一種治療膨脹症的中藥組合物及其製備方法和質量控制方法

2023-09-18 12:28:05

專利名稱：一種治療膨脹症的中藥組合物及其製備方法和質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥組合物，特別涉及治療臌脹症的中藥組合物，同時涉及該組合物的製備方法和質量控制方法。
本發明藥物組合物的原料藥組成及配比如下(按重量份)皂礬150-250重量份 甘遂15-25重量份 大棗150-250重量份木香15-25重量份小麥60-130重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選配比為(按重量份)皂礬230重量份甘遂23重量份大棗180重量份木香23重量份小麥80重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選配比為(按重量份)皂礬180重量份甘遂18重量份大棗230重量份木香18重量份 小麥120重量份。
本發明藥物組合物的原料藥組成優選配比為(按重量份)皂礬200重量份甘遂20重量份大棗200重量份木香20重量份 小麥100重量份。以上所述皂礬以生用為佳，大棗以去核炒為佳，小麥以炒為佳。
按藥劑學方法，可以將本發明藥物組合物製備成多種臨床藥物劑型，包括口服製劑或非腸道給藥的劑型。所說的口服製劑選自於片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、口服液體製劑當中的一種；所說的非腸道給藥劑型選自於注射劑、氣霧劑、栓劑或皮下給藥劑型當中的一種。
本發明藥物還可加入常規的藥物賦形劑，如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑等。
本藥物組合物的製備方法以上五味，粉碎成細粉，過篩，混勻；用熱水合坨制丸，60-70℃以下乾燥，最後經過常規工序直接或加入藥學上可接受的賦型劑製成臨床可接受的劑型，如丸劑、片劑、口服液體製劑、膠囊、顆粒劑。
本組合物製成的藥劑採用如下一種和/或幾種鑑別方法進行質量控制a.取本組合物製劑1g，研細，加水10ml，煮沸8-12分鐘，濾過，取濾液1ml，加鐵氰化鉀試液2-3滴，即生成藍色沉澱，分離，沉澱在稀鹽酸中不溶解，加氫氧化鈉試液，呈棕色沉澱；b.取本組合物製劑15g，研細，加60-90℃石油醚50ml，浸漬25-35分鐘，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以8-12∶0.5-1.5環己烷一丙酮為展開劑，展開，取出晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全溼潤；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；c.取本組合物製劑20g，研細，加乙醇60ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合併醋酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘遂對照藥材2g，加乙醇40ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥2000年版一部附錄V1B)試驗，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液2μl，分別點於同一以羧甲基纖維鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以18-25∶1-3∶1.5-1.5氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。所述質量控制方法中有賦型劑的製劑，可以按常規方法先去除其賦型劑。
本發明組合物在治療臌脹症中，具有利水消腫、除溼健脾功效，對胸腹脹滿、四肢浮腫、大便秘結、小便短赤病症有很好的效果。以下通過藥效學、臨床實驗研究進一步說明本發明。實驗例1本組物製劑(臌症丸)的藥效學研究試驗材料1.動物小鼠昆明種小鼠，雄，體重20-22g。購自北京醫科大學實驗動物科學部，一級，合格證號醫動字第01-3049號。大鼠Wistar種大鼠，雄，體重150-200g。購自北京醫科大學實驗動物科學部，一級，合格證號醫動字第01-3056號。2.受試藥物臌症丸藥粉，過100目，邯鄲製藥有限公司提供.3.試劑及藥品氫氯噻嗪片，25mg/片，唐山市渤海製藥廠，批號970801。甲基硫酸新斯的明注射液，0.5mg/ml，中國上海信誼藥廠，批號960404。阿拉伯樹膠粉，上海化學試劑公司分裝，批號880414。碳末北京化學試劑公司產品。總蛋白(TP)測定試劑盒(又縮脲法)，批號990921；白蛋白(ALB)試劑盒，批號991008尿素氮(BUN)試劑盒(二乙醯一肟法)，批號991228；肌酐(Cr)試劑盒(苦味酸不除蛋白法)，批號991028。均為北京北化精細化學品有限責任公司產品。其他試劑均為分析純，購自北京化學試劑公司。一、 對正常小鼠的利尿及峻瀉作用(一)臌症丸對正常小鼠的瀉下作用及利尿作用1.方法昆明種小鼠，雄，禁食12h，試驗動物分為6組，正常對照組20隻，臌症丸0.7g/kg、1.0g/kg、1.4g/kg 3組、氫氯噻嗪30mg/kg、60mg/kg2組，給藥各組每組10隻動物。實驗前輕壓動物下腹部，排盡餘尿。每鼠腹腔注射2ml，37℃溫鹽水作為水負荷，同時ig藥物0.2ml/10g體重，記錄給藥後0-2h、2-6h尿量，以組間t檢驗比較差異的顯著性，記錄給藥6h內各組瀉下動物數，以X2檢驗進行統計學比較。
2.結果見表1，臌症丸劑量0.7g/kg單次灌胃給藥後顯著增加給藥後2-6h間動物排尿量，但無明顯量效關係。臌症丸1.4g/kg劑量，半數動物排稀便，與正常對照組比，排稀便動物數顯著增加(P＜0.01)。
表1 臌症丸對正常小鼠的瀉下作用及利尿作用尿量ml組別動物數 劑量g/kg 瀉下動物1-2h ＞2-6h正常對照組20 - 02.77±0.841.34±0.50臌症丸10 0.7 02.07±0.472.49±0.638*臌症丸10 1.0 12.26±0.482.14±0.51臌症丸10 1.4 5** 1.87±0.762.49±0.69氫氯噻嗪 10 0.03 03.40±1.011.70±0.38氫氯噻嗪 10 0.06 03.17±0.551.97±0.51注與正常對照組比*P＜0.05，**P＜0.01。
3.結論臌症丸對正常小鼠有利尿作用及致瀉作用。(二)對正常小鼠碳末推進及腸道內含水量的影響1.方法昆明種小鼠，雄性，禁食24h後稱體重，隨機分為5組，每組10隻動物。依次為正常對照組、臌症丸0.7g/kg、1.0g/kg、1.4g/kg、新斯的明0.1mg/kg組，灌胃給藥0.2ml/10g。2h後ig 5％碳末0.2ml/只，給碳末20min後處死動物，取小腸全長(幽門到回盲部)及大腸(回盲部到直腸)全長，測碳末推進長度、小腸溼重、大腸溼重。腸管於80℃烤乾後，再稱取各段乾重，按下列公式計算碳末推進百分率，小腸內水分含量百分率，大腸內水分含量百分率。以組間t檢驗比較組間差異的顯著性。碳末推進百分率＝碳末在小腸內推進距離(cm)/小腸全長(cm)×100％ 2.結果(1)對小腸推進功能的影響，見表2，臌症丸在0.7g/kg-1.4g/kg顯著促進小腸碳末推進百分率(與正常對照比P＜0.05或P＜0.01)。
表2 臌症丸單次給藥對正常小鼠小腸推進功能的影響組別 動物數 劑量g生藥/kg 碳末推進百分率％正常對照組 12- 46.17±13.61臌症丸 100.774.95±15.05*臌症丸 101.073.93±13.45*臌症丸 101.482.20±11.12**新斯的明 100.0001 75.57±8.34**注與正常對照組比*P＜0.05，**p＜0.01。
(2)對腸道含水量的影響，見表3、4，臌症丸在0.7g/kg-1.4g/kg顯著增加小腸腸道水分含量(P＜0.001)，並增加小腸溼重。
表3 臌症丸單次給藥對正常小鼠腸道含水量的影響腸道水分含量(％)組別 動物數 劑量g/kg小腸 大腸正常對照組 12 - 79.30±0.84 92.75±4.28臌症丸 10 0.7 82.46±0.91*** 94.75±0.12臌症丸 10 1.0 81.75±0.87*** 94.25±0.67臌症丸 10 1.4 81.81±0.80*** 94.15±0.65新斯的明10 0.0001 79.15±3.97 94.09±1.14注與正常對照組比***P＜0.001。
表4 臌症丸單次給藥對腸道溼重的影響組別 動物數 劑量g/kg 小腸溼重(g) 全腸道溼重(g)正常對照組 12 - 1.78±0.20 2.52±0.25臌症丸 100.72.25±0.21* 2.96±0.26臌症丸 101.02.15±0.15 2.93±0.18臌症丸 101.41.89±0.18 2.64±0.25新斯的明100.0001 1.82±0.25 2.59±0.30注與正常對照組比*p＜0.05。
3.結論臌症丸給小鼠單次灌胃給藥，0.7g/kg有明顯利尿作用，0.7g/kg-1.4g/kg給藥2小時後顯著促進小腸推進功能，增加小腸水份含量，1.4g/kg有明顯致瀉作用。根據以上試驗結果臌症丸對正常小鼠有利尿作用與峻瀉作用。
二、臌症丸對正常大鼠的利尿作用1.方法選取150-200g雄性Wistar種大白鼠，預先使之適應代謝籠的生活環境1-2日。實驗前動物稱體重，ig 25ml/kg 38℃溫水收集2h尿量，選尿量達所灌入量40％以上的動物用於利尿實驗。實驗前動物禁食18h。水負荷用38℃ 生理鹽水25ml/kg ig每小時1次，共2次。於第2次水負荷時ig給臌症丸0.34g/kg、0.49g/kg、0.7g/kg、1.0g/kg共4個劑量組，陽性藥氫氯噻嗪15mg/kg。各組給藥體積為1ml/100g，正常對照組給與同體積常水。實驗開始時輕壓動物下腹，排盡餘尿。將動物放入代謝籠中，觀察用藥後1、2、4、6、8、12、24h尿量；24h大便總溼重、總乾重；24h飲水量。以組間t檢驗比較組間差異的顯著性。
2.結果臌症丸單次ig給藥0.49g/kg、1.0g/kg劑量，給藥後6-24h尿量較正常對照組顯著增加(P＜0.05或P＜0.01)，0.49g/g組尿比重顯著降低(P＜0.01)，見表5。陽性藥氫氯噻嗪組給藥後6h內尿量較對照組顯著增加(P＜0.01)，但6-24h則顯著降低(P＜0.05)。臌症丸1.0g/kg對動物大便溼重及乾重無明顯影響(P＞0.05)，見表6。臌症丸給藥各組動物飲水量有增加趨勢，但尚未達到統計學顯著差別(P＞0.05)，見表7。
表5 臌症丸單次灌胃給藥對正常大鼠尿量的影響(n＝10 X±SD)劑量 尿量(ml)組別尿比重g/kg 0-6h 6-24h 0-24h正常對照組- 5.65±1.25 6.62±1.19 12.28±1.20 1.0315±0.0045臌症丸0.34 5.19±1.97 8.37±2.18 13.57±3.34 1.0404±0.0067*臌症丸0.49 3.08±2.03* 15.83±6.95*18.91±8.23 1.0141±0.0072**臌症丸0.70 3.02±1.21**9.30±4.73 12.32±4.32 1.0278±0.0068臌症丸1.00 5.84±1.57 11.55±2.57** 17.39±3.05**1.0262±0.0138氫氯噻嗪 0.01 10.65±1.31** 4.88±1.18* 15.53±2.42**1.0119±0.0063**注與同期正常對照組比*P＜0.05，**P＜0.01。
表6 臌症丸單次灌胃給藥對正常大鼠大便量及含水量的影響(n＝10 X±SD)24h烘便重量(g)組別 劑量g/kg總溼重 總乾重正常對照組 -3.04±0.48 1.40±0.38臌症丸 0.34 3.60±0.75 1.69±0.45臌症丸 0.49 2.95±0.85 1.36±0.60臌症丸 0.70 3.03±0.97 1.25±0.55臌症丸 1.00 2.57±0.80 1.24±0.33氫氯噻嗪0.01 4.12±1.32 1.43±0.35表7 臌症丸單次灌胃給藥對正常大鼠飲水量的影響(n＝10 X±SD)組別 劑量g/kg 24h飲水量(ml)正常對照組 - 14.1±10.6臌症丸 0.34 13.0±6.6臌症丸 0.49 25.1±15.2臌症丸 0.70 19.7±12.8臌症丸 1.00 20.9±8.1氫氯噻嗪 0.015 12.1±4.63.結論臌症丸單次灌胃給藥0.49g/kg/1.0g/kg劑量，於給藥後6-24h顯著增加大鼠尿量(與正常對照組比P＜0.05或P＜0.01)，並降低尿比重。三、對大白鼠血紅蛋白尿急性腎衰模型的治療作用1.方法Wistar種雄性大白鼠，體重170-220g，置於代謝籠中，記錄正常飲水量及尿量。於造模前動物禁水24h，選體重減輕30g以上動物，肌肉注射50％甘油，按10ml/kg分別在大鼠兩側後肢肌肉注射。注射後讓大鼠自由進食及飲水。50％甘油造型30h經眼眶靜脈取血測定BUN、Cr。造型33h後分組給藥，分別為正常對照組，50％甘油造型組，50％甘油造型臌症丸0.25g/kg、0.5g/kg、1.0g/kg劑量治療組及氫氯噻嗪10mg/kg劑量治療組。每組10隻動物，連續灌胃給藥3d，灌胃體積為10ml/kg，對照組給同體積常水。動物置代謝籠中記錄每日飲水量、尿量、尿比重、pH，於末次給藥後24h，經眼眶靜脈取血測定TP、ALB、BUN、SCr及血Na+、K+。然後活殺全部動物，取腎臟稱重並固定於10％甲醛中，經石蠟切片，HE染色，顯微鏡下動物，取腎臟稱重並固定於10％甲醛中，經石蠟切片，HE染色，顯微鏡下觀察腎臟病變程度。計量資料以組間t檢驗進行統計比較，腎臟組織病理學改變級別以秩和檢驗進行統計比較。
2.結果(1)對腎衰大鼠尿量、比重、pH的影響，見表8，9，10。臌症丸0.25g/kg-1.0g/kg對急性腎衰大鼠尿量、尿比重及pH無明顯影響。
表8 臌症丸對50％甘油致急性腎衰大鼠尿量的影響(n＝10)劑量 尿量(ml)組別g/kg 24h 48h 72h正常對照組 - 3.06±1.90 7.09±6.39 8.6±6.8250％甘油造型0.34 20.62±7.33##19.69±12.31#15.43±8.79急性腎衰+臌症丸 0.25 22.57±6.58 23.00±11.19 20.29±9.91急性腎衰+臌症丸 0.50 15.83±11.62 15.83±11.62 18.20±11.48急性腎衰+臌症丸 1.00 19.75±6.16 19.29±7.09 13.00±6.03急性腎衰+氫氯噻嗪 0.01 15.71±8.48 19.25±2.99 13.20±2.17注與同期正常對照組比#P＜0.05，##P＜0.01。
表9 臌症丸對50％甘油致急性腎衰大鼠尿比重的影響(n＝10)劑量 尿比重(g/ml)組別g/kg 24h 48h 72h正常對照組 - 3.060±0.0091.078±0.0271.077±0.0205％甘油造型0.341.029±0.009##1.040±0.098##1.037±0.013##急性腎衰+臌症丸0.251.027±0.0061.039±0.0061.035±0.009急性腎衰+臌症丸0.501.024±0.0081.036±0.0111.039±0.009急性腎衰+臌症丸1.001.035±0.0141.032±0.0051.038±0.007急性腎衰+氫氯噻嗪 0.011.026±0.0111.029±0.006*1.032±0.007注與同朋正常對照組比#P＜0.05，##P＜0.01。
與同期50％甘油造型造型組比*P＜0.05。
表10 臌症丸對50％甘油致急性腎衰大鼠尿pH的影響(n＝10)組別劑量 尿比重(g/ml)g/kg 24h 48h 72h正常對照組 -8.79±0.03 8.72±0.068.79±0.0250％甘油造型 0.34 8.64±0.019#8.75±0.058.79±0.03急性腎衰+臌症丸0.25 8.73±0.05 8.72±0.078.78±0.05急性腎衰+臌症丸0.50 8.78±0.06 8.72±0.038.81±0.01急性腎衰+臌症丸1.00 8.72±0.12 8.73±0.038.76±0.04急性腎衰+氫氯噻嗪 0.01 8.69±0.09 8.69±0.078.80±0.02
注與同期正常對照組比#P＜0.05。
(2)對急性腎衰大鼠血液生化指標的影響，見表11。臌症丸在0.25g/kg-1.0g/kg對急性腎衰大鼠血清BUN、SCr、TP、ALB濃度無明顯影響。
表11 臌症丸對50％甘油致急性腎衰大鼠血液生化指標的影響(n＝10)劑量 BUN SCr TP ALB組別g/kg Mmol/L μmol/L g/Lg/L正常對照組 - 7.53±1.34 108.99±12.42 71.56±4.3740.88±9.6450％甘油造型- 17.85±7.20##152.46±31.02#73.32±3.9739.60±1.87急性腎衰+臌症丸0.25 19.79±8.93161.24±5.51 72.52±3.6237.02±3.22急性腎衰+臌症丸0.50 23.71±8.09185.64±43.76 76.24±4.4439.26±1.04急性腎衰+臌症丸1.00 18.15±5.29135.83±18.48 73.96±6.6638.47±2.37急性腎衰+氫氯噻嗪 0.01 13.50±2.72156.53±15.27 73.12±3.6037.56±2.97注與正常對照組比#P＜0.05 ##P＜0.01。
(3)對急性腎衰大鼠血清Na+、K+濃度的影響，見表12。臌症丸有升高血清Na+、K+濃度的作用(與模型組比P＜0.05或P＜0.01)表12 臌症丸對50％甘油致急性腎衰大鼠血清Na+、K+濃度的影響(n＝10)劑量 Na+K+組別g/kg mmol/L mmol/L正常對照組 - 121.27±26.786.03±0.6850％甘油造型- 105.26±14.656.80±1.33急性腎衰+臌症丸 0.25 146.20±17.58#6.81±1.14急性腎衰+臌症丸 0.50 108.79±31.487.07±0.69急性腎衰+臌症丸 1.00 128.74±13.06#8.84±0.98##急性腎衰+氫氯噻嗪0.01 103.87±31.1613.77±2.71##注與50％甘油造型組比*P＜0.05。**P＜0.01。
(4)對急性腎衰大鼠腎臟病變程度的影響臌症丸0.25g/kg-1.0g/kg連續灌胃給藥3天後，對50％甘油所致腎臟損傷引起的腎係數增大無明顯影響，對腎臟病理組織學改變未見明顯治療作用，見表13。
表13 臌症丸對50％甘油致急性腎衰大鼠腎係數的影響(n＝10)劑量 腎係數組別g/kg g/100g體重正常對照組- 0.824±0.05850％甘油造型 - 1.418±0.235**急性腎衰+臌症丸0.25 1.418±0.187急性腎衰+臌症丸0.50 1.585±0.220急性腎衰+臌症丸1.00 1.504±0.218急性腎衰+氫氯噻嗪 0.01 1.336±0.165注與正常對照組比**p＜0.01。
3、結論臌症丸對50％甘油所致大鼠急性腎功能衰竭動物無明顯利尿作用，對血液生化指標無明顯響，但有升高血清Na+、K+的作用。四、臌症丸對癌性腹水動物腹水量的影響1.方法昆明種小鼠，70隻，體重19-21g，雄、雌各半，除正常對照組動物外其餘動物腹腔接種S180腹水癌，癌細胞濃度1.12×106/ml，每隻0.2ml，將動物按體重隨機分為5組，既荷瘤對照組，臌症丸0.25g/kg、0.5g/kg、1.0g/kg組，陽性藥氫氯噻嗪15mg/kg組，ig給藥0.2ml/10g體重，於荷瘤第8、9、10日，每日給藥1次，於給藥前稱動物體重並禁食、禁水，給藥後4-6小時，稱體重，以體重差值作為排尿指標。於荷瘤第11天，稱體重，處死動物，開腹，用注射器吸出腹水並測量體積。以組間t檢驗比較體重、腹水量、尿量差別的顯著性。
2.結果臌症丸1g/kg劑量ig給藥3天，可顯著減少腹水癌小鼠腹水量(P＜0.01)，見表14；對荷瘤動物體重有降低趨勢，但無統計學顯著性。見表15；但每日給藥後6小時內尿量與荷瘤組比無明顯增加，見表16。臌症丸1.0g/kg組部分動物有稀便，陽性藥氫氯噻嗪15mg/kg劑量有顯著減少荷S180腹水癌動物腹水量的作用(P＜0.05)。見表14。
表14 臌症丸對荷S180腹水癌小鼠腹水量的影響組別 動物數 劑量g/kg 給藥天數d 腹水量ml正常對照組 10-- -腹水癌模型組20-- 13.86±4.58荷瘤+臌症丸 9 0.25 3 12.67±2.74荷瘤+臌症丸 9 0.50 3 12.30±1.64荷瘤+臌症丸 9 1.00 3 9.19±2.68**荷瘤+氫氯噻嗪 9 0.015 3 9.05±2.97*
注於荷S180第8，9，10天給藥，連續3d，第11d取腹水。與腹水癌模型組比*P＜0.05，**P＜0.01。
表15 臌症丸對荷S180腹水癌小鼠體重的影響組別動物數 劑量g/kg 給藥前體重g荷瘤天體重g正常對照組 10 - 20.5±1.1 29.7±3.7腹水癌模型組20 - 20.7±1.1 33.6±3.5荷瘤+臌症丸 9 0.25 20.7±1.1 34.4±2.9荷瘤+臌症丸 9 0.50 20.7±1.1 33.8±5.5荷瘤+臌症丸 9 1.00 20.9±1.0 30.1±4.3荷瘤+氫氯噻嗪 9 0.015 20.7±1.1 28.4±4.4表16 臌症丸對荷S180腹水癌小鼠尿量的影響6h尿量(g)組別 動物數 劑量g/kg第1天 第2天 第3天正常對照組 10 - 4.12±0.564.34±0.534.00±0.36腹水癌模型組20 0.34 3.97±0.602.88±0.77##2.59±1.07##荷瘤+臌症丸 9 0.25 3.83±0.872.94±0.412.52±0.89荷瘤+臌症丸 9 0.50 2.96±1.312.89±0.752.60±0.96荷瘤+臌症丸 9 1.00 3.04±1.222.58±0.621.98±0.62荷瘤+氫氯噻嗪 9 0.01 4.69±0.913.08±0.942.01±0.77注與同期正常對照組比##P＜0.053.結論臌症丸1g/kg灌胃給藥3天，顯著減少荷S180腹水癌小鼠腹水量(P＜0.01)。
試驗結論1.臌症丸單次灌胃給藥，在0.7g/kg-1.4g/kg對正常小鼠有利尿作用及致瀉作用(P＜0.05或P＜0.01)，並促進小腸碳末推進功能(P＜0.05或P＜0.01)。2.臌症丸單次灌胃給藥在0.49g/kg、1.0g/kg劑量對正常大鼠有利尿作用，顯著增加給藥後6-24h尿量(P＜0.05或P＜0.01)。3.臌症丸灌胃給藥連續3天，0.25g/g-1.0g/kg對50％甘油致急性腎功能衰竭大鼠未顯示明顯利尿作用，但可顯著增加血Na+、K+濃度。4.臌症丸灌胃給藥1.0g/kg連續3天，對荷S180腹水癌小鼠有顯著減少腹水量的作用(P＜0.01)。實驗例2本組物製劑(臌症丸)的臨床實驗研究一、一般資料根據「臨床驗證方案」要求，認真選擇符合標準的納入病例共400例，採用臨床隨機分組方法，分為治療組300例，對照組100例。
1.別分布見表1表1 兩組性別分布情況組別例數 男(％) 女(％)治療組 300 219(73.0) 81(27.0)對照組 100 76(76.0)24(24.0)兩組病例性別分布經統計學處理(P＞0.05)，無顯著性，有可比性。
2.年齡分布見表2表2 兩組年齡分布情況組別 例數 ＜30歲 31～40歲 41～50歲 51～60歲 ＞60歲治療組300 19 77 1117914對照組100 7 29 36 244兩組病例年齡最小20歲，最大65歲，平均年齡治療組44.94±8.59歲，對照組44.51±8.93歲，經統計學處理(P＞0.05)，無顯著性差異，有可比性。
3.職業分布見表3表3 兩組職業分布情況組別 例數 幹部(％) 工人(％)農民(％)治療組30077(25.67)111(37.0) 112(37.33)對照組10031(31.0) 37(37.0) 32(32.0)兩組病例職業分布經統計學處理(P＞0.05)，無顯著性，具有可比性。
4.病程分布見表4表4 兩組病程分布情況組別例數 ＜1年(％) 1～5年(％)6～10年(％) ＞10年(％)治療組 30061(20.33) 125(41.67)65(21.67) 49(16.33)對照組 10018(18.0)45(45.0) 24(24.0) 13(13.0)
兩組病例病程最短0.5年，最長30年，平均病程治療組7.16±3.71年，對照組7.08±3.55年，經統計學處理(P＞0.05)，無顯著性，具有可比性。
5.中醫主症分布見表5表5 兩組中醫主症輕、中、重度分布情況組別例數 輕度(％)中度(％) 重度(％)治療組 300 63(21.0)166(55.33)71(23.67)對照組 100 22(22.0)52(52.0) 26(26.0)兩組中醫主症輕、中、重度分布經統計學處理(P＞0.05)，無顯著性差異，有可比性。
6.西醫臨床類型分布見表6表6 兩組西醫臨床類型分布情況活動性肝硬化 穩定性肝硬化組別 例數(％) (％)治療組 300203(67.67)97(32.33)對照組 10070(70.0) 26(26.0)兩組西醫臨床類型分布經統計學處理(P＞0.05)，無顯著性差異，有可比性。
7.臨床分期分布見表7表7 臨床分期分布情況組別例數 早期(％) 中晚期(％)治療組 300161(53.67)139(46.33)對照組 10055(55.0) 45(45.0)兩組臨床分期分布，經統計學處理(P＞0.05)，無顯著性差異，有可比性。
二、病例選擇標準依據衛生部制定的《中藥新藥臨床研究指導原則》，並參照現行大學教材等書籍中的有關內容，結合該藥的特點擬定。
1.中醫辨病辨證診斷標準(1)辨病臌症。(2)辨證脾虛溼盛、水液停滯兼溼熱互結證。主症腹部膨脹如鼓，或胸腹脹滿。兼症飲食減少，或不思飲食，或食後腹脹。下肢浮腫，或周身浮腫。小便短少，或小便短赤。大便不爽，或大便秘結。舌脈舌邊尖紅，苔白膩或黃膩，脈弦或弦數。
(3)診斷凡具備上述主症1項，兼症2項以上，及相應的舌脈，即可做出診斷。
2.主症病情程度分級標準腹部脹大輕度(+)時感腹脹，按之尚柔軟，叩之如鼓，或見脅下脹滿。中度(++)腹大脹滿，按之如囊裹水，轉側時有振水聲，或見胸腹脹滿。重度(+++)腹部脹大繃急，按之堅滿，臍心突出，或見青筋暴露。
3.西醫診斷標準(1)西醫診斷本證所涉及到的西醫疾病，如肝硬化，主要以肝炎性肝硬化、酒精性肝硬化、寄生蟲性肝硬化等較單純的或穩定性肝硬化失代償期，臨床可見腹部脹滿，尿量減少，腹部移動性濁音陽性，兩下肢水腫，肝功能異常，血清白蛋白在30g幾以下。B型超聲波顯示肝臟縮小，門靜脈直徑增寬，脾臟增大，有腹水暗區。或x線檢查有右側胸腔積液。其它情況按該病的臨床相應診斷標準執行。
(2)臨床類型(參照1995年北京第五次全國傳染病會議修訂方案)活動性肝硬化慢性肝炎的臨床表現依然存在，特別是轉氨酶增高、黃疸、白蛋白減低、肝臟質地變硬、脾大、門脈高壓。穩定性肝硬化有或無肝臟病史，轉氨酶正常，無明顯黃疸、脾大伴門脈高壓，低白蛋白血症。
(3)臨床分期早期第一次出現腹水雙下肢水腫，一般狀況好，未經任何利尿藥治療，白蛋白在28-30g幾之間。中、晚期反覆發作2次以上，或腹水經利尿劑治療持續2個月以上不消退者，白蛋白在25g/L以下。
三、試驗病例標準1.納入病例標準凡符合臌症上述中醫辯證診斷標準者，均可納入試驗病例。
2.排除病例標準(包括不適應症或剔除病例)(1)辨證診斷不明確或有過多兼挾證者。(2)年齡在18歲以下，或65歲以上者，妊娠期或哺乳期婦女，對本藥過敏者。(3)合併心、腦、腎和造血系統等重要臟器有嚴重原發性疾病及精神病患者。(4)合併有原發性腹膜炎，原發性肝癌，或原因不明的血性、乳糜性腹水患者。(5)不符合納入標準，未按規定用藥，無法判斷療效或資料不全等影響療效或安全性判斷者。
四、觀測指標1.安全性觀測一般體檢項目。(2)血、尿、便常規化驗。(3)心、肝、腎功能檢查。
2.療效性觀測(1)腹部脹大等主症的變化情況。(2)飲食、二便等情況的變化。(3)體徵，舌象，脈象及24小時尿量變化情況。(4)B型超聲波檢查肝、脾、腹水變化情況。
五、療效判定標準1.顯效主症消失或減輕(++)以上，輕重程度由(+++)轉變為(+)，或(++)消失，其他症狀、體徵明顯好轉或消失，尿量明顯增加。2.有效主症減輕(+)以上，輕重程度由(+++)轉變為(++)，或(++)轉變為(+)，或(+)轉變(-)，其他症狀、體徵有所好轉，尿量增加。3.無效症狀、體徵減輕達不到上述標準者，或較治療前無變化，或有所加重者。
六、驗證方法臨床驗證採用隨機單盲法對照原則進行，入選病例依據就診順序編號，按隨機數字表分配為治療組與對照組。1.治療組臌症丸(河北省邯鄲製藥有限公司生產)，口服，每次10粒，每日3次。2.對照組安體舒通，口服，每次40mg，每日3次。3.療程1周為一個療程，一療程後改服健康補脾丸，配合臥床休息，限制水鹽攝入，可間斷輸白蛋白，以善其後。
七、統計學處理驗證結果，各種數據均經統計學處理，計量資料用t檢驗，計數資料用X2檢驗，P＜0.05為顯著性差異。
八、驗證結果1.臨床總療效見表8表8 兩組總療效比較組別 例數顯效(％)有效(％) 無效(％)總有效率(％)治療組300163(54.33) 111(37.0) 26(8.67)274(91.33)對照組10034(34.0)39(39.0)27(27.0)73(73.0)兩組總療效經統計學處理，X2＝25.4013，P＜0.01，有顯著性差異。
2.治療前後中醫主症變化見表9表9 兩組治療前後中醫主症變化情況比較組別例數主症治療前治療後輕度(％)63(21.0) 189(63.0)治療組 300中度(％)166(55.33)65(21.67)重度(％)71(23.67) 25(8.33)輕度(％)22(22.0) 53(53.0)對照組 100中度(％)52(52.0) 27(27.0)重度(％)26(26.0) 13(13.0)兩組治療前後中醫主症輕、中、重度變化，經統計學處理，治療組X2＝150.2018，P＜0.01；對照組X2＝32.0581，P＜0.01，兩組均有顯著性。
3.治療前後兼證及體徵變化見表10表10 兩組治療前後兼證及體徵變化比較組別 例數 兼證及體徵治療前治療後飲食減少 260(86.67) 72(24.0)浮腫 228(76.0) 57(19.0)治療組300大便異常 147(49.0) 51(17.0)小便少 279(93.0) 27(9.0)飲食減少 87(87.0) 33(33.0)對照組100 浮腫 73(73.0) 30(30.0)大便異常 50(50.0) 24(24.0)小便少 92(92.0) 27(27.0)兩組治療前後兼證及體徵變化，經統計學處理，治療組X2＝209.7011，P＜0.01對照組X2＝44.2907，P＜0.01，兩組均有顯著性。
4.治療前後體重、腹圍、24h尿量變化見表11表11 治療前後體重、腹圍、24h尿量變化(x±s)組別例數主要體徵治療前治療後t值P值體重(kg) 71.96±3.6262.55±4.043.16 ＜0.01治療組 300 腹圍(cm) 106.39±7.85 92.22±4.493.81 ＜0.01尿量(ml/24h) 539.68±86.9 1622±185.56.49 ＜0.01體重(kg) 70.88±3.7966.22±9.942.19 ＜0.05對照組 100 腹圍(cm) 103.8±8.2196.11±6.052.06 ＜0.05尿量(ml/24h) 532.78±89.3 1149±221.54.14 ＜0.015、治療前後肝功能變化見表12
表12 兩組治療前後肝功能變化(x±s)組別 例數 主要體徵 治療前治療後 t值 P值ALT(IU/L) 87.29±2.61 69.91±3.072.85 ＜0.01治療組300 TBIL(Umol/L) 47.03±1.66 26.39±2.093.62 ＜0.01A(白蛋白)(g/L)26.28±1.34 35.77±1.562.74 ＜0.01ALT(IU/L) 83.33±2.81 76.56±2.492.14 ＜0.05對照組100 TBIL(Umol/L) 43.94±2.01 37.09±2.262.39 ＜0.05A(白蛋白)(g/L)26.17±1.43 31.26±1.022.07 ＜0.05九、驗證總結1.通過對臌症丸300例臨床觀察，證實該藥具有利水消腫、除溼健脾之功效。臨床適用於臌症，胸腹脹滿、四肢浮腫、大便秘結、小便短赤等病症。通過臨床觀察，兩組在療效方面，治療組顯效率和總有效率分別為54.33％和91.33％，明顯優於對照組34.0％和73.0％，經統計學處理均有顯著性差異(P＜0.01)。2.臌症丸可以明顯改善肝硬化腹水病人的腹脹、浮腫、尿少、大便異常等症狀，病人用藥後尿量增加，腹水逐漸消退，腹圍變小，體重減少，肝功能及各主證和兼證都有改善。兩組比較各病情變化都明顯優於服用安體舒通的對照組病人。3.臨床觀察的患者在用藥前後均經必要的安全性理化檢查，結果未見任何異常。患者在服藥期間及用藥後，亦未發現嚴重的毒副作用和不良反應。
下列實施例均能實現上述實驗例的效果。實施例1 丸劑皂礬(醋制)200g 甘遂20g 大棗(去核炒)200g木香20g 小麥(炒)100g以上五味，粉碎成細粉，過篩，混勻；用熱水合坨制丸，60℃以下乾燥，包糖衣，即得，每10粒重1.3g。飯前服，一次10粒，一日3次，兒童酌減。不可與甘草同服，忌食鹽與蕎麥麵。實施例2 膠囊劑皂礬230g 甘遂23g大棗180g木香23g小麥80g膠囊劑製法以上五味，粉碎成細粉，過篩，混勻；裝膠囊即得，每粒重0.4g。飯前服，一次3粒，一日3次，兒童酌減。不可與甘草同服，忌食鹽與蕎麥麵。實施例3 顆粒劑皂礬180g 甘遂18g大棗230g木香18g小麥120g顆粒劑製法以上五味，水煎煮2次，濾過，合併濾液，濃縮成膏，加入輔料，混勻，制粒，乾燥，包裝即得，每袋3-5g。飯前服用，一次1袋，一日3次，兒童酌減。不可與甘草同服，忌食鹽與蕎麥麵。實施例4 丸劑的鑑別質量控制方法a.取本品1g，除去糖衣，研細，加水10ml，煮沸10分鐘，濾過，取濾液1ml，加鐵氰化鉀試液2-3滴，即生成藍色沉澱，分離，沉澱在稀鹽酸中不溶解，加氫氧化鈉試液，呈棕色沉澱；b.取本品15g，研細，加60-90℃石油醚50ml，浸漬30分鐘，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以10∶1環己烷一丙酮為展開劑，展開，取出晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全溼潤；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；c.取本品20g，研細，加乙醇60ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合併醋酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘遂對照藥材2g，加乙醇40ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥2000年版一部附錄V1B)試驗，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液2μl，分別點於同一以羧甲基纖維鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以20∶2∶1氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
權利要求
1.治療臌脹症的中藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由下述原料藥製成的皂礬150-250重量份甘遂15-25重量份大棗150-250重量份木香15-25重量份 小麥60-130重量份。
2.如權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由下述原料藥製成的皂礬230重量份甘遂23重量份大棗180重量份木香23重量份小麥80重量份。
3.如權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由下述原料藥製成的皂礬180重量份甘遂18重量份大棗230重量份木香18重量份小麥120重量份。
4.如權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由下述原料藥製成的皂礬200重量份甘遂20重量份大棗200重量份木香20重量份小麥100重量份。
5.如權利要求1、2、3或4所述的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物中皂礬生用，大棗去核炒，小麥為炒小麥。
6.如權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物還可加入賦型劑製成臨床可接受的劑型。
7.如權利要求6所述的藥物組合物的製備方法，其特徵在於該方法為以上五味，粉碎成細粉，過篩，混勻；用熱水合坨制丸，60-70℃以下乾燥，最後經過常規工序直接或加入藥學上可接受的賦型劑製成臨床可接受的劑型，如丸劑、片劑、口服液體製劑、膠囊、顆粒劑。
8.如利要求6所述的藥物組合物的質量控制方法，其特徵在於該方法中的鑑別方法包括如下鑑別中的一種或幾種a.取本組合物製劑1g，研細，加水10ml，煮沸8-12分鐘，濾過，取濾液1ml，加鐵氰化鉀試液2-3滴，即生成藍色沉澱，分離，沉澱在稀鹽酸中不溶解，加氫氧化鈉試液，呈棕色沉澱；b.取本組合物製劑15g，研細，加60-90℃石油醚50ml，浸漬25-35分鐘，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以8-12∶0.5-1.5環己烷一丙酮為展開劑，展開，取出晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全溼潤；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；c.取本組合物製劑20g，研細，加乙醇60ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合併醋酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘遂對照藥材2g，加乙醇40ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥2000年版一部附錄V1B)試驗，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液2μl，分別點於同一以羧甲基纖維鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以18-25∶1-3∶1.5-1.5氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
9.如利要求8所述的藥物組合物的質量控制方法，其特徵在於該方法中用於丸劑的鑑別方法包括如下鑑別中的一種或幾種a.取丸劑1g，除去糖衣，研細，加水10ml，煮沸10分鐘，濾過，取濾液1ml，加鐵氰化鉀試液2-3滴，即生成藍色沉澱，分離，沉澱在稀鹽酸中不溶解，加氫氧化鈉試液，呈棕色沉澱；b.取丸劑15g，研細，加60-90℃石油醚50ml，浸漬30分鐘，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取木香對照藥材0.5g，加醋酸乙酯10ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以10∶1環己烷一丙酮為展開劑，展開，取出晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，至板面完全溼潤；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；c.取丸劑20g，研細，加乙醇60ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合併醋酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘遂對照藥材2g，加乙醇40ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥2000年版一部附錄V1B)試驗，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液2μl，分別點於同一以羧甲基纖維鈉為粘合劑的矽膠G薄層板上，以20∶2∶1氯仿-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
全文摘要
本發明公開了一種治療臌脹症的中藥組合物及其製備方法和質量控制方法；該組合物由皂礬、甘遂、大棗、木香、小麥五味藥材組成；該中藥組合物製備時碎成細粉，過篩，混勻；用熱水合坨制丸，60－70℃以下乾燥，最後經過常規工序直接或加入藥學上可接受的賦型劑製成臨床可接受的劑型，同時本發明還提供了對該組合物進行成分鑑別的質量控制方法；本組合物在治療臌脹症中，具有很好利水消腫、除溼健脾功效。
文檔編號A61P43/00GK1440772SQ03109399
公開日2003年9月10日 申請日期2003年4月8日 優先權日2003年4月8日
發明者陳致慜, 李春雷, 霍志金 申請人:邯鄲製藥有限公司