一種防治高血壓的藥物組合物及其製備方法

2023-09-18 12:32:15 1

專利名稱：一種防治高血壓的藥物組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物及其製備方法，特別是涉及一種防治高血壓的藥物組合物及其製備方法。
背景技術：
高血壓病是中老年人的常見病、多發病。1991年進行了全國第三次高血壓抽樣調查，對30個省、自治區、直轄市年齡在15歲以上城鄉自然人群調查結果其患病率已達13.58％(男14.38％、女12.85％)較之1964年人口標化患病率9.63％有逐年增高的趨勢[1]。而高血壓所引起的心、腦、腎等靶器官的損害，是心腦血管疾病的主要危險因素。是造成高血壓人群致殘、致死的主要原因之一，因此進一步研究探索防治高血壓的新途徑，具有重要的現實意義。
近幾十年來，致力於現代醫學的國內外學者對本病進行了廣泛的研究，在發病機理和藥物治療及新藥開發等方面做了大量工作。目前降壓西藥多達百種，主要通過減少血容量和擴張血管等作用來降壓，西藥的優點在於降壓迅速、可靠，但有些藥物具有明顯副作用，如噻嗪類利尿劑低鉀血症、高膽固醇血症及性功能障礙等；鈣拮抗劑為頭痛、踝部水腫；轉換酶抑制劑有刺激性乾咳和血管神經性水腫，這些副作用限制了部分病人的長期服用。
隨著醫學模式的轉變，人們逐漸認識到高血壓治療的目的不僅僅是控制血壓，更重要的是保護靶器官和提高患者的生活質量，提高長期服藥的依從性。只有保證了一定的生活質量，壽命延長才有實際意義。高血壓病自然病程較長，需要長期服用藥物來減輕症狀，限制病情的發展，而不是「治癒」，單用血壓的治癒率或疾病的病死率來判斷治療效果既不敏感，也不全面。中醫藥治療高血壓的特點是從整體觀出發、辯證論治，既強調了高血壓的異質性與個體化治療，又通過調整機體陰陽氣血來改善全身症狀，達到降壓效果，提高了病人的生活質量；而且中藥的毒副作用相對較小，病人可長期服用，這是西藥所不能比擬的獨特的優勢。因此，研製開發安全有效、服用方便的中藥新製劑是一項非常有意義的工作。

發明內容
本發明目的在於提供一種防治高血壓的藥物組合物及其製備方法。
本發明目的是通過如下技術方案實現的原料藥按重量比為桑寄生600-900重量份 淫羊藿500-700重量份杜仲(炒)350-450重量份丹參400-600重量份葛根400-600重量份黃芪350-450重量份酸棗仁(炒)400-600重量份 黃連200-400重量份川芎350-450重量份優選配比為桑寄生825重量份 淫羊藿688重量份杜仲(炒)413重量份丹參550重量份葛根550重量份 黃芪413重量份酸棗仁(炒)550重量份 黃連248重量份 川芎413重量份上述原料藥可以製成任何臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑等。
本發明藥物組合物的製備方法以上九味，桑寄生、淫羊藿、葛根、川芎、酸棗仁加50-70％乙醇回流提取2-3次，加醇量6-12倍，每次1-2小時，合併提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇，藥液放置備用；取杜仲、黃芪、黃連、丹參等其餘藥味，加水煎煮2-3次，加水量6-10倍，每次1-2小時，合併煎液，濾過，減壓濃縮，與上述藥液合併，濃縮至相對密1.12～1.15/60℃的清膏，以噴霧乾燥法製備幹浸膏粉，製成臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑等。
本發明顆粒劑的質量控制方法中包括鑑別和/或含量測定。
鑑別包括如下方法中的一種或幾種
a.取本品3g，研細，加1-2∶1-2甲醇—水60ml，超聲處理20分鐘，功率50W，工作頻率30KHz，濾過，濾液濃縮至約20ml，加水10ml稀釋，加5-10％硫酸0.5mL，煮沸回流1-1.5小時，放冷，移至分液漏鬥中，用醋酸乙酯提取2-3次，每次30ml，合併醋酸乙酯液，水浴蒸乾，殘渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作為供試品溶液。另取桑寄生藥材粉末3g，同法製成對照藥材溶液。再取槲皮素對照品，加醋酸乙酯溶解，製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版-部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液、藥材對照品溶液各6μl，對照品溶液2μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以4-6∶3-4∶-2水飽和甲苯—醋酸乙酯—甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。
b.取本品2g，研細，加70％乙醇50ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，水浴蒸至無醇味，加水10ml稀釋，加氯化鈉至飽和，10-15ml乙醚提取3-5次，合併乙醚液，揮去乙醚，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品加乙醇製成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一以羧甲基纖維素為黏合劑的矽膠G的薄層板上，以8-6∶1-2∶1-2氯仿一丙酮一甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同汙綠色的斑點。
c.取本品1g，研細，加60-80％乙醇浸泡10-20min，60-40ml超聲處理2-3次，每次20-40分鐘，合併提取液，水浴蒸發至約5ml，與0.5g聚醯胺拌勻，水浴蒸乾，置已處理好的聚醯胺柱，中，先用蒸餾水洗至流出液無色，再以60-80％乙醇洗脫至無色，繼以80-90％乙醇洗脫至無色，收集乙醇洗脫液，以水浴蒸至無醇味，放冷，用鹽酸溶液調pH值至2，移至分液漏鬥中以10-15ml醋酸乙酯提取2-3次，合併醋酸乙酯液水浴蒸乾，殘渣加70％乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對照品加甲醇製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版第一部附錄VIB)試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一矽膠H薄層板上，以6-8∶2-4∶1-2氯仿-甲醇-水下層溶液為展開劑，展開、取出、晾乾，置氨氣中燻後，於紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的亮藍色螢光斑點。
d.取本品2g，加甲醇50ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，以15-20ml水飽和正丁醇提取2-4次，合併正丁醇液，以10-15ml氨試液洗滌2-3次，棄去鹼水層，正丁醇層水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，通過D101型大孔吸附樹脂柱，先以水洗至流出液無色，再以20-40％乙醇洗至流出液無色，繼用50-70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品加甲醇製成每1ml含1.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液8ul，對照品溶液4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以11-14∶5-9∶1-2氯仿—甲醇—水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5-10％硫酸乙醇溶液，在100-105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈(365nm)下顯相同的橙黃色螢光斑點。
e.取本品2g，研細，加甲醇20ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃連對照藥材0.1g，同法製成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗鹼對照品加甲醇製成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以5-7∶2-4∶2-4∶1-2∶0.5-1苯—醋酸乙酯—異丙醇—甲醇—氨水為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內，預平衡10-20分鐘後，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。
f.取鑑別d項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取酸棗仁皂苷A加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液6μl，對照品溶液4μ1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以3-5∶1-2∶5-3正丁醇—冰醋酸—水上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾。噴以2％香草醛硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍綠色的斑點。
含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版第一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷健合矽膠為填充劑，20-25∶75-80乙腈—水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低於1500。對照品溶液的製備精密秤取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇製成每1ml含43.04μg的溶液，即得。供試品溶液的製備取本品研細，約0.3g，精密稱定，加60-80％乙醇100ml，超聲分散1-3分鐘，加熱回流提取1-1.5小時，濾過，用60-80％乙醇少量洗滌容器和濾渣，洗液與提取液合併，水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，置已處理好的聚醯胺柱中，先以水40ml洗至流出液無色，再以80-95％乙醇150ml洗脫，收集醇洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加60-80％乙醇使溶解，並定容至10ml，以0.5μm的微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。測定法，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，計算，即得。本品每g含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H40O15)計不得低於1.70mg。
所述聚醯胺柱為60～80目，2.5g或3g，柱內徑1.5cm，溼法上柱。
本發明藥物組合物(桑仙降壓顆料)藥效學研究表明清醒自發性高血壓大鼠單次口服桑仙降壓顆粒2、4、8g生藥/kg，腎性高血壓犬單次口服1.25、2.5、5g生藥/kg後，血壓均明顯降低，降壓時對心率無明顯影響。每天一次，連續14天口服給藥，每天給藥後血壓逐漸下降，不產生明顯耐藥性，停藥後1-2天血壓恢復至對照期水平，無反跳現象；麻醉開胸犬十二指腸給予桑仙降壓顆粒1.25、2.5、5g生藥/kg後，血壓有下降趨勢，左室做功明顯減少，對冠脈循環無明顯影響；小鼠口服桑仙降壓顆粒3、6、12g生藥/kg，對中樞神經系統無明顯鎮靜作用。
下述實驗例用於進一步說明本發明。
實施例一、對高血壓模型動物的降壓實驗(一)對SHR的降壓作用1.單次給藥的急性降壓作用SHR體重229±44g，雌雄兼用，測壓前將大鼠放入36±1℃電熱恆溫箱內加熱，10min後用CRB-III型大鼠電腦血壓心率儀(上海市高血壓研究所生產)間接測定大鼠尾動脈收縮壓(SBP)和心率(HR)。正式實驗前每天測壓一次，約2周。待大鼠適應環境，血壓穩定後進行實驗。SHR按血壓、體重隨機分為5組，每組8隻，雌雄各半。分別灌服蒸餾水、桑仙降壓2、4、8g生藥/kg和陽性對照藥牛黃降壓丸0.8g丸重/kg，體積均為1ml/100g，測定給藥前及給藥後1、2、3、4、6、8h的血壓和心率。結果表明，對照組的血壓和心率在觀測的8h內無明顯變化。灌服桑仙降壓2、4、8g生藥/kg後，收縮壓從1h開始明顯下降，2h達峰值，最大降壓值分別為10±4、17±9、20±10mmHg，降壓作用維持至給藥後3、3、4h以上，給藥後6h均恢復至給藥前水平，降壓效力、作用時間與劑量成正相關。給予陽性藥牛黃降壓丸0.8g/kg後血壓亦明顯下降，降壓作用持續3h以上。上述劑量的桑仙降壓及牛黃降壓丸對SHR心率無明顯影響。
2.多次給藥的實驗治療實驗在5天對照期血壓穩定後，給SHR灌服桑仙降壓2、4、8g生藥/kg/d，陽性藥物牛黃降壓丸0.8g丸重/kg/d，空白對照組灌服蒸餾水，連續14天，隔日測定當天給藥前及給藥後2h的SBP和HR。並在停藥後繼續觀察3天。結果可以看出，對照組血壓和心率波動不大。灌服桑仙降壓2、4、8g生藥/kg/d後，治療期(給藥前)內每天給藥前的血壓與對照期平均值相比無顯著性差異，每天給藥後2h所測血壓明顯下降，14天平均下降值分別為7±5、11±6、20±3mmHg，各劑量組血壓分別於末次給藥後24h恢復至對照期水平，降壓時動物心率波動不大。灌服陽性藥物牛黃降壓丸0.8g丸重/kg/d，每天給藥後2h所測血壓明顯下降，第5天開始給藥前血壓亦明顯下降，14天治療期內每天給藥前SBP平均下降了12±7mmHg，每天給藥後平均下降19±9mmHg，心率波動不大。治療期內各組動物體重變化無顯著性差異。
實驗例二、對麻醉開胸犬血流動力學的影響體重13±2(9-16)kg成年健康雜種犬，雌雄兼用。靜脈注射3％戊巴比妥鈉30mg/kg麻醉。氣管插管接SC-3型電動呼吸機行人工正壓呼吸。左側第IV肋間開胸，暴露心臟，分離主動脈根部，卡上直徑12或14mm(FC-120/140T)的電磁流量計探頭，經MFV-3200型電磁血液流量計測定主動脈血流量，以此代表心輸出量(CO)；分離冠狀動脈左旋支，卡上直徑2或3mm(FC-020/030T)的電磁流量計探頭，經MFV-3200型電磁血液流量計測定冠脈流量(CBF)；心尖部插管至左心室，經TP-400T型壓力換能器接AP-641G血壓放大器測量左室內壓(LVSP)；並將LVSP電訊號輸入EQ-601G壓力處理器，測定左室內壓最大上升和下降速率(±LVdp/dtmax)；分離股動脈，插管至腹主動脈，經TP-400T型壓力換能器接AP-641G血壓放大器測定收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、平均動脈壓(MBP)；四肢皮下插入針狀電極，經AC-601G心電放大器測量標準II導聯心電圖(ECG II)，並將ECG電訊號輸入AT-601G心率計，測量心率(HR)。上述觀測指標同步記錄於RM-6300型八導生理記錄儀的RTA-1200型熱陣記錄儀上。同時將HR、SBP、DBP、MBP、LVSP存入VM-187G型存儲器的磁碟內，動態觀察及核對實驗過程中心率和血壓的變化。另行股靜脈插管，靜脈輸注0.9％NaCl 30ml/h；開腹，十二指腸給藥，給藥容量1ml/kg。
手術完畢待各項指標穩定後記錄藥前值，然後分別給予桑仙降壓2.5、5g生藥/kg，空白對照組給予蒸餾水，陽性對照組給予心得安2mg/kg，記錄給藥後15、30、60、90、120min上述諸項指標。按公式推導計算心臟指數(CI)、左室做功(LVW)和總外周阻力(TPR)，實驗結束後放血處死動物，剪下心臟並稱重，以1/3心重作為左旋支引流區，計算每百克心肌的血流量(CF)，並按公式推導計算冠脈阻力(CR)。實驗數據以均數±標準差(X±SD)表示，以配對t檢驗比較給藥前與給藥後均數差異的顯著性，結果見表1-5。
1.對血壓、心率及心電圖的影響麻醉開胸犬十二指腸給予蒸餾水後SBP、DBP、HR和ECG II在120min內與給藥前相比無明顯變化。
SBP、DBP十二指腸給予桑仙降壓2.5、5g生藥/kkg，SBP、DBP有降低的趨勢，但與給藥前比較，無顯著性差異。
HR、ECG II桑仙降壓對心率及ECG II波形均無明顯影響。
陽性藥物心得安明顯降低血壓，減慢心率。
2.對左心室功能的影響麻醉開胸犬給予蒸餾水後120min LVSP、±LVdp/dtmax、LVW、LVdp/dt/P無明顯變化。
LVSP十二指腸給予桑仙降壓2.5、5g生藥/kg，LVSP均有降低的趨勢，但與給藥前比較，無明顯差異。
LVEDP桑仙降壓對LVEDP無明顯影響。
LVW十二指腸給予桑仙降壓2.5g生藥/kg，LVW有下降的趨勢，但與給藥前相比無顯著性差異；5g生藥/kg藥後45min LVW明顯下降，作用持續120min以上。表明桑仙降壓減少左室做功，對心臟有一定的抑制作用。
±LVdpdtmax桑仙降壓對±LVdp/dtmax無明顯影響。
LVdp/dtmax/P(P指LVSP)十二指腸給予桑仙降壓2.5、5g生藥/kg對LVdp/dtmax/P無明顯影響，說明該藥對左心室的收縮功能無明顯影響。
陽性藥物心得安明顯降低LVSP、±LVdpdtmax及LVW，對LVEDP、LVdp/dtmax/P無影響。
3.對心臟泵血功能及總外周阻力的影響麻醉開胸犬十二指腸給予蒸餾水後120min CO、CI及TPR無明顯變化。
CO、CI十二指腸給予桑仙降壓對CO、CI無明顯影響。
TPR十二指腸給予桑仙降壓對TPR無明顯影響。
陽性藥物心得安明顯減少CO、CI，對TPR無明顯影響。
4.對冠脈流量及冠脈阻力的影響十二指腸給予桑仙降壓2.5、5g生藥/kg CF、CR均無明顯變化。
心得安有降低CF的趨勢，對CR無影響。
實驗例三、對腎性高血壓大鼠血漿中血管緊張素I、血管緊張素II和醛固酮含量的影響取實驗一，給藥20天時的大鼠，於藥後2h眼眶取血，將血加入到已準備好的試管內，離心，分離血漿。採用均相競爭法直接測定，依次加入血漿和各種測定試劑，最後用放射免疫r-計數器進行測定，計算出各組動物血漿中血管緊張素I，血管緊張素II和醛固酮的含量，結果見表6。
實驗結果表明，桑仙2、4g生藥/kg有降低腎性高血壓大鼠血管緊張素I、血管緊張素II和醛固酮的趨勢，隨著劑量加大其作用加強，8g生藥/kg組與對照組相比血管緊張素I、血管緊張素II有明顯差異。
實施例1桑寄生825g 淫羊藿688g杜仲(炒)413g丹參550g葛根550g 黃芪413g酸棗仁(炒)550g 黃連248g 川芎413g以上九味，桑寄生、淫羊藿、葛根、川芎、酸棗仁加60％乙醇回流提取兩次(加醇量12，7倍)，第一次2小時，第二次1.5小時，合併提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇，藥液放置備用；取杜仲、黃芪、黃連、丹參等其餘藥味，加水煎煮兩次(加水量10，8)，第一次1.5小時，第二次1.5小時，合併煎液，濾過，減壓濃縮，與上述藥液合併，濃縮至相對密度1.12～1.15(60℃)的清膏，以噴霧乾燥法製備幹浸膏粉，取幹浸膏粉3份，加糊精1份，阿司帕坦3.5％，混合均勻後，乾式制粒，整粒，製成1000g，即得。
實施例2本發明藥物組合物顆粒劑的質量控制方法a.取本品3g，研細，加1∶1甲醇—水60ml，超聲處理[功率50W，工作頻率30KHz]20分鐘，濾過，濾液濃縮至約20ml加水10ml稀釋，加10％硫酸0.5mL，煮沸回流1小時，放冷，移至分液漏鬥中，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合併醋酸乙酯液，水浴蒸乾，殘渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作為供試品溶液。另取桑寄生藥材粉末3g，同法製成對照藥材溶液。再取槲皮素對照品，加醋酸乙酯溶解，製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版-部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液、藥材對照品溶液各6μl，對照品溶液2μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以5∶4∶1水飽和甲苯—醋酸乙酯—甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。
b.取本品2g，研細，加70％乙醇50ml，超聲處理〔功率50W，工作頻率30KHz〕30分鐘，濾過，水浴蒸至無醇味，，加水10ml稀釋，加氯化鈉至飽和，15ml、15ml、10ml、10ml乙醚提取4次，合併乙醚液，揮去乙醚，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品加乙醇製成每1ml含1.5m g的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一以羧甲基纖維素為黏合劑的矽膠G的薄層板上，以8∶1∶1氯仿一丙酮一甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同汙綠色的斑點。
c.取本品1g，研細，加70％乙醇浸泡15min，60ml、40ml超聲處理2次，每次30分鐘，功率50W，工作頻率30KHz合併提取液，水浴蒸發至約5ml，與0.5g聚醯胺拌勻，水浴蒸乾，置已處理好的聚醯胺柱，中，先用蒸餾水洗至流出液無色，再以70％乙醇洗脫至無色，繼以90％乙醇洗脫至無色，收集乙醇洗脫液，以水浴蒸至無醇味，放冷，用鹽酸溶液調pH值至2，移至分液漏鬥中以15ml、10ml醋酸乙酯提取2次，合併醋酸乙酯液水浴蒸乾，殘渣加70％乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對照品加甲醇製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版第一部附錄VI B)試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一矽膠H薄層板上，以8∶3.5∶1氯仿一甲醇一水下層溶液為展開劑，展開、取出、晾乾，置氨氣中燻後，於紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的亮藍色螢光斑點。
d.取本品2g，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，功率50W，工作頻率30KHz，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，以20ml、20ml、15ml、15ml水飽和正丁醇提取4次，合併正丁醇液，以15ml、15ml氨試液洗滌2次，棄去鹼水層，正丁醇層水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，通過內徑1.5cm長15cm D101型大孔吸附樹脂柱，先以水洗至流出液無色，再以30％乙醇洗至流出液無色，繼用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品加甲醇製成每1ml含1.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液8ul，對照品溶液4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈(365nm)下顯相同的橙黃色螢光斑點。
e.取本品2g，研細，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，功率50W，工作頻率30KHz，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃連對照藥材0.1g，同法製成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗鹼對照品加甲醇製成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以6∶3∶3∶1.5∶0.8苯—醋酸乙酯—異丙醇—甲醇—氨水為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內，預平衡15分鐘後，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。
f.取鑑別d項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取酸棗仁皂苷A加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI B)試驗，吸取供試品溶液6μl，對照品溶液4μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以4∶1∶5正丁醇—冰醋酸—水上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾。噴以2％香草醛硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍綠色的斑點。
含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2000年版第一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適應性試驗用十八烷基矽烷健合矽膠為填充劑，24∶76乙腈—水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低於1500。對照品溶液的製備精密秤取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇製成每1ml含43.04μg的溶液，即得。供試品溶液的製備取本品研細，約0.3g，精密稱定，加70％乙醇100ml，超聲分散2分鐘，功率50W，工作頻率30KHz，加熱回流提取1小時，濾過，用70％乙醇少量洗滌容器和濾渣，洗液與提取液合併，水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，置已處理好的聚醯胺柱中，先以水40ml洗至流出液無色，再以90％乙醇150ml洗脫，收集醇洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加70％乙醇使溶解，並定容至10ml，以0.5μm的微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。測定法，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，計算，即得。本品每g含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H40O15)計不得低於1.70mg，每袋6g，1日三次，1次6g。
權利要求
1.一種治療高血壓的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由如下原料藥製成的桑寄生600-900重量份淫羊藿500-700重量份杜仲350-450重量份 丹參400-600重量份葛根400-600重量份 黃芪350-450重量份酸棗仁400-600重量份黃連200-400重量份川芎350-450重量份
2.如權利要求1所述的一種治療高血壓的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物是由如下原料藥製成的桑寄生825重量份淫羊藿688重量份杜仲413重量份丹參550重量份 葛根550重量份 黃芪413重量份酸棗仁550重量份黃連248重量份 川芎413重量份
3.如權利要求1或2所述的一種治療高血壓的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物原料藥中酸棗仁、杜仲經炒制。
4.如權利要求1、2或3所述的一種治療高血壓的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物原料藥可以製成任何臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑。
5.如權利要求4所述的一種治療高血壓的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的製備方法為桑寄生、淫羊藿、葛根、川芎、酸棗仁加50-70％乙醇回流提取2-3次，加醇量6-12倍，每次1-2小時，合併提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇，藥液放置備用；取杜仲、黃芪、黃連、丹參等其餘藥味，加水煎煮2-3次，加水量6-10倍，每次1-2小時，合併煎液，濾過，減壓濃縮，與上述藥液合併，濃縮至相對密1.12～1.15/60℃的清膏，以噴霧乾燥法製備幹浸膏粉，製成臨床可接受的劑型，如片劑，膠囊，顆粒劑，口服液體製劑，皮下給藥製劑，栓劑。6、如權利要求5所述的一種治療高血壓的藥物組合物，其特徵在於該藥物組合物的製備方法為桑寄生、淫羊藿、葛根、川芎、酸棗仁加60％乙醇回流提取兩次，加醇12，7倍，第一次2小時，第二次1.5小時、合併提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇，藥液放置備用；取杜仲、黃芪、黃連、丹參等其餘藥味，加水煎煮兩次，加水量10，8倍，第一次1.5小時，第二次1.5小時，合併煎液，濾過，減壓濃縮，與上述藥液合併，濃縮至相對密度1.12～1.15/60℃的清膏，以噴霧乾燥法製備幹浸膏粉，取幹浸膏粉3份，加糊精1份，阿司帕坦3.5％，混合均勻後，乾式制粒，整粒，製成顆粒。7.如權利要求6所述顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於該方法中包括鑑別和/或含量測定，其中鑑別包括如下方法中的一種或幾種a.取本品3g，研細，加1-2∶1-2甲醇—水60ml，超聲處理20分鐘，功率50W，工作頻率30KHz，濾過，濾液濃縮至約20ml，加水10ml稀釋，加5-10％硫酸0.5mL，煮沸回流1-1.5小時，放冷，移至分液漏鬥中，用醋酸乙酯提取2-3次，每次30ml，合併醋酸乙酯液，水浴蒸乾，殘渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作為供試品溶液。另取桑寄生藥材粉末3g，同法製成對照藥材溶液。再取槲皮素對照品，加醋酸乙酯溶解，製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、藥材對照品溶液各6μl，對照品溶液2μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以4-6∶3-4∶1-2水飽和甲苯—醋酸乙酯—甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。b.取本品2g，研細，加70％乙醇50ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，水浴蒸至無醇味，加水10ml稀釋，加氯化鈉至飽和，10-15ml乙醚提取3-5次，合併乙醚液，揮去乙醚，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品加乙醇製成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一以羧甲基纖維素為黏合劑的矽膠G的薄層板上，以8-6∶1-2∶1-2氯仿一丙酮一甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同汙綠色的斑點。c.取本品1g，研細，加60-80％乙醇浸泡10-20min，60-40ml超聲處理2-3次，每次20-40分鐘，合併提取液，水浴蒸發至約5ml，與0.5g聚醯胺拌勻，水浴蒸乾，置已處理好的聚醯胺柱，中，先用蒸餾水洗至流出液無色，再以60-80％乙醇洗脫至無色，繼以80-90％乙醇洗脫至無色，收集乙醇洗脫液，以水浴蒸至無醇味，放冷，用鹽酸溶液調pH值至2，移至分液漏鬥中以10-15ml醋酸乙酯提取2-3次，合併醋酸乙酯液水浴蒸乾，殘渣加70％乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對照品加甲醇製成每1ml含2 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一矽膠H薄層板上，以6-8∶2-4∶1-2氯仿一甲醇一水下層溶液為展開劑，展開、取出、晾乾，置氨氣中燻後，於紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的亮藍色螢光斑點。d.取本品2g，加甲醇50ml，超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，以15-20ml水飽和正丁醇提取2-4次，合併正丁醇液，以10-15ml氨試液洗滌2-3次，棄去鹼水層，正丁醇層水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，通過D101型大孔吸附樹脂柱，先以水洗至流出液無色，再以20-40％乙醇洗至流出液無色，繼用50-70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品加甲醇製成每1ml含1.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8ul，對照品溶液4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以11-14∶5-9∶1-2氯仿—甲醇—水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5-10％硫酸乙醇溶液，在100-105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色螢光斑點。e.取本品2g，研細，加甲醇20ml，超聲處理10-30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃連對照藥材0.1g，同法製成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗鹼對照品加甲醇製成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以5-7∶2-4∶2-4∶1-2∶0.5-1苯—醋酸乙酯—異丙醇—甲醇—氨水為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內，預平衡10-20分鐘後，展開，取出，晾乾，置紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。f.取鑑別d項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取酸棗仁皂苷A加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液6μl，對照品溶液4μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以3-5∶1-2∶5-3正丁醇—冰醋酸—水上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾。噴以2％香草醛硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍綠色的斑點。含量測定照高效液相色譜法測定。色譜條件與系統適應性試驗 用十八烷基矽烷健合矽膠為填充劑，20-25∶75-80乙腈—水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低於1500。對照品溶液的製備精密秤取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇製成每1ml含43.04μg的溶液，即得。供試品溶液的製備取本品研細，約0.3g，精密稱定，加60-80％乙醇100ml，超聲分散1-3分鐘，加熱回流提取1-1.5小時，濾過，用60-80％乙醇少量洗滌容器和濾渣，洗液與提取液合併，水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，置已處理好的聚醯胺柱中，先以水40ml洗至流出液無色，再以80-95％乙醇150ml洗脫，收集醇洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加60-80％乙醇使溶解，並定容至10ml，以0.5μm的微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。測定法，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，計算，即得。本品每g含淫羊藿以淫羊藿苷計不得低於1.70mg。
8.如權利要求7所述顆粒劑的質量控制方法，其特徵在於該方法為a.取本品3g，研細，加1∶1甲醇—水60ml，超聲處理[功率50W，工作頻率30KHz]20分鐘，濾過，濾液濃縮至約20ml加水10ml稀釋，加10％硫酸0.5mL，煮沸回流1小時，放冷，移至分液漏鬥中，用醋酸乙酯提取2次，每次30ml，合併醋酸乙酯液，水浴蒸乾，殘渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作為供試品溶液。另取桑寄生藥材粉末3g，同法製成對照藥材溶液。再取槲皮素對照品，加醋酸乙酯溶解，製成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、藥材對照品溶液各6μl，對照品溶液2μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以5∶4∶1水飽和甲苯—醋酸乙酯—甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。b.取本品2g，研細，加70％乙醇50ml，超聲處理30分鐘，功率50W，工作頻率30KHz濾過，水浴蒸至無醇味，加水10ml稀釋，加氯化鈉至飽和，15ml、15ml、10ml、10ml乙醚提取4次，合併乙醚液，揮去乙醚，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品加乙醇製成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一以羧甲基纖維素為黏合劑的矽膠G的薄層板上，以8∶1∶1氯仿一丙酮一甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以2％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同汙綠色的斑點。c.取本品1g，研細，加70％乙醇浸泡15min，60ml、40ml超聲處理2次，每次30分鐘，功率50W，工作頻率30KHz合併提取液，水浴蒸發至約5ml，與0.5g聚醯胺拌勻，水浴蒸乾，置已處理好的聚醯胺柱，中，先用蒸餾水洗至流出液無色，再以70％乙醇洗脫至無色，繼以90％乙醇洗脫至無色，收集乙醇洗脫液，以水浴蒸至無醇味，放冷，用鹽酸溶液調pH值至2，移至分液漏鬥中以15ml、10ml醋酸乙酯提取2次，合併醋酸乙酯液水浴蒸乾，殘渣加70％乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對照品加甲醇製成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取對照品溶液2μl，供試品溶液6μl，分別點於同一矽膠H薄層板上，以8∶3.5∶1氯仿一甲醇一水下層溶液為展開劑，展開、取出、晾乾，置氨氣中燻後，於紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的亮藍色螢光斑點。d.取本品2g，加甲醇50ml，超聲處理30分鐘，功率50W，工作頻率30KHz，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加水20ml使溶解，以20ml、20ml、15ml、15ml水飽和正丁醇提取4次，合併正丁醇液，以15ml、15ml氨試液洗滌2次，棄去鹼水層，正丁醇層水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，通過內徑1.5cm長15cm D101型大孔吸附樹脂柱，先以水洗至流出液無色，再以30％乙醇洗至流出液無色，繼用70％乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品加甲醇製成每1ml含1.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8ul，對照品溶液4ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色螢光斑點。e.取本品2g，研細，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，功率50W，工作頻率30KHz，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃連對照藥材0.1g，同法製成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗鹼對照品加甲醇製成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以6∶3∶3∶1.5∶0.8苯—醋酸乙酯—異丙醇—甲醇—氨水為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內，預平衡15分鐘後，展開，取出，晾乾，置紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃色螢光斑點。f.取鑑別d項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取酸棗仁皂苷A加甲醇製成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液6μl，對照品溶液4μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以4∶1∶5正丁醇—冰醋酸—水上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾。噴以2％香草醛硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍綠色的斑點。含量測定照高效液相色譜法測定。色譜條件與系統適應性試驗 用十八烷基矽烷健合矽膠為填充劑，24∶76乙腈—水為流動相，檢測波長為270nm，理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低於1500。對照品溶液的製備精密秤取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇製成每1ml含43.04μg的溶液，即得。供試品溶液的製備取本品研細，約0.3g，精密稱定，加70％乙醇100ml，超聲分散2分鐘，功率50W，工作頻率30KH z，加熱回流提取1小時，濾過，用70％乙醇少量洗滌容器和濾渣，洗液與提取液合併，水浴蒸乾，殘渣加水5ml使溶解，置已處理好的聚醯胺柱中，先以水40ml洗至流出液無色，再以90％乙醇150ml洗脫，收集醇洗脫液，水浴蒸乾，殘渣加70％乙醇使溶解，並定容至10ml，以0.5μm的微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。測定法，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，計算，即得。本品每g含淫羊藿以淫羊藿苷計不得低於1.70mg。
9.如權利要求7或8所述的質量控制方法，其特徵在於該方法中所述聚醯胺柱為60～80目，2.5g或3g，柱內徑1.5cm，溼法上柱。
10.如權利要求1、2或3所述的一種治療高血壓的藥物組合物在製備治療高血壓的藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種治療高血壓的藥物組合物，該藥物組合物是由如下原料藥製成的桑寄生600－900重量份、淫羊藿500－700重量份、杜仲(炒)350－450重量份、丹參400－600重量份、葛根400－600重量份、黃芪350－450重量份、酸棗仁(炒)400－600重量份、黃連200－400重量份、川芎350－450重量份。該藥物組合物治療高血壓有很好的療效。
文檔編號A61P9/12GK1511571SQ0215945
公開日2004年7月14日 申請日期2002年12月31日 優先權日2002年12月31日
發明者林慧娟, 莫用元 申請人:中國中醫藥科技開發交流中心