一種純化豬皮的製作方法

2023-09-15 23:28:15 2

專利名稱：一種純化豬皮的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種純化豬皮的製作方法，屬於生物醫學材料的製備領域。
背景技術：
近些年來，隨著科學技術的不斷發展進步，生物醫學材料也得到了前所未有的發展，動 物皮膠原在生物醫學材料中的應用日益廣泛。
膠原廣泛地存在於哺乳動物的骨、腱、軟骨和皮膚及其它結締組織中，約佔哺乳動物蛋 白總量的1/3，是構成人體重要的細胞外基質成分。膠原具有較好的生物相容性，較弱的抗 原性，且親水性好，對細胞的吸附作用強。由於它本身就是一種細胞外基質成分，還兼具誘 導細胞增殖和分化的作用。因此，長期以來，人們利用膠原的性能特點，研究開發系列膠原 基生物醫學材料，如生物敷料、人工皮膚、生物醫用膜、止血海綿、脫細胞真皮基質材料、 可注射膠原溶液、膠原基複合醫用纖維以及組織工程支架材料等等，部分膠原基生物醫學材 料己應用於臨床，並被證明具有一定的療效(但衛華，王坤餘，曾睿，等.膠原的醫學應用及 其發展前景.生物醫學工程與臨床.2004， 8 (1): 45-48)。
膠原是世界上資源存量最大的可再生動物生物質資源，來源廣泛、價廉易得，具有很高 的醫學利用價值。令人遺憾的是，膠原在醫學應用方面，由於膠原基生物醫學材料的生物相 容性在製造過程中難於控制，導致材料在使用過程中常常出現可靠性和安全性的問題。出現 這些問題的根本原因就是由於所使用的膠原蛋白的純度達不到要求。
根據我們的研究，解決膠原基生物醫學材料的生物相容性的關鍵是提高膠原蛋白的純 度，儘量地清除原料中的非膠原成分和小分子物質；在純化提取的過程中，既要確保膠原的 生物活性，又要清除抗原物質，消除其免疫原性。現有技術往往忽略了這些關鍵問題，有的 技術是使用氯化鈉溶液除去原料中的非膠原成分，再進行提純(傅燕鳳，沈月新，楊承剛， 等.淡水魚魚皮膠原蛋白的提取.上海水產大學學報.2004， 13 (6): 146-150);有的技術則是 進行一些簡單的預處理就進行提取(李開雄，趙志遠，劉霞.豬皮中膠原蛋白的提取及應用. 肉類研究.1996， 4: 43-48);從總體上來看，己有技術側重於膠原提取的居多，而直接對動 物皮膠原進行純化的甚少(胡勝，李志強，陳敏.皮膠原蛋白的酶法提取及在高附加值領域的 應用.皮革科學與工程.2002， 12 (5): 38-42)。
綜上所述，現有技術存在以下不足
1.以資源相對有限的牛腱、鼠尾腱為原料提取膠原蛋白，忽略了原料的選擇及其純化對於製備醫用膠原蛋白的極端重要性；
2. 以牛腱為原料提取膠原蛋白，存在攜帶狂牛症病毒的風險；
3. 以豬皮、牛皮、羊皮及魚皮等提取膠原蛋白，工藝過於簡單，無法達到純化的目的。

發明內容
本發明的目的是針對已用技術存在的不足而提供一種針對豬皮的高效純化方法，其特點 是以價廉易得的豬皮為原料，製備具有醫學利用價值的純化豬皮。 純化豬皮的製作方法包括以下步驟
(1) 機械去肉採用去肉機去肉，清除豬皮的皮下組織層。
(2) 第一次清洗選取健康豬皮100重量份裝入轉鼓中，加水調節液比2.0-4.0，轉動 30-120min，控幹廢液，加水調節液比2. 0-4. 0，轉動30-120min，控幹廢液。
(3) 第二次清洗加水調節液比2.0-4.0，轉動30-120min，控幹廢液，加水調節液比 2.0-4.0，轉動30-120min，控幹廢液。
(4) 第三次清洗加溫度為30-45。C的熱水，調節液比2.0-4.0，浴溫30-35°C，加入 平平加0.2-3.0重量份，轉動30-180min，控幹廢液。
(5) 水洗:加水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min。
(6) 浸水加水調節液比2. 0-6. 0，加入平平加0. 2-3. 0重量份、食鹽1. 0-6. 0重量份， 轉動30-180min，停鼓過夜。次晨轉動30-60min，控幹廢液。
(7) 水洗加水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min。
(8) 第一次脫脂加入40—45。C的熱水調節液比1.0~4.0，浴溫為30—38。C，加入平 平加0.3—2.0重量份，洗衣粉0. 5—3. 0重量份，轉動60—180min,控幹廢液。
(9) 第二次脫脂加入40—45。C的熱水調節液比1.0—4.0，浴溫為30—38°C，加入平 平加0. 3—3. 0重量份，洗衣粉0.5—3.0重量份，轉動60—180min，控幹廢液。
(10) 第三次脫脂加入40—45。C的熱水調節液比1.0—4.0，浴溫為30—38。C，加入 平平加0. 3—3. 0重量份，洗衣粉0.5—3.0重量份，轉動60—180min，控幹廢液。
(11) 水洗加溫度為35—40。C的熱水，調節液比2.0-6.0，悶水洗15-30min，然後加 溫度為35—40。C的熱水，調節液比2. 0-6. 0，悶水洗10-20min，再加溫度為35—4(TC的熱水， 調節液比2.0-6.0，悶水洗10-20min。最後，加水調節液比2. 0_6. 0，流水洗30min。將皮 出鼓，瀝水3h。
(12) 塗酶先稱取複合酶皮膠原處理劑A 3.0-6.0重量份，複合酶皮膠原處理劑B
2.0-4.0重量份，水l.O-4.0重量份，調成糊狀。然後，將皮肉麵朝上，平鋪於工作檯上，
用鬃刷蘸酶糊，均勻塗於皮的肉麵上，塗好後，沿皮的脊背線對摺，堆置30-72h。
5(13) 手工推毛用推毛板推去鬆動的針毛和絨毛，儘量推淨。
(14) 水洗加常溫水調節液比2. 0-6. 0,流水洗10-30min。然後加水調節液比2. 0-6. 0， 流水洗10-30min。再加水調節液比2. 0_6. 0，流水洗10-30min。控幹廢液將皮出鼓。
(15)浸鹼加入純度為60%的Na2S 1.0-4. 0重量份，濃度為30%的NaOll 0. 3-1. 0重 量份，水10-15重量份，轉動20-40min，再將皮放進轉鼓中，轉動30-120min，檢査脫毛情 況，毛脫淨後，擴大液比至2. 0-5. 0，轉動120min，停鼓過夜。次日晨，轉動30-60min， 控幹廢液。
(16) 水洗加水調節液比2.0-6.0，悶水洗10-30min，控幹廢液。然後，加水調節液 比2. 0-6.0，流水洗10-30min，控幹廢液。
(17) 第一次脫鹼加溫度為38-42'C的熱水調節液比1.0-4.0，浴溫30-35'C，加入氯 化銨1. 0-5. 0重量份，平平加0. 3-1. 5重量份，轉動30-90min。
(18) 水洗加水調節液比2.0-6.0，流水洗30-90min,控幹廢液。再加水調節液比 2.0-6.0，流水洗30-90rain，控幹廢液。
(19) 第二次脫鹼加溫度為38-42'C的熱水調節液比1.0-4.0，浴溫30-35'C，加入氯 化銨1. 0-5. 0重量份，平平加0. 3-1. 5重量份，轉動30-90min。
(20) 水洗加常溫水調節液比2. 0-6. 0，流水洗30-90min，控幹廢液。再加常溫水調 節液比2.0-6.0,流水洗30-90min，控幹廢液。
(21) 酶消化加入溫度為40-44。C的熱水，預熱，調節液比至1.0-3.0，浴溫為30-36 。C，然後，加入活力為l: 25的工業胰酶O. 10-1.20重量份，平平加0. 3-3. 0重量份，轉動 60-180min後，停鼓過夜。次日轉動15-45min，控幹廢液。
(22) 清洗加常溫純水調節液比2.0—5.0，加入氯化鈉2. 0—5. 0重量份，轉動90— 180min，控幹廢液。加常溫純水調節液比2. 0—5. 0，加入氯化鈉2. 0—5. 0重量份，轉動90 一180min，控幹廢液。加常溫純水調節液比2. 0—5. 0，加入氯化鈉2. 0—5. 0重量份，轉動 90—180min，控幹廢液，即得到純化豬皮。
(23) 滾鹽加入氯化鈉5. 0—20. 0重量份，轉動20—60min，出鼓。
(24) 分割首先將純化豬皮裁成矩形，然後再分割成10.0—30.0cmX10.0—30.0cm 的小塊矩形。
(25) 裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度-5 — -15'C的條件下冷 凍保存。1. 外觀白色至淡黃色片狀物，無肉眼所見之雜質；
2. 水分60—70%;
3. 蛋白質含量>95%;
4. 雜蛋白含量<5%;
5. 殘留細胞數光學顯微鏡在一個視野內，殘留細胞數不超過5個(HE染色，X 400)
6. 重金屬含量<5 ug/g(m/m)。
本發明的方法所製作的純化豬皮，可用於提取製備醫用膠原、組織工程支架材料和修復 與重建材料。
本發明具有以下優點
1. 以價廉易得、來源廣泛的豬皮為原料，製備純化豬皮，既降低了材料成本，又避免了
使用牛腱、鼠尾腱所存在的種種不足；
2. 方法簡單，工藝條件不苛刻，容易滿足；
3. 工藝規範，條件可控，易於工業化生產；
4. 實現了豬皮的高效純化，純化豬皮不僅可以作為提取製備醫用膠原的原料，而且還適 合其他多種醫學用途；
5. 本方法也能用於其他動物皮的本體純化；
6. 生產過程無汙染，具有顯著的環境效益和經濟效益。
具體實施例方式
下面通過實施例對本發明進行具體的描述，有必要在此指出的是，本實施例只用於對本 發明進行進一步說明，而不能理解為對發明的保護範圍的限制，該領域的技術熟練人員可以 根據本發明的內容作出一些非本質的改進和調整。
實施例1
(1) 機械去肉採用去肉機去肉，清除豬皮的皮下組織層。
(2) 第一次清洗選取健康豬皮100重量份裝入轉鼓中，加水調節液比2. 0，轉動30min， 控幹廢液，加水調節液比2.0，轉動30min，控幹廢液。
(3) 第二次清洗加水調節液比2.0，轉動30min，控幹廢液，加水調節液比2.0，轉 動30min，控幹廢液。
(4) 第三次清洗加溫度為35。C的熱水，調節液比2.0，浴溫3(TC，加入平平加0. 2 重量份，轉動30min，控幹廢液。
(5) 水洗加水調節液比2.0，流水洗10min。
(6) 浸水加水調節液比2. 0，加入平平加0. 2重量份、食鹽1. 0重量份，轉動30min，停鼓過夜。次晨轉動30min，控幹廢液。
(7) 水洗加水調節液比2.0，流水洗10min。
(8) 第一次脫脂加入40'C的熱水調節液比1.0，浴溫為3(TC,加入平平加0.3重量 份，洗衣粉0.5重量份，轉動60min，控幹廢液。
(9) 第二次脫脂加入4(TC的熱水調節液比1. 0,浴溫為30°C,加入平平加0. 3重量 份，洗衣粉0.5重量份，轉動60min，控幹廢液。
(10) 第三次脫脂加入40。C的熱水調節液比1.0，浴溫為30。C，加入平平加0.3重量 份，洗衣粉0.5重量份，轉動60min，控幹廢液。
(11) 水洗加溫度為35'C的熱水，調節液比2.0，悶水洗15min，然後加溫度為35°C 的熱水，調節液比2. 0，悶水洗10min，再加溫度為35'C的熱水，調節液比2. 0,悶水洗10min。 最後，加水調節液比2.0，流水洗30min。將皮出鼓，瀝水3h。
(12) 塗酶先稱取複合酶皮膠原處理劑A 3.0重量份，複合酶皮膠原處理劑B 2.0 重量份，水1.0重量份，調成糊狀。然後，將皮肉麵朝上，平鋪於工作檯上，用鬃刷蘸酶糊， 均勻塗於皮的肉麵上，塗好後，沿皮的脊背線對摺，堆置30h。
(13) 手工推毛用推毛板推去鬆動的針毛和絨毛，儘量推淨。
(丄4)水洗加常溫水調節液比2.0，流水洗10min。然後加水調節液比2.0，流水洗 10min。再加水調節液比2.0，流水洗10min。控幹廢液，將皮出鼓。
(15)浸鹼加入純度為60°/。的Na2S 1. 0-4. 0重量份，濃度為30%的NaOH 0. 3重量份， 水10重量份，轉動20min，再將皮放進轉鼓中，轉動30min，檢査脫毛情況，毛脫淨後，擴 大液比至2.0，轉動120min，停鼓過夜。次日晨，轉動30min,控幹廢液。
(16) 水洗加水調節液比2.0，悶水洗10min，控幹廢液。然後，加水調節液比2.0， 流水洗10min，控幹廢液。
(17) 第一次脫鹼加溫度為38'C的熱水調節液比1.0，浴溫3(TC，加入氯化銨1.0重 量份，平平加0.3重量份，轉動30min。
(18) 水洗加水調節液比2.0，流水洗30min，控幹廢液。再加水調節液比2.0，流水 洗30min，控幹廢液。
(19) 第二次脫鹼加溫度為38'C的熱水調節液比1.0，浴溫30"C，加入氯化銨1.0重 量份，平平加0.3重量份，轉動30min。
(20) 水洗加常溫水調節液比2.0，流水洗30rain，控幹廢液。再加常溫水調節液比 2.0，流水洗30min，控幹廢液。
(21) 酶消化加入溫度為40'C的熱水，預熱，調節液比至l.O，浴溫為30'C，然後，
8加入活力為l: 25的工業胰酶0. IO重量份，平平加0.3重量份，轉動60min後，停鼓過夜。 次日轉動15min，控幹廢液。
(22) 清洗加常溫純水調節液比2.0,加入氯化鈉2.0重量份，轉動90min，控幹廢 液。加常溫純水調節液比2.0，加入氯化鈉2.0重量份，轉動90min，控幹廢液。加常溫純水 調節液比2.0，加入氯化鈉2.0重量份，轉動90min，控幹廢液，即得到純化豬皮。
(23) 滾鹽加入氯化鈉5.0重量份，轉動20min，出鼓。
(24) 分割首先將純化豬皮裁成矩形，然後再分割成10.0—30.0cmX10.0—30.0cm 的小塊矩形。
(25) 裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度-5 — _15°0的條件下冷 凍保存。
實施例2
(1) 機械去肉採用去肉機去肉，清除豬皮的皮下組織層。
(2) 第一次清洗選取健康豬皮100重量份裝入轉鼓中，加水調節液比3. 0，轉動75min， 控幹廢液，加水調節液比3.0，轉動75min，控幹廢液。
(3) 第二次清洗加水調節液比3.0，轉動75min，控幹廢液，加常調節液比3.0，轉 動75min，控幹廢液。
(4) 第三次清洗加溫度為38。C的熱水，調節液比3.0，浴溫32。C，加入平平加1.6 重量份，轉動100min,控幹廢液。
(5) 水洗加水調節液比4.0，流水洗20min。
(6) 浸水加水調節液比3. 0，加入平平加1. 6重量份、食鹽3. 5重量份，轉動100min， 停鼓過夜。次晨轉動45min，控幹廢液。
(7) 水洗加水調節液比4.0，流水洗20min。
(8) 第一次脫脂加入42'C的熱水調節液比2.5，浴溫為34"C，加入平平加1.2重量 份，洗衣粉1.8重量份，轉動120min，控幹廢液。
(9) 第二次脫脂加入42'C的熱水調節液比2.5，浴溫為34'C，加入平平加1. 6重量 份，洗衣粉1.8重量份，轉動120min，控幹廢液。
(10) 第三次脫脂加入42'C的熱水調節液比2. 5，浴溫為34°C，加入平平加1. 6重量 份，洗衣粉1.8重量份，轉動120min，控幹廢液。
(11) 水洗加溫度為3『C的熱水，調節液比4.0，悶水洗25min，然後加溫度為38°C 的熱水，調節液比4. 0，悶水洗15min，再加溫度為38。C的熱水，調節液比4. 0，悶水洗15min。 最後，加水調節液比4.0，流水洗30min。將皮出鼓，瀝水3h。(12) 塗酶先稱取複合酶皮膠原處理劑A 4.5重量份，複合酶皮膠原處理劑B 3.0 重量份，水2.5重量份，調成糊狀。然後，將皮肉麵朝上，平鋪於工作檯上，用鬃刷蘸酶糊， 均勻塗於皮的肉麵上，塗好後，沿皮的脊背線對摺，堆置50h。
(13) 手工推毛用推毛板推去鬆動的針毛和絨毛，儘量推淨。
(14) 水洗加常溫水調節液比4.0，流水洗20min。然後加水調節液比4.0，流水洗 20min。再加水調節液比4.0，流水洗20min。控幹廢液，將皮出鼓。
(15)浸鹼加入純度為60%的Na2S 2. 5重量份，濃度為30%的NaOH 0. 6重量份， 水12重量份，轉動30min，再將皮放進轉鼓中，轉動75min，檢查脫毛情況，毛脫淨後，擴 大液比至3.5，轉動120min,停鼓過夜。次日晨，轉動45min，控幹廢液。
(16) 水洗加水調節液比4.0，悶水洗20min，控幹廢液。然後，加水調節液比4.0， 流水洗20min，控幹廢液。
(17) 第一次脫鹼加溫度為4(TC的熱水調節液比2.5,浴溫38'C，加入氯化銨3. 0重 量份，平平加0.9重量份，轉動60min。
(18) 水洗加水調節液比4.0，流水洗60min，控幹廢液。冉加水調節液比4.0，流水 洗60min，控幹廢液。
(19) 第二次脫鹼加溫度為4(TC的熱水調節液比2.5，浴溫38。C，加入氯化銨3. 0重 量份，平平加0.9重量份，轉動60min。
(20) 水洗加常溫水調節液比4.0，流水洗60min，控幹廢液。再加常溫水調節液比 4.0，流水洗60min，控幹廢液。
(21) 酶消化加入溫度為42。C的熱水，預熱，調節液比至2.0，浴溫為33'C，然後， 加入活力為l: 25的工業胰酶0. 65重量份，平平加1.7重量份，轉動120min後，停鼓過夜。 次日轉動30min，控幹廢液。
(22) 清洗加常溫純水調節液比3.5，加入氯化鈉3.5重量份，轉動130min，控幹廢 液。加常溫純水調節液比3.5，加入氯化鈉3.5重量份，轉動130min，控幹廢液。加常溫純 水調節液比3.5，加入氯化鈉3.5重量份，轉動130min，控幹廢液，即得到純化豬皮。
(23) 滾鹽加入氯化鈉12. 5重量份，轉動40min，出鼓。
(24) 分割首先將純化豬皮裁成矩形，然後再分割成10.0—30.0cmX10.0—30.0cm 的小塊矩形。
(25) 裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度-5 — -15'C的條件下冷 凍保存。
實施例3(I) 機械去肉採用去肉機去肉，清除豬皮的皮下組織層。
(2)第一次清洗選取健康豬皮100重量份裝入轉鼓中，加水調節液比4.0，轉動 120min,控幹廢液，加水調節液比4.0，轉動120min，控幹廢液。
(3) 第二次清洗加水調節液比4.0，轉動120min，控幹廢液，加水調節液比4.0，轉 動120min，控幹廢液。
(4) 第三次清洗加溫度為45。C的熱水，調節液比4.0，浴溫35。C，加入平平加3. 0 重量份，轉動180min，控幹廢液。
(5) 水洗加水調節液比6.0，流水洗30min。
(6) 浸水加水調節液比6. 0，加入平平加3. 0重量份、食鹽6. 0重量份，轉動180min， 停鼓過夜。次晨轉動60min,控幹廢液。
(7) 水洗加水調節液比6.0,流水洗30min。
(8) 第一次脫脂加入45。C的熱水調節液比4.0，浴溫為38。C，加入平平加2. 0重量 份，洗衣粉3.0重量份，轉動180min，控幹廢液。
(9) 第二次脫脂加入45'C的熱水調節液比4.0，浴溫38'C，加入平平加3. 0重量份， 洗衣粉3.0重量份，轉動180min，控幹廢液。
(10) 第三次脫脂加入45。C的熱水調節液比4.0，浴溫為38'C，加入平平加3. 0重量 份，洗衣粉3.0重量份，轉動180min，控幹廢液。
(II) 水洗加溫度為40。C的熱水，調節液比6.0，悶水洗30min，然後加溫度為40°C 的熱水，調節液比6. 0，悶水洗20min，再加溫度為40'C的熱水，調節液比6. 0,悶水洗20min。 最後，加水調節液比6.0，流水洗30min。將皮出鼓，瀝水3h。
(12) 塗酶先稱取複合酶皮膠原處理劑A 6.0重量份，複合酶皮膠原處理劑B 4.0 重量份，水4.0重量份，調成糊狀。然後，將皮肉麵朝上，平鋪於工作檯上，用鬃刷蘸酶糊， 均勻塗於皮的肉麵上，塗好後，沿皮的脊背線對摺，堆置72h。
(13) 手工推毛用推毛板推去鬆動的針毛和絨毛，儘量推淨。
(14) 水洗加常溫水調節液比6.0，流水洗30min。然後加水調節液比6.0，流水洗 30niin。再加水調節液比6.0，流水洗30min。控幹廢液，將皮出鼓。
(15)浸鹼加入純度為60%的Na2S 4. 0重量份，濃度為30%的NaOH 1. 0重量份，水 15重量份，轉動40min，再將皮放進轉鼓中，轉動120min，檢査脫毛情況，毛脫淨後，擴 大液比至5.0，轉動120min,停鼓過夜。次日晨，轉動60min，控幹廢液。
(16)水洗加水調節液比6.0，悶水洗30min,控幹廢液。然後，加水調節液比6.0， 流水洗30min，控幹廢液。(17) 第一次脫鹼加溫度為42'C的熱水調節液比4.0，浴溫35匸，加入氯化銨5. 0重 量份，平平加1.5重量份，轉動90min。
(18) 水洗加水調節液比6.0,流水洗90min，控幹廢液。再加水調節液比6. 0，流水 洗90min，控幹廢液。
(19) 第二次脫鹼加溫度為42'C的熱水調節液比4.0，浴溫35。C，加入氯化銨5. 0重 量份，平平加1.5重量份，轉動90min。
(20) 水洗加常溫水調節液比6.0，流水洗90min，控幹廢液。再加常溫水調節液比 6.0，流水洗90min，控幹廢液。
(21) 酶消化加入溫度為44'C的熱水，預熱，調節液比至3.0，浴溫為36t:，然後， 加入活力為l: 25的工業胰酶1.20重量份，平平加3.0重量份，轉動180min後，停鼓過夜。 次日轉動45min，控幹廢液。
(22) 清洗加常溫純水調節液比5.0，加入氯化鈉5.0重量份，轉動180min，控幹廢 液。加常溫純水調節液比5.0，加入氯化鈉5.0重量份，轉動180min,控幹廢液。加常溫純 水調節液比5.0，加入氯化鈉5. 0重量份，轉動180min，控幹廢液，即得到純化豬皮。
(23) 滾鹽加入氯化鈉20. 0重量份，轉動60min，出鼓。
(24) 分割首先將純化豬皮裁成矩形，然後再分割成10.0—30.0cmX10.0—30.0cm 的小塊矩形。
(25) 裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度-5 — -15°(:的條件下冷 凍保存。
注本發明所用的平平加為上海助劑廠生產，活力為l: 25的工業胰酶為溫江東方酶制 劑廠生產，複合酶皮膠原處理劑A和複合酶皮膠原處理劑B由成都佰樂金生物科技有限公司 生產，其餘的化學試劑均為市場購買。
權利要求
1.一種純化豬皮的製作方法，其特徵在於該純化方法含有以下步驟(1)機械去肉採用去肉機去肉，清除豬皮的皮下組織層；(2)第一次清洗選取健康豬皮100重量份裝入轉鼓中，加水調節液比2.0-4.0，轉動30-120min，控幹廢液，加水調節液比2.0-4.0，轉動30-120min，控幹廢液；(3)第二次清洗加水調節液比2.0-4.0，轉動30-120min，控幹廢液，加水調節液比2.0-4.0，轉動30-120min，控幹廢液；(4)第三次清洗加溫度為35-45℃的熱水，調節液比2.0-4.0，浴溫30-35℃，加入平平加0.2-3.0重量份，轉動30-180min，控幹廢液；(5)水洗加水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min；(6)浸水加水調節液比2.0-6.0，加入平平加0.2-3.0重量份、食鹽1.0-6.0重量份，轉動30-180min，停鼓過夜，次晨轉動30-60min，控幹廢液；(7)水洗加水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min；(8)第一次脫脂加入40-45℃的熱水調節液比1.0-4.0，浴溫為30-38℃，加入平平加0.3-2.0重量份，洗衣粉0.5-3.0重量份，轉動60-180min，控幹廢液；(9)第二次脫脂加入40-45℃的熱水調節液比1.0-4.0，浴溫為30-38℃，加入平平加0.3-3.0重量份，洗衣粉0.5-3.0重量份，轉動60-180min，控幹廢液；(10)第三次脫脂加入40-45℃的熱水調節液比1.0-4.0，浴溫為30-38℃，加入平平加0.3-3.0重量份，洗衣粉0.5-3.0重量份，轉動60-180min，控幹廢液；(11)水洗加溫度為35-40℃的熱水，調節液比2.0-6.0，悶水洗15-30min，然後加溫度為35-40℃的熱水，調節液比2.0-6.0，悶水洗10-20min，再加溫度為35-40℃的熱水，調節液比2.0-6.0，悶水洗10-20min，最後，加水調節液比2.0-6.0，流水洗30min，將皮出鼓，瀝水3h；(12)塗酶先稱取複合酶皮膠原處理劑A 3.0-6.0重量份，複合酶皮膠原處理劑B2.0-4.0重量份，水1.0-4.0重量份，調成糊狀，然後，將皮肉麵朝上，平鋪於工作檯上，用鬃刷蘸酶糊，均勻塗於皮的肉麵上，塗好後，沿皮的脊背線對摺，堆置30-72h；(13)手工推毛用推毛板推去鬆動的針毛和絨毛，儘量推淨；(14)水洗加常溫水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min，然後加水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min，再加水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min，控幹廢液，將皮出鼓；(15)浸鹼加入純度為60％的Na2S 1.0-4.0重量份，濃度為30％的NaOH 0.3-1.0重量份，水10-15重量份，轉動20-40min，再將皮放進轉鼓中，轉動30-120min，檢查脫毛情況，毛脫淨後，擴大液比至2.0-5.0，轉動120min，停鼓過夜，次日晨，轉動30-60min，控幹廢液；(16)水洗加水調節液比2.0-6.0，悶水洗10-30min，控幹廢液，然後，加水調節液比2.0-6.0，流水洗10-30min，控幹廢液；(17)第一次脫鹼加溫度為38-42℃的熱水調節液比1.0-4.0，浴溫30-35℃，加入氯化銨1.0-5.0重量份，平平加0.3-1.5重量份，轉動30-90min；(18)水洗加水調節液比2.0-6.0，流水洗30-90min，控幹廢液，再加水調節液比2.0-6.0，流水洗30-90min，控幹廢液；(19)第二次脫鹼加溫度為38-42℃的熱水調節液比1.0-4.0，浴溫30-35℃，加入氯化銨1.0-5.0重量份，平平加0.3-1.5重量份，轉動30-90min；(20)水洗加常溫水調節液比2.0-6.0，流水洗30-90min，控幹廢液，再加常溫水調節液比2.0-6.0，流水洗30-90min，控幹廢液；(21)酶消化加入溫度為40-44℃的熱水，預熱，調節液比至1.0-3.0，浴溫為30-36℃，然後，加入活力為1∶25的工業胰酶0.10-1.20重量份，平平加0.3-3.0重量份，轉動60-180min後，停鼓過夜，次日轉動15-45min，控幹廢液；(22)清洗加常溫純水調節液比2.0-5.0，加入氯化鈉2.0-5.0重量份，轉動90-180min，控幹廢液，加常溫純水調節液比2.0-5.0，加入氯化鈉2.0-5.0重量份，轉動90-180min，控幹廢液，加常溫純水調節液比2.0-5.0，加入氯化鈉2.0-5.0重量份，轉動90-180min，控幹廢液，即得到純化豬皮；(23)滾鹽加入氯化鈉5.0-20.0重量份，轉動20-60min，出鼓；(24)分割首先將純化豬皮裁成矩形，然後再分割成10.0-30.0cm×10.0-30.0cm的小塊矩形；(25)裝袋、冷凍保存將裝袋的純化豬皮放入凍庫，在溫度-5--15℃的條件下冷凍保存。
2.按照權利要求1所述一種純化豬皮的製作方法，其特徵在於轉鼓為懸掛式木轉鼓或不 鏽鋼轉鼓。
全文摘要
本發明公開了一種純化豬皮的製作方法，該製作方法是選用健康的新鮮豬皮為原料，在維持豬皮的三維構造不變的前提下，對豬皮進行反覆清洗，並採用多種酶製劑和鹼性材料交替處理，除去豬皮中的非膠原成分和小分子物質，得到具有良好生物相容性和生物活性的純化豬皮。這種純化豬皮可以用於提取醫用膠原、製備組織工程支架材料和修復與重建材料等。
文檔編號A61L27/00GK101608245SQ20091005983
公開日2009年12月23日 申請日期2009年6月30日 優先權日2009年6月30日
發明者但衛華, 但年華, 廖隆理, 睿 曾, 李志強, 海 林, 王坤餘, 敏 陳 申請人:四川大學