一種可促口服吸收的積雪草酸脂質納米粒及其製備方法

2023-09-16 02:02:50 2

專利名稱：一種可促口服吸收的積雪草酸脂質納米粒及其製備方法
技術領域：
本發明涉及藥物製劑技術領域，尤其涉及一種能夠增加腸道藥物吸收，提高口服生物利用度的積雪草酸脂質納米粒及其製備方法。
背景技術：
積雪草為傘形科植物積雪草Centella asiatica (L. ) Urban.的乾燥全草或帶根全草，具有清熱利溼、解毒消腫之功效(張蕾磊，等.積雪草化學成分研究[J]·中草藥，2005,36 (12) :1761-1763.)。積雪草酸(Asiatic Acid)是積雪草有效成分之一，屬五環三萜酸，具有治療皮膚創傷以及抗肝、腎纖維化等作用，常用於與美化皮膚相關的疤痕治療(陳軍，等.積雪草酸及其衍生物的生物活性研究概況[J].中草藥，2006，37 (3) :458-460.)。積雪草酸的胃腸道吸收差，口服生物利用度低。文獻報導，大鼠口服積雪草酸(1. 25mg)，血藥峰濃度(Cmax)遠遠低於靜脈注射(約為1/60)，人口服積雪草酸(12mg)後，Cmax僅為0.0981^.11^,0-1211曲線下面積(AUC0_12h)為 O. 61 ±0. 25 μ g · h · mL 1 (Chasseaud L. F. , et al. The metabolismof Asiatic Acid, Madecassic Acid and Asiaticoside in the Rat[J]. DrugRes. , 1971, 21:1379-1384 ；Rush ff. R.,et al.The comparative steady-statebioavailability of the active ingredients of madecassol[J]. Eur. J. Drug Metab.Pharmacokinet. , 1993, 18(4):323-326.)。積雪草酸儘管具有良好的生物活性，但在水中溶解度極小，腸道吸收較差，這給口服給藥帶來一定困難。人們一直致力於改善積雪草酸的腸道吸收，如劉英等通過將積雪草酸經化學結構修飾製成水溶性積雪草酸氨基丁三醇鹽，再製成微乳、微乳軟膠囊、氣霧劑、硬膠囊及片劑等製劑，雖然積雪草酸的口服生物利用度有所增加(專利申請號CN102755333 A ；CN 102755328 A ；CN 102755329 A ；CN 102755331 A ；CN 102755332 A)，但由於積雪草酸的化學結 構已經改變，安全性和療效是否變化有待進一步確證。現代製劑技術可以改善藥物的口服吸收，張大平等採用自乳化技術，得到積雪草酸乳滴，灌胃給藥後，血藥濃度較原料組明顯提高(專利申請號CN 102784096 A)，但處方中需加入大量的乳化劑、助乳化劑及抗氧化劑等輔料，可能存在安全隱患，而且自乳化所形成的乳滴大小易受胃腸道條件的影響，從而影響吸收。脂質納米粒是以脂質材料為載體經一定的製劑工藝構建而成,如固體脂質納米粒(Solid Lipid Nanoparticles, SLN)以及改變脂質材料中液態脂質的比例所製成的納米結構脂質載體(Nanostructured Lipid Carriers, NLC)。該類脂質納米粒主要具有以下特點1) 口服後，在胃腸道可經淋巴通道吸收進入體循環，該吸收旁路途徑可避免肝臟的首過效應，減少藥物損失(Hussain N. , et al. Recent advances in the understanding ofuptake of microparticulates across the gastrointestinal lymphatics[J]. Adv.Drug Deliv. Rev.，2001，50 :107-142.)。2)由於脂質納米粒的結構與細胞膜結構的相似性，具有增強細胞膜通透的能力。3)帶負電荷的納米粒，具有良好的生物粘附特性(Jung T. , et al. Biodegradable nanoparticles for oral delivery of peptides:1sthere a role for polymers to affect mucosal uptake [J]. Eur. J. Pharm.Biopharm.，2000, 50 (I) : 147-160.)，可延長載藥粒子在吸收部位的停留時間，增加吸收，提高生物利用度。經檢索，目前尚無積雪草酸脂質納米粒改善腸道吸收的專利申請或文獻報導。

發明內容
本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種積雪草酸脂質納米粒及其製備方法。為達到上述目的，本發明採用如下技術方案一種可促進口服吸收的積雪草酸脂質納米粒，所述納米粒包裹的藥物為積雪草酸，載體為脂質材料，所述脂質材料包括固態脂質和液態脂質，固態脂質和液態脂質的質量配比為80 100:0 20 ;固態脂質選用單硬脂酸甘油酯或硬脂酸，液態脂質選用油酸或三油酸甘油酯；所獲得的脂質納米粒粒徑小於700nm，包封率為40 90%，載藥量為7 11%。所述的積雪草酸脂質納米粒通過以下過程製備得到
(1)以無水乙醇為溶劑，加入脂質材料和色譜純度大於90%積雪草酸，在(70±2)°〇下水浴加熱溶解，並作為有機相，其中積雪草酸與脂質材料質量比為1:7 11，脂質材料的溶液濃度為7 llmg/mL ；
(2)以水為分散相，加熱至(70±2)V ；
(3)在400r/min機械攪拌下，將有機相注入至分散相中，無水乙醇與水的體積比為I 10 ;繼續攪拌5min，得帶乳光的濁液。該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節pH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為0. 001g/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。本發明的有益效果是簡單、易行、安全有效，是本發明的特點。「簡單」指處方組成簡單；「易行」指製備工藝非常簡單，將有機相(無水乙醇)加到水相即可，無需高速攪拌或高壓處理，工藝的重現性好；「安全有效」:指處方組成安全，不添加乳化劑和有毒溶劑，納米粒的載體與腸道上皮細胞同為脂質成分，因此容易透過腸道而被吸收。本發明所得積雪草酸脂質納米粒粒徑小於700nm，包封率為40 90%，載藥量為7 11%，而且可有效增加腸道藥物吸收，提高口服生物利用度。


圖1為實施例2中積雪草酸脂質納米粒透射電鏡照片；
圖2為實施例5中積雪草酸脂質納米粒透射電鏡照片；
圖3為積雪草酸脂質納米粒大鼠在體腸灌流模型中藥物吸收百分率曲線；
圖4為積雪草酸脂質納米粒大鼠灌胃後膽汁積雪草酸排洩量-時間曲線。
具體實施方式
本發明可促進口服吸收的積雪草酸脂質納米粒包裹的藥物為積雪草酸，載體為脂質材料，積雪草酸與脂質材料質量比為1:7 11，所述脂質材料包括固態脂質和液態脂質，固態脂質和液態脂質的質量配比為80 100:0 20 ;固態脂質選用單硬脂酸甘油酯或硬脂酸，液態脂質選用油酸或三油酸甘油酯；所獲得的脂質納米粒粒徑小於700nm，包封率為40 90%，載藥量為7 11%。上述積雪草酸脂質納米粒製備方法，包括以下過程1.以無水乙醇為溶劑，加入脂質材料和積雪草酸(色譜純度大於90%)，在(70±2)°C下水浴加熱溶解，作為有機相，其中積雪草酸與脂質材料質量比為1:7 11，脂質材料的溶液濃度為7 llmg/mL。2.以水為分散相，加熱至(70±2) °C。3.在400r/min機械攪拌下，將有機相注入至分散相中，無水乙醇與水的體積比為I 10 ;繼續攪拌5min，得帶乳光的濁液。該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節pH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為O. 001g/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。下面根據附圖和實施例詳細描述本發明，本發明的目的和效果將變得更加明顯。實施例1 :積雪草酸單硬脂酸甘油酯脂質納米粒的製備(主藥與脂質材料質量比為 1:7)
精密稱取積雪草酸5mg和單硬脂酸甘油酯(市售，純度> 90%)35mg，(70±2) °C水浴加熱下使溶於5mL無水乙醇，並作為有機相，脂質材料的溶液濃度為7mg/mL。以水為分散相，加熱至(70±2)°C。400rpm機械攪拌下,將有機相注入至50mL分散相中，繼續攪拌5min,得帶乳光的濁液。該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節PH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為O. OOlg/mL的泊洛沙姆188的水溶液 中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。經測定,該脂質納米粒粒徑為214±35nm (馬爾文Zetaszier Nano-S900)； 藥物包封率為44.1 ±4. 8% (包封率=納米粒中的藥物量(mg) /投藥量(mg) X 100%)； 載藥量為9. 8±0. 5% (載藥量=納米粒中的藥物量(mg) /納米粒總重(凍乾粉末，
mg) X 100%)ο實施例2 :積雪草酸單硬脂酸甘油酯脂質納米粒的製備(主藥與脂質材料質量比為 19)
精密稱取積雪草酸5mg和單硬脂酸甘油酯(市售，純度> 90%) 45mg，(70±2) °C水浴加熱下使溶於5mL無水乙醇，並作為有機相，脂質材料的溶液濃度為9mg/mL。以水為分散相,加熱至(70±2) °C,400rpm機械攪拌下,將有機相注入至50mL分散相中，繼續攪拌5min，得帶乳光的濁液。該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節pH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為O. 001g/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。經測定,該脂質納米粒粒徑為208±24nm (馬爾文Zetaszier Nano-S900)； 藥物包封率為67. 6±5. 5% (包封率=納米粒中的藥物量(mg) /投藥量(mg) X 100%)； 載藥量為8. 6±0. 5% (載藥量=納米粒中的藥物量(mg) /納米粒總重(凍乾粉末，
mg) X 100%)ο實施例3 :積雪草酸單硬脂酸甘油酯脂質納米粒的製備(主藥與脂質材料質量比為 1:11)精密稱取積雪草酸5mg和單硬脂酸甘油酯(市售，純度> 90%) 55mg, (70±2) °C水浴加熱下使溶於5mL無水乙醇，並作為有機相，脂質材料的溶液濃度為llmg/mL。以水為分散相，加熱至(70±2) °C。400rpm機械攪拌下，將有機相注入至50mL分散相中，繼續攪拌5min，得帶乳光的濁液。該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節pH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為O. 001g/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。經測定,該脂質納米粒粒徑為217±26nm (馬爾文Zetaszier Nano-S900)；藥物包封率為53.1 ±3. 9% (包封率=納米粒中的藥物量(mg) /投藥量(mg) X 100%)；載藥量為7. 1±0. 9% (載藥量=納米粒中的藥物量(mg) /納米粒總重(凍乾粉末，
mg) X 100%)ο實施例4 :積雪草酸硬脂酸脂質納米粒的製備(主藥與脂質材料質量比為1:9)精密稱取積雪草酸5mg和硬脂酸(市售，純度> 90%) 45mg, (70±2) °C水浴加熱下使
溶於5mL無水乙醇,並作為有機相,脂質材料的溶液濃度為9mg/mL。以水為分散相,加熱至(70±2) °C。400rpm機械攪拌下，將有機相注入至50mL分散相中，繼續攪拌5min，得帶乳光的濁液。該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節PH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為O. 001g/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。經測定,該脂質納米粒粒徑為624±29nm (馬爾文Zetaszier Nano_S900);藥物包封率為53. 6±7. 9% (包封率=納米粒中的藥物量(mg) /投藥量(mg) X 100%)；載藥量為7. 5±0. 5% (載藥量=納米粒中的藥物量(mg) /納米粒總重(凍乾粉末，
mg) X 100%)ο實施例5 :積雪草酸單硬脂酸甘油酯-油酸脂質納米粒的製備(主藥與脂質材料質量比為1:9)
精密稱取積雪草酸5mg、單硬脂酸甘油酯(市售，純度> 90%) 36mg和液態脂質油酸9mg(市售，純度> 95% ;油酸佔脂質材料的質量比為20%)，(70±2) °C水浴加熱下使溶於5mL無水乙醇，並作為有機相，脂質材料的溶液濃度為9mg/mL。以水為分散相，加熱至(70±2)°C。400rpm機械攪拌下,將有機相注入至50mL分散相中，繼續攪拌5min,得帶乳光的池液。該池液放冷至室溫後，用鹽酸調節PH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為O. 001g/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。經測定,該脂質納米粒粒徑為310± Ilnm (馬爾文Zetaszier Nano-S900)；藥物包封率為77. 9±4. 8% (包封率=納米粒中的藥物量(mg)/投藥量(mg) X 100%)；載藥量為8. 8±0. 7% (載藥量=納米粒中的藥物量(mg) /納米粒總重(凍乾粉末,
mg) X 100%)ο實施例6 :積雪草酸單硬脂酸甘油酯-三油酸甘油酯脂質納米粒的製備(主藥與脂質材料質量比為1:9)
精密稱取積雪草酸5mg、單硬脂酸甘油酯(市售，純度> 90%) 36mg和液態脂質三油酸甘油酯9mg (市售，純度> 95%;三油酸甘油酯佔脂質材料的質量比為20%)，(70±2) °〇水浴加熱下使溶於5mL無水乙醇，並作為有機相，脂質材料的溶液濃度為9mg/mL。以水為分散相，加熱至(70±2) °C。400rpm機械攪拌下，將有機相注入至50mL分散相中，繼續攪拌5min，得帶乳光的濁液。該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節pH至1. 2，離心，沉澱用少量去離子水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒。該納米粒可分散於質量體積比為
O.OOlg/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。經測定,該脂質納米粒粒徑為293±9nm (馬爾文Zetaszier Nano_S900);
藥物包封率為63. 3±5. 7% (包封率=納米粒中的藥物量(mg) /投藥量(mg) X 100%)； 載藥量為8. 2±0. 4% (載藥量=納米粒中的藥物量(mg) /納米粒總重(凍乾粉末，
mg) X 100%)ο實施例7 :脂質納米粒的大鼠在體腸灌流模型中藥物吸收考察
按文獻方法配製濃度為20 μ g/ml的酚紅溶液(吳佩盛，等.大鼠腸道對左旋延胡索乙素及其消旋體的吸收差異研究[J].藥學學報，2007，42 (5) :534-537.)。精密移取實施例2和實施例5的脂質納米粒分散液適量，再分散於酚紅溶液中，分別配製積雪草酸濃度為30 μ g/mL的納米粒腸灌流液，同時以積雪草酸原料作為對照組(藥液濃度30μ g/mL，酚紅溶液配製)，37°C下放置備用。採用大鼠在體單向灌流吸收模型，考察大鼠小腸段的吸收情況。即取自然飲水條件下禁食過夜的SD大鼠，體重(200 ± 20 )g，隨機分成3組，每組5隻。腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉，背部固定。沿腹中線打開腹腔，小心分離出小腸段。於小腸段兩端切口後，用預熱至37 1生理鹽水將腸內容物衝洗乾淨，再用空氣將生理鹽水排空，插管並結紮，接恆流泵。用已配製的腸灌流液(預熱至37 °0以1.0 mL/min的流速衝洗50 min後，將流速調整為O. 2mL/min，開始計時，分別 於15 30、30 45、45 60、60 75、75 90、90 105、105 120,120 135分鐘收集灌流液，分別測定各時間點的積雪草酸和酚紅的濃度，並計算積雪草酸原料及其脂質納米粒在各時間點的藥物吸收百分率(吸收百分率=吸收量
/起始量X 100%)。通過腸腔有效吸收係數0°e//)、吸收速率常數Gf3)和藥物吸收劑量分數(/；)評價藥物的吸收特性(表I)。結果顯示，兩種脂質納米粒的和均與原料存在顯著差異(P < O. 05)，所製備的脂質納米粒能明顯提高腸道中藥物的透過率。表1:不同脂質納米粒大鼠小腸的和(n=5)
權利要求
1.一種可促進口服吸收的積雪草酸脂質納米粒，其特徵在於，所述納米粒包裹的藥物為積雪草酸，載體為脂質材料，所述脂質材料包括固態脂質和液態脂質，固態脂質和液態脂質的質量配比為80 100:0 20 ;固態脂質選用單硬脂酸甘油酯或硬脂酸，液態脂質選用油酸或三油酸甘油酯；所獲得的脂質納米粒粒徑小於700nm,包封率為40 90%,載藥量為 7 11%。
2.—種權利要求1所述的積雪草酸脂質納米粒的製備方法，其特徵在於，該方法包括以下步驟(1)以無水乙醇為溶劑，加入脂質材料和色譜純度大於90%積雪草酸，在(70±2)°〇下水浴加熱溶解，並作為有機相，其中積雪草酸與脂質材料質量比為1:7 11，脂質材料的溶液濃度為7 llmg/mL ；(2)以水為分散相，加熱至(70±2)V ；(3)在400r/min機械攪拌下，將有機相注入至分散相中，無水乙醇與水的體積比為 1:10 ;繼續攪拌5min，得帶乳光的濁液；該濁液放冷至室溫後，用鹽酸調節pH至1. 2，離心， 沉澱用少量水洗滌，再離心，傾棄上層液體得積雪草酸脂質納米粒；該納米粒可分散於質量體積比為O. 001g/mL的泊洛沙姆188的水溶液中，得積雪草酸的脂質納米粒分散液。
全文摘要
本發明公開了一種可促口服吸收的積雪草酸脂質納米粒及其製備方法，本發明以脂質材料為載體，積雪草酸為主藥，通過溶劑擴散法製備得到。所獲得的脂質納米粒粒徑小於700nm，包封率為40～90%，載藥量為7～11%。該納米粒可增加腸道藥物吸收，提高口服生物利用度。
文檔編號A61P13/12GK103040791SQ20131002061
公開日2013年4月17日 申請日期2013年1月18日 優先權日2013年1月18日
發明者王勝浩, 張雅雯, 尹麗娜, 梁澤華, 馮霞 申請人:浙江省醫學科學院