用趨化因子的組合活化祖細胞/幹細胞的製作方法

2023-09-14 12:45:20 2

專利名稱：用趨化因子的組合活化祖細胞/幹細胞的製作方法
技術領域：
本發明屬於治療和藥物化學領域。更具體的，本發明涉及採用組合療法活化(mobilize)祖細胞/幹細胞的方法。
背景技術：
血細胞在維持動物，包括人類健康和生存方面發揮重要作用。白血細胞包括噬中性粒細胞、巨噬細胞、嗜曙紅細胞和嗜鹼細胞/肥大細胞以及免疫系統的B和T細胞。白血細胞通過造血系統經集落刺激因子(CSF)和各種細胞因子對造血組織中幹細胞和祖細胞的作用而不斷被更新。編碼這些生長因子的核苷酸序列已經被克隆和測序。其中了解得最清楚的可能是粒細胞集落刺激因子(G-CSF)，它被證明可通過刺激白血細胞和祖細胞產生(外周血幹細胞活化)而抵消化學治療的負面作用。關於這種因子造血作用的討論可在，例如，美國專利5,582,823中找到，在此將其併入以供參考。
已報導其它一些因子也可升高人類和動物對象的白血細胞和祖細胞。這些試劑包括粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、白細胞介素-1(IL-1)、白細胞介素-3(IL-3)、白細胞介素-8(IL-8)、PIXY-321(GM-CSF/IL-3融合蛋白)、巨噬細胞炎性蛋白、幹細胞因子(SCF)、血小板生成素、flt-3、髓細胞生成蛋白(myelopoietin)、抗-VLA4抗體和生長相關癌基因(GRO)，它們可單獨使用或聯合使用(Dale，D.等，Am.J.ofHematol.(1998)577-15；Rosenfeld，C.等，Bone Marrow Transplantation(1997)17179-183；Pruijt，J.等，Cur.Op.in Hematol.(1999)6152-158；Broxmeyer，H.等，Exp.Hematol.(1995)23335-340；Broxmeyer等，Blood Cell，Molecules and Diseases(1998)2414-30；Glaspy，J.等，Cancer Chemother.Pharmacol.(1996)38(增刊)S53-S57；Vadhan-Raj，S.等，Ann.Intern.Med.(1997)126673-81；King，A.等，Blood(2001)971534-1542；Glaspy，J.等，Blood(1997)902939-2951)。
此外，King等(King，A.等，Blood(2001)971534-1542)已經證實，人趨化因子GROβ的N-末端4-胺基酸截短重組形式(也稱為SB-251353或Garnocestim)在一起給予SB-251353和G-CSF之後可活化祖細胞，在研究期間中性白細胞和血小板被活化。WO 94/29341；WO 97/15594；WO 97/15595；WO 99/26645；WO 02/02132；美國專利6080398；美國專利6399053；和美國專利6447766也討論了諸如SB-251353、GROα、GROβ和GROγ之類的趨化因子，所有這些專利通過引用納入本文。
SB-251353是一種鹼性肝素結合蛋白，其分子量約為7500Da，並且是一種特異性CXCR2受體激動劑(King，A.等，J.Immunol.(2000)1643774-3782，Hepburn，T.等，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics，(2001)298886-893)。除GROβ外，通過CXCR2受體發揮作用的其它趨化因子包括GROα、GROγ、GCP-2(粒細胞趨化蛋白(chemo-attractant protein)2)、IL-8、NAP-2(中性白細胞激活肽2)、ENA-78(上皮細胞衍生的中性白細胞激活蛋白78)和MGSA。
趨化因子受體CXCR4及其天然配體基質細胞衍生因子-1(SDF-1)在血細胞的發育和成熟過程中似乎非常重要，其中，成熟的血細胞衍生自存在於包括骨髓在內的特定造血組織中的造血前體細胞(祖細胞)細胞和幹細胞(為回顧該內容可參見Maekawa，T.等，Internal Med.(2000)3990-100；Nagasawa，T.等，Int.J.Hematol.(2000)72408-411)。報告證實，CXCR4或SDF-1敲除小鼠顯示出造血缺陷(Ma，Q.等，Proc.Natl.Acad.Sci USA(1998)959448-9453；Tachibana，K.等，Nature(1998)393591-594；Zou，Y-R.等，Nature(1998)393595-599)。還已知CD34+祖細胞表達CXCR4並需要骨髓基質細胞產生的SDF-1以進行趨化(chemoattraction)和移植(Peled，A.等，Science(1999)283845-848)，SDF-1在體外對CD34+細胞(Aiuti，A.等，J.Exp.Med.(1997)185111-120；Viardot，A等，Ann.Hematol.(1998)77194-197)和祖細胞/幹細胞(Jo，D-Y.等，J.Clin.Invest.(2000)105101-111)都有趨化作用。SDF-1對於其它一些更加定型的祖細胞和包括T-淋巴細胞和單核細胞(Bleul，C等，J.Exp.Med.(1996)1841101-1109)、原B淋巴細胞和前B淋巴細胞(Fedyk，E.R.等，J.Leukoc.Biol.(1999)66667-673；Ma，Q.等，Immunity(1999)10463-471)和巨核細胞(Hodohara，K.等，Blood(2000)95769-775；Riviere，C等，Blood(1999)951511-1523；Majka，M.等，Blood(2000)964142-4151；Gear，A.等，Blood(2001)97937-945；Abi-Younes，S.等，Ore.Res.(2000)86131-138)在內的成熟血細胞也是一種重要的趨化物，它通過CXCR4受體發生信號傳導。
因此總之，SDF-1似乎能夠控制帶有CXCR4受體的細胞的定位和分化，無論這些細胞是幹細胞(即CD34+細胞)或祖細胞(可以響應特定刺激形成特定集落類型；可以是CD34+或CD34-)或是更加分化的細胞。
最近，相當多的注意力集中於用於自體幹細胞移植的外周血祖細胞群中活化的CD34+細胞的數目。幹細胞移植可以是同種異體的(此時細胞移植自健康供體，通常是同胞)或是自體的(此時細胞收集自患者並在化療後重新輸入)。在收集幹細胞的典型過程中，患者或供體連續接受4或5天G-CSF日劑量以刺激幹細胞產生，然後進行血漿分離置換法(apheresis)直到達到細胞的目標水平。在血漿分離置換法期間也連續使用G-CSF。通常顯著數量的患者需要多次血漿分離置換過程以達到目標細胞水平。CD34+群體被認為是主要負責改善化學治療後恢復時間的成分，這種細胞更可能負責長期移植和造血作用的恢復(Croop，J.M.等，Bone Marrow Transplantation(2000)261271-1279)。CD34+細胞再移植(re-engraft)的機制可能是由於SDF-1對CXCR4表達細胞的趨化作用(Voermans，C，Blood，2001，97，799-804；Ponomaryov，T.等，J.Clin.Invest.(2000)1061331-1339)。最近，成人造血幹細胞顯示能夠恢復小鼠受損的心臟組織(Jackson，K.等，J.Clin.Invest.(2001)1071395-1402；Kocher，A.等，Nature Med.(2001)7430-436)。
因此，可假定CXCR4受體對控制細胞定位和分化是非常重要的。化合物AMD3100，即1，1[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷，是一種已知的本身即可活化祖細胞的CXCR4拮抗劑(參見，例如，Hubel，K.等，Supportive CancerTherapy(2004)1165-172，引用了De Clercq，E.等，Nat.Rev.Drug Discov.(2003)2581-587。此外，PCT公開WO 00/45814公開了包括AMD3100在內的各種可以升高白細胞計數的環狀多胺化合物。PCT公開WO 03/011277還顯示，包括AMD3100在內的這種化合物可以活化祖細胞/幹細胞；還提到了AMD3100與各種其它因子的組合，所述其它因子包括GM-CSF、IL-1、IL-3、IL-8、PIXY-321、巨噬細胞炎性蛋白、皮膚細胞因子、血小板生成素、生長相關癌基因或化學療法，或者其它活性成分(通常諸如抗生素、維生素、草本提取物、抗炎藥、葡萄糖、解熱藥、鎮痛藥)。
已經發現CXCR4拮抗劑與GROβ(包括GROβ的修飾形式)的特定組合對於活化祖細胞特別有效。
應用上述文獻不是要承認上述內容為相關的現有技術。所有關於這些文件的數據的聲明或關於內容的表述是基於申請人可獲得的信息，且不對這些文件的數據或內容的正確性負責。此外，本申請提到的所有文獻在此全文併入以供參考。

發明內容
本發明涉及治療動物對象，尤其是獸類和人類對象，以增加祖細胞和/或幹細胞數目的方法。所述祖細胞和/或幹細胞可被收穫並用於細胞移植。本發明的方法採用CXCR4受體抑制劑(如下文所述的某些多胺)和至少一種形式的GROβ(即GROβ本身或其修飾形式)的組合。該方法被用於幹細胞移植、組織修復和涉及需要體內刺激造血作用的情況。
文中，術語「一個」、「一種」和「這種」包括單數和複數形式，上下文有明確說明除外。因此，例如，當提及一種CXCR4拮抗劑時包括一種或多種CXCR4拮抗劑。
因此，本發明一方面涉及升高對象中的祖細胞和/或幹細胞的方法，該方法包括給予所述對象一定量抑制CXCR4受體的化合物，如下述式(1)的化合物，與GROβ及其修飾形式中的一種的組合。在一個實施方案中，骨髓細胞被活化以進行心肌修復。其它實施方案包括離體(ex vivo)或者體外活化細胞，隨後再移植入自體或同種異體對象。
因此，本發明的方法還包括用CXCR4抑制劑和GROβ或其修飾形式的組合離體處理細胞群，並將處理過的群體引入相容的對象以升高外周血中幹細胞和/或祖細胞的數量。也可升高骨髓中白細胞的數量。
另一方面，本發明涉及含有CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白的組合產品，其中，所述組合能夠升高外周血或骨髓中的祖細胞和/或幹細胞數目。所述組合產品可以是混合物、溶液或藥物組合物。另一方面，本發明涉及含有CXCR4抑制劑和GROβ趨化因子的藥物組合物以用於有效升高動物對象或者離體培養物中的祖細胞和/或幹細胞。
此外，本發明提供了含有CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白的組合產品或其藥物組合物在升高外周血或骨髓中的祖細胞和/或幹細胞數目中的應用。本發明還提供了含有CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白的組合產品或其藥物組合物在製造用於升高外周血或骨髓中的祖細胞和/或幹細胞數目的藥物中的應用。此外，本發明涉及用於升高外周血或骨髓中的祖細胞和/或幹細胞數目的含有CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白的化合物或藥物。
驚奇的是，CXCR4拮抗劑，如式(1)的化合物，與趨化因子GROβ，包括其修飾形式，的組合能夠在較短時間—少於1小時內有效地顯著活化祖細胞和幹細胞，而單獨使用任何一種試劑則需要數小時或數天。
用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有式(1)的化合物Z-連接基-Z1(1)其中，Z是含有9-32個環成員的任選取代的環狀多胺，其中有2-8個是氮原子，所述氮原子被至少2個碳原子相互分隔，且其中所述雜環可任意含有氮原子以外的其它雜原子和/或可以和其它的環系統稠合；或Z具有式 其中，A包含含有至少一個N的單環或雙環稠環系統，且B是H或有1-20個原子的有機部分；Z』可以按上面Z定義的形式，或者可具有式-N(R)-(CR2)n-X其中，各R獨立為H或直鏈、支鏈或環狀烷基(1-6C)，n是1或2，和X是芳環，包括雜芳環，或是硫醇；或其中，Z』可以是含氮雜環或NR2，其中各R如上面的定義；「連接基」代表鍵、亞烷基(1-6C)、或者可包括芳基、稠芳基、包含在亞烷基鏈中的氧原子，或者可包含酮基或氮原子或硫原子。
CXCR4拮抗劑優選是具有上述式(1)的化合物。本發明還涉及升高對象中祖細胞和/或幹細胞的方法，該方法包括給予所述對象一定量的至少一種抑制CXCR4受體的化合物，如下述式(1A)-(1F)、(2A)-(2B)、(3)、(3A)-(3C)、(4)、(4A)-(4C)、(5)、(6)、(6A)-(6D)、(7)和(8)的化合物，與GROβ及其修飾形式中至少一種的組合。
本發明的實施方式本發明涉及CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白的特定組合，以活化祖細胞和/或幹細胞或者增強祖細胞和/或幹細胞的增殖。該組合能夠在相比單獨使用任一組分和相比之前披露的組合短得多的時間內實現這種刺激。幹細胞和/或祖細胞的活化可用於下文進一步描述的多種情況。
該組合可直接給予對象或者可用於處理離體培養的細胞，然後可將處理的細胞給予對象，所述對象通常是得到該細胞的對象(自體移植)或是密切相關的對象(同種異體移植)。該組合的各必需成分可作為單一類別成員提供或者可作為類別各成員的混合物或其它組合提供。該組合的各組分(實際上是代表單一類別的亞組合的各成員)可同時通過相同途徑單獨給予，或者同時通過不同途徑單獨給予，或者在不同時刻通過相同或不同途徑給予該組合中的任何其它組分。因此，例如，如果使用兩種不同CXCR4拮抗劑，則可同時給予這兩種拮抗劑(但不一定要這樣)；可靜脈內給予這兩種拮抗劑(但不一定要這樣)。類似地，如果使用兩種或多種GROβ蛋白，則可對這些蛋白質採用剛才描述過的各種給藥類型。在給予CXCR4拮抗劑類的成員和GROβ蛋白類的成員時也可這麼做。GROβ蛋白和CXCR4拮抗劑的組合也可按照這種可變方法單獨或在同一組合物中給予。
「GROβ蛋白」或「GROβ趨化因子」類別包括GROβ自身以及GROβ的修飾形式。如文中將進一步描述的，這些修飾形式可以是截短的、多聚的(multimerized)、含有胺基酸取代、刪除或插入、或者可含有這些的組合。
CXCR4拮抗劑優選是式(1)的化合物。其它優選的用於本發明方法的CXCR4拮抗劑是下述式(1A)-(1F)、(2A)-(2B)、(3)、(3A)-(3C)、(4)、(4A)-(4C)、(5)、(6)、(6A)-(6D)、(7)and(8)的化合物。
式(1)的化合物通過抑制CXCR4抑制HIV複製，CXCR4是T-熱帶HIV菌株融合和進入必需的共同受體，該化合物還抑制天然配體趨化因子SDF-1誘導的結合和信號傳導。由於不希望局限於任何理論，式(1)的化合物抑制SDF-1與CXCR4結合從而導致幹細胞和/或祖細胞增加。血液中的幹細胞和/或祖細胞增加有助於緩解對骨髓造成不良影響的方案，如導致白細胞減少的方案的影響。這些都是化療和放療的已知副作用。式(1)的化合物還能提高骨髓移植的成功率、加快傷口癒合和燒傷治療，並有助於恢復受損的器官組織。它們還能抵抗在白血病中普遍的細菌感染。如WO03/011277所述，式(1)的化合物可與其它活化因子一起或者單獨用於活化CD34+細胞並通過血漿分離置換法收穫CD34+細胞。收穫的細胞被用於需要幹細胞移植的治療。
文中，術語「祖細胞」是指可響應某種刺激形成分化的造血細胞或骨髓細胞的細胞。可根據樣品中的細胞形成各種類型集落形成單位的能力來判斷祖細胞的存在，例如包括CFU-GM(粒細胞-巨噬細胞集落形成單位)；CFU-GEMM(多潛能集落形成單位)；BFU-E(紅細胞爆裂型集落形成單位)；HPP-CFC(高增殖性潛在集落形成細胞)；或可在培養基中用已知方法獲得的其它類型的分化集落。
文中，「幹」細胞是祖細胞分化較少的形式。通常，這種細胞通常是CD34陽性的。然而，一些幹細胞不含有這種標記。可用螢光激活細胞分選儀(FACS)測定這些CD34+細胞，因此可用這種技術評定它們在樣品中的存在情況。
通常，CD34+細胞僅以低水平在血液中存在，但大量存在於骨髓。而其它類型的細胞，如內皮細胞和肥大細胞也可能表示這種標記，CD34被認為是幹細胞存在的指標。
在一些式(1)的化合物中，Z和Z』是含有9-24個碳的環狀多胺部分，其中包括3-5個氮原子，如U.S.5021409；6001826和5583131所述，所述文獻通過引用納入本文。特別優選的是1，5，9，13-四氮雜環十六烷；1，5，8，11，14-五氮雜環十六烷；1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，5，9-三氮雜環十二烷；1，4，7，10-四氮雜環十二烷等，包括與其它芳環或雜芳環稠合的環狀多胺和/或在環中含有氮原子外的雜原子的環狀多胺。含有稠合的其它環狀系統或一個或多個其它雜原子的環狀多胺的例子描述在美國專利5698546和WO 01/44229，所述文獻通過引用納入本文。同樣優選的有3，7，11，17-四氮雜二環(13.3.1)十七烷-1(17)，13，15-三烯；4，7，10，17-四氮雜二環(13.3.1)十七烷-1(17)，13，15-三烯；1，4，7，10-四氮雜環十四烷；1，4，7-三氮雜環十四烷；和4，7，10-三氮雜二環(13.3.1)十七烷-1(17)，13，15-三烯。
當Z』不是Z中定義的環狀多胺時，其優選的實施方案如美國專利5817807；6756391；6506770；和6667320所述，也通過引用納入本文。
Z具有下式的形式揭示於U.S.6734191；6750348；以及2001年9月17日提交、現在已被授權的申請09/957,682；2001年9月17日提交、現在已被授權的申請09/957,654，所有文獻通過引用納入本文 其中A包括含有至少一個N的單環或雙環的稠環系統，B是H或有1-20個原子的有機部分。
連接基部分的優選形式包括以下這些，其中連接基是鍵，或其中連接基是亞烷基或包括側翼連接有亞烷基，優選亞甲基部分的芳香部分。優選的連接基團包括側翼連接有亞甲基的1，3-亞苯基、2，6-吡啶、3，5-吡啶、2，5-噻吩、4，4』-(2，2』-聯嘧啶)、2，9-(1，10-菲咯啉)等。特別優選的連接基是1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)。
一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(1A)的化合物V-CR2-Ar1-CR2NR-(CR2)x-Ar2(1A)其中，V是9-24元取代的雜環，其含有2-4個任選地被取代的、彼此被2個或多個任選地被取代的碳原子隔開的胺氮原子，且該雜環可任選地包括稠合芳環或雜芳環；且其中(a)所述的雜環含有至少一個O或S，且所述的O或S與任何相鄰的雜原子距離至少2個碳原子，且所述的S任選地被氧化或(b)所述的環中至少一個碳原子被吸電子取代基取代，或(c)(a)和(b)二者；且其中各R分別是H或含有1-6C的直鏈、支鏈或環烷基；x是0-4；Ar1是未取代的或取代的芳族或雜芳族部分；和Ar2是未取代的或取代的芳基或雜環基。
在上述式(1A)中，V含有2-4個N，宜為3-4個N，如果沒有其它雜原子。V的優選環大小為9-18元，更佳地為12-16元。V還可包括稠合的芳環或雜芳環，宜為1，2或1，3或1，4亞苯基或2，6或2，5或2，4或2，3亞吡啶(pyridinylene)。稠合環可以是如2，5或2，6亞嘧啶基(pyrimidinylene)或2，4或2，3-亞吡咯基。
在上式I中，所需的存在於環V至少一個碳原子上的吸電子取代基可以是滷素、硝基、氰基、羧酸基、羧酸酯(含有1-6C醇)或由0-12C胺形成的醯胺、磺酸或亞磺酸、或磺酸或亞磺酸的酯或醯胺、CF3等。優選的吸電子取代基是＝O和滷素。滷素的例子包括氟、氯、溴、碘等，優選氟和氯。
在上述式(1A)中，Ar2是任選取代的雜環基團或芳基。芳基的例子包括但不限於苯、萘、二氫萘和四氫萘。雜環基的例子包括5-6元飽和、部分飽和、或芳族雜環，這些雜環含有1-4個選自氮、氧和硫的雜原子。雜環可以是吡啶、喹啉、異喹啉、咪唑、苯並咪唑、氮雜苯並咪唑、苯並三唑、呋喃、苯並呋喃、噻唑、苯並噻唑、唑、苯並唑、吡咯、吲哚、二氫吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氫喹啉、四氫異喹啉、吡唑、噻吩、異唑、異噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、嗎啉、硫代嗎啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氫吡喃、二氫吡喃、苯並吡喃、二烷、二噻烷、四氫呋喃、四氫噻吩、二氫呋喃、二氫噻吩等。含氮和硫的雜環氧化物也包括在本發明中。
Ar2上的任選取代基包括(1-6C)烷基、(1-6C)鏈烯基、(1-6C)炔基、滷素、硝基、氰基、羧酸、由1-6C醇形成的羧酸酯基、由0-12C胺形成的醯胺基、磺酸、亞磺酸、磺酸或亞磺酸的酯或醯胺、OR、SR、NR2、OCR、OOCR、NRCOR，其中所有R都是氫或直鏈或支鏈(1-6C)烷基、任選取代的芳基或雜環基、CF3等。優選的取代基包括烷基、OR、NR2和滷素。Ar2優選的例子包括苯基、吡啶基、嘧啶基和咪唑基。
在上述式(1A)中，Ar1是5-6元芳族體系，為二價的苯、吡啶、噻吩、嘧啶等。Ar1可以任選地被以下基團取代烷基、烯基、滷素、硝基、氰基、CF3、COOR、CONR2、OCR、OOCR、NRCOR、OR、NR2、SR(其中R是H或1-6C烷基)、磺酸基或磺酸、酯或醯胺等。Ar1的優選例子為亞苯基(尤其是1，3和1，4亞苯基)和亞吡啶基(尤其是2，6亞吡啶基和3，5亞吡啶基)。優選的取代基是烷基、OR、NR2和滷素。
另外，在式(1A)的化合物中，各R基團是氫或1-2C烷基，優選氫。偶合於氮的R基團是氫或1-6C烷基，優選直鏈1-3C烷基，更優選的是H或甲基。在一個實施例中，1、2、3、4、或5個R是甲基或乙基，其餘的R基團是氫。
在一個實施方案中，CXCR4拮抗劑具有下式V-CH2-Ar1-CH2NR-CH2-Ar2其中，V是在式(1A)中定義的雜環，且其中(a)所述雜環被滷素或＝O取代的，或(b)所述雜環含有O或S；或(c)(a)和(b)二者，且其中，Ar1是未取代的1，3或1，4-亞苯基，R是H、甲基或乙基，Ar2是未取代的苯基或吡啶基。x的優選例為0-2和1-2。
雜環V可含有3個N，且雜環中有至少一個碳原子被至少一個氟取代基取代。R部分可獨立為氫或甲基。(CR2)x基團的數目可以是0-4、0-2或1-2。Ar1部分可以是1，3或1，4-亞苯基。Ar2部分可以是苯基或吡啶基。雜環V可以是12-16元雜環，或者可含有O或S作為環原子。雜環V也可含有氧化的硫作為環原子。在一個實施例中，雜環V中有至少一個碳被＝O取代。
式(1A)的化合物以及合成這種化合物的方法描述於WO 01/44229，該文獻通過引用納入本文。式(1A)的化合物、其藥學上可接受的鹽或其金屬絡合物的例子包括但不限於N-[4-(11-氟-1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11，11-二氟-1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(1，4，7-三氮雜環十四烷-2-酮基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；
N-[12-(5-氧雜-1，9-二氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-氧雜-1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫雜-1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫氧(sulfoxo)-1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫氧(sulfono)-1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；或N-[4-(3-碳氧(carboxo)-1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4化合物的例子為具有式(1B)的化合物V-CR1R2-Ar-CR3R4-N(R5)-(CR6R7)x-R8(1B)其中，V是任選取代的1，4，8，11-四氮雜環十四烷基、4，7，10，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基、1，4，7-三氮雜環十四烷基、4，7，10-三氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基、1，7-二氮雜環十四烷基或4，10-二氮雜二環[13.31.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基系統；R1-R7可以相同或不同，並獨立選自氫或直鏈、支鏈或環狀C1-6烷基；R8是吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、噻吩基、硫苯基、氨苄基、哌啶基、嘌呤、哌嗪基、苯基哌嗪基或硫醇；Ar是在一個或多個位置被烷基、芳基、氨基、烷氧基、羥基、滷素、羧基和/或醯胺基任選取代的亞苯基環；和x是1或2。
在上述式(1B)中，V部分可任選被羥基、烷氧基、硫醇、硫烷基、滷素、硝基、羧基、醯氨基、磺酸和/或磷酸酯取代。
式(1B)的化合物、其藥學上可接受的鹽或其金屬絡合物、以及合成這種化合物的方法描述於WO 00/02870，該文獻通過引用納入本文。具有式(1B)的化合物的例子包括但不限於N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙-(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-N-甲基-2-(氨基甲基)吡啶；
N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-4-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-3-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-(2-氨基甲基-5-甲基)吡嗪；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基乙基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)噻吩；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)硫醇；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-氨基苄胺；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-4-氨基苄胺；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-4-(氨基乙基)咪唑；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-苄胺；N-[4-(1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[7-(4，7，10，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[7-(4，7，10-三氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[I-(1，4，7-三氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-[4，7，10，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基]-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-[4，7，10-三氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基]-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-嘌呤；1-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-4-苯基哌嗪；N-[4-(1，7-二氮雜環十四烷基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；和N-[7-(4，10-二氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基)-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶。
再在另一方面，用於本發明方法的CXCR4的例子為具有式(1C)的化合物以及酸加成鹽和金屬絡合物V2-CR9R10-Ar2(1C)其中，V是任選取代的1，4，8，11-四氮雜環十四烷基或4，7，10，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯基系統；
R9和R10可以相同或不同，並獨立選自氫或直鏈、支鏈或環狀C1-6烷基；Ar2是芳環或雜環，各環可在一個或多個位置任選被供電子基或吸電子基和/或芳環和雜環基團以及它們的烷基衍生物取代。
在上述式(1C)中，Ar2可任選被烷基、芳基、氨基、烷氧基、羥基、滷素、羧基和/或醯胺基取代。在具體實施例中，Ar2可任選被烷氧基、烷基或滷素取代。
具有式(1C)的化合物以及該化合物的合成方法描述於WO 00/02870，該文獻通過引用納入本文。具有式(1C)的化合物的例子包括但不限於1-[2，6-二甲氧基吡啶-4-基(亞甲基)]-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1-[2-氯吡啶-4-基(亞甲基)]-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1-[2，6-二甲基吡啶-4-基(亞甲基)]-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1-[2-甲基吡啶-4-基(亞甲基)]-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1-[2，6-二氯吡啶-4-基(亞甲基)]-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1-[2-氯吡啶-5-基(亞甲基)]-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；和7-[4-甲基苯基(亞甲基)]-4，7，10，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯。
再在另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑可例子有具有式(ID)的化合物V--R--A--R』--W(ID)其中，V和W獨立為含有9-32個環成員的環狀多胺，環中有3-8個胺氮氮原子被2個或多個碳原子相互分隔，並有一個或多個芳環或雜芳環與其稠合，當V和W有一個或多個芳族或雜芳族部分與其稠合併且環中有或沒有摻入氮原子之外的其它雜原子時A是芳族或雜芳族部分，或者當V和W的環中摻入有除了氮原子之外的雜原子但沒有一個或多個芳族或雜芳族部分與其稠合時A是芳族或雜芳族部分，R和R』各自為將環狀多胺和A部分分隔開的取代或未取代的亞烷基鏈或含有雜原子的鏈。
在上述式(ID)中，R和R』可以各自為亞甲基。一實施例中，A是1，3-或1，4-亞苯基。另一實施例中，各V和W為未取代的或取代的三環或雙環環系統，環中僅含有碳原子和氮原子。所述環系統之一可以是具有3-6個胺氮原子的10-20元多胺環系統，且該環系統或系統與苄基或吡啶基環系統稠合。
具有式(ID)的化合物以及合成該化合物的方法描述於美國專利5,698,546，該文獻通過引用納入本文。這些化合物包括但不限於
7，7』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙-3，7，11，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯；7，7』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙[15-氯-3，7，11，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯]；7，7』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙[15-甲氧基-3，7，11，17-四氮雜二環[13.3.1]十七烷-1(17)，13，15-三烯]；7，7』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙-3，7，11，17-四氮雜二環[13.3.1]-十七烷-13，16-三烯-15-酮；7，7』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙-4，7，10，17-四氮雜二環[13.3.1]-十七烷-1(17)，13，15-三烯；8，8』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙-4，8，12，19-四氮雜二環[15.3.1]十九烷-1(19)，15，17-三烯；6，6』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙-3，6，9，15-四氮雜二環[11.3.1]十五烷-1(15)，11，13-三烯；6，6』-[1，3-亞苯基-雙(亞甲基)]雙-3，6，9，15-四氮雜二環[11.3.1]十五烷-1(15)，11，13-三烯；和17，17』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]雙-3，6，14，17，23，24-六氮雜三環[17.3.1.18，12]二十四烷-1(23)，8，10，12(24)，19，21-六烯(hexaene)。
再在另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(1E)的化合物Z-R-A-R』-Y(1E)其中Z和Y相同，為具有10-15個環成員的環狀多胺部分，且環中有3-6個胺氮原子被2個或多個碳原子相互分隔，所述胺氮是唯一的環雜原子，A是喹啉之外的芳族或雜芳族部分，R和R』各自為連接Z和Y中氮原子的亞甲基，胺氮原子否則是未取代的。
在上述式(1E)中，各Z和Y部分可具有14個環成員，並在環中有4個胺氮原子。具有式(1E)的化合物即該化合物的合成方法描述於美國專利5,583,131，該文獻通過引用納入本文。這些化合物包括但不限於1，1』-[1，3-亞苯基雙(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四-氮雜環十四烷；1，1』-[1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四-氮雜環十四烷(AMD 3100)；1，1』-[1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；
1，1』-[1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷的雙-鋅或雙-銅絡合物；1，1』-[3，3』-聯亞苯基-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；11，11』-[1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，7，11-四氮雜環十四烷；1，11』-[1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)]-1，4，8，1 1-四氮雜環十四烷-1，4，7，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[2，6-吡啶-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1-[3，5-吡啶-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[2，5-噻吩-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[4，4』-(2，2』-聯吡啶)-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[2，9-(1，10-菲咯啉)-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[1，3-亞苯基-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，7，10-四氮雜環十四烷；1，1』-[1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)]-雙-1，4，7，10-四氮雜環十四烷；1』-[5-硝基-1，3-亞苯基雙(亞甲基)]雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[2，4，5，6-四氯-1，3-亞苯基雙(phenyleneis)(亞甲基)]雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[2，3，5，6-四-氟-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[1，4-亞萘基-雙-(亞甲基)]雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[1，3-亞苯基雙-(亞甲基)]雙-1，5，9-三氮雜環十二烷；1，1』-[1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)]-1，5，9-三氮雜環十二烷；1，1』-[2，5-二甲基-1，4-亞苯基雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[2，5-二氯-1，4-亞苯基雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；1，1』-[2-溴-1，4-亞苯基雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；和1，1』-[6-苯基-2，4-吡啶雙-(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷。
再在另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(1F)的化合物Z-(A)n-Y(1F)其中，Z和Y獨立為含有9-32個環成員的環狀多胺部分，且環中有3-8個胺氮原子，A是連接原子或連接基，n是0或1-6個整數。
在上述式(1F)中，各Z和Y部分可具有10-24個環成員，或12-18個環成員。各Z和Y部分也可在環中含有4-6個胺氮原子。一實施例中，n是0。另一實施例中，A是亞甲基。
具有式(1F)的化合物及該化合物的合成方法描述於美國專利5,021,409，該文獻通過引用納入本文。這些化合物包括但不限於2，2』-bicyclam、6，6』-bicyclam；3，3』-(雙-1，5，9，13-四氮雜環十六烷)；3，3』-(雙-1，5，8，11，14-五氮雜環十六烷)；亞甲基(或聚亞甲基)二-1-N-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；3，3』-雙-1，5，9，13-四氮雜環十六烷；3，3』-雙-1，5，8，11，14-五氮雜環十六烷；5，5』-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；2，5』-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；2，6』-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；11，11』-(1，2-乙二基(ethanediyl))雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；11，11-(1，2-丙二基(propanediyl))雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；11，11』-(1，2-丁二基(propanediyl))雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；11，11』-(1，2-戊二基(pentanediyl))雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷；和11，11』-(1，2-己二基(hexanediyl))雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(2A)的化合物或其藥學上可接受的酸加成鹽 W是氮原子且Y不存在，或者W是碳原子且Y＝H；R1-R7可以相同或不同，且獨立為氫或直鏈、支鏈或環狀C1-6烷基；R8是任選取代的雜環基或任選取代的芳基Ar是任選在一個或多個非連接位置被供電子基或吸電子基取代的芳環或雜芳環；n和n』獨立為0-2；X為具有下式的基團
其中，環A是任選取代的、飽和或不飽和的5或6元環，P是任選取代的氮原子，且環A中除P之外的任何雜原子是N；其中，環B是任選取代的5-7元環；其中，環A或環B通過V基團從任何位置結合到W基團；其中，V是化學鍵，或者V是(CH2)n」基(其中n」＝1-2)，或者V是C＝O基；和其中，Z選自下組氫原子；任選取代的C1-6烷基；任選取代的芳基或雜環基；任選取代的氨基；任選取代的C1-6烷基氨基或C3-7環烷基氨基；和取代的羰基；或其中，所述化合物可以是任何立體異構形式，或者以其立體異構形式的混合物存在；其中，環B選自下組苯環和5-7元環烷基環；以及其任選取代的形式。
在上述式(2A)中，環A可以是吡啶；嘧啶；吡嗪；噠嗪；三嗪；哌啶；哌嗪；咪唑；吡唑；或三唑，以及其任選取代的形式。環B可以是環戊基；環己基；環庚基；環戊烯基；環己烯基；或環庚烯基，以及其任選取代的形式。一實施方案中，環A和環B一起是任選取代的二氫喹啉或四氫喹啉。
在上述式(2A)中，環A和環B獨立被選自下組的取代基任選取代滷素；硝基；氰基；羧酸；任選取代的烷基、烯基或環烷基；任選取代的羥基；任選取代的硫醇基；任選取代的氨基或醯基；任選取代的羧酸酯基、氨甲醯基或氨磺醯基；和任選取代的芳基或雜環基。一實施方案中，環A或環B中的任選取代基獨立為任選取代的芳烷基或雜環烷基，其中，所述雜環烷基是含有1-4個雜原子的5或6元環。例如，任選取代的芳烷基或雜環烷基可以是苯基C1-4烷基；苯基甲基(苄基)；苯乙基；吡啶基甲基；或吡啶基乙基。
在上述式(2A)中，Z可以是任選取代的C1-6烷基，其中所述C1-6烷基被一個或多個選自下組的取代基取代滷素；硝基；氰基；羧酸；任選取代的烷基、烯基或環烷基；任選取代的羥基；任選取代的硫醇基；任選取代的氨基或醯基；任選取代的羧酸酯基、氨甲醯基或氨磺醯基；和任選取代的芳基或雜環基。
在上述式(2A)中，Z是任選取代的芳基或雜環基或被任選取代的芳基或雜環基任選取代的C1-6烷基。一實施方案中，Z是被任選取代的芳基或雜環基取代的C1-6烷基。所述任選取代的芳基可被選自下組的取代基取代苯；萘；二氫萘；和四氫萘；和其中，所述任選取代的雜環基是5-6元飽和、部分飽和或芳族雜環，所述環含有1-4個選自氮、氧或硫的雜原子。所述雜環基選自下組吡啶、喹啉、異喹啉、咪唑、苯並咪唑、氮雜苯並咪唑、苯並三唑、呋喃、苯並呋喃、噻唑、苯並噻唑、唑、苯並唑、吡咯、吲哚、二氫吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氫喹啉、四氫異喹啉、吡唑、噻吩、異唑、異噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、嗎啉、硫代嗎啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氫吡喃、二氫吡喃、苯並吡喃、二烷、二噻烷、四氫呋喃、四氫噻吩、二氫呋喃和二氫噻吩。所述雜環基也可含有氮或硫雜原子；且其中，所述氮或硫雜原子任選為氧化物形式。
在另一實施方案中，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑可以是具有式(2B)的化合物或其藥學上可接受的酸加成鹽 其中，W為氮原子且Y不存在；R1-R7可以相同或不同，且獨立為氫或直鏈、支鏈或環狀C1-6烷基；R8是任選取代的雜環基或任選取代的芳基Ar是任選在一個或多個非連接位置被供電子基或吸電子基取代的芳環或雜芳環；n和n』獨立為0-2；X為具有下式的基團 其中，環A是任選取代的、飽和或不飽和的5或6元環，P是任選取代的氮原子，且環A或B中的任何雜原子是N；其中，環B是任選取代的5-7元環；其中，環A或環B通過V基團從任何位置結合到W基團；其中，V是化學鍵，或者V是(CH2)n」基(其中n」＝1-2)，或者V是C＝O基；和其中，Z選自下組氫原子；任選取代的C1-6烷基；任選取代的芳基或雜環基；任選取代的氨基；任選取代的C1-6烷基氨基或C3-7環烷基氨基；和取代的羰基；或其中，所述化合物可以是任何立體異構形式，或者以其立體異構形式的混合物存在。
在上述式(2B)中，環A可以是吡啶；嘧啶；吡嗪；噠嗪；三嗪；哌啶；哌嗪；咪唑；吡唑；或三唑，以及其任選取代的形式。環B可以是苯或5-7元環烷基環，以及其任選取代的形式。例如，環B可以是環戊基；環己基；環庚基；環戊烯基；環己烯基；或環庚烯基，以及其任選取代的形式。
在上述式(2B)中，環A和環B一起可以是任選取代的二氫喹啉或四氫喹啉。例如，環A和環B獨立被選自下組的取代基任選取代滷素；硝基；氰基；羧酸；任選取代的烷基、烯基或環烷基；任選取代的羥基；任選取代的硫醇基；任選取代的氨基或醯基；任選取代的羧酸酯基、氨甲醯基或氨磺醯基；和任選取代的芳基或雜環基。在一個實施例中，環A或環B中的任選取代基獨立為任選取代的芳烷基或雜環烷基，其中，所述雜環烷基是含有1-4個雜原子的5或6元環。例如，任選取代的芳烷基或雜環烷基選自苯基C1-4烷基；苯基甲基(苄基)；苯乙基；吡啶基甲基；和吡啶基乙基。
在上述式(2B)中，Z可以是任選取代的C1-6烷基，其中所述C1-6烷基被一個或多個選自下組的取代基取代滷素；硝基；氰基；羧酸；任選取代的烷基、烯基或環烷基；任選取代的羥基；任選取代的硫醇基；任選取代的氨基或醯基；任選取代的羧酸酯基、氨甲醯基或氨磺醯基；和任選取代的芳基或雜環基。一實施例中，Z是被任選取代的芳基或雜環基取代的C1-6烷基。
另一實施例中，Z是任選取代的芳基或雜環基或被任選取代的芳基或雜環基任選取代的C1-6烷基。例如，所述任選取代的芳基可被選自下組的取代基取代苯；萘；二氫萘；和四氫萘；和其中，所述任選取代的雜環基是5-6元飽和、部分飽和或芳族雜環，所述環含有1-4個選自氮、氧或硫的雜原子。所述雜環基可以是吡啶、喹啉、異喹啉、咪唑、苯並咪唑、氮雜苯並咪唑、苯並三唑、呋喃、苯並呋喃、噻唑、苯並噻唑、唑、苯並唑、吡咯、吲哚、二氫吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氫喹啉、四氫異喹啉、吡唑、噻吩、異唑、異噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、嗎啉、硫代嗎啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氫吡喃、二氫吡喃、苯並吡喃、二烷、二噻烷、四氫呋喃、四氫噻吩、二氫呋喃或二氫噻吩。其它實施例中，雜環基含有氮或硫雜原子；且其中，所述氮或硫雜原子任選為氧化物形式。
一實施方案中，CXCR4拮抗劑是選自下組的化合物N-(2-吡啶基甲基)-N』-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺(dimethanamine)；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(6，7-二氫-5H-環戊[b]吡啶-7-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1，2，3，4-四氫-1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-N』-(1-甲基-1，2，3，4-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N』-(1-甲基-1，2，3，4-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1，2，3，4-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N』-(1，2，3，4-四氫-1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(2-苯基-5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N』-(2-苯基-5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-5-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1H-咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-5-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1H-咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[(2-氨基-3-苯基)丙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)N』-(1H-咪唑-4-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(2-喹啉基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(2-(2-萘甲醯基)氨基乙基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[(S)-(2-乙醯氨基-3-苯基)丙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[(S)-(2-乙醯氨基-3-苯基)丙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[3-((2-萘基甲基)氨基)丙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-(S)-吡咯烷基(pyrollidinyl)甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-(R)-吡咯烷基甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[3-吡唑基甲基]-N』-(556，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-吡咯基甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-噻吩基甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-噻唑基甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-呋喃基甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(苯基甲基)氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(2-氨基乙基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-3-吡咯烷基-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺N-(2-吡啶基甲基)-N』-4-哌啶基-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(苯基)氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(7-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(6-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1-甲基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(7-甲氧基-3，4-二氫萘基)-1-(氨基甲基)-4-苯甲醯胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(6-甲氧基-3，4-二氫萘基)-1-(氨基甲基)-4-苯甲醯胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1H-咪唑-2-基甲基)-N』-(7-甲氧基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(8-羥基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1H-咪唑-2-基甲基)-N』-(8-羥基-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(8-氟-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1H-咪唑-2-基甲基)-N』-(8-氟-1，2，3，4-四氫-2-萘基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-7-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1H-咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-7-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(2-萘基甲基)氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-(異丁基氨基)乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(2-呋喃基甲基)氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(2-胍基乙基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[雙-[(2-甲氧基)苯基甲基]氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(1H-咪唑-4-基甲基)氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-(苯基脲基)乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[[N」-(正丁基)醯胺基]甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(醯胺基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[(N」-苯基)醯胺基甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(羧基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；
N-(2-吡啶基甲基)-N』-(苯基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(1H-苯並咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(5，6-二甲基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺(氫溴酸鹽)；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(5-硝基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[(1H)-5-氮雜苯並咪唑-2-基甲基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-(4-苯基-1H-咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(2-苯並唑基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(反-2-氨基環己基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(2-苯基乙基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(3-苯基丙基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N』-(反-2-氨基環戊基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-甘氨醯胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-(L)-丙氨醯胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-(L)-天冬醯胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-吡嗪醯胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-(L)-脯氨醯胺；
N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-(L)-賴氨醯胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-苯甲醯胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-吡啶醯胺；N』-苄基-N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-脲；N』-苯基-N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-脲；N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[細菌(bacteria)吡啶-9-基)-4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯甲醯胺；N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯甲醯胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N』-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[細菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N』-(6，7-二氫-5H-環戊[細菌吡啶-7-基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N』-(1，2，3，4-四氫-1-萘基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N』-[(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)甲基]-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N』[(6，7-二氫-5H-環戊[細菌吡啶-7-基)甲基]-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]-N』-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)苯二甲胺；N-[(2，3-二甲氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N-[1-(N」-苯基-N」-甲基脲基)-4-哌啶基]-1，3-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N-[N」-對甲苯磺醯苯基丙氨醯)-4-哌啶基]-1，3-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N-[1-[3-(2-氯苯基)-5-甲基-異唑-4-基(isoxazol-4-oyl)]-4-哌啶基]-1，3-苯二甲胺；
N-[(2-羥基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[細菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-氰基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[細菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-氰基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-乙醯氨基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-苯氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[細菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-2-醯胺基)乙基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(4-苄氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[細菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(噻吩-2-基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[細菌吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[[1-甲基-3-(吡唑-3-基)]丙基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-(苯基)乙基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(3，4-亞甲二氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-苄基-3-羧基甲基-4-哌啶基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(3，4-亞甲二氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-吡啶基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[[1-甲基-2-(2-甲苯基)醯胺基]乙基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(1，5-二甲基-2-苯基-3-吡唑啉酮-4-基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-丙氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；
N-(1-苯基-3，5-二甲基吡唑啉-4-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-4-基甲基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(3-甲氧基-4，5-亞甲二氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-氰基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-氰基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(5-乙基噻吩-2-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(5-乙基噻吩-2-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2，6-二氟苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2，6-二氟苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-二氟甲氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-二氟甲氧基苯基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(1，4-苯並二烷-6-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N-[1-(N」-苯基-N」-甲基脲基)-4-哌啶基]-1，4-苯二甲胺；N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-N-[N」-對甲苯磺醯苯基丙氨醯)-4-哌啶基]-1，4-苯二甲胺；N-[1-(3-吡啶醯胺基)-4-哌啶基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(環丙基醯胺基)-4-哌啶基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(1-苯基環丙基醯胺基)-4-哌啶基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(1，4-苯並二烷-6-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；
N-[1-[3-(2-氯苯基)-5-甲基-異唑-4-醯胺基]-4-哌啶基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(2-甲硫基吡啶-3-醯胺基)-4-哌啶基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2，4-二氟苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基吡咯-2-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-羥基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-甲氧基-4，5-亞甲二氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-吡啶基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[2-(N」-嗎啉代甲基)-1-環戊基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-3-哌啶基)丙基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基苯並咪唑-2-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[[(1-苯基-3-(N」-嗎啉代)]丙基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(異丙基)-4-哌啶基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-(乙氧基羰基)-4-哌啶基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-3-吡唑基)丙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-甲基-2-(N」，N」-二乙基醯胺基)乙基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-2-苯基磺醯基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-氯-4，5-亞甲二氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-甲基-2-[N″-(4-氯苯基)醯胺基]乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；
N-(1-乙醯氧基吲哚-3-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(3-苄氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-喹啉基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基(quinolinyl))-1，4-苯二甲胺；N-[(8-羥基)-2-喹啉基甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-喹啉基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-乙醯氨基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-2-基甲基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-喹啉基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(2-噻唑基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(4-吡啶基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(5-苄氧基)苯並[b]吡咯-3-基甲基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基吡唑-2-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(4-甲基)-1H-咪唑-5-基甲基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[[(4-二甲基氨基)-1-萘基(napthalenyl)]甲基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1，5-二甲基-2-苯基-3-吡唑啉酮-4-基甲基]-N，N』-雙(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-[(1-乙醯基-2-(R)-脯氨醯]-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-[2-乙醯氨基苯甲醯基-4-哌啶基]-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-氰基-2-苯基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[(N」-乙醯基色氨醯)-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(N」-苯甲醯基纈氨醯)-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(4-二甲基氨基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-(4-吡啶基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(1-甲基苯並咪唑(benzimadazol)-2-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-丁基-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-苯甲醯基-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[(1-甲基)苯並[b]吡咯-3-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-4-基甲基]N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，3-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-4-哌啶基]N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[1-甲基苯並咪唑-2-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(2-苯基)苯並[b]吡咯-3-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N』-(2-吡啶基甲基)-1，4-苯二甲胺；N-[(6-甲基吡啶-2-基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，4-苯二甲胺；N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基甲基)-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-甲氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-乙氧基苯基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(6，7，8，9-四氫-5H-環庚[b]吡啶-9-基)-1，3-苯二甲胺；N-(苄氧基乙基)-N』-(2-吡啶基甲基)N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(2-乙氧基-1-萘基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；N-[(6-甲基吡啶-2-基)甲基]-N』-(2-吡啶基甲基)-N-(5，6，7，8-四氫-8-喹啉基)-1，3-苯二甲胺；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]胍；N-(2-吡啶基甲基)-N-(8-甲基-8-氮雜二環[3.2.1]辛-3-基)-1，4-苯二甲胺；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]高哌嗪(homopiperazine)；1-[[3-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]高哌嗪；反-和順-1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3，5-哌啶二胺；N，N』-[1，4-亞苯基雙(亞甲基)]雙-4-(2-嘧啶基)哌嗪；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-1-(2-吡啶基)甲基胺；2-(2-吡啶基)-5-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]-1，2，3，4-四氫異喹啉；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3，4-二氨基吡咯烷；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3，4-二乙醯氨基吡咯烷；8-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-2，5，8-三氮雜-3-氧雜二環[4.3.0]壬烷；和8-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-2，5，8-三氮雜二環[4.3.0]壬烷。
具有式(2A)和(2B)的化合物及該化合物的合成方法描述於WO 00/56729，該文獻通過引用納入本文。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(3)的化合物或其鹽、前藥和立體化學形式 其中
環A任選含有選自N、O或S的雜原子；虛線表示任選為不飽和鍵；R1是滷素、硝基、氰基、任選取代的羥基、任選取代的硫醇、任選取代的氨基、羧酸酯、氨甲醯、磺酸酯、氨磺醯、C2-4烷醯基、烷基磺醯基或芳醯基；R2和R3獨立為H、任選滷化的C1-4烷基、任選取代的芳基或雜環基，或者R2和R3與環E一起形成取代或未取代的5-7元環；k是0-4；m是0-2；L1是共價鍵或任選含有N或O的C1-6烷基；X是未取代的或取代的C或N；或是O或S；Ar是亞苯基；各n獨立為0-2；各R獨立為H或烷基(1-6C)；和Y是稠合或未稠合的芳環或雜芳環，或是5-6元雜環基。
在上述式(3)中，Y可以是取代或未取代的苯、萘(napthalene)、二氫萘、四氫萘、吡啶、喹啉、異喹啉、咪唑、苯並咪唑、氮雜苯並咪唑、苯並三唑、呋喃、苯並呋喃、噻唑、苯並噻唑、唑、苯並唑、吡咯、吲哚、二氫吲哚、吲唑、吡咯烷、吡咯烷酮、吡咯啉、哌啶、哌嗪、四氫喹啉、四氫異喹啉、吡唑、噻吩、異唑、異噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、嗎啉、硫代嗎啉、吡唑烷、咪唑烷、咪唑啉、四氫吡喃、二氫吡喃、苯並吡喃、二烷、二噻烷、四氫呋喃、四氫噻吩、二氫呋喃或二氫噻吩。
在上述式(3)中，L1可連接到環E的2位。環E中的虛線還可表示所示氮和2位之間的雙鍵。一實施例中，R2和R3可連接形成環E上的苯並(benzo)取代基。
在上述式(3)中，環A可以是飽和的。一些實施例中，m是1，k是0或1。
在另一實施方案中，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑具有式(3A)，或是其鹽、前藥和立體化學形式
其中R、m、n、Ar和各Y如式(3)中的定義；L2是共價鍵或任選含有N或O的C1-6烷基；和各Z獨立為CR2、NR、O或S，條件是只有兩個Z可以不是CR2。
在上述式(3A)中，L2可以是亞甲基或亞乙基。一實施例中，m是1，所有Z都是CR2，尤其是CH2。
在上述式(3A)中，各Y可以是嘧啶基、吡啶基、苯基、苯並咪唑或苯並唑。
再在另一實施方案中，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑具有式(3B)，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中W1是含有至少一個選自N、O或S的雜原子的未取代或取代的單環(5-6元)或稠合雙環(8-12元)系統；W2是H，或者選自任選取代的C1-6烷基；被任選取代的芳基或雜環基取代的C0-6烷基；任選取代的C0-6烷基氨基或C3-7環烷基氨基；和任選取代的羰基或磺醯基；Ar、R和n如式(3)中的定義，和 是含有1-2個選自N、O或S的雜原子的飽和或不飽和的5元環。
再在另一實施方案中，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑具有式(3C)，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中W1是苯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、硫苯基(thiophenylyl)或任選含有選自N、O或S的雜原子的稠環系統；
W2是H；Ar、R和n如式(3)中的定義；和 表示任選含有1或2個選自N、O或S的雜原子的10元稠環系統。
具有式(3)和(3A)-(3C)的化合物及該化合物的合成方法描述於WO 02/22600，該文獻通過引用納入本文。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(4)的化合物，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中X是含有至少一個選自N、O或S的雜原子的未取代或取代的單環(5-6元)或稠合雙環(9-12元)系統；Z是H，或是任選取代的含有N、O或S的5-6元單環或9-12元稠合雙環環系統；Ar是任選取代的芳環或雜芳環；L1、L2和L3各自獨立為鍵、CO、SO2或CH2，其中，L2和L3中的至少一個必須是CO或SO2；且其中L1也可以是亞烷基(2-5C)，其中，一個或兩個C可任選被N取代，且該亞烷基自身可被橋連亞烷基(3-4C)任選取代；L2和L3也可以獨立為SO2NH、CONH、SO2NHCH2或CONHCH2；n是0、1或2；R1和R2各自獨立為H或者直鏈、支鏈或環烷基(1-6C)，它可任選被取代，且其中的R2可以是偶聯到Y的亞烷基；和Y含有至少一個直接偶聯到L3的芳環或雜芳環或其它取代或未取代的雜環。
在上述式(4)中，X可以是二氫喹啉、四氫喹啉、吡喃吡啶、二氫吡喃吡啶、硫代吡喃吡啶、二氫硫代吡喃吡啶、二氫1，5-二氮雜萘、四氫1，5-二氮雜萘、咪唑基、唑基、噻唑基、苯並咪唑基、苯並噻唑基或苯並唑基。
在上述式(4)中，L1以是亞烷基(2-5C)，其中的一個C可任選被N取代，且可任選被橋連亞烷基(3-4C)取代。例如，L1可以是亞烷基、CO或SO2，X是任選取代的咪唑、唑、噻唑、苯並咪唑、苯並噻唑或苯並唑。或者，L1可以是鍵，而X是取代或未取代的二氫喹啉、四氫喹啉、吡喃吡啶、二氫吡喃吡啶、硫代吡喃吡啶、二氫硫代吡喃吡啶、二氫1，5-二氮雜萘或四氫1，5-二氮雜萘。
在上述式(4)中，Z可以是氫。
在上述式(4)中，Y可以是任選取代的咪唑、苯並咪唑、吡啶、吡啶、嘧啶或苯基，其中，環氮原子可任選被氧化。例如，Y可被滷素、腈、烷基、-OR、-SR、-NR2、-NRCOR、-OOCR、-COR、-CONR2、-COOR、-NO2、-NOH、-CF3取代，其中的R是H或烷基(1-6C)。
在上述式(4)中，各X或Z可任選被滷素、硝基、氰基、羧基、C1-10烷基、C2-10烯基、C3-10環烷基、羥基、硫醇、氨基、醯基、羧酸酯、氨基甲酸酯、氨甲醯、氨磺醯、與氫結合的羰基或磺醯基取代，或被C1-10烷基、C2-10烯基、C3-7環烷基或5-6元單環芳基取代；或者X或Z可任選被5-6元單環芳基、萘基或5-6元雜環取代；一實施方案中，用於本發明方法的化合物具有式(4A)或式(4B) 其中，l是0-3，R』是OH、MeO、SH SMe、CN、CO2Me、F、Cl、Br、NO2、CH3CO、NH2、NHCH3、N(CH3)2、CH3CONH、CH3SO2NH、CONH2、SO2NH2、CF3或Me；Z1、Z2和Z3各自獨立為CH、CR』或N，其中，所述Z1、Z2和Z3中只有兩個可以是N；
和L2和L3如式(4)中的定義。
在上述式(4A)或(4B)中，Z1、Z2和Z3都可以是CH或CR』。一實施例中，Z3是N，L3是CO。此外，L2和L3之一可以是SO2，而另一個是鍵或CH2。或者，L2和L3之一是CO而另一個是鍵或CH2。
在另一實施方案中，用於本發明方法的化合物具有式(4C) 其中，l是0-3，R』是OH、MeO、SH SMe、CN、CO2Me、F、Cl、Br、NO2、CH3CO、NH2、NHCH3、N(CH3)2、CH3CONH、CH3SO2NH、CONH2、SO2NH2、CF3或Me；k是0-2；Z1、Z2和Z3各自獨立為CH、CR』或N，其中，所述Z1、Z2和Z3中只有兩個可以是N；和X、L2和L3如式(4)中的定義。
在上述式(4C)中，Z1、Z2和Z3都可以是CH或CR』。一實施例中，Z3是N，L3是CO。此外，L2和L3之一可以是SO2，而另一個是鍵或CH2。或者，L2和L3之一是CO而另一個是鍵或CH2。
具有式(4)和(4A)-(4C)的化合物以及該化合物的合成方法描述於WO 02/22599，該文獻通過引用納入本文。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(5)的化合物，或是其鹽、前藥和立體化學形式
環A任選含有選自N、O或S的雜原子；虛線表示任選為不飽和鍵；R1、R2和R3獨立為H、滷素、取代或未取代的烷基、羥基、氨基、硫醇或醯基；或者R2和R3可以一起形成苯環；k是0-4；l是0、1或2；X是未取代的或取代的C或N；或是O或S；Ar是芳族或雜芳族部分的殘基；各n獨立為0-2；各R獨立為H或烷基(1-6C)；j是0-3；和各Y獨立選自下組滷素；OR；SH；SO；SO2；任選取代的苯基；-(CR2)mOR；-(CR2)mCOR；-(CR2)mCOOR；-(CR2)mN＝CH-NR2；-(CR2)mCONHNHR；-(CR2)mCN；-(CR2)mNR52；-(CR2)mNR(CR2)mNRR4；-(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mCO(CR2)mNR52；
-(CR2)mCO(CR2)mNR(CR2)mNRR4；-(CR2)mCO(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mNRCO(CR2)mNRR4；-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR52；-(CR2)mNROH；-(CR2)mCONROH；-(CR2)mCR＝NOH；-NHNHR；-CH＝N-Z；和-胍基或脒基，其中的每一個可通過(CR2)m部分連接到Y；其中，R是H或烷基(1-6C)，各m獨立為0-4，且各R4和各R5獨立為H、烷基(1-6C)、烯基(2-6C)、炔基(2-6C)或醯基(1-6C)，各自可被一個或多個非芳族、非雜環取代基任選取代，其中，兩個R5可以連接形成任選含有一個或多個選自N、O或S的其它雜原子的環胺；a表示環A和N之間的連接基；b表示環E和N之間的連接基；和其中，Z是含有5-12個環成員的芳族或雜芳族部分。
在上述式(5)中，Ar可以是5-6元單環或9-12元稠環系統。例如，Ar可以是苯、萘、二氫萘、四氫萘、吡啶、嘧啶、喹啉、異喹啉、咪唑、苯並咪唑、氮雜苯並咪唑、苯並三唑、呋喃、苯並呋喃、噻唑、苯並噻唑、唑、苯並唑、吡咯、吲哚、咪唑、四氫喹啉、四氫異喹啉、吡唑、噻吩、異唑、異噻唑、三唑、四唑、二唑、噻二唑、咪唑啉或苯並吡喃。在具體實施例中，Ar是苯、苯並咪唑、苯並噻唑、咪唑、唑、苯並三唑、噻唑、吡啶或嘧啶。一實施方案中，至少一個可以是Y的是-(CR2)mNR52。
在上述式(5)中，R2和R3一起形成苯並取代基。一實施方案中，X是N，環E包含偶聯到一個N的π鍵。一實施方案中，環E在2位偶聯到分子的剩餘部分。
在上述式(5)中，環A可以是飽和的，l是1。一個實施例中，k是0-1。其它實施例中，包含A的環系統是四氫喹啉或是其取代形式。
在上述式(5)中，(CR2)an和(CR2)bn之一可以是CH2，而另一個是鍵。例如，(CR2)an可以是鍵而(CR2)bn是CH2。
具有式(5)的化合物及該化合物的合成方法描述於WO 02/34745，該文獻通過引用納入本文。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(6)的化合物，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中，X和Y獨立為N或CR1；Z是S、O、NR1或CR12；R1-R6各自獨立為H、滷素、O(C＝O)R、NR(C＝O)R、OR、SR、NR2、COOR、CONR2，其中的R是H或任選取代的烷基、烯基、炔基或芳基；或R1-R6各為烷基(C1-10)、烯基(C2-10)、炔基(C2-10)、芳基(C5-12)、芳基烷基、芳基烯基或芳基炔基，各基團可任選被取代並任選含有O、S或N；或任選取代的醯基、芳基醯基、烷基-烯基-、炔基-或芳基磺醯基，其中，各烷基、烯基、炔基或芳基部分可含有O、O或N；n1是0-4；n2是0-1，其中，*表示C≡C可被取代成CR5＝CR5；n3是0-4；其中，n1+n2+n3大於或等於2；b是0-2；其中，R基團的以下組合可偶聯形成一個環，該環可以是飽和或不飽和的R2+R2一個R2+R3R3+一個R4，
R4+R4，一個R5+另一個R5，一個R5+一個R6，和R6+R6；其中，當環的組成部分是兩個R5時該環可以是芳環；和其中，當n2是1時，n1和n3都不能是0。
一實施方案中，用於本發明方法的化合物具有式(6A)，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中，R1-R6和n1-n3如式(6)中的定義。
在另一實施方案中，用於本發明方法的化合物具有式(6B)或式(6C)，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中，n是0-1；d是0-3；虛線是任選的π鍵；和
R1-R6如式(6)中的定義。
再在另一實施方案中，用於本發明方法的化合物具有式(6D)，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中，R1-R6如式(6)中的定義，n4是2-6。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R1可以是H、滷素、烷基、烷氧基或CF3。一實施方案中，各R2是H或烷基。在另一實施方案中，各R3是H、烷基、烯基、芳基烷基或芳基。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R4可以是H、烷基或芳基。或者，兩個R4可形成任選取代的芳環或雜芳環。例如，兩個R4可形成苯基或吡啶基環，該環可被滷素、烷基、滷化的烷基、羥基或烷氧基取代。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R5可以是H、烷基或烯基，其中，所述烷基或烯基可任選被取代。一實施方案中，在單個碳上或在非相鄰或相鄰的碳上的烷基或烯基取代基形成飽和或不飽和環。一實施例中，取代基形成非芳環，在另一實施方案中，一個R5是肟、烷基化肟、烷基化羥胺、羥胺或滷素。
在上述式(6)或(6A)-(6D)中，各R6可獨立為H或者芳基烷基或芳基磺醯基，其中，芳基部分可含有雜原子；或者兩個R6可形成胍基、羰基或氨甲醯基。一實施方案中，兩個R6或者一個R5和一個R6可一起形成飽和環、不飽和環或芳環，其中，各環可任選含有N、S或O。
具有式(6)的化合物及該化合物的合成方法描述於WO 03/055876，該文獻通過引用納入本文。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(7)的化合物，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中，X是(CR32)o-(CR3＝CR3)p-(CR32)q-NR52；(CR32)r-R4；或任選取代的苄基或任選含有N、O或S的單環或雙環；Y是含有氮原子的任選取代的5-12元雜環，所述雜環可以是單環或稠環，並且是芳族的或部分芳族的；A和R1獨立為滷素、CF3、氰基、硝基、OR、SR、NR2、COOR、CONR2、NSO2R、OSO2R或OSO2NR，其中各R是H、烷基、烯基、炔基或芳基；或A和R1獨立為任選取代的烷氧基(C1-10)、烷基(C1-10)、烯基(C2-10)、炔基(C2-10)、芳基(5-12元)、芳基烷基、芳基烯基或芳基炔基，它們各自可任選含有O、S或N；R2和R3獨立為H或任選取代的烷基；R4是任選取代的雜環環或雜芳基；或R4包括脲、羥基脲、磺醯胺、乙醯胺、胍、氨腈、羥胺、氨腈、咪唑烷-2-酮或是煙醯胺部分，它們各自可被雜環取代；R5是H或烷基；l和n獨立為0-4；p是0-1；o和q獨立為1-4；和r是1-6。
在上述式(7)中，R1和R2中至少有一個可以不是H，並且可以相連形成額外的環，如芳基或雜芳基。一實施例中，兩個As可形成一個額外的環。另一實施例中，X是(CR32)r-R4，r至少為2，R4是2-吡啶基、喹啉基、咪唑基或呋喃。
在上述式(7)中，X可以是(CR32)o-(CR3＝CR3)p-(CR32)q-NR52，其中，R3和R5各自獨立為H，且p可以是0。一具體實施方案中，o和q一起為2-6。或者，X可以是(CR32)r-R4，其中，R4是雜環或雜芳基，它們各自可含有氮原子。例如，R4可以是氮雜環丁烷、吡咯烷基、吡啶基、硫苯基(thiophenyl)、咪唑基或苯並咪唑基。或者，X可以是任選含有N、O或S的單環或雙環，如環己基、哌啶、8-氮雜-二環[3.2.1]辛烷或3-氮雜-二環[3.2.1]辛烷。再在另一實施方案中，X是任選取代的苄基，特別是二取代的苄基。
在上述式(7)中，Y可以是5-6元雜環，該環在連接到分子剩餘部分的原子相鄰處含有氮原子。所述5-6元雜環可與另一個環稠合。例如，Y可以是吡啶、嘧啶、吡嗪、吲哚、苯並咪唑、苯並噻唑、咪唑、異喹啉、四氫喹啉、噠嗪、噻唑或苯並咪唑。一具體實施例中，Y是四氫喹啉，特別是5，6，7，8四氫喹啉部分，它在8位連接到分子的剩餘部分。
在上述式(7)中，各任選取代的部分可被雜原子、滷素、CF3、氰基、硝基、羥基、烷氧基、羰基、羧基、氨基、醯氨基、亞氨基、氰基、磺醯基、C1-6烷基或C2-6烯基取代，其中各自可含有N、O或S；或被芳基、雜芳基、碳環或雜環取代，其中各自還可被相同的取代基取代。
具有式(7)的化合物及該化合物的合成方法描述於WO 04/091518，該文獻通過引用納入本文。
另一方面，用於本發明方法的CXCR4拮抗劑的例子有具有式(8)的化合物，或是其鹽、前藥和立體化學形式 其中，A和B各自獨立為任選取代的5-6元單環雜芳基；環C是任選取代的飽和或部分飽和的5-7元環，並可含有氮原子之外的雜原子，其中，所述雜原子是N、O或S；Y是H、含有一個或多個雜原子的C1-6烷基或是環部分，它們各自可任選被取代；R1和R2獨立為H、滷素或任選取代的烷基；L是(CR32)1或NR(CR32)1，其中，烷基鍵可被烯基或炔基鍵替代；l是1-6；和各R3是H或烷基。
在上述式(8)中，當C是哌啶基或1，2，3，6-四氫吡啶基且環A和B是吡啶基時，R1和R2中至少有一個不是H。在其它實施方案中，當環C是哌啶基且環A和B是吡啶基時R1和R2不都是萘基。再在另一實施方案中，如果L-Y是CH3則環C不是4-氧-哌啶-3，5-二羧酸；且如果L-Y是苄基則環C不是4-羥基-1，2，5，6-四氫-吡啶-3-羧酸。
在上述式(8)中，R1和R2可在鄰接於環C的鍵的位置。一實施例中，R1和R2獨立為未取代的烷基，如甲基。
在上述式(8)中，環A和B各自可以是吡啶、嘧啶、吡嗪、噠嗪、1，2，3-三嗪、1，2，4-三嗪、1，3，5-三嗪、1，2，4，5-四嗪、吡咯、咪唑、吡唑、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑、四唑、噻唑、唑、異噻唑、異唑、1，2，3-噻二唑、1，3，4-噻二唑、1，2，3-二唑、1，3，4-二唑、喹啉、異喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪(pthalazine)、噌啉、1，2，3-苯並三嗪、1，2，4-苯並三嗪、吲哚、苯並咪唑、1H-吲唑、苯並唑、苯並噻唑、苯並[d]異唑、苯並[d]異噻唑或嘌呤。一具體實施例中，環A和B各自為吡啶、嘧啶、咪唑或苯並咪唑，且環A和B可以相同。環A和B各自還可以在連接該環與環C的鍵相鄰的位置上含有單個取代基，所述取代基可以相同。
在上述式(8)中，環C可以是飽和的環，或者可以含有雙鍵。例如，環C可以是吡咯烷、哌啶、六氫-1H-氮雜(azepine)、哌嗪、嗎啉、硫代嗎啉、azepane、azocane、2，3，4，7-四氫-1H-氮雜、2，3，6，7-四氫-1H-氮雜、3-吡咯啉、1，2，3，6-四氫吡啶、異二氫吲哚、1，2，3，4-四氫異喹啉、2，3，4，5-四氫-1H-苯並[d]氮雜、2，3，4，5-四氫-1H-苯並[c]氮雜、環丁烷、環戊烷、環己烷、環庚烷、環辛烷、環戊烯、環己烯、環庚烯、環辛烯、四氫吡喃、四氫硫代吡喃、oxepane、thiepane、oxocane或thiocane。一具體實施例中，環C是吡咯烷、哌啶、哌嗪或六氫-1H-氮雜。環C可被任選取代的烷基、滷素、氰基、肟、OR或C＝N-OR取代，其中，R是任選取代的烷基。
在上述式(8)中，Y可以選自下組-(CR2)mNR2，-(CR2)mNR2(CR3)，-(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mOR，-(CR2)mCO(CR2)mOR，-(CR2)mCO(CR2)mNR2，
-(CR2)mCO(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNRCO(CR2)mNR2，-(CR2)mNR(CR2)mCO2R，-(CR2)mNR(CR2)mCOR，-(CR2)mNR(CR2)mSO2R，-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNRCO(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR(CR2)mNR2，-(CR2)mNR(CR2)mOR，-(CR2)mCR＝NOH，-(CR2)mCONR(CR2)mOR，-(CR2)mN[(CR2)mCO2R]2；-(CR2)mONRCONR2，-(CR2)m-Z，-(CR2)mNR-(CO)mZ，-(CR2)mNR-(CR2)mZ，和-(CR2)m-CR＝N＝Z；其中，各R是H或任選取代的烷基，各m獨立為0-4；和Z是含有5-12個環成員的任選取代的芳族或雜芳族部分。
一具體實施方案中，Y是(CH2)1NR2且l是1-10。或者，Y可以是5-12元芳族、雜芳族或雜環部分，其中各自可以是單環或稠環。例如，Y可以是苯基、咪唑、吡啶、噻吩、吡咯烷、吡唑、哌啶、氮雜環丁烷、苯並咪唑、苯並[c]異唑或噻唑。此外，Y可任選被以下基團取代滷素；氰基；硝基；烷氧基；滷化烷基；取代的羰基；環部分，如含有N、O或S的5-12元芳基或雜芳基；或任選含有一個或多個N、O、S的烷基、烯基或雜烷基部分，其中各自可以是任選取代的並任選可以是氧化物形式，在具體實施例中，Y被吡啶、苯基、哌啶或2H-四唑取代。
在上述式(8)中，各任選取代的基團可被無機部分如雜原子、滷素、硝基、羥基、羧基、氨基、醯氨基、氰基或磺醯基取代；或者可被烷基(C1-10)、烯基(C2-10)、炔基(C2-10)、芳基(5-12元)、芳基烷基、芳基烯基或芳基炔基取代，其中各自可任選含有雜原子，如O、S或N，且其中各自還可被相同的取代基取代。例如，各任選取代的烷基可被雜原子如N、O或S取代，或被碳環、雜環、芳基或雜芳基取代基取代。
具有式(8)的化合物及該化合物的合成方法描述於WO 04/093817和2004年10月28日提交的美國專利申請序列號10/977,221中，所述各文獻通過引用納入本文。
可用於實踐本發明方法的其它CXCR4抑制劑包括但不限於CTCF-0214；CTCF-9908；CP-1221(線性肽、環肽、天然胺基酸、非天然胺基酸、以及肽模擬化合物)；T140及類似物；4F-苯甲醯基-TN24003；KRH-1120；KRH-1636；KRH-2731；鱟肽(polyphemusin)類似物；ALX40-4C；或者WO 01/85 196、WO 99/50461、WO01/94420、WO 03/090512中描述的那些，所有這些文獻通過引用納入本文。
可以單獨使用或者與上述CXCR4抑制劑組合使用的其它試劑包括以下這些環磷醯胺；吉西他濱；環孢菌素；Rituxan；沙利度胺；Clofarabine；Velcade；Antegren；Ontak；Revlimid(沙利度胺類似物)；Prochymal；Genasense/Oblimersen；Gleevec；Glivec(伊馬替尼)；他米巴羅汀(Tamibarotene)；奈拉濱(Nelarabine)；galium nitrate；PT-100；Bexxar Zevalin；Pixantrone；Onco-TCS；拓撲異構酶(topoisomerate)抑制劑；重組G-CSF(非格司亭；來格司亭；ETRX101；和TLK199/Telintra)；重組GM-CSF(沙格司亭，莫拉司亭)；重組SCF(安西司亭(ancestim))；重組G-CSF的共價偶聯物(peffilgrastim)等。
特別優選的式(1)的化合物的實施方案包括2，2』-bicyclam；6，6』-bicyclam；美國專利Nos.5021409和6001826中列出的實施方案，尤其是美國專利No.5,583,131中列出的1，1』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷，這裡稱為AMD3100。同樣優選的是WO 03/055876中描述的N』-(1H-苯並咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫喹啉-8-基)-丁烷-1，4-二胺。對本發明方法有用的化合物的其它合成方法描述於上述美國專利和申請以及美國專利6,489,472和2004年3月14日提交的臨時申請60/553,589中。
本發明的化合物可被製成前藥形式，即受到保護的形式，它可在給予對象後釋放出本發明的化合物。通常，保護基在體液(如血液)中被水解從而釋放出活性化合物或在體內被氧化或還原以釋放出活性化合物。關於前藥的討論可在Smith和Williams的《藥物設計原則介紹》(Introduction to the Principles of Drug Design)，Smith，H.J.；Wright，第二版，倫敦(1988)中找到。
當式(1)的化合物是多胺時，可以將其製成酸加成鹽或金屬絡合物的形式給予。合適的酸加成鹽包括適合生物的無機酸，包括HCl、HBr、硫酸、磷酸等，以及有機酸如乙酸、丙酸、丁酸等，以及含有一個以上羧基的酸如草酸、戊二酸、己二酸等的鹽。通常，在生理pH下，本發明的化合物可以呈酸加成鹽形式。特別優選的是鹽酸鹽。此外，當製成純化形式時，所述化合物也可被結晶為水合物。那些含有手性中心的式(1)的化合物的形式可以是純的或者可含有立體異構體的混合物，包括外消旋混合物或者各種光學純度的混合物。
如上所述，式(1)的化合物與GROβ(包括其修飾形式)組合使用。「GROβ的修飾形式」包括其截短形式，如美國專利6447766；6399053；6080398；PCT公開99/26645；PCT公開WO 97/15595；PCT公開WO 02/02132；PCT公開WO 97/15594；和PCT公開WO 94/29341中所述的那些。「GROβ的修飾形式」還包括其多聚形式。因此，「修飾形式」包括那些在成熟蛋白質的氨基末端截短了2-約8個胺基酸的形式、在成熟蛋白質的羧基末端截短了2-約10個胺基酸的形式、修飾的和/或截短的蛋白質的多聚形式，例如二聚體、三聚體、四聚體和其它聚集形式。特別優選GROβ的截短形式，尤其是由胺基酸5-73構成的SB251353以及它的胺基酸69被脫醯氨基的形式。
CXCR4抑制劑(包括其混合物)與趨化因子GROβ和/或其修飾形式組合給予。也可採用對治療或營養有用的其它活性成分，如抗生素、維生素、草本提取物、抗炎藥、葡萄糖、解熱藥、鎮痛藥、環磷醯胺、重組G-CSF(非格司亭(Neupogen)、格拉諾賽特(Granocyte)/Neutrogin和Stemgen)、重組G-CSF的共價偶聯物(Neulasta)、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)(如Leukine和Luecomax)、ETRX-101、TLK199/TILENTRATM、CTCE-0214(SFD-1的截短的SDF-1α肽類似物)、VLA-4抑制劑、白細胞介素-1(IL-1)、白細胞介素-3(IL-3)、白細胞介素-8(IL-8)、PIXY-321(GM-CSF/IL-3融合蛋白)、巨噬細胞炎性蛋白、幹細胞因子、血小板生成素、GRO家族的其它成員、或者化療等。這些可與幹細胞表達系統或者醫療裝置套件(如Replicell、Allogen以及TransStem Device TransCord Device ACE System)一起使用。
可用此領域熟知的常規加工技術將本發明的化合物製成用於動物對象的給藥製劑。適合于于式(1)表示的那些化合物的特定給藥方式的製劑可在《雷明頓藥物科學》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)(最新版本，Mack Publishing Company，Easton，PA)中找到；類似地，給予多肽(如GROβ及其修飾形式代表的多肽)的方法也可在其中找到。
優選地，所述化合物是通過注射給予的，更優選通過靜脈注射給予，但也可以通過皮下注射或腹膜內注射等方法給予。其它腸道外給藥途徑包括肌肉內注射和關節內注射。對於靜脈內或腸道用藥，所述化合物可以根據需要和賦形劑一起被製成合適的液體形式。所述組合物可包含脂質體或其它合適的載體。對於靜脈內注射，可用標準製劑如Hank溶液使所述溶液等滲。
除注射外，也可採用其它給藥途徑。所述化合物可被製成片劑、膠囊劑、糖漿劑、粉末劑或其它適合口服給藥的形式。通過使用合適的賦形劑，也可利用栓劑或鼻內噴霧通過黏膜給予這些化合物。使用合適的滲透劑並控制釋放速度透皮給藥也是有效的。
所選製劑和給藥途徑應根據各個對象、將被治療的對象的症狀、通常還要根據主治醫生的判斷而確定。
CXCR4抑制劑的合適的劑量範圍應根據這些情況變化，但通常，所給予的化合物約為每千克體重0.1μg-5mg；優選約為每千克體重1μg-300μg；更優選約為每千克體重10μg-100μg。因此，對於通常為70千克的人類對象，劑量範圍約為0.7μg-350mg；優選約為700μg-21mg；更優選約為700μg-7mg。與靜脈內給藥相比，當通過口服或透皮給予化合物時，劑量可以較高。由於本發明的方法涉及至少一種式(1)的化合物與GROβ相關趨化因子的組合，因此採用較低劑量是有利的，通常低2倍，更優選低4倍。至少一種CXCR4抑制劑和GROβ組分的組合可以在一種製劑中一起給予、在單獨的製劑中通過相同或不同途徑同時給予、或者在不同時刻也是通過相同或不同途徑給予。就特定對象的給藥方案最佳化是本領域的一般技術人員熟知的。
當靜脈內給藥或透皮給藥時，CXCR4抑制劑和GROβ趨化因子可以一次推注劑量給予、一段時間給予一次，或以多劑量給予。
除了直接給予對象外，本發明的組合物還可用於離體處理過程以製造細胞培養物，這種細胞培養物然後被用來補充對象的血細胞。離體處理可在獲自外周血或骨髓的自體同源細胞或來自相匹配供體的同種異體移植物上進行。所述單獨的或與GROβ組分組合的抑制CXCR4的化合物的濃度也是優化給藥途徑時要考慮的因素。
對本發明的方法反應良好的對象包括醫學對象和動物對象，通常包括人類患者。對本發明的方法有效的其它對象有貓類、狗類、大型動物、鳥類如雞類等。通常，任何對象都可從祖細胞和/或幹細胞增加中受益，或者，其祖細胞和/或幹細胞將進行幹細胞移植的對象也適合本發明的方法。
用本發明的方法將改善或從中受益的症狀通常包括造血疾病，如化學治療或放射治療導致的再生障礙性貧血、白血病、藥物誘導性貧血和造血不足，包括中性粒細胞減少和血小板減少。本發明的方法也可用於提高免疫抑制治療中以及這以後的移植的成功率，且對傷口癒合和處理細菌性炎症更加有效。本發明的方法還可用於治療免疫妥協的患者或免疫系統被削弱的患者。典型的症狀，用本發明的方法可減輕或從中受益，包括受到逆轉錄病毒感染的對象，更特別的是受到人免疫缺陷病毒(HIV)感染的對象。因此，本發明的方法可廣泛用於這些症狀，這些症狀中，對象祖細胞和/或幹細胞增加是有益的，或者，收穫祖細胞和/或幹細胞以隨後進行幹細胞移植是有益的。還可給予本發明的化合物以通過激活骨髓幹細胞而使心肌再生。
現在已經大致描述了本發明，應該理解，通過參考以下實施例將更容易理解本發明，這些實施例是以例舉方式提出的，除非特別指出，它不是要限制本發明的範圍。
實施例1製備1，1』-[1，4-亞苯基雙(亞甲基)]雙1，4，8，11-四氮雜環十四烷將1，1』-[1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-雙-三-(三氟乙醯基)-1，4，8，11-氮雜十四烷(3.30g，3.05mmol)溶於MeOH(6.0mL)。一次性加入K2CO3(1.27g，9.1mmol)。將此懸浮液加熱回流3小時。然後在冷卻的混合物中加入甲苯(30mL)。通過與甲苯形成共沸物除去MeOH。除去所有MeOH後將懸浮有無機鹽的熱甲苯溶液過濾並濃縮以得到不含鹼的AMD3100(1.32g，86％)，其為白色固體。該產品的所有特徵與按照報導的方法製備的可靠樣品良好吻合。
實施例2製備N』-(1H-苯並咪唑-2-基甲基VN』-(5，6，7，8-四氫喹啉-8-基)-丁烷-1，4-二胺 在(1-叔-丁氧羰基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-(5，6，7，8-四氫-喹啉-8-基)-胺(0.169g，0.451mmol)的CH3CN(5mL)溶液中加入二異丙基乙胺(0.25mL，1.44mmol)，然後加入4-溴代丁腈(0.10mL，1.01mmol)。所得混合物在80℃加熱5天，然後冷卻至室溫。濃縮混合物，殘餘物在CH2Cl2(20mL)和鹽水(10mL)之間分配。將各相分離，水相用CH2Cl2萃取(3×10mL)。將合併的有機提取物乾燥(Na2SO4)並濃縮。通過矽膠柱層析(30∶1∶1 CH2Cl2-CH3OH-NH4OH)純化粗物質，得到108mg(54％)黃色泡沫。
將上面得到的中間體(108mg，0.24mmol)溶於NH3飽和的甲醇(4mL)，用拉尼鎳(100mg)處理，並在50psi H2下在Parr振蕩器上放置24小時。混合物通過Celite過濾，濾餅用甲醇洗滌。減壓濃縮洗脫液。通過矽膠徑向層析(1mm板，20∶1∶1CH2Cl2-CH3OH-NH4OH)純化得到33mg(39％)不含鹼的標題化合物，其為白色泡沫。
將此白色泡沫(33mg)轉化成氫溴酸鹽，然後從甲醇/醚重新沉澱中間固體物質，得到所需化合物(40mg)，其為白色固體。1H NMR(D2O)δ1.52(br s，4H)，1.74-1.88(m，1H)，1.95-2.08(m，1H)，2.15-2.21(m，1H)，2.34-2.39(m，1H)，2.50-2.61(m，1H)，2.79-2.86(m，3H)，2.99-3.02(m，2H)，4.38(d，1H，J＝16.8Hz)，4.47-4.56(m，2H)，7.58-7.63(m，2H)，7.76-7.88(m，3H)，8.34(d，1H，J＝7.8Hz)，8.62(d，1H，J＝5.7Hz)；13C NMR(D2O)δ20.42(2碳)，25.03，25.42，27.64，39.50，48.20，51.71，60.64，114.26，125.93，126.93，131.05，139.32，140.62，148.09，150.31，151.82；ES-MS m/z 350(M+H)。C21H27N5·2.9HBr·2.2H2O的計算值C，40.44；H，5.54；N，11.23；Br，37.15。實測值C，40.38；H，5.42；N，10.85；Br，37.42。
實施例3製備N』-(1H-苯並咪唑-2-基甲基)-N』-(S)-5，，6，7，8-四氫-喹啉-8-基-丁烷-1，4-二胺(鹽酸鹽) 製備4-鄰苯二甲醯亞氨基-丁醛將4-氨基-1-丁醇(5.0g，56mmol)和鄰苯二甲酸酐(8.3g，56mmol)在20％MeOH/CHCl3(140mL)中的溶液攪拌回流66小時。將混合物冷卻至室溫並依次用水(3×75mL)和1NNaOH洗滌(3×50mL)。將分離的有機層乾燥(MgSO4)，濃縮，並通過快速層析(內徑5cm，120g矽膠，用2％MeOH/CH2Cl2洗脫)純化以得到所需的醇，其為白色固體(4.21g，34％)。
在30分鐘內，在TPAP(340mg，0.96mmol)、NMO(3.4g，29mmol)和3分子篩(10g)的CH2Cl2(100mL)漿液中邊攪拌邊逐滴加入上面得到的醇(4.2g，19mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液。加入之後將黑色漿液在氮氣下攪拌30分鐘，真空濃縮，並通過快速層析純化(內徑5cm，80g矽膠，用EtOAc洗脫)以得到純的標題化合物，其為灰色固體(3.30g，80％)。1H NMR(CDCl3)δ1.97-2.07(m，2H)，2.54(t，2H，J＝7.2Hz)，3.74(t，2H，J＝6.8Hz)，7.71-7.75(m，2H)，7.82-7.88(m，2H)，9.77(s，1H)。
採用通用方法B在二氯甲烷(150mL)中使上面得到的4-鄰苯二甲醯亞氨基-丁醛(3.21g，14.8mmol)與S-(5，6，7，8-四氫-喹啉-8-基)-胺(2.40g，16.3mmol)和NaBH(OAc)3(9.54g，45.0mmol)反應。通過快速層析(內徑5cm，200g矽膠，用5％MeOH/CH2Cl2洗脫)得到純的2°胺(2°amine)，其為白色泡沫狀固體(2.48g，48％)。
在上面得到的胺(2.5g，7.1mmol)的乙腈(70mL)溶液中加入二異丙基乙胺(1.9mL，10.7mmol)、1-叔丁氧羰基-2-氯甲基苯並咪唑(2.3g，8.6mmol)和碘化鉀(115mg，0.70mmol)。混合物在氮氣下於60℃攪拌15小時，冷卻至室溫並真空濃縮。殘餘物在氯仿(150mL)和水(100mL)之間分配。將分離的有機層乾燥(MgSO4)，濃縮，並通過快速層析(內徑5cm，120g矽膠，用CH2Cl2洗脫以除去未反應的氯化物，然後用2％MeOH/CH2Cl2洗脫以除去不需要的產物)純化以得到所需的胺，其為淡黃色泡沫狀固體(3.50g，85％)。
用一水合肼(1.80g，36mmol)處理上面得到的胺(3.33g，5.7mmol)的乙醇(30mL)溶液，攪拌3小時。然後真空濃縮混合物並通過快速層析(內徑5cm，80g矽膠，用5％MeOH/CH2Cl2洗脫)純化以得到未保護的胺，其為淡黃色泡沫狀固體(1.70g，86％)。
將上面得到的胺(1.70g，4.86mmol)溶於冰醋酸(5mL)並用HCl飽和的醋酸(5mL)處理。溶液然後室溫攪拌5分鐘，然後邊劇烈攪拌並將其緩慢滴入二乙醚(400mL)。所得漿液通過燒結玻璃漏鬥抽濾，濾餅用二乙醚洗滌(3×100mL)並在40℃的真空爐中乾燥16小時以得到所需化合物，其為白色固體(2.34g，94％)。1H NMR(D2O)δ1.46-1.63(m，4H)，1.70-1.87(m，1H)，1.97-2.07(m，1H)，2.10-2.21(m，1H)，2.28-2.38(m，1H)，2.55-2.65(m，1H)，2.81-2.90(m，3H)，2.91-3.00(m，2H)，4.30(d，1H，J＝16.3Hz)，4.41(d，1H，J＝16.3Hz)，4.42-4.48(m，1H)，7.48-7.51(m，2H)，7.70-7.75(m，3H)，8.20(d，1H，J＝8.2Hz)，8.53(d，1H，J＝4.5Hz)；13C NMR(D2O)δ20.36，20.43，21.67，24.99，25.24，27.60，39.51，48.29，51.78，60.54，114.46(2碳)，125.63，126.10(2碳)，132.53，139.58，140.16，147.34，151.41，151.81。ES-MS m/z 350(M+H)。C21H27N5·2.5HCl·2.0H2O·0.6CH3COOH的計算值C，52.01；H，7.06；N，13.66；Cl，17.29。實測值C，52.15；H，7.09；N，13.40；Cl，17.56。
通過手性HPLC採用以下條件測得該化合物的對映體純度為96.7％設備HewlettPackard 1100 HPLC(VWD1)；柱Chiralpak OD，0.46cm×25cm；流動相A90∶10己烷/異丙醇，含0.1％DEA，B異丙醇；等度洗脫90％A，10％B；總運行時間20分鐘；流速0.5毫升/分鐘；溫度10℃；檢測器UV@270nm；進樣體積20μL。
S對映體的保留時間＝16.3分鐘，R對映體的保留時間＝21.9分鐘。
實施例4試驗過程如之前的描述(Pelus，L.M.等，Blood(2001)971534-1542；Blood(2004)103110-119)。AMD3100是1，1』-[1，4-亞苯基-雙(亞甲基)]-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷。
與單獨使用的AMD3100或GROβ相比，AMD3100和GROβ的組合對外周血的活化作用活化作用(mobilization)試驗在BALB/c小鼠(每組3隻小鼠)中進行。就單獨使用AMD3100或GROβ進行活化而言，在之前的試驗中，PBSC活化作用是在任何一種試劑的活化作用峰值處測量(quantify)的。因此，PBSC活化作用是在皮下注射2.5mg/kg GROβ15分鐘後以及皮下注射5mg/kg AMD3100 1小時後測量的。
在組合物試驗中，PBSC活化作用是在皮下注射一次2.5mg/kg GROβ(R DSystems)(用鹽水配製)和5mg/kg AMD3100後5、15、30、60和150分鐘時測量的。在不同的皮下位置分別並同時注射化合物。注射是預定的，因此在每次試驗中可同時評價對照小鼠和活化了的小鼠。用CO2窒息殺死小鼠並用塗有EDTA(乙二胺四乙酸)的注射器通過心臟穿刺獲得血液。在Lympholyte-M(Cedarlane Labs，Hornby，ON，加拿大)上分離外周血(0.4mL)以獲得PBMC。在Hemavet Mascot(CDC Technologies，Oxford，CT)上進行全血細胞計數(CBC)。在Wright-Giemsa染色的(Hema-Tek 1000，Bayer，Elkhart，IN)血塗片或脾和骨髓細胞離心塗片(cytospin)標本(Shandon，Pittsburgh，PA)上進行手工區分。
CFU-GM測定在含有15％熱滅活胎牛血清(Hyclone Sterile Systems，Logan，UT)和0.3％瓊脂(Difco Laboratories，Detroit，MI)的McCoy 5A培養基中對PBMC進行的CFU-GM測定。將PBMC培養到2×105/mL。用10ng/mL重組鼠GM-CSF(rmGM-CSF)、10ng/mLrmIL-1α和50ng/mL幹細胞因子(SCF)刺激CFU-GM。將來自各動物的一式三份培養物在37℃、5％CO2、5％O2的空氣中培育7天。將CFU頻率乘以每毫升血液的PBMC(按Lympholyte-M分離後白細胞(WBC)的回收率校正)得到測定每毫升血液中的總CFU-GM。
表1

表2外周血區分總結

如表1和2所示，與單獨使用AMD3100和GROβ相比，它們的組合以協同方式活化祖細胞、中性白細胞和所有的白細胞；且反應更加迅速。
應該理解，上面的詳細描述和有關實施例只是為了例證而不是要限制本發明的範圍。精通本領域的技術人員顯然可對所述實施方案作出各種變化和修飾而不背離本發明的精神和範圍。這裡提及的美國專利和公開通過引用納入本文。
權利要求
1.一種升高外周血或骨髓中祖細胞和/或幹細胞數目的方法，所述方法包括用CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白處理所述外周血或骨髓；其用量可有效升高所述外周血或骨髓中的所述祖細胞和/或幹細胞數目。
2.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述GROβ蛋白是GROβ蛋白的修飾形式。
3.如權利要求2所述的方法，其特徵在於，所述修飾形式是SB-251353。
4.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述CXCR4拮抗劑具有下式Z-連接基-Z1(1)或其藥學上可接受的鹽或前藥形式其中，Z是含有9-32個環成員的環狀多胺，其中有2-8個是氮原子，所述氮原子被至少2個碳原子相互分隔，且其中所述雜環可任意含有氮原子以外的其它雜原子和/或可以和其它的環系統稠合；或Z具有式 其中，A包含含有至少一個N的單環或雙環稠環系統，且B是H或有1-20個原子的有機部分，Z』可以按上面Z定義的形式，或者可具有式-N(R)-(CR2)n-X其中，各R獨立為H或直鏈、支鏈或環狀烷基(1-6C)，n是1或2，X是芳環，包括雜芳環，或是硫醇；或其中，Z』可以是含氮雜環或NR2，其中各R如上面的定義；「連接基」代表鍵、亞烷基(1-6C)或者可包括芳基、稠芳基、和/或包含在亞烷基鏈中的氧原子，和/或可包括酮基和/或氮原子或硫原子；或其前藥或鹽。
5.如權利要求4所述的方法，其特徵在於，至少Z和Z』之一是環狀多胺。
6.如權利要求5所述的方法，其特徵在於，Z和Z』是相同的。
7.如權利要求6所述的方法，其特徵在於，所述(1)的化合物是1，1』-[1，4-亞苯基-雙-(亞甲基)-雙-1，4，8，11-四氮雜環十四烷或其前藥或鹽。
8.如權利要求4所述的方法，其特徵在於，所述化合物是N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基-甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-N-甲基-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-4-(氨基-甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-3-(氨基-甲基)吡啶；N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-(2-氨基-甲基-5-甲基)吡嗪；和N-[1，4，8，11-四氮雜環十四烷基-1，4-亞苯基雙(亞甲基)]-2-(氨基-乙基)吡啶；或其前藥或鹽。
9.如權利要求4所述的方法，其特徵在於，或Z具有式 其中，A包含含有至少一個N的單環或雙環稠環系統，且B是H或有1-20個原子的有機部分。
10.如權利要求9所述的方法，其特徵在於，所述式(1)的化合物是N』-(1H-苯並咪唑-2-基甲基)-N』-(5，6，7，8-四氫喹啉-8-基)-丁烷-1，4-二胺，或其前藥或鹽。
11.如權利要求4所述的方法，其特徵在於，式(1)為其酸加成鹽的形式。
12.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述外周血細胞或骨髓含在活的對象中。
13.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述對象由於化療或放療而出現造血不足。
14.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述對象具有選自再生障礙性貧血、白血病、藥物誘導性貧血、嗜中性白血球減少症和血小板減少症的症狀。
15.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述對象是移植術接受者或是健康的幹細胞供體。
16.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述祖細胞和/或幹細胞加快傷口癒合、或者改善細菌性炎症、或者恢復受損的心臟組織或其它器官組織。
17.如權利要求16所述的方法，其特徵在於，所述祖細胞和/或幹細胞恢復受損的心臟組織。
18.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述CXCR4拮抗劑或GROβ蛋白通過靜脈內或皮下途徑給予所述對象。
19.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白是同時給予的。
20.如權利要求12所述的方法，其特徵在於，所述CXCR4拮抗劑和所述GROβ蛋白是先後給予的。
21.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述外周血或骨髓維持在離體培養物中。
22.一種含有CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白的組合產品。
23.如權利要求22所述的組合產品，其特徵在於，所述組合能夠升高外周血或骨髓中的祖細胞和/或幹細胞數目。
24.一種藥物組合物，其含有權利要求22所述的組合產品和藥學上可接受的賦形劑。
25.一種藥物組合物，其含有有效量的CXCR4拮抗劑和GROβ蛋白。
26.如權利要求25所述的藥物組合物，用於升高外周血或骨髓中的祖細胞和/或幹細胞數目。
全文摘要
公開了用與趨化因子受體CXCR4結合的化合物和CXCR2趨化因子GROβ(包括其修飾形式)升高動物對象中祖細胞和幹細胞數的方法。
文檔編號A61K38/16GK101094684SQ200580032332
公開日2007年12月26日 申請日期2005年8月11日 優先權日2004年8月13日
發明者G·J·布裡傑, L·M·佩魯斯 申請人:阿諾麥德股份有限公司