檢測抗體和抗原的免疫測定裝置的製作方法

2023-09-14 09:37:40 2

專利名稱：檢測抗體和抗原的免疫測定裝置的製作方法
檢測抗體和抗原的免疫測定裝置
背景技術：
I.現有和相關申請
本申請要求2009年2月16日提交的美國臨時申請號61/338，303和2010年12月10日提交的美國序列號12/965，258的優先權。2.發明領域
本發明廣泛地涉及免疫測定裝置及其使用方法。更具體而言，本發明涉及用於檢測體液中的配體的快速層析測試條帶。甚至更具體地，本發明涉及「第四代檢測」，其可以用於臨床診斷目的同時檢測抗原和抗體。3.現有技術
已有多種配體-受體測定法被應用於檢測體液，如血液、尿液或唾液中是否存在通常稱為配體的各種物質。這些測定法涉及抗原抗體反應，包含放射性、酶、螢光或肉眼可見的聚苯乙烯或金屬溶膠標記在內的合成綴合物，以及專門設計的反應室。在所有這些測定法中，都具有受體，例如對所選配體或抗原具特異性的抗體，以及用於檢測所述配體-受體反應產物是否存在、一些情況下檢測其含量的工具。一些測試設計成用來進行定量測定，但在多數情況下所需要的只是陽性/陰性的定性指示。這種定性測定法的實例包括血型檢測、大多數種類的尿檢、驗孕、以及AIDS檢測。對於這些測試來說，優選肉眼可見的指示物，例如存在凝集現象或者顏色改變。即使是定性測定也必須非常靈敏，因為通常測試流體中感興趣的配體的濃度很小。假陽性也很麻煩，特別是利用凝集反應和其它快速檢測法例如浸潰條(dipstick )和變色測試的情況下。由於這些問題，人們已經開發出了所謂的「夾心」測定法和採用金屬溶膠或其它種類有色顆粒的其它靈敏檢測機制。在「夾心」測定法中，目標分析物例如抗原「夾在」標記抗體和固定在固相載體上的抗體之間。通過觀察結合抗原-標記抗體複合物的存在和/或含量讀取所述測定結果。在「竟爭性」免疫測定法中，將結合到固相表面上的抗體與含有未知量抗原分析物的樣品以及相同種類的標記抗原相接觸。然後測定結合到固相表面上的標記抗原含量以提供對樣品中抗原分析物含量的間接測定結果。由於這些和其它測定法既可檢測抗體也可檢測抗原，故其通常稱為免疫化學配體-受體測定法或者簡稱為免疫測定法。固相免疫測定裝置，無論是夾心還是竟爭型的，均可提供對生物流體樣品，如血液、尿液或唾液中的分析物的靈敏檢測。固相免疫測定裝置包括固相載體，其結合有配體-受體對的一個成員，通常是抗體、抗原或半抗原。固相載體的早期通用形式有平板、試管、或聚苯乙烯珠，它們是放射性免疫測定和酶免疫測定領域公知的。近十年來，採用了許多多孔材料作為固相載體，例如尼龍、硝酸纖維素、醋酸纖維素、玻璃纖維以及其它的多孔聚合物。已經記載了許多利用多孔材料作為免疫化學成分，如抗原、半抗原或抗體的固相載體的設備齊全的(self-contained)免疫測定試劑盒。這些試劑盒通常設計成浸潰式、流通式、或者遷移式。 在浸潰條測定的更通用形式中，典型的有家用懷孕和排卵檢測試劑盒，是將免疫化學成分，例如抗體結合在固相上。將該測定裝置「浸入」懷疑含有未知抗原分析物的樣品中以進行孵育。然後同時或者在孵育一段時間之後加入酶標記抗體。然後洗滌該裝置並插入含有所述酶的底物的第二種溶液。如果存在的話，酶標記與所述底物相互作用，引起有色產物形成，它們要麼作為沉澱物沉積到所述固相上，要麼在所述底物溶液中產生可見的顏色變化。流通(flow-thixnigh)式免疫測定裝置設計成無需進行浸潰條測定法相關的大量孵育步驟和繁瑣的洗滌步驟。Valkris等人的美國專利US 4632901中公開了一種裝置，其包括結合到施加液態樣品的多孔膜或濾片上的抗體(對目標抗原分析物有特異性)。隨著液體流過所述膜，目標分析物與抗體結合。加入樣品後接著加入標記抗體。對標記抗體的可見檢測提供樣品中目標抗原分析物是否存在的指示。Korom等人的EP-A0299359公開了一種流通裝置的變形方式，其中用作試劑輸送系統的膜中加入了標記抗體。浸潰條和流通式免疫測定裝置對於多個加樣和洗滌步驟的需要增加了低訓練程度的個人和家庭用戶得到錯誤測定結果的可能性。在遷移式測定中，用需要進行測定的試劑浸潰膜。設置分析物檢測區，在其中結合有標記的分析物並讀取測定標記。例如，參見Tom等人的美國專利US 4366241和Zuk等人的US 4596275。然而，由於樣品中存在或形成了不希望有的固體成分，其阻斷了標記分析物通往檢測區的通道，因而經常降低了遷移式測定的靈敏度。遷移式測定裝置內通常包含已連接到有色標記上的試劑(即綴合物)，從而可以不用添加其它的物質就能夠可見性地檢測到測定結果。例如，參見Bernstein的美國專利US 4770853。這些標記有金溶膠顆粒，例如Leuvering在美國專利US 4313734中所述，染色溶膠顆粒，如Gribnau等人在美國專利US4373932中所述，染色乳膠，如May等人的WO88/08534中所述，以及脂質體包裹的染料，如Campbell等人的US 4703017中所述。這些有色標記通常受到合適固定方法的限制。而且，它們需要相對大量的配體分子並涉及昂貴的試劑，因而增加了成本。最近，引入了「第四代」快速檢測免疫測定裝置。所述「第四代」裝置旨在同時檢測具體疾病的抗原和抗體。然而，所述「第四代」裝置面臨著與前述裝置相同的問題。發明簡述
本發明提供了一種第四代快速檢測免疫測定裝置，其中所述分析物沿著與攜帶綴合物的緩衝液不同的路徑遷移。本發明的免疫測定裝置是高靈敏度的並且使用小體積樣品也可提供準確結果。本發明的裝置可用於不同種類的體液並且可與多種不同疾病的檢測聯合使用。上述這些目的在下文將進行詳細論述，據此提供了乾燥和液態綴合物免疫測定裝置系統。本發明的系統包括測試單元，所述測試單元具有接收緩衝溶液的第一緩衝液接收部位；和第一吸收性材料，其限定第一緩衝溶液的第一水平流動通道；第二吸收性材料，其限定不同於所述第一水平流動通道的第二水平流動通道，用於提供給第一緩衝液接收部位或第二緩衝液接收部位的相同或不同緩衝溶液；第三吸收性材料，其限定用於樣品接收部位處的樣品的第三水平流動通道，所述第三水平流動通道不同於所述第一和第二水平流動通道，用於樣品接收部位處的樣品的第四流動通道，所述第四水平流動通道不同於所述第一、第二和第三水平流動通道；位於第一和第三吸收性材料接合處的第一測試區具有固定抗原或抗體之一的第一測試線或測試部位；以及位於第二和第四吸收性材料接合處的第二測試區具有固定抗原或抗體的另一種的第二測試線或測試部位。用於本發明的目的，當術語「不同的」與詞語「流動通道」或「遷移路徑」結合使用時，應被理解為是指「沒有液體流通，除非(i)經由測試區，或者(ii)在緩衝液接收或樣品接收部位」。在本發明的測試單元設置在一殼體中的情況下，所述殼體具有鄰近所述第一緩衝液接收部位的第一開口和鄰近所述樣品接收部位的樣品接收開口。當採用第二緩衝液接收部位時，所述殼體具有鄰近所述第二緩衝液接收部位的第二緩衝液接收開口。在第一測試線上方的殼體上設有第一視窗，在第二測試線上方的殼體上設有第二視窗。在本發明的優選實施方式中，所述第三吸收性材料和第四吸收性材料是連接在一個樣品接收墊上的分開件。可替代性地，如果需要，所述第三和第四吸收性材料可以彼此整合在一起。在本發明的優選實施方式中，所述第一吸收性材料和第二吸收性材料也可以是·連接在相同緩衝液接收墊或兩個不同緩衝液接收墊上的分開件。然而，如果需要，在採用一個緩衝液接收墊的實施方式中，所述第一和第二吸收性材料可以彼此整合在一起。在優選的實施方式中，具有與每個測試部位相鄰的對照線或部位。在本發明的一種實施方式中，所述第一、第二、第三和第四吸收性材料的材質、厚度和長度可以進行選擇以調節液態樣品和液態緩衝液到達所述測試部位的時間。在本發明的乾燥綴合物系統中，第一乾燥綴合物設置在第一開口和測試部位之間。所述第一乾燥綴合物載於所述第一吸收性材料的上面或內部，使得當緩衝液加入第一開口時，第一吸收性材料將緩衝液芯吸到第一綴合物上，然後由緩衝液攜帶到第一測試部位。所述第二乾燥綴合物同樣載於所述第二吸收性材料的上面或內部，使得當緩衝液加入第一或第二 (如果有)開口時，所述第二吸收性材料將緩衝液芯吸到第二綴合物上，然後由緩衝液攜帶到第二測試部位。在本發明的液態綴合物系統中，設置有第一緩衝液-綴合物液態子系統，將其施加到第一開口。然後所述第一吸收性材料將第一緩衝液-綴合物子系統芯吸到第一測試部位。設置有第二緩衝液-綴合物液態子系統，將其施加到第二開口。然後所述第二吸收性材料將第二緩衝液-綴合物子系統芯吸到第二測試部位。應當明白的是，本發明的系統可以與不同種類的樣品，例如血液、尿液、唾液以及糞便聯合使用，並可用於測試任何配體的存在。在應用血液、唾液或糞便的情況下，可以在將其加入樣品接收開孔之前先將所述血液、唾液或糞便進行稀釋或與緩衝液混合。或者，在一些情況下，可以將所述樣品加入樣品接收開孔，然後再將稀釋液加入同一孔中。本發明的測試單元優於現有技術，因為本發明的測試單元克服了綴合物和樣品中的分析物之間的聚集/凝集問題，這在針對較大分析物如細菌或聚合病毒的傳統層析免疫測定中是個大問題。特別是在傳統的層析免疫測定中，細菌和綴合抗體之間的複合物難以遷移到測試線並容易滯留在測試條帶的底部或襯墊內。本發明中在樣品到達測試部位之前分析物和綴合物之間沒有複合物結合，因為所述分析物是通過其自身的通道施加到測試部位的，而綴合物也獨自遷移。這樣，本發明的系統極其靈敏和具有特異性。對於本領域技術人員來說，參考詳細說明並結合所提供的附圖，本發明的其它目的和優點將更加顯而易見。附圖簡述
圖I是本 發明第一種實施方式的頂視圖。圖IA是圖I的第一種實施方式的抗體測試部分的示意圖。圖IB是圖I的第一種實施方式的抗原測試部分的示意圖。圖2是包含在殼體內的本發明的第一種實施方式的頂視圖。圖3是本發明第二種實施方式的頂視示意圖。圖4是包含在殼體內的本發明的第二種實施方式的頂視圖。圖5是適用於測試登革熱抗體和抗原並且包含在殼體內的本發明的第二種實施方式的頂視圖。圖6是適用於測試愛滋病毒和結核抗體和抗原並且包含在殼體內的本發明的第二種實施方式的頂視圖。圖7是適用於測試多個抗體和抗原並且包含在殼體內的本發明的第二種實施方式的頂視圖。優選實施方式詳述
現參見

圖1、1A和1B，提供了第四代免疫測定測試裝置410。測試裝置410被示為用於測試HIV 1/2抗體和P24抗原的測試裝置(S卩，其為HIV檢測裝置)，但如下文相對於圖5-7所討論的，使用本發明，可以提供許多其它類型的抗體/抗原測試。如所示，測試裝置410包括限定第一、第二、第三和第四水平流動通道的第一吸收性或吸水性材料412a、第二吸收性或吸水性材料412b、第三吸收性或吸水性材料414a和第四吸收性或吸水性材料414b。第一吸收性材料412a優選地包括最少兩個且優選地三個或四個區域並且可以由數種材料製成。第一區域431a (有時稱為過濾區)位於條帶412a的第一端並且延伸至位於與第二吸收性材料414a的接合處的第二區域433a (有時稱為測試區)。第一區域431a可以由附接的過濾器(未示出)組成或具有附接的過濾器，並且可以具有含所需抗原(例如蛋白質A)的綴合物439a，並且附接的有色標記物沉積並固定於其上或者沉積並固定在其所附接的綴合物墊(未示出)上。第一吸收性材料可以由吸收性或吸水性材料的薄膜組成，所述吸收性或吸水性材料的薄膜一般由硝化纖維與塑料背襯(未示出)製成。第一區域431a適用於接收緩衝溶液，以使緩衝溶液接觸該綴合物，從而使該綴合物移動，並且將攜帶綴合物的緩衝溶液芯吸至第二區域433a。第二(測試)區域433a包括該薄膜的第二部分，該第二部分優選地被印有測試線450a (圖1A)，所述測試線450a具有固定在該膜上的如本領域熟知的抗原。包括薄膜的第三部分的任選的第三區域435a (有時稱為對照區)也可以被印有對照線460a (圖1A)，所述對照線460a —般含有如本領域熟知的綴合物抗原的抗體。如果需要，則可以提供任選的第四區域437a (有時稱為儲液區)作為也如本領域熟知的芯吸儲液庫。第四區域437a可以包括相對較厚的吸收性紙(未示出)。優選地，所有區域的底層和/或覆蓋物是具有將吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄的、優選透明的塑料膜或卡片(未示出)。該卡片可以在條帶412a的端部被切割出開口以使得其不阻斷液體進入第一吸收性條帶412a。第二吸收性材料412b同樣優選地包括至少兩個且優選地三個或四個區域並且同樣可以由數種材料製成。第一區域431b (有時稱為過濾區)位於條帶412b的第一端並且延伸至位於與第二吸收性材料414b的接合處的第二區域433b (有時稱為測試區)。第一區域431b可以由附接的過濾器(未示出)組成或具有附接的過濾器，並且可以具有含所需抗體的綴合物43%，並且附接的有色標記物沉積並固定於其上或者沉積並固定在其所附接的綴合物墊(未示出)上。第一吸收性材料可以由吸收性或吸水性材料的薄膜組成，所述吸收性或吸水性材料的薄膜一般由硝化纖維與塑料背襯(未示出)製成。第一區域431b適用於接收緩衝溶液，以使緩衝溶液接觸該綴合物，從而使該綴合物移動，並且將攜帶綴合物的緩衝溶液芯吸至第二區域433b。第二(測試)區域433b包括該薄膜的第二部分，該第二部分優選地被印有測試線450b (圖1B)，所述測試線450b具有固定在該膜上的如本領域熟知的P24抗體。包括薄膜的第三部分的任選的第三區域435b (有時稱為對照區)也可以被印有對照線460b (圖IB)，所述對照線460b —般含有如本領域熟知的抗小鼠抗體(如果綴合物439使用小鼠抗體)。如果需要，則任選的第四區域437b (有時稱為儲液區)可以被提供作為也如本領域熟知的芯吸儲液庫。第四區域437b可以包括相對較厚的吸收性紙(未示出)。優選地，所有區域的底層和/或覆蓋物是具有將吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄的、優選透明的塑料膜或卡片(未示出)。該卡片可以在條帶412b的端部被切割出開口以使得其不阻斷液體進入第一吸收性條帶412b。
第三吸收性材料414a也可以由數種材料製成並且優選地包括兩個區域461a、463a。第一區域461a (有時稱為過濾區)可以包括過濾器或襯墊(未示出)以及一般由硝化纖維與背襯(未示出)製成的薄膜或吸收性或吸水性材料的第一部分。第一區域461a旨在在其第一端處接收樣品並且第一區域延伸至第二區域463a。第二區域463a包括與第一吸收性材料412a的第二區域433a接觸的薄膜的第二部分。如圖I和IA表明，第一吸收性材料412a和第三吸收性材料414a被布置成使得所述膜彼此接觸(它們形成接合部)，使得測試線450a有效地位於所述膜之間(而非背襯接觸所述膜或彼此接觸)。因此，測試線450a可以印在第三吸收性材料414a的第二區域463a上，而非第一吸收性材料412a的第二區域433a上；或者在第一吸收性材料412a的第二區域433a以外，測試線450a還印在第三吸收性材料414a的第二區域463a上。如果需要，可以使用具有將第三吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄塑料膜或卡片(未示出)。第四吸收性材料414b也可以由數種材料製成並且優選地包括兩個區域461b、463b。第一區域461b (有時稱為過濾區)可以包括過濾器或襯墊(未示出)以及一般由硝化纖維與背襯(未示出)製成的薄膜或吸收性或吸水性材料的第一部分。第一區域461b旨在在其第一端處接收樣品並且第一區域延伸至第二區域463b。第二區域463b包括與第二吸收性材料412b的第二區域433b接觸的薄膜的第二部分。如圖I和IB表明，第二吸收性材料412b和第四吸收性材料414b被布置成使得所述膜彼此接觸(而非背襯接觸所述膜或彼此接觸)，並且使得測試線450b有效地位於所述膜之間。因此，測試線450b可以印在第四吸收性材料414b的第二區域463b上，而非第二吸收性材料412b的第二區域433b上；或者在第二吸收性材料412b的第二區域433b以外，測試線450b還印在第四吸收性材料414b的第二區域463b上。如果需要，可以使用具有將第三吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄塑料膜或卡片(未示出)。在吸收性材料412a、412b、414a、414b由標準型硝化纖維膜與背襯製成的情況下，期望樣品遷移和緩衝液綴合物遷移膜具有不同的孔徑。例如，如果條帶412a (用於綴合物遷移)具有3μ的孔徑，並且膜414a (用於樣品遷移)具有15μ的孔徑，則施加於膜414a的樣品將傾向於遷移並停留在樣品膜414a中並且將不傾向於遷移至綴合物膜412a中。此夕卜，可能期望的是膜412a和412b具有不同的孔徑。因此，例如，攜帶抗體綴合物的膜可能大於攜帶抗原綴合物的膜。如圖I中所見，四種吸收性材料呈現出"H"形，其中第一和第二吸收性材料形成"H"的兩側，而第三和第四吸收性材料形成〃H〃的中間橫臂。應了解，四種吸收性材料可以以其它排列方式來布置。參見圖2，應了解，圖1、1A和IB的測試裝置410可以被設置在殼體470的內部。殼體470具備用於接收樣品(和緩衝液，如果需要的話)的樣品接收開孔471和兩個緩衝液接收開孔472a、472b。開孔471直接位於吸收性條帶414a、414b的第一區域461a、461b上方，使得沉積在開孔471中的樣品將流動至吸收性條帶414a和414b上。同樣地，開孔472a和472b直接位於吸收性條帶412a、412b的第一區域431a、431b上方，使得沉積在開孔472a、472b中的緩衝液將流動至各自吸收性條帶412a、412b上。另外，殼體470具備窗口475a、475b。窗口 475a、475b分別位於測試線450a、450b上方，使得測試線可以透過所述窗 口可見。如果需要，則所述窗口可以由透明塑料組成。在提供了第三區域435a、435b的情況下，窗口 475a、475b優選地延伸至各自對照線460a、460b上方。應理解，因為將向吸收性材料414a、414b提供相同樣品，所以吸收性材料414a、414b任選地可以由單片(整片)材料製成。如果需要，則可以提供樣品接收墊(未示出)以接收該樣品並將該樣品提供給組成吸收性材料414a和414b的單片材料或各片材料。圖I的免疫測定410優選地按以下使用。首先，可能含有抗體和/或抗原的所需量的樣品(例如10微升，未示出)被提供至第三和第四吸收性材料414a、414b (通過開孔471，如果使用殼體470的話)並且被允許通過第三和第四吸收性材料414a、414b而遷移至其各自的第二區域463a、463b，所述第二區域463a、463b分別與第一和第二吸收性材料412a、412b的第二區域433a、433b接觸。任選地，在將樣品提供至第三和第四吸收性材料之後，可以將優選被測的量的液體例如緩衝溶液加入(通過開孔471，如果使用殼體470的話)以幫助樣品的遷移。所加緩衝液的量可能取決於所用樣品的類型(例如血液、尿液、唾液等等)。無論如何，樣品到達測試線450a、450b，所述測試線450a、450b被印在第一和第二吸收性材料的第二區域433a、433b的頂上或者被輸注於其中。在所需量的時間之後，此時樣品中的HIV抗體(如果存在)有機會與固定在測試線450a上的HIV抗原結合以及樣品中的HIV抗原(如果存在)有機會與固定在測試線450b上的HIV P24抗體結合，將優選被測的量的液體例如緩衝溶液(未示出)加入第一和第二吸收性材料412a、412b (通過開孔472a、472b，如果使用殼體470的話)。應注意，可以通過各個開孔添加不同類型的緩衝溶液，從而允許優化該系統的敏感度。在足以允許綴合物439a、439b遷移至測試部位450a、450b (和對照部位460a、460b，如果提供的話)的另一段時間之後，檢查(通過窗口 475a、475b，如果使用殼體470的話)測試部位450a、450b (和對照部位460a、460b，如果提供的話)以便確定樣品是否為「陽性」。通常，當測試部位450a和對照部位460a均顯示有色的線時，獲得指示樣品中存在HIVl或HIV2抗體的「陽性」測試。當僅對照部位460a顯示有色的線時，獲得指示樣品中缺少抗體存在的「陰性」測試。類似地，在測試部位450b和對照部位460b均顯示有色的線的情況下獲得指示樣品中存在HIV P24抗原的「陽性」測試，而當僅對照部位460b顯示有色的線時獲得指示樣品中缺少P24抗原存在的「陰性」測試。通過向殼體470提供編號和/或字母來指示開孔471是用於接收樣品(和任選地某些緩衝液)且將被首先使用，以及指示開孔472a、472b是用於接收緩衝溶液且將被其次地使用，可以促進本發明的方法。本領域技術人員將理解免疫測定410起到以下作用。因為測試線450a具有固定在膜上的抗原，所以如果測試樣品含有該抗原的抗體，則該抗體將在測試線上使其自身與抗原結合。此後，當使含有與有色標記物連接的抗體的抗原的綴合物439a遷移至測試線時，如果測試樣品含有目前保持在測試線450a上的抗體，則該綴合物的抗原將使其自身與抗體結合併且該有色標記物將導致在測試部位450a處顯現有色線。如果測試樣品不含有抗體，則該綴合物將不具有用於在測試線450a處結合的抗體，並且在測試部位450a處將沒有有色線顯現。另一方面，因為對照線460a具有抗體，該綴合物的抗原將總是與對照線460a·中的抗體結合，從而如果綴合物到達對照部位460a處則導致在對照部位460a處顯現有色線。因此，如果向測試單元提供足夠緩衝溶液，則應該總是在對照部位460a處顯現有色線，從而提供用於該測試的對照。類似地，因為測試線450b具有固定在膜上的抗體，所以如果測試樣品含有該抗體的抗原，則該抗原將在測試線450b上使其自身與抗體結合。此後，當使含有與有色標記物連接的該抗原的抗體的綴合物43%遷移至測試線時，如果測試樣品含有目前保持在測試線450b上的抗原，則該綴合物43%的抗原將使其自身與抗原結合併且該有色標記物將導致在測試部位450b處顯現有色線。如果測試樣品不含有抗原，則該綴合物將不具有用於在測試線450b處結合的抗原，並且在測試部位450b處將沒有有色線顯現。另一方面，因為對照線460b具有經選擇與該綴合物中抗體類型相同的所選抗體(例如小鼠抗體)，所以該綴合物的抗體將總是在對照線460b中與所選抗體結合，從而如果該綴合物到達對照部位460b處則導致在對照部位460b處顯現有色線。因此，如果向測試單元提供足夠緩衝溶液，則應該總是在對照部位460b處顯現有色線，從而提供用於該測試的對照。根據本發明的其它實施方式，而未在測試單元中(例如在吸收性材料412a、412b上)提供具有連接有色標記物的所需抗原或抗體的乾燥綴合物沉積物439a、439b，該測試單元完全不包括乾燥綴合物。相反，使用(溼)緩衝液綴合物子系統。因此，在樣品已沉積在吸收性材料414a、414b上之後，第一緩衝液_綴合物子系統(採用與抗原的綴合物加緩衝液)被沉積在吸收性材料412a上並被允許遷移至測試線450a，而第二緩衝液-綴合物子系統(採用含抗體的綴合物加緩衝液)被沉積在吸收性材料412b上並且被允許遷移至測試線450b。根據本發明的另一實施方式，在殼體的底部提供窗口，而非將視窗提供在殼體的頂部中。現轉到圖3，參見本發明的另一實施方式。如所示，測試裝置510包括限定第一、第二、第三和第四水平流動通道的第一吸收性或吸水性材料512a、第二吸收性或吸水性材料512b、第三吸收性或吸水性材料514a和第四吸收性或吸水性材料514b。第一吸收性材料512a優選地包括最少兩個且優選地三個或四個區域並且可以由數種材料製成。第一區域531a (有時稱為過濾區)位於條帶512a的第一端並且延伸至位於與第二吸收性材料514a的接合處的第二區域533a (有時稱為測試區)。第一區域531a可以由附接的過濾器(未示出)組成或具有附接的過濾器，並且可以具有含所需抗原(例如蛋白質A)的綴合物539a，並且附接的有色標記物沉積並固定於其上或者沉積並固定在其所附接的綴合物墊(未示出)上。第一吸收性材料可以由吸收性或吸水性材料的薄膜組成，所述吸收性或吸水性材料的薄膜一般由硝化纖維與塑料背襯(未示出)製成。第一區域531a適用於接收緩衝溶液，以使緩衝溶液接觸該綴合物，從而使該綴合物移動，並且將攜帶綴合物的緩衝溶液芯吸至第二區域533a。第二(測試)區域533a包括該薄膜的第二部分，該第二部分優選地被印有測試線550a (圖4)，所述測試線550a具有固定在該膜上的如本領域熟知的抗原。包括薄膜的第三部分的任選的第三區域535a (有時稱為對照區)也可以被印有對照線560a(圖4)，所述對照線560a通常含有如本領域熟知的綴合物抗原的抗體。如果需要，則任選的第四區域537a (有時稱為儲液區)可以被提供作為也如本領域熟知的芯吸儲液庫。第四區域537a可以包括相對較厚的吸收性紙(未示出)。優選地，所有區域的底層和/或覆蓋物是具有將吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄的、優選透明的塑料膜或卡片(未示出)。該卡片可以在條帶512a的端部被切割出開口以使得其不阻斷液體進入第一吸收性條帶512a。
第二吸收性材料512b同樣優選地包括至少兩個且優選地三個或四個區域並且同樣可以由數種材料製成。第一區域531b (有時稱為過濾區)位於條帶512b的第一端並且延伸至位於與第二吸收性材料514b的接合處的第二區域533b (有時稱為測試區)。第一區域531b可以由附接的過濾器(未示出)組成或具有附接的過濾器，並且可以具有含所需抗體的綴合物53%，並且附接的有色標記物沉積並固定於其上或者沉積並固定在其所附接的綴合物墊(未示出)上。第一吸收性材料可以由吸收性或吸水性材料的薄膜組成，所述吸收性或吸水性材料的薄膜一般由硝化纖維與塑料背襯(未示出)製成。第一區域531b適用於接收緩衝溶液，以使緩衝溶液接觸該綴合物，從而使該綴合物移動，並且將攜帶綴合物的緩衝溶液芯吸至第二區域533b。第二(測試)區域533b包括該薄膜的第二部分，該第二部分優選地被印有測試線550b (圖4)，所述測試線550b具有固定在該膜上的如本領域熟知的P24抗體。包括薄膜的第三部分的任選的第三區域535b (有時稱為對照區)也可以被印有對照線560b (圖4)，所述對照線560b通常含有如本領域熟知的抗小鼠抗體。如果需要，則任選的第四區域537b (有時稱為儲液區)可以被提供作為也如本領域熟知的芯吸儲液庫。第四區域537b可以包括相對較厚的吸收性紙(未示出)。優選地，所有區域的底層和/或覆蓋物是具有將吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄的、優選透明的塑料膜或卡片(未示出)。該卡片可以在條帶512b的端部被切割出開口以使得其不阻斷液體進入第一吸收性條帶512b。應了解，第一和第二吸收性材料512a、512b經成型具有使得它們可以相接的曲線或角度。如下文所述，這允許緩衝液(或緩衝液加綴合物的亞複合體)被加入單個位置，而非如參考圖I和圖2描述的兩個位置。因此，吸收性材料514a、514b任選地由單片(整片)材料製成。第三吸收性材料514a也可由數種材料製成並且優選地包括兩個區域561a、563a。第一區域561a (有時稱為過濾區)可以包括過濾器或襯墊(未示出)以及一般由硝化纖維與背襯(未示出)製成的薄膜或吸收性或吸水性材料的第一部分。第一區域561a旨在在其第一端處接收樣品並且第一區域延伸至第二區域563a。第二區域563a包括與第一吸收性材料512a的第二區域533a接觸的薄膜的第二部分。如圖3表明，第一吸收性材料512a和第三吸收性材料514a被布置成使得所述膜彼此接觸(而非背襯接觸所述膜或彼此接觸)，並且使得測試線550a有效地位於所述膜之間。因此，測試線550a可以被印在第三吸收性材料514a的第二區域563a上，而非印刷在第一吸收性材料512a的第二區域533a上；或者在第一吸收性材料512a的第二區域533a之外，測試線550a還印在第三吸收性材料514a的第二區域563a上。如果需要，可以使用具有將第三吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄塑料膜或卡片(未示出)。第四吸收性材料514b也可以由數種材料製成並且優選地包括兩個區域561b、563b。第一區域561b (有時稱為過濾區)可以包括過濾器或襯墊(未示出)以及一般由硝化纖維與背襯(未示出)製成的薄膜或吸收性或吸水性材料的第一部分。第一區域561b旨在在其第一端處接收樣品並且第一區域延伸至第二區域563b。第二區域563b包括與第二吸收性材料512b的第二區域533b接觸的薄膜的第二部分。如圖I和IB表明，第二吸收性材料512b和第四吸收性材料514b被布置成使得所述膜彼此接觸(而非背襯接觸所述膜或彼此接觸)，並且使得測試線550b有效地位於所述膜之間。因此，測試線550b可以印在 第四吸收性材料514b的第二區域563b上，而非第二吸收性材料512b的第二區域533b上；或者在第二吸收性材料512b的第二區域533b之外，測試線550b還可以印刷在第四吸收性材料514b的第二區域563b上。如果需要，可以使用具有將第三吸收性材料保持在適當位置的粘附劑的薄塑料膜或卡片(未示出)。在吸收性材料512a、512b、514a、514b由標準型硝化纖維膜與背襯製成的情況下，期望樣品遷移和緩衝液綴合物遷移膜具有不同的孔徑。例如，如果條帶512a (用於綴合物遷移)具有3μ的孔徑，並且膜514a (用於樣品遷移)具有15μ的孔徑，則施加於膜514a的樣品將傾向於遷移並停留在樣品膜514a中並且將不傾向於遷移至綴合物膜512a中。如圖3中所見，四種吸收性材料呈現出〃A〃形，其中第一和第二吸收性材料形成"A"的兩側，而第三和第四吸收性材料形成"A"的中間橫臂。應了解，四種吸收性材料可以以其它排列來布置。參見圖4，應了解圖3的測試裝置510可以被設置在殼體570內部。殼體570具備用於接收樣品(和緩衝液，如果需要的話)的樣品接收開孔571和單個緩衝液接收開孔572。開孔571直接位於吸收性條帶514a、514b的第一區域561a、561b上方，使得沉積於開孔571中的樣品將流動至吸收性條帶514a和514b上。同樣地，開孔572直接位於吸收性條帶512a、512b的第一區域531a、531b上方，使得沉積於開孔572中的緩衝液流動至各自吸收性條帶512a、512b上。另外，殼體570具備窗口 575a、575b。窗口 575a、575b分別位於測試線550a、550b上方，使得該測試線可以透過所述窗口可見。如果需要，則所述窗口可以由透明塑料組成。在提供了第三區域535a、535b的情況下，窗口 575a、575b優選地延伸至各自對照線560a、560b上方。應理解，因為將向吸收性材料514a、514b提供相同樣品，所以吸收性材料514a、514b任選地可以由單片(整片)材料製成。如果需要，則可以提供樣品接收墊(未示出)以接收該樣品並將該樣品提供給組成吸收性材料514a和514b的單片材料或各片材料。圖3的免疫測定510優選地按以下使用。首先，可能含有抗體和/或抗原的所需量的樣品(例如10微升，未示出)被提供至第三和第四吸收性材料514a、514b (通過開孔571，如果使用殼體570的話)並且被允許通過第三和第四吸收性材料514a、514b而遷移至其各自的第二區域563a、563b，所述第二區域563a、563b分別與第一和第二吸收性材料512a,512b的第二區域533a、533b接觸。任選地，在將樣品提供至第三和第四吸收性材料之後，可以將優選被測的量的液體例如緩衝溶液加入(通過開孔571，如果使用殼體570的話)以幫助樣品的遷移。所加緩衝液的量可能取決於所用樣品的類型(例如血液、尿液、唾液等等)。無論如何，樣品到達測試線550a、550b，所述測試線550a、550b被印在第一和第二吸收性材料的第二區域533a、533b的頂上或者被輸注於其中。在所需量的時間之後，此時樣品中的HIV抗體(如果存在)有機會與固定在測試線550a上的HIV抗原結合，以及樣品中的HIV抗原(如果存在)有機會與固定在測試線550b上的HIV P24抗體結合，將優選被測的量的液體例如緩衝溶液(未示出)加入至第一和第二吸收性材料512a、512b (通過開孔572，如果使用殼體570的話)。在足以允許綴合物539a、539b遷移至測試部位550a、550b (和對照部位560a、560b，如果提供的話)的另一段時間之後，檢查(通過窗口 575a、575b，如果使用殼體570的話)測試部位550a、550b (和對照部位560a、560b，如果提供的 話)以便確定樣品是否為「陽性」。通常，當測試部位550a和對照部位560a均顯示有色的線時，獲得指示樣品中存在HIVl或HIV2抗體的「陽性」測試。當僅對照部位560a顯示有色的線時，獲得指示樣品中缺少抗體存在的「陰性」測試。類似地，在測試部位550b和對照部位560b均顯示有色的線的情況下獲得指示樣品中存在HIV P24抗原的「陽性」測試，而當僅對照部位560b顯示有色的線時獲得指示樣品中缺少P24抗原存在的「陰性」測試。通過向殼體570提供編號和/或字母來指示開孔571是用於接收樣品(和任選地某些緩衝液)且將被首先使用，以及指示開孔572是用於接收緩衝溶液且將被其次地使用，可以促進本發明的方法。本領域技術人員應當明白，本發明的實施方式可以採用許多不同的材料實現。例如，通常包括非常薄的惰性薄膜、條帶、片層或膜層的吸收性材料(一種或多種)可以由硝化纖維、濾紙、二氧化矽製成，或者由例如，微孔或微粒的紡織或無紡纖維或其組合物製成。多種合適的材料及其組合記載於Gordon等人的美國專利#4960691, Zuk等人的美國專利#4956275中，這裡均引入全文作為參考。通常，硝化纖維或其它吸收性材料設有如上所述的薄的非多孔性惰性塑料背襯層。因此，根據本發明的其它一些實施方式，第一、第二、第三和第四吸收性材料的材質、厚度和長度可加以選擇以調節液態樣品和液態緩衝液(或緩衝液-綴合物子系統)到達測試部位的時間。通過對樣品/分析物以及緩衝液或緩衝液-綴合物子系統設置單獨的遷移通道，還可以選擇材料以提高系統的靈敏度。在類似的方式中，應當明白的是吸收性材料可以以任何方式成型，並可採取如本領域所知的任何尺寸。因此，為了幫助加速芯吸，所述吸收性材料可以呈鑰匙形，其中所述條帶在接收緩衝液的開孔以及測試部位和對照部位處具有較小的寬度，而在儲液區具有較大的寬度。這種設置在Charlton等人的美國專利#5989921中所示，這裡引入其全文作為參考。在任何情況下，一般來說，測試條帶長度顯著大於寬度，並且寬度顯著大於厚度。事實上，在本發明的至少某些實施方式中，所述條帶在測試區域應當很薄(例如Imm厚)並且基本上透明，這樣測試線和對照線可以很容易通過測試條帶看到。此外，所述殼體和吸收性材料可以整合在開放式的測流平臺上，該平臺上設有具有微柱的注模聚合物，所述微柱通過改變柱高度、直徑、形狀和/或間距能夠精確控制流動。這種平臺主要採用與殼體和吸收性芯吸材料相同的材料，並由Uppsala, Sweden的AmicAB出售，參見例如，www. amic. Se。由於注模的聚合物通常可以是透明的，故整個殼體都可以看作「視窗」，通過它可以觀察測試線/部位和對照線/部位。應當明白的是，根據所構建的測試類型(例如驗孕、HIV、結核(TB)、朊病毒、尿液分析/藥檢、心肌標記物、癌標記物、Chagas病、衣原體、口腔細菌(SM/LC)、流感病毒A、流感病毒B、腺病毒、輪狀病毒、鏈球菌A、其它細菌或病毒等等，甚至是獸醫應用例如CPV (犬細小病毒)、FIV (貓免疫缺陷病毒)、FeLV (貓白血病病毒)、以及心絲蟲病)，感興趣的抗體和抗原將有所不同，因而在測試條帶中使用的抗原和抗體需要與之相適應。同樣，所述綴合物的抗原或抗體也需要與之相適應。在一些情況下(例如HIV)，測試條帶中可以採用與綴合物中相同的抗原，因為HIV抗體的結合位點會在測試部位處結合HIV抗原，其仍具有另外的HIV抗體結合位點用以結合抗原-綴合物，而在其它情況下，可能需要不同的抗原。類似地，應當明白根據所構建的測試類型，如果具有對照部位的話也需要與之相適應。因此，例如在HIV抗體檢測實驗中，測試區識別的配體為HIVl和/或HIV2抗體，則測試區的抗原可 以是肽HIVl (例如gp41/gpl20)和肽HIV2 ( gp36 )的混合物和/或重組抗原。綴合物可以是綴合到蛋白A、蛋白A/G、抗人IgG/IgM、肽或重組抗原的有色乳膠或膠體金。圖5-7顯示了不同類型的測試。圖5顯示了登革熱(發熱)的第四代檢測。圖5中描述的裝置610是以與第二種實施方式(圖3)的測試裝置510相同的方式構建的，具有與圖4的實施方式中採用的類似的殼體670，除了用於裝置610所用的測試線和綴合物不同並且殼體上的標記物可以不同。更具體而言，裝置610使用第一套測試線650al、650a2用於檢測樣品中的登革熱抗體(登革熱Ab)。測試線650al具有抗人IgM抗體，而測試線650a2具有抗人IgG抗體。如本領域的技術人員所理解的，測試樣品中的IgM和IgG抗體將分別在測試線650al和650a2捕獲，不管抗體是登革熱抗體或是其它傳染病抗體。然而，裝置610中的第一綴合物是具有金標記物的重組登革熱抗原，其僅與登革熱抗體結合。結果是，僅當登革熱IgM或登革熱IgG抗體在測試線650al和650a2捕獲時，綴合物才被捕獲，顯示如圖5所示的陽性測試。因為IgM抗體是早期標記物，其僅發生在感染的早期，而IgG通常在感染的後期開始出現，圖5的登革熱測試具有單獨的測試線650al和650a2以檢測登革熱IgM和/或登革熱IgG抗體。然而，如果不需要區分，可採用具有重組登革熱抗原的單一測試線，所述綴合物可以是與將在測試線被捕獲的登革熱IgM和登革熱IgG抗體結合的任何所需綴合物。優選地，第一對照線660a設置在測試線650al、650a2的下遊。如圖5所示，測試裝置610還包括登革熱抗原(登革熱Ag)檢測測試線650b。測試線650b具有抗登革熱NSl (非結構性糖蛋白)單克隆抗體，其將捕獲NSl抗原。用於裝置610的第二綴合物優選是相同的或不同的針對NSl抗原的單克隆抗體，所述抗體與如金溶膠的標記物綴合。同樣優選設置第二對照線660b。圖6顯示了 HIV和結核病(TB)的第四代檢測。圖6描述的裝置710是以與第二種實施方式(圖3)的測試裝置510相同的方式構建的，具有與圖4的實施方式中採用的類似的殼體770，除了用於裝置710所用的測試線和綴合物不同並且殼體上的標記物可以不同，並且抗原檢測與第一和第三吸收條帶結合進行，而抗體檢測與第二和第四吸收條帶結合進行。更具體而言，裝置710使用第一套測試線750al、750a2用於檢測樣品中的HIV1/2和TB抗體。測試線750al具有HIVl和HIV2重組抗原或合成肽，而測試線750a2具有重組TB抗原雞尾酒或融合。用於抗體檢測的第一綴合物優選是具有金溶膠的蛋白質A和/或抗人IgM綴合物。結果是，如果樣品中有HIVl或HIV2抗體，所述抗體將在測試線750al被抗原或合成肽捕獲，如果樣品中有TB抗體，則它們將在測試線750a2被抗原雞尾酒或融合捕獲。當緩衝液加入測試裝置710中並且蛋白質A和/或抗人IgM綴合物遷移至測試線750al、750a2處，所述綴合物如果在測試線750al處存在，則其將被HIVl或HIV2抗體捕獲，如果在測試線750a2處存在，則其將被TB抗體捕獲。優選地，第一對照線760a設置在測試線750al、750a2 的下遊。測試裝置710還包括測試線750b l、750b2用於分別檢測HIV. P24抗原和TB-LAM(脂阿拉伯甘露聚糖)抗原。更具體而言，測試線750b I具有將捕獲p24 HIV抗原的抗HIV.P24單克隆和/或多克隆抗體，而抗原測試線750b2具有將捕獲TB LAM抗原的LAM抗體。在測試裝置710中用於抗原檢測的「第二綴合物」是綴合物的混合物，其包括抗-HIV. P24單克隆或多克隆抗體與如金溶膠的標記物綴合的綴合物、和LAM抗體與抗-HIV. P24單克隆或 多克隆綴合物中使用的相同的或不同的標記物綴合的綴合物。如果LAM抗體綴合物使用不同的標記物，當HIV和TB抗原同時存在時，測試線750b2處顯現的顏色可與測試線750b I處顯現的顏色不同。第二對照線660b同樣優選設置。在圖7中大概顯示了用於多抗體和多抗原測試的第四代測試。測試裝置810是以與第二種實施方式(圖3)的測試裝置510相同的方式構建的，具有與圖4的實施方式中採用的類似的殼體870，除了用於裝置810所用的測試線和綴合物不同並且殼體上的標記物可以不同。如圖7所示，具有5條具有不同抗原的測試線850al、850a2、850a3、850a4、850a5以檢測不同的抗體，同時具有5條提供不同抗體的另外的測試線850bl、850b2、850b3、850b4、850b5以檢測不同抗原。測試裝置810可用於檢測過敏或多種感染疾病。對於本發明的所有實施方式，本領域技術人員應當明白，綴合物的標記物可以採取多種形式，包括不同種類的金屬溶膠，有色乳膠，各種酶類等等。儘管本發明的優選實施方式提供了一種肉眼容易看見的檢測信號，但應當明白本發明還包括可通過紫外線或其它技術如螢光鏡來檢測的其它標記物。因此，應當明白的是，可以提供一種能夠通過諸如螢光鏡或數字讀取儀之類的自動讀取裝置讀取的、採用本發明的測試單元的系統。本發明提高了靈敏度但不損害測試的特異性。靈敏度提高的主要原因是通過不同的遷移通道改進了樣品到測試區的遷移，以及在綴合標記物與測試區複合物反應之前測試區中分析物與結合位點的有效結合。例如，在HIV測試的情況下，施加到第三吸收性條帶上的血清樣品中的HIV特異性抗體將遷移到第一測試區並與HIV測試線結合。血液中再沒有其它的免疫球蛋白G (IgG)會結合到測試區中固定的HIV抗原上。當緩衝液加入第一吸收性條帶，使蛋白A與乳膠或金的綴合物遷移到測試區時，所述蛋白A綴合物將與已在測試線處被HIV肽所捕獲的HIV抗體的FC部分結合。由於蛋白A與HIV抗體的FC部分之間的結合非常牢固，僅需要提供少量的HIV抗體就能檢測到。這樣就與血液樣品中所有人IgG (包括HIV抗體)在遷移到測試線之前都要與蛋白A結合的傳統測流層析HIV測試系統形成了鮮明對比，因為蛋白A會非特異性地結合所有的IgG。因此，全部的蛋白A、IgG、金/乳膠複合物都將遷移到含有HIV抗原的測試線處。而之後只有HIV抗體、蛋白A、金/乳膠綴合物會與HIV抗原結合。然而，由於樣品中有大量的非相關IgG和少量的HIV抗體存在，因而存在沒有足夠的HIV抗體與蛋白A結合，故有色線不可見的風險。類似地，當血液血清樣品中存在HIV特異性抗原時，在第四吸收條帶中遷移的抗原將到達第二測試區，並將與含有HIVP24抗體的第二測試線結合。當緩衝溶液加入第二吸收條帶引起抗體/標記物綴合物遷移至第二測試區時，綴合物中的抗體將與第二測試線中已捕獲的抗原結合。本文已經記載和舉例說明了多種免疫測定實施方式及其使用方法。儘管記載了本發明的具體實施方式
，但並不意味著本發明僅限於此，其表示本發明的範圍應大到本領域允許的程度，並且應該同樣理解說明書。因此，儘管說明書中記載利用抗原/抗體反應進行配體結合，但也可以採用其它的配體結合機制，例如適配體結合、核酸結合、酶結合等等。同樣，儘管記載該測試單元具有單條線用於檢測一種配體，兩條線用於檢測兩種配體，五條測試線用於檢測五種配體，但應當明白可以採用不同數量的線來檢測不同數量的抗體。此夕卜，儘管所記載的測試單元在殼體頂壁具有開孔用於接收樣品和緩衝液或者緩衝液-綴合·物子系統，但應當明白也可以在所述殼體的端壁或側壁設置一個或兩個開孔。類似地，儘管記載的吸收性材料優選包括薄塑料背襯層，但應當明白也可以只在某些部位設置所述塑料被襯層或者根本不設置。在僅設置部分背襯層或不設背襯層的情況下，測試和對照部位可以位於所述吸收性材料的任何一側或者兩側。而且，儘管所述測試區和對照區如所示包括測試線和對照線，但應當明白所述測試和對照部位也可以有不同的構造，例如環形、方形、橢圓形、虛線等等。事實上，測試部位和對照部位的構造可以互不相同。同樣，儘管本發明描述採用相互垂直的吸收性材料，但應當明白所述殼體也可以不必相互垂直，只要為分析物/樣品以及緩衝液-綴合物子系統提供不同的遷移通道。本領域技術人員還應當明白，所述殼體還可以有其它方式的改變以包括每條測試線的單獨的窗口。同樣，儘管本發明是結合使用加入綴合物遷移通道和可選擇性的樣品遷移通道的緩衝液進行說明的，但應當明白，可以根據需要選擇一種或多種緩衝液，並根據要實施的一種或多種測試將其加入遷移通道。因此，通常使用例如磷酸鹽緩衝液或TRIS (三羥甲基氨基甲烷)緩衝液的緩衝液。然而，本發明意在包括使用包括水在內的任何稀釋液。此外，如果需要的話，所述稀釋液可以在將樣品加入到吸收性材料之前加入並混合到樣品中，或者可以先將樣品沉積之後加入稀釋液。同樣，可以採用任何能夠使綴合物遷移的稀釋液，並且可將其與綴合物在液態綴合物系統中進行預混合，或者將其提供到乾燥綴合物系統中綴合物的遷移通道上。而且，應理解，本文所公開的測試和方法的方面可與前文引用的U. S.序列號11/908,071中包含的任何的方面和教導結合。因而本領域技術人員應當明白，在不偏離其要求保護的精神和範圍的情況下，本發明還可以做出其它的改變。
權利要求
1.一種用於檢測樣品的免疫測定裝置，包括 第一、第二、第三和第四吸收性或吸水性材料，其限定第一、第二、第三和第四水平流動通道，所述第一和第二流動通道用於第一和第二綴合物的遷移，所述第三和第四流動通道用於樣品的遷移，其中用於檢測樣品中一種或多種不同抗體的存在的第一測試區域位於第一和第三流動通道的接合處，用於檢測樣品中一種或多種不同抗原的存在的第二測試區域位於第二和第四流動通道的接合處。
2.根據權利要求I的測定裝置，進一步包括 包含所述第一、第二、第三和第四吸收性或吸水性材料的殼體，所述殼體具有用於接收樣品的第一開孔，以及用於接收引起所述第一和第二綴合物遷移的液體的至少一個第二開孔。
3.根據權利要求2的免疫測定裝置，其中 所述至少一個第二開孔是單個第二開孔。
4.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第一和第二吸收性或吸水性材料彼此整合在一起。
5.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第三和第四吸收性或吸水性材料彼此整合在一起。
6.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第一、第二、第三和第四吸收性或吸水性材料布置成「H」形狀和「A」形狀中的一種。
7.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第一測試區域包括多個檢測線，用於檢測多種不同抗體的存在。
8.根據權利要求7的免疫測定裝置，其中 所述第二測試區域包括多個檢測線，用於檢測多種不同抗原的存在。
9.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第一吸收性或吸水性材料具有第一孔徑，所述第二吸收性或吸水性材料具有第二孔徑，並且所述第二孔徑比所述第一孔徑大。
10.根據權利要求9的免疫測定裝置，其中 所述第三吸收性或吸水性材料具有第三孔徑，並且所述第三孔徑比所述第二孔徑大。
11.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第一測試區域包括含有Hiv抗原的第一測試線，所述第二測試區域包括含有HIV抗體的第二測試線。
12.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第一測試區域包括含有IgM抗體的第一測試線，和含有IgG抗體的第二測試線，並且所述第一綴合物含有帶標記物的登革熱抗原。
13.根據權利要求12的免疫測定裝置，其中 所述第二測試區域包括含有抗登革熱抗體的第三測試線。
14.根據權利要求I的免疫測定裝置，其中 所述第一測試區域包括含有HIV抗原或合成肽的第一測試線，和含有TB抗原的第二測試線，並且所述第二測試區域包括含有HIV抗體的第三測試線和含有脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗體的第四測試線。
15.根據權利要求14的免疫測定裝置，其中 所述第二綴合物包含與第一標記物綴合的抗-HIV. P24單克隆或多克隆抗體，和與第二標記物綴合的LAM抗體的綴合物的混合物。
全文摘要
一種第四代免疫測定裝置，其包括第一、第二、第三和第四吸收性或吸水性材料，所述材料限定第一、第二、第三和第四水平流動通道。所述第一和第二流動通道用於第一和第二綴合物的遷移，而所述第三和第四流動通道用於液體樣品的遷移。用於檢測一種或多種不同抗體的存在的第一測試區域位於第一和第三流動通道的接合處，用於檢測一種或多種不同抗原的存在的第二測試區域位於第二和第四流動通道的接合處。任選向吸收性材料提供殼體，其具有用於接收樣品的開口，以及一個或多個用於接收緩衝溶液或綴合物-緩衝液亞複合物的開口。所述殼體還可在測試區域上具有視窗。
文檔編號C12M1/34GK102947439SQ201180019396
公開日2013年2月27日 申請日期2011年2月15日 優先權日2010年2月16日
發明者J.埃斯範迪亞裡 申請人:生化診斷系統公司