使用來自枯草桿菌的果膠酸裂合酶酶促處理紡織品的製作方法

2023-08-13 16:28:06

專利名稱：：使用來自枯草桿菌的果膠酸裂合酶酶促處理紡織品的製作方法
技術領域：
：本文描述包括枯草桿菌(Bacillussubtilis)的果膠酸裂合酶(pectatelyase)的化合物及組合物、其在生物煮練、漂白、染色、退漿、纖維素纖維處理和清潔組合物及其組合中的應用。
背景技術：
：果膠聚合物是植物細胞壁的組成成分。果膠是一種主鏈由交替的同型半乳糖醛酸聚糖(平滑區)和鼠李糖半乳糖醛酸聚糖(毛狀區)組成的雜多糖，所述平滑區由1，4連接的ot-D-半乳糖醛酸的直鏈聚合物形成。半乳糖醛酸殘基可以在g基團上被不同程度地甲基酯化，通常是以非隨機的方式將聚半乳糖醛酸嵌段完全甲酯化。可以將果膠酶根據其優選底物(即，高度甲酯化的果膠或低甲酯化的果膠和聚半乳糖醛酸(果膠酸))分類。也可以根據其反應機制(即，P-消除或水解)進行分類。果膠酶可以主要是內切作用，即在鏈內隨機位置切割聚合物產生寡聚物混合物。或者，果膠酶可以是外切作用，從果膠的一端起始進行攻擊。由EnzymeNomenclature(1992)給出的酶分類中包括了幾種作用於果膠平滑區的果膠酶活性，例如果膠酸裂合酶(EC4.2.2.2)、果膠裂合酶(EC4.2.2.10)、多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2丄15)、果膠酯酶(EC3.2丄11)、半乳聚糖酶(EC3.2.1.89)、阿拉伯聚糖酶(arabinase)(EC3.2.1.99)7和甘露聚糖酶(EC3.2.1.78)。已從不同細菌屬中克隆了果膠酸裂合酶。迄今，多數被純化的果膠酸裂合酶具有8或更高的pH最適活性，通常具有5(TC或更高的最適溫度範圍，且需要二價陽離子以達到最大活性，其中鈣離子是刺激作用最大的。需要能夠實行退漿、漂白、煮練、染色及其一步組合的組合物，也需要清潔劑。在天然纖維、紗和織物的紡織品加工中，通常需要預處理或前處理步驟以適當地預備這些天然材料以備進一步的使用，尤其是用於商品通常所需的染色和/或整理(finishing)階段。這些紡織品處理步驟除去天然存在的或在紡和織步驟加入到纖維和/或織物中的雜質和發色體。儘管紡織品處理可包括許多不同的處理和階段，但最常見的包括退漿——通過除&的、鹼性的或氧化的浸漬(soak)，除去上漿料，例如澱粉；煮練一一通過在接近沸騰的溫度下與氫氧化鈉溶液接觸而除去油脂、油狀物、蠟狀物、果膠物質、塵屑、蛋白質及脂肪；和漂白一一通過通常使用氧化劑(例如過氧化氫、次氯酸鹽和二氧化氯)或通過使用還原劑(例如二氧化硫或亞硫酸氫鹽)從紡織品中除去發色體和使發色體褪色。商業酶促紡織品加工通常需要將這些預處理步驟分開，因為各步驟的條件有大的差異。然而，處理步驟的這種分離，將由於需要多個在各階段之間的漂洗步驟而使得整個處理工藝增加了沉重的額外成本，並由於高於95。C的高加工溫度而造成高能耗。該額外的漂洗和/或乾燥步驟使得該處理工藝平添了巨大的額外成本、時間和廢料。因此，將多個預處理階段合併成一步處理，與通常使用的商業工藝相比，由於降低成本和減少廢料，而將具有顯著的環境益處並對商業紡織品處理產生顯著的影響。然而，儘管之前曾進行過研究，但這三個通常步驟的組合一直不令人滿意。當前使用的漂白技術涉及在超過95。C的溫度使用鹼性過氧化氫漂白。該高溫和強漂白體系與退漿操作中利用的許多酶完全不相容。因此，在超過95。C的溫度將退漿和漂白技術組合，將導致退漿酶的破環以及不令人滿意的退漿結果。替代的退漿技術，例如鹼性或氧化浸漬，涉及使用會導致纖維損壞的侵蝕性化學品。另一方面，在降低的溫度下進行一步處理以允許有效的酶促退漿，將導致不可接受的不良漂白，白度值低於商業可接受的限值。此外，這種沒有煮練酶參與的低溫工藝產生具有低潤溼性的織物，這對於進一步的染色、印花和整理工藝是不可接受的。清潔汙垢涉及除去包含汙垢的有色物質。常見類型的汙垢起源自植物材料，例如來自草、蔬菜(菠菜、甜菜、胡蘿蔔、番茄、水果如漿果類和葡萄)，以及源自植物的材料，如酒、啤酒、果汁、番茄沙司等等。色素通常通過共價鍵或通過物理結合("粘著，，)而附著在纖維材料上。除去這些色素可能是非常困難的，因為洗滌劑幾乎不能從需要清潔的表面除去纖維-色素團。研究顯示，植物細胞壁由纖維物質的複雜網絡組成。細胞壁的組成根據植物材料的來源而有相當大的變化。然而，一般地，植物的組成中包含非澱粉多糖。這些多糖以多種形式存在，包括例如纖維素、半纖維素和果膠。因此，持續需要鑑定可以用於生物煮練、漂白、退漿、染色步驟及其組合，以及用於洗滌劑組合物、清潔組合物中的果膠酸裂合酶，該酶具有10-50。C(例如20-30。C)的最適溫度，在酸性至弱鹼性環境下(pH<8.5)操作最佳，且不依賴於二價陽離子，尤其是鈣的存在。發明概述因此，本文提供了化合物、組合物及使用其進行纖維素纖維的生物煮練、漂白、退漿和/或染色、以及清潔硬底物和紡織品的方法。本文描述的方法和組合物避免了因本領域現有的局限性和缺點而帶來的一個或多個問題。因此，一方面提供包含SEQIDNO:1的多肽的果膠酸裂合酶。還提供獲自枯草桿菌的果膠酸裂合酶，其在還原性SDS-PAGE條件下分子量約43kD，以及pl約7丄對於原棉的最適pH為約6.0至8.0，然而這將在使用另一底物時變化。另一實施方式提供編碼SEQIDNO:1的核酸，例如SEQIDNO:2。本發明還考慮包含與其有效連接的所述核酸的栽體以及包含該載體並表達由該核酸編碼的多肽的宿主細胞。宿主細胞可以是任何原核或真核宿主細胞，例如芽孢桿菌屬(Bacillus)物種。又一方面考慮在水性溶液中包括一種所述果膠酸裂合酶的生物煮練組合物。該生物煮練組合物可以進一步包括漂白試劑或漂白組合物。漂白試劑包括^f旦不限於氧化漂白劑、過氧化鈉、次氯酸鈉、次氯酸鈣、二氯異氰脲酸鈉或其組合。漂白組合物可以是例如，酯源、醯基轉移酶和過氧化氫源。生物煮練組合物和/或生物煮練和漂白組合物可以進一步包括退漿劑。該生物煮練組合物可以進一步包括其它生物煮練酶，例如果膠酶、角質酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、脂肪酶，或其組合。再又一實施方式中，考慮用於紡織品的一步處理組合物。該組合物包括(a)獲自枯草桿菌的果膠酸裂合酶，其在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量約43kD，pl約7,3;(b)—或多種退漿酶；和(c)一或多種漂白試劑和/或漂白組合物。很顯然，漂白和染色不在同一步驟中發生，但是它們可以與煮練和退漿組合。該組合物也可以進一步包括選自果膠酶、角質酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、脂肪酶及其組合的生物煮練酶。該一步處理組合物可以還包括一或多種輔助組分，其中所述輔助組分是表面活性劑、乳化劑、螯合劑和/或穩定劑，或其組合。該組合物可以進一步包括漂白活化劑。用於所述一步處理組合物中的漂白試劑包括但不限於氧化漂白劑、過氧化鈉、次氯酸鈉、次氯酸鉤、二氯異氰脲酸鈉或其組合。用於所述一步處理組合物中的表面活性劑可以包括但不限於非離子型表面活性劑、陰離子型表面活性劑、陽離子型表面活性劑、兼性離子表面活性劑，或其組合。另一方面考慮用於煮練和漂白紡織品的方法，包括在適宜使紡織品增白的條件和一段時間下，使紡織品與包括漂白劑和果膠酸裂合酶的水性溶液接觸，該果膠酸裂合酶獲自枯草桿菌，其在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量約43kD,pl為約7.3。允許增白的適宜條件包括pH為約5至約11;時間為約2分鐘至約24小時，更優選約15分鐘至12小時；和更優選10約30分鐘至6小時；溫度為約15。C至90°C。可以根據用於處理的工藝確定適宜的溫度。用於冷軋巻堆煮練和漂白的適宜溫度是約15。C至約45。C,並優選約25。C至約35。C。用於連續、半連續和其它分批(batch)工藝的溫度包括約15。C至約90。C，優選約2(TC至約75。C，和更優選約25。C至約60°C。漂白試劑可以是過氧化氫並且以約100ppm至5000ppm之間的量存在。因此所考慮的一組示例性條件包括pH為約6至8，時間長度為約2分鐘至24小時，溫度為約25。C至60°C,且其中漂白劑是過氧化氫並且以約1000ppm至3000ppm的量存在。再又一方面考慮用於紡織品的一步加工的方法，包括(a)提供一步紡織品加工組合物和需要加工的紡織品，其中所述一步紡織品加工組合物包括獲自枯草桿菌的果膠酸裂合酶，其在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量約43kD，pI為約7J;(b)在足以允許退漿、煮練和漂白紡織品的條件和一段時間下，使所述紡織品與所述一步紡織品加工組合物接觸。該一步紡織品加工組合物可以進一步包括(a)—或多種生物煮練酶；(b)一或多種漂白試劑和/或漂白組合物；和(c)一或多種退漿劑。一或多種生物煮練酶可以包括但不限於果膠酶、角質酶、蛋白酶、纖維素酶、半纖維素酶、脂肪酶，或其組合。退漿劑可以包括但不限於澱粉酶、纖維素酶、甘露聚糖酶，或其組合。該一步紡織品加工組合物可以還包括選自表面活性劑、乳化劑、螯合劑、穩定劑，或其組合的輔助組分。用於所考慮的一步紡織品加工組合物中的漂白試劑包括但不限於酶促漂白體系和化學漂白劑，例如但不限於氧化漂白劑、過氧化鈉、次氯酸鈉、次氯酸鉤、二氯異氰脲酸鈉或其組合。進行處理的紡織品是包含纖維素的或含纖維素的材料的那些，例如棉。用於進行該一步加工的條件可以是溫度約15。C至約90。C，優選約20。C至約75。C,和更優選約25。C至約60°C，以及pH為約5至11，更優選約6至約10，和更優選pH為約6至約8，進行約2分鐘至24小時。可以才艮據選用於該處理的工藝確定適宜的處理溫度和pH。又一方面考慮紡織品前處理的方法，其包括同時或相繼地進行生物煮練和漂白，其中所述煮練步驟包括將所述紡織品與包括枯草桿菌的果膠酸裂合酶的水性組合物接觸，該果膠酸裂合酶在還原性SDS-PAGE條件下具有約"kD的分子量和約7.3的pl，且其中所述接觸在適於生物煮練的條件下發生。再又一方面考慮生物煮練和染色紡織品的方法，包括(a)製備包括枯草桿菌的果膠酸裂合酶的水性溶液，該果膠酸裂合酶在還原性SDS-PAGE條件下具有約43kD的分子量和約7.3的pi,並具有最適pH為約6.0至8.0，且其中所述果膠酸裂合酶以約10至500mol/min/kg紡織品的量存在於pH約5至11,優選pH約5至9，和更優選pH約6至約8，以及溫度約15。C至卯°。(或約2(TC至約75°C,或更優選約25°〇至約60°C)且具有小於2mM二價陽離子的條件下；(b)在該水性溶液中孵育該紡織品足夠生物煮練的一段時間；和(c)向該水性溶液補充染色體系並孵育該紡織品足以獲得染色的紡織品的一段時間。又一方面提供洗滌劑組合物，其包括(a)表面活性劑；(b)枯草桿菌果膠酸裂合酶，在還原性SDS-PAGE條件下，其分子量為約43kD，pl為約7，3;和(c)任選地，洗滌劑添加劑，其中所述洗滌劑候選物是助洗劑、漂白試劑、消泡劑、磨料、懸浮劑、汙垢釋放劑、殺細菌劑、潤滑劑或其組合。所考慮的洗滌劑組合物還可以包括半纖維素酶，例如但不限於木聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、乙醯木聚糖酯酶、葡糖醛酸糖苷酶、阿魏酸酯酶、香豆酸酯酶、內切-半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、地衣多糖酶、內切-阿拉伯聚糖酶、外切-阿拉伯聚糖酶、外切-半乳聚糖酶或其組合。洗滌劑組合物還可以包括蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶或其組合。再又一方面考慮清潔紡織品的方法，包括將需要清潔的紡織品暴露於洗滌劑組合物，該組合物包括(a)表面活性劑；(b)在還原性SDS-PAGE條件下分子量為約43kD、pl為約7.3的枯草桿菌果膠酸裂合酶；和(c)任選地，洗滌劑添加劑，其中所述洗滌劑候選物是助洗劑、漂白試劑、消泡劑、磨料、懸浮劑、汙垢釋放劑、殺細菌劑、潤滑劑或其組合。洗滌劑組合物還可以包括蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶，或其組合。又一方面提供清潔硬表面的組合物和方法。所述組合物可以包括包含12有枯草桿菌果膠酸裂合酶的水性溶液，該果膠酸裂合酶在還原性SDS-PAGE條件下分子量為約43kD，pi為約7.3，且具有最適pH約6.0至8.0。對於清潔和洗滌劑組合物，該範圍可以更大，例如，從約pH5至11。應理解前述一般描述和下述詳細說明是示例性和解釋性的，旨在進一步對所公開的化合物、組合物和方法提供解釋。附圖簡述本說明書包括附圖，其組成本說明書的一部分。附圖與說明書一起用於闡明所討論的組合物及方法的各方面。圖1顯示枯草桿菌果膠酸裂合酶Exp.B.subtilis在果膠去除上的pH範圍，y軸為pH而x軸為溫度(°C)。將該枯草桿菌果膠酸裂合酶(左圖)和市售可得的Bioprep3000L(右圖)的果膠酸裂合酶活性進行比較。在不同pH(5.9-9.8)和溫度(30-60。C)條件下，將2ppm的每種酶各與未經煮練的棉織品(Testfabrics，428U)孵育1小時來比較枯草桿菌果膠酸裂合酶和Bioprep3000L的初步pH和溫度曲線。使用統計學軟體程序進行實騶"沒計和數據分析。酶處理及徹底漂洗棉織物後，用釕紅染料對經處理的織物盤染色以量化處理後留在織物中的果膠的量。然後徹底漂洗染色的織物並且風乾，之後使用MinoltaCR-200分光光度計測量CIELMt。較低的CIEI^表示較高的果膠結合。果膠結合越高，酶的煮練性能越低。圖中，較暗的陰影對應於較少的果膠去除。圖2顯示從原棉織物中除去果膠的劑量反應。對枯草桿菌果膠酸裂合酶(GCOR)在55。C、pH7.5進行本實驗20分鐘。對於Bioprep3000L,該試驗再次於55。C進行20分鐘，但pH增至8.2以在該酶的最適pH檢測該酶。X軸表示總蛋白質濃度(ppm)。Y軸是CIE1^單位。CIE是CommissionInternationaledePEclairage。L是光密度參數。"a"是綠到紅參數而"b"是藍到黃參數。圖3顯示枯草桿菌果膠酸裂合酶在O.lppm(左圖)、0.5ppm(中圖)和lppm(右圖)跨pH(y軸)和溫度(°C)(x軸)的果膠去除性能。枯草桿菌果膠酸裂合酶具有寬的溫度譜(即25-65°C)和寬的pH譜。圖4闡述枯草桿菌果膠酸裂合酶相比於市售可得的果膠酸裂合酶在不同溫度和不同過氧化氫濃度下的穩定性。圖4A顯示在55。C且過氧化氫為0、500、2500和5000ppm時該酶的穩定性，並將枯草桿菌果膠酸裂合酶(GCOR)和Bioprep3000L比較。圖4B闡述過氧化氫為0ppm和2500ppm時在25。C以相同量的果膠酸裂合酶隨時間檢測所獲得的結果。在25。C，枯草桿菌果膠酸裂合酶(GCOR)的活性實際上隨時間增加。圖5闡述存在螯合劑EDTA或不存在該螯合劑下，在室溫(RT)或55'C下，果膠酸裂合酶的穩定性。活性測量為在1小時時活性損失的百分數(％)。比較了枯草桿菌果膠酸裂合酶(GCOR)和Biopr印3000L的活性。圖6:使用MES電泳緩沖液以及NuPAGE4-12%Bis-Tris膠，闡明枯草桿菌果膠酸裂合酶的純度及其相對於對照的分子量。圖7A和7B:圖A和B示出在0.15mL/LAATCCWOB2003強效型液體洗滌劑中，lOppm的枯草桿菌果膠酸裂合酶對新鮮汙垢的清潔。圖8A和8B:圖A和B示出在1.5mL/LAATCCWOB2003強效型液體洗滌劑中，lppm的枯草桿菌果膠酸裂合酶對新鮮汙垢的清潔。圖9闡述在標準AATCCWOB2003強效型液體洗滌劑中，枯草桿菌果膠酸裂合酶與地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)澱粉酶相比對新鮮汙垢的清潔性能。圖10闡述在標準AATCCWOB液體洗滌劑中，枯草桿菌果膠酸裂合酶與地衣芽孢桿菌澱粉酶相比對陳化的技術性汙垢(agedtechnicalstains)的清潔性能。圖11闡述在市售液體洗滌劑中，枯草桿菌果膠酸裂合酶與芽孢桿菌屬物種707澱粉酶相比對新鮮汙垢的清潔性能。圖12闡述在市售液體洗塗劑中，枯草桿菌果膠酸裂合酶與芽孢桿菌屬物種707澱粉酶相比對陳化的技術性汙垢的清潔性能。14優選實施方式的詳述現在僅為參考目的，使用下面的定義和實施例，詳細描述本發明組合物、化合物和方法。本文提及的所有專利和出版物，包括該專利和出版物中公開的所有序列，在此通過整體引用的方式明確地為所有目的而併入本文。數值範圍涵蓋限定該範圍的數值。除非另有指明，核酸以5，到3，的方向從左至右書寫；胺基酸序列以氨基至羧基的方向從左至右書寫。在此提供的標題不構成對所公開化合物、組合物和方法的各個方面或實施方式的限制，所述方面和實施方式以通過參考說明書整體而得。因此，緊接下面定義的術語將基於整個說明書作更全面地定義。1、縮寫和定義1.1定義除非本文另有定義，本文^f吏用的所有技術和科學術語具有與本領域普通技術人員通常所理解的含義相同的含義。例如，Singleton和Sainsbury，DICTIONARYOFMICROBIOLOGYANDMOLECULARBIOLOGY(第二版，JohnWileyandSons,NY，1994);以及Hale和Marham，THEHARPERCOLLINSDICTIONARYOFBIOLOGY(HarperPerennial,NY,1991)為本領域技術人員提供了本文所用許多術語的一般性字典。此外，如本文所使用，除非上下文另有明確指明，否則單數術語"一"和"該，，涵蓋複數形式。除非另有指明，分別地，核酸以5，到3，的方向從左至右書寫；胺基酸序列以氨基至氯基的方向從左至右書寫。應理解，本發明組合物、化合物和方法不限於所描述的具體方法學、操作方案和試劑，本領域技術人員可根據它們所用的上下文而改變它們。本說明書中給出的每一個最大數值限定均旨在包括每一個較小的數值限定，就如同本文明確書寫了該較小的數值限定一樣。本說明書中給出的每一個最小數值限定均包括每一個較大的數值限定，就如同本文明確書寫了該較大的數值限定一樣。本說明書中給出的每個數值範圍將包括落入該較寬數值範圍內的每個較窄的數值範圍，就如同本文明確書寫了該較窄的數值範圍一樣。如本文所使用，術語"漂白"意指處理諸如纖維、紗、織物、衣服和非織造布等紡織品材料以在所述纖維、紗、織物、衣服或非織造布中產生較淺顏色的工藝。例如，如本文所用的漂白意指通過在纖維素的或其它的紡織品材料中除去、修飾或掩蓋生色化合物而增白織物。因此，"漂白，，指以足夠長的時間和在適宜的pH和溫度條件下處理紡織品以實現紡織品的增白(即，變白)。可使用化學漂白劑和/或齊冗產生的漂白試劑進行漂白。適合的漂白試劑的實例包括但不限於C102、H202、過酸類化合物、N02等。本工藝、方法和組合物中，優選酶促產生過氧化物諸如11202和過酸類化合物。如本文使用的術語"漂白試劑"涵蓋任何能夠漂白織物的結構部分。"化學漂白試劑，，是在沒有酶存在時能夠漂白紡織品的實體。它們可能需要漂白活化劑的存在。適合用於本文所述工藝、方法和組合物的化學漂白試劑的實例是過氧化鈉、過硼酸鈉、高錳酸鉀、其它過酸類化合物。在一些方面，當11202非原位1^1產生時，可以將它視為化學漂白試劑。術語"一步紡織品加工組合物"指包括至少一種生物煮練酶和至少一種齊&產生的漂白試劑、退漿劑和/或染色劑的製劑。因此，一些實施方式中，該加工組合物還包括至少一種退漿酶。該一步紡織品加工組合物將含有足夠的酶，以4更在處理液(即水性介質)中提供本文所述的酶水平。用於本文的酶可以是野生型酶及其變體。優選地，該變體#:改造為氧化穩定的，例如在存在過氧化氫和/或不存在二價離子時是穩定的。措詞"酶促漂白體系"意指能夠酶促產生漂白試劑的酶和底物。降&漂白體系可包括酯源、醯基轉移酶(或過水解酶(perhydrolase))和過氧化氫源。"酯源"指含有酯鍵的過水解酶底物。可以將包括有脂肪族和/或芳香族16羧酸及醇的酯與過水解酶一起使用。優選實施方式中，酯源是醋酸酯。一些優選實施方式中，酯源選自二乙酸丙二醇酯、二乙酸乙二醇酯、三醋精、乙酸乙酯和三丁精中的一或多種。一些優選實施方式中，酯源選自下述一或多種酸的酯曱酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、辛酸、壬酸、癸酸、十二烷酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸和油酸。術語"過氧化氫源"意指這樣的過氧化氫，其自外源(即外界或外部)來源加入紡織品處理浴中，或者由產生過氧化氫的氧化酶對其底物的作用而原位產生。術語"產生過氧化氫的氧化酶"意指催化涉及分子氧(02)作為電子受體的氧化/還原反應的酶。這些反應中，氧被還原為水(H20)或過氧化氫(H202)。適合本文使用的氧化酶是在其底物上產生過氧化氫(而非水)的氧化酶。適合本文使用的產生過氧化氫的氧化酶及其底物的實例是葡萄糖氧化酶和葡萄糖。其它可以產生過氧化氫的酶(例如，醇氧化酶、乙二醇氧化酶、甘油氧化酶、胺基酸氧化酶等)也可與過水解酶和酯底物組合應用以產生過酸。一些實施方式中，產生過氧化氫的氧化酶是碳水化合物氧化酶。如本文所使用，"紡織品"指纖維、紗、織物、衣服和非織造布。該術語包括由天然的、合成的(例如人造的)、以及各種天然和合成的混合物(blends)製成的紡織品。因此，術語"紡織品，，指未經加工的和經加工的纖維、紗、織造或編織的紡織品、非織造布和衣服。本說明書中，除非明確說明，否則"紡織品"、"織物"和"衣服"將可互換。術語"需要加工的紡織品"指需要進行退漿和/或煮練和/或漂白或可能需要其它處理(如生物拋光)的紡織口Po術語"需要漂白的紡織品"指不論其它可能處理如何，需要漂白的紡織品。這些紡織品可能已經進行了其它處理或者可能沒有。類似地，這些紡織品可能需要或者可能不需要隨後的處理。如本文所使用，"紡織品材料"是纖維、紡紗半制品、紗、織物，由織物製成的產品(例如，衣服和其它製品)和非織造布的總稱。17如本文所使用，術語"相容的，，意指一步紡織品加工組合物中的組分不使果膠酸裂合酶或其它可能存在於該組合物中的酶的SI^活性降低至該果膠酸裂合酶不能如在正常使用狀態期間所期望的一樣有效的程度。下文詳細示例了具體組合物物質。如本文所使用，"有效量的果膠酸裂合酶"指實現本文所述工藝或方法中所需的除&活性必需的果膠酸裂合酶的量。該有效量是本領域普通技術人員容易確定的且取決於許多因素，例如所用的具體酶變體、所用的pH、所用的溫度等等，以及所需的結果(例如，白度水平、可染性、退漿能力)。如本文所使用，"氧化(性)化學品"指具有漂白紡織品的能力的化學品。該氧化化學品以適合於漂白的量、pH和溫度存在。該術語包括但不限於過氧化氫、氯漂白劑和過酸。如本文所使用，術語"酶促轉化"指通過使底物或中間體與酶接觸，將底物#"飾成中間體或將中間體修飾成終產物。一些實施方式中，通過將底物或中間體直接暴露於合適的酶進行接觸。如本文所使用，措詞"蛋白水解穩定性"指蛋白質(例如酶)抵抗蛋白水解的能力。該術語不旨在局限於使用任何特定蛋白酶來評估蛋白質的穩定性。如本文所使用，"氧化穩定性"指蛋白質在氧化條件下發揮功能的能力。特別地，該術語指蛋白質在各種濃度的11202和/或過酸存在下發揮功能的在各種氧化條件下的穩定性。氧化穩定性的實質性改變可以通過相比於沒有氧化化合物時表現出的酶促活性，酶促活性的半衰期至少約5%或更大的增加或降低(多數實施方式中，優選增加)來反映。如本文所使用，"pH穩定性"指蛋白質在特定pH下發揮功能的能力。一般地，多數酶具有有限的pH範圍供其發揮功能。除了在中間範圍的pH(即，約pH7)發揮功能的酶以外，還存在能夠在極高或極低pH條件下工作的酶。可以通過本領域技術人員已知的標準程序和/或本文所述的方法測量在各種pH下的穩定性。pH穩定性的實質性改變可以通過相比於在酶的最適pH時表現出的酶促活性，S^波活性的半衰期至少約5。/。或更大的增加或降低(多數實施方式中，優選增加)來反映。然而，本文所述的本發明工藝、方法和/或組合物不旨在局限於任何pH穩定性水平及pH範圍。如本文所使用，"熱穩定性"指蛋白質在特定溫度下發揮功能的能力。一般地，多數酶具有有限的溫度範圍供其發揮功能。除了在中間範圍的溫度(即，室溫)發揮功能的酶以外，還存在能夠在極高或極低溫度下工作的酶。可以通過已知的程序或本文所述的方法測量熱穩定性。熱穩定性的實質性改變可以通過與酶促活性的最適溫度相比，當突變體暴露於不同溫度(即較高或較低)時，催化活性的半衰期至少約5%或更大的增加或降低(多數實施方式中，優選增加)來反映。然而，本文所述的工藝、方法和/或組合物不旨在局限於任何溫度穩定性水平及溫度範圍。如本文所使用，術語"化學穩定性"指蛋白質(例如酶)針對負面影響其活性的化學品表現出的穩定性。一些實施方式中，該化學品包括但不限於過氧化氫、過酸、陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、非離子型表面活性劑、螯合劑等。然而，本文所述的工藝、方法和/或組合物不旨在局限於任何特定的化學穩定性水平和化學穩定性範圍。如本文所使用，術語"純化的，，和"分離的"指從樣品中除去雜質。例如，純化果膠酸裂合酶。一些實施方式中，在細菌或真菌宿主細胞中表達重組的果膠酸裂合酶並且通過除去其它宿主細胞組分純化這些重組的果膠酸裂合酶；由此樣品中的重組果膠酸裂合酶多肽的百分數增加。如本文所使用，多肽(例如酶)的"純化的製品"或"基本上純的製品"意指已從與其一起天然存在的其它蛋白質、脂質和核酸中分離出來的多肽。優選地，該多肽也與用於純化它的物質諸如抗體或凝膠基質(例如聚丙烯醯胺)分離。優選地，該多肽佔純化製品的乾重的至少10、20、50、70、80或95%。在一些實施方案中，酶可以以例如純化製品的形式使用或供應。如本文所使用，"蛋白質"指由胺基酸組成並被本領域技術人員認可為蛋白質的任何組合物。術語"蛋白質"、"肽，，和"多肽，，可在本文互換使用。當肽是蛋白質的一部分時，本領域技術人員將在上下文中理解該術語的用法。如本文所使用，功能上和/或結構上相似的蛋白質被認為是"相關蛋白質"。一些實施方式中，這些蛋白質源自不同屬和/或物種，包括生物類別之間的不同(例如細菌蛋白質和真菌蛋白質)。一些實施方式中，這些蛋白質源自不同的屬和/或物種，包括生物類別之間的不同(例如，細菌酶和真菌酶)。其它實施方式中，從相同物種提供相關蛋白質。事實上，本文所述的工藝、方法和/或組合物並不旨在局限於任何特定來源的相關蛋白質。此外，術語"相關蛋白質，，包括三級結構同源物和一級序列同源物(homolog)。再一些實施方式中，該術語包括免疫學上交叉反應的蛋白質。如本文所使用，術語"衍生物"指這樣的蛋白質，其源自通過向蛋白質的C末端和N末端之一或兩者添加一或多個胺基酸、在胺基酸序列中的一個或數個不同位點置換一或多個胺基酸、和/或在蛋白質的任一端或兩端或在胺基酸序列中的一或多個位點缺失一或多個氛基酸，和/或在M酸序列中的一或多個位點插入一或多個胺基酸。可以通過改變編碼天然蛋白質的I)NA序列，將該DNA序列轉化到適宜宿主中並表達該改變的DNA序列以形成衍生蛋白質來實現蛋白質衍生物的製備。相關的(和衍生的)蛋白質包括"變體蛋白質"。一些優選的實施方式中，變體蛋白質與親本蛋白質，如野生型蛋白質不同，且相互之間相差小數目的胺基酸殘基。不同的胺基酸殘基的數目可以是一或多個，優選l、2、3、4、5、10、15、20、30、40、50或更多胺基酸殘基。變體之間的不同to酸的數目可以為1至10。一些方面，相關蛋白質，尤其是變體蛋白質包括至少35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、卯％、95%、97%、98。/。或99。/o的^J^酸序列同一性。此外，如本文所使用的相關蛋白質或變體蛋白質還可以指與另一相關蛋白質或親本蛋白質在主要區域(prominentregions)的數目上不同的蛋白質。例如，一些實施方式中，變體蛋白質具有l、2、3、4、5或IO個相應的主要區域與親本蛋白質不同。本領域已知若干方法適用於產生本文所述酶的變體，包括但不限於位點飽和誘變、掃描誘變、插入誘變、隨機突變、定點突變和定向進化、以及多種其它重組手段。在尤其優選的實施方式中，改造同源性蛋白質以產生具有一種或多種期望活性的酶。如本文所使用，術語"類似序列"指蛋白質中提供與目的蛋白質(即，通常地目的原始蛋白質)類似的功能、三級結構和/或保守殘基的序列。例如，在含有a螺旋或(3片層結構的表位區中，類似序列中的替代M酸優選保持相同的特定結構。該術語也指核苷酸序列，以及胺基酸序列。一些實施方式中，產生類似序列以便替代胺基酸導致顯示相似或改良的功能的變體酶。一些優選的實施方式中，在目的蛋白質中這些胺基酸的三級結構和/或保守殘基位於或鄰近於目的區段或片段。因此，當目的區段或片段含有例如a-螺旋或(5-片層結構時，替代M酸優選保持該特定結構。如本文所使用，"同源性蛋白質"指蛋白質(例如果膠酸裂合酶)與目的蛋白質(例如來自另一來源的果膠酸裂合酶)具有相似作用和/或結構。同源物並不旨在必需是進化上相關的。因此，該術語旨在包括獲自不同物種的相同或相似酶(即，就結構和功能而言)。一些優選的實施方式中，可能期望鑑定與目的蛋白質具有類似的四級、三級和/或一級結構的同源物，因為用來自該同源物的類似區段置換目的蛋白質中的該區段或片段將降低該改變的破壞性。一些實施方式中，同源性蛋白質誘導與目的蛋白質相似的免疫應答。如本文所使用，"野生型，，和"天然"蛋白質是自然界中存在的那些蛋白質。術語"野生型序列，，和"野生型基因，，可在本文互換使用，指宿主細胞中天然的或自然存在的序列。一些實施方式中，野生型序列指作為蛋白質改造工程起點的目的序列。可按照本領域技術人員已知的一般方法獲得編碼該天然蛋白質的基因。該方法通常包括合成具有編碼目的蛋白質的區域的推定序列的標記探針、從表達該蛋白質的生物製備基因組文庫以及通過與21探針雜交從該文庫篩選目的基因。然後對陽性雜交克隆作圖並測序。可使用本領域已知的任何適當方法確定序列間的同源性程度(參見例如，Smith和Waterman,2ADV.APPL.MATH.482(1981);Needleman和Wunsch，48J.MOL.BiOL.443(1970);Pearson和Lipman，85PROC.NAT'L.ACAD.SCI,USA2444(1988);程序例如WisconsinGeneticsSoftwarePackage(GeneticsComputerGroup,Madison,WI)中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA;以及Devereux等人，12NUCL.ACIDRES.387-395(1984))。例如，PILEUP是確定序列同源性水平的有用程序。PILEUP使用漸進式兩兩序列比對從一組相關序列建立多序列比對。其也可以繪出顯示用於建立該比對的聚類關係的樹。PILEUP使用對Feng和Doolittle的漸進式比對方法的簡化(Feng和Doolittle,35J.MOL.EvOL.351-360(1987))。該方法與Higgins和Sharp(Higgins和Sharp,5CABIOS151-153(1989))所述的方法類似。有用的PILEUP參數包括默認空位權重3.00，默認空位長度權重0.10和加權的末端空位。另一有用的算法實例是Altschul等人，(Altschul等人，215J.MOL.BIOL.403-410(1990);以及Karlin等人，PROC.NAT'L.ACAD.SCI.USA90:5873-5787(1993))所述的BLAST算法。一尤其有用的BLAST程序是WU-BLAST-2程序(參見，Altschul等人，266METH.ENZYMOL.460-480(1996))。參數"W"、"T"和"X"確定比對的靈敏度和速度。該BLAST程序使用字長(W)為11,BLOSUM62打分矩陣(參見，Henikoff和Henikoff，89PROC.NAT'L.ACAD.SCI.USA10915(1989))，比對(B)為50，期望值(E)為10,M'5，N'-4以及兩鏈比較作為默認值。與至少兩種核酸或多肽相關的措詞"基本上相似"和"基本上相同"通常意指多核苷酸或多肽與參照(即野生型)序列相比，包含具有至少約40%同一性，更優選至少約50%同一性，還更優選至少約60%同一性，優選至少約75%同一性，更優選至少約80%同一性，還更優選至少約卯％,再更優選約95%,最優選約97。/。同一性，有時高達約98%和約99%序列同一性的序列。可使用已知的程序，例如BLAST、ALIGN和CLUSTAL,使用標準參數確定序列同一性(參見，例如Altschul等人，215J.MOL.BiOL.403-410(1990);Henikoff等人，89PROC.NAT'L.ACAD.SCI.USA10915(1989);Karin等人，90PROC.NAT，L.ACAD.SCI.USA90:5873(1993);和Higgins等人，73GENE73:237-244(1988))。執行BLAST分析的軟體是可通過美國國家生物技術信息中心公眾獲得的。可使用FASTA(Pearson等人，85PROC.NAT'L.ACAD.SCI.USA2444-2448(1988))檢索資料庫。兩多肽基本上相同的一個指標為第一多肽與第二多肽是免疫學上交叉反應的。通常，因保守胺基酸置換而不同的多肽;U^疫學上交叉反應的。因此，例如，當一條多肽與第二多肽僅因保守性置換而不同時，兩肽基本上相同。兩核酸序列基本上相同的另一指標為兩分子在嚴緊條件下(例如，在中度至高嚴緊的範圍內)相互雜交。術語"同時地"或"同時"或"一步"旨在指在單個操作中進行退漿、煮練、漂白和染色(及這些步驟的組合)的至少一部分(例如，優選約75。/。或更多，更優選約90%或更多)。該術語並不旨在意指由本發明方法和組合物處理的紡織品不能被處理一次以上。相反，該術語意指對於每個處理周期，在紡織品加工中同時使用多個組分，如本申請它處詳述的。同樣地，該處理的組分可一次加入一種、同時加入所有或者分組加入，只要對於該處理周期的至少一部分而言，所有組分都存在即可。處理周期中所有組分都存在的那部分可因處理周期的總長度而異。術語"同時地"在一些實施方式中也旨在指在單個操作中進行生物煮練和酶促漂白的至少一部分。這具有不再需要通常在分開進行的煮練、漂白和/或染色步驟之間進行的清洗及其它處理的明顯優點。因而，水、時間和能量需求以及對在每個工藝中使用不同的設備的需求顯著減少。此外，根據待處理的紡織品的類型以及其上存在的雜質的性質，在本文所討論的工藝的實施期間可獲得退漿效果。因而，在此類情況下，不需要進行額外的退漿處理。儘管優選所有退漿與漂白步驟聯合進行，但本領域普通技術人員將認識到退漿的一些部分可與漂白步驟分開來進行。術語"上漿"或"漿紗，，指用於紡織品工業中通過增加紗的耐磨牢度和強度來提高織造性能的化合物。例如，漿料通常由澱粉或澱粉樣化合物製成。如本文所使用的術語"退漿，，或"進行退漿"指通常在施用特定的整理、染色或漂白之前，從紡織品中除去漿料，通常是澱粉的工藝。如本文所^使用的術語"退漿酶"指用於酶促除去漿料的酶。示例性酶是澱粉酶和甘露聚糖酶。如本文所使用，術語"生物煮練"意指將在棉或其它紡織品中天然存在的雜質，例如多數非纖維素化合物(例如果膠、蛋白質、蠟和塵屑等)除去。除了天然非纖維素雜質，一些實施方式中，煮練還可以除去殘留的由工藝引入的物質，例如紡紗、絡筒或經紗上漿潤滑劑。煮練包括生物煮練，但也可以包括使用苛刻的化學煮練劑，例如氫氧化鈉。術語"生物煮練酶"因此指能夠除去棉或其它紡織品中的至少一部分雜質的酶。術語"塵屑"指不想要的雜質，例如棉籽碎片、葉、莖和其它植物部分，其甚至在^/L械軋棉工藝後仍粘在纖維上。如本文所使用，術語"原坯(greige)"(發音同gray)紡織品指在生產後沒有經過任何漂白、染色或整理處理的紡織品。例如，尚未被整理(退漿、煮練等)、漂白或染色的任何離開織機的織造或編織紡織品都被定義為原坯紡織品。下文實施例中使用的紡織品是原坯紡織品。如本文所使用，術語"染色"指尤其是通過在染色溶液中浸漬，向例如，紡織品上色。術語"非棉纖維素，，纖維、紗或織物意指主要由非棉的基於纖維素的組合物組成的纖維、紗或織物。該組合物的實例包括亞麻(linen)、宇麻、黃麻、亞麻(flax)、人造絲、lyocell、醋酸纖維素和其它源自非棉纖維素的類似組合物。術語"蛋白酶"意指源自諸如真菌、細菌等微生物或源自植物或動物的蛋白質或多肽的蛋白質或多肽結構域，其具有在蛋白質的碳水化合物骨架的一個或多個不同位點催化斷裂肽鍵的能力。24"角質酶，，(cutinase)指用於紡織品加工中的源自植物、細菌或真菌的酶。角質酶是能夠水解底物角質的脂解酶。角質酶可以降解需要在紡織品加工(例如，煮練)中除去的脂肪酸酯和其它基於油的組合物。"角質酶"意指具有顯著的植物角質水解活性的酶。特別地，角質酶將對植物葉上的生物聚酯聚合物角質具有水解活性。適合的角質酶可分離自許多不同植物、真菌和細菌源。LIPASES:STRUCTURE,MECHANISMANDGENETICENGINEERING,71-77(VCHPublishers,Alberghina編，Schmid&Verger,1991);LIPASES,471-77(Elsevier,Borgstrom&Brockman編，1984);和Sebastian等人，169丄BACTERIOLOGY131-136(1987)提供了角質酶的實例。如本文所使用，術語"果膠酸裂合酶"指這樣一類果膠酶，其切割果膠酸以產生在非還原端具有4-脫氧-a-D-葡糖-4-烯醛酸基(D-gluc-4-enuronosyl)基團的寡糖。"果膠酶"是一組切割果膠物質，主要是聚(1，4-a-D-半乳糖醛酸糖苷)(poly(l，4-a-D-galacturonide))及其衍生物，的泮唐香鍵的酶(參見Sakai等人，"Pectin,pectinaseandprotopectinase:production,propertiesandapplications"in39ADVANCESINAPPLIEDMICROBIOLOGY213-294(1993))。果膠酸裂合酶也稱作多聚半乳糖醛酸裂合酶(EC4.2.2.2)(PGL)和聚(1，4普D-半乳糖醛酸糖苷)裂合酶。"枯草桿菌果膠酸裂合酶"旨在包括SEQIDNO:1的多肽，以及其變體，其中該變體的特徵在於當使用原棉作為底物時具有約6至約8的pH範圍、且其具有pl約7.3、溫度範圍約15。C至約卯。C及約43kD。應注意該pH範圍可以因所用底物而變。其它可以使用的溫度範圍包括從約20°C至約"。C，更優選從約25。C至約60°C。因此，變體可以包括獲自其它枯草桿菌林系的果膠酸裂合酶。術語"果膠"指可被較高或較低程度地酯化的果膠酸、多聚半乳糖醛酸和果膠。用，術語"a-澱粉酶，，指切割直鏈澱粉的a(1-4)糖苷鍵以產生麥芽糖分子((X-葡萄糖的二糖)的酶。澱粉酶是在唾液中發現的消化性酶，其也由許多植物產生。澱粉酶將長鏈碳水化合物(例如澱粉)降解為較小的單位。"氧化穩定的，，a-澱粉酶是當與非氧化穩定的a-澱粉酶相比，尤其是與該氧化穩定的a-澱粉酶所源自的非氧化穩定的a-澱粉酶形式相比時，能抵抗氧化手段的降解作用的a-澱粉酶。如本文所使用，"微生物"指細菌、真菌、病毒、原生動物和其它微生物或微Jf見生物。如本文所使用，"源自，，微生物的物質(例如多核苷酸或蛋白質)意指該物質是孩吏生物天然的。1.2縮寫本文中使用下面的縮寫且涉及相關單詞和措詞AATCC美國紡織化學師與印染師協會APSU鹼性果膠酶標準單位ATCC美國典型培養物保藏中心bp鹼基對CBG纖維二糖水解酶CMC羧曱基纖維素CWDE細胞壁降解酶EC酶分類ECU內纖維素酶單元EDTA乙二胺四乙酸EGTA乙二醇-O，-O'-雙(2-氨基-乙基)-N,N，N'，N'-四乙酸FPLC快速蛋白質液相色譜HPLC高效液相色譜kl)a千道爾頓KmMichaelis-Menten常數pi等電點ppm百萬分之PVA聚乙烯醇RAU基準澱粉酶單位SDS-PAGE十二烷基琉酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳sp.物種(當在微生物中時)TAU熱穩定性澱粉酶單位TSAU紡織品嗜熱脂肪芽孢桿菌澱粉酶(stearothermophilusamylase)單位TTAU紡織品熱穩定性澱粉酶單位Vmax表示酶反應的最大速度(即限制速度)的符號w/v物質重量與總體積的百分比w/w按重量計。2、分離並表徵枯草桿菌果膠酸裂合酶從枯草桿菌亞種subtilis菌林168獲得果膠酸裂合酶(pel)。然後在枯草桿菌中過表達該蛋白質。表達的蛋白質具有SEQIDNO:1的^J^酸序列。該枯草桿菌果膠酸裂合酶由pel基因(SEQIDNO:2)編碼GATAACGTCATTATTCGCAACATTGAATTCCAGGATGCCTATGACTATTTTCCGCAA27CAAATTAAAAATTACGCTGCATCATAACCGCTATAAAAATATTGTCCAGCGCGCGCTATGCCCAAAACAATGTCATTGACGTACCGGGACTGTCAGCTGCTAAAACGATCAGAGATCAACGCATCGGCTGCAAACGGGCTGAGCTCTTCTGTCGGCTGGACGCCGTCTCGTGCGGGTAAATTAAAT-3，.該420個氮基酸的果膠酸裂合酶將可能歸類於酶類EC4.2.2.2。其具有下面的特性氛基酸，DNA420個殘基；1260個4lJ^對分子量45,497功能果膠酸裂合酶(EC4.2.2.2)蛋白蔟IG假定的16615根據還原性SDS-PAGE凝膠分析，成熟的蛋白質具有43.4kDa的計算分子量，以及pl7.3。該成熟的蛋白質具有下面的序列(以氨基到氛基的方向顯示)ADLGHQTLGSNDGWGAYSTGTTGGSKASSSNVYTVSNRNQLVSALGKETNTTPKIIYIKGTID畫VDDNIKPLGLNDYKDPEYDLDKYLKAYDPSTWGKKEPSGTQEEARARSQKNQKARVM窗PANmVGSGTNAKVVGGNFQIKSDVI翻IEFQDAYDYFPQWDPTDGSSGNWNSQU蘭T歸GTHIWIDHCTFNDGSRPDSTSPKYYGRKYQHHDGQTDASNGANYITMSYNYYHDHDKSSIFGSSDSKTSDDGKLKITLHHNRYKNIVQRAPRVRFGQVHVYNNGTQ脆SAANGLSSSVGWTPSLHGSIDASANVKSNVINQAGAGKLN(SEQIDNO:I).該蛋白質表達為與AprE信號序列融合的融合蛋白質。然後該信號序列在蛋白質分泌期間被切除。可以用其它信號序列替代。該枯草桿菌pel基因被克隆到作為宿主細胞的枯草桿菌抹系BG3594comK中。其它細胞可以替代用於表達該基因。由枯草桿菌抹系BG3594comK產生的成熟蛋白質具有43.4kDa的計算分子量和pi為7.3。該蛋白質具有寬的pH範圍和寬的溫度範圍。圖3。該公開的果膠酸裂合酶的最適pH低於Biopr印TM3000L的(Novozymes,pH範圍7.5-8.5)。參見圖1。另外，與Bioprep3000L在窄溫度範圍中起作用不同，本文公開的果膠酸裂合酶的最適pH活性具有跨寬的溫度範圍(即20。C至65。C)的活性。本文公開的果膠酸裂合酶具有大大超過由BkprepTM3000L所獲得的果膠去除劑量反應。參見圖2。相比於BioprepTM3000L，該公開的果膠酸裂合酶在55。C具有較低的熱穩定性。然而，該酶最佳在室溫下使用。在室溫下檢測時，該公開的果膠酸裂合酶具有比Bh)prq)TM3000L提高的EDTA穩定性。表達。優選地，表達SEQIDNO:1或其變體的宿主細胞具有適於大,表達該多肽的增加的表達。可以通過如下方式測量變體的果膠酸裂合酶活性向瓊脂板(例如，LB瓊脂)中打出的4mm孑L(含有0.7%w/v聚半乳糖醛酸鈉(SigmaP1879))施加受試溶液。然後在特定溫度(例如75°C)孵育板6h。然後(i)在1MCaCl2中浸漬該板0.5h或在(ii)1。/。混合的溴化烷基三甲基銨(MTAB，SigmaM-7635)中浸漬該板1h。這些程序都造成聚半乳糖醛酸在瓊脂內的沉澱。可以通過在沉澱的聚半乳糖醛酸背景中透明區的出現檢測果膠酸裂合酶活性，"胡裡貼祐刻3、包括果膠酸裂合酶的組合物本文提供的一個方面是包括枯草桿菌的純化的果膠酸裂合酶或其變體的酶組合物或製劑。該果膠酸裂合酶可以單獨使用或與其它具有酶活性的多肽組合使用。優選的組合物包括生物煮練、漂白、退漿和/或染色組合物。更優選的是在一個步驟中實現紡織品的生物煮練、漂白、退漿和/或染色及其組合的一步組合物。其它組合物包括含有果膠酸裂合酶的清潔組合物，例如用於清潔紡織品的洗滌劑。所公開的果膠酸裂合酶也可以在纖維素材料的準備中用於酶促煮練(生物煮練)工藝，例如以為了在後續的漂白和/或染色操作中獲得合適的反應。該酶也可以用於除去洗滌物上存在的某些汙垢或汙漬，尤其是由例如含半乳聚糖或阿拉伯半乳聚糖的食品、植物等造成的汙垢和汙點。該果膠酸裂合酶也可以用於清潔溶液和清潔劑中以通過從硬表面除去或輔助除去某些汙垢或汙漬來清潔硬表面。因而，組合物尤其可以包括退漿酶、生物煮練酶(除果膠酸裂合酶之外附加的)、漂白試劑和染色劑。3.1退漿酶本文所述的組合物可以包括退漿酶與果膠酸裂合酶的組合。退漿劑可以與漂白劑、除果膠酸裂合酶之外附加的其它生物煮練酶以及生物拋光酶、和/或染色劑一起使用。可使用任何適合的退漿酶。優選地，退漿酶是澱粉分解酶。甘露聚糖酶和葡糖澱粉酶也可用於此處。更優選地，退漿酶是a或(3澱粉酶及其組合。3.1.1澱粉酶可以使用a-和p-澱粉酶，其包括那些細菌或真菌來源的。也考慮該澱粉酶的化學或遺傳修飾的突變體。優選的a-澱粉酶包括，例如可獲自芽孢桿菌屬物種的a-澱粉酶。有用的澱粉酶包括但不限於Optisize40、Optisize160、OptisizeHT260、OptisizeHT520、OptisizeHTPlus、OptisizeFLEX(全部來自GenencorInt.Inc.)、DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM和BA『M(全部可獲自NovozymesA/S，Bagsvaerd，Denmark)。其它優選的澱粉分解酶是CGTases(環糊精葡聚糖轉移酶，EC2.4.1.19)，例如獲自芽孢桿菌屬、高溫厭氧桿菌屬(Thermoanaerobacter)或高溫厭氧芽孢桿菌屬(Thermoanaerobacterium)物種的那些。以基準澱粉酶單位(RAU)每克產品(RAU/g)表示Optisize40和Optisize160的活性。一RAU是在標準條件下，1小時內將lg澱粉轉化成可溶性糖的酶量。OptisizeHT260、OptisizeHT520和OptisizeHTPlus30的活性以紡織品熱穩定性澱粉酶單位每克(TTAU/g)表示。一TTAU是在標準條件下，每小時將100mg澱粉水解為可溶性糖所需的酶量。OptisizeFLEX的活性以紡織品嗜熱脂肪芽孢桿菌澱粉酶單位(TSAU/g)每克來定義。一TSAU是在標準條件下，一分鐘內將lmg澱粉轉化成可溶性糖所需的酶量。澱粉酶的劑量因工藝類型而變。較小劑量將比較大劑量的相同酶需要更多的時間。然而，除了可能受溶液的物理特徵控制外，退漿澱粉酶的量沒有上限。過量的酶不會損傷織物；其允許較短的工藝時間。4艮據前述以及所使用的酶，建議下述最小劑量用於退漿tableseeoriginaldocumentpage31退漿酶也可優選源自上迷列舉的酶，其中一或多個胺基酸已被添加、缺失或置換，包括雜種多肽，條件是生成的多肽展現退漿活性。可以使用常規誘變程序產生該變體並使用例如高通量篩選扶術如瓊脂板篩選法進行鑑定。以可以有效地^f吏紡織品材料退漿的量將退漿酶加入水性i^液(即，所述處理組合物)中。通常，退漿酶(例如a-澱粉酶)以按重量計織物的0.00001%至2%的酶蛋白量加入處理組合物中，優選按重量計織物的0.0001%至1%的酶蛋白量，更優選按重量計織物的0.001%至0.5%的酶蛋白量，及甚至更優選按重量計織物的0.01%至約0.2%的酶蛋白量。3.2生物煮練酶一方面考慮使用果膠酸裂合酶作為唯一的生物煮練劑。另一方面考慮其與一或多種其它生物煮練酶組合使用。這些生物煮練酶可以包括在適合的生物煮練組合物，或進行生物煮練、漂白、退漿和/或染色中的一或多種的一步組合物中。可以與所公開的果膠酸裂合酶及其變體結合使用的其它生物煮練酶，包括但不限於，其它果膠酶，包括其它果膠酸裂合酶，和角質酶、蛋白酶、脂肪酶和纖維素酶。生物煮練酶可以與緩衝液，包括但不限於磷酸鹽、矽酸鹽、碳酸鹽或檸檬酸鹽緩沖液，以及其它輔助化學品，例如但不限於，潤溼劑、表面活性劑、乳化劑和螯合劑，一起使用來增強紡織品的潤溼性。根據所選用於處理的工藝，可以使用不同的溫度。對於冷軋巻堆工藝，煮練處理可以例如在約15。C至約45°C，和優選約25。C至約35。C進行；對於連續、半連續和其它分批工藝，工藝可以在約15。C至約卯。C,優選約2(TC至75。C，及更優選約25。C至約60。C進行。為了提高煮練性能，可單獨使用包括但不限於潤溼劑、表面活性劑、乳化劑、螯合劑的助劑或將其與其它試劑組合使用。3.2.1果膠酶可使用任何具有降解諸如植物細胞壁的果膠組合物的能力的果膠分解酶。適合的果膠酶包括但不限於真菌或細菌來源的那些。也包括化學或遺傳修飾的果膠酶。優選地，果膠酶是重組產生的或是天然來源的。它們可為單組分酶。可以根據果膠酶的優選底物，即，高甲基酯化的果膠或低曱基酯化的果膠和聚半乳糖醛酸(果膠酸)，以及它們的反應機制，即P-消除或水解，將果膠酶分類。果膠酶可以主要是內切作用，在鏈內隨機位點切斷聚合物得到寡聚物的混合物，或者它們可為外切作用，從聚合物的一端起始攻擊並產生單體或二聚體。由EnzymeNomenclature(1992)提供的酶分類中包括了作用於果膠平滑區的幾種果膠酶活性，例如，果膠酸裂合酶(EC4.2.2.2)、果膠裂合酶(EC4.2.2.10)、多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)、外切-多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.67)、外切-多聚半乳糖醛酸-裂合酶(EC4.2.2.9)和外切-聚-a-半乳糖醛酸糖苷酶(EC3.2.1.82)。優選實施方式中，本發明方法利用果膠酸裂合酶。如本文所使用的果膠酸裂合酶酶促活性指催化果膠酸(也稱作多聚半32乳糖醛酸)中a-l，4-糖苷鍵通過反式消除而隨機斷裂。果膠酸裂合酶也稱作多聚半乳糖醛酸裂合酶和聚(1，4-D-半乳糖醛酸糖苷)裂合酶。出於本文的目的，果膠酸裂合酶酶促活性是可以通過測量在pH10的0.1M甘氨酸緩沖液中0.1%w/v多聚半乳糖醛酸鈉溶液的235nm吸光度增力口而確定的活性(參見Collmer等人，"Assaymethodsforpecticenzymes,"in161METHODSENZYMOL.329-335(1988))。酶活性通常表示為xmol/分鐘，即，催化形成x摩爾產物/分鐘的酶量。替代的檢測法測量在pH10的0.1M甘氨酸緩衝液中5%w/v多聚半乳糖醛酸鈉溶液的粘度降低，如通過振動粘度計所測的(APSU單位)。APSU單位檢測法是使用底物多聚半乳糖醛酸的粘度測量法且可以按照例如WO2006/002034所討論的來進行。可以與枯草桿菌果膠酸裂合酶及其變體一起使用的其它果膠酸裂合酶包括已從不同細菌屬克隆出的果膠酸裂合酶，例如歐文氏菌屬(Erwinia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)，其它芽孢桿菌屬物種和菌林，克雷伯氏菌屬(Klebsiella)，和黃單胞菌屬(Xanthomonas)。適合此處使用的果膠酸裂合酶可以來自枯草桿菌(Nasser等人，335FEBSLETTS.319-326(1993))和芽孢桿菌屬物種YA-14(Kim等人，58Biosci.BIOTECH.BICHEM.947-949(1994))。可以考慮的其它果膠酸裂合酶包括由短小芽胞桿菌(Bacilluspumilus)(Dave和Vaughn,108J.BACTERIOL.166-174(197")、多粘芽孢桿菌(B.polymyxa)(Nagel和Vaughn,93ARCH.BIOCHEM.BIOPHYS.344-352(1961))、嗜熱脂肪芽孢桿菌(B.stearothermophilus)(Karbassi和Vaughn,26CAN.J.MICROBIOL.26:377-384(1980))、芽孢桿菌屬物種(Hasegawa和agel，31J，FOODSCI.838-845(1966))以及芽孢桿菌屬物種RK9(Kelly和Fogarty，24CAN.丄MICROBIOL.1164-1172(1978))產生的那些，這些果膠酸裂合酶已被描述，可以考慮將其與本文公開的枯草桿菌果膠酸裂合酶及其變體組合用於本發明的組合物和方法中。可以考慮組合使用的其它果膠酸裂合酶包括WO04/090099(Diversa)和WO03/095638(Novozymes)中公開的那33些。待使用的果膠分解酶的有效量取決於許多因素，但可以包括水性介質中按織物重量計約0.0001%至約1%的微克酶蛋白質，優選按織物重量計0.0005%至0.2%的酶蛋白質，更優選按織物重量計0.001%至約0.05%的酶蛋白質的果膠分解酶濃度。3.2.2角質酶可用於本文組合物和方法的任何適合的角質酶包括，例如，源自特異腐質黴(Humicolainsolens)角質酶林系DSM1800的角質酶，(如在美國專利號4,810,414的實施例2中所述(在此引入作為參考))，或在優選實施方式中，美國專利號5,512,203所述的來自門多薩假單胞菌(Pseudomonasmendocina)的微生物角質酶，其變體和/或等效物。適合的變體描述於，例如WO03/76580。合適的細菌角質酶可源自假單胞菌屬(Pseudomonas)或不動桿菌屬(Acinetobacter)物種，優選來自施氏假單胞菌(P.stutzeri)、產鹼假單胞菌(P.alcaligenes)、類產鹼假單胞菌(P.pseudoalcaligenes)、銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)或醋酸釣不動桿菌(A.calcoaceticus)，最優選來自施氏假單胞菌林ThaiIV17-1(CBS461.85)、PG-1-3(CBS137.89)、PG-1-4(CBS138.89)、PG-II-11.1(CBS139.89)或PG-II-11.2(CBS140.89)、銅綠假單胞菌PAO(ATCC15692)、產鹼假單胞菌DSM50342、類產鹼假單胞菌INII-5(CBS468.85)、類產鹼假單胞菌M-l(CBS473.85)或醋酸鉤不動桿菌GrV-39(CBS460.85)。對於來自植物的角質酶的使用，已知角質酶在許多植物的花粉中存在。因此，所公開的方法和組合物中可以考慮使用源自植物的角質酶。角質酶也可源自真菌，例如犁頭黴屬(Absidiaspp.);枝頂孢屬(Acremoniumspp.);蘑蒜屬(Agaricusspp);Anaeromycesspp.;麴黴屬(Aspergillusspp.)，包括棘孢麴黴(A.auculeatus)、泡盛麴黴(A.awamori)、黃麴黴(A.flavus)、臭麴黴(A.foetidus)、A.fumaricus、煙麴黴(A.fumigatus)、構巢麴黴(A.nidulans)、黑曲審(A.niger)、米曲審(A.oryzae)、土麴黴(A.terreus)和雜色麴黴(Aeurobasidiumspp.);頭孢屬(Cephalosporumspp.);毛殼屬(Chaetomiumspp.);鬼傘屬(Coprinusspp.);才旨孢屬(Dactyllumspp.);鐮孢屬(Fusariumspp.)，包括F.conglomerans、多隔鐮孢(F.decemcellulare)、爪哇鐮孢(F.javanicum)、亞麻錄抱(F.lini)、尖鐮孢(F.oxyspor函)和腐皮鐮孢(F.solani);粘帚黴屬(Gliocladi腿spp.);腐質黴屬(Humicolaspp.),包括特異腐質黴(H.i畫lens)和疏毛腐質黴(H.lanuginosa);毛黴屬(Mucorspp.);脈孢菌屬(Neurosporaspp.)，包括粗糙脈孢菌(N.crassa)和好食脈孢菌(N.sitophila);Neocallimastixspp.;Orpinomycesspp.;青黴屬(Penicilliumspp.);原毛平革屬(Phanerochaetespp.);射脈菌屬(Phlebiaspp.);Piromycesspp.;假單胞菌屬(Pseudomonasspp.);根黴屬(Rhizopusspp.);裂褶菌屬(Schizophyllumspp.);檢菌屬(Trametesspp.);木黴屬(Trichodermaspp.)，包括裡氏木黴(T.reesei)、長梗木黴(T.reesei(Iongibrachiatum))和綠色木黴(T.viride);以及接黴屬(Zygorhynchusspp.)。類似地，預期可在細菌，例如芽孢桿菌屬；纖維單胞菌屬(Celhilomonasspp.);.梭菌屬(Clostridiumspp.);毀絲黴屬(Myceliophthoraspp.);假單胞菌屬，包括門多薩假單胞菌和惡臭假單胞菌(P.putida);高溫單孢菌屬(Thermomonosporaspp.);嗜熱絲孢菌屬(Thermomycesspp)，包括疏棉狀嗜熱絲孢菌(T.lanuginose);鏈黴菌屬(Streptomycesspp.)，包括橄欖色鏈黴菌(S.olivochromogenes);和在降解纖維的瘤胃細菌中，例如Fibrobactersuccinogenes;和在酵母中，包括，假絲酵母屬(Candidaspp.)，包括南極假絲酵母(C.Antarctica),皺落假絲酵母(C.rugosa)、C.to園ii;近平滑假絲酵母(C.parapsllosis);清酒假絲酵母(C.sake);涎沫假絲酵母(C.zeylanoides);Pichiaminuta;紅酵母(Rhodotomlaglutinis);膠紅酵母(R.mucilagi謹a);和不對稱擲孢酵母(Sporobolomycesholsaticus),發現角質酶。優選地，角質酶以按織物重量計0,00001%至2%的酶蛋白量，優選以按織物重量計0.0001%至1%的酶蛋白量，更優選按織物重量計0.005%至350.5%的酶蛋白量，及甚至更優選按織物重量計0.001%至0.5%的酶蛋白量，加入水性酶溶液中。3.2.3纖維素酶也考慮將纖維素酶與本文所述的枯草桿菌果膠酸裂合酶及其變體組合用於本發明方法和組合物中進行生物煮練。纖維素酶坤皮分類為一系列酶家族，涵蓋內切和外切活性以及纖維二糖水解能力。用於組合物和工藝的纖維素酶可源自已知能夠產生纖維素分解酶的孩i生物，例如腐質黴屬、嗜熱絲孢菌屬、芽孢桿菌屬，木黴屬、鐮孢屬、毀絲黴屬、原毛平革屬、耙菌屬(Irpex)、柱頂孢屬(Scytalidium)、裂褶菌屬、青黴屬、麴黴屬、或地黴屬(Geotricum)的物種。能夠產生纖維素分解酶的已知物種包括特異腐質黴、尖鐮孢或裡氏木黴。美國專利號4,435,307;歐洲專利申請No.O495257;PCT專利申請No.WO91/17244;和歐洲專利申請No.EP-A2-271004公開了合適的纖維素酶的非限制性實例，這些文獻全部在此整體併入作為參考。纖維素酶也可以用於紡織品的生物拋光。可以通過稱作"生物拋光"的酶促處理改良棉和基於纖維素的其它天然纖維(例如，亞麻，大麻)。這一處理賦予織物更平滑及更有光澤的外觀。可以使用該處理除去"絨毛"-從紗表面突出的微小纖維束。絨毛球在紡織品行業中被稱作"起球，，(pill)。生物拋光以後，絨毛和起球減少。除去絨毛的其它益處在於更柔軟和更平滑的手感以及出眾的色澤亮度。一個實施方式中，纖維素酶可以以按織物重量計0.0001%至1%的酶蛋白質，優選按織物重量計0.0001%至0.05%的酶蛋白質，特別是按織物重量計0.001%至約0,01%的酶蛋白質的濃度使用。纖維素酶活性(ECU)的確定可通過測量酶降低羧甲基纖維素(CMC)溶液粘度的能力以內纖維素酶單位(ECU)確定。ECU檢測法通過測量樣品降低羧曱基纖維素(CMC)溶液粘度的能力來量化樣品中存在的催化活性的量。以40。C;pH7.5;0.1M磷酸鹽緩衝液；時長30分鐘，使用降低CH1C底物粘度的相對酶標準(Hercules7LED),大約0.15ECU/ml的酶濃度)，于振動粘度計(例如來自Sofraser，France的MIVI3000)中實施該檢測法。此ArchStandard定義為8200ECU/g。一ECU是在這些條件下將粘度降至一半的酶量。3.2.4其它生物煮練酶L討煮練酶與本文公開的枯草桿菌果膠酸裂合酶及其變體組合用於生物煮練。其它酶可單獨使用或者相互地或與上面列舉的酶相組合使用。例如，蛋白酶可用作生物煮練劑。適合的蛋白酶包括那些動物、植物或^:生物來源的，優選孩i生物來源的。蛋白酶可為絲氨酸蛋白酶或金屬蛋白酶，優選鹼性微生物蛋白酶或胰蛋白酶樣蛋白酶。蛋白酶的實例包括氨肽酶，包括脯氨醯氨肽酶(3.4.11.5)、X-pro氨肽酶(3.4.11.9)、細菌亮氨醯氨肽酶(3.4.11.10)、耐熱氨肽酶(3.4.11.12)、賴氨醯氨肽酶(3.4.11.15)、色氨醯氨肽酶(3.4.11.17)和曱硫氨醯氨肽酶(3.4.11.18);絲氨酸內肽酶，包括糜蛋白酶(3.4.21.1)、胰蛋白酶(3.4.21.4)、黃瓜素(cucumisin)(3,4.21.25)、brachyurin(3.4.21.32)、cerevisin(3.4.21.48)和枯草桿菌蛋白酶(3.4.21.62);半胱氨酸內肽酶，包括木瓜蛋白酶(3.4.22.2)、無花果蛋白酶(3.4.22.3)、木瓜凝乳蛋白酶(3.4.22.6)、蘿摩蛋白酶(3.4.22.7)、獼猴桃蛋白酶(actinidain)(3.4.22.14)、番木瓜蛋白酶(3.4.22.30)和ananain(3.4.22.31);天冬氨酸內肽酶，包括胃蛋白酶A(3.4.23.1)、麴黴天冬醯蛋白酶(Aspergillop印sin)I(3.4.23.18)、青黴天冬醯蛋白酶(3.4.23.20)和酵母天冬醯蛋白酶(Saccharopepsin)(3.4.23.25);以及金屬內肽酶，包括芽孢桿菌溶素(Bacillolysin)(3.4.24.28)。枯草桿菌蛋白酶的非限制性實例包括枯草桿菌蛋白酶BPN'、枯草桿菌蛋白酶amylosacchariticus、枯草桿菌蛋白酶168、枯草桿菌蛋白酶mesentericopeptidase、枯草桿菌蛋白酶Carlsberg、枯草桿菌蛋白酶DY、枯草桿菌蛋白酶309、枯草桿菌蛋白酶147、thermitase、aqualysin、芽孢桿菌PB92蛋白酶、蛋白酶K、蛋白酶TW7和蛋白酶TW1市售可得的蛋白酶包括AlcalaseTM、SavinaseTM、PrimaseTM、37I)uralaseTM、EsperaseTM、KannaseT,DurazymTM(NovoNordiskA/S)、MaxataseTM、MaxacalTM、MaxapemTM、ProperaseTM、PurafectTM、P眼fectOxPTM、F醇m和FN3(GenencorInternationalInc.)。考慮用於本公開的組合物的其它蛋白酶包括變體，例如在專利或公布的專利申請EP130,756(Genentech)、EP214,435(Henkd)、WO87/04461(Amgen)、WO87/05050(Genex)、EP251,446(Genencor)、EP260,105(Genencor)、WO88/08028(Genex)、WO88/08033(Amgen)、WO89/06279(NovoNordiskA/S)、WO91/00345(NovoNordiskA/S)、EP525610(Solvay)、WO94/02618(Gist-BrocadesN.V.)、Thomas等人，318NATURE375-376(1985)、Russel等人，328NATURE496-500(1987)、Thomas等人，193丄MOL.BIOL.803-813(1987)中公開的那些，這些文獻全部通過引用併入此處。可以按照METHODSOFENZYMATICANALYSISvol.5(第三版，VerlagChemie，Weinheim，1985)所述確定蛋白酶的活性。另一方面考慮脂肪酶與本公開的果膠酸裂合酶及其變體組合用於生物煮練。適合的脂肪酶(也稱作羧酸酯水解酶)包括但不限於細菌或真菌來源的那些，包括三醯甘油脂肪酶(3.1.1.3)和磷脂酶A2(3丄1.4.)。可以考慮的脂肪酶包括但不限於來自腐質黴屬(與嗜熱絲孢菌屬同義)的脂肪酶，例如專利或7>布的專利申請EP258,068和EP305,216所述來自疏毛腐質黴(T.lanuginosus)，或WO96/13580所述來自特異腐質黴的脂肪酶;假單胞菌脂肪酶，例如來自產鹼假單胞菌或類產鹼假單胞菌(EP"8,272)、洋蔥假單胞菌(P.cepacia)(EP331,376)、施氏假單胞菌(GB1,372,034)、螢光假單胞菌(P.fluorescens)、假單胞菌屬物種林系SD705(WO95/06720和WO96/27002)、P.wisconsiiieiisis(WO96/12012)的脂肪酶；芽孢桿菌脂肪酶，例如來自枯草桿菌(Dartois等人，1131BiOCHEM.BIOPHYS.ACTA253-360(1993));嗜熱脂肪芽孢桿菌(JP64/744992)或短小芽胞桿菌(WO91/16422)的脂肪酶，所有文獻在此通過整體引用而併入。其它實例是脂肪酶變體，例如WO92/05249、WO94/01541、EP407225、38EP260105、WO95/35381、WO96/00292、WO95/30744、WO94/25578、WO95/14783、WO95/22615、WO97/04079和WO97/07202中所述的那些，所有文獻在此通過整體引用而併入。優選的市售可得的脂肪酶包括LipolaseTM、LipolaseUltraTM、LipozymeTM、PalataseTM、NovozymTM435和LecitaseTM(均可獲自NovoNordiskA/S)。可以按METHODSOFENZYMATICANALYSISvol.4(第三版，VeiiagChemie，Weinhein，1984)所述確定脂肪酶的活性。應理解任何展示生物煮練活性的酶均可以用於本公開的組合物中。也就是說，可使用源自其它生物的生物煮練酶、或者源自上面列舉的酶且其中一或多個胺基酸已發生添加、缺失或置換的生物煮練酶，包括雜種多肽，條件是生成的多肽展現生物煮練活性。可以使用常規誘變法產生變體並使用例如高通量篩選技術如瓊脂板篩選法進行鑑定。3.3化學漂白試劑和^^漂白體系另一方面考慮將漂白試劑與枯草桿菌果膠酸裂合酶及其變體組合用於處理坊織品o只要漂白試劑和體系不使組合物的酶失活，則對該漂白試劑或體系沒有限制。示例性的漂白試劑包括，例如過氧化氫、過氧化脲、過氧化碳酸鈉、過氧化鈉、過硼酸鈉、次氯酸鈉、次氯酸4丐、高錳酸鹽和二氯異氰脲酸鈉。優選實施方式中，使用過氧化氫作為漂白試劑。另一實施方式中，S^l生物漂白試劑單獨使用或與非酶促漂白試劑一起使用。生物漂白試劑的非限制性實例是過氧化物酶(Colonna等人，"Recentbiologicaldevelopmentsintheuseofperoxidases,"17TIBTECH163-168(1999))和氧化還原酶(例如，葡糖氧化酶)(Pramod，"Liquidlaundrydetergentscontainingstabilizedglucose-glucoseoxidativesystemforhydrogenperoxidegeneration，"美國專利No.5,288,746)。漂白化合物可以以約0.01至約10g/L水性溶液或洗液，更優選約0.1至5g/L，和更優選約0.5至約2.5g/L的量存在於水性溶液中。另一方面考慮將過水解酶與其它化學漂白試劑例如過碳酸鈉、過硼酸鈉、硫酸鈉/過氧化氫加合物和氯化鈉/過氧化氫加合物和/或光敏漂白染料39例如磺化酞菁的鋅或鋁鹽組合使用以進一步提高漂白效果。其它實施方式中，可以加入進一步與漂白增效劑(例如，TAED、NOBS)組合的過水解酶。漂白增效劑也可以在沒有過水解酶的情況下與本/^開的果膠酸裂合酶和漂白試劑相組合使用。3.3.1酶促漂白體系通過酶促過水解(perhydrolysis)進行過酸生產的關鍵組分是酶、酯底物和過氧化氫。3.3.1.1過氧化氫過氧化氫可以直接地分批加入，或者原位持續產生。例如，在2004年12月3日遞交的題為"perhydrolase，，的PCT/US2004/040438(在此通過引用併入)中描述的乙醯轉移酶也可以與任何其它合適的Kb02源，包括由化學、電化學和/或除&手段產生的11202源，一起使用。化學來源的實例是過碳酸鹽和過硼酸鹽，而電化學來源的實例是氧氣和氫氣供料的燃料電池，以及降冗實例包括從葡萄糖與葡糖氧化酶的反應生產11202。下式提供了可以使用的偶聯體系的實例葡糖氧化酶葡萄糖+H20---------------------->葡糖酸+H202+過水解酶H202+酯底物--------------------->醇+過酸與適合的底物產生H202的其它酶也可以與本文所述的組合物和方法組合使用。例如，來自已知從乳酸和氧氣產生H202的乳桿菌屬物種(lactobacillus)的乳酸氧化酶。事實上，該方法的一個優點在於酸(例如，上例中的葡糖酸)的產生將使鹼性溶液的pH降至對於過酸在漂白中最為有效的pH範圍(即，為pKa或低於pKa)。其它可以產生過氧化氫的酶(例如乙醇氧化酶、乙二醇氧化酶、丙三醇氧化酶、胺基酸氧化酶等)也可與酯底物及過水解酶組合用於產生過酸。一些優選實施方式中，酯底物選自一或多種下述酸甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、辛酸、壬酸、癸酸、十二烷酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸和油酸。因此，如本文所述，本公開的組合物和工藝比當前用於紡織品漂白的方法和組合物，可以提供明確的優點。3.3.2漂白活化劑本發明可使用任何適合的漂白活化劑。根據本發明優選使用的漂白活化劑包括，例如屬於下類物質的化合物多醯化的糖或具有Cl-10-醯基基團的糖f汴生物，所述醯基優選乙醯基、丙醯基、辛醯基、壬醯基或苯甲醯基，尤其優選乙醯基，它們可以用作漂白活化劑。可以使用的糖或糖衍生物是單糖或二糖及其還原的或氧化的衍生物，優選葡萄糖、甘露糖、果糖、蔗糖、木糖或乳糖。這類物質中尤其適合的漂白活化劑是例如，五乙醯基葡萄糖、木糖四乙酸酯、l-苯甲醯基-2，3，4，6-四乙醯基葡萄糖和1-辛醯基-2，3,4，6-四乙醯基葡萄糖。另一類優選用作漂白活化劑的物質包括例如醯基氧基恭璜酸及其鹼金屬和鹼土金屬鹽，例如Cw4-醯基基團。優選乙醯基、丙醯基、辛醯基、壬醯基和苯甲醯基，尤其是乙醯基和壬醯基。這類物質中尤其適合的漂白活化劑是乙醯氧基苯磺酸和苯甲醯氧基苯磺酸。它們優選地以其鈉鹽的形式使用。組合或與TAED組合)；O-醯基將酯，例如丙酮O-乙醯基肟、丙酮O-苯曱醯基坊、二(丙基亞氨基)碳酸酯、二(環己基亞M)碳酸酯作為漂白活化劑。根據本發明可以用作漂白活化劑的醯化肟描述於，例如EP-A-O028432。才艮據本發明可以用作漂白活化劑的肟酯描述於，例如EP-A-0267046。其它優選的漂白活化劑包括N-醯基己內醯胺，例如N-乙醯基己內醯胺、N-苯甲醯己內醯胺、N-辛醯基己內醯胺和羰基雙己內醯胺；N，N-二醯化的和N，N，N'，N'-四醯化的胺，例如N，N，N'，N，-四乙醯基甲二胺和-乙二胺(TAED)、N，N-二乙醯基苯胺、N，N-二乙醯基-對-甲苯胺或1，3-二醯化乙內醯脲例如1，3-二乙醯基-5，5-二甲基乙內醯脲；N-烷基-N-磺醯基醯胺例如N-曱基-N-甲磺醯基乙醯胺或N-曱基-N-甲磺醯基苯甲醯胺;N-醯化環醯肼、醯化三唑或尿唑，例如單乙醯化馬來醯肼；O，N，N-三取代的羥胺，例如O-苯甲醯基-N,N-琥珀醯基-羥胺、O-乙醯基-N，N-琥珀醯基羥胺或O,N，N-三乙醯基羥胺；N,N，-二醯基磺醯胺，例如N，N'-二甲基-N，N'-二乙醯基磺醯胺或N，N'-二乙基-N，N'-二丙醯基磺醯胺；三醯基氰脲酸酯例如三乙醯基氰脲酸酯或三苯甲醯基氰脲酸酯；羧酸酐例如苯甲酸酐、間-氯苯甲酸酐或鄰苯二甲酸酐；1，3-二醯基-4，5-二醯基氧基咪唑啉，例如1,3-二乙醯基-4，5-二乙醯氧基咪唑啉；四乙醯基甘脲和四丙醯基甘脲；二醯化2，5-二酮哌嗪例如1，4-二乙醯基-2，5-二酮哌噪；亞丙基雙脲和2，2-二曱基亞丙基雙脲的醯化產物例如四乙醯基亞丙基雙脲；a-醯氧基多醯基丙二醯胺例如a-乙醯氧基-N，N，-二乙醯基丙二醯胺；二醯基二氧代六氫-l，3,5-三嗪例如1，5-二乙醯基-2，4-二氧代六氫-l，3，5-三嗪；2-烷基-或2-芳基-(4H)-3，1-苯並喁嗪-4-酮如EP-B1-0332294和EP-B0502013所述，和2-苯基-(4H)-3,1-苯並嗜、嗪-4-酮和2-甲基-(4H)-3，1-苯並噴、嚷-4-酮、陽離子亞硝酸鹽，如EP303520和EP458396Al所述，例如三甲基銨基乙腈、N，N-二甲基-N-辛基銨基乙腈、2-(三甲基銨基)丙腈、2-(三甲基銨基)-2-甲基丙腈的甲磺酸鹽或甲#^酸鹽。還適合的是N-甲基哌嗪基-N，N'-二乙腈和N-甲基嗎啉基乙腈(MMA)的甲磺酸鹽。或二醯基過M羧酸酯類及其前體。漂白活化劑通常以約0.1至30g/l,更優選0.5至10g/l的量添加。3.3.2漂白穩定劑本發明另一優選實施方式中，漂白體系還含有一或多種漂白穩定劑。漂白穩定劑包括能吸附、結合或絡合痕量重金屬的添加劑。根據本發明可以使用的具有漂白穩定作用的添加劑的實例包括但不限於多陰離子化合物，例如多磷酸鹽、多羧酸鹽、多羥基多羧酸鹽，完全或部分中和的鹼金屬或鹼土金屬鹽形式的可溶性矽酸鹽，尤其是中性Na或Mg鹽，其是相對弱的漂白穩定劑。根據本發明可以使用的強漂白穩定劑的實例是*劑例如，乙二胺四乙酸(EDTA)、二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、次氮基三乙酸(NTA)、甲基-甘氨酸二乙酸(MGDA)、卩-丙氨酸二乙酸(ADA)、乙二胺-N,N'-二琥珀酸(EDDS)和膦酸例如乙二胺四亞曱基膦酸、二亞乙基三胺五亞甲基膦酸(DTMPA)或羥基亞乙基-l，l-二膦酸(以酸的形式或以部分或全部中和的鹼金屬鹽的形式)。漂白穩定劑通常以約0.1至約5g/L處理組合物，更優選約0.5至約2g/L，和最優選約lg/L的量加入處理組合物。根據本發明的漂白組合物優選含有至少一種漂白穩定劑，和更優選至少一種上述強漂白穩定劑。有效漂白通常導致一或多個下述特性(i)期望的白度(使用例如Macbeth色目機通過Ganz白度測量確定)；(ii)令人滿意的塵屑去除均一性(肉眼觀察評估)；優選地，織物的白度為50Ganz單位或更高，和最優選60Ganz單位或更高。因此，優選實施方式中，一浴工藝包括酶體系，例如果膠酸裂合酶、過氧化氬、漂白活化劑(例如TAED)和漂白穩定劑。3.4染色體系果膠酸裂合酶組合物可以與多種如下染色體系一起使用，所迷染色體系與下述條件相容(i)用於生物煮練的條件，如果生物煮練和染色同時進行的話，或(ii)在生物煮練之後調整的條件，如果染色在生物煮練之後進行的話。該染色體系包括但不限於(a)常規染色體系，包括下述中的一或多種(i)直接染料，例如，C.I.直接紅81;黃U和28;橙39;紅76;藍78，86，106，107和108;黑22;(ii)活性染料，例如，C.I.活性紅1，3,6，17，120，194;藍4，19,171和182;黑5;紫5;(Hi)還原染料，例如，C.I.還原黃28;橙11和15;藍6,16和20;綠1和3,8;棕1;黑9和27;(iv)硫化染料，例如，C.I.硫化黑l和ll;棕l;紅10;和(v)偶氮染料，例如，C.I.偶合組分5和U與C.I.偶氮染料重43氮組分44和45的組合。此類常規染色體系是本領域已知的且描述於，例如Shore編，CELLULOSICDYEING(SocietyofDyersandColorists，AldenP固，1995)和COLOURINDEXvol.1-8Supplements(SocietyofDyersandColoristsandAmericanAssociationofTextileChemistsandColorists,1977-1988)。3.5輔助組分組合物也可包括各種輔助組分，本文中也將其稱作輔助化學品。此類組分包括但不限於多價螯合或螯合劑，潤溼劑、乳化劑、pH控制劑(例如緩衝液)、漂白催化劑、穩定劑、分歉劑、消泡劑、去汙劑及其混合物。應理解該輔助組分是除酶、漂白試劑和退漿劑之外附加的。3.5.1潤溼劑潤溼劑通常選自表面活性劑且尤其是非離子型表面活性劑。當使用時，通常以每升浴約0.1至約20g，更優選約0.5至約10g/L,和更優選0.5至約5g/L的水平包括潤溼劑。出於多種原因，包括緩衝能力、螯合、*以及還有增強表面活性劑的性能，可以使用穩定劑。穩定劑可以減慢過氧化物分解的速度，並且可以與可催化過氧化物分解並誘發纖維損壞的金屬雜質結合或中和該金屬雜質。穩定劑是眾所周知的，其中無機的以及有機的種類均是7〉知的，而且矽酸鹽或有機磷酸酯贏得了最廣泛的接受，穩定劑如果存在則可以以每升浴(bath)約0.01至約30g，更優選約0.01至約10g/L，和最優選約0.01至約5g/L的水平使用。3.5.2表面活性劑適合使用的表面活性劑包括但不限於非離子型(參見例如美國專利No.4，565，647，其在此通過引用併入)；陰離子；陽離子和兼性離子表面活性劑(參見例如美國專利No.3,929，678，其在此通過引用併入)；其通常以按重量計約0.2%至約15%,優選按重量計約1%至約10%的濃度存在。陰離子表面活性劑包括但不限於，線性烷基M酸鹽、a-烯烴磺酸鹽、烷基硫酸酯鹽(脂肪醇硫酸酯鹽)、醇乙氧J^危酸酯鹽、仲烷基磺酸鹽、a-磺基脂肪酸甲酯鹽、烷基-或鏈烯基琥珀酸和急。非離子型表面活性劑包括但不限於，醇乙氧基化物、壬基酚乙氧基化物、烷基多糖苷、烷基二曱基胺氧化物、乙氧基化脂肪酸單乙醇醯胺、脂肪酸單乙醇醯胺、多羥基烷基脂肪酸醯胺和葡糖胺的N-醯基N-烷基衍生物("葡糖醯胺類")。優選用於實施方式中的表面活性劑是非離子型表面活性劑或非離子型和陰離子型的混合物。3.5.3螯合劑也可以使用螯合劑且螯合劑可選自M羧酸鹽、氨基膦酸鹽、多官能取代的芳香族螯合劑及其混合物，所有這些全部在下文進行定義。用作可選的螯合劑的氨基羧酸鹽包括乙二胺四乙酸鹽、N-羥乙基乙二胺三乙酸鹽、次氮基三乙酸鹽、乙二胺四丙酸鹽、三亞乙基四胺六乙酸鹽、不含具有大於約6個碳原子的烷基或鏈烯基的膦酸鹽。多官能取代的芳族螯合劑也可以用於本文的組合物。參見例如US專利No.3812044。酸形式的該類型優選化合物是二羥基二磺基苯，例如1,2-二羥基-3，5-二磺基苯二亞乙基三胺五乙酸，和乙醇二甘氨酸、其中的鹼金屬、銨和取代的銨的鹽，和它們的混合物。當允許至少低水平的總磷時，氨基膦酸鹽也適用在本公開的組合物中用作螯合劑。優選的用於本文的可生物降解的螯合劑是乙二胺二琥珀酸("EDDS")，尤其是如授予Hartman和Perkins的US專利No.4,704,233中所述的[S，S1異構體。可以考慮的其它螯合劑包括EDTA和EGTA。當螯合劑存在時，其以約0.01至約10g/L,更優選約0.1至約5g/L，和最優選約0.2至約2g/L的水平使用。4.用於單獨的或與漂白、退漿和/或染色組合的生物煮練的工藝含酶和漂白體系的水性溶液與紡織品材料接觸的方式將取決於該加工方案是連續的、半連續的、還是不連續的軋堆(pad-batch)、堆置(batch)(或連續流)。例如，對於連續或不連續的軋堆工藝，該水性酶溶液優選包含在飽和器浴(saturatorbath)中且隨紡織品材料經過此浴而連續地施加至45紡織品材料上，該工藝期間，紡織品材料通常以例如其重量0.5-1.5倍的量吸收該加工液。在堆置操作中，以液體-織物比率為5:1-50:1將織物暴露於酶溶液約2分鐘至24小時。這些是一般參數。一些實施方式中，通過使用更濃的酶和其它化合物的溶液，可縮短該時間。本領域技術人員能夠確定最適於其自身需要的參數。可在比傳統煮練、退漿和漂白技術更低的溫度，進行本文公開的方法。一個實施方式中，在低於95°C，優選約2(TC至75。C之間進行該方法。更優選的實施方式中，在約25。C至60。C之間進行該方法。可在比傳統退漿、煮練或漂白技術更接近中性的pH範圍進行本發明方法。儘管可在pH約5至ll之間使用本發明的方法，但優選pH低於9。一個實施方式中，該方法在pH約6至9之間，和優選地6至8之間實施。本領域普通技術人員將認識到可以選擇待使用的工藝條件，以便匹配期望使用的特定設備或特定工藝類型。例如，雖然需要處理的紡織品優選在約15。C至約95。C的溫度保持與處理溶液接觸對於處理該紡織品而言適宜的一段時間，其中該時間為至少約2分鐘至24小時，更優選約30分鐘至約12小時，優選約30分鐘至約6小時和最優選約30至約卯分鐘，其中所述溫度優選在約15。C至約65°C，最優選約WC至約45°C。但是，當然，本領域普通技術人員將認識到諸如時間和溫度的反應條件將根據所用的設備和/或工藝及處理的織物而變化。待使用的工藝類型的優選實例包括但不限於Jet、Jigger/Winch、Pad-Roll和Pad-Steam類型。可使用汽蒸或冷-漂原理，按分批、半連續或連續工藝進行該組合的工藝。作為實例，該工藝可包括下述步驟(a)將織物浸漬在如本文所述的煮練和漂白浴中，之後壓軋出過量液體以維持實施該反應所需的液體量(通常為幹織物重量的60%至120%);(b)對該浸漬的織物進行汽蒸，以l更使織物達到期望的反應溫度，通常約加。C至約80。C之間；和(c)通過在J-Box、U-Box、地趁機等中巻起或打褶織物而保持足夠長時間以允許發生煮練和漂白。如它處所提及，退漿可能是想要的結果。因此，對於某些類型的織物，將該紡織品進行退漿處理以便獲得具有期望品質的終產物，可能是有利的和/或必需的。該情況下，可在該紡織品上利用工藝的組合，例如組合的退漿、漂白和煮練工藝，或組合的退漿和漂白工藝，或組合的退漿和煮練工藝這些方法可以涉及向所述處理溶液中提供未經整理的紡織品組分。該紡織品組分可包括纖維、紗、織物，包括織造物、編織物、衣服和非織造布。"未經整理"旨在指紡織品組分是尚未進行過退漿、煮練、漂白、染色、印花，或者未經過可提供整理步驟的其它處理，例如耐久壓燙的材料。當然，本領域普通技術人員將認識到該紡織品尚未經過涉及該材料的剪裁和縫合的製衣工藝或其它製作工藝。本發明的工藝可用於任何紡織品材料，包括纖維素材料(cellulosics)，例如棉、亞麻、苧麻、大麻、人造絲、lyocell、醋酸纖維素、和三醋酸纖維素，以及合成材料，包括但不限於聚酯、尼龍、斯潘德克斯(spandex)、萊克拉(lycra)、聚丙烯腈系纖維和各種其它天然和合成材料的混合物。天然材料可包括蛋白質纖維，例如羊毛、蠶絲、羊絨、以及此處所述的纖維素材料。本發明的工藝可用於漂白，而不會對可能易4皮鹼水解和降解的幾種類型的合成紡織品和其混合物，包括但不限於，聚酯、AJt絲、醋酸纖維素、尼龍、棉/聚酯、棉/萊克拉等，造成明顯的纖維或織物破壞。該方法可以在處理步驟後進一步包括燒毛工藝和絲光工藝步驟。雖然可在單獨的步驟中使用退漿，但在優選的實施方式中，通過在處理浴中包括退漿酶從而將漂白、退漿和煮練組合成一個單步驟，可以將退漿步驟包括在一步處理中。當然，在該優選的應用中，本工藝在本文提供的一步處理方法後可以包括一個清洗步驟或一系列的清洗步驟。經處理的紡織品的清洗是眾所周知的且在本領域技術人員的水平內。清洗階段通常存在於退漿、煮練和漂白步驟(當存在時)之每一個之後，以及存在於本發明處理步驟後。也可在染色步驟後進行清洗。此外，本發明處理步驟，不管它們的順序和/或組47合，均可在優選的實施方式中包括浸溼(wet-ont)或預溼步驟以保證紡織品中均勻或均一的溼潤。紡織品的潤溼性對於任何紡織品的染色和/或整理均是重要的。潤溼性導致染料或整理劑對紡織品的出色滲透和出色的染色和/或整理結果。因此，紡織品的潤溼性可以指示處理工藝的有效程度。較高的潤溼性意味著更有效和出色的處理工藝，即用於潤溼的時間更短。常規紡織品過氧(peroxygen)漂白只在超過95°C的溫度提供可接受的潤溼性質，而較低溫度的漂白(70°C)導致大於約40%的潤溼性。用於吸溼性檢測的一種方法是AATCCTestMethod79-1995，其可以用於快速檢測處理後的潤溼性。可以通過涉及在銅乙二胺(CP)中+狀纖維的AATCC檢測法82-1996測量基於流度的纖維損傷。切下約1.5mm的代表性纖維樣品並在具有若干玻璃球的樣本瓶中將其溶解在按公式CP=120x(樣品重量)xO.98的定義的CP中，置於氮氣下並振蕩溶解近2小時。加入按公式CP=80x(樣品重量)x(0.98)定義的額外的CP並在氮氣下再振蕩3小時。持續攪拌下放置溶液以防止^t體分離。然後可以在校準的OswaldCanonFenske粘度計中，於25。C恆溫浴中測量該溶液以確定流出時間。由公式F=100/ctd計算流度，其中c^粘度計常數，t-流出時間，而d二溶液密度l.O52。4.1工業應用4^>開的方法和組合物在工業上具有許多實際應用，如本文所考慮的，且本說明書旨在舉例說明而非囊括一切。一個實施方式中，本發明的組合物、化合物和方法可以用於纖維、紗、織物、衣服和非織造布的加工。主要應用包括涉及紡織品的煮練和漂白的紡織品一步^加工。紡織品的退漿也可以與煮練、漂白、以及與煮練、漂白和/或生物拋光同時進行。組合物中酶組分的給定劑量(即水平)取決於比活性、工藝條件和想要的結果。本領域技術人員可以確定該劑量水平。相比於傳統的基於化學的處理，例如鹼性煮練、漂白等，本文描述的組合物和方法在降低強度損失的同時提供有效的紡織品處理。不受任何理論限制，相信與常規化學處理相比，該組合物和方法對纖維損壞更小並因此降低強力損失。可通過本領域/^知的技術測量強力損失，例如ASTMD5034(抓樣試驗)、ASTMD5035(織物條樣強力試驗)、ASTMD3787(鋼球式頂破強力試驗)和/或ASTMD3786(編織產品和非織造織物的液壓法頂-皮強力)。本發明煮練劑可以單獨使用，或與其它煮練劑、退漿劑、漂白試劑和染色劑及其組合進行聯用。為了保證酶與紡織品之間的良好接觸，應利用潤溼劑。可以在施用酶之前或同時施用潤溼劑。由於本/^開的生物煮練酶非鉀依賴型，故可以使用弱和強螯合劑。因此，可以使用弱螯合劑例如但不限於多膦酸鹽、葡糖酸和檸檬酸以及強螯合劑例如EDTA。螯合劑的使用可以根據組合物中存在的其它酶的需要而變。然而，鉤去除有助於蠟去除和避免漂白損壞。4.2—浴退漿和煮練的方法一方面提供一步或一浴退漿和煮練，其發生在與退漿或煮練相同的條件下。用水、退漿酶，和生物煮練酶的組合處理紡織品，優選還聯合一或多種試劑，例如但不限於穩定劑、表面活性劑、潤溼劑、M劑、螯合劑和乳化劑，以及其混合物。允許已上漿的織物在加工液中停留足夠長的保留時間來實現退漿和煮練。該保留時間取決於工藝方案的類型和使用的溫度，並且可以從約15分鐘至約2小時及高達24小時之間變化。加工可以是分批、半連續或連續的，其中紡織品與液體加工流以平幅或以繩狀方式接觸。連續的操作通常使用飽和器，從而將每織物重量大約相等重量的加工液施加於織物上，隨後使用熱堆置室，於其中發生化學反應。然後於清洗區準備用於下一加工步驟的織物。為了保證高白度和良好的潤溼性和由此保證染色，必須從紡織品中徹底除去退漿和煮練酶及其它試劑。連續工藝可以在約15。C至約95°C,pH約5至約11進行約5分鐘至約1小時。分批工藝通常在一個加工浴(即單浴)中發生，其中紡織品與近8-15倍其重量的加工液接觸。反應期後，排乾加工液，漂洗紡織品並進行下一49步驟。對於不連續的軋堆工藝，使用飽和器，其中將每織物重量大約相等重量的加工液施加至織物上，1^是停留期，這在冷軋堆工藝的情況下可能是一或多天。例如，冷軋堆工藝可以在約20-40。C之間，pH在約5和11之間，進行8-24小時或更長時間。軋堆工藝可以在約25-85。C和在類似的pH進行約1-6小時。對於退漿酶，例如鹼性a-澱粉酶(例如AQUAZY1VFM120L,Novozymes或PurastarTMOxAm，Genencor)可以以約180-240KNU/L或約180-240KNU/kg紡織品存在。退漿酶的其它範圍包括但不限於l-100KNU/kg紡織品或2-20KNU/kg紡織品。KNU是a-澱粉酶活性且可以按照WO2006/002034所討論的來計算。通常，向工藝中加入表面活性劑來增強疏水化合物的溶解性和/或防止它們重沉積回紡織品上。因而，這一上下文中，洗滌劑與表面活性劑是同義的。洗滌劑可以是非離子型表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性表面活性劑、兼性離子表面活性劑和半極性表面活性劑或其混合物。用於組合的煮練和退漿的表面活性劑通常以按重量計約0.1%至約60%的量存在。選擇的表面活性劑應與組合物中存在的酶組分相容。液體和凝膠組合物中，以至少不降低存在的酶的穩定性的方式配製表面活性劑。可以按本領域的教導配製表面活性劑。參見例如，國際PCT申請WO2006/002034。4.3用於組合的漂白、煮練和/或退漿的方法一方面，考慮-使用本公開裂合酶的組合的煮練和漂白。因而，考慮在酶促漂白體系和過氧化物存在下用該酶進行煮練和漂白，其中對於去除果膠，最適pH範圍為約6至約8。優選的酶促漂白體系是醯基轉移酶的體系。對於冷軋堆工藝，溫度優選約15"至45。C並更優選約25。C至約35°C。對於非冷軋堆工藝，可使用不超過95。C的較高溫度。水性溶液或洗液通常具有pH約5至約11。優選地，處理組合物的pH是約5至約9，並且更優選約6至約8。一個實施方式中，不加鹼的情況下進行該用於處理紡織品的一浴法。優選地，這一處理用於處理對鹼敏感的紡織品，例如但不限於蠶絲、羊毛、尼龍、聚酯、萊克拉、醋酸纖維素及混紡織物。另一實施方式中，在pH低於9，更優選低於8，並且甚至更優選低於7，進行該用於處理紡織品的一浴法。另一實施方式中，在添加鹼的情況下進行用於處理紡織品的一浴法。優選地，在pH約8至約11進行接觸。例如可通過添加鹼性試劑如NaOH控制pH。根據需要，可以以按重量計織物的約0.1至約10%的量添加鹼性試劑以獲得想要的pH。然而，本領域技術人員將明了，加入的鹼性試劑的量取決於所用漂白化合物的量。應理解酶、漂白化合物、漂白穩定劑以及鹼性試劑(如使用)的最佳劑量和濃度、水性溶液或洗液的體積、以及pH和溫度將根據下述內容而變化(i)纖維的性質，即天然纖維、紗或紡織品；(ii)是否同時或順序進行煮練和漂白；(iii)所用的具體酶，以及酶的比活性；(iv)工藝進行時的溫度、pH、時間等條件；(v)洗液中其它組分的存在；和(vi)所用工藝方案的類型，即連續、不連續的軋堆或堆置。可以使用常規實驗確定工藝條件的優化，例如，通過建立條件矩陣並檢測該矩陣中不同的點。例如，可以改變酶量、發生接觸時的溫度、以^i。工的總時間，這之後評估得到的纖維素材料或紡織品的(a)果膠去除；(b)煮練後的性質(scouredpr叩erty)，諸如潤溼性；和(c)漂白的質量，例如白度。優選實施方式中，可調整條件或處理組合物以利於退漿、煮練或漂白工藝，例如，通過調整pH、潤溼劑濃度、或二價陽離子螯合劑(例如乙二胺四乙酸)濃度，以便進一步促進漂白工藝。優選實施方式中，順序模式可進一步包括在步驟(ii)和(iii)之間調節水性溶液或洗液的組成的一或多個特性。例如，可在步驟(ii)和(iii)之間調節pH、潤溼劑濃度或二價陽離子螯合劑(例如乙二胺四乙酸)的濃度以進一步促進漂白工藝。就溫度、攪拌、時間等而言，第一和第二孵育的條件也可不同。4.4用於一浴生物前處理和染色的方法51一方面考慮在一浴中進行生物前處理(或煮練)和染色。至少有兩種實踐該方法的模式。一方面，將生物煮練酶和染色體系加入與纖維素纖維或織物接觸的水性溶液或洗液中，並且在合適的條件下醉育足夠長的時間以實現有效煮練和有效染色。替代方法中，(i)將生物煮練酶加入洗液；(ii)在合適條件下進行第一孵育足夠長的時間以至少引起，且優選實現有效煮練；(iii)然後向含有生物煮練酶的洗液補入染色體系；和(iv)在合適條件下進行第二孵育持續足夠長的時間以實現有效染色。應理解所述的第二方法可進一步包括在步驟(ii)和(iii)之間調節洗液的組成的一或多個特性(例如pH、離子強度、濃度或潤溼劑或二價陽離子螯合劑如EDTA或EGTA的濃度)，而且第一和第二孵育在溫度、攪拌、pH、時間等方面也可具有不同的條件。可以調節水性溶液中的酶濃度以便加入到給定量的纖維中的酶劑量為約0.1至約10000mol/min/kg纖維，優選約1至約2000mol/min/kg纖維，及最優選約10至約500mol/min/kg纖維。使用不同的計量單位，酶劑量因此可以是例如約250至12000APSU/kg纖維(APSU意指鹼性果膠酶標準單位)，優選約500至卯OOAPSU/kg纖維，最優選約1000至6000APSU/kg纖維。含生物煮練酶的水性溶液具有pH約5至約11，和更優選約6-10。優選的pH將取決於是否同時或順序進行煮練和染色。如果同時進行煮練和染色，洗液優選具有pH約5至約8,5，且最優選約7至約8。當順序進行這些步驟時，步驟(i)和(ii)中的洗液可優選具有pH約6至9，例如約7.0至約8.5，而步驟(iii)和(v)中具有約6至約9的pH。此外，洗液優選含有低濃度的添加的鈣(即小於2mMCa2+)或完*乏添加的Ca2+或其它二價陽離子。當同時生物煮練和染色時，進行組合的煮練和染色工藝的溫度可在約15。C和約95。C之間，更優選約20。C和80。C之間，並最優選約40。C和70°C之間。當順序發生生物煮練和染色步驟時，可以利用類似的溫度，或者可以改變溫度以包括約25。C至約50。C用於煮練步驟；而進行隨後的染色的溫52度可在約30。C和約IOO'C之間，優選低於50。C。應理解溫度的選擇將取決於(i)纖維性質，即天然纖維、紗或紡織品；(ii)用於煮練的具體酶，以及具體氧化酶(如果用於染色的活)；和(iii)具體染料或染料類型。例如，通常在約60。C和95。C之間進行浸染。例如在60。C至80。C進行活性染色和直接染色而在約95。C附近進行硫化染色。另外，硫化和直接染色(例如Ciba染料，例如Solophenyl)需要高鹽濃度(例如NaCl)。活性和直接染色也需要優選在約pH6至8的範圍的pH，本文公開的果膠酸裂合酶在該pH工作良好。當按照AATCCTestMethod39-1980使用液滴試驗(droptest)測量時，有效的煮練通常導致小於約IO秒，優選小於約5秒，和最優選小於約2秒的潤溼性。通常，有效煮練需要消化纖維中相當大比例的果膠，優選按重量計至少30%、更優選按重量計至少50%，和最優選至少70%。果膠消化指斷裂果膠中a-l，4-糖苷鍵以便可以通過例如，漂洗或任何其它常規分離方法從纖維中除去消化產物。用於測量纖維的果膠消化程度的方法包括但不限於，例如Luft,171THEANATOMICALRECORD347(1971)所述的釕紅染色方法。有效染色通常導致下述特性中的一或多個(i)期望的色澤和顏色深度(使用例如Mecbeth色目機通過CIE1^*3*13*測量來確定)；(ii)滿意的勻染度(目視評價)；和(iii)色牢度特性，例如耐洗牢度、耐光牢度和耐(溼和幹)摩擦色牢度至少約3.0,優選高於3.5,和最優選高於4.0(使用AATCCTECHNICALMANUAL,vol.7，350(1995)中公開的MethodEP1在灰度色標上測量)。此外，使用帶有枯草桿菌果膠酸裂合酶的組合物的方法可導致進行單缸(single-vat)生物煮練和染色的纖維相比於只進行染色的纖維具有增強的染料攝取。優選地，染料攝取的增強為至少約10%。可通過例如(i)測量染料溶液的上染率，或(ii)測量織物中顏色強度(L*a*bMi)來測量染料攝取。為了實現有效煮練，酶劑量(mol/min/kg纖維)、洗液中的酶濃度(mol/min/L洗液)、施用於給定量的纖維的洗液的總體積(L/kg纖維)，將根據下述而變化(i)纖維的性質，即天然纖維、紗或紡織品；(ii)是否同時或順序進行煮練和染色；(iii)所用的具體酶，以及酶的比活性；(iv)進行該工藝的溫度、pH、時間等條件；和(v)洗液中其它組分的存在。可以通過建立條件矩陣並檢測該矩陣中不同的點，使用常規實驗確定合適的條件，包括，例如酶劑量、酶濃度(或酶混合物中的酶濃度)、溶液體積和待使用的溫度。例如，可以改變酶量、發生接觸的溫度、以M口工的總時間，這之後評估得到的纖維或紡織品的(a)果膠去除；(b)煮練後的性質諸如潤溼性；和(c)染色的質量。同時煮練和染色時，纖維與果膠酸裂合酶(任選地存在其它酶)和纖維素染料，例如C丄活性藍184可以在下述條件下接觸(i)約45。C的溫度；(ii)pH約7.0-8.0;(iii)沒有加入二價陽離子；(iv)洗液:織物比率約0.5至約50;和(v)生物煮練酶劑量約10至約500mol/min/kg纖維。下面的實施例中證實可以使用公開的果膠酸裂合酶或果膠酸裂合酶製劑在50。C或更低(但高於0°C)的溫度且最佳在室溫下進行煮練步驟。組合的漂白生物煮練反應的pH可以為約6至約11，且最佳為約6.0至85。5、清潔組合物除去源自植物、食品和水果的汙垢對於清潔行業，不管是清潔紡織品還是其它物質來講是一項挑戰。這些汙垢通常含有(主要基於碳水化合物及其衍生物的)纖維性材料的複雜混合物纖維和細胞壁組分。果膠聚合物是植物細胞壁的重要組分且與源自植物或水果的汙垢相關。該汙垢通常見於汙染的織物中。例如，在汙染的織物上可以發現這些汙垢。通常難於從汙染的栽汙體上有效除去這些汙垢。源自水果和/或蔬菜汁的重度有色或"乾涸"汙垢尤其難於除去。對於清潔此類汙垢而言，具體實例包括植物汙垢，例如源自菠菜、甜菜根、胡蘿蔔和番茄；水果例如櫻桃、漿果、芒果、桃、杏、香蕉和葡萄的那些。此外，果膠和果膠酸組分也用於食品添加劑，例54如水激淋、番茄沙司、果凍、果醬和嬰兒食品中。因此，另一方面是清潔因帶有此類食品添加劑的食物汙染紡織品或表面而造成的汙漬。因此，在洗滌劑組合物或清潔組合物中包括果膠酸裂合酶，可以通過將果膠和果膠酸切割成較易於除去的組分，而有助於分解存在於汙垢中的果膠和果膠酸。基於植物細胞壁降解酶的總量(w/w)，清潔組合物可以包括至少50%，優選至少75。/。的果膠酸裂合酶，該組合物可以進一步包括半纖維素酶。一些實施方式中，該組合物可包括90%(w/w)或更多的果膠酸裂合酶作為;ti物細胞壁降解酶活性。另一方面，該組合物可以包括其它酶。可以以一或多種組合方式考慮的其它酶類包括但不限於蛋白酶、澱粉酶、p-葡聚糖酶、脂肪酶、半纖維素酶、角質酶、果膠酶和其它果膠酸裂合酶。纖維素、半纖維素和果膠在細胞壁中存在高度相互作用。將這些相當強烈交聯的多糖結構酶促降解並不簡單。已知大量的酶參與植物細胞壁降解。廣義上可以將它們分為纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶(Ward和Young,8CRCCRITICALREV.INBIOTECH.237-274(1989))。纖維素是植物細胞壁的主要多糖組分。其由p-l，4-連接的葡萄糖聚合物組成。纖維素可以被纖維素酶(也稱作纖維素分解酶)分解。傳統將纖維素分解酶分為了三類內切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶或纖維二糖水解酶(CBG)、和p-葡糖苷酶(J.Knowles等人，5TRENDSINBIOTECH.TECH，255-261(1987))。與所有細胞壁降解酶類似，可以通過大量細菌、酵母和真菌產生纖維素酶。果膠是水杲和蔬菜可食用部分的細胞壁的主要組分。位於兩個細胞壁之間的胞間層主要由原果膠構成，其是不溶形式的果膠。果膠被認為是細胞內膠粘劑且由於其膠體性質，它們在植物的水分調節系統中起重要作用。植物中果膠的量可以非常高。例如，據報導檸檬皮中含有高達其乾重30%的果膠，橘皮含有15-20%，而蘋果皮含有約10%(K,Norz,ZUCKERUNDSUSSWARENWIRTSCHAFT38:5-6(1985))。果膠由鼠李糖半乳糖醛酸聚糖骨架構成，其中通過間隔地插入1，2-連接的(a-L-吡喃鼠李糖基)殘基中斷1,4連接的((x-D-半乳糖醛酸聚糖)鏈(W.Pilnik等人，INTHEBIOCHEMISTRYOFFRUITSANDTHEIRPRDUCTS,vol.l,Chapter3，(AcademicPress,1970))。其它糖，例如D-半乳糖、L-阿拉伯糖和D-木糖作為側鏈存在。許多半乳糖醛酸聚糖殘基在C2和C3位置被曱基基團酯化。已知大量酶可以降解果膠。該酶的實例是果膠酯酶、果膠裂合酶(也稱作果膠反式消除酶)、果膠酸裂合酶和內切或外切多聚半乳糖酪酸酶(Pilnik和Voragen,4FOODBIOTECH319-328(1990))。除了降解平滑區的酶，也發現了降解毛狀區的酶例如鼠李糖半乳糖醛酸酶和輔助酶(Schols等人，206CARBOHYDRATERES.105-115(1990);SearleVanLee匿n等人，38APPL.MICROBIOL.BIOTECHNOL.347-349(1992))。半纖維素是植物細胞壁中一類複雜的非澱粉多糖。它們由木糖、阿拉伯糖、半乳糖或甘露糖的聚合物組成，其通常高度分支並且連接到其它細胞壁結構上。因此，多種酶可以用於降解這些結構。木聚糖酶、半乳聚糖酶、阿拉伯聚糖酶、地衣多糖酶和甘露聚糖酶是用於降解這些結構的一些半纖維素降解酶。因而，清潔組合物可以組合地包括這些半纖維素降解酶中的一或多種與果膠酸裂合酶。因此，所選用於所考慮的組合物的酶將最佳地在約15。C-5(TC的溫度範圍和pH約6.0至約8.0起作用。例如，Kormelink(1992，博士論文,UniversityofWageningen，TheNetherlands)討論了內切和外切木聚糖酶和輔助酶例如葡糖醛酸糖苷酶、阿拉伯吹喃糖苷酶、乙醯木聚糖酯酶和阿魏酸酯酶或香豆酸酯酶。這些酶由多種微生物產生並具有各不相同的最適溫度和pH。與其它細胞壁降解酶(CWDE)相似，許多微生物合成半乳聚糖酶(參見例如Dekker和Richards,32ADV.CARBOHYDRAT.CHEM.BIOCHEM.278-319(1976))。植物細胞壁中，存在兩類阿拉伯半乳聚糖I型一一1，4-|5-半乳聚糖和II型一一具有分支主鏈的1，3/1，6-p-半乳聚糖(Stephen,THEPOLYSACCHARIDES97-193(G.O.Aspinael(編)"AcademicPress,NewYork,1983))。兩種類型的半乳聚糖各自需要相應類型的內切酶來實現降解。可以預期其它酶，例如阿拉伯聚糖降解酶和外56切半乳聚糖酶可以在阿拉伯半乳聚糖降解上起作用。地衣多糖酶(EC3.2.1/73)水解含1，3-和1，4-鍵的p-D-葡聚糖中的1,4-p-D-糖苷鍵。例如在纖維素中，地衣多糖酶作用於只含1,4-鍵的P-D-葡聚糖。因此，地衣多糖酶的應用不會損壞織物中的纖維素纖維。地衣多糖酶由細菌例如澱粉液化芽孢桿菌(B.amyloliquefaciens)、環狀芽胞桿菌(B.circulans)、地衣芽胞桿菌，和植物產生(參見例如，S.Bielecki等人，10CRIT.REV.INBIOTECHN.275-304(1991))。阿拉伯聚糖具有由相互通過a-(1—5)鍵連接的a-L-阿拉伯糖單位組成的主鏈。側鏈通過a-(1—3)或有時通過a-(1—2)連接到a-(1—5)-L阿拉伯聚糖主鏈上。蘋果中，例如，總阿拉伯糖的三分之一存在於側鏈中。阿拉伯聚糖的分子量通常約15kDa。已知多種植物和^L生物生產阿拉伯聚糖降解酶。已經通過分子生物學技術克隆了可以獲自黑麴黴的三種酶(參見例如，歐洲專利申請0506190)。並且，克隆了細菌諸如擬桿菌屬(Bacteroides)細菌的阿拉伯糖苷酶(參見例如，Whitehead和Hespell172丄BACTERIOL.2408(1990))。半乳甘露聚糖是在豆科(Leguminosae)種子中發現的貯存性多糖。半乳甘露聚糖具有線性(1—4)-p-甘露聚糖主鏈，且由(1—6)-a-半乳糖單殘基取代。例如，瓜爾豆膠中，甘露糖/半乳糖的比率是約2比l。半乳甘露聚糖在諸如調味品和湯類等食品產品中用作增稠劑。例如，國際PCT申請WO93/24622描述了甘露聚糖酶。葡甘露聚糖由葡萄糖和甘露糖的主鏈組成。該主鏈可被半乳糖及乙醯基基團取代；可以由許多微生物，包括細菌和真菌生產甘露聚糖酶。另一類可包括的酶是纖維素酶。有時加入纖維素酶來作為抗起球組分、提高柔軟度或用於額外的清潔效果。纖維素酶不能大量使用，因為許多紡織品纖維包括高百分比的纖維素纖維。纖維素纖維易於^皮纖維素酶降解。因此，纖維素酶自身並不特別適合用於紡織品和織物的清潔，因為它們不能以足以除去源於植物的汙漬的量加入而不損壞紡織品。纖維素酶可以與其它能夠分解植物細胞壁的酶一起加入洗滌劑或紡織品清潔組合物中。由於酶混合物對纖維性物質及其汙垢具有協同作用，因此酶組合可以包括較低濃度的每種酶。因而，當纖維素酶量降至低於組合物中存在的植物細胞壁降解酶總量(w/w)的50%，優選低於25%和最優選{氐於10%時，細胞壁降解酶的使用可以產生最佳清潔條件而不損壞紡織品纖維。或者，清潔組合物中可以不存在纖維素酶。總的來講，存在由不同生物產生的大量植物細胞壁降解酶。根據它們的來源，這些酶的底物特異性、最適pH和溫度、Vmax、Km等是不同的。酶的複雜性反映了植物細胞壁的複雜性質，其在植物物種之間以及物種內的植物組織之間有強烈不同。可以根據植物材料的來源、應用的目的以及具體應用條件(例如pH、溫度、底物、二價離子和過氧化物的存在)製備適合用於清潔、生物煮練和漂白組合物中的酶混合物。近年來，這些細胞壁降解酶的可得性和種類顯著增加，這開啟了使用這些酶的選擇的組合在洗滌劑和清潔組合物中作為添加劑的可能性。這些洗滌劑和清潔組合物尤其適於除去植物汙垢。由於許多研究的細胞壁降解酶產生自真菌並展現酸性pH範圍內的最適pH，故鑑定在酸性pH下工作的果膠酸裂合酶(例如本文討論的)對於製備新型洗滌劑和清潔組合物是有益的。許多情況下，所公開的酶可以通過培養生產它的微生物並從培養物或肉湯培養物分離該酶而獲得。也可以通過重組DNA才支術獲得該酶，其中提供具有編碼所需酶的遺傳信息和適用於表達該遺傳信息的元件的宿主細胞。宿主細胞可為同源微生物或異源微生物，其二者均可包括但不限於細菌、桿菌、酵母和真菌；然而它們也可以包括高等真核生物細胞，例如植物或動物細胞。其在提供具有編碼一種以上的酶或一種以上的酶活性(例如雜種酶)的遺傳信息的宿主細胞方面也可能是非常有用的。儘管已經一定程度地強調了微生物作為便利的酶源，但應理解可使用來自任何來源的酶，只要它們具有能夠分解至少部分的植物細胞壁的活性即可。由於這一活性是最相關的特性，故很顯然，也可以使用與枯草桿菌果膠酸裂合酶具有相同或相似活性的衍生物、片段或其組合且它們包括在酶的定義中。衍生物包括突變體以及化學修飾的酶，該突變體中已添加、缺失或置換一或多個胺基酸來保持或提高酶的某些特性。組合物可包括單個酶，果膠酸裂合酶。更優選地，其將是不同酶的混合物，其中這些酶優選能夠降解植物細胞壁的不同部分、有助於漂白、煮練或除去汙垢組分(例如，存在植物細胞壁組分作為增稠劑或凝膠劑等的食品組合物的汙垢)。本公開的酶是外切多聚半乳糖醛酸裂合酶，其優選底物為多聚半乳糖醛酸。該酶將多聚半乳糖醛酸切割為A4:5不飽和的半乳糖醛酸。產物通常是從底物的還原端分離開的不飽和A4:5雙半乳糖醛酸。直到最近，對於4艮道的所有酶，除了歐文氏菌屬物種的那些酶外，最適pH都被指示為在8.0和9.5之間且4丐離子被認為是絕對必需的。參見例如，JohnR.Whitaker,"MicrobialPectolyticEnzymes,"rNMICROBIALENZYMESANDBIOTECHNOLOGY158(第二版W.M.Fogarty和C.T.Kelly,1990，ElsevierSciencePub.Co.,Inc，)。可以考慮與枯草桿菌的果膠酸裂合酶組合使用的酶的非限制性列表包括下述。可以使用澱粉酶且其包括，例如細菌或真菌來源的a-或P-澱粉酶。也可以考慮該澱粉酶的化學或遺傳修飾的突變體。a-澱粉酶的示例性列表包括例如可以獲自芽孢桿菌屬物種，尤其是地衣芽胞桿菌的特定抹系(英國申請No.1296839)的a-澱粉酶。相關的市售可得的澱粉酶包括INatalaseTM、Stainzyme、Duramy、Termamyl、TermamylTMUltra、Fungamyl⑧和BAN(可獲自NovozymesA/S，Bagsvaerd，Denmark)，和Rapidasem及MaxamyITM(可獲自DSM，Holland)。或者，a畫澱粉酶可以源自芽孢桿菌屬物種林系NCIB12289、NCIB12512、NCIB12513和DSM9375。其它a-澱粉酶包括如在WO00/60060(在此通過引用併入)公開的源自芽孢桿菌屬物種DSM12649的a-澱粉酶以及其變體。其它有用的澱粉酶是CGTases(環糊精葡聚糖轉移酶，EC2.4丄19)，例如，可59獲自芽孢桿菌屬、高溫厭氧桿菌屬或高溫厭氧芽孢桿菌屬物種的那些。內切葡聚糖酶也可以與果膠酸裂合酶和/或其它酶一起使用。蛋白酶包括動物、植物或微生物來源的那些。優選微生物來源的蛋白酶。在這方面包括蛋白酶的化學或遺傳修飾的突變體。蛋白酶可為絲氨酸蛋白酶，優選鹼性微生物蛋白酶或胰蛋白酶樣蛋白酶。鹼性蛋白酶的實例是枯草桿菌蛋白酶，尤其是源自芽孢桿菌屬的那些，例如枯草桿菌蛋白酶Novo、枯草桿菌蛋白酶Carlsberg、枯草桿菌蛋白酶309、枯草桿菌蛋白酶147和枯草桿菌蛋白酶168(描述於，例如WO89/06279)。胰蛋白酶樣蛋白酶的實例是描述於如WO89/06270的胰蛋白酶(例如，源自豬或牛的)和鐮孢屬(Fusarium)蛋白酶。這些酶也可以與半纖維素酶組合以對含有半纖維素和類似多糖的汙垢提供提高的去汙性能。該半纖維素酶包括木聚糖酶、木葡聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、乙醯木聚糖酯酶、葡糖酪酸糖苷酶、阿魏酸酯酶、香豆酸酯酶、內切-半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、內切-或外切-阿拉伯聚糖酶、外切-半乳聚糖酶。適合的甘露聚糖酶包括細菌或真菌來源的那些。包括化學或遺傳修飾的突變體。例如，組合物可以包括甘露聚糖酶，例如源自芽孢桿菌屬，尤其是WO99/64619公開的芽孢桿菌屬物種l633或Bacillusagaradhaerens，例如來自DSM8721抹系的甘露聚糖酶。適合的甘露聚糖酶是由NovozymesA/S生產的Mannaway⑧。酶組合物也可以考慮使用P-葡聚糖酶(EC3.2.1.6)以對含有P-葡聚糖的汙垢提供提高的去汙性能。其它優選的(3-葡聚糖酶包括地衣多糖酶和昆布多糖酶。例如，果膠酸裂合酶可以與其它果膠分解酶例如原果膠酶，其它果膠酶，多聚半乳糖醛酸酶或其它果膠酸裂合酶組合來對含果膠的汙垢提供提高的去汙性能。適合的果膠分解酶包括例如WO"/27083、WO99/27084、WO00/55309和WO02/092741所述的那些。本文討論的果膠酸裂合酶還可以與果膠裂合酶(EC4,2.2.10)、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖裂合酶(EC未定)、內切1，4-半乳聚糖酶(EC3.2.1.89)、木葡聚糖酶(EC未定)、木聚糖酶(EC3.2.1.8)、阿拉伯聚糖酶(EC603.2.1.99)、a-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(EC3.2.1.55)、甘露聚糖內切1，4-甘露糖苷酶(EC3.2.1.78)、(5-甘露糖苷酶(EC3.2丄25)、卩-l，3-l，4-葡聚糖酶(EC3.2丄73)、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖水解酶、外切多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.67)、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖酶(EC未定)、葡聚糖l，3-ji-葡糖苦酶(EC3.2.1.58)、葡聚糖內切l，6-P-葡糖苷酶(EC3.2,1.75)、甘露聚糖內切1，4-P-甘露糖苷酶(EC3.2丄78)、內切1，4-卩-木聚糖酶(EC3.2.1.8)、纖維素1，4-纖維二糖苷酶(EC3.2.1.91)、纖維二糖水解酶(EC3.2.1.91)、多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)、乙醯基和甲基酯酶(例如鼠李糖半乳糖醛酸聚糖甲基酯酶、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖乙醯基酯酶、果膠甲基酯酶(EC3丄1.11)、果膠乙醯基酯酶(EC未定)、木聚糖曱基酯酶、乙醯木聚糖酯酶(EC3.1.1.72)、阿魏酸酯酶(EC3.1.1.73)、肉桂酸酯酶(EC3.1.1.73))組合，以對相應的汙垢提供提高的去汙性能。為了增強汙漬去除，可以包括具有內切-活性的酶。這些酶將聚合纖維化合物切成較小的片段，並因此提高纖維物質及其結合的色素的溶解性。組合物可以具體調整以適應其預期用途。例如，用於手工或自動清潔紡織品的組合物通常將與用於清潔廚具(刀具或陶器)、地板和瓷磚的組合物包括不同成分。該清潔組合物也將與預備用作在清潔汙垢或載汙體前或在使用第二洗滌劑之前施用的"pre-spotter，，的組合物不同。用於組合物的通常成分包括表面活性劑、助洗劑、漂白試劑、酶例如澱粉酶和蛋白酶，等。可將洗滌劑組合物配製為清潔粉或清潔液。它們可以用作洗衣用洗滌劑、餐具洗滌組合物、家用或家務(例如地板和瓷磚)清潔劑、預洗組合物、和/或其它紡織品，織物和衣服洗滌組合物。5.1.1紡織品表面活性劑另一實施方式涉及含枯草桿菌果膠酸裂合酶的水性組合物，其還包括展示相容的或協同的反應的表面活性劑，該組合物具有提高的漂白和/或煮練效果。表面活性劑強化組合物可以以與果膠酸裂合酶組合的形式包括表面活性劑體系，其中表面活性劑可以選自非離子型和/或陰離子和/或陽離子和/或兼性和/或兩性離子和/或半極性表面活性劑。該組合物中也可以包括其它酶。表面活性劑通常以按重量計0.1%至60%(更優選0.2%-15%)的水平存在，且最優選以其促進或至少不降低這些組合物中的任何酶的穩定性的方式來配製。可以使用的優選體系包括非離子和/或陰離子表面活性劑。烷基酚的聚氧乙烯、聚氧丙烯、和聚氧丁烯縮合物適合用作表面活性劑體系中的非離子表面活性劑，優選聚氧乙烯縮合物。脂族伯和仲醇與約1至約25摩爾環氧乙烷的縮合產物適用作非離子表面活性劑體系中的非離子表面活性劑。烷基多糖苷也可以用作非離子型表面活性劑，例如US專利No.4,565,647所述。環氧丙烷與丙二醇縮合形成的疏7jc基和環氧乙烷的縮合產物也是適用的。其它可以用於所述組合物中的非離子型表面活性劑包括環氯乙烷與環氧丙烷和乙二胺的反應產物的縮合產物、以及醇乙氧基化物、壬基酚乙氧基化物、烷基多苷、烷基二曱基胺氧化物、乙氧基化脂肪酸單乙醇醯胺、脂肪酸單乙醇醯胺、多羥基烷基脂肪酸醯胺，和葡糖胺的N-醯基N-烷基衍生物("葡糖醯胺類，，)。優選的陰離子表面活性劑包括烷基烷氧基化硫酸酯鹽表面活性劑和類似的磷酸酯。適合使用的陰離子表面活性劑是烷基酯磺酸鹽表面活性劑、烯烴磺酸鹽、烷基琉酸酯鹽(脂肪醇硫酸酯鹽)、醇乙氧基硫酸鹽、仲烷基磺酸鹽、a-磺基脂肪酸甲酯、烷基或鏈烯基琥珀酸，和皂，包括C8-C20羧酸(即脂肪酸)的線性酯(其可以用氣態S03磺化)。水性酶組合物也可以包括其它可用於紡織品清潔的陰離子表面活性劑。水性酶組合物也可以含有陽離子、兩性、兼性離子和半極性表面活性劑，以及除本文已經公開的那些以外的非離子和/或陰離子表面活性劑。當表面活性劑被包括時，水性酶組合物通常包括按重量計約1%至約40%和更優選按重量計約3%至約20。/。的表面活性劑。5.1.2消泡劑紡織品清潔、漂白和煮練組合物中的另一可選成分可以是泡沫抑制劑或消泡劑。示例性的消泡劑包括聚矽氧烷、DC-S44(DowCorning)和二氧化矽-聚珪氧烷混合物。消泡劑通常以按重量計組合物的0.001%至2%,優選按重量計0.01%至1%的水平使用。參見例如，US專利No.3,933,622。5.1.3蛋白酶適合用於所述組合物中的蛋白酶包括動物、植物或微生物來源的那些。優選地，蛋白酶是微生物來源的。該蛋白酶可為絲氨酸蛋白酶或金屬蛋白酶，例如鹼性微生物蛋白酶或胰蛋白酶樣蛋白酶。蛋白酶的實例包括但不限於(a)氨肽酶，包括但不限於脯氨醯氨肽酶(3.4.11.5)、X-pro氨肽酶(3.4.11.9)、細菌亮氨醯氨肽酶(3.4.11.10)、耐熱氨肽酶(3.4,11.12)、賴氨醯氨肽酶(3.4.11.15)、色氨醯氨肽酶(3.4.11.17)和甲硫氨醯氨肽酶(3.4.11.18);(b)絲氨酸內肽酶，包括但不限於糜蛋白酶(3.4.21.1)、胰蛋白酶(3.4.21.4)、黃瓜素(cucumisin)(3.4.21.25)、brachyurin(3.4.21.32)、cerevisin(3.4.21.48)和枯草桿菌蛋白酶(3.4.21.62);(c)半胱氨酸內肽酶，包括但不限於木瓜蛋白酶(3.4.22.2)、無花果蛋白酶(3.4.22.3)、木瓜凝享L蛋白酶(3.4.22.6)、蘿摩蛋白酶(3.4.22,7)、獼猴桃蛋白斷3.4,22.14)、番木瓜蛋白酶(3.4.22.30)和ananain(3.4,22.31);(d)天冬氨酸內肽酶，包括但不限於胃蛋白酶A(3.4,23.1)、麴黴天冬醯蛋白酶I(3.4.23.18)、青黴天冬醯蛋白酶(3.4.23,20)和酵母天冬醯蛋白酶(3.4.23.25);以及(e)金屬內肽酶，例如芽孢桿菌溶素(3.4.24.28)。枯草桿菌蛋白酶的非限制性實例包括枯草桿菌蛋白酶BPN'、枯草桿菌蛋白酶amylosacchariticus、枯草桿菌蛋白酶168、枯草桿菌蛋白酶mesentericopeptidase、枯草桿菌蛋白酶Carlsberg、枯草桿菌蛋白酶DY、枯草桿菌蛋白酶309、枯草桿菌蛋白酶147、thermitase、aqualysin、芽孢桿菌PB92蛋白酶、蛋白酶K、蛋白酶TW7和蛋白酶TW3。市售可得的蛋白酶包括AlcalaseTM、SavinaseTM、PrimaseTM、l)uralaseTM、EsperaseTM、KannaseT,DurazymTM(NovoNordiskA/S)、MaxataseTM、MaxacaFM、MaxapemTM、ProperaseTM、PurafectTM、PurafectOxPTM、FN2tm和FN3TM(GenencorInternationalInc.)。也可以用於組合物和方法中的是蛋白酶變體，例如歐洲專利申請No.130756(Genentech);EP260105(Ge歸cor);EP251446(Genencor);歐洲申請525610(Solvay);和EP214435(Henkel);國際PCT申請No.WO87/04461(Amgen);WO87/05050(Genex);WO88/08028(Genex);WO88/08033(Amgen);WO89/06279(NovoNordiskA/S);WO91/00345(NovoNordiskA/S);和WO94/02618(Gist-BrocadesN.V.);和Thomas等人，318NATURE375-376(1985);Thomas等人，193丄MOL.BIOL.193:803-813(1987);Russel等人，328NATURE496-500(1987)中z〉開的那些。可以例如通過METHODSOFENZYMATICANALYSIS,vol.5(第三版，VerlagChemie，Weinheim1984)所述確定蛋白酶的活性。5丄4脂肪酶在包括枯草桿菌果膠酸裂合酶的組合物中也可以考慮包括脂肪酶。適合的脂肪酶(也稱作羧酸酯水解酶)包括但不限於細菌或真菌來源的那些，包括三醯甘油脂肪酶(3.1.1.3)和磷脂酶A2(3丄1.4.)。其它脂肪酶包括但不限於來自腐質黴屬(與嗜熱絲孢菌屬同義)的脂肪酶，例如歐洲專利申請號258,068和305,216所述來自疏毛腐質黴(T.lanuginosus)，或如國際PCT申請WO96/13580所述來自特異腐質黴的脂肪酶；假單胞菌脂肪酶，例如來自產鹼假單胞菌或類產鹼假單胞菌(歐洲專利號218,272)、洋蔥假單胞菌(歐洲專利號331,376)、施氏假單胞菌(英國專利號1,372,034)、螢光假單胞菌、假單胞菌屬物種林系SD705(參見例如國際PCT申請WO95/06720和WO96/27002)、P.wisconsi固sis(國際PCT申請WO96/12012)的脂肪酶；芽孢桿菌脂肪酶，例如來自枯草桿菌(參見例如Dartois等人，1131BiOCHEM.BIOPHYS.ACTA253-360(1993));嗜熱脂肪芽孢桿菌(曰本申請號64/744992)或短小芽胞桿菌(國際PCT64申請號WO91/16422)的脂肪酶。其它實例可以包括脂肪酶變體，例如國際PCT中請WO92/05249、WO94/01541、WO95/35381、WO96/00292、WO95/30744、WO94/25578、WO95/14783、WO95/22615、WO97/04079和WO97/07202;和歐洲專利號407225和260105中所述的那些。優選的市售可得的脂肪酶包括但不限於LipolaseTM、LipolaseUltraTM、LipozymeTM、PalataseTM、NovozymTM435和LecitaseTM(均可獲自NovoNordiskA/S)。可以按METHODSOFENZYMATICANALYSISvol,4(第三版，VeiiagChemie，Weinhein,1984)所述確定組合物中脂肪酶的活性。其它生物煮練酶可以與果膠酸裂合酶一起使用。該其它生物煮練酶可以源自其它微生物，或是源自上述列舉的酶經添加、缺失或置換了一或多個胺基酸而得的生物煮練酶，包括雜種多肽。可使用該衍生物和雜種多肽，只要所得的多肽展示生物煮練活性即可。可以使用常規誘變法產生此類變體並且使用例如高通量篩選技術如瓊脂板篩選法進行鑑定。例如，可以通過如下方式測量果膠酸裂合酶活性向瓊脂板(例如，LB瓊脂)中打出的4mm孔(含有0.7%w/v聚半乳糖醛酸鈉(SigmaP1879))施加受試溶液。然後在特定溫度(例如25-40。C)孵育板6小時。然後(O在lMCaCI2中浸漬該板0.5小時或在(ii)l。/。混合的溴化烷基三甲基銨(MTAB，SigmaM-7635)中浸漬該板lh。這些程序都造成聚半乳糖趁酸在瓊脂內的沉澱。可以通過在沉澱的聚半乳糖醛酸背景中透明區的出現檢測果膠酸裂合酶活性。使用果膠酸裂合酶標準製劑的稀釋液校準該檢測法的靈敏度。可以使用常規方法確定分離的生物煮練酶的溫度、pH和二價陽離子依賴性。例如，可在一個溫度和pH範圍以及在存在和不存在不同濃度的Ca2+下進行酶促活性檢測試驗，並定量最適溫度和pH以及二價陽離子的影響(如果有)。然後確定溫度、pH和陽離子依賴性，建立特定果膠酸裂合酶在本發明所考慮的組合物和方法中使用的適宜性。這些也可以在一系列底物上進行檢測。生物煮練酶可源自其來源細胞或者可為重組產生的，且可純化或分離。65如本文所使用，"純化的"或"分離的"酶是這樣的酶，其已經經處理除去了源自合成它的細胞的、可幹擾其iHl活性的非酶物質。通常，生物煮練酶與作為內源性組分或作為重組產物產生它的細菌或真菌^:生物分離。如果酶分泌到培養基中，純化可包括使用常規方法，通過離心、過濾或沉澱從生物質中分離培養基。或者，酶可經細胞破壞從宿主細胞釋放然後自生物質分離。一些情況下，可以通過常規蛋白質純化方法實現進一步純化，該方法包括但不限於硫酸銨沉澱；酸或離液劑提取；離子交換；分子篩；和疏水色譜，例如FPLC和HPLC;製備性等電聚焦和製備性聚丙烯醯胺凝膠電泳。或者可使用親和色譜如免疫親和色譜實現純化。例如，可使用具有用作親和"標籤"的額外胺基酸序列的雜種重組果膠酸裂合酶，該標籤有利於使用適合的固相基質進行的純化。可化學修飾生物煮練酶來增強提供有利特徵的一或多個特性，例如，增加溶解性、減小不穩定性或二價離子依賴性等。修飾包括但不限於磷酸化、乙醯化、疏酸化、醯化或本領域技術人員已知的其它蛋白質修飾。5.1.5助洗劑體系根據本發明的組合物可以進一步包含助洗劑體系。任何常規的助洗劑體系都適合用於這裡，包括矽鋁酸鹽材料、矽酸鹽、多羧酸(鹽)和脂肪酸、如乙二胺四乙酸鹽等材料、金屬離子螯合劑如氨基多膦酸，尤其是乙二胺四亞甲基膦酸和二亞乙基三胺五亞甲基膦酸。儘管由於明顯的環境原因較不優選磷酸鹽助洗劑，但其仍可以用在此處。適當的助洗劑可以是無機離子交換材料，通常是無機水合矽鋁酸鹽材料，更特別的是水合的合成沸石，如水合沸石A、X、B、HS或MAP。另一適合的無機助洗劑材料為層狀珪酸鹽，例如SKS-6(Hoechst)。SKS-6是由矽酸鈉(Na2Si;j05)組成的晶體層狀矽酸鹽。適宜的含有一個羧基基團的多羧酸鹽包括乳酸、甘醇酸和其醚衍生物。包含兩個羧基基團的多羧酸鹽包括琥珀酸、丙二酸、(亞乙二氧基)雙乙酸、馬來酸、二甘醇酸、酒石酸、丙醇二酸和富馬酸的水溶性鹽，以及在例如US3,935,257中公開的醚羧酸鹽和亞硫醯基羧酸鹽。含有三個羧酸基團的多羧酸鹽包括尤其是水溶性檸檬酸鹽、烏頭酸鹽和檸康酸鹽以及琥珀酸鹽衍生物，如羧曱基氧基琥珀酸鹽，2-羥基丙氧基琥珀酸鹽(lactoxysuccinates)，和氧基多羧酸鹽材料如2-氧雜-l，l，3-丙烷三羧酸鹽。包含四個羧基基團的多羧酸鹽包括氧基雙琥珀酸鹽、含有磺基取代基的1,1，3，3-丙烷四羧酸鹽(參見例如美國專利號3,936,448)、1，1，2，2,-乙烷四羧酸鹽、磺化熱解的檸檬酸鹽，及包含膦取代基的多羧酸鹽。脂環族的和雜環的多羧酸鹽包括環戊烷-順,順，順-四羧酸鹽、環戊二烯五羧酸鹽、2，3，4，5-四氫呋喃-順，順，順-四羧酸鹽、2，5-四氫呋喃-順-二羧酸鹽、2，2，5，5,-四氫呋喃四羧酸鹽、1，2，3，4，5，6-己烷-六羧酸鹽和多元醇如山梨醇、甘露糖醇和木糖醇的羧甲基衍生物。芳族多羧酸鹽包括苯六甲酸、苯四酸和鄰苯二曱酸衍生物。優選的多羧酸鹽包括每個分子包含不超過3個羧基基團的羥基-羧酸鹽，更優選的是檸檬酸鹽。洗劑如沸石A或層狀矽酸鹽(SKS-6)和水溶性羧酸螯合劑如檸檬酸的混合物。適合包含在本發明洗滌劑組合物中的螯合劑是乙二胺-N，N'-二琥珀酸(EDDS)或其鹼金屬、鹼土金屬、銨或取代的銨鹽，或它們的混合物。優選的EDDS化合物是游離酸形式和其鈉或鎂鹽。這些優選的EDDS鈉鹽的實例包括Na2EDDS和Na4EDDS。優選的EDDS鎂鹽的實例包括MgEDDS和Mg2EDDS。鎂鹽最優選包含在本發明組合物中。也可以考慮可以形成粒狀組合物中使用的助洗劑體系的一部分的助洗劑材料，包括但不限於，無機材料如鹼金屬碳酸鹽、碳酸氫鹽、矽酸鹽，和有機材料如有機膦酸鹽、氨基聚亞烷基膦酸鹽和氛基多羧酸鹽。其它適宜的水溶性有機鹽是均聚物酸或共聚物酸或它們的鹽，其中多羧酸包含至少兩個被不多於兩個的碳原子相互隔開的氣基基團。聚丙烯酸鹽包括分子量2000-5000道爾頓的那些和它們與馬來酸酐的共聚物，該共聚物的分子量是20,000到70,000，尤其約40,000。67組合物中通常包括5%到80。/。重量的洗滌助洗劑鹽。液體洗滌劑中優選包括5%到30%的助洗劑。5.1.6漂白劑另外可選的可包括在本發明洗滌劑組合物中的洗滌劑組分包括漂白劑如過硼酸鹽PB1、PB4和過碳酸鹽。這些漂白劑成分可以包括一種或多種氧漂白劑(oxygenbleachingagent)和，才艮據選擇的漂白劑，一種或多種漂白活化劑。目前的氧漂白化合物通常以約1%至約25%的水平存在。通常，漂白化合物是非液體製劑，例如粒狀洗滌劑中的任選加入組分。其也可以包括本文所討論的漂白體系。包括氧漂白劑以及其它本領域已知的漂白劑。適用於本發明的漂白劑可以是活化的或未活化的漂白劑。一種可用的氧漂白劑包括過羧酸漂白劑和其鹽。此類漂白劑的適宜實例包括單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物、間氯過苯甲酸鎂，4-壬氨基-4-氧代過氧丁酸和雙過氧十二烷二酸。美國專利號4，483，781、EP0133354和美國專利號4,412,934中公開了這些漂白劑。非常優選的漂白劑也包括在美國專利號4,634,551中公開的6-壬氨基-6-氧代過氧己酸。另一類漂白劑包括卣素漂白劑。次滷酸鹽漂白劑的實例包括例如三氯異氰脲酸，二氯異氰脲酸鈉和鉀及N-氯和N-溴烷烴磺醯胺。這些材料通常佔成品的0.5-10%重量，優選1-5%重量。此類滷素漂白劑一般不太優選用於酶促洗滌劑中。過氧化氫釋放劑可與漂白活化劑結合使用，漂白活化劑如四乙醯基乙二胺(TAED)，壬醯基氧基苯磺酸鹽(NOBS,見例如美國專利號4,412,934)，3，5-三甲基-hexsanoloxy苯磺酸鹽(ISONOBS，見例如EP120591)或五乙醯基葡萄糖(PAG)，它們在過水解後形成作為活性漂白物的過酸，從而使漂白效果得到提高。另夕卜，非常適合的漂白活化劑是C8(6-辛醯氨基-己醯基)氧基笨璜酸鹽，C9(6-壬醯氨基己醯基)氧基笨璜酸鹽和C10(6-癸醯氨基己醯基)氧基^t酸鹽或其混合物。同樣適當的活化劑是醯化檸檬酸酯，如在歐洲專利申請號91870207.7中公開的醯化檸檬酸酯。在本發明的清潔組合物中有用的漂白劑(包括過氧酸)和漂白體系(包含漂白活化劑和過氧漂白化合物)。過氧化氫也可以通過添加能夠在洗滌和/或漂洗開始或其過程中產生過氧化氫的S^體系(即酶及其底物)而存在。這種^體系公開於歐洲專利申請EP0537381中。氧漂白劑以外的其它漂白劑也是本領域已知的並可在此利用。一種特別有意義的非氧漂白劑包括光活化漂白劑如磺化酞菁鋅和/或鋁。這些材料在洗滌過程中可以沉積到載汙體(substrate)上。在光照下，在氧氣存在時，如在白天通過懸掛衣物乾燥，此磺化酞菁鋅將被活化，導致載汙體被漂白。優選的酞菁鋅和光活化漂白方法公開於例如美國專利號4,033,718。通常，洗滌劑組合物包含約0.025%至約1.25%重量的磺化酞菁鋅。漂白劑也可包含錳催化劑。錳催化劑可以是例如在"對於低溫漂白有效的錳催化劑"，Nature369,1994，pp.637-639中描述的化合物之一。5.1.7其它成分可以以各種組合形式用於洗滌劑組合物中的其它成分包括汙物懸浮劑或抗再沉積劑、汙垢釋放劑、螢光增白劑、磨料、殺細菌劑、晦暗抑制劑、著色劑和/或包嚢化或未包嚢化的香料。特別適合的包嚢化材料是由具有多糖和多羥基化合物的基質組成的水溶性嚢。其它適合的水溶性包嚢化材料包括衍生自取代的二羧酸的未糊化澱粉酸酯的糊精(參見例如美國專利號US3,455,838)。這些酸-酯糊精優選製備自澱粉如蠟質種玉米、蠟質種高梁、西米、木薯和馬鈴薯。所述包嚢化材料的適當實例包括NationalStarch生產的N-Lok。N-Lok包嚢化材料由改性玉米澱粉和葡萄糖組成。澱粉通過添加單官能取代的基團如辛烯基丁二酸酐改性。用於洗滌劑中的典型抗再沉積劑包括水溶性的，通常是有機的膠體，包括例如聚合羧酸如聚丙烯酸或聚馬69來酸或其共聚物的水溶性鹽、膠、凝膠、澱粉或纖維素的醚羧酸或醚磺酸的鹽或纖維素或澱粉的硫酸酯的鹽。含有酸性基團的水溶性聚醯胺也可以用作抗再沉積劑。也可使用可溶性澱粉製劑以及除了上述那些以外的其它澱粉產品，例如部分水解的澱粉。優選使用曱基纖維素、羥乙基纖維素、甲基羥乙基纖維素、羧曱基纖維素鈉及其混合物。這些物質通常組合物的0.05%至10%重量，更優選0.2%至8%重量，最優選0.5%至6%重量的水平使用。也可以考慮4吏用螢光增白劑。優選的螢光增白劑在性質上是陰離子的，其例子是4，4'-二-(2-二乙醇氨基-4-苯絲-s-三溱-6-基絲)二苯乙烯-2，2'二磺酸二鈉、4，4，-二-(2-嗎啉代-4-苯氨基-s-三"秦-6-基氨基)-二苯乙烯-2，2，-二磺酸二鈉、4，4'-二-(2，4-二苯氨基-s-三溱-6-基氨基)二苯乙烯-2，2'-二磺酸二鈉、4'，4"-二-(2，4-二^^基-s-三溱-6-基JL&)二苯乙烯-2-磺酸一鈉、4，4'-二-(2-苯氨基-4-(N-曱基-N-2-羥基乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)二苯乙烯-2,2'-二磺酸二鈉、4，4'-二-(4-苯基-2，1，3-三唑-2-基)-二苯乙烯-2，2，-二磺酸二鈉、4，4'-二-(2-苯氨基-4-(1-甲基-2-羥基乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)二苯乙烯-2，2'-二磺酸二鈉、2-(二苯乙烯基-4"-(萘並-l'，2':4，5)-l,2，3-三唑-2"-磺酸鈉和4，4'-二-(2-磺基苯乙烯基)聯苯。其它可用的聚合材料有聚乙二醇，特別是分子量1000-10000道爾頓，更特別是大約2000到8000且最優選約4000的聚乙二醇。這些材料以0.20%到5%，更優選0.25%到2.5%重量使用。這些聚合物和在前提到的均聚-或共聚-多羧酸鹽對於改善在過渡金屬雜質存在時粘性、蛋白質性和可氧化的汙物上的清潔性能、白度保持、織物灰沉積是有價值的。也可以考慮在提出的洗滌劑和清潔組合物中使用汙垢釋放劑。這些可以包括具有各種排列的乙二醇和/或丙二醇單元與對苯二酸的常規共聚物或三元共聚物。此聚合物的實例公開於例如美國專利號4,116,885和4，711，730和EP0272033。另外非常有用的是形式為對苯二曱酸二甲酯、磺基間苯二甲酸二曱酯、乙二醇和l，2-丙二醇的隨機共聚物的改性聚酯，其中端基主要由磺基苯甲酸酯以及其次由乙二醇和/或1，2-丙二醇的單酯構成。目標是得到一種兩端都被磺基苯甲酸酯基團封端的聚合物，在本上下文中，"主要"是指大部分所述共聚物被磺基苯甲酸酯基團封端。然而，有些共聚物未被完全封端，因此它們的端基可由乙二醇和/或1,2-丙二醇的單酯構成，即"其次"由該類物質構成。也可以考慮在洗滌劑組合物中使用軟化劑。這些軟化劑可以是無機或有機類型。無機軟化劑可舉例的有如在GB-A-1400898和美國專利號5,019,292中公開的綠土粘土(smectiteclay)。有機織物軟化劑包括在GB-A1514276和EP0011340中公開的水不溶性叔胺和在EP-B-0026528中公開的它們同單C,2-Cw季銨鹽的聯合和在EP0242919中公開的雙長鏈醯胺。其它可用的織物軟化體系的有機成分包括在EP0299575和0313146中公開的高分子量聚環氧乙烷材料。綠土粘土的水平通常是5%到15%，更優選約8%到12%重量，該材料以乾燥混合成分形式加入到製劑的剩餘組分中。有機織物軟化劑如水不溶性叔胺或雙長鏈醯胺材料的摻入水平為約0.5%到5%重量，通常為約1%到3%重量，而高分子量聚環氧乙烷材料和水溶性陽離子材料的加入水平為約0.1%到2%，通常為約0.15%到1.5%重量。這些材料通常加入到組合物的噴霧乾燥部分中，儘管在一些情況下可能更適合將它們以乾燥混合顆粒形式添加到其中，或將它們以熔化液體形式噴到組合物的其它固體組分上。可以用於洗滌劑組合物中的另一成分是聚合物染料轉移抑制劑。本發明洗滌劑組合物可以包含約0.001%到10%，優選約0.01%到2%，更優選約0.05%到1%重量的聚合物染料轉移抑制劑。所述聚合物染料轉移抑制劑通常混合到洗滌劑組合物中用以抑制染料從有色織物轉移到同時洗滌的其它織物上。這些聚合物能夠在從染色的織物洗出的易褪色染料有機會接觸洗滌中的其它物件之前結合或吸收該染料。特別適合的聚合物染料轉移抑制劑是多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯基-吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯吡咯烷酮聚合物，聚乙烯基口惡唑烷酮和聚乙烯咪唑或它們的混合物。添加這些聚合物也可提高本發明酶的性能。71本領域技術人員應理解，可以對本文所述的組合物、化合物和方法進行多種修改或改變。實施例實施例1、酶的合成與純化使用高效轉錄基因的aprE啟動子和使果膠酸裂合酶高效分泌到培養基中的AprE信號序列在枯草桿菌中生產來自枯草桿菌亞種subtilis菌林168之衍生物的果膠酸裂合酶。使用正向寡核苷酸引物5，-CGTTGGG-3'(SEQIDNO:3)和反向引物5-TTTTCAAAGCTTTAATTTAATTTACCCGCACCCGCTTGATTT-3'(SEQIDNO:4)，利用PCR從染色體DNA(利用標準酚提取技術分離自枯草桿菌亞種subtms菌林168的衍生物)擴增/7e/基因。正向引物將AprE信號序列的編碼序列在讀框內融合到成熟/7e/基因的編碼序列上。正向引物還包括BbsI限制性位點，其在切割後產生與BssHII位點相容的突出序列。反向引物將HindIII限制性位點引入/^/基因編碼區的終止密碼子後。使用Herculase聚合酶(Stratagene，LaJolla，CA)，基本上按照生產商的推薦進行PCR反應。純化近1.2千鹼基對(kb)的PCR片段(PCRPurificationKit,QiagenInc.，Valencia,CA)並用Bbsl和HindIII消化。用BssHII和HindIII消化表達載體(p2JM103的衍生物)，分離載體條帶並隨後將其與攜帶/7e/基因的經消化的PCR片段連接。生成的表達載體p2JM103pel具有近^0bp的aprE啟動子和信號序列(參見，Ferrari等人，170丄BACT.170:289-295(1988);和Henner等人，170丄BACT.170:296-300(1988))，其自aprE啟動子上遊的EcoRI位點起始而終止於引入aprE信號序列中的BssHH位點處。該aprEDNA片段的該EcoRI位點早先已被克隆到pJM103整合質粒的EcoRI位點中(Perego，"用於枯草桿菌中遺傳操作的整合栽體"，BACILLUSSUBTILISANDOTHERGRAM-POSITIVEBACTERIA:BIOCHEMISTRY,PHYSIOLOGY,ANDMOLECULARGENETICS615-624(Sonenshdn,Hoch,和Losick(編)，AmericanSocietyforMicrobiology,WashingtonD.C，1993)。自該EcoRI至BssHII限制性位點的該aprE片段的DNA序列為5，-GAATTCTCCATTTTCTTCTGCTATCAAAATAACAGACTCGTGATTTTCCAAACGAGCTTTCAAAAAAGCCTCTGCCCCTTGCAAATCGGATGCCTGTCTATAAAATTCCCGAT丁CATCTTA丁TTCTTCCTCCCTCTCAATAATTTTTTCATTCTATCCCTTTTCTGTAAAGT丁丁A丁TTTTCAGAATACTTTTA丁CATCATGCTTTGAAAAAATATCACGATAATATCCATTGT丁CTCACGGAAGCACACGCAGGTCATTTGAACGAATTnTTCGACAGGAATTTGCGTCTACTCTGAATTTTTTTAAAAGGAGAGGGTAAAGAGTGAGAAGCAAAAAATTGTGCGCGC-3'(SEQIDNO:5).使用在LAT終止子(來自地衣芽胞桿菌a-澱粉酶基因，Yuuki等人，98J.BIOCHEM(TOKYO)1147-56(1985))的5，端引入的HindIII位點，將/^/基因的3，端克隆到該終止子上遊。該LAT終止子的3，端早先已以寡核苷酸形式克隆到pJM103質粒的Hindlll位點中，連接後質粒中的原始Hindlll位點被除去。pJM103中，從該Hindlll位點到該失去的Hindlll位點的LAT終止子區的DNA序列為AATCCGTTTTTTTATTTTTAATTAAGAGCTT-3，(SEQIDNO:6)。為了構建生產宿主，使用pJM103pel轉化枯草桿菌BG3594comK(degUHy32，oppA,AspoIIE，AaprE,AnprE,amyE::xylRPxylAcomK-phleo)。通過用木糖誘導由xylA啟動子驅動的comK基因，製造感受態細胞(Hahn等人，21MOL.MICROBIOL.763-75(1996))。在具有5pg/mL氯黴素的LB瓊脂板上選擇轉化體並且在具有25ng/mL氯黴素的LB瓊脂板上對經選擇的菌落進行連續劃線培養直到獲得快速的菌落生長以便選摔73具有較高基因拷貝數的克隆。對於Pel生產，在14L發酵罐中生長培養物。果膠酸裂合酶的生產可以部分地基於本領域已知的芽孢桿菌發酵、回收和配製來進行，且可以相應地進行調整。為了生長接種物，用P/。葡萄糖補充LuriaBroth(LB)肉湯並向肉湯中添加25ppm氯黴素抗生素(用作菌林標記物)。類似的營養富集培養基可以替代LB肉湯。用在液氮罐中凍存於甘油貯存物中的細胞接種培養基。在2L含有600ml該預備的培養基的三角瓶中生長種子，在37。C以200rpm振蕩。然後當550nm處光密度(OD)約為1時，將培養的接種物轉移到發酵罐。基於0+，以如下提供的濃度向發酵罐中批投入培養基組分(接種物轉移後的批量大小)。tableseeoriginaldocumentpage74用如上表所示的纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶的工業混合物處理髮酵培養基以使溶液粘性較小。為了向該批補料，使用每千克滅菌溶液600g葡萄糖。保持有限的葡萄糖和過量的溶解氧(DO)水平直到收穫。使用氨溶液控制pH為7.4。冷卻發酵罐以保持溫度為37°C。總的發酵時間為36小時。收穫後，冷卻發酵肉湯。然後用鹽和絮凝劑處理肉湯並過濾以除去細胞。然後將該材料超濾以濃縮果膠酸裂合酶。用40%丙二醇和0.25%Proxel的穩定劑將濃縮的果膠酸裂合酶配製為pH6.25。用MES電泳緩衝液在NuPAGE4-12%Bis-Tris膠上電泳濃縮的果膠酸裂合酶。Markl2標準分子量(MW)標記物與樣品(泳道1-10)—起跑膠。圖6示出該膠，泳道2具有2.5pg總蛋白質的牛血清白蛋白(BSA)(對照)。泳道3具有5ngBSA。泳道4具有按上述獲得的、用HC1稀釋的、每泳道5照濃度的、濃縮果膠酸裂合酶。泳道5具有按上述獲得的、用去離子(DI)水稀釋的、每泳道5嗎濃度的、濃縮果膠酸裂合酶。泳道6具有5pg的NovozymesBioprep3000L。泳道7具有10pg的BSA。泳道8具有10pg按上述獲得的用HC1稀釋的果膠酸裂合酶。泳道9具有10fig的NovozymesBioprep3000L。實施例2、果膠酸裂合酶的表徵在下述條件下，將枯草桿菌果膠酸裂合酶(SEQIDNO:1)的果膠去除性能與市售可得的果膠酸裂合酶，Bioprep3000L(Novozymes)的進行比較。tableseeoriginaldocumentpage75"*"該結果是根據6.35&蛋白質^氮換算的。此外，該結果是總蛋白質估算。材料所用栽汙體為來自Testfabrics的退漿但未漂白的織物ArmyCardedCottonSateen(Style#428)。以2ppm總蛋白質來利用實施例1的枯草桿菌果膠酸裂合酶和NovozymesBiopr印3000L果膠酸裂合酶。分析多種pH的50mMBIS-TRIS丙烷(BTP)緩衝液。使用HC1調整該緩沖液。使用在50mM磷酸緩衝液中的0.005%釕紅染料。程序為了進行pH和溫度曲線繪圖，進行下述。通過在12-孔微滴定板中孵育5/8英寸一片的棉織物(Testfabricsstyle#428)盤，獲得酶進行果膠去除的初步pH和溫度曲線。12孔微滴定板的每個孔中加入2ml總終體積的BTP/HC1緩沖液和酶以及一個織物盤。用板密封劑緊密密封板後，將124Ul^"振蕩孵育箱並在靶溫度下以250rpm孵育60分鐘。用去離子水徹底漂洗這些盤。漂洗後，將1.5ml在pH6的50mM磷酸鈉緩衝液中的0.05。/。釕紅染料^/v含織物盤的每個孔中。然後放在振蕩孵育箱中於250rpm再次孵育該板15分鐘。然後將織物盤從釕紅染料溶液中拿出並用去離子水漂洗及風乾。為了量化由酶實現的果膠去除，使用分光光度計(MinoltaCR-200)測量每個染色的織物盤的CIELMt。也使用Launder-Ometer檢測實施例1的枯草桿菌果膠酸裂合酶和NovozymesBioprep3000L在果膠去除上的劑量反應活性。為了檢查果膠去除效力，對於實施例的杲膠酸裂合酶，在55°C，pH7.5,於Launder-Ometer中，在50mMBTP/HC1緩衝液中處理三塊4英寸x3英寸的ArmyCardedCottonSateen織物樣布(Testfabrics#428型，退漿但未漂白)，歷時20分鐘。在pH8.2,在50mMBTH/HCI中用同等的樣布檢測Bioprcp3000L。孵育後，用水徹底漂洗所有的織物樣布，然後在釕紅染色前風乾。從每個經處理的織物樣布剪切下3個5/8英寸的織物盤。然後用0.05%釕紅染料對這些盤染色。於pH6，在50mM磷酸鈉溶液中進行染色。按照上面用於pH和溫度曲線的程序量化每個處理的果膠去除。結果圖2提供了在初步pH和溫度曲線上的果膠去除。通過釕紅染料染色測量杲膠去除。使用枯草桿菌果膠酸裂合酶的果膠去除性能證實如圖1所示的寬的溫度鐠和約6至8的最適pH範圍。越低的CIELMi指示越高的果膠結合。果膠結合越高表明酶的果膠去除性能越低。可以使用其它煮練試驗，例如描述於ArneSolbak等人，"Discoveryofpectin-degradingenzymesanddirectedevolutionofanovelpectatelyaseforprocessingcottonfabric，"280J.BIOL爭CHEM.9431-9438(2005)中所述的。也使用Launder-Ometer檢測了實施例1的果膠酸裂合酶的果膠去除76劑量反應。結果如圖3所顯示。為了比較枯草桿菌果膠酸裂合酶和NovozymesBiopr印3000L果膠酸裂合酶的果膠去除效力，進行下述實驗。在Launder-Ometer中，用不同濃度的果膠酸裂合酶於55。C處理3片4英寸x3英寸退漿的ArmyCardedCottonSateen織物(Testfabrics#428型)，歷時20分鐘。為了比較處於最適pH的果膠酸裂合酶，對GCOR果膠酸裂合酶使用pH7.5而對Bioprep3000L使用pH8.2。處理20分鐘後，用去離子水徹底漂洗織物樣布並風乾。從每塊織物樣布切下5/8英寸的織物盤。然後如之前所述的用0.05%釕紅染料對這些織物盤染色以量化果膠去除。也在25X:和55r評估實施例1的果膠酸裂合酶的過氧化物穩定性。在25。C的較低溫度時果膠酸裂合酶活性比在較高溫度時其的活性以及Bioprep3000L的活性高。使用0.2%(w/v)多聚半乳糖醛酸在25mMTris/HCl，25mM甘氨自aOH，pH9緩沖液中測量果膠酸裂合酶活性。通過^f吏用分光光度計測量235nm處吸光度的線性增加，歷時5分鐘，以確定活性。一單位的酶活性定義為每分鐘產生相當於lpmol不飽和的雙半乳糖醛酸糖苷的lnmol不飽和寡聚半乳糖酪酸糖苷(oligogalacturonide)的蛋白質的量，其中，對於雙半乳糖醛酸苷二聚體，在235nm使用拍00M"cm—1的分子消光係數。通過測量280nm處的吸光度確定蛋白質濃度，其中使用基於實施例1的果膠酸裂合酶的M酸序列的消光係數。按單位/mg純化的果膠酸裂合酶確定比活性。該果膠酸裂合酶活性檢測法如ArneSolbak等人，"Discoveryofpectin-degradingenzymesanddirectedevolutionofanovelpectatelyaseforprocessingcottonfabric,'"280J.BIOL.CHEM.9431-9438(2005)所述。在存在遞增數量的過氧化物下使用所述的果膠酸裂合酶活性檢測法評估酶穩定性。該檢測的結果如圖4A和4B所展示。也使用如Solbak等人，(2005)所述的果膠酸裂合酶活性檢測法，檢測了實施例1的果膠酸裂合酶在螯合劑EDTA存在下的酶穩定性。洗滌組合物優選地缺乏二價陽離子例如鈣。然而，最佳酶促活性通常需要陽離子的存在。圖5顯示當在室溫比較帶有EDTA和沒有EDTA的樣品時，實施例1的果膠酸裂合酶的酶促活性幾乎無損失。然而，相比於檢測的其它酶，當將溫度取至55。C時，該酶的功能有顯著損失。基於這些結果，另一方面考慮取實施例1的純化的果膠酸裂合酶並用過氧化物例如過氧化氫在回收期間處理它以生產具有比未處理的果膠酸裂合酶具有顯著更高活性的果膠酸裂合酶產物。例如，用過氧化氫處理，該杲膠酸裂合酶可獲得比活性10%的增加。然後可以在本申請描述的各種組合物和一步工藝中使用該經處理的果膠酸裂合酶。實施例3使用乙酸，配製具有丙二醇(40%)、Proxel(0.25%)(1，2-苯並異參唑|3-酮)、和pH6.25±0.1的實施例1的果膠酸裂合酶。在37。C孵育20分鐘進行該試驗。使用具有CaCl2和多聚半乳糖醛酸底物的甘氨酸緩沖'液進4於該終點測量。tableseeoriginaldocumentpage78使用下面公式計算終APSU/ml:樣品中的APSU/m—來自標準曲線的APSU/mlxKxF/a，其中K是稀釋該樣品的稀釋倍數；F是2，因為使用1:1的酶和底物混合物；a是稀釋前酶樣品的吸樣體積，以mL計。一旦已知樣品密度，可以將APSU/ml單位換算成APSU/g。這些計算是基於具有3000APSU/g的Bioprep3000L樣品進行的，並從該樣品產生標準曲線。來自Bioprep3000L樣品的標準曲線具有斜率為0.:215793，截距為0.010572和RSQ0.9982。如果酶在長期儲存期間活性損失，比如10倍，以致Bioprep3000L只具有300APSU/g，那麼在含有來自枯草桿菌果膠酸裂合酶的樣品中所有活性數值也將降低10倍。該終點檢測試驗需要具有已知活性的標準來測量未知樣品的活性。實施例4、包括果膠酸裂合酶的清潔組合物和活性枯草桿菌果膠酸裂合酶在北美洗衣M下展現出對多種含有碳水化合物的汙垢的清潔。在實際尺寸的上開門洗衣機和小型Tergotometer中，在AATCC標準強效型液體洗滌劑(HDL)和Dial的商品化Purex液體洗滌劑中，以亞ppm的濃度檢測實施例1的果膠酸裂合酶。將果膠酸裂合酶的清潔性能與來自地衣芽孢桿菌和芽孢桿菌屬物種707的澱粉酶進行比較。在兩個尺寸的洗衣才幾，即，Tergotometer(UnitedStatesTestingCo.Inc.,Hoboken，NJ，美國專利號A)和上開門US洗衣機(KenmoreElitemodel110.26962503，SearsRoebuck和Co"HoffmanEstates,IL，美國專利號A)，中進行試驗。從CenterforTestmaterialsBV(CFT，Vlaardingen，Netherlands)、EMPATestmaterialsAG(St.Gallen-Winkeln，Switzerland)和Warwick誦Equest(Consett，UnitedKingdom)獲得汙染的樣布。獲得自CFT和EMPA的陳化的技術性汙垢是CFTCS-2可可、CFTCS-20番茄、CFTCS-6色拉調料加中性黑、EMPA160巧克力水激凌、EMPAl61棉上的澱粉、EMPA163粥、以及EMPA164草。來自Warwick-Equest的受試新鮮汙染的織物是ScrubbedGrass和由多種含碳水化合物的汙垢組成的4x4多重汙祐組(multi-stainpanel),所述含碳水化合物的汙垢包括MixedBerries(什錦莓)、TomatoSo叩(番痴湯)、RaguTraditionalPastaSauce(Ragu傳統義大利麵醬)、CurryBIend(咖噪摻混物)、C&GCheeseandBroccoliBabyFood(C&G乾酪嫩莖花椰菜嬰兒食品)、HeinzVegetableandTurkeySauce(Heinz蔬菜火雞肉醬)、Coleman'sMustard(CoIeman芥末)、Coleman'sGravy(Coleman洗滷)、BistoGravy(Bisto免滷)、Kellogg'sCocoaPops(Kellogg可可汽水)、FreshBa隨a(新鮮香蕉)、BlackOlives(油橄欖)、HPBBQSauce(HPBBQ醬)、HPBrownSauce(HP面醬)、HomeprideChilliConCarne、TomatoKetch叩(調味番痴醬)、StrawberryIceCream(草莓冰激淋)、NutellaChocolateSpread(Nutella巧克力醬)、SchwartzPaprika(Schwartz辣椒粉)、EconaHotPepperSauce(Econa辣椒醬)、Coleman'sSausageCasserole(Coleman香腸烤面)、Patak'sDoplaza、Patak'sVindaloo、UncleBen'sMadras、FrijjChocolateMilkshake(Frijj巧克力奶昔)、PecBilberries(Pec越橘提取物)、JWBlackcurrantJuice(JW,紫、茶簾子'汁)、Robertson'sBlackberryJam(Robertson,繁、莓醬)、HeinzAppleandBananaBabyFood(Heinz蘋果香蕉嬰兒食品)、Coleman'sBeefCasserole(Coleman牛肉烤面)、HeinzChocolatePuddingBabyFood(Heinz巧克力布丁嬰兒食品)、Cadbury'sChocolateMousse(Cadbury巧克力木斯)、St.Dalfour'sBlueberryMarmalade(St.Dalfour藍莓馬茉蘭)、Morton'sRedCherryPieFilling(Morton紅櫻桃餡餅餡)、FreshPlums(新鮮李子)、AsdaPrunes(Asda李脯)、AsdaCurryKetchup(Asda咖鬼番痴沙司)、Apple(蘋果)、Orange(橙子)、Banana(香蕉)、RuskBabyFood(Rusk嬰兒食品)、HeinzSunDriedTomatoSauce(Heinz番茄幹醬汁)、FrijjStrawberryMilkshake(Frijj草莓奶昔)、V8VegetableJuice(V8蔬菜汁)、Tea(茶)、Coffee(咖啡)、MeriotRedWine(Merlot紅酒)、Baxter'sBeetroot(Baxter甜菜根)、Welch'sPurpleGrapeJuice(Welch紫葡萄汁)、J.WestBlackBerry(J.West黑莓)、NapolinaChoppedTomato(Napolina切塊番茄)、HomeprideTikka和QuinkBlueInk(QuinkBlue墨水)。對於多重汙垢，4吏用MinoltaReflectometerCR-400，而對於4支術性汙祐用CR-410,在處理之前和之後通過光反射測量每種汙垢。按CIE-LAB色空間所定義的，將L、a、b值上的差異轉換成總色差(dE)。通過用初始汙垢與清潔後的汙垢之間的色差除於初始汙垢和未經汙染的織物之間的色差，取比值，以去汙指數百分數(％SRI)表示汙垢的清潔。通常，在Tergotometer規模下檢測9個重複，一式三份樣布在一式三份洗滌桶(pot)80中進行檢測，而在實際尺寸中檢測8個重複，一式四份樣布在一式兩份洗衣機中進行檢測。在Tergotometer中進行小規^莫清潔實驗。向每個洗塗桶中加入近1LMilli-Q反滲透7JC，並且還向其中加入1.5g/LAATCCHDLWOB2003液體洗滌劑、5mMHEPESpH8.0、每加侖水6^4^的石級(Ca:Mg比為3:1)，允許溫度達到平衡至77下(25°C)。當向每個洗滌桶中加入的3塊多重汙垢樣布超過40g時，有時調整溶液體積來保持每升洗液40g織物。在臨開始洗滌前加入酶和汙垢，在77。F(25°C)以100rpm攪拌12分鐘。清洗後，以自來水漂洗樣布3分鐘，甩幹以除去過量水並允許過夜晾乾。通過上面描述的反射計法評估汙垢去除並以去汙指數百分數(％SRI)表示。數據也以A。/。SRI表示，其中從酶處理中減去對照處理(單獨洗滌劑)的。/oSRI。在KenmoreEliteKingSize洗衣機中進行實尺清潔，將該洗衣機設置為超清潔循環(UltraCleanCylce)(15分鐘)，小負載(48L)，冷/冷自動溫度補償(Cold/ColdAutotemp)，一次漂洗，緩慢攪拌，快速甩幹。當向洗衣機投料時，加入1.5g/LAATCCWOB2003強效型液體洗滌劑以及5mMHEPESpH8.0或1.5g/LPurex液體洗滌劑並一^口入每加侖水6格令的硬度(Ca:Mg比為3:1)。一旦完成向洗衣機的投料，通過按需添加熱水或水控制溫度為70°F。然後向洗衣機中加入酶、汙染的樣布和增載織物並允許進行所述循環。完成清潔循環後，將樣布過夜風乾。通過反射計評估汙垢去除並以上述去汙指數百分數(％SRI)和A。/。SRI表示。證明了枯草桿菌果膠酸裂合酶可以有效地清潔許多新鮮的與消費者相關的汙垢以及陳化的技術性汙垢(參見圖7-12)。果膠酸裂合酶對清潔的貢獻在pH8.0的AATCCHDL中比在pH9.6的Purex液體洗滌劑中顯著得多。低至0.5ppm其仍顯示出顯著的清潔作用，並且其自身顯示了清潔作用，並展示出與澱粉酶協同地清潔一些汙垢(這種協同作用不能歸因於酶組合的加性效應)。上面描述的所有參考文獻在此整體併入用於所有目的。8權利要求1、一種在水性溶液中包括純化的枯草桿菌果膠酸裂合酶的生物煮練組合物，其中該果膠酸裂合酶具有SEQIDNO1的胺基酸序列或與其有95％同一性。2、權利要求1的生物煮練組合物，還包括S^漂白體系或化學漂白試劑。3、權利要求2的生物煮練組合物，其中該化學漂白試劑是氧化漂白劑、過氧化鈉、次氯酸鈉、次氯酸H二氯異氰脲酸鈉，或其組合。4、權利要求l的生物煮練組合物，還包括退漿劑。5、權利要求1的生物煮練組合物，還包括生物拋光劑。6、權利要求1的生物煮練組合物，還包括染料。7、權利要求l的生物煮練組合物，還包括生物拋光劑和染料。8、權利要求2的生物煮練組合物，還包括退漿劑。9、權利要求2的生物煮練組合物，其中該iW漂白體系包括酯源、過水解酶和過氧化氫源。10、權利要求1的生物煮練組合物，還包括第二酶，其選自果膠酶、角質酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、脂肪酶、澱粉酶及其組合。11、一種用於處理紡織品的一步處理組合物，包括(a)獲自枯草桿菌的果膠酸裂合酶，在還原性SDS-PAGE條件下，其分子量約43kD，pl約7.3,並且其最適pH為約5.0至約11.0;(b)—或多種退漿酶；和(c)一或多種化學漂白試劑和/或,漂白體系。12、權利要求U的一步處理組合物，包括第二酶，其選自第二果膠酶、角質酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、脂肪酶、及其組合。13、權利要求11的一步處理組合物，還包括一或多種輔助組分，其中所述輔助組分是表面活性劑、乳化劑、螯合劑和/或穩定劑，或其組合。14、權利要求ll的一步處理組合物，還包括漂白活化劑。15、權利要求11的一步處理組合物，其中該化學漂白試劑是氧化漂白劑、過氧化鈉、次氯酸鈉、次氯酸釣、二氯異氰脲酸鈉，或其組合。16、權利要求13的一步處理組合物，其中所i^面活性劑是非離子型表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兼性離子表面活性劑，或其組合。17、一種煮練和漂白紡織品的方法，包括在適宜允許紡織品增白的條件和一段時間下，使紡織品與包括化學漂白試劑或S^漂白體系、以及獲自枯草桿菌的果膠酸裂合酶的水性溶液接觸，其中該果膠酸裂合酶在還原性SI)S-PAGE條件下具有約43kD分子量，約7.3的pl，並且具有約5.0至11.0的最適pH。18、權利要求17的方法，其中該適宜條件包括約6至約8的pH。19、權利要求17的方法，其中所述適宜條件包括約2分鐘至24小時的一段時間。20、權利要求19的方法，其中該一段時間為約15分鐘至12小時。21、權利要求19的方法，其中該一段時間為約30分鐘至6小時。22、權利要求17的方法，其中所述適宜條件包括約15。C至95。C的溫度。23、權利要求22的方法，其中所述溫度為約20。C至80。C。24、權利要求22的方法，其中所述溫度為約25。C至60。C。25、權利要求17的方法，其中該化學漂白試劑是過氧化氫且以約100ppm至5000ppm的濃度存在。26、權利要求25的方法，其中該化學漂白試劑是過氧化氫且以約500ppm至4000ppm的濃度存在。27、權利要求25的方法，其中該化學漂白試劑是過氧化氫且以約1000ppm至3000ppm的濃度存在。28、權利要求17的方法，其中該適宜條件包括pH約6至8、約2分鐘至24小時的一段時間、溫度約25。C至60。C,且其中該化學漂白試劑是過氧化氫且以約1000ppm至3000ppm的量存在。29、一種一步加工紡織品的方法，包括(a)提供一步紡織品加工組合物和需要加工的紡織品，且其中所述一步紡織品加工組合物包括獲自枯草桿菌的果膠酸裂合酶，所述果膠酸裂合酶在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量約43kD，pi約7.3，並具有最適pH約6.0至8.0。(b)在足以允許紡織品退漿、煮練和漂白的條件和一段時間下，使所述紡織品與所迷一步紡織品加工組合物接觸。30、權利要求29的方法，其中該一步紡織品加工組合物進一步包括(a)—或多種生物煮練酶；(b)—或多種化學漂白試劑和/或^漂白體系；和(c)一或多種退漿劑。31、權利要求30的方法，其中該生物煮練酶是果膠酶、角質酶、蛋白酶、纖維素酶、半纖維素酶、脂肪酶，或其組合。32、權利要求30的方法，其中該退漿劑是澱粉酶、纖維素酶、甘露聚糖酶、或其組合。33、權利要求29的方法，其中該一步紡織品加工組合物還包括選自表面活性劑、乳化劑、螯合劑、穩定劑，或其組合的輔助組分。34、權利要求30的方法，其中該化學漂白試劑是氧化漂白劑、過氧化鈉、次氯酸鈉、次氯酸鉤、二氯異氰脲酸鈉或其組合。35、權利要求29的方法，其中所述紡織品包括纖維素的或含纖維素的材料。36、權利要求35的方法，其中所述纖維素的或含纖維素的材料包括棉。37、權利要求29的方法，其中該一步紡織品加工組合物還包括染料。38、權利要求29的方法，其中所述足以允許生物煮練、漂白、和退漿的條件為溫度約15。C至65°C、pH約6至8，持續時間約2分鐘至24小時。39、一種紡織品前處理的方法，包括將所述紡織品同時或相繼地進行生物煮練和漂白，其中所述煮練步驟包括將所述紡織品與包括枯草桿菌果膠酸裂合酶的水性組合物接觸，其中該果膠酸裂合酶在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量約"kD，pl約7.3,並具有最適pH約6.0至8.0，並且其中所述接觸在適於生物煮練的條件下發生。40、權利要求39的方法，其中煮練和漂白步驟同時發生。41、一種生物煮練和染色紡織品的方法，包括(a)製備包括枯草桿菌果膠酸裂合酶的水性溶液，該果膠酸裂合酶在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量約43kD，pl約7.3，並具有最適pH約6.0至8.0,且其中所述果膠酸裂合酶以約10至500mol/min/kg紡織品的量存在於pH約6至8，溫度約20。C至40。C以及具有小於2mM二價陽離子的條件下；(b)在該水性溶液中孵育該紡織品足以生物煮練的一段時間；和(c)向該水性溶液補充染色體系並孵育該紡織品足以獲得染色的紡織品的一段時間。42、一種洗滌劑組合物，包括(a)表面活性劑；(b)枯草桿菌果膠酸裂合酶，其在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量約43kD，pl約7.3，並具有最適pH約6.0至8.0;和(c)任選地，洗滌劑添加劑，其中所述洗滌劑候選物是助洗劑、化學漂白試劑、消泡劑、磨料、懸浮劑、汙垢釋^L劑、殺細菌劑、潤滑劑或其組合。43、權利要求42的洗滌劑組合物，還包括半纖維素酶，其選自木聚糖酶、阿拉伯吹喃糖苷酶、乙醯木聚糖酯酶、葡糖醛酸糖苷酶、阿魏酸酯酶、香豆酸酯酶、內切-半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、地衣多糖酶、內切-阿拉伯聚糖酶、外切-阿拉伯聚糖酶、外切-半乳聚糖酶，或其組合。44、權利要求42的洗滌劑組合物，還包括蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶或其組合。45、一種清潔紡織品的方法，包括將需要清潔的紡織品暴露於洗滌劑組合物，該組合物包括(a)表面活性劑；(b)枯草桿菌果膠酸裂合酶，其在還原性SDS-PAGE條件下具有分子量為約43kD，以及pl為約7.3;和(c)任選地，洗滌劑添加劑，其中所述洗滌劑候選物是助洗劑、化學漂白試劑、消泡劑、磨料、懸浮劑、汙垢釋》文劑、殺細菌劑、潤滑劑或其組合。46、權利要求45方法，其中所述洗滌劑組合物還包括蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶，或其組合。47、一種清潔硬表面的方法，包括用包括有純化的枯草桿菌果膠酸裂合酶的清潔溶液處理硬表面。48、一種生物煮練紡織品的方法，包括(a)製備在水性溶液中包括純化的枯草桿菌果膠酸裂合酶的水性溶液，其中該果膠酸裂合酶具有SEQIDNO:l的M酸序列或與其有95%同一性；和(b)在該水性溶液中孵育該紡織品足以生物煮練的一段時間。49、一種生物煮練紡織品的方法，包括(a)製備在水性溶液中包括純化的枯草桿菌果膠酸裂合酶的水性溶液，其中該果膠酸裂合酶具有SEQIDNO:l的M酸序列或與其有95%同一性；(b)向該水性溶液補充退漿酶；和(c)在該水性溶液中孵育該紡織品足以生物煮練和退漿的一段時間。全文摘要本發明公開用於纖維素的和含纖維素的紡織品的酶促一步預處理的組合物和方法，該組合物和方法使用來自枯草桿菌的果膠酸裂合酶。預處理包括紡織品的煮練和漂白及任選地退漿的各種組合。該一步預處理也可以與染色步驟組合。本發明還公開用於清潔和汙垢去除的組合物，例如洗滌劑組合物。文檔編號D06M16/00GK101517156SQ200780035180公開日2009年8月26日申請日期2007年9月20日優先權日2006年9月22日發明者A·J·普洛斯,B·施密特,F·J·C·萬加斯特爾,M-Y·允申請人:丹尼斯科美國公司