植物油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法

2023-10-20 03:15:12 3

專利名稱：植物油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法
技術領域：
本發明涉及一種植物成分測定方法，尤其是一種橄欖油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，屬於分析化學技術領域。
背景技術：
在植物提取、植物成分分析中，常常涉及到植物油中主要脂肪酸及功能性成分的測定。現有的技術標準都以繁瑣、複雜的操作，且需要多種有毒試劑(如濃硫酸、石油醚、苯、乙醚等)配合的甲酯化方法，來進行橄欖油的前期處理的，由於處理效果不理想，當將處理過的橄欖油送入氣相色譜儀中分析時，會導致色譜峰不出現，或脂肪酸與角鯊烯兩主要成分的分離效果不理想，而且分離橄欖油中的主要脂肪酸成分及功能性成分時，還需要極性不同的兩根毛細管柱，即脂肪酸分析要使用極性柱，而功能性成分角鯊烯的分析則要用非極性柱，且分離橄欖油中脂肪酸與角鯊烯的前期處理方法也不同，即分離兩種成分需兩種甲酯化方法。因而是一直以來造成植物提取分析成本居高不下、分析準確性不足的主要原因。因此，完全有必要對現有技術加以改進。

發明內容
為克服現有技術中，植物油脂肪酸甲酯化方法存在的繁瑣、複雜操作，費時、費力，且要使用有害、有毒試劑，成本高，資源浪費嚴重等不足，本發明提供一種方便、快捷，成本低，樣品只需一次前期處理，用同一根色譜柱即可實現植物油中主要脂肪酸及功能性成分角鯊烯的分離測定方法。本發明通過下列技術方案實現:一種植物油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，其特徵在於經過下列步驟:
A、按35飛OmL/g植物油的量，在植物油中加入正已烷，使植物油完全溶解，再按
5.5^7.5mL/g植物油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液，振蕩3 5min,離心分離5 8min,得上層試樣液；
B、將步驟A所得試樣液送氣相色譜儀中進行GC、MS分析，並按常規用面積歸一化法計算得到各脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的百分含量，其中:
GC分析條件:一根HP-5MS石英毛細管柱；程序升溫:按:TC /min的升溫速率升溫至3000C ;進樣口溫度2900C ;柱流量1.0mL/min ;柱前壓IOOkPa ;進樣量0.5 1.0μ L ;分流比10:1 ;載氣為高純氦氣；
MS分析條件:電離方式EI ;電子能量70 ;傳輸線溫度250°C ;離子源溫度230°C ;四極杆溫度150°C ;質量範圍35 500 ;採用wiley7n.1標準譜庫進行檢索定性。所述正已烷、氫氧化鉀及甲醇均為市購的色譜級產品。所述步驟B的氣相色譜儀型號為HP6890GC/5973MS氣相色譜一質譜聯用儀。本發明具有下列優點和效果:採用上述方案測定植物油中主要脂肪酸和角鯊烯時，其甲酯化方法快速、簡捷，且使用的溶劑量小，對人體健康無任何危害，易於回收利用，批量生產時可大大降低溶劑成本，縮短時間，減少不必要的浪費，節約資源，同時使用該方法時，樣品脂肪酸的萃取及脂肪酸的甲酯化是同步完成的，同時角鯊烯被很好地萃取於溶劑中，所選擇的非極性毛細管柱在同一升溫程序中對角鯊烯與各脂肪酸甲酯的分離良好，定量準確，並實現了更低的檢出限。運用GC-MS與角鯊烯標準樣品法測定橄欖油中角鯊烯的含量，其方法的精密度和準確度好，能達到所需要的檢測目的，此法也適用於其它植物油中脂肪酸與角鯊烯含量的檢測。


圖1為本發明橄欖油氣相色譜圖。圖1中可知，本發明方法只需要35min就可同時完成植物油中主要脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的分離，分離效果良好，常規方法則需3倍以上時間(35min的三倍時間)才能實現植物油中主要脂肪酸與功能性成分的分離，其中還不包括換柱子及平衡時間還有樣品前處理時間；甲酯化時間只需15min，而常規方法的脂肪酸甲酯化時間約需6(T90min ;—個植物油樣的分析只需5(T60min，常規方法則需10(Tl30min，兩種成分則需200 260mino
具體實施例方式下面結合實施例對本發明做進一步說明。實施例1
一種橄欖油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，其特徵在於經過下列步驟:
A、按35mL/g橄欖油的量，在40mg橄欖油中加入正已烷2ml，使橄欖油完全溶解，再按
5.5mL/g橄欖油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液0.3mL，振蕩3min，離心分離5min，得上層試樣液；
B、將步驟A所得試樣液送氣相色譜儀中進行GC、MS分析，並按常規用面積歸一化法計算得到橄欖油中各脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的百分含量，分別為:脂肪酸總含量94.10%(分別是:十六碳烯酸1.05%,棕櫚酸14.14%，亞油酸16.01%,油酸60.44%，硬脂酸1.50%, 二十碳烯酸0.29%，花生酸0.30%,未知0.20%,山俞酸0.17%);角鯊烯含量5.90%。其中:
GC分析條件:一根HP-5MS石英毛細管柱(30m X0.32mm X 0.25 u m);程序升溫:按3°C /min的升溫速率升溫至300°C ;進樣口溫度290°C ;柱流量1.0mL/min ;柱前壓IOOkPa ;進樣量0.5 1.0 ii L ;分流比10: I ;載氣為高純氦氣；
MS分析條件:電離方式EI ;電子能量70 ;傳輸線溫度250°C ;離子源溫度230°C ;四極杆溫度150°C ;質量範圍35 500 ;採用wiley7n.1標準譜庫進行檢索定性。實施例2
一種橄欖油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，其特徵在於經過下列步驟:
A、按40mL /g橄欖油的量，在50mg橄欖油中加入正已烷2mL，使橄欖油完全溶解，再按6mL/g橄欖油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液0.3mL，振蕩4min，離心分離6min，得上層試樣液； B、將步驟A所得試樣液送氣相色譜儀中進行GC、MS分析，並按常規用面積歸一化法計算得到橄欖油中各脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的百分含量，分別為:脂肪酸含量91.70%(分別是:十六碳烯酸1.36%，棕櫚酸15.18%，亞油酸10.14%，油酸62.33%，硬脂酸1.58%，二十碳烯酸0.31%，花生酸0.33%，未知0.17%，山俞酸0.30%);角鯊烯含量8.30%。其中:
GC分析條件:一根HP-5MS石英毛細管柱(30m X0.32mm X 0.25 u m);程序升溫:按3°C /min的升溫速率升溫至300°C ;進樣口溫度290°C ;柱流量1.0mL/min ;柱前壓IOOkPa ;進樣量0.5 1.0 ii L ;分流比10: I ;載氣為高純氦氣；
MS分析條件:電離方式EI ;電子能量70 ;傳輸線溫度250°C ;離子源溫度230°C ;四極杆溫度150°C ;質量範圍35 500 ;採用wiley7n.1標準譜庫進行檢索定性。實施例3
一種橄欖油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，其特徵在於經過下列步驟:
A、按50mL/g橄欖油的量，在60mg橄欖油中加入正已烷2mL，使橄欖油完全溶解，再按7.5mL/g橄欖油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液0.3mL，振蕩5min，離心分離8min，得上層試樣液；
B、將步驟A所得試樣液送氣相色譜儀中進行GC、MS分析，並按常規用面積歸一化法計算得到橄欖油中各脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的百分含量，分別為:脂肪酸含量95.97%(分別是:十六碳烯酸1.07%,棕櫚酸14.10%,亞油酸8.01%，油酸69.99%，硬脂酸1.60%, 二十碳烯酸0.24%，花生酸0.32%，未知0.24%，山俞酸0.40%);角鯊烯含量4.03%。其中:
GC分析條件:一根HP-5MS石英毛細管柱(30m X0.32mm X 0.25 u m);程序升溫:按3°C /min的升溫速率升溫至300°C ;進樣口溫度290°C ;柱流量1.0mL/min ;柱前壓IOOkPa ;進樣量0.5 1.0 ii L ;分流比10: I ;載氣為高純氦氣；
MS分析條件:電離方式EI ;電子能量70 ;傳輸線溫度250°C ;離子源溫度230°C ;四極杆溫度150°C ;質量範圍35 500 ;採用wiley7n.1標準譜庫進行檢索定性。
權利要求
1.一種植物油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，其特徵在於經過下列步驟: A、按35飛OmL/g植物油的量，在植物油中加入正已烷，使植物油完全溶解，再按5.5^7.5mL/g植物油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液，振蕩3 5min,離心分離5 8min,得上層試樣液； B、將步驟A所得試樣液送氣相色譜儀中進行GC、MS分析，並按常規用面積歸一化法計算得到各脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的百分含量，其中: GC分析條件:一根HP-5MS石英毛細管柱；程序升溫:按:TC /min的升溫速率升溫至3000C ;進樣口溫度2900C ;柱流量1.0mL/min ;柱前壓IOOkPa ;進樣量0.5 1.0y L ;分流比10:1 ;載氣為高純氦氣； MS分析條件:電離方式EI ;電子 能量70 ;傳輸線溫度250°C ;離子源溫度230°C ;四極杆溫度150°C ;質量範圍35 500 ;採用wiley7n.1標準譜庫進行檢索定性。
2.如權利要求1所述的快速測定方法，其特徵在於所述正已烷、氫氧化鉀及甲醇均為市購的色譜級產品。
3.如權利要求1所述的快速測定方法，其特徵在於所述步驟B的氣相色譜儀型號為:HP6890GC/5973MS氣相色譜一質譜聯用儀。
全文摘要
本發明提供一種植物油中脂肪酸及角鯊烯的快速測定方法，按35~50mL/g植物油的量，在植物油中加入正已烷，使植物油完全溶解，再按5.5~7.5mL/g植物油的量，加入濃度為2mol/L的氫氧化鉀與甲醇的混合溶液，振蕩3～5min，離心分離5～8min，得上層試樣液；送氣相色譜儀中進行GC、MS分析，並按常規用面積歸一化法計算得到各脂肪酸成分和功能性成分角鯊烯的百分含量。樣品脂肪酸的萃取及脂肪酸的甲酯化是同步完成的，同時角鯊烯被很好地萃取於溶劑中，快速、簡捷，溶劑量小，不危害人體健康，實現了更低的檢出限。適用於任何植物油中脂肪酸與角鯊烯含量的檢測。
文檔編號G01N30/02GK103149303SQ20131008332
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月15日 優先權日2013年3月15日
發明者耿樹香, 張豔麗, 李勇傑, 馬婷, 肖良俊, 谷麗萍, 賀娜, 王洋, 廖永堅, 陳海雲, 徐玉梅, 寧德魯 申請人:雲南省林業科學院