色譜方法
2023-10-08 07:57:39
專利名稱：色譜方法
技術領域：
本發明涉及一種用柱色譜從不飽和的、選擇性衍生的脂肪酸和其它組分如飽和的、選擇性衍生的脂肪酸的混合物中回收不飽和的、選擇性衍生的脂肪酸的方法。
從營養學的和醫學的觀點來看待不飽和的，特別是多不飽和，脂肪酸(縮寫為「PUFAs」)的科學上的興趣已經流行了很長時間。正如已知的，除了前列腺素、凝血噁烷和leukotrienes之外，一些脂肪酸，特別是PUFAs，是前列腺素類化合物的前體，除了在血小板的聚集、發炎及變應性之外，前列腺素類化合物起著重要的生物學上的作用。尤其是兩種「ω-3」-PUFAs(其中第一個雙鍵位於從酸的端甲基算起第三個碳原子上)二十碳五烯酸(「EPA」)和二十二碳六烯酸(「DHA」)在「文明疾病」，特別是心血管疾病，例如心肌梗塞和膽固醇水平升高的治療和預防中適於用作活性劑。也是已知的是發現了ω-3-PUFAs與ω-6-PUFAs(其中第一個雙鍵位於第六個碳原子上)一樣，除了在嬰兒的全面發育中以外還在視網膜和大腦的發育中起著重要作用。因此，在母乳中能測得ω-3-和ω-6PUFAs；母乳餵養的孩子比非母乳餵養的對比的孩子發育快得多是完全正確的。此外，特別是對二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸在動脈硬化的控制、降低膽固醇水平和血液脂肪水平以及預防血小板凝集、慢性炎症如類風溼關節炎和神經性皮炎，和變應性中的確定的活性正在進行深入研究。
天然的脂肪和油，特別是魚、海洋動物和植物油，是ω-3-和ω-6-PUFAs的重要來源，ω-3-和ω-6-PUFAs主要是以它們的甘油脂和磷脂的形式存在並伴有許多不需要的次級產物和雜質。例如前述ω-3-PUFAs二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸主要存在於魚油中而ω-6-PUFAs二十碳四烯酸和亞油酸主要存在於動物脂肪和植物油，如玉米油中。鑑於在吸收或服用PUFAs中的上述優點和在有營養的脂肪和油中所需要的長鍵PUFAs的總含量在大約10％至20％之間(例如ω-3-和ω-6-PUFAs在魚油中的含量大約是12％至18％)的這一事實，為了獲得推薦劑量的ω-3-PUFAs在日常的食物中必須吃掉大量的魚。但是，由於許多原因這一點是不能實行的。因此，一些製造商除了銷售含有天然濃度的油的魚油(這種魚油在幾十年前就已是可商購的)外，正在銷售含有以可能的最純的形式作為酯或作為再取代的甘油三酯的富集的PUFAs的膠囊，這就保持了對個別的儘可能純的PUFAs的需要。
含有PUFAs的混合物、例如魚、海洋動物或植物油本身或它們的精鍊形式的鹼解，和接下來的用醇，特別是用乙醇的再酯化反應除了給出其它產物外，產生相應的烷基酯。正如已知的，烷基酯混合物的隨後的工藝上的分離方法除了其它方法外可用超臨界氣體，特別是二氧化碳，根據可能存在的碳原子數用一種真實的分離通過逆流萃取來實施。採用這種方法得到的餾分具有相對較高純度的具有相同或相近碳原子數的PUFAs，例如，一種60％純的二十碳五烯酸C20和二十二碳六烯酸C22的混合物。從經驗可知，根據飽和度(雙鍵數)以這種方法設計的分離是不可能的。然而，為了研究個別的PUFAs的生理活性，需要純度非常高的餾分。由於分離方法的預先不適宜性，仍然不可能澄清，例如個別的ω-3PUFAs二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸是分開地起作用還是彼此互相結合起作用，這一點也適用於二十二碳五烯酸，它總是必須與二十二碳六烯酸一起使用。
用PUFAs，特別是在分子中具有至少16個碳原子營養上和醫藥上有效益的PUFAs的一種分離方法，有可能製得個別的PUFAs，這種方法不僅根據碳原子數目而且依據了雙鍵的數目，這些PUFAs不僅代表了對日常營養的補充而且它們可以作為藥物被特定地服用。
一些出版物，其中的大部分是基於由M.Perrut領導的研究小組的工作〔見，例如，LC-GC(Magazine of Liquid and Gaschromatography)6，10(1988)，914〕，在製備性超臨界流體色譜(縮寫為「SFC」)領域中是可得到的。根據這些出版物，從魚油中獲得並經重新酯化成相應的乙酯的二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸可以在裝填的柱上用SFC製備性地分離。使用矽膠裝填的柱子能夠得到純度分別為96％和85％的二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。沒有給出關於二十二碳五烯酸分離的信息，由於對二十二碳六烯酸得到的是相對較低的純度85％，這暗示著用這種方法不可能分離二十二碳五烯酸。
一種用於從含有不飽和脂肪酸或它們的衍生物的植物或動物混合物中回收不飽和脂肪酸或它們的衍生物的SFC柱色譜方法從歐洲專利出版物(EP)558,974中是已知的。在該法中超臨界的或液態的二氧化碳被用作流動相和一種特別定義的塗覆相被用作固定相。固定相的特點是一個基本結構通常含有必須被提供一個具有游離電子對和/或多重鍵的塗覆相的矽膠或氧化鋁，其中游離電子對和/或多重鍵正如在一種含有一個氨基(例如在氨基丙基中)或一個硝基或，個自地一個苯基或一個氰基(例如在氰基丙基中)的物質中所存在的。在EP558,974中沒有提出通過SFC柱色譜用二氧化碳作流動相但用一種未塗覆的基本結構，特別是氧化鋁，獲得個別的PUFAs的有效分離。
本發明的目的是提供一種用柱色譜從脂肪酸和/或脂肪酸酯的混合物中以不飽和脂肪酸或其衍生物，特別是這些脂肪酸的預製備的較低級烷基酯的形式回收有價值的不飽和脂肪酸的新方法，即一種方法大致不具有本領域現有水平的缺點。根據本發明的方法是一種用於從脂肪酸和/或脂肪酸衍生物的混合物中用柱色譜以超臨界或液態二氧化碳作流動相回收分子中具有至少16個碳原子的一種不飽和脂肪酸或這種脂肪酸的一種衍生物的方法。其特點是用選擇性地用鹼預處理過的氧化鋁作為固定相。
從大體上說，根據本發明的方法按如下來實施將可能已經是在壓力下的脂肪酸和/或脂肪酸衍生物與超臨界的或液態二氧化碳的流動相結合，將全部混合物(選擇性地加入額外的流動相)加入到裝有前述固定相的色譜柱中和然後洗脫，洗脫在選定的溫度和壓力條件下實施並注意固定相和混合物中個別組分之間的強相互作用，獲得了這些組分間的暫時分離，收集溶解在二氧化碳(洗脫劑)中的組分，這些組分在收集器中用檢測方法連續地檢查確定後從柱中連續地洗脫，從每個收集的物料中通過減壓(蒸發)除去二氧化碳，如此最終獲得的、分離的組分或「餾分」(特別是所需要的不飽和脂肪酸或脂肪酸衍生物)在各個收集器中不含二氧化碳。如果需要，在洗脫和從柱中流出來後洗脫液可再進行一次或多次這樣的色譜步驟以便獲得組分的更好的分離。這種方法也適合於任何不具有所需要純度的餾分。
在實施完根據本發明的方法後，如果從所用的混合物中得到的是原來存在於混合物中的一個衍生物，例如具有至少16個碳原子的一種不飽和脂肪酸的一個較低級的烷基酯或一種天然存在的甘油三酯，而脂肪酸本身是所需要的，則這種脂肪酸可通過常規方式的衍生，例如通過較低級的烷基酯或甘油三酯的皂化來獲得。此外，經過這樣的化學處理後得到的是未足夠富集的不飽和脂肪酸，該個別的產物可進行根據本發明的方法的處理直到在產生的洗脫產物中達到所需要的純度。
含有至少一種分子中具有至少16個碳原子的不飽和脂肪酸或其一種衍生物的任何混合物都適合作為脂肪酸和/或脂肪酸衍生物的混合物用於根據本發明的方法中。因此，例如，可以使用植物或動物(包括海洋動物)來源的油或脂肪，它們除含有其它物質外，含有以甘油三酯、醯胺、磷脂、內酯和鹽的形式的所需要的脂肪酸以及其它脂肪酸及其衍生物如甘油三酯等、甾醇如膽甾醇、維生素如維生素E，和通常被認為是雜質的物質，例如，多氯聯苯(PCB)、芳烴聚合物(PAH)、殺蟲劑、二噁英、重金屬，飽和脂肪酸或它們的衍生物的氧化和分解產物，預先採用的濃縮或純化步驟等所剩餘溶劑或試劑，或可以使用預先提純的和/或化學處理的，特別是酯化或再酯化的原料(油或脂肪)。優選地，當甘油三酯存在時，將對應的油或脂肪(選擇性地預純化)進行酸解或鹼解，其中所含的甘油三酯被轉化成相應的酸，或用一個較低級的烷基特別是C1-6烷基醇尤其是用乙醇酯化，不飽和的和飽和的脂肪酸的甘油三酯被酯基轉移成相應的較低級烷基酯。水解或酯化作用可用常規方法來實現。優選的原料(選擇性地已被預先純化和/或化學處理)是魚油例如沙丁魚和金槍魚油，這是由於它們是大量需要的二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的有價值的來源，以及動物脂肪和植物油，例如玉米油，這是由於它們是同樣大量需要的二十碳四烯酸和亞油酸的有價值的來源，魚油是特別優選的原料。
儘管脂肪酸和/或脂肪酸衍生物的混合物可預先溶解在適當的溶劑，例如一種較低級的烷烴，優選正己烷中，通常不將該混合物稀釋就與超臨界或液態二氧化碳一起用於裝有根據本發明所使用的固定相的色譜柱中，然而優選地是以未稀釋的形式使用該混合物。
如已知的，在根據本發明的方法中使用的超臨界二氧化碳是二氧化碳的這樣一種形式它被保持在至少大約31℃的溫度和至少大約73bar的壓力下並且既不是純粹的液體又不是純粹的氣體，而是兩種物理形態的雜化體。作為替換能用於根據本發明的方法中的液態二氧化碳具有低於大約31℃的溫度和高於大約73bar的壓力。使用二氧化碳的優點在於它的無毒性、不可燃性和容易除去減壓收集的洗脫液對於分離的不飽和脂肪酸或其衍生物不會留下一種潛在的有害剩餘物。此外，能以較高的純度和成本效益比大量地得到二氧化碳和，如果需要，能夠與一種有機助溶劑(改性劑)如上述的正己烷，以及一種較低級的烷醇如甲醇或乙醇，和一種脂族酮如丙酮，一起用作流動相部分。由於二氧化碳的臨界溫度比室溫高得不多而且在根據本發明的方法中要回收的不飽和的脂肪酸或脂肪酸衍生物是溫度敏感的(感熱的)，由於這些原因二氧化碳非常適合作為流動相用於根據本發明的方法中。
用作根據本發明的方法中的固定相的氧化鋁-這是本發明的特點-很方便地以不對稱的或優選地以珠狀(球形)顆粒存在，其儘可能均勻地裝填，顆粒尺寸是大約5至25μm。這樣的珠狀氧化鋁可很容易地從商業上得到。作為商業上可得到的氧化鋁的實例可以提到的是AluspherAl和Spherisorb氧化鋁；前者具有比表面積SBET為170m2/g，孔體積vp為0.5ml/g，孔徑D為100和顆粒尺寸dp50為5μm，而後者具有SBET為93m2/g， D為130和dp50同樣為5μm。原料是可以從各種生產廠家如ICN Biomedicals Inc，得到的。這些氧化鋁的特徵是顆粒尺寸分布為3-6μm、7-12μm、10-18μm或18-32μm。這些材料的比表面積SBET是200m2/g；其孔體積和孔徑是可與球狀材料的孔體積和孔徑相比的。
作為直接使用(未經處理)氧化鋁作為固定相的替換，可將氧化鋁在使用前用一種鹼預處理。這種預處理大體上包括將氧化鋁顆粒與一種鹼金屬或鹼土金屬的氫氧化物，如鈉、鉀或鈣氫氧化物的一種水溶液在pH範圍大約10至約13下接觸數小時，方便地是接觸約8至約20小時以上。鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物水溶液的濃度是在大約0.01M至約0.1M的範圍中。如果需要，鹼金屬或鹼土金屬的氫氧化物水溶液可用一種水混溶的或水溶性有機溶劑來補充以便將溶液的粘度調整到在使用中是可用的值。例如，這可以用極性有機溶劑乙腈或丙酮來獲得。現已發現乙腈和0.1M氫氧化鈉水溶液的10∶90(v/v)混合物是特別適用的，其pH值大約為13。
為了實用上的原因氧化鋁的鹼預處理可以方便地通過將鹼溶液連續地通入已經裝入色譜柱中的氧化鋁中數小時，優選大約12至16小時，然後用蒸餾水漂洗被預處理的氧化鋁直到從柱中流出的漂洗液為中性來實施。為了除去預處理過的氧化鋁中的水，推薦的方法是將柱加熱至50至90℃大約4-10小時和隨後用一種較低級的烷烴，優選正庚烷，漂洗預處理過的氧化鋁數小時，優選大約8至20小時，此後，如此預處理過的氧化鋁可被用作固定相用於根據本發明的方法中。利用用鹼預處理過的氧化鋁代表了根據本發明的方法的一個優選的方面。
為了將在根據本發明的方法中用作流動相的二氧化碳保持在超臨界或液體範圍，不僅要在將二氧化碳引入到裝有固定相的色譜柱中，而且要在隨後的洗脫過程中，都必須保持確定的溫度和壓力條件。本方法可以方便地在溫度為大約30℃至約100℃和壓力為大約140bar至約320bar的條件下實施，當在其它等價的方法條件下用被鹼預處理過的氧化鋁代替未被處理過的氧化鋁時可在適當的更低的壓力下實施本方法。優選地，溫度範圍是大約45℃至大約75℃而個自的壓力範圍是大約220bar至約260bar，二氧化碳的密度可以通過壓力和溫度來調節，和在最後所述的溫度和壓力範圍下最佳的二氧化碳密度是大約720kg/m3至大約850kg/m3。
在實施根據本發明的方法中作為固定相的氧化鋁使得各種不飽和的脂肪酸或脂肪酸衍生物和，存在時，飽和的脂肪酸或脂肪酸衍生物的色譜分離，一方面根據鏈長(碳原子數)和另一方面根據飽和度(雙鍵數該數越高，飽和度越低)來進行。從一個確定數值的雙鍵開始，對飽和度的選擇性似乎是佔主要的。如果被分離的脂肪酸或脂肪酸衍生物只具有一個雙鍵，例如順13-二十二碳烯酸(22個碳原子，1個雙鍵「22∶1」)，則對於鏈長的選擇性很明顯是次要的，並且脂肪酸或衍生物在更短鏈長但更高不飽和度的脂肪酸或衍生物例如20∶5脂肪酸二十碳五烯酸的洗脫範圍之前洗脫。另一方面，在205、22∶5和22∶6脂肪酸(二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸，各自對應地)的洗脫中，具有相同數目的雙鍵的較長鏈的酸與較短鏈的酸相比較和具有較小飽和度的酸與具有較大飽和度的酸相比較在每種情況下在固定相上停留更長，因此首先洗脫20∶5脂肪酸，然後22∶5脂肪酸和最後是22∶6脂肪酸。特別是在後者範圍中(碳原子數20-22和/或雙鍵數是5-6)存在有在營養和醫學領域中最有意義的不飽和脂肪酸，在這些領域中需要獲得完全的色譜分離而沒有過度的拖尾效應。
不僅實施根據本發明的方法的溫度和壓力條件影響分離的結果，而且選擇未處理的氧化鋁還是用鹼預處理過的氧化鋁作為固定相也對分離結果有影響。通常，溫度增加或壓力降低隨時間將不同脂肪酸的洗出液分開，而壓力增加或溫度降低會將洗出液合併，因此這些參數的任何所需要的變化可以確定根據本發明的方法隨時間的歷程。用鹼預處理氧化鋁其表面上的活性中心(主要是Leωis酸和鹼)可以被封閉，於是氧化鋁的極性被減弱。這樣處理後洗出液的次序不改變，但極性多重不飽和脂肪酸的拖尾效應被減小了並顯著減少了洗脫時間。例如，如果在未處理的氧化鋁上於65℃和280bar下實施根據本發明的方法最後洗脫的22∶6脂肪酸只在大約半小時後被洗脫完並具有顯而易見的拖尾效應時，那麼在相同的溫度和壓力條件下在鹼處理過的氧化鋁上實施洗脫幾乎是在三分之一時間後就被洗脫並且拖尾效應被很強地減少了。由於這種原因，在根據本發明的方法中與使用一種未經處理的中性氧化鋁相比使用用鹼預處理的一種氧化鋁是優選的。
溶解在連續地從色譜柱中洗脫的二氧化碳(洗出液)中的組分的檢測優選地是通過一個UV檢測器、接著用一個火焰電離檢測器(FID)來實施。UV檢測器可以根據雙鍵的數目來評價組分和相應地對個別組分的有限結構評價作出貢獻。通過使用FID可以電子化地表現出收集器中不同洗出液的分布。從個自收集的物質中除去二氧化碳(通過減壓)的技術方法本身是已知的。
根據本發明的方法尤其適合回收20∶5脂肪酸二十碳五烯酸以及22∶6脂肪酸二十二碳六烯酸，在每種情況下既可以直接地回收酸也可以通過它的一種衍生物，優選乙基酯來回收。
基於下列實施例來說明本發明。
圖1表示實施例1中從Carlo Erba Instruments得到的SFC-3000系統；圖2和圖3表示圖1所示裝置得到的色譜圖，其中圖2表示使用鹼改性前、後的柱子。
固定相鋁(Spherisorb氧化鋁)；記錄粘度 0.25cm/min；衰減 64；濃度 40mg/ml正己烷；檢測 FID。
圖3色譜條件為改性柱Al2O3(相分離)，5μm尺寸 250×1mm條件 240bar/80℃樣品 Head3檢測 FID固定相、記錄粘度、衰減以及濃度與圖2相同。
圖4表示實施例3中從New Ways of Analytics(NWA)得到的一種裝置；圖5表示使用粗的氧化鋁作固定相，用NWA裝置得到的UV譜圖結果，其色譜條件為
柱ICN18-32Bμm；尺寸 250×4mm；條件 235bar/50℃；注射體積5μl；己烷中的稀釋率1∶1；檢測 UV；樣品 Head3。
實施例1本方法的實施從Carlo Erba Instruments得到的一種裝置(見圖1)被用來研究用色譜法從用乙醇酯化的魚油中回收組分，特別是不飽和脂肪酸乙基酯。該裝置通過一個二氧化碳(CO2)汽缸連續地提供流動相，根據選定的在超臨界範圍(對於CO2高於大約31℃和73bar)或次臨界範圍的壓力和溫度條件來操作流動相。
CO2被從汽缸中抽入到泵室中並在那裡用一個恆溫箱開始將其凝結至-6℃。通過一個步進馬達來操縱燒瓶，這樣流動相被壓縮至所需要的壓力。噴射泵的壓力及柱加熱爐的溫度可通過計算機來調節，流動相以所需要的壓力流過該裝置並開始通過注射系統。在此，樣品通過一個兩通閥被加入到流經的流動相中。加樣時間可以選擇性地從0至999msec間變化，加樣體積是恆定的0.5μl。然後樣品與流動相一起進入到柱中。在此，進行了基於樣品溶液中個別組分與固定相之間不同相互作用強度的混合物分離。混合物的各個組分被(在理想情況下)連續地從柱中洗脫。由於柱子是位於一個加熱爐中的，所以也可以通過溫度來影響洗脫行為。在柱上分離的物質(特別是不飽和的脂肪酸乙基酯)的檢測(確定)可以連續地通過一個UV檢測器和隨後通過一個火焰電離檢測器(FID)的方法來實施。實施例2氧化鋁固定相的鹼預處理將一個裝有氧化鋁的色譜柱用0.1M氫氧化鈉水溶液在乙腈中的一種混合物(90∶10％v/v)通過漂洗數小時(12-24小時)來進行處理，隨後溶液的pH值為13。用蒸餾水將柱子洗至中性，加熱至50到90℃大約4至10小時，然後用正庚烷重新調節12至18小時。
實施例3本方法的實施(進一步的實施方案)將從New Ways of Analytics得到的一種裝置(見圖4)用來操縱更大內徑的色譜柱並由此增加了生產量。通過一個CO2管道連續地向該裝置提供流動相。根據所選定的壓力和溫度條件可以在超臨界(對CO2高於大約31℃和73bar)或也可以在次臨界範圍內操作流動相。為了這一目的，從CO2容器中流入壓力組件PM-101的恆溫器的CO2通過使用一個恆溫器被冷凝至-6℃。一個氣動燒瓶泵將流動相壓縮至壓力在300-400bar。在一個連接的減壓組件PR-102中將壓縮的流動相減壓至所需要的壓力，由操作壓力組件PM-101所產生的額外壓力波動被抑制。流動相以在減壓組件PR-102中選定的壓力流過該裝置並開始通過注射閥門。在此樣品通過一個六通閥(Rheodyne 7125)被引入到流過的流動相中。通過選擇適當的從5μl至數毫升的進樣量可以改變引入的樣品體積，然後樣品與流動相一起進入色譜柱。在柱中根據樣品溶液中個別組分和固定相之間相互作用的不同強度進行混合物的分離。在理想情況下混合物中的各個組分連續地被洗脫。由於色譜柱位於一個加熱箱中，也有可能通過溫度來影響洗脫行為。在色譜柱上分離的物質通過一個UV檢測器來記錄並且從那兒傳輸到色譜軟體。軟體可以控制閥門使被分離的組分流出，隨後通過一個壓力釋放單元PE-103來進行超臨界相的壓力釋放。
權利要求
1.用柱色譜以超臨界或液態二氧化碳作為流動相從脂肪酸和/或脂肪酸衍生物的混合物中回收分子中至少具有16個碳原子的不飽和脂肪酸或該脂肪酸的一種衍生物的一種方法，其中選擇性地用鹼預處理過的氧化鋁被用作固定相。
2.根據權利要求1的一種方法，其中選擇性地用鹼預處理過的氧化鋁以儘可能均勻裝填的珠狀顆粒存在，顆粒尺寸是大約5至25μm。
3.根據權利要求1或2的一種方法，其中用鹼預處理過的氧化鋁被用作固定相，這種預處理通過將顆粒狀的氧化鋁與一種鹼金屬或鹼土金屬的氫氧化物的水溶液在pH約10至約13的範圍中接觸大約8至大約20小時以上來實施。
4.根據權利要求3的一種方法，其中用一種水混溶的或水溶性的有機溶劑特別是乙腈或丙酮來補充溶液，以便將水溶液的粘度調整到在使用中可用的值。
5.根據權利要求4的一種方法，其中乙腈和0.1M氫氧化鈉水溶液的10∶90(v/v)混合物被用於氧化鋁的預處理。
6.根據權利要求1至5中任一個的一種方法，其中一種選擇性地預先純化和/或化學處理過的魚油被用作脂肪酸和/或脂肪酸衍生物的混合物。
7.根據權利要求6的一種方法，其中一種預先酯化的魚油，特別是一種用乙醇酯化的魚油被用作脂肪酸和/或脂肪酸衍生物的混合物。
8.根據權利要求1至7中任一個的方法，這種方法是在大約30℃至約100℃的溫度範圍和約140bar至約320bar的壓力下來實施的。
9.根據權利要求8的一種方法，其中的溫度範圍是大約45℃至約75℃而對應的壓力範圍是大約220bar至約260bar。
10.根據權利要求1至9中任一個的一種方法，該法被用來直接或通過乙酯的形式回收二十碳五烯酸或二十二碳六烯酸。
全文摘要
一種通過柱色譜以超臨界或液態二氧化碳作為流動相從脂肪酸和/或脂肪酸衍生物的一種混合物中回收分子中至少有16個碳原子的不飽和脂肪酸或這種脂肪酸的一種衍生物的方法，其中把選擇性地用鹼預處理過的氧化鋁用作固定相。氧化鋁的預處理可以方便地通過將顆粒狀的氧化鋁與一種鹼金屬或鹼土金屬的氫氧化物的一種水溶液，選擇性地補充一種水混溶的或水溶性的有機溶劑，在pH範圍大約10至大約13下接觸數小時以上來實施。以這種方法用色譜方式產生的不飽和脂肪酸或脂肪酸衍生物適合用作在營養和醫學領域中有價值的活性成分。
文檔編號C11C1/08GK1154868SQ9611183
公開日1997年7月23日 申請日期1996年8月16日 優先權日1995年8月17日
發明者G·布魯尼爾, F·雷切曼 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司