包含格拉默或其藥用鹽的儲藥系統的製作方法

2023-10-04 04:31:04

專利名稱：包含格拉默或其藥用鹽的儲藥系統的製作方法
技術領域：
本發明涉及醋酸格拉默(glatiramer acetate)和格拉默(glatiramer)的其它藥用鹽的長效劑型。特別優選的是用於醋酸格拉默的延長釋放的儲藥系統(depot system)和其它可植入系統。
背景技術：
醋酸格拉默共聚物-1，還稱作醋酸格拉默並以商標Copaxone 銷售，包含多肽的醋酸鹽，上述多肽含有L-穀氨酸、L-丙氨酸、L-酪氨酸和L-賴氨酸。胺基酸的平均摩爾分數分別為O. 141,0. 427,0. 095和O. 338，並且共聚物-I的平均分子量為4，700至11，000道爾頓。化學上，醋酸格拉默是指定的L-穀氨酸聚合物，並具有L-丙氨酸、L-賴氨酸和L-酪氨酸，醋 酸(鹽)。它的結構式是(Glu, Ala, Lys, Tyr) xCH3C00H (C5H9NOiC3H7NO2-C6H14N2O2-C9H11NO3)XC2H4O2 [CAS-147245-92-9]，大約比率為 Glu14Ala43Tyr10Lyz34X (CH3COOH) 20。 Copaxone咒是澄清、無色至微黃色、無菌、非致熱溶液，用於皮下注射。每毫升包含20mg醋酸格拉默和40mg甘露醇。溶液的pH範圍大約為5. 5至7. O。作用機制醋酸格拉默是無規聚合物(平均分子質量為6. 4kD)，包括4種在髓磷脂鹼性蛋白中發現的胺基酸。醋酸格拉默的作用機制是未知的，雖然已出現這種共聚物的ー些重要的免疫學特性。給予共聚物-I會使T細胞群體從促炎Thl細胞移動到調節Th2細胞，其抑制炎性反應(FDA Copaxone 標籤)。鑑於它與髓磷脂鹼性蛋白的相似性，共聚物-I還可以作為誘餌，來轉移相對於髓磷脂的自身免疫反應。然而，至少在治療的早期，血腦屏障的完整性並不受到共聚物-I的明顯影響。共聚物-1是非自身抗原，已證明其可以抑制由各種致腦炎因子(包括小鼠脊髄勻漿(MSCH))誘導的實驗性變應性腦脊髄炎(EAE)，其包括髓磷脂抗原，如髓磷脂鹼性蛋白(MBP) (Sela M et al. ,Bull Inst Pasteur(1990)88 303-314)、蛋白脂質蛋白(PLP)(Teitelbaum D et al. , J Neuroimmunol (1996) 64 209-217)和在各種物種中的髓憐脂少突膠質細胞糖蛋白(MOG) (Ben-Nun A et al. , J Neurol (1996) 243 (Suppl 1)S14_S22)。EAE是多發性硬化症的接受模型。已證明，當皮下、腹腔內、靜脈內或肌內注射時，共聚物-1是活性的(Teitelbaum D et al. ,Eur J Tmmunol (1971)I 242-248;Teitelbaum D et al. , EurJ Immunol (1973) 3273-279)。在III期臨床試驗中，發現，每日皮下注射共聚物-1會放慢無能的進展並降低加劇-緩解多發性硬化症的復發率(Johnson KP, Neurology(1995) 165-70 ;www. copaxone. com)。共聚物-1治療目前限於姆日皮下給予。在US6，214，791中披露了通過攝入或吸入共聚物-I來進行治療，但還未表明這些給予途徑在人患者中可以獲得臨床療效。
療效在患有復發-緩解多發性硬化症(RR MS)的患者中支持醋酸格拉默在降低復發頻率方面的有效性的證據來自兩項安慰劑對照試驗，其均使用20mg/天的醋酸格拉默劑量。在RR MS的安慰劑對照試驗中沒有研究其它劑量或劑量方案(www. copaxone. com)。認可的20mg劑量和40mg劑量的比較試驗表明，在這些劑量之間療效沒有顯著性差異(The 9006trial; Cohen JA et al. , Neurology (2007) 68 939-944)。醋酸格拉默的各種臨床試驗正在進行中。這些臨床試驗包括用較高劑量的醋酸格拉默進行的研究(40mg - FORTE研究)；對臨床孤立性症候群患者進行的研究(PreCISe研究)；以及許多組合和誘導方案，其中和另ー種活性產物一起或在其以後給予醋酸格拉默。副作用
目前，多發性硬化症的所有特別認可的治療涉及活性物質的自我注射。經常觀察到的注射部位問題包括刺激、超敏感性、炎症、疼痛和甚至壞死(在幹擾素Iβ治療的情況下)以及低水平的患者依從性。副作用通常包括在注射部位的團塊(注射部位反應)、疼痛、發熱、和寒戰。這些副作用的特性通常是溫和的。偶爾在注射以後數分鐘發生反應，其中存在潮紅、呼吸短促、焦慮和快速心搏。這些副作用在30分鐘內減退。隨著時間的推移，可以在注射部位發展可見凹痕，這是由於脂肪組織的局部破壞，稱作皮下脂肪萎縮。因而，期望ー種可替換的給予方法。按照FDA的處方標註，已報導了醋酸格拉默的更嚴重的副作用，它們包括對身體的心血管系統、消化系統(包括肝臟)、造血及淋巴系統、肌肉骨骼系統、神經系統、呼吸系統、特殊感官(尤其是眼)、泌尿生殖系統的嚴重的副作用；還報導了代謝和營養障礙；然而，還沒有明確建立在醋酸格拉默和這些不利影響之間的聯繫(FDA Copaxonel財示籤)。儲藥系統(depotsystem)通過靜脈內(IV)、肌內(IM)、或皮下(SC)注射的胃腸道外途徑是遞送較小和較大分子量藥物的最常見和最有效的形式。然而，起因於針扎的疼痛、不適和不方便使得這種藥物遞送方式成為患者最少優選的。因而，可以在最低限度減少注射總數的任何藥物遞送技術是優選的。在實踐中，可以通過使用可注射的儲藥製劑來減小給予藥物的頻率，上述儲藥製劑能夠以緩慢但可預見的方式來釋放藥物，因而可以改善依從性。對於大多數藥物，取決於劑量，可以減小注射頻率從每日一次到毎月一次或兩次或甚至更長時間出個月)。除改善患者舒適度以外，通過消除高峰和低谷，儲藥製劑的藥性的較小頻繁注射可以緩和血漿濃度-時間曲線。血漿分布的上述緩和有可能在大多數情況下不僅提高治療效果，而且可以減少任何不需要的事件，如免疫原性等(經常伴隨較大分子量藥物)。微顆粒、植入物和凝膠是在實踐中使用的可生物降解聚合物裝置的最常見形式，用於延長藥物在體內的釋放。在注射以前立刻將微顆粒懸浮在水介質中，並且可以在懸浮液中加載多達40%固體。藉助於處於乾燥狀態的特殊針而不需要水介質，來將植入物/棒劑型遞送到SC/IM組織。棒/植入物的這種特點便於遞送較高質量的劑型以及藥物含量。另外，在棒/植入物中，最初爆發的問題被最小化，這是由於和微顆粒相比，植入物的小得多的面積。除可生物降解系統之外，還有不可生物降解植入物和可以佩戴在體外的輸注泵。不可生物降解植入物需要醫生的訪問不僅為了將裝置植入SC/頂組織，而且為了在藥物釋放期以後除去它們。包含微顆粒製劑的可注射組合物特別容易出現問題。和在其它類型的可注射懸浮液中的O. 5-5%固體相比，微顆粒懸浮液可以包含多達40%的固體。另外，和建議用於IM或SC給予的小於5μπι的顆粒尺寸相比，在可注射儲藥產品中所使用的微顆粒的尺寸高達約250 μ m(平均60-100 μ m)。更高濃度的固體、以及更大的固體顆粒尺寸需要更大尺寸的針(約18-21號規格)來注射。總之，儘管很少使用較大的和不舒服的針，但和用較小針每天 藥物注射相比，患者還是喜歡不經常給予劑型。聚乳酸(PLA)的可生物降解聚酯以及丙交酯和こ交酯的共聚物，稱作聚(丙交酷-こ交酷)(PLGA)，是用於可生物降解劑型的最常見的聚合物。PLA是疏水性分子並且PLGA比PLA更快地降解，這是因為更具親水性的こ交酯基團的存在。這些生物相容性聚合物經受酯鍵的隨機的非酶促的水解切割以形成乳酸和こ醇酸，其是體內的正常代謝化合物。可吸收縫線、小夾和植入物是這些聚合物的最早應用。在1970年，南方研究所(Southern Research Institute)開發了第一種合成的可吸收縫線(DexOil )。描述 PLGA聚合物在緩釋劑型中的應用的第一個專利出現於1973年(US 3，773，919)。今天，PLGA聚合物可商業上獲自多個供應商Alkermes (Medisorb聚合物)、Absoroable Polymers International [先目U 的 Birmingham Polymers (Durect 的一個部門)]、Purac和Boehringer Ingelheim0除PLGA和PLA之外，天然纖維素聚合物如澱粉、澱粉衍生物、葡聚糖和非PLGA合成聚合物，也被開發為在上述系統中的可生物降解聚合物。目前，不能獲得醋酸格拉默的長效劑型。這是巨大的未滿足的醫療需求，因為這些劑型將極為有利於許多患者，尤其是有利於具有神經系統症狀或身體殘疾的那些患者。

發明內容
本發明提供了長效胃腸道外藥物組合物，該組合物包含治療有效量的格拉默的藥用鹽，例如，醋酸格拉默。尤其是，本發明提供了長效藥物組合物，該組合物包含治療有效量的儲藥形式(cbpot form)的格拉默鹽，適用於在醫療上可接受的位置胃腸道外給予對其需要的主體。本發明進一歩提供了一種用於治療多發性硬化症的方法，該方法包括胃腸道外給予或植入組合物，該組合物包含治療有效量的格拉默的藥用鹽，優選醋酸格拉默。出乎預料地，現已發現，根據本發明的原則的長效藥物組合物相對於市售每日注射劑型可以提供相同或更好的療效，並在局部和/或全身水平具有降低的副作用的發生率和/或嚴重性。根據ー些實施方式，醋酸格拉默包含L-丙氨酸、L-穀氨酸、L-賴氨酸、和L-酪氨酸的醋酸鹽，摩爾比率為約O. 14穀氨酸、約O. 43丙氨酸、約O. 10酪氨酸和約O. 33賴氨酸。根據其它實施方式，醋酸格拉默或格拉默的其他藥用鹽包含約15至約100個胺基酸。根據某些實施方式，可植入儲藥適合於皮下或肌內植入。根據可替換的實施方式，長效胃腸道外藥物組合物包含用于格拉默鹽如醋酸格拉默的藥用可生物降解或不可生物降解載體。根據ー些實施方式，載體選自PLGA、PLA、PGA、聚己內酷、聚羥基丁酸酷、聚原酸酷、聚鏈烷酸酐、明膠、膠原、氧化纖維素、和聚磷臆。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。根據具體實施方式
，本發明的長效藥物組合物具有通過水包油包水雙重乳化エ藝(water-in oil-in water double emulsification process)製備的微顆粒的形式。在目前優選的實施方式中，本發明的長效藥物組合物包括內部水相，其包含治療有效量的格拉默的藥用鹽；水不混溶的聚合物相，其包含選自可生物降解和不可生物降解聚合物的載體；以及外部水相。在其它目前優選的實施方式中，水不混溶的聚合物相包含選自PLA和PLGA的可生物降解聚合物。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。在另外的實施方式中，外部水相包含表面活性剤，其選自聚こ烯醇(PVA)、聚山梨酷、聚氧化こ烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物和纖維素酷。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。本發明涵蓋適用於植入對其需要的個體的儲藥形式的醋酸格拉默或格拉默的任何其它藥用鹽用於治療多發性硬化症的用途。本發明進一步涵蓋使用醋酸格拉默的可植入儲藥，其適用於提供格拉默在主體中 的延長釋放或延長作用。在本發明範圍內的是儲藥形式的格拉默的藥用鹽，其適合用於治療多發性硬化症或提供格拉默在主體中的延長釋放或延長作用。本發明還包括醋酸格拉默與至少ー種另外藥物，優選地，免疫抑制劑，尤其是芬戈莫德(fingoIimod)的組合。根據ー些實施方式，長效藥物組合物適用於每周一次到每6個月一次的給藥時間表。根據特定的實施方式，組合物適合於從每2周一次到毎月一次的給藥。根據ー些實施方式，長效組合物包括20_750mg醋酸格拉默/注射的劑量。長效組合物的具體實例將包括可生物降解或不可生物降解微球體、任何適宜幾何形狀的植入物、可植入棒、可植入膠囊、可植入環、延長釋放凝膠和易侵蝕基質。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。根據下文給出的詳細描述，本發明的另外的實施方式和應用的全部範圍將是顯而易見的。然而，應當明了，詳細描述和具體實施例，雖然指出本發明的優選實施方式，僅是說明性的，因為對於本領域技術人員來說，根據這種詳細描述，在本發明的精神和範圍內的各種變化和改進將是顯而易見的。


圖I.在PBS中並在37° C下，醋酸格拉默自PLGA微顆粒製劑MPG-02-07的釋放。表示的數據被歸一化到存儲在相同條件下的標準肽溶液。圖2.在PBS中並在37。C下，醋酸格拉默自PLGA微顆粒製劑MPG-05R、08_11和格拉默的生育酚琥珀酸鹽(1:1)的釋放。表示的數據被歸一化到存儲在相同條件下的標準肽溶液。圖3.在PBS中並在37° C下，醋酸格拉默自PLGA微顆粒製劑MPG-12 - 15的釋放。表示的數據被歸一化到存儲在相同條件下的標準肽溶液。圖4.在體外在PBS中並在37° C、pH7. 4下，醋酸格拉默自PLGA微顆粒製劑MPG-14SU-1 和 MPG-15SU-1 的釋放。
圖5.在體外在PBS中並在37° C、pH7. 4下，醋酸格拉默自PLGA微顆粒製劑MPG-14SU-2 和 MPG-15SU-2 的釋放。
具體實施例方式本發明提供了格拉默的藥用鹽(優選醋酸格拉默)的長效胃腸道外藥物製劑，相比於每天注射，其可以提供相同或更好的療效，因而導致改善的患者依從性。除提供相同療效以外，長效注射劑或植入物還可以降低起源於頻繁注射的格拉默副作用(局部和/或全身)。根據第一方面，本發明提供了長效胃腸道外藥物組合物，該組合物包含治療有效量的醋酸格拉默或格拉默的任何其它藥用鹽。如在本文中所使用的，術語「胃腸道外」是指途徑，其選自皮下(SC)、靜脈內(IV)、肌內(IM)、皮內(ID)、腹腔內(IP)等途徑。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。如在本文中所使用的，術語"治療有效量"用來限定共聚物的量，其將實現緩和多發性硬化症的症狀的目標。適宜劑量包括但不限於每劑型20-750mg。然而，應當明了，給予的共聚物的量將由醫生根據各種參數來確定，包括所選的給予途徑、年齡、體重、和患者症狀的嚴重性。根據本發明的各種實施方式，至少ー種共聚物的治療有效量為約Img至約500mg/天。可替換地,至少ー種共聚物的上述治療有效量為約20mg 至約 IOOmg/ 天。在另ー個方面，本發明提供了長效藥物組合物，該組合物包含治療有效量的儲藥形式的醋酸格拉默或格拉默的任何其它藥用鹽，其適用於在醫療上可接受的位置給予對其需要的主體。如在本文中所使用的，術語「長效」是指ー種組合物提供格拉默鹽到主體的一般全身循環或到主體的局部作用部位的長期、持續或延長釋放。此術語可以進一歩指ー種組合物提供格拉默鹽在主體中的長期、持續或延長的作用持續時間(藥代動力學)。尤其是，本發明的長效藥物組合物提供了每周一次到每6個月一次的給藥方案。根據目前更優選的實施方式，給藥方案是一周一次、每月兩次(大約每兩周一次)到毎月一次。取決於所需要的作用的持續時間，本發明的各儲藥或可植入裝置將通常包含約20至750mg的活性組分，設計成經兩周至數月時間範圍加以釋放。在一些實施方式中，本發明的儲藥製劑包括但不限于格拉默或其藥用鹽在水、油或蠟相中的懸浮體；格拉默或其藥用鹽的不易溶解的聚合物電解質複合物(polyelectrolyte complexes);基於水混溶性溶劑與格拉默或其藥用鹽的組合的「原位」凝膠形成基質；以及結合有格拉默或其藥用鹽的可生物降解聚合物微顆粒。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。尤其是，本發明的組合物具有可注射微顆粒的形式，其中格拉默或其藥用鹽被截留在可生物降解或不可生物降解載體中。本發明的微顆粒組合物可以包含水包油包水雙重乳液。在本發明的範圍內，微顆粒組合物包含內部水相，其包含格拉默或其任何藥用鹽；油相或水不混溶相，其包含可生物降解或不可生物降解聚合物；以及外部水相。外部水相可以進一歩包含表面活性剤，優選聚こ烯醇(PVA)、聚山梨酷、聚氧化こ烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物或纖維素酷。在本文中可以互換使用術語「油相」和「水不混溶相，，。本發明進一歩提供了通過將長效藥物組合物胃腸道外給予對其需要的主體治療多發性硬化症的方法，該長效藥物組合物包含治療有效量的醋酸格拉默或格拉默的任何其它藥用鹽。本發明的範圍內的是治療多發性硬化症的方法，該方法將儲藥形式的醋酸格拉默或格拉默的任何其它藥用鹽給予對其需要的個體。如在本文中所使用的，術語「治療」是指在多發性硬化症的發作以後症狀的抑制或緩和。在多發性硬化症的發作以後的常見症狀包括但不限於視カ的降低或喪失、跌跌撞撞和不平衡的步態、言語不清、以及尿頻和尿失禁。此外，多發性硬化症可以引起心境變化和抑鬱、肌肉痙攣和嚴重癱瘓。藥物所給予的"主體"是哺乳動物，優選但不限於人。如在本文中所使用的，術語「多發性硬化症」是指中樞神經系統的自身免疫病，其伴隨上述ー種或多種症狀。如在本文中所使用的，術語「醋酸格拉默」是指以前稱為共聚物I的化合物，其以商標名稱Copaxone 出售並且由合成多肽的醋酸鹽組成，包含4種天然存在的胺基酸=L-穀氨酸、L-丙氨酸、L-酪氨酸、和L-賴氨酸，平均摩爾分數分別為O. 141,0. 427、O. 095、和O. 338。在Copaxone 中醋酸格拉默的平均分子量是4，700-11，000道爾頓(FDA Copaxone 標註)以及胺基酸的數目範圍為約15至約100個胺基酸。該術語還指化合物的化學衍生物和類似物。通常，該化合物如在以下任何一項美國專利號中所述的來製備和表徵5, 981, 589,6, 054, 430,6, 342, 476,6, 362，161、6，620，847、和 6,939，539，每 個上述專利的全部內容以引用方式結合於本文。在一些實施方式中，組合物可以包含格拉默的任何其它藥用鹽，包括但不限於硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸ー氫鹽、磷酸ニ氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘化物、醋酸鹽、硝酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、癸酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙ニ酸鹽、琥珀酸鹽、生育酚琥珀酸鹽、辛ニ酸鹽、癸ニ酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1，4- ニ酸鹽、己炔-1，6- ニ酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、ニ硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯ニ甲酸鹽、對苯ニ甲酸鹽、磺酸鹽、ニ甲苯磺酸鹽、苯基醋酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、β -羥基丁酸鹽、こ醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙烷磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、扁桃酸鹽以及類似鹽。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。可以通過本領域技術人員可獲得的任何程序來製備共聚物。例如，可以在縮合條件下利用在溶液中的所期望摩爾比率的胺基酸、或通過固相合成程序，來製備共聚物。縮合條件包括適當溫度、pH、和溶劑條件，用於縮合一個胺基酸的羧基與另ー個胺基酸的氨基以形成肽鍵。縮合劑，例如，ニ環己基碳ニ亞胺，可以用來促進肽鍵的形成。保護基團可以用來保護官能團，如側鏈部分和一些氨基或羧基避免不希望的副反應。在美國專利號3，849，550 (其全部內容以引用方式結合於本文)中披露的方法可以用於製備本發明的共聚物。例如，在環境溫度下在無水ニ氧雜環己烷中並用ニこ胺作為弓I發劑，來聚合酪氨酸的N-羧基酸酐、丙氨酸、Y-苄基穀氨酸和N，三氟こ醯基-賴氨酸。可以通過在冰醋酸中的溴化氫來解封穀氨酸的Y-羧基。通過I摩爾哌啶來從賴氨酸除去三氟こ醯基。本領域技術人員容易明了，該方法可以加以調節以製備包含所期望的胺基酸的肽和多肽，即，在共聚物I中四種胺基酸中的三種，其中通過選擇性地消除涉及穀氨酸、丙氨酸、酪氨酸、或賴氨酸的任何ー種的反應。美國專利號6，620，847,6, 362，161,6, 342，476、6，054，430,6, 048，898和5，981，589 (其全部內容以引用方式結合於本文)披露了用於製備醋酸格拉默(Cop-I)的改進方法。對於本申請的目的來說，術語「環境溫度」和「室溫」通常是指約20° C至約26° C的溫度。可以在多肽合成期間或在已製備聚合物以後來調節共聚物的分子量。為了在多肽合成期間調節分子量，調節合成條件或胺基酸的量，使得當多肽達到近似所期望的長度時停止合成。在合成以後，可以通過任何可獲得的尺寸選擇程序來獲得具有所期望的分子量的多肽，如用分子量分級柱(molecular weight sizing column)或凝膠對多肽進行的層析法，以及所期望的分子量範圍的收集。還可以部分地水解多肽以除去高分子量物質，例如，通過酸或酶水解，然後加以純化以除去酸或酶。在一種實施方式中，可以通過ー種方法來製備具有所期望的分子量的共聚物，該方法包括反應受保護多肽和氫溴酸以形成具有所期望的分子量分布的三氟こ醯基-多肽。在由一種或多種測試反應預先確定的溫度下進行反應一定時間。在測試反應期間，變化時間和溫度，並確定給定批的測試多肽的分子量範圍。為該批多肽提供最佳分子量範圍的測試條件用於上述批。因此，可以通過ー種方法來製備具有所期望的分子量分布的三氟こ醯基-多肽，該方法包括在由測試反應預先確定的溫度下反應受保護多肽和氫溴酸一定時間。然後用哌啶水溶液進ー步處理具有所期望的分子量分布的三氟こ醯基-多肽，以形成 具有所期望的分子量的去保護多肽。在ー種優選實施方式中，在約20-28° C的溫度下，使來自給定批的受保護多肽的測試樣品和氫溴酸反應約10-50小吋。通過運行若干測試反應來確定用於該批的最佳條件。例如，在一種實施方式中，在約26° C的溫度下，使受保護多肽和氫溴酸反應約17小時。在某些實施方式中，劑型包括但不限於可生物降解可注射儲藥系統(depotsystem)如，基於PLGA的可注射儲藥系統、基於非PLGA的可注射儲藥系統、和可注射可生物降解凝膠或分散體。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。如在本文中所使用的，術語「可生物降解」是指這樣的成分，其隨著時間的推移在其表面會發生侵蝕或降解，這至少部分地起因幹與存在於周圍組織液中的物質的接觸，或通過細胞作用。尤其是，可生物降解成分是聚合物如但不限於基於乳酸的聚合物如聚丙交酯例如聚(D，L-丙交酷)即PLA;基於こ醇酸的聚合物如聚こ交酯(PGA)例如來自Durect的Lactel⑩;聚(D，L-丙交酷-こ交酷)即 PLGA (來自 Boehringer 的Resomer RG-504>Resomer RG-502>Resomer RG-504H、Resc)mer RG-502H、ResomeHD RG-504S、Resomen RG-502S，來自 Durect 的Lactel );聚己內酯如聚(e-己內酷)即PCL (來自Durect的Lactel );聚酐；聚(癸ニ酸)SA ;聚(蓖麻油酸)RA;聚(富馬酸)，FA;聚(脂肪酸ニ聚體)，FAD ;聚(對苯ニ甲酸)，TA ;聚(間苯ニ甲酸)，IPA;聚(對{羧基苯氧基}甲烷)，CPM;聚(對{羧基苯氧基}丙烷)，CPP ;聚(對{羧基苯氧基}己烷)CPH;聚胺、聚氨酷、聚酯醯胺、聚原酸酯{CHDM:順式/反式-環己基ニ甲醇，HD: I, 6-己ニ醇，DETOU :(3,9-ニ亞こ基-2，4，8，10-四氧雜螺i^ 一烷)};聚ニ氧雜環己酮；聚輕基丁酸酯；聚草酸亞燒基酯(polyalkylene oxalate);聚醯胺；聚酯醯胺；聚氨酯；聚縮醛；聚縮酮；聚碳酸酯；聚原碳酸酯；聚矽氧烷；聚磷腈；琥珀酸酷；透明質酸；聚(蘋果酸) 』聚(胺基酸)；聚羥基戊酸酷；聚琥珀酸亞烷基酷(polyalkylenesuccinates);聚こ烯吡咯烷酮；聚苯こ烯；合成纖維素酷；聚丙烯酸；聚丁酸；三嵌段共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、三嵌段共聚物(PEG-PLGA-PEG)、聚(N-異丙基丙烯醯胺)(PNIPAAm)、聚(環氧こ烷)_聚(環氧丙烷)_聚(環氧こ烷)三嵌段共聚物(ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0)、聚戊酸；聚こニ醇；聚羥基烷基纖維素；甲殼質(chitin);殼聚糖；聚原酸酯和共聚物、三元共聚物；脂質如膽固醇、卵磷脂 』聚(穀氨酸-穀氨酸こ酷)及類似物、或它們的混合物。在一些實施方式中，本發明的組合物包含可生物降解聚合物，其選自但不限於PLGA、PLA、PGA、聚己內酷、聚羥基丁酸酷、聚原酸酷、聚鏈烷酸酐、明膠、膠原、氧化纖維素、聚磷腈等。每個可能性表示単獨的實施方式。目前優選的可生物降解聚合物是基於乳酸的聚合物，更優選聚丙交酷、或聚(D，L-丙交酷-こ交酷)即PLGA。優選地，可生物降解聚合物的存在量為組合物的約10%至約98%w/w。基於乳酸的聚合物具有100:0至約0:100的乳酸與こ醇酸的單體配比，優選100:0至約10:90，並具有約1,000至200，000道爾頓的平均分子量。然而，應當明了，可生物降解聚合物的量是由參數如應用的持續時間等來確定。本發明的組合物可以進一歩包含一種或多種藥用賦形劑，其選自但不限於輔助表面活性劑、溶劑/共溶劑、水不混溶性溶劑、水、水混溶性溶劑、油性成分、親水性溶劑、乳化齊 、防腐剤、抗氧化劑、防泡劑、穩定劑、緩衝劑、pH調節劑、滲透劑、通道形成劑、滲透調節 齊U、或本領域已知的任何其它賦形劑。適宜的輔助表面活性劑包括但不限於聚こニ醇、聚氧こ烯-聚氧丙烯嵌段共聚物(稱作「泊洛沙姆」)、聚甘油脂肪酸酯如單月桂酸十甘油酯(decaglyceryl monolaurate)和單肉豆冠酸十甘油酯(decaglyceryl monomyristate)> 山梨聚糖脂肪酸酷如脫水山梨醇單硬脂酸酷、聚氧こ烯山梨坦脂肪酸酯如聚氧こ烯脫水山梨醇單油酸酯(吐溫)、聚こニ醇脂肪酸酯如聚氧こ烯單硬脂酸酷、聚氧こ烯烷基醚如聚氧こ烯月桂基醚、聚氧こ烯蓖麻油和硬化蓖麻油如聚氧こ烯硬化蓖麻油等或它們的混合物。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。適宜溶剤/共溶劑包括但不限於醇、三こ酸甘油酷、ニ甲基異山梨醇、四氫呋喃聚こニ醇醚(glycofurol)、碳酸丙ニ酷、水、ニ甲基こ醯胺等或它們的混合物。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。適宜的防泡劑包括但不限於矽酮乳液或倍半油酸山梨聚糖。用來在本發明的組合物中防止或減少成分的惡化的適宜的穩定劑包括但不限於抗氧化劑如甘氨酸、α -生育酚或抗壞血酸、BHA、BHT等或它們的混合物。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。適宜的張カ調節劑包括但不限於甘露醇、氯化鈉、和葡萄糖。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。適宜的緩衝劑包括但不限於醋酸鹽、磷酸鹽、和檸檬酸鹽(具有適宜的陽離子)。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。可以通過本領域已知的任何方式來製備本發明的組合物。目前優選的是將格拉默或其鹽共聚物加入膠體遞送系統，例如，可生物降解微顆粒，從而便於藉助於通過顆粒的聚合物壁的擴散和通過在體內的水介質或生物流體中的聚合物降解來實現釋放遲緩。可以通過稱作「雙重乳化」的エ藝並以可注射微顆粒的形式來製備本發明的組合物。簡要地，將水溶性共聚物的濃縮溶液分散於可生物降解或不可生物降解聚合物在水不混溶性揮發性有機溶劑(例如ニ氯甲烷、氯仿等)中的溶液。然後將如此獲得的「油包水」(w/o)乳液分散在包含表面活性劑(例如聚こ烯醇-PVA、聚山梨酷、聚氧化こ烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物、纖維素酯等)的連續外部水相中，以形成「水包油包水(w/o/w)雙重乳液」小滴。在蒸發有機溶劑以後，固化微顆粒並通過過濾或離心加以收集。用純化水洗滌收集的微顆粒(MP)以消除大多數表面活性劑和非結合肽，然後再次離心。在沒有添加劑或添加冷凍保護劑(甘露醇)的條件下，收集和冷凍乾燥經洗滌的MP，以促進它們隨後的重建。
可以通過各種參數來確定「水包油包水(w/o/w)雙重乳液」的顆粒尺寸，包括但不限於在此步驟中外加力的量、混合速度、表面活性劑類型和濃度等。適宜的顆粒尺寸為約I至 100 μ m。本發明的儲藥系統包括本領域技術人員已知的任何形式。適宜的形式包括但不限於可生物降解或不可生物降解微球體、可植入棒、可植入膠囊、和可植入環。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。另外包括延長釋放凝膠儲藥和易侵蝕基質。每個可能性表示本發明的單獨的實施方式。適宜的可植入系統描述於例如US 2008/0063687，其全部內容以引用方式結合於本文。如在本領域已知的，可以利用適宜的微型擠出機如那些例如在http://www. randcastle. com/prodinfo. html中描述的微型擠出機，來製備可植入棒。根據本發明的原則，相對於市售每日注射劑型，本發明的長效藥物組合物可以提供相同或更好的療效，並在局部和/或全身水平下，具有降低的副作用的發生率和降 低的副作用的嚴重性。在一些實施方式中，和大致相同劑量的醋酸格拉默的立即釋放製劑相比，本發明的組合物可以提供格拉默在主體中的延長釋放或延長作用。本發明包括醋酸格拉默或格拉默的任何其它藥用鹽與至少ー種其它活性劑的聯合療法。在本發明的範圍內的活性劑包括但不限於幹擾素，例如聚こニ醇化或非聚こニ醇化α-幹擾素、或β_幹擾素，例如幹擾素β-Ia或幹擾素β-lb、或τ-幹擾素；具有可選的抗增生/抗腫瘤活性的免疫抑制劑，例如米託蒽醌(mitoxantrone)、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤(azathioprine)、環磷醯胺、或類固醇,例如甲潑尼龍、潑尼松或地塞米松,或類固醇分泌齊U，例如ACTH ;腺苷脫氨酶抑制劑，例如克拉屈濱(cladribine);相對於各種T細胞表面標記的IV免疫球蛋白G (例如如在Neurology, 1998, May50 (5) : 1273-81中所披露的)單克隆抗體，例如那他珠單抗(natalizumab) (ANTEGREN⑩)或阿侖單抗(alemtuzumab)；TH2促進細胞因子，例如IL-4、IL-10，或抑制THl促進細胞因子的表達的化合物，例如磷酸ニ酯酶抑制劑，例如己酮可可鹼(pentoxifylline);解疫劑,其包括巴氯芬(baclofen)、地西泮(diazepam)、批拉西坦、丹曲林(dantrolene)、拉莫三嗪(lamotr igine)、利魯唑(rifluzole)、替扎尼定、可樂定、β阻滯劑、賽庚啶、奧芬那君或大麻素；AMPA穀氨酸受體拮抗劑，例如2，3- ニ羥基-6-硝基-7-氨磺醯苯並(f)喹喔啉、[1，2，3，4，-四氫-7-嗎啉基-2，3-ニ氧代-6-(三氟甲基)喹喔啉-i-基]甲基膦酸酷、I-(4-氨基苯基)-4-甲基-7，8-亞甲基-ニ氧-5H-2, 3-苯並ニB丫庚因(I- (4-aminophenyl) -4-methyl-7, 8-methylene-dioxy-5H-2, 3-benzodiazepine)、或(-)I- (4_ 氛基苯基)~4~ 甲基-7，8_ 亞甲基-ニ氧_4，5- ニ氫-3-甲基氨基甲醯基_2，3-苯並ニ吖庚因；VCAM-1表達的抑制劑或它的配體的拮抗劑，例如α 4 β I整聯蛋白VLA-4和/或α -4-β ~7整聯蛋白的拮抗劑,例如那他珠單抗(ANTLGRliN^.h抗巨噬細胞遷移抑制因子(Anti-MIF) ；xii)組織蛋白酶S抑制劑；xiii)mTor抑制劑。每個可能性表示本發明的単獨的實施方式。目前優選的一種其它活性劑是？1￥720(2-氨基-2-[2-(4-辛基苯基)こ基]丙-1，3-ニ醇；芬戈莫德)，其屬於免疫抑制劑。以下實施例用來更充分說明本發明的某些實施方式。然而，決不應將它們看作是限制本發明的範圍。本領域技術人員可以容易地設計本文披露的原則的許多變化和改進而不偏離本發明的範圍。實施例
實施例I :一般製備方法某幹PLGA的可灃射長效顆粒通過溶劑萃取/蒸發方法(單乳液)來製備微顆粒。將包含250mg的PLGA和200mg醋酸格拉默的50:50的ニ氯甲烷/こ醇溶液慢慢倒入包含2%PVA的水溶液(200ml)並在25° C下利用機械攪拌器(300rpm)加以乳化。在攪拌(IOOrpm)下蒸發有機溶劑2h。通過離心來收集如此形成的微顆粒並用蒸餾水洗滌以除去過多的乳化剤。然後冷凍乾燥最終懸浮液以獲得細粉。基於聚己內酯的可注射儲藥(depot)顆粒通過溶劑萃取/蒸發方法(單乳液)來製備微顆粒。將包含500mg聚己內酯和200mg醋酸格拉默的70:30的ニ氯甲烷/丙酮溶液慢慢倒入包含2%PVA、1%吐溫80的水溶液(200ml),然後在25° C下利用機械攪拌器(500rpm)加以乳化。在攪拌(300rpm)下蒸發有機溶劑4h。通過離心來收集形成的微顆粒並用蒸餾水洗滌，以除去過多的乳化剤。然 後冷凍乾燥最終懸浮液以獲得細粉。某於PLGA的棺入棒通過溶劑萃取/蒸發方法來製備長度為20mm和直徑為2mm的基於PLGA的可生物降解棒狀植入物。將包含250mg的PLGA和200mg醋酸格拉默的50:50的ニ氯甲烷/こ醇溶液慢慢倒入特製的棒狀模具。在室溫的真空烘箱中蒸發有機溶劑12小吋。可替換地，通過在85-90° C下擠出250mg的PLGA和200mg格拉默的混合物來製備棒狀植入物，其中利用模具直徑為O. 8或I. Omm的螺杆式擠出機(Microtruder Rancastle RCP-0250或類似擠出機)。實施例2 :分析方法-醋酸格拉默的測定設備分光光度計分析天平,能夠精確地稱量到O. Olmg材料和試劑醋酸格拉默83%，作為參考標準2，4，6_ 三硝基苯橫酸(TNBS,苦基橫酸(picrylsulfonic acid), 170. 5mM), 5% 在MeOH 中O. IM硼酸鹽緩衝液ρΗ9· 3 (十水四硼酸鈉欄381. 37)純化水O. 5、I. 0,2. O 和 7. OmL 的容量吸移管各種各樣的玻璃器皿。製備格拉默儲備溶液400 μ g/mL的製備將4. 8mg醋酸格拉默(效カ83%，作為參考標準的基礎)稱量到IOml容量瓶。添加大約7ml的O. IM硼酸鹽緩衝液以在超聲波浴中溶解醋酸格拉默。用O. IM硼酸鹽緩衝液進ー步稀釋溶液以獲得格拉默儲備溶液400 μ g/ml (作為基礎)。O. 25%TNBS工作溶液的製備在使用前，用水(20倍；例如50 μ I和950 μ I水)稀釋TNBS的5%儲備溶液，以獲得O. 25%TNBS工作溶液。柃準曲線標準制各 按照表1來製備8個格拉默校準標準溶液(cSTD ;各自4ml)。表1.醋酸格拉默的標準溶液
權利要求
1.一種長效胃腸道外藥物組合物，包含治療有效量的格拉默的藥用鹽。
2.一種長效藥物組合物，包括治療有效量的儲藥形式的格拉默的藥用鹽，所述儲藥形式適合於在醫療上可接受的位置植入對其需要的主體。
3.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，其中，所述格拉默的藥用鹽是醋酸格拉默。
4.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，適合於皮下或肌內植入。
5.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，其中，所述格拉默包含L-丙氨酸、L-穀氨酸、L-賴氨酸、和L-酪氨酸，摩爾比率為約0. 14穀氨酸、約0. 43丙氨酸、約0. 10酪氨酸和約0. 33賴氨酸。
6.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，其中，所述格拉默包含約15至約100個胺基酸。
7.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，其中，所述格拉默的藥用鹽的劑量為約20至約750mg範圍。
8.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，進一步包含藥用可生物降解或不可生物降解載體。
9.根據權利要求8所述的藥物組合物，其中，所述載體選自PLGA、PLA、PGA、聚己內酯、聚羥基丁酸酯、聚原酸酯、聚鏈烷酸酐、明膠、膠原、氧化纖維素、和聚磷腈。
10.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，具有通過水包油包水雙重乳化工藝製備的微顆粒的形式。
11.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，包含內部水相，所述內部水相包含治療有效量的格拉默的藥用鹽；水不混溶的聚合物相，所述水不混溶的聚合物相包含可生物降解或不可生物降解聚合物；以及外部水相。
12.根據權利要求11所述的藥物組合物，其中，所述水不混溶的聚合物相包含選自PLA和PLGA的可生物降解聚合物。
13.根據權利要求11所述的藥物組合物，其中，所述外部水相包含表面活性劑，所述表面活性劑選自聚乙烯醇(PVA)、聚山梨酯、聚氧化乙烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物和纖維素酯。
14.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，適合於每周一次至每6個月一次的給藥時間表。
15.根據權利要求14所述的藥物組合物，適合於每2周一次至每月一次的給藥時間表。
16.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，具有以下形式可生物降解微球體、不可生物降解微球體、任何適宜幾何形狀的植入物、可植入棒、可植入膠囊、可植入環、或延長釋放凝膠或易侵蝕基質。
17.根據權利要求I或2所述的藥物組合物，其中，相對於醋酸格拉默的市售每日注射劑型，所述組合物提供相同或更好的療效，在局部和/或全身水平，副作用的發生率降低和/或副作用的嚴重性降低。
18.根據權利要求17所述的藥物組合物，其中，與大致相同劑量的醋酸格拉默的立即釋放劑型相比，所述組合物提供格拉默在主體中的延長釋放或延長作用。
19.一種用於治療多發性硬化症的方法，其中，通過胃腸道外給予根據權利要求I所述的長效藥物組合物。
20.一種用於治療多發性硬化症的方法，包括以下步驟將根據權利要求2所述的長效藥物組合物植入對其需要的主體。
21.根據權利要求19或20所述的方法，包括以下步驟皮下給予或肌內植入所述藥物組合物。
22.根據權利要求19或20所述的方法，其中，所述藥物組合物包含醋酸格拉默。
23.根據權利要求22所述的方法，其中，所述醋酸格拉默包含L-丙氨酸、L-穀氨酸、L-賴氨酸、和L-酪氨酸，摩爾比率為約0. 14穀氨酸、約0. 43丙氨酸、約0. 10酪氨酸和約0.33賴氨酸。
24.根據權利要求23所述的方法，其中，所述格拉默包含約15至約100個胺基酸。
25.根據權利要求19或20所述的方法，其中，所述藥物組合物包含劑量範圍為約20至約750mg的格拉默的藥用鹽。
26.根據權利要求19或20所述的方法，其中，所述藥物組合物進一步包含藥用可生物降解或不可生物降解載體。
27.根據權利要求26所述的方法，其中，所述載體選自由PLGA、PLA、PGA、聚己內酯、聚羥基丁酸酯、聚原酸酯、聚鏈烷酸酐、明膠、膠原、氧化纖維素、和聚磷腈組成的組。
28.根據權利要求19或20所述的方法，其中，所述藥物組合物具有通過水包油包水雙重乳化工藝製備的微顆粒的形式。
29.根據權利要求19或20所述的方法，其中，所述藥物組合物包含內部水相，所述內部水相包含治療有效量的格拉默的藥用鹽；水不混溶的聚合物相，所述水不混溶的聚合物相包含可生物降解或不可生物降解聚合物；以及外部水相。
30.根據權利要求29所述的方法，其中，所述水不混溶的聚合物相包含選自PLA和PLGA的可生物降解聚合物。
31.根據權利要求29所述的方法，其中，所述外部水相包含表面活性劑，所述表面活性劑選自聚乙烯醇(PVA)、聚山梨酯、聚氧化乙烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物和纖維素酯。
32.根據權利要求19或20所述的方法，其中，以每周一次至每6個月一次的給藥時間表進行所述給予或所述植入步驟。
33.根據權利要求32所述的方法，其中，所述給藥時間表是每2周一次至每月一次。
34.根據權利要求19或20所述的方法，其中，所述藥物組合物具有以下形式可生物降解微球體、不可生物降解微球體、任何適宜幾何形狀的植入物、可植入棒、可植入膠囊、或可植入環、延長釋放凝膠或易侵蝕基質。
35.根據權利要求19或20所述的方法，其中，相對於市售每日注射劑型，所述藥物組合物提供相同或更好的療效，在局部和/或全身水平副作用的發生率降低和副作用的嚴重性降低。
36.根據權利要求35所述的方法，其中，與大致相同劑量的醋酸格拉默的立即釋放劑型相比，所述藥物組合物提供格拉默在主體中的延長釋放或延長作用。
37.適用於植入對其需要的個體的儲藥形式的格拉默的藥用鹽用於治療多發性硬化症的應用。
38.根據權利要求37所述的可植入儲藥的應用，用於提供格拉默在主體中的延長釋放或延長作用。
39.根據權利要求37至38中任一項所述的應用，其中，所述格拉默的藥用鹽是醋酸格拉默。
40.一種儲藥形式的格拉默的藥用鹽，適合用於治療多發性硬化症。
41.一種儲藥形式的格拉默的藥用鹽，適合用於提供格拉默在主體中的延長釋放或延長作用。
全文摘要
本發明提供了包含治療有效量的格拉默的長效胃腸道外藥物組合物。尤其是，本發明提供了長效藥物組合物，該組合物包含治療有效量的儲藥形式的醋酸格拉默，其適合於在醫療上可接受的位置給予對其需要的主體。上述儲藥形式適合於皮下或肌內植入或注射。
文檔編號A61K38/00GK102686235SQ201080060632
公開日2012年9月19日 申請日期2010年8月19日 優先權日2010年1月4日
發明者埃胡德·馬羅姆, 塞·魯比諾夫 申請人:Mapi醫藥公司