一種降糖降脂的黃連地黃組合物及其檢測方法與流程

2023-10-10 01:37:29

本發明涉及一種降糖降脂的黃連地黃組合物及其檢測方法，屬於中藥領域。

背景技術：

黃連《神農本草經》：「味苦，寒。主治熱氣，目痛，眥傷，泣出，明目，腸澼，腹痛，下痢，婦人陰中腫痛。久服令人不忘」。《名醫別錄》：「微寒，無毒。主治五藏冷熱，久下洩澼、膿血，止消渴、大驚，除水，利骨，調胃，厚腸，益膽，治口瘡」。《本草拾遺》：「主羸瘦氣急」。《藥性論》：「惡白僵蠶，忌豬肉，惡冷水。殺小兒疳蟲，點赤眼昏痛，鎮肝，去熱毒」。現代藥理研究黃連藥理作用有抗潰瘍、抑制胃酸分泌、保護胃黏膜、抗炎鎮痛、抑菌。廣泛用於溼熱痞滿，嘔吐，瀉痢，黃疸，高熱神昏，心火亢盛，心煩不寐，血熱吐衄，目赤吞酸，牙痛，消渴，癰腫疔瘡；外治溼疹，溼瘡，耳道流膿。

黃連為毛茛科植物黃連Coptischinensis Franch.、三角葉黃連Coptis deltoideaC.Y.Cheng et Hsiao.或雲連Coptis teeta wall.的乾燥根莖，味苦性寒，主要含有小檗鹼等生物鹼類成分，黃連及其主要成分小檗鹼治療糖尿病及其併發症、血脂異常等的藥理活性。但是，給大鼠連續灌胃較大劑量的黃連水煎劑10天後，對大鼠胃腸激素胃動素、胃泌素等均有明顯影響，可導致胃黏膜PGE2水平下降、氧自由基體系代謝活躍，胃黏膜脂質過氧化產物堆積，進而導致大鼠胃腸功能紊亂甚至死亡；臨床應用時也常有黃連及小檗鹼製劑的不良反應報導。可見，黃連或小檗鹼雖然藥效作用明顯，但，單獨用藥安全劑量範圍窄，安全性不佳，在臨床前研究和臨床使用中均存在一定的風險，就有必要進行中藥複方配伍來提高黃連臨床使用的安全性。

黃連地黃的複方組合始載於孫思邈《備急千金藥方》之黃連丸，該方用黃連一斤，生地黃一斤，為末，絞生地取汁，漬黃連，出，曬之燥，復納之。但是，由於「絞生地取汁」的具體用量不清楚，「漬黃連，出，曬之燥，復納之」的具體工藝不清楚，由於本領域技術人員不能通過常規的用量選擇、工藝優選來加以確定，不能簡單通過常規方法來提高黃連臨床使用的安全性，黃連地黃的組合藥物依然處於空白狀態，無法開發出臨床上使用方便、安全有效的藥物製劑。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，以及該黃連地黃組合物的製備方法和檢測方法。

本發明的目的是提供一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，生地黃和黃連的質量比是：1∶1-8∶1。

本發明的目的是提供一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，生地黃和黃連的質量比是：2∶1-6∶1。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，將生地黃和黃連混合，粉碎，過100目篩，製成散劑。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，將生地黃和黃連混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-3小時，合併提取液，製成湯劑。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，將生地黃和黃連混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-3小時，合併提取液，加入矯味劑適量，製成口服液。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，將生地黃和黃連混合，用5-15倍量的水煎煮1-3次，每次1-6小時，合併提取液，適量濃縮後，浸膏真空乾燥；按照浸膏10-40g，乳糖200-500g，微粉矽膠10-30g，羧甲基澱粉鈉10-40g，可溶性澱粉50-200g，硬脂酸鎂1-3g，混合均勻，製成片劑。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，取黃連適量，洗淨，粉碎並過篩，得黃連粉末；取新鮮的生地黃適量，洗淨，加水1-10倍量浸泡1-6小時，混合打漿，過濾；用適量黃連粉末吸收適量生地黃汁；在35-40攝氏度加熱1-6小時，真空乾燥，既得。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，取黃連適量，洗淨，粉碎並過篩，得黃連粉末；取新鮮的生地黃適量，洗淨，加水1-10倍量浸泡1-6小時，混合打漿，過濾，得生地黃汁；用適量黃連粉末吸收適量生地黃汁；在35-40攝氏度加熱1-6小時，真空乾燥，既得。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，取黃連適量，洗淨，粉碎並過篩，得黃連粉末；取新鮮的生地黃適量，洗淨，加水1-10倍量浸泡1-6小時，混合打漿，過濾，得生地黃汁；用適量黃連粉末吸收適量生地黃汁；在35-40攝氏度加熱1-6小時，真空乾燥，壓片，既得。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，取黃連適量，洗淨，粉碎並過篩，得黃連粉末；取新鮮的生地黃適量，洗淨，加水1-10倍量浸泡1-6小時，混合打漿，過濾，得生地黃汁；用適量黃連粉末吸收適量生地黃汁；在35-40攝氏度加熱1-6小時，真空乾燥，按照乾燥物10-40g，乳糖200-500g，微粉矽膠10-30g，羧甲基澱粉鈉10-40g，可溶性澱粉50-200g，硬脂酸鎂1-3g，混合均勻，製成片劑。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，取黃連適量，洗淨，粉碎並過篩，得黃連粉末；取新鮮的生地黃適量，洗淨，粉碎，加水1-10倍量浸泡1-3小時，混合打漿，過濾，得生地黃汁；用適量黃連粉末吸收適量生地黃汁；在35-40攝氏度加熱1-6小時，真空乾燥，既得。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，取黃連適量，洗淨，粉碎並過篩，得黃連粉末；取新鮮的生地黃適量，洗淨，粉碎，加水1-10倍量浸泡1-3小時，混合打漿，過濾，得生地黃汁；用適量黃連粉末吸收適量生地黃汁；在35-40攝氏度加熱1-6小時，真空乾燥，壓片，既得。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物，取黃連適量，洗淨，粉碎並過篩，得黃連粉末；取新鮮的生地黃適量，洗淨，粉碎，加水1-10倍量浸泡1-3小時，混合打漿，過濾，得生地黃汁；用適量黃連粉末吸收適量生地黃汁；在35-40攝氏度加熱1-6小時，真空乾燥，按照乾燥物10-40g，乳糖200-500g，微粉矽膠10-30g，羧甲基澱粉鈉10-40g，可溶性澱粉50-200g，硬脂酸鎂1-3g，混合均勻，製成片劑。

一種降糖、或、降脂的黃連地黃組合物可單一或與藥學上可接受的藥物載體用於製備預防或治療代謝症候群的藥物或保健品製劑。

所述的藥物製劑形式可以是任何可藥用的劑型，這些劑型包括：湯劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、片劑、或口服液等。

本發明利用原發性高血壓大鼠、高脂飼料結合鏈脲佐菌素誘導的II型糖尿病大鼠、果糖飼料誘導的代謝症候群大鼠、db/db小鼠、四氧嘧啶誘導的I型糖尿病小鼠、高脂飼料誘導的代謝症候群小鼠進行體內藥效實驗。

結果表明：本發明優選了組分用量、優選了工藝，提供的中藥組合物可明顯降低模型動物血清甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白等水平，改善血糖和葡萄糖、胰島素耐量，抑制高脂飲食造成的高血脂、高血糖，顯示出良好的降糖降脂的藥用價值。

本發明的技術方案如下：

一種黃連地黃組合物的檢測方法，包括如下鑑別方法中的一種或幾種：

A.黃連鑑別

取黃連地黃組合物細粉2-10g，加入乙酸乙酯10-50ml，超聲提取0.5-2小時，濾過，作為供試品溶液；

取黃連藥材適量，加乙酸乙酯製成每1ml含1-10mg藥材的溶液，，超聲提取0.5-2小時，濾過，作為對照品溶液；

分別吸取上述溶液各1-5μl，點於同一矽膠G薄層板上，以體積份數比為(3-5)∶(0.5-2)異丙醇-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以重量體積比2％三氯化鐵乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同或類似顏色的斑點；

B.地黃鑑別

取黃連地黃組合物細粉2-10g，加入乙醇10-50ml，超聲提取0.5-2小時，濾過，作為供試品溶液；

取地黃藥材適量，加乙醇製成每1ml含1-10mg藥材的溶液，超聲提取0.5-2小時，濾過，作為對照品溶液；

分別吸取上述溶液各2-10μl，點於同一矽膠G薄層板上，以體積份數比為(1-9)∶(0.5-2)甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以重量體積比5％的香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同或類似顏色的斑點；

本發明的鑑定方法，專屬性強，進一步確保了產品質量安全、均一、有效、質量可控。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明做進一步詳細、完整的說明。

實施例1

將新鮮的生地黃、和黃連以質量比1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，真空乾燥，製成散劑。

實施例2

將新鮮的生地黃、和黃連以質量比3g∶1g混合，粉碎，過100目篩，真空乾燥，製成散劑。

實施例3

將新鮮的生地黃、和黃連以質量比1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用10g水煎煮1次，每次3小時，合併提取液，適量濃縮後，浸膏真空乾燥。

實施例4

將新鮮的生地黃、和黃連以質量比1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用10g水在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併提取液，適量濃縮後，浸膏真空乾燥。

實施例5

將新鮮的生地黃、和黃連以質量比1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用10g水在40攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併提取液，適量濃縮後，浸膏真空乾燥。

實施例6

將黃連1g，粉碎，過100目篩；

將新鮮的生地黃1g，粉碎，過100目篩，用10g水在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併生地黃汁；

將黃連粉與生地黃汁混合，在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，得到混合物；

混合物適量濃縮後，浸膏真空乾燥。

實施例7

將黃連1g，粉碎，過100目篩；

將新鮮的生地黃1g，粉碎，過100目篩，用10g水在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併生地黃汁；

將黃連粉與生地黃汁混合，在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，得到混合物；

混合物適量濃縮後，浸膏真空乾燥。

實施例8

將新鮮的生地黃和黃連以質量比1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用10g水煎煮1次，每次3小時，合併提取液，適量濃縮後，浸膏真空乾燥；按照浸膏2g，乳糖40g，微粉矽膠2g，羧甲基澱粉鈉2g，可溶性澱粉10g，硬脂酸鎂0.2g，混合均勻，製成片劑。

實施例9

將新鮮的生地黃和黃連以質量比1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用10g水在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併提取液，適量濃縮後，浸膏真空乾燥；按照浸膏2g，乳糖40g，微粉矽膠2g，羧甲基澱粉鈉2g，可溶性澱粉10g，硬脂酸鎂0.2g，混合均勻，製成片劑。

實施例10

將生地黃和黃連以質量比1g∶1g混合，粉碎，過100目篩，用10g水在40攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併提取液，適量濃縮後，浸膏真空乾燥；按照浸膏2g，乳糖40g，微粉矽膠2g，羧甲基澱粉鈉2g，可溶性澱粉10g，硬脂酸鎂0.2g，混合均勻，製成片劑。

實施例11

將黃連1g，粉碎，過100目篩；

將新鮮的生地黃1g，粉碎，過100目篩，用10g水在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併生地黃汁；

將黃連粉與生地黃汁混合，在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，得到混合物；

混合物適量濃縮後，浸膏真空乾燥；

按照浸膏2g，乳糖40g，微粉矽膠2g，羧甲基澱粉鈉2g，可溶性澱粉10g，硬脂酸鎂0.2g，混合均勻，製成片劑。

實施例12

將黃連1g，粉碎，過100目篩；

將新鮮的生地黃1g，粉碎，過100目篩，用10g水在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，合併生地黃汁；

將黃連粉與生地黃汁混合，在35攝氏度浸泡1次，每次3小時，得到混合物；

混合物適量濃縮後，浸膏真空乾燥；

按照浸膏2g，乳糖40g，微粉矽膠2g，羧甲基澱粉鈉2g，可溶性澱粉10g，硬脂酸鎂0.2g，混合均勻，製成片劑。

實施例13

選用(200±20)g健康雄性wistar大鼠，隨機分為正常組和高脂組(88％普通飼料+10％豬油+2％膽固醇)，飼餵4周後，高脂組腹腔注射鏈脲佐菌素35mg/kg，五天後剪尾測隨機血糖，篩選血糖值超過16.7mmol/L的大鼠進入實驗，並分為模型組、單用黃連組(生藥用5倍量水煎煮30分鐘，過濾，既得)、單用生地黃組(生藥用5倍量水煎煮30分鐘，過濾，既得)、給藥組1-7。連續給藥2周，

正常組：生理鹽水；

模型組：生理鹽水；

單用黃連組：每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

單用生地黃組：每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

給藥組1-7分別給予實施例1-7的產品，給藥組1-7每天口服灌胃8g生藥/kg，1次，

給藥結束後，測定各組大鼠血空腹血糖值。實驗數據進行方差分析，結果以x±s表示。

給藥結束後測定大鼠空腹血糖、血清甘油三酯和總膽固醇水平。實驗數據進行方差分析，結果以x±s表示。

註：#P＜0.05，##P＜0.01，與正常組相比；*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，與模型組相比。

同時，與模型組相比，中藥組合物有顯著的降低體重、血壓和血清甘油三酯的作用，同時對空腹血糖和血清總膽固醇也具有一定的調節作用，說明中藥組合物具有良好的治療代謝症候群的作用。

給藥2周後，取其糞便。比較菌群種屬水平的組成差異。

模型組相對於正常組：

擬桿菌屬、脫硫弧菌屬、異常球菌屬的豐度顯著增長；

吉氏副擬桿菌等的豐度顯著增長；

螺桿菌屬的豐度增加；

Alistipes、Anaerotruncus、顫桿菌屬的豐度明顯降低。

單用黃連組、單用生地黃組：

擬桿菌屬、脫硫弧菌屬、異常球菌螺桿菌屬，豐度明顯降低；

吉氏副擬桿菌豐度，降低；

顫桿菌屬的豐度顯著增加；

Alistipes的豐度顯著增加；

給藥組1-7組：水平恢復正常組

擬桿菌屬、異常球菌屬豐度降低；

螺桿菌屬、Alistipes、Anaerotruncus、顫桿菌屬、脫硫弧菌屬、吉氏副擬桿菌的豐度水平恢復正常組。

表明該中藥組合物可在提高安全性的同時增強藥效，能調節腸道菌群，具有很大的藥物開發潛力和臨床應用價值。

實施例14

一種黃連地黃組合物的檢測方法，包括如下鑑別方法中的一種或幾種：

A.黃連鑑別

取實施例2的黃連地黃組合物細粉2g，加入乙酸乙酯10ml，超聲提取0.5小時，濾過，作為供試品溶液；

取黃連藥材適量，加乙酸乙酯製成每1ml含1mg藥材的溶液，超聲提取0.5小時，濾過，作為對照品溶液；

分別吸取上述溶液各1μl，點於同一矽膠G薄層板上，以體積份數比為3∶0.5異丙醇-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以重量體積比2％三氯化鐵乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同或類似顏色的斑點；

B.地黃鑑別

取實施例2的黃連地黃組合物細粉2g，加入乙醇10ml，超聲提取0.5小時，濾過，作為供試品溶液；

取地黃藥材適量，加乙醇製成每1ml含1mg藥材的溶液，超聲提取0.5小時，濾過，作為對照品溶液；

分別吸取上述溶液各2μl，點於同一矽膠G薄層板上，以體積份數比為3∶0.5甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以重量體積比5％的香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同或類似顏色的斑點；

本發明的鑑定方法，專屬性強，進一步確保了產品質量安全、均一、有效、質量可控。

本發明的地黃和黃連組合物具有降糖降脂的新用途。同時由於地黃具有藥食同源的特性，與黃連合用可起到減毒增效的作用。