8-位取代的苯並氮雜作為類toll受體調節劑的製作方法

2023-10-05 02:59:34 1

專利名稱：8-位取代的苯並氮雜作為類toll受體調節劑的製作方法
8-位取代的苯並氮雜萆作為類TOLL受體調節劑本申請根據35 U. S. C. § 119要求2005年8月19日提交的美國臨 時專利申請60/710,004的權益，其全文通過引用結合到本文中。發明背景發明領域本發明涉及用於調節免疫功能的方法和組合物。更具體地講，本 發明涉及用於調節TLR7-和/或TLR8-介導的信號傳導的組合物和方法。現有技術描述免疫系統刺激，包括先天免疫和適應性免疫之一或二者的刺激， 是一種能夠導致宿主保護性或不利生理後果的複雜現象。近年來，人 們逐漸對先天免疫下的機理產生興趣，相信其引發和支持適應性免 疫。這種興趣部分由目前發現一系列高保守圖式識別受體蛋白質引 起，這種蛋白質被稱為類Toll受體(TLRs)，相信這種受體與病原體相 關性分子圖式(PAMPs)的受體的先天免疫相關。因此，用於調節先天 免疫的組合物和方法最令人感興趣，因為它們可影響包括自身免疫、 炎症、過敏、哮喘、移植排斥、移植物抗宿主疾病(GvHD)、感染、癌 症和免疫缺陷的病症的治療方法。類Toll受體(TLRs)為I型跨膜蛋白質，這種蛋白質允許生物體(包 括哺乳動物)檢測微生物，並引發先天免疫反應(Beutler, B.， Nature 2004， 430:257-263)。它們包含同源胞質域和富亮氨酸胞外域，並且一 般生成同源二聚體，同源二聚體感覺胞外(或內化)信號，隨後通過銜 接分子如MyD88(髓樣分化因子88)引發信號轉導級聯繫統。在TLR的胞質域中有這種高同源性，以至於最初有人提出，對於所有的TLR 均存在相似的信號傳導途徑(Re, F.， Strominger， J. L.， Immunobiology 2004， 209:191-198)。實際上，所有的TLR均可激活NF-kB和MAP 激酶；然而，由TLR激活衍生的細胞因子/趨化因子釋放分布似乎對 各TLR是唯一的。此外，TLR刺激的信號傳導途徑非常類似於細胞 因子受體IL-1R誘導的途徑。這可能是由於這些受體共有的同源物， 即TIR(Toll/IL-lR同源結構)域。 一旦在TLR中激活TIR域並且徵集 MyD88，就會激活絲氨酸/蘇氨酸激酶的IRAK族，最終促進Ik-B降 解並激活NF-kB(MeansT. K.，等人，Life Sci. 2000， 68:241-258)。盡 管似乎設想此級聯允許胞外刺激以增加胞內事件，但有證據表明一些 TLR遷移到細胞內體，在內體也可引發信號傳導。此過程允許與被吞 沒微生物緊密接觸，並且適應這些受體在先天免疫反應中擔當的角色 (Underhill， D. M., etal.， Nature 1999， 401:811-815)。此過程也可能 允許受損組織(例如，在炎性疾病中)或凋亡細胞釋放的宿主核酸通過 內體呈遞觸發反應。在哺乳動物中，有與此快速反應協同的11種TLR。 數年前曾提出一種假設(Janeway， C. A., Jr.， Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. 1989, 54:1-13)，先天免疫反應通過微生物導致的TLR激 活模型引發適應性免疫反應，現在這已得到證實。因此，由不同族感 染生物體呈遞的病原體相關性分子圖式(PAMP)產生先天免疫反應，包 括某些細胞因子、趨化因子和生長因子，隨後引發精確適應性免疫反 應，以通過抗原呈遞適應感染性病原體，從而製造抗體並產生細胞毒 素T細胞。格蘭氏陰性菌脂多糖(LPS)—直被看作是誘導哺乳動物類似於敗 血性休克的炎症反應的輔助物質和免疫刺激物質，也是一種藥理學工 具。利用基因方法，i口、另寸出TLR4為LPS的受體。LPS是TLR4的激 動劑的這一發現說明TLR調節可用於疫苗和人類疾病的治療 (Aderem, A.; Ulevitch， R.丄，Nature 2000， 406:782-787)。現在已認 識到，各種TLR激動劑可激活B細胞、嗜中性粒細胞、肥大細胞、7嗜酸性粒細胞、內皮細胞和數種上皮細胞，並且調節某些類型細胞的 增殖和凋亡。
至今，有些類似的TLR7和TLR8被表徵為在內體分室中發現的 單條RNA的受體，因為被認為對病毒攻擊的免疫反應重要。咪*莫 特， 一種^皮批准的局部抗病毒/4元癌症藥物，最近糹皮描述成TLR7激動 劑，已證明這種激動劑對某些皮膚疾病有臨床效果(Miller R. L., et al., Int. J. Immunopharm. 1999, 21:1-14)。這種小分子藥物被描述成ssRNA 的結構片莫擬。TLR8最初描述於2000(Du， X., etal.， European Cytokine Network 2000 (Sept.), 11(3):362-371),並且很快被歸屬與病毒感染先 天免疫反應有關(Miettinen, M， et al., Genes and Immunity 2001 (Oct.), 2(6):349隱355)。
最近報告具有抗病毒活性的某些咪唑並喹啉化合物是TLR7和 TLR8的配體(Hemmi H.， et al.(2O02) Nat. Immunol. 3:196-200; Jurk M.， et al.(2002) Nat. Immunol. 3:499)。咪唑並喹啉是具有抗病毒性質和抗 腫瘤性質的免疫細胞的有效合成活化劑。最近，Hemmi等人用野生型 巨噬細胞和MyD88-缺陷的鼠淨艮告，兩種咪唑並喹啉，咪喹莫特和瑞 喹莫德(R848),誘導腫瘤壞死因子(TNF)和白介素-12(IL-12)，並且只 在野生型細胞中激活NF-kB,與通過TLR激活一致(Hemmi H.， et al.(2002) Nat. Immunol. 3:196-200)。自TLR7缺乏而其他TLR不缺乏
咪唑並喹啉誘導脾B細胞劑量依賴性增生，並且在野生但不是11^7-/-鼠的細胞中激活細胞內信號傳導級聯。螢光素酶分析確定，人胚胎腎 細胞中的人TLR7但不是TLR2或TLR4的表達導致響應瑞喚莫德 NF-kB激活。Hemmi等人的發現提示，這些咪唑並查啉化合物為能夠 通過TLR7誘導信號傳導的TLR7的非天然配體。最近報告R848也是 人TLR8的配體(Jurk M., et al.(2002) Nat. Immunol. 3:499)。
發明概述本文所述組合物用於調節體外和體內免疫反應。已發現此類組合 物用於多種臨床應用，如用於治療包括不需要的免疫活性的病症的方 法，包括炎性和自身免疫疾病。
更具體地講，本發明的一個方面提供一種式I的化合物
及其代謝物、溶劑化物、互變異構體以及藥學上可接受的鹽和前藥，
其中Y、 R1、 R2、 R3、 R4、 R5a、 1151)和1151;如下限定。
本發明還涉及一種藥物組合物，該組合物包含式I的化合物或其 溶劑化物、藥學上可接受的前藥、代謝物或藥學上可接受的鹽。
本發明的化合物可有利與其他已知的治療劑組合使用。因此，本 發明還涉及一種藥物組合物，該組合物包含治療有效量的式I的化合 物或其溶劑化物、藥學上可接受的前藥、代謝物或藥學上可接受的鹽 以及第二治療劑。
本發明還提供調節TLR7-和/或TLR8-介導的信號傳導的方法，所 述方法包括使表達TLR7和/或TLR8的細胞與有效量的式I的化合物 或其溶劑化物、藥學上可接受的前藥、代謝物或藥學上可接受的鹽接 觸。在一個方面，所述方法抑制TLR7-和/或TLR8-介導的免疫刺激信 號傳導。
本發明還提供調節患者TLR7-和/或TLR8-介導的免疫刺激的方 法，所述方法包括給予有TLR7-和/或TLR8-介導的免疫刺激發展或有 這種風險的患者有效量的式I的化合物或其溶劑化物、藥學上可接受 的前藥、代謝物或藥學上可接受的鹽，以抑制或促進患者TLR7-和/ 或TLR8-介導的免疫刺激。本發明還提供治療可由調節TLR7-和/或TLR8-介導的細胞活性 治療的病症或疾病的方法，所述方法包括給予有所述病症或疾病發展 或有這種風險的溫血動物如哺乳動物(例如人)有效量的式I的化合物 或其溶劑化物、代謝物、藥學上可接受的前藥或藥學上可接受的鹽， 以治療所述病症或疾病。
本發明還提供一種調節哺乳動物免疫系統的方法，所述方法包括 給予哺乳動物有效量的式I的化合物或其溶劑化物、代謝物、藥學上 可接受的前藥或藥學上可接受的鹽，以調節所述免疫系統。
本發明還提供在為有此類疾病或病症的哺乳動物(例如人)治療所 述疾病或病症中用作藥物的式I的化合物或其溶劑化物、藥學上可接 受的前藥或藥學上可接受的鹽。本發明還提供式I的化合物或其溶劑 化物、代謝物、藥學上可接受的前藥或藥學上可接受的鹽在製備藥物 中的用途，所述藥物用於治療有此類疾病的哺乳動物(例如人)的所述 疾病禾口病症。
本發明還提供試劑盒，所述試劑盒包含一種或多種式I的化合物 或其溶劑化物、代謝物、藥學上可接受的前藥或藥學上可接受的鹽。 試劑盒還可包含第二化合物或包含第二藥劑的製劑。
本發明的其他優點和新穎特徵將部分在以下說明中闡明，部分在 詳查以下說明時對本領域的技術人員顯而易見，或者通過實施本發明 認識。本發明的優點可通過在附加權利要求書中特別指出的手段、組 合、組合物和方法實現和獲得。
附圖簡述
附圖結合本文並形成本說明書的一部分，圖示本發明的非限制實 施方案，並與說明一起用於解釋本發明的原理。在附圖中

圖1顯示合成化合物7的反應方案。 圖2顯示合成化合物8的反應方案。 圖3顯示合成化合物12的反應方案。圖4顯示合成化合物24的反應方案。
發明詳述
在某些方面，本發明提供用於調節TLR7-和/或TLR8-介導的信號 傳導的組合物和方法。更具體地講，本發明的一個方面提供一種式I 的化合物
及其代謝物、溶劑化物、互變異構體和藥學上可接受的鹽及前藥， 其中
Y為CF2CF3、 CF2CF2RS或芳基或雜芳環，其中所述芳基和雜芳 環用一個或多個獨立選自烯基、炔基、Br、 CN、 OH、 NR6R7、 C(-O)R8、 NR6S02R7、 (C-C6烷基)氨基、R6OC(=0)CH=CH2-、 SR6和S02R6的基 團取代，並且其中所述芳基和雜芳環任選另外用 一個或多個獨立選自 F、 Cl、 CF3、 CF30-、 HCF20-、烷基、雜烷基和ArO-的基團取代；
R1、 W和R"蟲立選自H、烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、 環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜 烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基任選用一個或多個 獨立選自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(O)R6、 C(-O)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C廣C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基團取代，或者
R3和R4與它們結合的原子一起形成飽和或部分不飽和的碳環， 其中所述碳環任選用一個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(O)OR6、 OC(=Q)R6、 C(=0)NRV、(C誦C6烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6 和502116的基團取代；
R2和R8獨立選自H、 OR6、 NR6R7、烷基、烯基、炔基、雜烷基、 環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、 炔基、雜烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基任選用一 個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(-O)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C-C6烷基)氨基、 CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基團 取代；
R5a、 1^和115°獨立為H、 F、 Cl、 Br、 I、 OMe、 CH3, CH2F、 CHF2 或CFs並且
RS和R"獨立選自H、烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、環 烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基，其中所迷烷基、烯基、炔基、雜烷 基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基任選用一個或多個獨 立選自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (C廣C6烷基)絲、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6和S02R6的基團取代，或者
R6和R7與它們結合的原子一起形成飽和或部分不飽和的雜環， 其中所述雜環任選用一個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、 Cl、 Br、 I、 CN、 OR6、 NR6R7、 C(=0)R6、 C(=0)OR6、 OC(=0)R6、 C(=0)NR6R7、 (d-Q烷基)氨基、CH3OCH20-、 R6OC(=0)CH=CH2-、 NR6S02R7、 SR6 和S02RS的基團取代。
在某些實施方案中，R1、 113和114分別為氫。
在某些實施方案中，R5a、 RSb和R^分別為氫。
在所述式I化合物的某些實施方案中，W為OR6。在某些實施方 案中，R"為烷基，如(1-4C)烷基。在特定實施方案中，116為乙基。
在所述式I化合物的某些實施方案中，W為NR6117。在某些實施 方案中，W和I^獨立為H、烷基如(1-6C)烷基、或雜烷基如(1-4C)烷氧基(2-4C)烷基。在特定實施方案中，W和I^獨立為H、乙基、丙基
或CH2CH2OCH3。
在所述式I化合物的某些實施方案中，Y為芳基，如苯基。在某 些實施方案中，所述芳基用C—0)rS取代，如在對-rsc(o)苯基中。 在某些實施方案中，R8為OR6、服&7或雜環烷基。在某些實施方案 中，116和117獨立為H或烷基，^。(l-6C)烷基。在某些其他實施方案中， 116和f與它們連接的氮原子一起形成4-6元氮雜環烷基環，如吡咯烷 基。在特定實施方案中，Y為
在所述式I化合物的某些實施方案中，Y為CF2CF3。 本文所用術語"烷基"是指具有1至12個碳原子(包括1至10個碳 原子、1至6個碳原子和1至4個碳原子)的飽和線形或支鏈單價烴基， 其中烷基可任選獨立用 一個或多個下述取代基取代。烷基的實例包括 C!-C!2烴部分，如但不限於甲基(Me, -CH3)、乙基(Et, -CH2CH3)、 l-丙基(n-Pr，正丙基，-CH2CH2CH3)、 2-丙基(i-Pr，異丙基，-CH(CH3)2)、
1- 丁基(n-Bu,正丁基，-CH2CH2CH2CH3)、 2-甲基-l-丙基(i-Bu，異丁 基，-CH2CH(CH3)2)、 2-丁基(s-Bu,仲丁基，-CH(CH3)CH2CH3)、 2隱 曱基-2-丙基(t-Bu ，叔丁基，-C(CH3)3) 、 l-戊基(正戊基， -CH2CH2CH2CH2CH3) 、 2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3) 、 3-戊基 (-CH(CH2CH3)2)、 2-曱基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、 3-甲基-2-丁基 (-CH(CH3)CH(CH3)2)、 3-甲基-l-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、 2-曱基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、 l曙己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch3)、 2隱己 基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3) 、 3- i|(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、
2- 甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3) 、 3-甲基-2-戊基 (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、 4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2) 、 2-曱基-3-戊基 (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、 2，3-二甲基-2-丁基(誦C(CH3)2CH(CH3)2)、 3，3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、 1-庚基和l-辛基。
本文所用術語"烯基"是指具有2至10個碳原子(包括2至6個碳 原子和2至4個碳原子)且具有至少一個雙鍵的線形或支鏈單價烴基， 包括但不限於乙烯基、丙烯基、l-丁-3-烯基、l-戊-3-烯基、l-己-5-烯 基等，其中烯基可任選獨立用一個或多個本文所述取代基取代，並且 包括具有"順式"和"反式"取向或者"E"和"Z"取向的基團。術語"烯基" 包括烯丙基。
本文所用術語"炔基"是指2至12個碳原子(包括2至10個碳原 子、2至6個碳原子和2至4個碳原子)的包含至少一個畚鍵的線形 或支化單價烴基。實例包括但不限於乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔 -2-基等，其中炔基可任選獨立用 一個或多個本文所述取代基取代。
本文所用術語"碳環"、"碳環基"或"環烷基"可互換使用，是指具 有3至12個碳原子(包括3至10個碳原子和3至6個碳原子)的飽和 或部分不飽和環狀烴基。術語"環烷基，，包括單環和多環(例如二環和三 環)環烷基結構，其中多環結構4壬選包括稠合到飽和或部分不飽和環烷 基或雜環烷基環或芳基或雜芳基環的飽和或部分不飽和環烷基。環烷 基的實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基等。 二環碳環具有例如排成二環[4,5]、 [5,5、[5,6]或[6,6]系統的7-12個環 原子，具有排成二環[5,6]或[6，6]系統的9或IO個環原子，或排成橋連 系統，如二環[2.2.1]庚烷、二環[2.2.2]辛烷和二環[3.2.2]壬烷。環烷基 可任選獨立在一個或多個可取代位置用一個或多個本文所述取代基 取代。此環烷基可任選用例如一個或多個獨立選自d-Cs烷基、CrC6 烷氧基、滷素、羥基、氰基、硝基、M、單(C廣C6)烷基氨基、二(C廣C6)
烷基氨基、C2-Q;烯基、C2-C6炔基、d-C6囟代烷基、C廣Ce卣代烷氧
基、氨基(d-C6)烷基、單(CrC6)烷基氨基(d-C6)烷基和二(C廣C6)烷基 氨基(CV Cs)烷基的基團取代。術語"環烯基"是指具有3至10個碳原子(包括3至6個碳原子)且 在碳環內具有至少一個雙鍵的部分不飽和環狀烴基。
術語"雜烷基"是指1至12個碳原子(包括1至6個碳原子和1至 4個碳原子)的飽和線形或支鏈單價烴基，其中至少 一個碳原子用選自 N、 O或S的雜原子代替，並且其中所述基團可以為碳基團或雜原子 基團(即，雜原子可出現於基團的中間或末端)。雜烷基可任選獨立用 一個或多個本文所述取代基取代。術語"雜烷基"包括烷氧基和雜烷氧 基。
本文所用術語"雜環烷基"、"雜環"和"雜環基"可互換使用，是指3 至8個環原子的飽和或部分不々包和碳環基團，其中至少一個環原子為 選自氮、氧和硫的雜原子，其餘環原子為C,其中一個或多個環原子 可任選獨立用一個或多個下述取代基取代。該基團可以為碳基團或雜 原子基團。術語"雜環"包括雜環烷氧基。該術語還包括包含稠合到芳 族基團的雜環的稠合環系統。"雜環烷基"也包括其中雜環基團與芳族 或雜芳族環稠合的基團。雜環烷基環的實例包括但不限於吡咯烷基、 四氫呋喃基、二氫吹喃基、四氫p塞汾基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、 四氫p塞喃基、哌啶子基、嗎啉代、硫嗎啉代(thiomorpholino)、緣嚼烷 基、哌嗪基、高哌嗪基、氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷 基(thietanyl)、高哌啶基、氧雜環庚烷基、硫雜環庚烷基、氧氮雜草基、 二氮雜草基、硫氮雜草基、1,2,3,6-四氫吡咬基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉 基、P引咮啉基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧雜環己烷基、1,3-二氧 戊環基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫雜環戊烷基、二氫吡喃基、二氫 噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜二環[3.1.0] 己烷基、3-氮雜二環[4丄0]庚烷基、氮雜二環[2.2.2]己烷基、3H-巧I咮 基喹嗪基和N-吡啶基脲。在此定義範圍內也可包括螺部分。如果可能， 由上列基團衍生的前述基團可C-連接或N-連接。例如，由吡咯衍生 的基團可以為吡咯-l-基(N-連接)或吡咯-3-基(C-連接)。此外，由咪唑 衍生的基團可以為咪唑-l-基(N-連接)或咪唑-3-基(C-連接)。其中2個環碳原子用氧代(=0)部分取代的雜環基團的實例為1,1-二氧代-硫嗎
啉基。本文雜環基可不取代，或如規定用不同基團在一個或多個可取
代位置取代。例如，此雜環基可4壬選用例如一個或多個獨立選自C,-C6 烷基、C廣C6烷氧基、滷素、羥基、絲、硝基、氨基、單(C廣C6)烷基 氨基、二(C廣C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C廣C6滷代烷基、
C廣Q卣代烷氧基、氨基(C廣C6)烷基、單(C廣C6)烷基氨基(d-C6)烷基或
二(d-C6)烷基氨基(C,-C6)烷基的基團取代。
術語"芳基"是指具有單環(例如苯基)、多環(例如聯苯)或其中至少
一個為芳族的多個稠合環(例如，1,2,3,4-四氪萘基、萘基等)的單價芳
族碳環基團，該基團任選用一個或多個獨立選自例如卣素、低級烷基、 低級烷氧基、三氟甲基、芳基、雜芳基和羥基的取代基取代。
本文所用術語"雜芳基"是指5-、 6-或7-元環且包括5-10個原子的 稠合環系統(至少 一個為芳族)的單價芳族基團，該基團包含至少 一個 且最多4個選自氮、氧和硫的雜原子。雜芳基的實例為吡咬基、咪唑 基、嘧啶基、p比哇基、三唑基、吡漆基、四唑基、呋喃基、p塞吩基、 異嗯唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異唾啉基、 p引咮基、苯並咪唑基、苯並呋喃基、噌啉基、吲唑基、。引。秦基、2,3-二氮雜萘基、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑 基、三唑基、噻二唑基、p塞二p坐基、呔咱基、苯並吹咱基、苯並p塞吩 基、苯並噻唑基、苯並嗨唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘咬基和呋喃 並吡咬基(furopyridinyl)。在此定義範圍內也可包括螺部分。雜芳基任 選用一個或多個獨立選自例如卣素、低級烷基、低級烷氧基、卣代烷 基、芳基、雜芳基和羥基的取代基取代。
術語"滷素"表示氟、溴、氯和碟。
術語"氧代"表示=0。
通常，式I化合物的各個部分或官能團可任選由一個或多個取代 基取代。適用於本發明的取代基的實例包括但不限於氧代、囟素、氰 基、硝基、三氟甲基、二氟曱氧基、三氟甲M、疊氮基、-NR"S02R'、-S02NR'R"、 -C(O)R'、國C(O)OR'、 -OC(O)R'、 -NR"C(O)OR'、 -NR"C(O)R'、 -C(O)NR'R"、 -NR'R"、 -NR"'C(O)N'R" 、 -NR'"C(NCN)NR'R" 、 -OR'、 芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環基和雜環基烷基，其中 R'、 R"和R"'獨立為H、烷基、雜烷基、環烷基、雜環烷基、烯基、炔 基、芳基或雜芳基。
應了解，在連續使用兩個或多個基團以限定連接到 一個結構的取 代基的情況下，將第一命名的基團認為是末端，而將最後命名的基團 認為是連接到所述結構。因此，例如，芳基烷基通過烷基連接到所述 結構。
本發明的化合物可具有一個或多個不對稱中心；因此，此化合物
作為單獨(R)-或(S)-立體異構體或其混合物製備。除非另外指明，說明
書和權利要求書中特定化合物的描述和命名旨在包括其兩種單獨的 對映異構體、非對映異構體混合物、外消旋或其他化合物。因此，本 發明也包括所有此類異構體，包括式I的非對映異構體混合物、純非 對映異構體和純對映異構體。可通過本領域的技術人員已知的方法， 例如色譜法或分級結晶，根據物理化學差異將非對映異構體混合物分 離成單獨的非對映異構體。可將對映異構體分離，可通過與適合光學 活性化合物(例如，醇)反應將^f映異構體混合物轉化成非對映異構體 混合物，分離非對映異構體並將單獨非對映異構體轉化(例如水解)成 相應的純對映異構體。對映異構體也可用手性HPLC柱分離。測定立 體化學和分離立體異構體的方法在本領域已知(討論於"Advanced Organic Chemistry"， 4th edition, Chapter 4，丄March, John Wiley and Sons, New York, 1992)。
在本文所示結構中，在未^見定任何特定手性原子的立體化學時， 則指所有立體異構體，並且所有立體異構體均作為本發明的化合物被 包含。在由表示特定構型的實楔線或虛線指定立體化學結構時，也就 如此糹見定和確定了這種立體異構體。單一立體異構體，例如實質不含其立體異構體的對映異構體，可 通過用光學活性拆分劑用一種方法(如形成非對映異構體)拆分外消旋
混合物獲得(Eliel， E. and Wilen ， S. Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons， Inc., New York, 1994; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr.， 113(3):283-302)。本發明的手性化合物 的外消旋混合物可由任何適合方法分離，包括(l)用手性化合物形成 離子、非對映異構鹽，並由分級結晶或其他方法分離；(2)用手性衍生 化劑形成非對映異構化合物，分離非對映異構體，並轉化成純立體異 構體；和(3)直接在手性條件下分離實質純或濃化的立體異構體。參閱 Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology, Irving W. Warner, Ed.， Marcel Dekker, Inc., New York(1993)。
在方法(l)下，形成非對映異構鹽可使對映異構純手性鹼(如二甲 氧基馬錢子鹼、奎寧、麻黃鹼、馬錢子鹼、a-甲基-P-苯基乙基胺(苯異 丙胺)等)與攜帶酸官能團(如羧酸和磺酸)的不對稱化合物反應。可通過 分級結晶或離子色譜誘導非對映異構鹽分離。為了分離氨基化合物的 光學異構體，加入手性羧酸或^黃酸(如樟腦石黃酸、酒石酸、扁桃酸或乳 酸)可使非對映異構鹽形成。
或者，通過方法(2)，使待拆分基質與手性化合物的一種對映異構 體反應生成非對映異構對(E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994， p. 322)。形成非對映異
生物)反應，隨後分離非對映異構體，並水解得到純或濃化對映異構體。 測定光學純度的一種方法包括在鹼存在下製備外消旋混合物的手性 酉旨，例如薄荷酯(如(-)氯甲酸薄荷酯)或Mosher酯，乙酸a-曱氧基-a-(三 氟甲基)苯基酯(Jacob III, (1982) J. Org. Chem. 47:4165)，並分析存在 兩種阻轉異構對映異構體或非對映異構體的NMR譜。阻轉異構體化 合物的穩定非對映異構體可按照分離阻轉異構萘基異喹啉的方法通 過正相和反相色譜法(WO 96/15111)分離。利用方法(3),可用手性固定相由色譜分離兩種對映異構體的外消旋混合物(Chiral Liquid Chromatography (1989) W.丄Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, (1990) J. of Chromatogr. 513:375-378)。利用區分具有不對稱 碳原子的其他手性分子的方法，如旋光和圓二色性，可區分濃化或純 化的對映異構體。
除了式I的化合物外，本發明還包括此類化合物的溶劑化物、藥 學上可接受的前藥、藥物活性的代謝物、溶劑化物和藥學上可接受的 鹽。
術語"溶劑化物"是指一種分子與 一種或多種溶劑分子的聚集物。 "藥學上可接受的前藥"是可在生理條件下或通過溶劑分解轉化成 特定化合物或轉化成此類化合物的藥學上可接受的鹽的化合物。前藥 包括其中胺基酸殘基或兩種或多種(例如二、三或四種)胺基酸殘基的 多肽鏈通過醯胺鍵或酯鍵共價結合到本發明化合物的游離氨基、鞋基 或羧酸基團的化合物。胺基酸殘基包括但不限於一般由三字母符號指 定的20種天然胺基酸，也包4舌磷酸絲氨酸、磷酸蘇氨酸、磷酸酪氨 酸、4-羥基月甫氨酸、羥基賴氨酸、demosine、 isodemosine、 y-羧基穀氨 酸鹽、馬尿酸、八氫吲哚-2-甲酸、抑胃酶氨酸、1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸、青黴胺、鳥氨酸、3-曱基組氨酸、正纈氨酸、p-丙氨酸、"氨基 丁酸、瓜氨酸、高胱氨酸、高絲氨酸、曱基丙氨酸、對苯曱醯基苯基 丙氨酸、苯基甘氨酸、炔丙基甘氨酸、肌氨酸、蛋氨酸碸和叔丁基甘 氨酸。本發明的前藥的具體實例包括共價結合到磷酸鹽殘基或纈氨酸 殘基的式I的化合物。
前藥的其他類型也包含在內。例如，可將游離羧基衍生化為醯胺 或烷基酯。作為另一實例，可將含游離羥基的本發明的化合物衍生化 為前藥，可通過使羥基轉化成如但不限於磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲 基氨基乙酸酯或磷醯基氧基曱氧基羰基的基團來衍生，如Advanced Drug Delivery Reviews, (1996)19:115所概述。也可包括羥基和氨基的 氨基甲酸酯前藥，羥基的碳酸酯前藥、磺酸酯和硫酸酯。也包括羥基衍生化為(醯基氧基)甲基醚和(醯基氧基)乙基醚，其中醯基可以為任選 用包括但不限於醚、胺和羧酸官能團的基團取代的烷基酯，或者醯基
為上述胺基酸酯。此類型前藥描述於J.Med. Chem., (1996)39:10。更 具體的實例包括用以下基團代替醇基團的氫原子，如(d-C6)烷醯基氧 基甲基、l-((C! -Q)烷醯基氧基)乙基、l-甲基-l-((C廣C6)烷醯基氧基) 乙基、(C廣C6)烷氧基羰基氧基甲基、、N-(C廣C6)烷氧基羰基氨基甲基、 琥珀醯基、(d-C6)烷醯基、a-氨基(d-Ct)烷醯基、芳基醯基和a-氨基 醯基或a-氬基醯基-a-氨基醯基，其中各a-氨基醯基獨立選自天然L-胺基酸、P(0)(OH)2、 ^(0)(0(。1-<:6)烷基)2或糖基(基團由半縮醛型糖 類去掉羥基產生)。
可使游離胺衍生為醯胺、》黃醯胺或膦醯胺。所有這些前藥部分可 結合包括但不限於醚、胺和羧酸官能團的基團。例如，前藥可通過用 以下基團代替胺基團中的氫原子生成，如R-羰基、RO-羰基、NRR'-羰基(其中R和R'分別獨立為(CVdo)烷基、(C3-C7)環烷基、節基，或 者R-羰基為天然a-氨基醯基或天然a-氨基醯基-天然a-氨基醯基)、 -C(OH)C(O)OY(其中Y為H、 (C廣C6)烷基或苄基)、-C(OYo)Y"其中 Y0為(C廣Ct)烷基，Y,為(C廣Q0烷基、羧基(C廣C6)烷基、氨基(C廣C4) 烷基或單-N-或二-N,N-(C廣C6)烷基氨基烷基)、-C(Y2)Y3(其中丫2為H 或甲基、Y3為單-N-或二-N,N-(d-C6)烷基氨基)、嗎啉代、哌啶-l-基或 p比咯烷-基。
對於前藥衍生物的其他實例，參閱，例如，a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard， (Elsevier, 1985)和Methods in Enzymology, Vol. 42， p. 309-396， edited by K. Widder， et al.(Academic Press, 1985); b) A Textbook of Drug Design and Development ， edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs" by H. Bundgaard p. 113-191(1991); c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, (1992); 8:1-38 d) H. Bundgaard， et al.， Journal of Pharmaceutical Sciences, (1988) 77:285;禾口 e) N. Kakeya,etal.， Chem. Pharm. Bull, (1984)32:692，各文獻明確通過引用結合到 本文中。
"藥物活性代謝物"為通過指定化合物或其鹽在體內代謝產生的藥 理學活性產物。化合物的代謝物可用本領域已知的常規技術鑑定，其 活性用如本文所述的檢驗方法測定。
化合物的前藥和活性代謝物可用本領域已知的常規技術鑑定。
除非另外指明，"藥學上可接受的鹽"包括保持指定化合物的游離 酸和鹼的生物學效力且不在生物學上或在其他方面不合乎需要的鹽。 本發明的化合物可具有足夠酸性、足夠鹼性或兩種官能團，因此可與 多種無機或有機鹼和無機和有機酸的任何一種反應生成藥學上可接 受的鹽。藥學上可接受的鹽的實例包括由本發明的化合物與無機或有 機酸或無機鹼反應製備的鹽，這些鹽包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫 鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏 磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸 酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸酸、丙 炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬 酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-l,4-二酸鹽、己炔-l,6-二酸鹽、苯曱酸鹽、氯 苯甲酸鹽、曱基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯曱酸鹽、甲氧基 苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯基乙酸鹽、苯 基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、"羥基丁酸鹽、乙醇酸 鹽、酒石酸鹽、曱磺酸鹽、丙石黃酸鹽、萘-l-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽和扁 桃酸鹽。由於本發明的單一化合物可包括多於一個酸性或鹼性部分， 因此本發明的化合物可包括單一化合物中的單、二或三鹽。
如果本發明的化合物為鹼，則可由本領域可利用的任何適合方法 製備所需的藥學上可接受的鹽，例如用酸性化合物處理游離鹼，尤其 用無機酸處理，如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者用有機 酸處理，如乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁^)匕酸、富馬酸、丙二酸、丙酮 酸、草酸、乙醇酸、水楊酸，吡喃糖苷酸(pyranosidylacid)如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、a-輕基酸如檸檬酸或酒石酸、胺基酸如天冬氨酸或谷 氨酸、芳族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如對甲苯磺酸或乙磺酸等。
如果本發明的化合物為酸，則可由任何適合方法製備所需的藥學 上可接受的鹽，例如用無機或有機鹼處理游離酸。適合的無機鹽的實 例包括用鹼金屬和鹼土金屬(如鋰、鈉、鉀、鋇和4丐)生成的鹽。適合 的有機鹼鹽的實例包括例如銨、二千基銨、千基銨、2-羥基乙基銨、 雙(2-羥基乙基)銨、苯基乙基千基胺、二節基乙二胺等鹽。酸性部分 的其他鹽包括例如用普魯卡因、奎寧和N-甲基葡糖胺生成的鹽與用鹼 性胺基酸如甘氨酸、烏氨酸、組氨酸、苯基甘氨酸、賴氨酸和精氨酸 生成的鹽。
本發明還提供不必為藥學上可接受的鹽但可作為中間體製備和/ 或純化式I的化合物和/或分離式I化合物的對映異構體的式I化合物 的鹽。
利用本領域可用技術且使用易得原料，可用如方案I所述的反應
路線和合成方案製備本發明的化合物，或者根據實施例和圖1-4所述 的方法或者使用本領域已知的方法合成本發明的化合物。formula see original document page 22方案I在方案I中，在70-90°C DMF中利用或不利用吡咯烷(J. Org. Chem.， (1986), 51(26)， 5106-5110),通過用二甲基甲醯胺縮二曱醇處 理從式I的烷基芳烴製備式II的化合物。可在室溫或接近室溫的 THF/pH 7.2磷酸緩沖液中用Nal04使粗中間體(未顯示)分裂成式II的 醛。在70-110。C(l-16小時)溫度甲苯中用磷葉立德使式II的醛烯化， 以得到式III的化合物。可在乙酸中用鐵粉由式III的化合物製備式IV 的化合物。可使反應在9(TC左右進行約3-14小時。
應注意到，製備本文所述式I的化合物可能需要保護遠處的官能 團。保護需要根據官能性質和製備方法所用條件而變化，並且可很容 易由本領域的技術人員確定。這種保護/脫保護方法為本領域的技術人 員所熟悉。
本發明的化合物可用於多種應用。例如，在某些方面，本發明提 供用於調節TLR7-和/或TLR8-介導的信號傳導的方法。在需要響應適 合TLR7和/或TLR8配體或TLR7和/或TLR8信號傳導激動劑改變 TLR7-和/或TLR8-介導的信號傳導時，本發明的方法有用。
本文所用術語"TLR7和/或TLR8配體"、"用於TLR7和/或TLR8 的配體"和"TLR7和/或TLR8信號傳導激動劑"是指通過TIR8域以外 的TLR7和/或TLR8域直接或間接與TLR7和/或TLR8作用且誘導 TLR7-和/或TLR8-介導的信號傳導的式I化合物以外的分子。在某些 實施方案中，TLR7和/或TLR8配體為天然配體，即天然發現的TLR7 和/或TLR8配體。在某些實施方案中，TLR7和/或TLR8配體是指TLR7 和/或TLR8天然配體以外的分子，例如由人類活動製備的分子。
本文所用與TLR7和/或TLR8受體相關的術語"調節，，是指介導患 者藥效反應，可通過(i)抑制或激活受體，或(ii)直接或間接影響受體活 性的正常調節。調節受體活性的化合物包括激動劑、拮抗劑、混合激 動劑/拮抗劑以及直接或間接影響受體活性調節的化合物。
術語"激動劑"是指與受體(例如TLR)組合能夠產生細胞反應的化 合物。激動劑可以為直接結合到受體的配體。或者，通過例如(a)與直接結合到受體的另一種分子形成複合體或(b)另外改變另一種化合物 以便另一種化合物直接結合到所述受體，激動劑可與受體間接結合。 可將激動劑稱為特定TLR的激動劑(例如TLR7激動劑和/或TLR8激 動劑)。
本文所用術語"拮抗劑"是指與激動劑或逆激動劑竟爭結合到受 體，從而阻止激動劑或逆激動劑作用於受體的化合物。然而，拮抗劑 對組成性受體活性沒有作用。更具體地講，拮抗劑是分別在TLR7或 TLR8受體處抑制TLR7或TLR8活性的化合物。
"抑制"是指生物活性可測降低。因此，在本文中"抑制"或"抑制作 用"可以為正常活性水平的百分率。
在本發明的一個方面，治療可由調節患者TLR7-和/或TLR8-介導 的細胞活性治療的病症或疾病的方法包括給予所述患者有效治療所 述病症或疾病的量的式I的組合物。術語"TLR7-和/或TLR8-介導的" 是指由TLR7和/或TLR8功能產生的生物或生物化學活性。
可由本發明方法治療的病症和疾病包括但不限於癌症、免疫複合 物相關性疾病、炎性疾病、免疫缺陷、移植排斥、移植物抗宿主疾病、 過敏、哮喘、感染及膿毒。更具體地講，用於治療包括自身免疫、炎 症、過敏、譯喘、移植排斥和GvHD的病症的方法一般利用響應適合 TLR7和/或TLR8配體或信號傳導激動劑抑制TLR7-和/或TLR8-介導 的信號傳導的式I的化合物。或者，用於治療包括感染、癌症和免疫 缺陷的疾病的方法一般利用響應適合TLR7和/或TLR8配體增強 TLR7-和/或TLR8-介導的信號傳導的式I的化合物。在某些情況下， 可用組合物響應TLR7和/或TLR8配體或信號傳導激動劑抑制或促進 TLR7-和/或TLR8-介導的信號傳導。在其他情況下，可用組合物在患 者中抑制或促進TLR7-和/或TLR8-介導的免疫刺激。
除非另外指明，本文所用術語"治療"是指哺乳動物(如人)的疾病 病症的至少緩解，包括但不限於調節和/或抑制這些疾病病症，和/或 減輕這些術語適用的疾病病症或者此疾病或病症的一種或多種症狀。除非另外指明，本文所用術語"治療"是指以上定義的"治療"的治療行 為。
本文所用術語"自身免疫疾病"、"自身免疫病症"和"自身免疫"是 指免疫介導的對宿主組織或器官的急性或慢性傷害。該術語包括細胞 和抗體介導的自身免疫現象以及器官特異和器官非特異自身免疫。自
身免疫疾病包括胰島素依賴性糖尿病、類風溼性關節炎、系統性紅斑 狼瘡、多發性硬化、動脈硬化和炎性腸疾病。自身免疫疾病還包括但 不限於關節強硬性脊推炎、自身免疫溶血性貧血、貝赫切特症候群、 古德帕斯徹症候群、格雷夫斯病、急性熱病性多神經炎、橋本甲狀腺 炎、自發性血小板減少、重症"幾無力、惡性貧血、結節性多動脈炎、 多肌炎/皮膚肌炎、原發性膽道硬化、銀屑病、結節病、硬化性膽管炎、
斯耶格倫症候群、全身性硬化症(硬皮病和肢端硬皮症候群(CREST syndrome))、高安氏動脈炎(Takayssu，s arteritis)、顳動脈炎和韋格納肉 芽腫。自身免疫疾病也包括某些免疫複合物相關性疾病。
本文所用術語"癌"和"胂瘤"是指其中在患者中存在可測量量的宿 主起源的異常複製細胞的病症。癌可以是惡性癌或良性癌。癌或腫瘤 包括但不限於膽道癌、腦癌、乳腺癌、子宮頸癌、絨毛膜癌、結腸癌、 子宮內膜癌、食道癌、胃癌、上皮內瘤、白血病、淋巴瘤、肝癌、肺 癌(例如，小細胞和非小細胞)、黑素瘤、成神經細胞瘤、口腔癌、卵 巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直腸癌、腎癌、肉瘤、皮膚癌、睪丸癌、 甲狀腺癌以及其他癌和肉瘤。癌可以為原發性或轉移性。
本文所用術語"免疫複合物相關性疾病"是指任何具有免疫複合物 (包含抗體和由抗體特異結合的抗原的任何綴合物)產生和/或組織沉積 特徵的疾病，包括但不限於系統性紅斑狼瘡(SLE)和相關結締組織疾 病、類風溼性關節炎、C肝和B肝相關性免疫複合物疾病(例如，冷球 蛋白血病)、貝赫切特症候群、自身免疫腎小球腎炎和與存在LDL/抗 -LDL免疫複合物相關的血管病變。本文所用術語"免疫缺陷"是指一種疾病或病症，其中患者的免疫 系統不以正常能力起作用，或者有用提高患者的免疫反應例如以消除 患者的腫瘤或癌(例如，腦、肺(例如小細胞和非小細胞)、卯巢、乳腺、 前列腺、結腸的腫瘤以及其他癌和肉瘤)或感染。免疫缺陷可以是獲得 的，或者可以是先天的。
本文所用術語"移植排斥"是指由宿主以外的源產生的對組織或器 官的免疫介導的超急性、急性或慢性傷害。因此，該術語包括細胞和 抗體介導的排斥以及同種異體移植和異種移植兩者的排斥。
"移植物抗宿主疾病"(GvHD)是移植的骨髓對抗患者自身組織的 反應。GVHD最常見於血髓給體與患者不相關或者給體與患者相關但 不完全匹配的情況。GVHD有兩種形式 一種早期形式被稱為急性 GVHD，在移植後不久出現白細胞增多時發生， 一種為晚期形式，被 稱為慢性GVHD。
Th2介導的特應性疾病包括但不限於遺傳過敏性皮炎或特應性溼 滲、嗜曙紅細胞增多、哞喘、過敏、過敏性鼻炎和奧曼症候群(Ommen，s syndrome)。
本文所用術語"過敏"是指只寸物質(過敏原)的獲得的過敏性。過敏 病症包括溼滲、過敏性鼻炎或鼻炎、花粉症、哞喘、蕁麻滲和食物過 敏及其他特應性病症。
本文所用術語"啤喘"是指一種呼吸系統疾病，其特點是炎症、呼 吸道變窄並且呼吸道對吸入劑的反應性增加。哮喘是經常性的，雖然 不排除與特應性或過敏症狀有耳關係。例如，哞喘可能由暴露於過敏原、 暴露於冷空氣、呼吸感染和活動突發。
本文所用術語"感染"和相當術語"感染性疾病"是指其中在患者血 液或正常無菌組織或正常無菌腔室中存在可測量量的感染性生物體 或感染物的病症。感染性生物體和感染物包括病毒、細菌、真菌和寄 生蟲。此術語包括急性和慢性感染及膿毒。本文所用術語"膿毒，，是指在血液(敗血症)或其他身體組織中存在 細菌(菌血症)或其他感染性生物體或其毒素。
本發明還提供在為有此類疾病或病症的哺乳動物(例如人)治療上 述疾病或病症中用作藥物的式I的化合物或其代謝物、溶劑化物、互 變異構體或藥學上可接受的前藥或鹽。本發明還提供式I的化合物或 其代謝物、溶劑化物、互變異構體或藥學上可接受的前藥或鹽在製備 藥物中的用途，所述藥物用於為有此類疾病的哺乳動物(例如人)治療 上述疾病和病症。
本發明還包括含式I的化合物的藥物組合物和治療可通過調節
TLR7-和/或TLR8-介導的細胞活性治療的病症和疾病的方法，所述方 法通過給予需要的患者一種包含式I的化合物或其代謝物、溶劑化物、 互變異構體或藥學上可接受的前藥或鹽的藥物組合物進行。
為了用式I的化合物或其糹容劑化物、代謝物、互變異構體或藥學 上可接受的前藥或鹽治病性治療(包括預防性治療)包括人的哺乳動 物， 一般根據標準藥物規範配製成藥物組合物。本發明的這一方面提 供一種藥物組合物，該組合物包含如前所述的式I的化合物或其溶劑 化物、代謝物、互變異構體、藥學上可接受的前藥或鹽以及藥學上可 接受的稀釋劑或載體。
為了製備本發明的藥物組合物，將治療或預防有效量的式I的化 合物或其溶劑化物、代謝物、互變異構體或藥學上可接受的前藥或鹽 (單獨或與本文所述其他治療劑一起)與例如藥學上可接受的載體根據 常規藥物混合技術緊密混合，以產生一定劑量。載體可根據給藥(例如 口服或腸胃外)所需的製劑形式採取多種形式。適合載體的實例包括任 何及所有溶劑、分散介質、佐劑、包衣料、抗菌和抗真菌劑、等滲和 吸收延遲劑、甜味劑、穩定劑(用於促進長期儲存)、乳化劑、粘合劑、 增稠劑、鹽、防腐劑、溶劑、分散介質、包衣料、抗菌和抗真菌劑、 等滲和吸收延遲劑、增香劑及為了製備特定治療組合物所需的混雜物 質，如緩衝劑和吸收劑。此類介質和劑與藥物活性物質的使用在本領域是熟知的。除了常規介質或劑與式I的化合物不相容外，其在治療 組合物和製劑中的使用均為本發明所包含。也可將輔助活性成分加入 本文所述的組合物和製劑中。
本發明的組合物可以為適用於口服使用(例如，作為片劑、錠劑、 硬或軟膠嚢、水性或油性混懸劑、乳劑、可分散粉劑或顆粒劑、糖漿 劑或酏劑)、局部使用(例如，作為乳膏劑、軟膏劑、凝膠或水性或油 性溶液或混懸劑)、吸入給藥(例如，作為精細粉劑或液體氣霧劑)、吹 入給藥(例如，作為精細粉劑)或腸胃外給藥(例如，作為無菌水或油溶 液用於靜脈、皮下或肌內給藥或作為栓劑用於直腸給藥)的形式。例如， 口服使用的組合物可包含例如一種或多種著色劑、甜味劑、增香劑和 /或防腐劑。
適用於片劑製劑的藥學上可接受的賦形劑包括例如惰性稀釋劑，
如乳糖、碳酸鈉、磷酸釣或碳酸4丐；粒化劑和崩解劑，如玉米澱粉或 藻酸(algenic acid);粘合劑，如澱粉；潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸 或滑石粉；防腐劑，如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯；和抗氧化劑，如抗 壞血酸。片劑可不包衣，或者用本領域熟知的常規包衣劑和方法包衣， 以改進其崩解和隨之活性成分在胃腸道內的吸收，或者改善其穩定性 和/或外觀。
適合口服使用的組合物可以為其中活性成分與惰性固體稀釋劑 (例如碳酸鈣、磷酸鈣或高呤土)混合的硬明膠膠嚢的形式，或者作為 其中活性成分與水或油(如花生油、液體石蠟或橄欖油)混合的軟明膠膠嚢。
含水混懸劑 一般包含細粉狀活性成分與 一種或多種懸浮劑，如羧 曱基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基曱基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡 咯烷酮、黃芪膠和阿拉伯膠；分散劑或溼潤劑，如印磷脂或環氧烷與 脂肪酸的縮合產物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、或環氧乙烷與長鏈脂肪 醇的縮合產物(例如十七(亞乙氧基)鯨蠟醇 (heptadecaethyleneoxycetanol))、或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物(例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯)、或環氧乙烷與 衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物(例如聚乙烯脫水山梨糖 醇單油酸酯)。含水混懸劑也可包含一種或多種防腐劑(如對羥基苯甲 酸乙酯或丙酯)、抗氧化劑(如抗壞血酸)、著色劑、增香劑和/或甜味劑 (如蔗糖、糖精或阿斯巴甜)。
油性混懸劑可通過在植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油) 或在礦物油(如液體石蠟)中懸浮活性成分配製。油性混懸劑也可包含 增稠劑，如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。也可加入如上所述的甜味劑和增 香劑以提供可口的口服製劑。這些組合物可通過加入抗氧化劑如抗壞 血酸防腐。
適合通過加水製備含水混懸劑的可分散粉末和顆粒一般包含活 性成分與分散劑或溼潤劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。適合的分散 劑或溼潤劑和懸浮劑由以上已>|是到的那些作為示例。也可存在其他賦 形劑，如甜味劑、增香劑和著色劑。
本發明的藥物組合物也可以為水包油型乳劑形式。油相可以為植 物油(如橄欖油或花生油)或礦物油(例如液體石蠟)或任何這些油的混 合物。適合的乳化劑可以為例如天然膠(如阿拉伯膠或黃艮膠)、天然 磷脂(如大豆、卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如脫 水山梨糖醇單油酸酯)和所述偏酯與環氧乙烷的縮合產物(如聚氧乙烯 脫水山梨糖醇單油酸酯)。乳劑也可包含甜味劑、增香劑和防腐劑。
糖漿劑和酏劑可用甜味劑如甘油、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜 或蔗糖配製，並且也可包含緩和劑、防腐劑、增香劑和/或著色劑。
藥物組合物也可以為無菌可注射的水性或油性混懸劑的形式，可 根據已知方法用 一種或多種以上已提到的適合分散劑或溼潤劑和懸 浮劑配製。對於胃腸外製劑，載體通常包含無菌水、含水氯化鈉溶液、
1,3-丁二醇或任何其他適合的無毒胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑。可 包含幫助分散的其他成分。當然，在無菌水待用並且保持為無菌時，也必須使組合物和栽體無菌。也可以製備可注射混懸劑，在此情況下 可利用適合的液體載體、懸浮劑等。
可通過混合活性成分與適合的非刺激性賦形劑製備栓劑，所述賦 形劑在常溫為固體，但在直腸溫度為液體，因此在直腸中將融化釋放 藥物。適合的賦形劑包括例如可可豆脂和聚乙二醇。
局部用藥製劑，如乳膏劑、軟膏劑、凝膠和水性或油性溶液或混 懸劑， 一般用本領域熟知的常》見方法配製活性成分與常規局部用藥可 接受的媒劑或稀釋劑獲得。
由吹入給藥的組合物可以為包含例如30pm或更小平均直徑的顆 粒的精細粉末劑型，粉末可自身包含單獨活性成分或用 一種或多種生 理可接受的載體(如乳糖)稀釋。然後，可方便地將用於吹入的粉末保 持在包含例如l-50mg活性成分的嚢中供渦輪吸入器使用，如用於已 知劑色甘酸鈉的吹入。
用於吸入給藥的組合物可以為常規加壓氣霧劑的形式，這種形式 布置成將活性成分分散為含微細固體或液體微滴的氣霧劑。可使用常 規氣霧劑拋射劑，如揮發性氟化烴或烴，並且可很方便地將氣霧劑裝 置布置成能夠分散計量活性成分。
用於透皮給藥的組合物可以為本領域的技術人員熟知的透皮皮 膚貼劑形式。
其他遞藥系統可包括定時釋藥、延遲釋藥或緩釋遞藥系統。此類 系統可避免化合物重複給藥，為患者和醫生增加便利。這些遞藥系統 的很多類型可以利用，並且為本領域的技術人員所熟悉。它們包括聚 合物基系統，如聚(丙交酯-乙交酯)、共聚草酸酯、聚己內酯、聚酯醯 胺、聚原酸酯、聚羥基丁酸和聚酐。含藥物的前述聚合物的微嚢描述 於例如美國專利5,075,109中。遞藥系統也可包括非聚合物系統，這 些系統為脂類，包括甾醇(如膽甾醇)、膽甾醇酯和脂肪酸或中性脂 肪如甘油單酯、二酯和三酯；水凝膠釋藥系統；矽橡膠系統；肽基系 統；蠟包衣料；利用常規粘合劑和賦形劑的壓製片劑；部分融合的植
30入物等。具體實例包括但不限於(a)其中本發明的劑以基質內形式包 含的腐蝕系統，如美國專利4,452,775、 4,675,189和5，736,152所述， 和(b)其中活性組分以控制速率從聚合物滲透的擴散系統，如美國專利 3,854,480、 5,133,974和5,407,686所述。此外可使用基於泵的硬體遞 藥系統，其中一些適用於植入。
關於製劑的其他資料，參見 Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Volume 5， Chapter 25.2， Pergamon Press 1990，此文獻明確通過引用結合到本文 中。
與 一種或多種賦形劑組合製備單一劑型的本發明化合物的量當 然要根據要治療的患者、疾病或病症的嚴重性、給藥速率、化合物的 處置和開方醫生的判斷變化。然而，在單劑量或分開劑量中，有效劑 量為約0.001至約100mg/kg體重/天，例如約0.5至約35mg/kg體重/ 天。對於70kg的人，這將是約0.0035至2.5g/天，例如約0.05至約 2.5g/天。在某些情況下，低於前述範圍下限的劑量可能足夠，而在其 他情況下，可使用更大量劑量而不產生任何有害副作用，其條件為首 先將此較大劑量分成供一天給藥的數個小劑量。關於給藥途徑和劑量 方案的其4也資泮+， 參見Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Volume 5， Chapter 25.3, Pergamon Press 1990，此文獻明確通過引用結合到本文中。
根據熟知的醫學原理，用於治療或預防的式I化合物的劑量大小 當然要根據病症的性質和嚴重性、動物或患者的年齡和性別以及給藥 途徑而變化。應了解，對於任^T特定患者的具體劑量和給藥頻率可以 變化，並且取決於多種因素，包括具體式I化合物的活性、物種、患 者的年齡、體重， 一般健康狀況、性別和飲食、給藥方式和時間、排 洩率、藥物組合以及特定病症的嚴重性，然而可由本領域的^支術人員 按常規確定。在一些實施方案中，式I的化合物可與另一種治療劑組合("組合 治療")給予個體患者(例如，在同一製劑或在單獨製劑中)。式I的化合 物可與另一種治療劑混合給藥，或者可在單獨的製劑中給藥。當在單
獨的製劑中給藥時，式I的化合物與另一種治療劑可基本同時或順序 給藥。
除了本發明的化合物外，這種組合治療可包括常規手術或放射治
療或化學治療。此類化學治療可包括一種或多種以下抗腫瘤劑種類 (i)抗增殖活性/抗腫瘤藥物及其組合；(ii)細胞生長抑制劑；(iii)癌細胞 侵入抑制劑；(iv)生長因子功能抑制劑；(v)抗血管形成劑；(vi)血管損 傷劑；(vii)反義治療藥；(viii)基因治療劑；(ix)幹擾素；和(x)免疫治療劑。
可與題述方法中式I化合物組合給藥的用於治療呼吸疾病的治療 劑包括但不限於P-腎上腺素能藥物，包括支氣管擴張藥，包括沙丁胺 醇、硫酸異丙腎上腺素、硫酸奧西那林、硫酸特布他林、乙酸吡布特 羅和沙美特羅、福莫特羅；類固醇，包括丙酸倍氯米松、氟尼縮松、 氟替卡松、布地奈德和曲安奈德。與治療呼吸疾病結合使用的抗炎藥 物包括類固醇，如丙酸倍氯米松、曲安奈德、氟尼縮松和氟替卡松。 其他抗炎藥物包括色甘酸鹽，如色甘酸二鈉。獲準成為支氣管擴張藥 的其他呼吸藥物包括抗膽鹼能藥，包括異丙託溴銨。抗組胺藥包括但 不限於苯海拉明、卡比沙明、氯馬斯汀、茶苯海明、美吡拉敏、曲吡 那敏、氯苯那敏、溴苯那敏、羥嗪、賽克力*、美克洛，秦、氯環力嗪、 異丙溱、多西拉敏、氯雷他定和特非那定。具體的抗組胺藥包括氮卓 汀(rhinolast)(Astelin⑧)、claratyne(Claritin ) 、 claratyne D(Claritin D )、 telfast(Allegra )、 Zyrtec⑧和伯克納。
在一些實施方案中，式I的化合物與Y-千擾素(IFN-力、皮質甾類 如潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼龍、氫化可的松、可的松、地塞米松、 倍他米松等或其組合作為組合治療給藥用於治療間質性肺病，例如特 發性肺纖維變性。在一些實施方案中，式I的化合物與一種已知治療劑在組合療法
中給藥用於治療CF。治療CF使用的治療劑包括但不限於抗生素；抗 炎劑；DNAse(例如，重組人DNAse;阿法鏈道酶、氯化鉀和氯化鈉 溶液；阿法鏈道酶)；溶粘蛋白劑(例如，N-乙醯基半胱氨酸； MucomystTM; Mucosil );減充血劑；支氣管擴張劑(例如，茶鹼、異 丙託溴銨)等。
在本發明的另一個實施方案中提供包含用於治療上述疾病的物 質的製品或"試劑盒"。在一個實施方案中，試劑盒包括容器，容器包 含式I的組合物或其代謝物、溶劑化物、互變異構體或藥學上可接受 的鹽或前藥。在一個實施方案中，本發明提供用於治療TLR7-和/或 TLR8-介導的疾病的試劑盒。在另一個實施方案中，本發明提供適用 於可由選擇性調節患者免疫系統治療的病症或疾病的試劑盒。試劑盒 可進一步包含在容器上或與容器相關的標籤或包裝說明書。適合的容 器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包裝等。容器可用多種材料製成， 如玻璃或塑料。容器容納治療病症有效量的式I的化合物或其藥物制 劑，並且可具有無菌入口(例如，容器可以為具有塞子的靜脈注射液袋 或瓶，塞子可被皮下注射針頭穿透)。標籤或包裝說明書標明用組合物 治療所選擇的病症。在一個實施方案中，標籤或包裝說明書標明可用 包含式I化合物的組合物例如治療可由調節TLR7-和/或TLR8-介導的 細胞活性治療的疾病。標籤或包裝說明書也可標明可用組合物治療其 他疾病。作為選擇或另外，試劑盒可進一步包含第二容器，第二容器 包含藥學上可接受的緩衝劑，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸鹽緩沖鹽 水、林格氏液和葡萄糖溶液。A人商業和用戶的觀點，可進一步包含其 他所需物質，包括其他緩沖劑、稀釋劑、濾器、針頭和注射器。
試劑盒還可包含式I化合物和(如果存在)第二藥物製劑的給藥說 明。例如，如果試劑盒包括含有式I化合物的第一組合物和第二藥物 製劑，則試劑盒還可以包含第一和第二藥物組合物同時、順序或單獨 給予需要的患者的說明。在另一個實施方案中，試劑盒適用於式I化合物的固體口服劑型 的遞藥，例如片劑或膠嚢。這種試劑盒包括例如一些單位劑量。這種 試劑盒可包括具有以預期使用順序導向的劑量的卡。這種試劑盒的實 例為"泡罩包裝"。泡罩包裝在包裝工業上熟知，並且廣泛用於包裝藥 物單位劑型。如果需要，可提供記憶幫助，例如，以數字、字母或其 他標誌形式，或者使用日程說明，指定其中能夠給予劑量的治療曰程 中的天數。
根據一個實施方案中，試劑盒包含(a)其中含有式I的化合物的第 一容器；和任選的(b)其中含有第二藥物製劑的第二容器，其中第二藥 物製劑包含第二化合物，第二化合物可有效治療可由選擇性調節 TLR7-和/或TLR8-介導的細胞活性治療的病症或疾病。作為選擇或另 外，試劑盒可進一步包含第三容器，第三容器包含藥學上可接受的緩 衝劑，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸鹽緩衝鹽水、林格氏液和葡萄糖 溶液。從商業和用戶的觀點，可進一步包含其他所需物質，包括其他 緩沖劑、稀釋劑、濾器、針頭和注射器。
在試劑盒包含式I化合物的藥物製劑和包含第二治療劑的第二制 劑的某些其他實施方案中，試劑盒可包含容納單獨製劑的容器，如分 開的瓶或分開的箔小包裝；然而，也可在單一不分開的容器中容納單 獨的組合物。通常，試劑盒包含單獨組分給藥的說明。在單獨組分以 不同劑型給藥(例如，口服和胃腸外)，以不同用藥間隔給藥時，或者 在處方醫生需要滴入組合的單獨組分時，試劑盒形式特別有利。
實施例
為說明本發明包含以下實施例。然而，應了解，這些實施例並不 限制本發明，只意味建議實施本發明的方法。本領域的技術人員應認 識到，可很容易地改變所述化學反應製備本發明的一些其他化合物，
通過對本領域技術人員顯而易見的修改，例如，適當保護幹擾基團，利用本領域已知的所述那些以外的其他適合試劑，和/或常規改變反應 條件，可成功地合成本發明的非示例性化合物。作為選擇，應認為本 文公開或本領域已知的其他反應也可用於製備本發明的其他化合物。 在下述實施例中，除非另外指明，所有溫度均為攝氏度。試劑購
自供應商，如Aldrich Chemical Company, Lancaster, TCI或Maybridge，
使用無需純化，除非另外指明。
下述反應一般在氮或氬正壓下或利用乾燥管(除非另外說明)在無 水溶劑中進行，反應燒瓶通常配有橡膠塞，用於通過注射器引入底物 和試劑。玻璃器亞經烘箱乾燥和/或加熱乾燥。
柱色譜在具有矽膠柱的Biotage系統(製造商Dyax Corporation) 或在氧化矽SepPak柱體(Waters)上進行。在以400MHz操作的Varian 儀器上記錄NMR語圖。'H NMR譜作為CDCl3溶液獲得(以卯m 報告)，用氯仿作為參比標準(7.2Sppm)。在報告峰多重性時，使用以 下略語s(單峰)、d(二重峰)、t(三重峰)、m(多重峰)、br(增寬)、dd(雙 二重峰)、dt(雙三重峰)。給出時，偶合常數以赫茲(Hz)報告。
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b氮雜草-4-甲酸乙酯
(7)
合成化合物(7)的反應方案顯示於圖1中。 步驟A:製備2，2，3，3，3-五氟丙酸鉀
將五氟丙酸(20.5g， 183mmol)緩慢加入KOtBu(29.9g, 183mmo1) 在乙醚(400mL)的0。C溶液中。30分鐘後，移去冰浴。在室溫4覺拌4
實施例1小時後，過濾懸浮體，並用乙醚(200mL)洗滌濾餅。使用前，在真空 下將細的白色固體放置16小時。
步驟B:製備l-甲基-4-(全氟乙基)苯(2):
所用方法自Syn. Comm.， (1988)18(9):965-972改造。將碘化銅 (129g， 679腿o1)、 l-碘-4-甲基苯(l)(74g, 339mmol)和2,2,3,3，3-五氟 丙酸鉀(120g, 594mmol)的混合物溶於DMF(500mL)，並且加熱到 12(TC經歷30分鐘，然後在160。C加熱4小時，隨後使混合物冷卻到 室溫。加入水(200mL)和乙醚(2O0mL),攪拌30分鐘後，將固體過濾， 並用乙醚洗滌。將相分離，有^/L層用鹽水/水(3x250mL)洗滌。將有機 層乾燥，濃縮得到深色油l-甲基-4-(全氟乙基)苯(66g， 92%)。
步驟C:製備l-甲基-2-硝基-4-(全氟乙基)苯(3):
利用硫酸和硝酸，由l-甲基-4-(全氟乙基)苯(1.95g， 9.28mmol)制 備，如EP 0418175所述(1.45g, 61%)。
步驟D:製備(E)-N，N-二甲基-!2-(2-硝基4-(全氟乙基)苯基)乙烯胺
(4):
將二曱基甲醯胺縮二甲醇(4.96g， 39.2mmol)加入到l-曱基-2-確基 畫4-(全氟乙基)苯(10.0g， 39.2mmol)和吡咯烷(2.79g， 39.2mmol)在曱苯 (250mL)的溶液中。將混合物加熱到回流16小時。冷卻到室溫後，將 混合物在真空下濃縮，並且將得到的油立即用於下一步反應。
步驟E:製備2-硝基-4-(全氟乙基)苯甲醛(5):
將NaI04(29.3g, 137.2mmol)加入到粗(E)隱N,N-二曱基-2-(2-硝基 -4-(全氟乙基)苯基)乙烯胺(12.2g， 39.2mmol)在THF(300mL)和pH 7.2 磷酸鹽緩衝液(300mL)的溶液中。2.5小時後，移出等分部分( 0.3mL)， 過濾並乾燥。此樣品的質子NMR表明反應完全。除去固體，用EtOAc 洗滌濾餅。將濾液用鹽水(2xl00mL)洗滌，乾燥並濃縮。濃縮物通過 快速層析(100%己烷到5。/。EtOAc)純化，得到2-硝基-4-(全氟乙基)苯甲 醛(5.4g, 52%)。步驟F:製備(E)-2-(氰基甲基)-3-(2-硝基-4-(全氟乙基)苯基)丙烯 酸乙酯(6):
將a-氰曱基乙氧羰亞乙基三苯基膦(8.55g, 22.1mmol)加入到2-硝 基-4-(全氟乙基)苯曱醛(5.4g, 20.1mmol)在曱苯(150mL)的溶液中。將 混合物加熱到75。C經歷30分鐘。使反應冷卻，並在真空下除去溶劑。 濃縮物通過快速層析(100。/。己烷到20。/。EtOAc)純化，得到(E)-2-(氰基 曱基)-3-(2-硝基-4-(全氟乙基)苯基)丙烯酸乙酯(6.0(^, 79%)。
步驟G:製備(lE，4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-笨並lbl氮雜草-4-甲酸乙酯(7):
將鐵粉(2.30g， 41.2mmol)加入到(E)-2-(氰基甲基)-3-(2-硝基-4-(全 氟乙基)苯基)丙烯酸乙酯P.60g， 6.87mmol)的溶液中。將混合物加熱 到90。C經歷5小時。冷卻後，在真空下除去乙酸，將所得半固體溶於 50%K2CO3(100mL^。 EtOAc(100mL)。過濾混合物以除去不溶物質， 並將相分離。水相用EtOAc(2xl00mL)萃取。將合併的有機相干燥， 濃縮。濃縮物通過快速層析(100。/。CH2Cl2到2。/。MeOH)純化，得到 (1E,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-曱酸乙酯(1.8g ， 74%)。
'H NMR (CDOb) 5 1.39 (t, 3H), 2.95 (s， 2H), 4.32 (q, 2H), 5.12 (br s， l-2H), 7.22-7.27 (m, 2H)， 7,47-7.51 (m, 2H), 7,80 (s, 1H).
圖2顯示合成通式(8)化合物的反應方案。如圖2所示製備以下醯胺。
實施例2
合成(1￡，4虹)-2-氨基- ^雙(2-甲氧基乙基)-8-(全氟乙基)-3H-苯 並[bj氮雜草4-甲醯胺(9)
37將三曱基鋁(0.34mL 2.0M甲苯溶液)力口入到雙(2-甲氧基乙基)胺
(92mg， 0.69mmol)(在DCE(3mL)中)。IO分鐘後，加入固體(lE,4E)-2-
氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-甲酸乙酯(80mg, 0.23mmo1)，將
容器密封並加熱到75。C經歷16-20小時。冷卻後，用飽和四水合酒石
酸鉀鈉鹽(2mL)猝滅反應，20分鐘後，使混合物在CH2Cl2(50mL)和鹽
水(50mL)之間分配。將相分離，水相用CH2Cl2(2x20mL)萃取。將合併
的有機相干燥，濃縮。粗物質通過製備TLC(2， 0.5mm板，用具有4-6
滴NR)OH的5-10。/。MeOH/CH2Cl2洗脫)純化。
'HNMR (CDC13) (s， 2H),
3.36 (s, 6H)， 3.55-3.74 (m, 8H), 6鄰(s, IH)， 7.20 (d 1H), 7.40 (d， 1H)' 7.39 (s' 1H).
實施例3
合成(lE，4E)-2-氨基-N，N-二乙基-8-(全氟乙基)-3H-笨並lb]氮雜草 -4-甲醯胺(10)
o
如實施例2所述製備化合物(9),得到17mg(21。/。)所需產物。
'HNMR (CDCI3) S 1.22-1.27 (邁，卿，1.78(s, 2H)， 3,49-3.56 (邊，4H), 5.04 (br s, lh)， 6.98 (s,舊)，7,20 (4 1H), 7.38 (4 1H), 7.48 (s,舊).
實施例4
合成(lE，4E)-2-M-8-(全氟乙基)-N，N-二丙基-3H-苯並[bl氮雜蕈 -4-甲醯胺(11)formula see original document page 39
如實施例2所述製備化合物(IO)，得到24mg(28。/。)所需產物。
'HNMR (CDCh) 8 0,85-0.94 (m,卿,1.61-1.71 (m， 4H), 2.77 (s， 2H)， 3.40-3.55 (m， 4H), 6.81 (s, 1H), 7,21 (4 1H), 7.37 (4 1H)， 7,48 (s, 1H).
圖3顯示合成通式(12)化合物的反應方案。如圖3所示製備以下 醯胺。
合成(lE，4E)-2-氨基-N-乙基-8-(全氟乙基)-3H-苯並bl氮雜草-4-曱 醯胺(15)
步驟A:製備(lE，4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(全氟乙基)-3H-笨並lb
氮雜草-4-甲酸乙酯(13):
將Boc肝(1.43g， 6.55mmol)加入到(lE,4E)-2-氨基-8-(全氟乙 基)-3H畫苯並[b〗氮雜草-4-甲酸乙酯(7)(2.28g ， 6.55mmo1)在 CH2Cl2(150mL)的溶液中。24小時後，將混合物濃縮，並通過快速層 析(100%己烷到10Q/。EtOAc)純化，得到(lE,4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(全 氟乙基)-3H-苯並[b]氮雜萆-4-甲酸乙酯(l.94g, 66%)。
步驟B:製備(lE，4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(全氟乙基)-3H-苯並lb
氮雜草-4-甲酸(14):
將LiOHH20 (42mg， 1.0Ommol)加入到(1E,4E)-2-(叔丁氧基羰 基)-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b]氮雜萆-4-甲酸乙酯在THF/H20(4:1,10mL)
實施例5的溶液中。4小時後，用10Q/o檸檬酸使混合物成酸性(pH 4)，並用 CH2Cl2(2xl00mL)萃取。將合併的有機相干燥，濃縮。所得物質無需 進一步純化即可使用。
步驟C:製備(lE，4E)-2-jL^-N-乙基-8-(全氟乙基)-3H-苯並lb]氮 雜萆-4-甲醯胺(15)
將鹽酸乙基胺(41mg ， 0.500mmo1)加入到三乙胺(76mg ， 0.750mmo1)、 PyBOP(143mg, 0.275mmol)和(lE,4E)陽2-(叔丁氧基羰 基)-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-甲酸(105mg， 0.250mmol)在 DMF(4mL)的溶液中。攪拌14小時後，使混合物在EtOAc(50mL)和鹽 水(100mL)之間分配。將相分離，有機層用水(3xl00mL)洗滌。將合併 的有機相干燥，濃縮。將粗殘餘物收入CH2CVTFA( 1:1， 50mL)中， 並且在室溫攪拌2小時。在真空下除去揮發物，使殘餘物在EtOAc和 10%Na2CO3(l:l, 100mL)之間分配。將相分離，水相用EtOAc(2x50mL) 萃取。將合併的有機相干燥，濃縮。濃縮物通過製備TLC(2， 0.5mm 板，用具有4-6滴NH4OH的10%MeOH/CH2Cl2洗脫)純化，得到 (化,4￡)-2-氨基-:^乙基-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b]氮雜蕈-4-曱醯胺(6.5 mg， 8%)。
H NMR (CDCl]) 5 1.26
(t, 2H), 2.94 (s, 2H)' 3,41-3.48 (邁,2H)， 5.15 (br s, 1H)，錫(br s， 1H), 7.16 (s， 1H)> 7.22 (d， 1H)' 7.42 (d, 1H)， 7.47 (s, 1H).
實施例6
合成(lE，4E)畫2-氨基-8陽(全氟乙基)-N畫丙基國3H-苯並bl氮雜草-4陽曱 醯胺(16)
formula see original document page 40用丙基胺代替鹽酸乙基胺，如實施例5所述製備化合物(16)，得 到16mg(45。/。)所需產物。
'HNMR(CDCl3)
5 0,99 (s,犯)，1.59-1,68 (in， 2H)， 2.94 (s, 2H)， 3,34-3.92 (m, 2H), 5.19 (br s， 1H), 6.14 (br s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7,42 (d, 1H)， 7.48 (s， 1H).
實施例7
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯並[bj氮雜蕈-4-甲酸 乙酯(24)
合成化合物(24)的反應方案顯示於圖4中。
步驟A:製備(E)-2-(4-溴-2-硝基苯基)-N，N-二甲基乙蜂胺(18):
將二曱基曱醯胺縮二曱醇(17.52g， 138.2mmol)加入到1-甲基-2-硝基-4-溴苯(17)(29.86g， 138.2mmol)在甲苯(200mL)的溶液中。將混合 物加熱到回流14小時。冷卻到室溫後，將混合物在真空下濃縮，並 且將得到的油立即用於下 一 步反應。
步驟B:製備4-溴-2-硝基苯甲醛(19):
將NaIO4(56.0g, 262mmol)加入到粗(E)-2-(4-溴-2匿硝基苯基)-N,N畫 二曱基乙烯胺(35.5g, 131mmol)在THF(300mL)和pH 7.2磷酸鹽緩沖 液(300mL)的溶液中。除去固體，用EtOAc(200mL)洗滌濾餅。將濾液 用鹽水(2xl00mL)洗滌，乾燥並濃縮。濃縮物通過快速層析(5。/。EtOAc/ 己烷到10。/。EtOAc/己烷)純化，得到4-溴-2-硝基苯曱醛(8.41g, 28%收率)。步驟C:製備(E)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-(氰基曱基)丙烯酸乙酯
(20) :
將a-氰甲基乙氧羰亞乙基三苯基膦(6.10g, 15.7mmol)加入到4-溴-2-硝基苯甲醛(3.45g， 15.0mmol)在甲苯(15mL)的溶液中。將混合物 加熱到75。C經歷16小時。使反應冷卻，並在真空下除去溶劑。濃縮 物通過快速層析(l00%己烷到20。/。EtOAc)純化，得到米色固體(E)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-(縣甲基)丙烯酸乙酯(2.25g， 44%收率)。
步驟D:製備(lE，4E)-2-氨基-8-溴-3H-苯並W氮雜蕈-4-甲酸乙酯
(21)
將鐵粉(1.10g, 19.0mmol)加入到(E)-3-(4-溴-2-硝基苯基)-2-(氰基 甲基)丙烯酸乙酯(1.00g， 2.9mmol)在乙酸(25mL)的溶液中。將混合物 加熱到90。C經歷5小時。冷卻後，在真空下除去乙酸，將所得半固體 溶於50%K2CO3(100mL>^ EtOAc(100mL)。過濾混合物以除去不溶物 質，並將相分離。水相用EtOAc(2xl00mL)萃取。將合併的有機相干 燥，濃縮。濃縮物通過快速層析(Biotage40m， 5%MeOH/CH2Cl2>Wt, 得到(lE,4E)-2-氨基-S-溴-3H-苯並[b]氮雜萆-4-曱酸乙酯(0.2g, 57%)。
步驟E:製備(1￡，4￡)-8-溴-2-(叔丁氧基羰基)-311-苯並[1)1氮雜草-4-甲酸乙酯(22):
將Boc酐(140mg，0.640mmol)加入到包含(lE,4E)-2-氨基-8-溴-3H曙 苯並[b]氮雜草-4-甲酸乙酯(198mg，0.640mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中。 在室溫攪拌溶液72小時。將反應物濃縮至幹，通過柱層析(Biotage 12m, 4:1己烷:EtOAc)純化，得到白色固體(lE,4E)-8-溴-2-(叔丁氧基 羰基)-3H-苯並[b]氮雜萆-4-曱酸乙酯(245mg, 94%收率)。
步驟F:製備(lE，4E):(叔丁氧基羰基)-S-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯 並bj氮雜草-4-甲酸乙酯(23):
將乙酸4巴(80.5mg , 0.358mmo1)力。入到含K3P04(938mg ， 4.42mmol) 、 4-(吡咯烷-1 -羰基)苯基硼酸(7 85mg ， 3.58mmol)和(1 E,4E)-8-溴-2-(叔丁氧基羰基)-3H-苯並[b]氮雜蕈-4-甲酸乙酯(489mg， U9mmo1)的乙醇溶液(15mL)中。將反應加熱到60。C經歷2小時，然後冷卻至室 溫，並濃縮至幹。棕色油通過製備LC板(100。/。EtOAc)純化，得到棕 褐色油(lE,4E)-2-(叔丁氧基羰基)-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯並[b]氮雜蕈 -4-甲酸乙酯(277mg, 46%收率)。
步驟G:製備(lE，4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-笨並lb]氮雜 草-4-甲酸乙酯(24)
用1:4 TFA:CH2C12溶液(4mL)稀釋(lE,4E)-2-(叔丁氧基羰 基)-8-(吡咯烷-1-羰基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-甲酸乙酯(110mg ， 0.218mmol)。將反應在室溫攪4f 1小時，然後用CH2C12##。有機相 用100/oK2CO3和鹽水(30mL)洗滌。CH2C12溶液經過Na2S04乾燥，過 濾，濃縮，得到黃色固體(lE,4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-3H-苯並[b] 氮雜草-4-曱酸乙酯(88mg， 81%收率)。
2H), 3.49-3.52 (ra, 2H)' 3.66-3.69 (m, 2H), 4.30-4.35 (邁,2H), 7.32 (d, 1H), 7.46-7.49 (叫 2H)， 7.60 (d， 2H) 7,67 (d， 2H)， 7,84 (s, 1H).
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3H-苯並[bl氮雜草-4-曱酸乙酯(25)
用4-( 曱氧基羰基)苯基硼酸代替4-(吡咯烷-l-羰基)苯基硼酸，根 據實施例7所述的一般步驟製備化合物(25),得到黃色固體(lE,4E)-2-氨基_8-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3H-苯並[b]氮雜萆-4-甲酸乙酯(17mg， 0.031mmo1， 54°/。收率)。
'H NMR (CDC13) S 1.39 & 3H), 1,88-1,99 (in, 4H)， 2,98 (s:
實施例8'HNMR (CDCl5) S 1.39 (t^ 3H)， 2.99 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 4.32 (q, 2H)， 7.33諷1H), 7.46-7.49 (m， 2H), 7.71卿2H)， 7,83 (s,舊)，8.09 (s, 1H), 8.11 (s, 1H).
實施例9
合成(lE，4E)-2-氨基-8-(4-(曱基氨基甲醯基)苯基)-3H-苯並[bl氮雜 蕈-4-曱酸乙酯(26)
用4-(曱基氨基甲醯基)苯基硼酸代替4-(吡咯烷-1 -羰基)苯基硼酸，
根據實施例7所述的一般步驟製備化合物(26)，得到黃色固體
(1 E,4E)-2-氨基-8-(4-(甲氧基羰基)苯基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-甲酸乙酯
(lmg, 0.031mmo1， 21%收率)。
'HNMR (CDCb) 5 1.39 (t， 3H), 2.98 (8， 2H), 3,06 (s, 3H)， 4,31-4.36 (q, 2H), 7,33 (dd, 1H), 7.46-7,49 (叫2H), 734 (d, 1H)， 7,47-7.52 (m， 3H), 7.32 (d， 2H) 7.83-7.85 (m, 3H).
實施例10
合成(1￡，4￡)-2-氨基-]\，]\-二丙基-8-(4-(吡咯烷-1-羰基)苯基)-311-苯並IW氮雜草-4-曱醯胺(27)通過與實施例2所述類似的方法用化合物(24)製備化合物(27)，得 到49mg(43。/。)所需化合物。
'HNMR(CDCl3)
S 0.93 (t, 6H)， 1.63-1.71 (m, 4H)， 1.89 (叫2H), 1.98 (m, 2H), 2,83 (s, 2H), 3.40-3,51 (m, 6〖1)， 3.67 (t, 2H), 6.83 (s, 1H), 7.3 (dd, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.49 " 1H), 7,64 (q, 4H).
用以下試驗測定本發明化合物的活性。
實施例11 HEK/TLR試驗
用不同濃度的化合物過夜培育人胚胎腎(HEK)細胞，這種細胞穩 定表達不同的人TLR基因，包括TLR7和TLR8以及NFkB-螢光素酶 報導基因。通過在650nm讀取吸光度確定誘導的螢光素酶的量。本發 明的化合物具有100pM或更小的MCso，其中MCst^皮定義為見到50% 最大誘導的濃度。
實施例12
TLR7和TLR8的PBMC試驗
用具有檸檬酸鈉的BD Vacutainer Cell Preparation Tube(細胞製備 管)從人血分離外周血單核細胞(PBMC)。細胞用化合物培育過夜。 TLR8活性通過由ELISA檢測上清液中TNFa的量測定。TLR7活性 通過由ELISA(R&D Systems)檢測上清液中IFNa的量測定。本發明的 化合物具有100^M或更小的MC5，其中MC5Q為見到50%最大誘導 的濃度。
前述說明僅為本發明原理的示例。此外，由於許多改進和變化對 本領域的技術人員顯而易見，因此本發明不限於上述確切結構和所示 方法。因此，所有適合改進及同等物應在以下權利要求限定的本發明 的範圍內。在說明書和以下權利要求中使用時，"包括"和"包含"旨在說明所 述特徵、整數、組分或步驟的存在，但它們不排除一個或多個其他特 徵、整數、組分、步驟或組的存在或加入。
權利要求
1.一種下式的化合物及其代謝物、溶劑化物、互變異構體和藥學上可接受的鹽其中Y為CF2CF3、CF2CF2R6或芳基或雜芳環，其中所述芳基和雜芳環用一個或多個獨立選自烯基、炔基、Br、CN、OH、NR6R7、C(＝O)R8、NR6SO2R7、(C1-C6烷基)氨基、R6OC(＝O)CH＝CH2-、SR6和SO2R6的基團取代，並且其中所述芳基和雜芳環任選另外用一個或多個獨立選自F、Cl、CF3、CF3O-、HCF2O-、烷基、雜烷基和ArO-的基團取代；R1、R3和R4獨立選自H、烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基任選用一個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基團取代，或者R3和R4與它們結合的原子一起形成飽和或部分不飽和的碳環，其中所述碳環任選用一個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基團取代；R2和R8獨立選自H、OR6、NR6R7、烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基任選用一個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基團取代；R5a、R5b和R5c獨立為H、F、Cl、Br、I、OMe、CH3，CH2F、CHF2或CF3；並且R6和R7獨立選自H、烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、雜烷基、環烷基、環烯基、雜環烷基、芳基和雜芳基任選用一個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基團取代，或者R6和R7與它們結合的原子一起形成飽和或部分不飽和的雜環，其中所述雜環任選用一個或多個獨立選自烷基、烯基、炔基、F、Cl、Br、I、CN、OR6、NR6R7、C(＝O)R6、C(＝O)OR6、OC(＝O)R6、C(＝O)NR6R7、(C1-C6烷基)氨基、CH3OCH2O-、R6OC(＝O)CH＝CH2-、NR6SO2R7、SR6和SO2R6的基團取代。
2. 權利要求1的化合物，其中112為OR6。
3. 權利要求2的化合物，其中W為烷基。
4. 權利要求3的化合物，其中116為乙基。
5. 權利要求1的化合物，其中112為NR6R7。
6. 權利要求5的化合物，其中116和117獨立為H、烷基或雜烷基。
7. 權利要求6的化合物，其中RS和R"獨立為H、乙基、丙基或 CH2CH2OCH3。
8. 權利要求1至7中任一項的化合物，其中Y為芳基。
9. 權利要求8的化合物，其中所述芳基用C(0)RS取代。
10. 權利要求9的化合物，其中RS為OR6、 ^6117或雜環烷基。
11. 權利要求10的化合物，其中116和117獨立選自H和烷基。
12. 權利要求10的化合物，其中Y為
13. 權利要求1至7中任一項的化合物，其中Y為CF2CF3。
14. 權利要求1至13中任一項的化合物，其中R1、 R3、 R4、 R5a、RSb和R"分別為氬。
15. 權利要求1的化合物，所述化合物選自(1 E,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-曱酸乙酯； (1E,4E)-2-氨基-N,N-雙(2-甲氧基乙基)-8-(全氟乙基)-3H-苯並[b] 氮雜蕈-4-曱醯胺；(lE,4E)-^氨基-N，N-二乙基-S-(全氟乙基)-!3H-苯並[b]氮雜萆-4-甲醯胺；(lE,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-N,N-二丙基-3H-苯並[b]氮雜草-4-曱醯胺；(1 &犯)_2-氨基-:^-乙基-8-(全氟乙基"H-苯並[b]氮雜萆-4-甲醯胺；(1 E,4E)-2-氨基-8-(全氟乙基)-N-丙基-3H-苯並[b]氮雜草-4-曱醯胺；(lE,4E)-2-氨基-8-(吡咯烷-l-羰基)-!3H-苯並[b]氮雜蕈-4-甲酸乙酯； (lE,4E)-2-氨基-8-(4-(曱氧基羰基)苯基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-曱酸 乙酯；(lE,4E)-2-氨基-8-(4-(甲基氨基甲醯基)苯基)-3H-苯並[b]氮雜草-4-曱酸乙酯；(lE,4E)-2-氨基-N,N-二丙基-8-(4-(吡咯烷-l-羰基)苯基)-3H-苯並[b] 氮雜草-4-甲醯胺；及其藥學上可接受的鹽。
16. —種用於治療TLR7-和/或TLR8-介導的病症的試劑盒，所迷 試劑盒包含a) 包含權利要求1至15中任一項的化合物的第一藥物組合物；和b) 任選的使用說明書。
17. 權利要求16的試劑盒，所述試劑盒進一步包含(c)第二藥物組 合物，其中所述第二藥物組合物包含用於治療TLR7-和/或TLR8-介導 的病症的第二化合物。
18. 權利要求17的試劑盒，所述試劑盒進一步包含用於對需要的 患者同時、順序或單獨給予所迷第一藥物組合物和笫二藥物組合物的 說明書。
19. 一種藥物組合物，所述組合物包含權利要求1至15中任一項 的化合物與藥學上可接受的稀釋劑或載體。
20. 權利要求1至15中任一項的化合物，所述化合物用作治療人 或動物的TLR7-和/或TLR8-介導的病症的藥物。
21. 權利要求1至15中任一項的化合物用於製備藥物的用途，所 述藥物用於治療人或動物的異常細胞生長病症。
22. —種治療TLR7-和/或TLR8-介導的病症的方法，所述方法包 括給予需要的患者有效量的權利要求l的化合物。
23. —種調節患者的免疫系統的方法，所述方法包括給予需要的 患者有效量的權利要求1的化合物。
全文摘要
本發明提供用於通過類Toll受體TLR7和/或TLR8調節信號傳導的組合物和方法。所述組合物和方法用於治療自身免疫、炎症、過敏、哮喘、移植排斥、移植物抗宿主疾病、感染、膿毒、癌症和免疫缺陷。
文檔編號C07D403/10GK101309906SQ200680038096
公開日2008年11月19日 申請日期2006年8月17日 優先權日2005年8月19日
發明者C·T·伊爾裡, G·A·多赫蒂, R·D·格羅內伯格, Z·瓊斯 申請人:阿雷生物藥品公司