獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球及製備方法

2023-10-27 00:56:47

專利名稱：獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球及製備方法
技術領域：
本發明屬於獸用抗生素製劑技術領域，具體地說，涉及一種頭孢噻呋鹽酸鹽的肺 靶向微球及製備方法。
背景技術：
頭孢噻呋又名塞得福(ceftiofur)，是一種頭孢類抗生素，抗菌譜廣、抗菌活性強， 是美國法瑪西亞普強公司創製的第一個動物專用的頭孢噻呋類抗生素，自從1988年被FDA 批准用於治療牛的呼吸系統感染以來，因其優良的抗菌活性及體內動力學過程，現在國內 外獸醫臨床上的應用日趨廣泛。頭孢噻呋為酸鹼兩性化合物，可與氫氧化鈉及鹽酸反應生成酸性可溶性鹽及鹼性 可溶性鹽，其鈉鹽及鹽酸鹽的乾燥粉末很穩定。由於頭孢噻呋具有的上述優點，對臨床及標 準菌株具有較大的抗菌活性；具有穩定的內醯胺環，不易產生耐藥性及交叉耐藥性，尤 其可用於易產生耐藥性的金黃色葡萄球菌感染，在世界各地廣泛應用，被許多專家推薦為 抗菌的首選藥物。該藥通過作用於轉達肽酶而阻斷粘肽的合成，粘肽是細菌細胞壁的重要 組成成分，故可使細菌細胞壁缺失而死亡，能夠達到快速殺菌的效果。但由於長期廣泛的使用，許多病原菌已經對頭孢噻呋產生了一定的耐藥性，從而 導致藥物治療效果的降低。如在治療肺部疾病時，要使藥物在肺部組織達到有效濃度，勢必 要增加藥物的劑量，由此容易造成藥物在其他組織中殘留的提高以及產生一些對機體有害 的毒副作用。肺靶向製劑給藥能將治療藥物最大限度的集中於肺部組織，使治療藥物在肺部濃 集，超出傳統製劑的數倍乃至數百倍，且治療效果會明顯提高；同時減少藥物的用量，可便 於控制給藥的速度和方式，還可降低藥物的不良反應，達到高效低毒的治療效果。另外，由 於靶向製劑提高了抗菌效率，因此有可能降低細菌對藥物產生抗藥性的可能，從而延長獸 醫臨床更有效地使用抗菌藥的時間。因此如何解決獸用頭孢噻呋普通製劑由於藥物劑量增加造成藥物在其他組織中 殘留的提高以及產生對機體有害的毒副作用、而且由於長期的使用，許多細菌對藥物產生 抗藥性，導致藥物治療效果降低的問題，而提供一種頭孢噻呋肺靶向製劑，則是本發明的課題。

發明內容
本發明提供了一種獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球及製備方法，可以解決現有 技術存在的由於藥物的組織選擇性低而造成在其他組織的濃度提高從而對機體產生有害 的毒副作用、而且藥物的治療效果不好的問題。為解決上述技術問題，本發明採用下述技術方案予以實現，
一種獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球，所述微球以頭孢噻呋鹽酸鹽為原料，以明膠 為載體，頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠的重量比為1 3 30。明膠是一種天然生物大分子材料，在體內具有較好的生物可降解性，且明膠來源廣泛，價格較低，因此有實現工業生產的潛力。為了使製備的微球的粒徑範圍實現肺靶向要求，所述微球的粒徑範圍為7 30 μ m,達到肺靶向微球對粒徑的要求。根據教科書《藥劑學》419頁，大於7 10 μ m的微球 通常被肺部的最細毛細血管床以機械過濾方式截留，從而達到肺靶向。一種獸用頭孢噻呋的肺靶向微球的製備方法，其特徵在於包括如下步驟
1)按照重量比為1 3 30的比例分別稱取頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠，將明膠在4(T50°C 水中溶脹完全，將頭孢噻呋鹽酸鹽溶解到明膠溶液中，超聲使其分散完全； 2)量取一定量液體石蠟於三角燒瓶中，加入乳化劑，置於4(T5(TC水浴中分散完全，上 述頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠混合溶液與液體石蠟的體積比為1:5 1:40 ；
3)將溶有頭孢噻呋鹽酸鹽的明膠溶液逐滴加入到三角燒瓶中，70(Tl900rpm轉速下， 4(T50°C攪拌乳化l(T20min，後轉入冰浴中乳化25 45min ；
4)加入體積濃度廣7%戊二醛溶液固化0.5 2h ；加入相應濃度的甘氨酸溶液反應 2(T40min，屏蔽戊二醛中未反應的醛基；
5)在上述溶液中加入異丙醇，脫水2(T50min，明膠溶液與異丙醇的體積比1:5 1:20; 抽濾後加入丙酮，丙酮與液體石蠟體積比2 :1(Γ6 :10，抽濾，重複數次，直到完全去除液體 石蠟；
6)用丙酮分散後用分樣篩篩選微球，將下層篩選出的液體抽濾除去丙酮後室溫乾燥， 即得肺靶向微球。進一步地，上述步驟2)中頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠混合溶液(水相)與液體石蠟(油 相)的體積比為優選l:l(Tl:30。進一步地，上述步驟2)中乳化劑採用Span80、Tween80。進一步地，所述明膠濃度範圍為59Γ20%。這裡的濃度是指明膠的質量與水的體積 之比，即 lg/100ml ；
進一步地，所述分樣篩的孔徑為400目。由於肺靶向微球的粒徑範圍為7 30 μ m，為了 使製備的微球達到該粒徑範圍，實現肺靶向的要求，使用孔徑為400目(即孔徑為37. 5μπι) 的分樣篩對微球進行分選。分選後的微球粒徑分布較窄，92%以上均在7 30 μ m的區域。本發明採用的方法 為乳化法，該方法製備的微球形態規整，成球形，包封率在60%以上，載藥量在1.94 17%之 間，藥物可以緩慢釋放達48h。與現有技術相比，本發明具有以下優點和積極效果
本發明通過採用明膠為載體，包埋頭孢噻呋鹽酸鹽製成頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微 球，微球載藥量及包封率均較高，包封率可達60%以上，載藥量在1. 94 17%之間；分選後微 球的粒徑92%以上都在7 30 μ m之間，因此達到肺靶向微球對粒徑的要求，提高了藥物的組 織選擇性，降低藥物在其他組織的濃度，靶向於肺部，延緩藥物釋放，增強療效，降低毒副作 用，從而高效的治療動物的肺部感染。
具體實施例方式以下結合實施例子對本發明作進一步的詳細描述。實施例1
一種獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球的製備方法步驟如下 1)微球的製備
準確稱量Ig明膠在5ml50°c水中溶脹完全，稱取0. 33g頭孢噻呋鹽酸鹽加入到明膠溶液中，使其完全溶解；同時，量取150ml液體石蠟於三角燒瓶中，加入2ml乳化劑SpanSO， 置於50°C水浴中分散完全；將溶有頭孢噻呋鹽酸鹽的明膠溶液逐滴加入到三角燒瓶中， 1900rpm，50°C攪拌乳化20min，後轉入冰浴中乳化45min ；加入4. 5ml7% (體積比)的戊二醛 溶液固化0. 5h ；加入相應濃度的甘氨酸溶液反應40min，屏蔽戊二醛中未反應的醛基；加入 IOOml異丙醇脫水20min ；抽濾後加入丙酮30ml去除液體石蠟；抽濾後用丙酮再次分散後 用400目分樣篩分選微球，抽濾後室溫乾燥得微球。2)微球外觀觀察
上述方法製備的微球，掃描電鏡顯示其外觀形態較好，並且微球分散性較好，較少粘聯。3)微球粒徑的測定
動態光散射法測定微球的平均粒徑為25. 44μπι，而且粒徑分布較窄，92%均在7 30μπι範圍內。4)載藥性能的研究
用高效液相測定微球的載藥量，樣品處理步驟為精確稱取5mg微球樣品，於離心管 中，加入3ml0. 0211妝2昍04溶液，水浴超聲30min，置於搖床中震蕩2h，5000rpm離心15min， 取上清液水相濾膜過濾進樣檢測。根據公式(1)公式(2)計算載藥量LE%與包封率EE%。
Γ 微球中藥物的質量 。,+八^、載顏=載藥徽球的顏趙公式⑴
包封率公式⑵ 加入藥物的質量
計算出微球載藥量達16. 06%，包封率達64. 25%。藥物溶出速率測定
用透析法測定微球的體外藥物溶出速率，步驟如下分別準確稱取10. Omg載藥微球， 用ρΗ7. 4的磷酸鹽緩衝溶液60ml作為緩衝介質，用37°C恆溫搖床在轉速為50轉速(rpm) 下進行藥物溶出速率的研究。用截留分子量為800(Tl4000Da的透析袋進行透析溶出。在 前12h內定時每次取樣5ml，並立即加入等體積的空白緩衝溶液，之後的每12h更換透析袋 外的透析液，測定光吸收值，根據標準曲線求得藥物溶出量，可得溶出速率。測得實施例1 製得的微球中的藥物頭孢噻呋鹽酸鹽在體外可緩慢釋放48h，溶出速率較為平穩。實施例2
準確稱量0. 25g明膠在5ml40°C水中溶脹完全，稱取0. 0083g頭孢噻呋鹽酸鹽加入到明 膠溶液中，至溶解完全；同時，量取50ml液體石蠟於三角燒瓶中，加入Iml乳化劑SpanSO， 置於40°C水浴中分散完全；將溶有藥物的明膠溶液逐滴加入到三角燒瓶中，700rpm，4(TC攪拌乳化lOmin，後轉入冰浴中乳化25min ；加入4. 5mll% (體積比)的戊二醛溶液固化2h ； 加入相應濃度的甘氨酸溶液反應20min，屏蔽戊二醛中未反應的醛基；加入25ml異丙醇脫 水50min ；抽濾後加入丙酮30ml去除液體石蠟；抽濾後用丙酮再次分散後用分樣篩分選微 球，抽濾後室溫乾燥。上述方法製備的微球，根據實施例1中所述方法檢測微球的性能，掃描電鏡顯示 其外觀形態較好，微球的平均粒徑為23. 93 μ m,而且粒徑分布較窄，93%均在7 30 μ m範 圍內，載藥量達1. 94%,包封率達60. 17%，體外藥物溶出可達48h。
實施例3
準確稱量0. 5g明膠在2. 5ml50°C水中溶脹完全，稱取0. Ig頭孢噻呋鹽酸鹽加入到明膠 溶液中，至溶解完全；同時，量取50ml液體石蠟於三角燒瓶中，加入Iml乳化劑SpanSO，置 於50°C水浴中分散完全；將溶有藥物的明膠溶液逐滴加入到三角燒瓶中，1700rpm，5(TC攪 拌乳化15min，後轉入冰浴中乳化30min ；加入4. 5ml2% (體積比)的戊二醛溶液固化Ih ；力口 入相應濃度的甘氨酸溶液反應30min，屏蔽戊二醛中未反應的醛基；加入20ml異丙醇脫水 30min ；抽濾後加入丙酮20ml去除液體石蠟；抽濾後用丙酮再次分散後用分樣篩分選微球， 抽濾後室溫乾燥。上述方法製備的微球，根據實施例1中所述方法檢測微球的性能，掃描電鏡顯示 其外觀形態較好，微球的平均粒徑為22. 85 μ m,而且粒徑分布較窄，95%均在7 30 μ m範 圍內，載藥量達11. 53%，包封率達69. 17%，體外藥物溶出可達48h。可見本發明的肺靶向微球載藥量及包封率均較高，包封率可達60%以上；分選後 微球的粒徑92%以上都在7 30 μ m之間，因此達到肺靶向微球對粒徑的要求，靶向於肺部， 從而高效的治療動物的肺部感染。以上所述，僅是本發明的較佳實施例而已，並非是對本發明作其它形式的限制，任 何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更或改型為等同變化的等 效實施例。但是凡是未脫離本發明技術方案內容，依據本發明的技術實質對以上實施例所 作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬於本發明技術方案的保護範圍。
權利要求
一種獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球，其特徵在於所述微球以頭孢噻呋鹽酸鹽為原料，以明膠為載體，頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠的重量比為1︰3~30。
2.根據權利要求1所述的獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球，其特徵在於所述微球的 粒徑範圍為7 30iim。
3.一種獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球的製備方法，其特徵在於包括如下步驟1)按照重量比為1 3 30的比例分別稱取頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠，將明膠在4(T50°C 水中溶脹完全，將頭孢噻呋鹽酸鹽溶解到明膠溶液中溶解完全；2)量取一定量液體石蠟於三角燒瓶中，加入乳化劑，置於4(T50°C水浴中分散完全，上 述頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠混合溶液與液體石蠟的體積比為1:5 1:40 ；3)將溶有頭孢噻呋鹽酸鹽的明膠溶液逐滴加入到三角燒瓶中，70(Tl900rpm轉速下， 4(T50°C攪拌乳化l(T20min，後轉入冰浴中乳化25 45min ；4)加入體積濃度廣7%戊二醛溶液固化0.5 2h ；加入相應濃度的甘氨酸溶液反應 2(T40min，屏蔽戊二醛中未反應的醛基；5)在上述溶液中加入異丙醇，脫水2(T50min，明膠溶液與異丙醇的體積比1:5 1:20; 抽濾後加入丙酮，丙酮與液體石蠟體積比2 :10飛10，抽濾，重複數次，直到完全去除液體 石蠟；6)用丙酮分散後用分樣篩篩選微球，將下層篩選出的液體抽濾除去丙酮後室溫乾燥， 即得肺靶向微球。
4.根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於上述步驟2)中頭孢噻呋鹽酸鹽與明 膠混合溶液與液體石蠟的體積比優選為1 l(Tl 30。
5.根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於上述步驟2)中乳化劑採用SpanSO、 Tween80o
6.根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於所述明膠濃度範圍為59^20%。
7.根據權利要求3所述的製備方法，其特徵在於所述分樣篩的孔徑為400目。
全文摘要
本發明提供了一種獸用頭孢噻呋鹽酸鹽的肺靶向微球及製備方法，可以解決現有技術存在的由於藥物的組織選擇性低而造成在其他組織的濃度提高從而對機體產生有害的毒副作用、而且藥物的治療效果不好的問題。技術方案是以頭孢噻呋鹽酸鹽為原料，以明膠為載體，頭孢噻呋鹽酸鹽與明膠的重量比為1︰3~30。本發明還提供了肺靶向微球的製備方法。微球載藥量及包封率均較高，包封率可達60%以上；分選後微球的粒徑92%以上都在7~30μm之間，因此達到肺靶向微球對粒徑的要求，提高了藥物的組織選擇性，靶向於肺部，降低藥物在其他組織的濃度，降低毒副作用，從而高效的治療動物的肺部感染。
文檔編號A61K9/16GK101829063SQ20101012639
公開日2010年9月15日 申請日期2010年3月18日 優先權日2010年3月18日
發明者王豔玲, 肖希龍, 郝智慧 申請人:青島康地恩藥業有限公司;青島六和藥業有限公司