從生物液中去除補骨脂素的方法
2023-05-12 01:41:36
專利名稱：從生物液中去除補骨脂素的方法
背景技術：
近來，由於涉及捐贈血液的潛在危險，正在活躍地研究著使可能在供血者血液或者血液成分中發現的病原性試劑滅活的方法。一項最前途的研究是通過光化學處理滅活病原體試劑。在大多數光化學處理方法中的一個主要的問題是將處理過的血液中的殘留的光敏劑或者其分解產物減少到足夠低的水平，使得處理過的血液或血製品能被轉輸給患者。即使對所有的供血者血液已經檢測了被已知的病原體造成的可能的汙染，但是常常不能從供血者血庫中完全去除所有的汙染的血液。
這是由幾個條件引起的。例如當一個人感染了病毒時，例如引起AIDS的人免疫缺陷病毒(HIV)，存在一段時期，在該時期期間，抗-HIV抗體滴度對於用常規篩選試驗的陽性檢測太低。因此HIV感染者供出的血液在該時期內可以通過抗體篩選檢測，並且可能感染這種供出的血液或者從中製備的血製品的所有受者。還總是有未知的或者未檢測到的病原體汙染供出的血液的可能性。因為這些原因，近來急切需要一種方法，能從用於人類的捐贈的血液或由其得到的血液成分中除去未檢測到的病原體的方法。
Wiesehahn等(美國專利4727027；4748120；和5176921)和Isaacs等(美國專利5139940)描述了在補骨脂素衍生物例如8-甲氧基補骨脂素(8-MOP),4』-羥基甲基-4,5』,8-三甲基補骨脂素(HMT)，4』-氨基甲基-4』,5』,8-三甲基補骨脂素(AMT)，或者其它補骨脂素衍生物存在下，通過UVA照射在生物液中滅活病原體的方法。在該方法中，只有加入的補骨脂素化合物的總量的一小部分在滅活那些病原體中被消耗，加入的補骨脂素化合物的剩餘部分或者作為源補骨脂素化合物留在處理過的血液中或者作為補骨脂素分解產物而留在處理過的血液中。
處理過的血液或者血液成分中的這些殘留化合物的量可能非常大，並且當用這種處理過的血液或血液成分對患者轉輸時，患者可能暴露給補骨脂素或補骨脂素分解產物。這種對於補骨脂素或補骨脂素降解產物的暴露可以對患者引起不期望的作用，例如光毒性或者其它與補骨脂素和其分解產物相關的毒性作用。因此，非常希望在所有的人使用之前，從處理過的血液或血液成分中去除殘留的補骨脂素衍生物或補骨脂素的分解產物。
近來沒有公開過證明從血液和血製品中去除補骨脂素化合物和其分解產物的方法。
發明概述本發明涉及從補骨脂素處理過的生物液，包括但不限於血液和血製品中去除補骨脂素化合物和其分解產物的方法。本發明方法使用一種與補骨脂素處理過的生物液例如血液或血製品接觸的補骨脂素-吸附劑材料。含有補骨脂素化合物或其分解產物的生物液、血液或血製品根據本發明方法處理，以產生基本上沒有補骨脂素化合物或補骨脂素分解產物的生物液、血液和血液成分。
附圖簡要說明
圖1所示的是該吸附裝置使用的總的圖示。第一個容器(9)含有已經照射過的血液或血液成分(11)，其含有在早期紫外A照射期間的殘留的補骨脂素或補骨脂素衍生物例如8-MOP,AMT,HMT或其它補骨脂素衍生物和其分解產物。處理過的液體(11)通過泵(13)泵入通過吸附裝置(1)，其中殘留的光敏劑(幾種光敏劑)或者其副產物被去除，進入第二個容器(10)。
圖2所示的是吸附裝置(1)的垂直剖面圖。該柱體由進口帽(4)，出口帽(5)，罩體(6)，兩個不鏽鋼篩(7)和吸附劑(8)組成。柱體內不鏽鋼篩(7)含有樹脂小球，並且防止它們從柱體中漏出。
圖3所示的是吸附裝置(1)的水平剖面圖。吸附劑(8)是直徑大小大約0.1-2mm的微孔小球，並且其由聚苯乙烯或者聚苯乙烯與二乙烯基苯共聚合製備。這些微孔小球具有的孔大小在分子水平內，10-1000埃，並且大孔表面積是每克吸附劑100-1000平方米。好的例子是Rohm和Haas公司製備的XAD-4和XAD-16樹脂小球。
圖4所示的是本發明另一個設計的剖面圖。這裡吸附劑(14)由微孔纖維(14)製成而不是小球。纖維可以是織物結構或者非織物結構。通過用纖維代替小球可以省去不鏽鋼篩(7)。
圖5所示的是圖4所示相同裝置的剖面圖。這裡示出了吸附劑纖維的剖面。這些吸附劑纖維是帶有其它細線的織物。
發明的詳細描述本發明的目的是給出一種從生物液例如處理過的血液或血液成分中去除如果殘留的光敏劑例如補骨脂素或其衍生物和其分解產物的方法，從而使處理過的生物液在基本上沒有殘留的光敏劑的情況下轉輸給患者。適合在本發明方法中使用的生物液包括但不限於全血、血清、血漿、血液級分例如血小板，紅細胞和血沉棕黃色層，血液或血液級分的提取物，例如從中純化的蛋白質，和用一種或幾種補骨脂素化合物處理過的任何生物液。
多種補骨脂素吸附材料適合在本發明方法中使用，並且可以製備這些材料的不同的物理形式，並且適合在本發明方法中使用。例如，微孔小球或纖維形式的活性炭是好的補骨脂素吸附劑。但是發現活性炭也可以吸附其它來自血液或血製品的成分。因此，其在本發明方法中的應用只有在如果活性炭不是也去除處理過的生物液的期望的成分的情況下才適合。在本發明方法中使用的優選的吸附劑材料是吸附補骨脂素和補骨脂素分解產物並且具有最小的吸附其它期望成分例如用於人的血液和血製品的成分的容量的吸附材料。
微孔聚合物小球例如由聚苯乙烯和聚苯乙烯與二乙烯基苯共聚合製備的那些小球是在本發明方法中使用的用於補骨脂素、補骨脂素衍生物和其光分解產物的優選的吸附材料。
實際上任何液體適用於本發明方法這一點對於本領域技術人員是顯而易見的。具體地說，已經用補骨脂素化合物處理過的所有的生物液適用於本發明方法。通常暴露給補骨脂素化合物的生物液包括但不限於全血、血漿、血清和從血液或血液級分分離的任何成分。補骨脂素化合物已經被用於各種各樣的目的，包括將人血和由血產生的產品滅菌以防止傳播肝炎病毒、皰疹病毒、HIV和由血液供者產生的任何其它感染或致瘤的病種；將細胞培養產生的生物產物滅菌，例如幹擾素、酶、激素和疫苗，以滅活所有的病毒或核酸雜質；和通過用補骨脂素治療患者後在體外循環中照射血液，接著將補骨脂素處理過的血液送還患者的對人的治療。
各種不同的補骨脂素-吸附劑材料適用於本發明方法這一點對本領域技術人員也是顯而易見的。合適類型的補骨脂素-吸附劑材料的例子包括但不限於活性炭小球或纖維，其包被有或者沒有包被生物相容材料、離子交換樹脂，例如Dowex小球(從Midland Michigan的Dow化學品公司購得)，和離子交換樹脂小球(由Philadelphia Pennsylvania的Rohm和Haas公司購得)，最優選聚苯乙烯和聚苯乙烯與二乙烯基苯共聚合產物。
補骨脂素處理過的生物液以各種各樣的方式與補骨脂素-吸附劑材料接觸這一點對於本領域技術人員是顯而易見的。例如，生物液可以以批量的方式與補骨脂素-吸附劑材料混合，接著通過標準分離方法例如過濾或者重力分離去除補骨脂素-吸附劑材料。另一種可替代的方法是，補骨脂素-吸附劑材料可以放置在標準的色譜裝置例如一個柱子中，通過該柱子通過含有補骨脂素的生物液。
實際上所有適用於生物液的補骨脂素化合物適用於本發明方法這一點對於本領域技術人員是顯而易見的。補骨脂素化合物是本領域公知的並且描述於美國專利4321919；和美國專利4960408中。通常使用的補骨脂素化合物包括但不限於補骨脂素；8-甲氧基-補骨脂素；4,5』,8-三甲基補骨脂素；5-甲氧基補骨脂素；4-5』二甲基-補骨脂素；4,8-甲氧基補骨脂素；4-甲基補骨脂素；4,4-二甲基補骨脂素；4』-羥基甲基-4,5』,8-三甲基補骨脂素；和4』-氨基甲基-4,5』,8-三甲基補骨脂素。
提供下面的實施例以詳細說明本發明，但是本發明不限於此。實施例1在證明苯乙烯或苯乙烯共聚物小球對於補骨脂素衍生物的吸附容量的該試驗中，一個玻璃移液管被用作樹脂容器，並且玻璃棉被用來代替不鏽鋼篩以將小球保留在移液管中。共8克XAD-4樹脂小球(從Rohm和Haas公司購得)裝入移液管。玻璃棉球放置在移液管內樹脂床的底部和頂部。樹脂小球的總的床體積是11.4ml。製備幾加侖0.5μg/ml AMT(補骨脂素)水溶液，加壓通過該小的XAD-4樹脂柱，隨著時間測定洗脫液中AMT濃度。結果見表1。
表1XAD-4樹脂柱上AMT吸附
用相同的柱體以6個不同的流速進行該試驗。由於流速提高，樹脂柱體內灌注液的滯留時間減少，使得發生吸附的時間少。因此，如果吸附速度慢或者容量低，則洗脫液中的AMT濃度應該增加。該試驗結果表明，洗脫液中的AMT濃度實際上是零，並且不受流速提高的影響。這些結果表明XAD-4樹脂小球對AMT在容量和吸附速度兩方面具有非常高的親和性。
權利要求
1.從生物液中去除補骨脂素化合物和補骨脂素分解產物的方法，包括a)使含有補骨脂素或補骨脂素分解產物的生物液接觸補骨脂素-吸附劑材料；和b)從補骨脂素-吸附劑材料中分離和收集生物液，以提供基本上沒有補骨脂素或補骨脂素分解產物的生物液。
2.權利要求1的方法，其中生物液是血清。
3.權利要求1的方法，其中生物液是血漿。
4.權利要求1的方法，其中生物液是血紅細胞。
5.權利要求1的方法，其中生物液是全血。
6.權利要求1的方法，其中補骨脂素-吸附劑材料選自聚苯乙烯和聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物。
7.權利要求1的方法，其中補骨脂素是8-甲氧基補骨脂素。
全文摘要
本發明涉及去除補骨脂素和補骨脂素降解產物的方法。本發明方法用於任何用補骨脂素處理過的生物液,包括血液,血液級分和從中產生的成分。根據本發明方法處理的生物液基本上沒有任何殘留的補骨脂素或補骨脂素降解產物。
文檔編號A61K35/14GK1215305SQ97193674
公開日1999年4月28日 申請日期1997年4月8日 優先權日1996年4月9日
發明者K·H·李 申請人:特拉科斯有限公司