包含黏膜粘附性配製的核酸活性成分的多顆粒狀藥物劑型以及製備所述藥物劑型的方法

2023-04-23 08:11:11 1

專利名稱：：包含黏膜粘附性配製的核酸活性成分的多顆粒狀藥物劑型以及製備所述藥物劑型的方法
技術領域：
：本發明涉及包含黏膜粘附性配製的核酸活性成分的多顆粒狀藥物劑型以及製備該藥物劑型的方法。
背景技術：
：WO02/64148描述了包含粘多糖的配製劑及其製備方法。在此，粘多糖，例如肝素，與吸附增強劑，例如殼聚糖一起配製，隨後向其提供可溶於腸液的包衣，使得活性成分可以在小腸的中段或下段釋放。合適的可溶於腸液的包衣的例子是EUDRAGITL、S、L100-55型陰離子丙烯酸系共聚物。該配製劑可以包括膠囊、片劑和粒劑。端粒酶是一種在細胞分裂時促進DNA加倍，尤其是在染色體末端區域中的DNA加倍的酶。該酶因此對於保持完好的染色體結構是重要的。端粒酶活性在大多數成人體細胞中受到抑制，僅在生殖細胞中，但也在許多腫瘤細胞類型中觀察到提高的端粒酶活性。據推測，端粒酶在細胞的直至它們的遺傳預程序化細胞死亡的正常生命周期的分子控制中起到重要作用。腫瘤細胞中不同於正常細胞的高端粒酶活性被認為是正常的細胞分裂控制已喪失的徵兆。端粒酶或與其相關的基因結構被視為是腫瘤細胞的基因治療的出發點。WO99/38964描述了用於基因治療的核酸，其特別包含端粒酶基因啟動子。這種DNA可以與外源基因，例如細胞毒素編碼基因結合。該核酸構建體可用作具有提高的端粒酶活性的腫瘤細胞的轉染用的活性成分。期望這會抑制腫瘤細胞分裂直至特異性殺死這些細胞。提到了WO99/38964中所述的活性成分類型或由其衍生的藥物劑型的口服可能性。Roy等人(1999)在NatureMedicine，第5卷，第4期，第387-391頁，「Oralgenedeliverywithchitosan-DNAnanoparticlesgeneratesimmunologicprotectioninmurinemodelofpeanutallergy(具有殼聚糖-DNA納米顆粒的口服基因遞送在鼠性模型中產生對花生過敏反應的免疫保護)」中描述了DNA活性成分在小鼠中的口服給藥。通過複合聚生將質粒DNA上存在的顯性花生過敏原基因(pCMVArah2)與Mw為大約390000的殼聚糖一起配製成尺寸為100至200納米的納米顆粒。將這些納米顆粒口服給藥給AKR/J小鼠，在此可以檢測腸上皮細胞中的轉導基因表達。由此處理的小鼠產生過敏原特異性分泌IgA抗體和血清IgG2a抗體，並表現出與對照組相比降低的過敏原誘發的過敏性反應。Leong等人(1998)在JournalofControlledRelease53，第183-193頁，「DNA-polycationnanospheresasnon-viralgenedeliveryvehicles(作為非病毒基因遞送載體的DNA聚陽離子納米球)」中描述了基因轉移載體，其在BALB/c小鼠體內產生外源基因表達。納米球作為DNA與明膠或尺寸為200至700納米的殼聚糖的配合物形式製備。WO02/094983描述了由核酸、對DNA具有特異性的抗體和與此相關的陽離子大分子配合物組成的配製劑。配製以納米顆粒形式完成，其中在體外和體內均檢測到提高的轉染速率。提到了具有活性成分緩釋的口服用配製劑。WO03/007913描述了口服多顆粒狀藥物劑型，其包含以大量所謂膜片(Patches)形式的活性成分。膜片是由生物相容性材料構成的直徑為500微米至5毫米且高度為100至1000微米的圓盤形物體。膜片由兩層或兩面構成，一面對水或體液僅具有低滲透性，例如由乙基纖維素構成，第二面包含活性成分，例如蛋白質、多糖或小分子，其可以與黏膜粘附性聚合物，例如殼聚糖、CMC、聚丙烯酸或果膠混合存在。這些膜片可以被壓制形成片劑或被填充到膠囊中，該膠囊另外具有可溶於腸液的包衣。該活性成分製劑還可以與所謂的增強劑(例如脂肪酸、脂肪醇、酯、表面活性物質和蛋白酶抑制劑)組合。在作用位點，例如在腸的特定段，膠囊溶解並釋放出膜片。釋放出的膜片能夠以它們的黏膜粘附面粘附到腸黏膜上，並在那裡緩釋活性成分和向腸黏膜靶向釋放。膜片的僅低可滲透的第二面旨在為活性成分提供一定保護以免腸腔一面的化學或酶促失活，並防止活性成分向這一面上逸出。WO03/092732描述了基於具有1000至50000的比較低的分子量Mw的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的pH敏感聚合物。該pH敏感聚合物尤其還適於配合核酸。該pH敏感聚合物在pH7.0或略高的範圍中僅在高濃度下具有細胞毒素性質或完全沒有細胞毒素性質，但在低於pH6.5時在低濃度下就已在體內具有細胞毒素或溶血或膜溶解(membranolytisch)作用。
發明內容問題和解決方案WO99/38964描述了與人類端粒酶基因或該基因的啟動子有關的核酸和載體。其中所述的核酸可以被視為用於腫瘤細胞的基因治療的潛在活性成分。WO99/38964中僅非常一般性地提出所述的活性成分類型的口服給藥。需要提出使本領域技術人員能夠以不會發生過早失活(尤其是由核酸酶引起的)且足夠比例的活性成分成功轉染目標細胞的方式將這種類型的活性成分輸送到作用位點的配製劑。開頭提到的描述了納米顆粒中的抗體-DNA共軛配合物的WO02/094983也僅對口服藥物劑型的配製給出相當一般性的暗示。WO03/007913描述了對提供口服藥物劑型的可能解決方案，該劑型在腸腔中釋放並意於在此發揮作用。這種解決方案的一個缺點可尤其認為是兩層膜片結構的複雜構造和製備。以具有耐胃液並可溶於腸液的包衣的膠囊形式提供藥物劑型似乎特別不利。當尺寸明顯大於2.5毫米時，會擔心治療再現性不足。膠囊通過胃的時間可能變化很大。在任何情況下都預期作用會延遲發生。此外，膠囊本身可能在包衣出現部分溶解後就已迅速或緩慢地溶解。包衣和膠囊兩種原理在這種情況下以不利方式重疊，使得膜片的釋放預計會總體上不受控。膠囊可在至少已部分可接觸到腸液的情況下，取決於這時的腸內容物或腸蠕動而保持完好或基本上被機械破壞。視最初包衣的膠囊形成物的崩解或機械應力而定，一方面可能突然釋放出大量膜片，或另一方面也可能出現不希望的延遲釋放。因此，很希望總體上可更好地控制活性成分的釋放。本發明涉及用於核酸活性成分的可口服給藥的藥物劑型，特別是用於基因治療目的。這方面的一般性問題是以有利於活細胞在作用位點上的轉染並同時確保活性成分或至少足量活性成分以能夠轉染的形式到達作用位點的劑型配製活性成分。本發明的問題之一被認為是提供適用於核酸活性成分的靶向和有效釋放的藥物劑型。這種藥物劑型旨在提供高的劑量可靠性並在迅速通過胃後在腸腔中良好分布。所含核酸活性成分在此應受到保護以在很大程度上避免物理、化學或溶核失活，並在指定作用位點釋放，使得高比例活性成分可以被機體吸收。釋放位點應視治療目的而定是可變的並可以可靠地調節。藥物劑型除了DNA活性成分外僅應包含藥理學可接受的非毒性成分，這樣即使在藥物劑型的頻繁或定期攝取時，在最初開始就預計沒有不希望的副作用。該問題由包含平均直徑為50至2500微米的丸粒的口服多顆粒狀藥物劑型解決，這些丸粒由下列部分構成a)包含納米顆粒的內部基質層，這些納米顆粒含有核酸活性成分並包埋在由具有黏膜粘附作用的聚合物構成的基質中，其中該基質可任選包含其它製藥常用輔料，b)外部成膜化包衣，其基本上由可任選與製藥常用輔料，尤其是增塑劑一起配製的陰離子聚合物或共聚物構成，其特徵在於將該多顆粒狀藥物劑型配製使得所含丸粒在胃的pH範圍內釋放，通過陰離子聚合物或共聚物或其與輔料的配製劑及其層厚的選擇調節外部包衣使得該包衣在腸內在4.0至8.0的pH範圍內在15至60分鐘內溶解，從而暴露出含活性成分的黏膜粘附性基質層，可以粘合到腸黏膜上並在那裡釋放出活性成分，其中選擇具有黏膜粘附作用的聚合物，使得其在基於外部包衣開始溶解時的pH值計±0.5個pH單位的範圍內，表現出至少ηb＝150至1000mPa·s的黏膜粘附作用和在15分鐘內10至750％的水吸收，且基質層中納米顆粒的活性成分含量最多為具有黏膜粘附作用的聚合物含量的40wt％。本發明的實施方案本發明涉及口服多顆粒狀藥物劑型，特別是以片劑、微型片劑、裝入膠囊中的丸粒、囊劑或重構用粉末(Trockensfte)，其包含平均尺寸或平均直徑為50至2500，優選100至1000微米的丸粒，這些丸粒由下列部分構成a)包含納米顆粒的內部基質層，這些納米顆粒含有核酸活性成分並包埋在由具有黏膜粘附作用的聚合物構成的基質中，其中該基質可任選包含其它製藥常用輔料，b)外部成膜化包衣，其基本上由可任選與製藥常用輔料，尤其是增塑劑一起配製的陰離子聚合物或共聚物構成。配製多顆粒狀藥物劑型以使得所含丸粒在胃的pH範圍內釋放。本發明意義中的術語丸粒包括圓形至球形附聚物，其也可以被稱作微粒、珠粒或微型片劑，只要它們具有本發明中所述的結構和尺寸。通過陰離子聚合物或共聚物或其與輔料的配製劑及其層厚的選擇調節外部包衣，以使得該包衣在腸內在4.0至8.0，優選5.5至7.8，特別優選5.8至7.5的pH範圍內，在15至60分鐘，優選20至40分鐘內溶解，從而暴露出含活性成分的黏膜粘附性基質層，可以粘合到腸黏膜上並在那裡釋放出活性成分。選擇具有黏膜粘附作用的聚合物或共聚物，以使得其在基於外部包衣開始溶解時的pH值計±0.5，優選±0.3個pH單位的範圍內，表現出至少ηb＝150至1000，優選150至600mPa·s的黏膜粘附作用和在15分鐘內10至750％，優選10至250％，特別優選10至160％的水吸收，且基質層中的活性成分含量為具有黏膜粘附作用的聚合物含量的最大40wt％，特別是0.001至15wt％，或0.05至5wt％。內部基質層內部基質層充當活性成分載體。內部基質層還具有藉助所含黏膜粘附性聚合物使活性成分粘合到腸黏膜上的功能，從而使活性成分可以由那裡進入機體。內部基質層還具有保護活性成分以免物理、化學或酶促失活的功能。內部基質還可以包含製藥輔料，尤其是G-蛋白質偶聯受體和配體(參見，例如WO02/102407，第74-76頁)，尤其是8-OH-DPAT、Aminoketanserin(氨基酮色林)、阿託品、布他拉莫、氯丙嗪、Chloroprozhixen、辛那色林、Cyanopindolol(氰基吲哚洛爾)、賽庚啶、哌雙咪酮、Epi-depride(依匹必利)、腎上腺素、非諾多泮、氟哌噻噸、氟奮乃靜、氟哌啶醇、Hexocyclium(己環銨)、Himbacin(喜巴辛)、Iodomelatonin(碘代褪黑素)、酮色林、麥角酸衍生物、美索達嗪、Mesulerigin(美舒麥角)、Methoctramin(美索曲明)、Methylsergid、胃復安、米安色林、Molindonem(嗎茚酮)、毒蕈鹼、納洛酮、N-甲基螺環哌啶酮、去甲腎上腺素、培高利特、酚妥拉明、哌侖西辛、PPHT-香豆素、PPHT-羅丹明、PPHT-Texas紅、哌唑嗪、丙嗪、雷氯必利、5-羥色胺、Speperone、Spriroxatrine、舒必利、舒馬普坦、替尼拉平和Trifluprimazin(三氟丙嗪)。內部基質還可以包含促滲劑，例如增塑劑，例如檸檬酸三乙酯、乙醯基檸檬酸三乙酯、癸二酸二乙酯、癸二酸二丁酯；聚合物，例如卡波姆(Carbomer)、殼聚糖、殼聚糖-半胱氨酸、羧甲基纖維素鈉、N-三甲基化殼聚糖、聚卡波非(carbophil)-半胱氨酸，長鏈脂肪酸、它們的酯(例如，單和二酸甘油酯)及它們的鹽，例如月桂酸、月桂磺酸、棕櫚酸、辛酸、癸酸、油酸、醯基肉鹼；螯合劑，例如EDTA、水楊酸酯、環糊精、聚丙烯酸、膽汁酸如膽酸、膽牛黃酸、膽肌氨酸、鵝脫氧膽酸及它們的鹽，例如膽酸鈉、甘膽酸鈉、牛磺膽酸鈉、牛磺雙氫褐黴酸鈉、糖雙氫褐黴酸鈉；表面活性劑和乳化劑，特別例如聚乙烯-660-12-羥基硬脂酸酯(SolutolHS15)、(SolutolHS15)、Polysorbat80(吐溫80)、聚氧乙基化蓖麻油(CremophorEL)、聚氧乙烯-聚氧丙二醇(PluronicF68)、毒素緊密連接毒素(ZOT)，和維生素，例如維生素E(生育酚)或維生素B12。內部基質層中優選不存在或僅存在少量，例如0.01至10wt％，優選0.05至2wt％，特別優選0.1至1wt％的製藥輔料、促滲劑和/或G-蛋白偶聯受體和配體。核酸活性成分基質層包含含有核酸活性成分的納米顆粒。核酸活性成分具有在體內的目標位點引發與哺乳動物細胞，特別是人類細胞的DNA的相互作用的任務，這導致細胞內改變的DNA結構或非常一般性地導致改變的細胞性質。在這點上，首先應該提到所謂的基因治療，其目標是修復在基因決定的病症中有缺陷的基因結構。這可能是指，例如，不希望的基因活性(例如腫瘤細胞中的端粒酶活性)的失活或中斷。其也可以是指通常在健康細胞中存在的基因活性(例如p53基因活性，一種長期已知並已深入研究的腫瘤抑制基因)的恢復。本發明因此涉及用於核酸活性成分，特別是用於基因治療的可口服給藥的藥物劑型。核酸活性成分可以是單鏈或雙鏈DNA(脫氧核糖核酸)或RNA(核糖核酸)或DNA-RNA嵌合體，在此可以存在天然存在和/或非天然存在的合成改性核苷酸。核酸活性成分可以線型或環狀存在。其可以是寡核苷酸單元，例如長度為10至200個鹼基或鹼基對。其還可以是更長單元，例如，超過200至100000，500至10000或1000至5000個鹼基或鹼基對。除了充當真正活性成分的序列(例如目標細胞中存在的或應增補的核酸序列)外，核酸活性成分中在適當時還可以包含載體序列，其通常不存在於目標細胞中且不應與後者相互作用。已知例如基於雙鏈DNA的載體體系，其涉及質粒或基於病毒體系的載體。已知例如重組腺相關病毒載體(rAAV)。其它雙鏈載體可以包含源自巨細胞病毒(CMV)或SV40病毒的啟動子或調節序列。其它載體可以涉及單鏈DNA，其藉助於附加的RNA單元而被保護以免降解。同樣已知的是所謂的RDOI和RDOII構建體，其中短DNA片段，例如30至60個鹼基，在末端提供有1至4個鹼基的短RNA片段。可以通過向RNA或DNA中引入非天然存在的核苷酸以額外提高半衰期或對核酸酶的抗性。在這點上，例如單個氧原子可以被硫原子替代，從而獲得磷-硫橋(MSO)。在例如NatureReviews第4卷，2003，第679-689頁，LiLiu等人中描述了適合用作基因修復或基因替代載體的可以在本發明意義中用作活性成分的多種核酸形式。優選基本上僅含有充當活性成分的核酸序列和僅含有小比例或不含有載體DNA的核酸片段。核酸活性成分可以存在於例如與陽離子聚合物或蛋白質(例如抗體)形成的配合物或共軛物中。配合或共軛物結合可以通過化學橋鍵而可逆或不可逆地共價進行或經由範德華力、離子鍵、疏水鍵而非共價進行。但在配合物或共軛物中除核酸活性成分外展現的分子本身不發揮治療作用，並因此被視為配製助劑而不視為活性成分或活性成分的一部分。核酸活性成分可以在適當時藉助於蛋白質或肽配製。但是，它們本身不發揮任何治療作用並因此被視為配製助劑而不視為活性成分或活性成分的一部分。核酸可以，例如根據WO02/094983，為與特異性結合到核酸上的抗體或與陽離子物質形成的配合物形式。已可能表明，這種方法可有助於提高的體外和體內轉染速率。這可能優選是指完整或以片段，Fc抗體片段、Fab′抗體片段、F(a，b)′2抗體片段或半抗體片段形式的單克隆IgG抗體或IgM抗體，但它們在每種情況下必須包含至少一個抗DNA結合位點。核酸與抗DNA抗體的分子比率可以例如為1∶20至1∶5。核酸活性成分可以例如以血友病的治療為目的並包含凝血因子基因，例如人類凝血因子IX的cDNA基因(參見，例如，WO03/028657或Palmer等人，Blood，1989，73(2)，第438-445頁或Yao等人，ProcNatlAcadSci，USA，1992，89(8)第3357-3361頁)。核酸活性成分可以除了治療有效的基因部分外還包含免疫耐受性誘導基因，例如Fas配體。共表達的Fas配體或Fas基因片段可以在T細胞中引起細胞凋亡，這些細胞可以在基因轉移到目標細胞中之後被特異性激活。也可以從Walensky等人，2004，「ActivationofApoptosisinVivobyaHydrocarbon-StapledBH3Helix(通過烴固定BH3螺旋進行的體內細胞凋亡的激活)」，Science，305，第1466-1470頁中推知與白血病細胞中的細胞凋亡誘導有關的載體。核酸活性成分可以包含，例如，人類端粒酶基因的基因片段，尤其是啟動子區域。合適的例子是WO99/38964中所述的基因治療載體pGT62-codAupp，或本領域技術人員可以從WO99/38964中推知的其它載體。核酸活性成分可以包含腫瘤抑制劑基因片段，例如p53腫瘤抑制劑基因或其片段。US6,451,593B1描述了用於基因治療的表達載體的構建原理，其適用於製備本發明意義中的核酸活性成分。納米顆粒藥物劑型包含優選可具有尺寸為20至1000，優選50至250，特別優選80至220，特別是100至200納米的納米顆粒。納米顆粒中存在的核酸可優選以與陽離子物質形成的配合物的形式存在。陽離子物質可以是陽離子脂質、陽離子多肽和/或陽離子聚合物。聚乙烯亞胺或衍生物也可以是合適的。陽離子脂質可以是例如N-[1-(2，3-二油基氧基)丙基]-N，N，N-三甲基氯化銨(DOTMA)和二油基磷脂醯基乙醇胺(DOPE)的市售混合物。適合的例子還有甲基硫酸N-[1-(2，3-二油基氧基)丙基]-N，N，N-三甲銨(DOTAP)、二油基磷脂醯基膽鹼(DOPC)、雙十八烷基醯氨基甘氨醯基精胺(DOGS)。陽離子多肽優選為具有陽離子側基的胺基酸的合成製備的均聚物。可提及聚賴氨酸、聚精氨酸、聚鳥氨酸和聚組氨酸。鏈長可以為幾個單位至大量單位，例如3至20，10至50，50至100或高至500或高至1000個胺基酸。還可以使用天然存在的主要具有陽離子性質的蛋白質，例如組蛋白。與具有相對較少藥理學經驗的其它物質相比，優選(甲基)丙烯酸酯共聚物，因為它們已經在口服藥物中安全使用了數十年。陽離子聚合物因此優選可為(甲基)丙烯酸酯共聚物，特別是具有叔或季氨基的(甲基)丙烯酸酯共聚物。陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的玻璃化轉變溫度(ISO11357-2，細目3.3.3)優選為40至60℃，分子量Mw(重均)為100000至200000(分子量Mw可以例如通過凝膠滲透色譜法或通過散射光法測定(參見，例如，H.F.Mark等人，EncyclopediaofPolymerScienceandEngineering(聚合物科學與工程大全)，第二版，第10卷，第1頁及後幾頁，J.Wiley，1989)。為了改進經腎或膽道的排洩，優選具有低分子量Mw，例如具有50000或更低，5000至40000，10000至30000或15000至25000的Mw的陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物。分子量Mw(重均)可以例如通過粘度測定法或凝膠排阻色譜法(GPC)測定。粘度測定值(特性粘數)可以在氯仿中或在DMF(二甲基甲醯胺)中在23℃下測定，並應該優選為10至20，優選11至15nspez/c(立方釐米/克)。粘數可以例如按ISO1628-6中所規定測量。特別優選的是由20-30wt％甲基丙烯酸甲酯、20-30wt％甲基丙烯酸丁酯和60-40wt％甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯形成的自由基聚合單元構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物。(甲基)丙烯酸酯共聚物特別可以以平均粒度為10至30微米的微粉化形式使用。具體合適的具有叔氨基的市售(甲基)丙烯酸酯共聚物是，例如，由25wt％甲基丙烯酸甲酯、25wt％甲基丙烯酸丁酯和50wt％甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯構成的(EUDRAGITE100)。平均粒度為10至20微米的微粉化形式(EUDRAGITEPO，粉末)是特別優選的。這種形式可以特別好地加工成含核酸的納米顆粒。這種情況下獲得明顯特別有利的與核酸分子的配合物形成，其可有利於提高的轉染速率。包含核酸活性成分和陽離子和陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的納米顆粒通過在包含核酸活性成分和陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的納米顆粒的製備中另外添加基於核酸活性成分和陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物計的比例為0.1至40wt％，特別是1至30wt％，特別優選2至25wt％的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物，可以進一步優化各核酸對目標細胞類型的轉染速率。隨後必須在體外試驗法中用目標細胞類型的細胞培養物(在可得的情況下)或用至少類似的或能類似地反應的細胞類型檢測納米顆粒的轉染速率。由此方式可以調節配合物中核酸的結合力與其從配合物中釋放到活細胞中之間的適當平衡。如果單獨由陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物引起的結合作用最初過強，使得核酸的轉染速率不令人滿意地低，則添加陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物弱化所述結合作用直至轉染速率達到對所用核酸和對目標細胞類型為特異性的最佳值。這種類型的配製劑具有下述優點——陽離子和陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物均是藥理學可接受的，使得預計僅幾乎沒有或完全沒有副作用。合適的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物優選是也可用於外部包衣的相同類型，即含陰離子基團的單體的含量為5至60wt％的(甲基)丙烯酸酯共聚物(EUDRAGIT類型L、S、L100-55、FS)。在許多情況下，當使用如下構成的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物時，可以實現轉染速率的令人驚奇的提高20至33wt％甲基丙烯酸和/或丙烯酸5至30wt％丙烯酸甲酯和20至40wt％丙烯酸乙酯和高於10至30wt％甲基丙烯酸丁酯和在適當時，0至10wt％能夠進行乙烯基共聚的其它單體，其中單體的比例合計達100wt％，條件是根據ISO11357-2，細目3.3.3的共聚物玻璃化轉變溫度(中點溫度Tmg)為55至70℃。上述共聚物特別由下列物質形成的經自由基聚合的單元構成20至33，優選25至32，特別優選28至31wt％甲基丙烯酸或丙烯酸，優選甲基丙烯酸，5至30，優選10至28，特別優選15至25wt％丙烯酸甲酯，20至40，優選25至35，特別優選18至22wt％丙烯酸乙酯，和高於10至30，優選15至25，特別優選18至22wt％甲基丙烯酸丁酯，其中選擇單體組成，使得共聚物的玻璃化轉變溫度為55至70℃，優選59至66，特別優選60至65℃。為了改進經由腎或膽道的排洩，具有低分子量的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物是優選的，例如，具有Mw為50000或更低，5000至40000，10000至30000或15000至25000的那些是優選的。分子量Mw(重均)可以例如通過粘度測定法或凝膠排阻色譜法(GPC)測定。粘度測定值(特性粘數)可以在氯仿中或在DMF(二甲基甲醯胺)中在23℃下測定並應該優選為10至20，優選11至15nspez/c(立方釐米/克)。粘數可以例如按ISO1628-6中所規定測量。具有低分子量的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物是pH敏感聚合物，其在pH7.0或略高的範圍內僅在高濃度下具有細胞毒素性質，或完全沒有細胞毒素性質，但在低於pH6.5時在體內在低濃度下就已具有溶血或膜溶解作用。聚合物可以在納米顆粒中用作核酸活性成分與陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物之間的結合強度的調節劑，並同時對轉染速率具有有利影響。具有低分子量的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物在納米顆粒中的比例可特別有助於核酸活性成分在攝入核內體中之後通過其隨後的去穩定或溶胞被進行細胞內釋放。用於納米包囊的具有低分子量的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物在優選實施方案中，具有低分子量，例如具有50000或更低，5000至40000，10000至30000或15000至25000的Mw的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物通過納米包囊而作為殼施加到包含核酸活性成分和陽離子聚合物，優選陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的納米顆粒上。具有低分子量的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物在納米顆粒表面上的比例可特別有助於核酸活性成分在攝入核內體中之後通過其隨後的去穩定或溶胞而被進行細胞內釋放。此外，核酸活性成分在內部受到更好保護以免溶核降解，從而更多活性成分可到達目標位點。活性成分的比例納米顆粒在基質層中的比例基於具有黏膜粘附作用的聚合物含量計優選最大40，特別是0.001至15或0.05至5wt％。核酸活性成分在納米顆粒中的比例可以為例如1至50，優選2至25wt％。納米顆粒的製備納米顆粒的製備是已知的。已知方法是團聚，配合物形成，乳液沉澱，從油包水乳液中蒸發有機溶劑級分，從而在水相中產生納米顆粒，從水包油乳液中蒸發有機溶劑級分，從而在水相中產生納米顆粒。Leong等人(1998)在JournalofControlledRelease53，第183-193頁「DNA-polycationnanospheresasnon-viralgenedeliveryvehicles(作為非病毒基因遞送載體的DNA聚陽離子納米球)」中描述了納米顆粒的製備。Roy等人(1999)在NatureMedicine，第5卷，第4期，第387-391頁，「Oralgenedeliverywithchitosan-DNAnanoparticlesgeneratesimmunologicprotectioninmurinemodelofpeanutallergy」中描述了納米顆粒的製備。納米包囊是指邊界層聚合法(參見，例如ChouinardF.等人，PharmRes.，1994，6月11日(6)869-874)。納米膠囊可以通過使納米顆粒作為不溶配合物分散在水介質中並將該分散體在有機溶劑中乳化製成。在有機溶劑中的分散體包含，例如，(甲基)丙烯酸酯共聚物。在有機溶劑蒸發時，(甲基)丙烯酸酯共聚物沉澱並在納米顆粒周圍形成外殼。納米顆粒的包囊是有利的，因為在被腸細胞和肝吸收的過程中確保對配合的核酸活性成分的額外保護。具有黏膜粘附作用的聚合物基質層進一步包含具有黏膜粘附作用的聚合物。合適的具有黏膜粘附作用的聚合物特別是殼聚糖(殼聚糖和衍生物，多種殼聚糖)，由20-45wt％甲基丙烯酸甲酯和55至80wt％甲基丙烯酸構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物，纖維素，尤其是甲基纖維素，例如羧甲基纖維素鈉(例如Blanose或Methocel)。與具有相對較少藥理學經驗的其它物質相比，優選(甲基)丙烯酸酯共聚物，因為它們已經在口服藥物中安全使用了數十年。選擇具有黏膜粘附作用的聚合物，以使得其在基於外部包衣開始溶解時的pH值計±0.5，優選±0.3個pH單位的範圍內在15分鐘內表現出10至750％，優選10至250％，特別優選10至160％的水吸收。黏膜粘附性質的測量適合表徵黏膜粘附性質的測量方法存在於Hassan和Gallo(1990)中(參見HassanE.E.和GalloJ.M.，「ASimpleRheologicalMethodfortheinVitroAssessmentofMucin-PolymerBioadhesiveBondStrength(用於粘蛋白聚合物生物粘接強度的體外評定的簡單流變學方法)」，PharmaRes.7(5)，491(1990))。該方法基於下述假定聚合物與粘蛋白的混合物的粘度(η，動態粘度或粘度係數)與各組分粘度的總和不同。適用關係式η聚合物與粘蛋白的混合物＝η粘蛋白+η聚合物+ηb，其中ηb代表差值。ηb越高，黏膜粘附性質越高。首先使用旋轉粘度計測量單個組分的粘度。使用0.5％濃度(w/w)的黏膜粘附性聚合物的水溶液和15％濃度的豬胃粘蛋白的溶液。為了測定黏膜粘附性質ηb，單獨測量粘蛋白和聚合物並以它們的以所述濃度的混合物形式測量。選擇具有黏膜粘附作用的聚合物，以使得其在基於外部包衣開始溶解時的pH值計±0.5，優選±0.3個pH單位的範圍內表現出150至1000，優選150至600mPa·s的作為粘度ηb形式測得的黏膜粘附作用。水合作用和水吸收聚合物的水合作用基於待吸收水的聚合物的親合力。聚合物由於這種水吸收而溶脹。這與水在聚合物中和水在周圍介質中的化學勢之間的不平衡有關。由於聚合物的滲透壓，水被吸收，直至在內相和外相之間已達到平衡。聚合物隨後100％水合。對於具有低平均分子量的聚合物，隨之呈溶液形式。對於用具有較高分子量的聚合物或交聯聚合物，產生凝膠。直至建立平衡之前的水吸收量可例如最多為固有重量的10倍，相當於聚合物重量的1000％。水吸收百分比的測量水吸收百分比的測量是本領域技術人員熟悉的。例如在LehrbuchderpharmazeutischenTechnologie(製藥技術教科書)/RudolfVoigt，BaselVerlagChemie(化學出版社)，第5完全修訂版，1984，第151頁，7.7.6，「Aufsaugvermgen(吸收能力)」部分中描述了合適的方法。該方法利用所謂的Enslin裝置，其中玻璃吸濾器通過軟管與帶刻度的吸移管連通。吸移管精確水平地安裝，使得它處於與玻璃料過濾器板相同的高度。在本發明情況下100％的水吸收被定義為每1克具有黏膜粘附作用的聚合物在15分鐘內的水吸收為1毫升水。由相對快速的水吸收或水合作用和高水合度確保在外部包衣開始溶解的時刻對活性成分的迅速保護和向腸黏膜上的直接結合。活性成分在黏膜粘附基質中的結合應該僅僅是低的，這樣活性成分可以直接從腸黏膜轉移入機體中。基質pH值的控制對於許多黏膜粘附聚合物，黏膜粘附作用是pH依賴性的。可以通過酸、鹼或緩衝體系的添加針對性地控制基質中的pH值。內部基質可以包含例如，與乙酸鹽緩衝體系一起使用的殼聚糖作為具有黏膜粘附作用的聚合物。例如調節至pH5.0至5.5的乙酸鹽/乙酸鈉緩衝劑可以作為添加劑存在於基質中或施塗到芯體(在該芯體上施塗有基質)上。由此方式也可以與在較高pH值，例如pH6.0至8.0下開始溶解的成膜化包衣結合使用殼聚糖。儘管周圍pH值高，但在基質的微環境中保持低pH值。由此可以在其它情況下無黏膜粘附作用或沒有到達該程度的黏膜粘附作用的pH範圍內利用聚合物的黏膜粘附性質。這具有下述優點可以實現相對於其pH最佳值處於較高pH範圍內的核酸酶而提供一定保護。也可以通過添加鹼提高基質的pH值並與在較低pH值下溶解的成膜化包衣結合，以相反方式應用相同的原理。合適的黏膜粘附性聚合物的選擇的例子合適的黏膜粘附性聚合物的選擇是基於它們的黏膜粘附性質和它們的水吸收能力。聚合物應該在各自pH範圍內具有至少ηb＝150至1000mPa·s的黏膜粘附作用和在15分鐘內10至750％的水吸收。下表給出作為例子的列表。殼聚糖例如適用於pH5.5的環境pH區域(十二指腸)或另一環境pH區域(迴腸或結腸)，只要已經例如藉助緩衝體系將基質pH範圍調節至大約pH5.5的區域。與大約pH5.5的pH區域相比，表中所列的(甲基)丙烯酸酯共聚物更適於pH7.2的pH區域。藻酸鈉適於大約pH5.5的pH區域，但不適於pH7.2。羧甲基纖維素鈉和交聯聚丙烯酸在5.5至7.2的整個寬pH範圍內合適。*＝由30wt％甲基丙烯酸甲酯和70wt％甲基丙烯酸構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物由陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物構成的外部包衣由陰離子聚合物或共聚物構成的外部包衣充當抗胃液包衣以保護內部基質層免受胃液影響。外部包衣還用於保護活性成分免受溶核酶的影響，直至該包衣到達其開始溶解所處的腸段(十二指腸、空腸、迴腸或結腸)的那一時刻。外部包衣在這種情況下特別用於所謂的「胃腸靶向」，即內部基質層在由其在那裡佔優勢的pH值決定的腸段的靶向釋放。為了不阻礙內部基質層的輸送，外部包衣的(甲基)丙烯酸酯共聚物應該表現出說可能小或僅低的與內部基質層的活性成分或黏膜粘附聚合物的相互作用。合適的陰離子聚合物或共聚物是乙醇酸纖維素(Duodcell)、乙酸鄰苯二甲酸纖維素(CAP、Cellulosiacetas、PhEur、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、NF、Aquateric)、乙酸琥珀酸纖維素(CAS)、乙酸偏苯三酸(trimeliat)纖維素(CAT)、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素(HPMCP、HP50、HP55)、乙酸琥珀酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS-LF、-MF、-HF)、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯(PVAP，Sureteric)、乙酸乙烯酯-乙烯基吡咯烷酮共聚物(PVAc，KollidonVA64)、乙酸乙烯酯∶巴豆酸9∶1共聚物(VAC∶CRA，KollicoatVAC)和/或蟲膠。所述聚合物或共聚物在許多情況下可以以完全令人滿意的方式配製，以可實現pH特異性溶解。外部成膜化包衣特別優選基本上由具有含陰離子基團的單體含量為5至60wt％的(甲基)丙烯酸酯共聚物構成，該共聚物任選與製藥常規輔料，尤其是增塑劑一起配製。與開頭提及的聚合物相比，本發明範圍內所提到的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物導致在許多情況下可以調節更精確且更可再現的溶解pH值的pH特異性設定。操作和應用通常也被認為不太複雜。外部包衣的(甲基)丙烯酸酯共聚物優選由40至95wt％，優選45至90wt％，特別是30至wt％的自由基聚合的丙烯酸或甲基丙烯酸的C1-至C4-烷基酯構成，並可以包含5至60wt％，優選8至40wt％，特別是20至35wt％含陰離子基團的(甲基)丙烯酸酯單體。所提到的比例通常合計達100wt％。但是，此外，在不會導致基本性質受損或改變的情況下，可以存在0至10，例如1至5wt％範圍內的少量的能夠進行乙烯基共聚的其它單體，例如甲基丙烯酸羥乙酯或丙烯酸羥乙酯。丙烯酸或甲基丙烯酸的C1-至C4-烷基酯特別是甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸丁酯、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯和丙烯酸丁酯。含陰離子基團的(甲基)丙烯酸酯單體可以是，例如，丙烯酸，但優選為甲基丙烯酸。同樣適合的是由40至60wt％甲基丙烯酸和60至40wt％甲基丙烯酸甲酯或60至40wt％丙烯酸乙酯構成的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物(EUDRAGITL或EUDRAGITL100-55類型)。這種類型的玻璃化轉變溫度(ISO11357-2，細目3.3.3)為105至160℃，且分子量Mw為100000至300000(分子量Mw可以例如通過凝膠滲透色譜法或通過散射光法測定(參見，例如，H.F.Mark等人，EncyclopediaofPolymerScienceandEngineering，第二版，第10卷，第1頁及後幾頁，J.Wiley，1989)。EUDRAGITL是由50wt％甲基丙烯酸甲酯和50wt％甲基丙烯酸構成的共聚物。這種(甲基)丙烯酸酯共聚物特別適於在大約pH6.0至6.5的pH範圍內(空腸)溶解。EUDRAGITL100-55是由50wt％丙烯酸乙酯和50wt％甲基丙烯酸構成的共聚物。EUDRAGITL30D-55是包含30wt％EUDRAGITL100-55的分散體。這種(甲基)丙烯酸酯共聚物特別適於在大約pH5.5至6.0的pH範圍內(十二指腸)溶解。同樣適合的是由20至40wt％甲基丙烯酸和80至60wt％甲基丙烯酸甲酯構成的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物(EUDRAGITS類型)。這種(甲基)丙烯酸酯共聚物特別適於在大約pH6.5至7.0的pH範圍內(空腸或迴腸)溶解。這種類型的玻璃化轉變溫度為140至180℃，且分子量Mw為100000至150000。特別適合的(甲基)丙烯酸酯共聚物是由10至30wt％甲基丙烯酸甲酯、50至70wt％丙烯酸甲酯和5至15wt％甲基丙烯酸構成的那些。EUDRAGITFS類型是由25wt％甲基丙烯酸甲酯、65wt％丙烯酸甲酯和10wt％甲基丙烯酸構成的共聚物。EUDRAGITFS30D是包含30wt％FS類型共聚物的分散體。這種(甲基)丙烯酸酯共聚物特別適於在大約pH7.0至7.8的pH範圍內(迴腸或結腸)溶解。另外適合的是由如下物質構成的共聚物20至34wt％甲基丙烯酸和/或丙烯酸20至69wt％丙烯酸甲酯和0至40wt％丙烯酸乙酯和/或，在適當時0至10wt％的能夠進行乙烯基共聚的其它單體，條件是，根據ISO11357-2細目3.3.3的共聚物的玻璃化轉變溫度為最高60℃。這種(甲基)丙烯酸酯共聚物由於其良好的斷裂伸長性能而特別適合將丸粒壓製成片劑。另外適合的是由如下物質構成的共聚物20至33wt％甲基丙烯酸和/或丙烯酸，5至30wt％丙烯酸甲酯和20至40wt％丙烯酸乙酯和大於10至30wt％甲基丙烯酸丁酯和在適當時0至10wt％能夠進行乙烯基共聚的其它單體，其中單體的比例合計達100wt％，條件是，根據ISO11357-2，細目3.3.3的共聚物的玻璃化轉變溫度(中點溫度Tmg)為55至70℃。這種類型共聚物由於其良好的機械性能而特別適於將丸粒壓製成片劑。上述共聚物特別由下列物質的經自由基聚合的單元構成20至33，優選25至32，特別優選28至31wt％甲基丙烯酸或丙烯酸，優選甲基丙烯酸，5至30，優選10至28，特別優選15至25wt％丙烯酸甲酯，20至40，優選25至35，特別優選18至22wt％丙烯酸乙酯，和大於10至30，優選15至25，特別優選18至22wt％甲基丙烯酸丁酯，其中選擇單體組成以使得共聚物的玻璃化轉變溫度為55至70℃，優選59至66，特別優選60至65℃。還可以使用所提到的共聚物的混合物以調節特定的釋放分布曲線或釋放位點。在此，玻璃化轉變溫度特別是指根據ISO11357-2，細目3.3.3的中點溫度Tmg。測量在不添加增塑劑的情況下，在低於100ppm的殘留單體含量(REMO)下，在10℃/分鐘的加熱速率下並在氮氣氣氛下進行。共聚物優選基本上至完全，以90、95或99至100wt％由在上述數量範圍內的單體甲基丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯和甲基丙烯酸丁酯構成。但是，在這不會必然導致基本性質受損的情況下，可以還存在0至10，例如1至5wt％範圍內的少量的能夠進行乙烯基共聚的其它單體，例如甲基丙烯酸甲酯、丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸羥乙酯、乙烯基吡咯烷酮、乙烯基丙二酸、苯乙烯、乙烯醇、乙酸乙烯酯和/或其衍生物。共聚物以本身已知的方式通過自由基本體聚合、溶液聚合、成珠聚合或乳液聚合獲得。它們必須在加工之前通過合適的研磨、乾燥或噴霧過程達到本發明的粒度範圍。這可以通過經擠出並冷卻的顆粒線料的簡單破碎，或熱擊碎(abschlag)進行。尤其在與其它粉末或液體混合的情況下，使用粉末可能是有利的。合適的製備粉末的裝置(Gertschaften)是本領域技術人員熟悉的，例如空氣噴射磨機、棒磨機、扇形磨機。在適當時，可以包括相應的篩分步驟。適於工業大量規模的磨機是，例如，以大約6巴的超壓操作的對衝射流磨機(MultiNo.4200)。共聚物製備提到的所有(甲基)丙烯酸酯共聚物可以通過單體在聚合引發劑和分子量調節劑存在下藉助嵌段、成珠或乳液聚合的自由基聚合和聚合產物的排料獲得(參見，例如，EP0704207A2、EP0704208A2或WO03/092732)。(甲基)丙烯酸酯共聚物可以以本身已知的方式通過自由基乳液聚合，在水相中，在優選陰離子乳化劑存在下製備，例如按DE-C2135073中所述的方法製備。適合的其它製備方法原則上還有「基團轉移聚合」(GTP)或「原子轉移自由基聚合」(ATRP)(參見，例如，Matyjaszewski，K.等人，Chem.Rev.2001，101，2921-2990)。所得聚合物結構是無規共聚物或嵌段共聚物。優選的是在2至15wt％分子量調節劑、0.1至2wt％的乳化劑比例、0.02至0.4wt％的聚合引發劑數量的存在下，並在65至90℃溫度下的乳液聚合。優選的是乳化劑混合物，優選由月桂基硫酸鈉(例如0.1至0.5wt％)和聚氧乙烯-20失水山梨糖醇單油酸酯(例如0.4至1.5wt％)構成。特別合適的引發劑是過氧二硫酸鈉或過氧二硫酸銨。由此方式可以製備例如固含量為20至40wt％的分散體，並可以通過噴霧乾燥或通過水在擠出機中的凝結和壓擠出而獲得共聚物。聚合產物隨後溶解，優選溶解在有機溶劑中，通過相對於水的多次透析而提純，並優選凍幹。可以提到的聚合引發劑的例子是偶氮化合物，例如2，2』-偶氮雙(異丁腈)或2，2』-偶氮雙(2，4-二甲基戊腈)；氧化還原體系，例如叔胺與過氧化物的組合，或優選過氧化物(在這點上參見例如H.Rauch-Puntigam，Th.Vlker，「Acryl-undMethacrylverbindungen(丙烯酸類與甲基丙烯酸類化合物)」，Springer，Heidelberg，1967，或Kirk-Othmer，EncyclopediaofChemicalTechnology(化學技術大全)，第1卷，第386頁以及後幾頁，J.Wiley，NewYork，1978)。合適的過氧化物型聚合引發劑的例子是過氧化二月桂醯、過辛酸叔丁酯、過異壬酸叔丁酯、過氧二碳酸二環己酯、過氧化二苯甲醯或2，2-雙(叔丁基過氧基)丁烷。聚合還可優選用具有不同半衰期的各種不同的聚合引發劑的混合物進行，例如過氧化二月桂醯和2，2-雙(叔丁基過氧基)丁烷，以使自由基流在聚合進程中和在各種不同的聚合溫度下保持恆定。聚合引發劑的用量通常為基於單體混合物計0.01至最多1wt％。可以通過使單體混合物在分子量調節劑存在下聚合而調節分子量Mw。合適的分子量調節劑特別是硫醇，例如正丁基硫醇、正十二烷基硫醇、2-巰基乙醇或巰基乙酸2-乙基己基酯，其中分子量調節劑通常以基於單體混合物計0.05至15wt％的量，優選以基於單體混合物計0.1至10wt％，特別優選2至12wt％的量使用(參見，例如，H.Rauch-Puntigam，Th.Vlker，「Acryl-undMethacrylverbindungen」，Springer，Heidelberg，1967；Houben-Weyl，MethodenderorganischenChemie(有機化學方法)，第XIV/1卷，第66頁，GeorgThieme，Heidelberg，1961或Kirk-Othmer，EncyclopediaofChemicalTechnology，第1卷，第296頁及後幾頁，J.Wiley，NewYork，1978)。優選使用的分子量調節劑為正十二烷基硫醇或巰基乙酸2-乙基己基酯。巰基乙酸乙基己基酯提供了可以影響(甲基)丙烯酸酯共聚物的疏水性的優點，因為該調節劑在末端引入分子中。優選用量為5至15wt％十二烷基硫醇或2至10wt％巰基乙酸2-乙基己基酯。有機溶液所提到的(甲基)丙烯酸酯共聚物可以以有機溶液，例如10至30wt％濃度的有機溶液形式提供。可用溶劑是，例如，丙酮、異丙醇或乙醇或其混合物，其在適當時可以包含比例最多為大約10wt％的水。但是，水分散體是優選的。分散體所提到的(甲基)丙烯酸酯共聚物可以作為乳液聚合物，優選以10至50wt％，特別是20至40％濃度的水分散體的形式製備並使用。作為市售形式，30wt％的固含量是優選的。對加工而言，甲基丙烯酸單元的部分中和過程是非必需的；但是，例如，如果需要包衣組合物分散體的穩定化或增稠，則其可以為最高至5或10摩爾％的程度。膠乳粒子的重均尺寸通常為40至100納米，優選50至70納米，確保低於1000mpa·s的在加工技術方面有利的粘度。在較高的中和度，例如10至50摩爾％，或完全中和的情況下，可以將共聚物轉化成溶解狀態。為了製備陰離子共聚物的溶液，通常需要部分或完全中和酸基團。陰離子共聚物可以，例如，以1至40wt％的最終濃度逐漸攪拌加入水中，並在此通過添加鹼性物質，例如NaOH、KOH、氫氧化銨或有機鹼，例如三乙醇胺而被部分或完全中和。還可以使用共聚物的粉末，在其製備過程中已經為了(部分)中和的目的而向其中添加了鹼，例如NaOH，使得該粉末是已經(部分)中和的聚合物。溶液的pH值通常高於4，例如為4至大約7。分散體也可以例如以本身已知的方式噴霧乾燥或凍幹，並以可再分散的粉末形式提供(參見，例如，EP-A0262326)。另選方法是凍幹或水在擠出機中凝結並壓擠出，隨後造粒(參見，例如，EP-A0683028)。已經令人驚奇地發現，由經噴霧乾燥或凍幹和再分散的粉末製成的共聚物分散體表現出提高的剪切穩定性。這在噴塗的情況下特別有利。當分散體中存在的共聚物以被部分中和至2至10摩爾％的形式存在(基於共聚物中存在的酸基團計)時，這種優點特別增強地顯現出來。為此目的通過添加NaOH實現的部分中和是優選的。陰離子乳化劑優選以0.1至2wt％的量存在。月桂基硫酸鈉特別優選作為乳化劑。層厚外部包衣的層厚優選為20至200，優選50至120微米。多顆粒狀藥物劑型的製備本發明還涉及以如下方式製備多顆粒狀藥物劑型的方法a)以本身已知的方式將核酸活性成分與輔料配製成納米顆粒，b)通過噴塗到芯體上或在無芯體時通過旋轉團聚(Rotagglomeration)、沉澱或噴霧法製備內部基質層，其包含納米顆粒形式的核酸活性成分和具有黏膜粘附作用的聚合物，並在適當時包含其它製藥常用輔料，和隨後c)通過噴塗法施塗基本上由任選可與製藥常用輔料，尤其是增塑劑一起配製的陰離子聚合物構成的外部成膜化包衣，從而獲得含活性成分的包覆丸粒，和d)藉助製藥常用輔料並以本身已知的方式將所得丸粒加工成多顆粒狀藥物劑型，特別是含丸粒的片劑、微型片劑、膠囊、囊劑或重構用粉末，其被配製成使得所含丸粒在胃的pH範圍內被釋放。預製丸粒和丸粒的製備可以在無活性成分的球粒(Nonpareilles)上進行造粒，或可以製備無芯體丸粒。首先，製備含活性成分的納米顆粒。隨後，製備含或不含芯體的內部基質層。這種尚未包衣的成圓形的層可以被稱作預製丸粒(丸粒芯)。可以通過流化床法將包含含核酸活性成分的納米顆粒的黏膜粘附性聚合物的溶液或懸浮液施塗到空白對照劑丸粒或其它合適的載體材料上，在此蒸發掉溶劑或懸浮劑。在這種製備過程之後可進行乾燥步驟。將核酸活性成分以含有具有黏膜粘附作用的聚合物的納米顆粒形式加入有機溶劑或加入水中，並混合。為了確保混合物的令人滿意的可噴霧性，通常必須配製低粘度混合物。為此目的可能有利的是以相對低濃度使用具有黏膜粘附作用的聚合物，例如1至最多10，優選2至5wt％。此外，以0.1至20，優選0.5至10wt％的濃度添加洗滌劑，例如吐溫，對降低表面張力可能是有利的。除活性成分外，還可以存在其它製藥輔料粘結劑(例如纖維素及其衍生物)、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、保溼劑、促崩解劑、潤滑劑、崩解劑、(甲基)丙烯酸酯、澱粉及其衍生物、糖、增溶劑或其它。例如由Bauer，Lehmann，Osterwald，Rothgang，「berzogeneArzneiformen(包衣藥物劑型)」，WissenschaftlicheVerlags-gesellschaftmbHStuttgart，第7章，第165-196頁中已知相應的施塗方法。此外，本領域技術人員從教科書中可獲知詳細情況。參見，例如-Voigt，R.(1984)LehrbuchderpharmazeutischenTechnologie；VerlagChemieWeinheim-BeerfieldBeach/Florida-Basel-Sucker，H.，Fuchs，P.，Speiser，P.PharmazeutischeTechnologie(製藥技術)，GeorgThiemeVerlagStuttgart(1991)，特別是第15和16章，第626-642頁-Gennaro，A.，R.(編者)，Remington′sPharmaceuticalSciences(Remington製藥科學)，MackPublishingCo.，EastonPennsylvania(1985)，第88章，第1567-1573頁-List，P.H.(1982)Arzneifomenlehre(藥物劑型指南)，WissenschaftlicheVerlagsgesellschaftmbH，Stuttgart。內部基質還可以不藉助惰性芯體(Nonpareilles)製備。內部基質的成分在這種情況下可以通過旋轉團聚、沉澱或噴霧法之類的方法，尤其是超聲流化噴霧法成圓為具有指定尺寸，例如50至1000微米的尚未包衣的丸粒(預製丸粒)。這具有整個芯體體積可供活性成分加載的優點。活性成分的加載因此與具有惰性芯體的實施方案相比可進一步提高。在內部基質芯(或預製丸粒)製成之後，再次優選在噴霧法中向它們提供外部包衣，從而獲得成品丸粒。由有機溶液，或優選由水分散體，通過噴塗製備丸粒。在這種情況下，產生均勻的無孔包衣對於實施是決定性的。面塗層另外可向丸粒提供著色包衣，但其必須不影響溶解pH值。合適的例子是由經著色的羥丙基甲基纖維素或其它可溶於水或能在水中快速崩解的聚合物構成的包衣。製藥常用輔料在製備過程中可以向本發明的配製劑中添加常用輔料或添加劑。當然，原則上所有所用物質必須是毒物學上無問題的，並特別是在藥物中對患者應用沒有風險。常用添加劑在藥物包衣或塗層中的用量和應用是本領域技術人員熟悉的。常用添加劑的可能例子是增塑劑、隔離劑、顏料、穩定劑、抗氧化劑、成孔劑、促滲劑、光澤劑、芳香物質、洗滌劑、潤滑劑或增味劑。它們充當加工助劑並意於保可靠和可再現的製備方法和良好的長期貯存穩定性，或它們在藥物劑型中實現附加的有利性質。它們在加工之前添加到聚合物製劑中，並可以影響包衣的滲透性，這在適當時可以用作附加的控制參數。●隔離劑隔離劑通常具有親脂性質並通常添加到噴霧懸浮液中。它們防止芯體在薄膜包衣過程中團聚。優選使用滑石、硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、研磨二氧化矽(Kieselsure)、高嶺土或HLB值為3至8的非離子乳化劑。隔離劑在本發明的包衣組合物和粘結劑中的通常用量為基於共聚物計0.5至100wt％。●顏料與包衣組合物不相容的顏料特別是如下顏料其如果以基於(甲基)丙烯酸酯共聚物的乾重量計例如20至400wt％的通常用量直接添加到(例如通過攪拌加入)(甲基)丙烯酸酯共聚物分散體中則會導致分散體失穩定，凝聚，導致離析現象或類似的不希望的效果。此外，所用顏料當然是無毒的並適於製藥目的。關於這一點，還參見，例如，DeutscheForschungsgemeinschaft(德國科學研究協會)，FarbstoffefürLebensmittel(食品用染料)，HaraldBoldtVerlagKG，Boppard(1978)；DeutscheLebensmittelrundschau74，第4期，第156頁(1978)；ArzneimittelfarbstoffverordnungAmFarbV，1980年8月25日。與包衣組合物不相容的顏料可以是，例如，氧化鋁顏料。不相容顏料的例子是黃橙色、胭脂蟲紅色澱、基於氧化鋁或偶氮染料的有色顏料、磺酸染料、黃橙色S(E110，C.I.15985，FDC黃6)、靛胭脂紅(E132，C.I.73015，FDC藍2)、酒石黃(E102，C.I.19140，FDC黃5)、麗春紅4R(E125，C.I.16255，FDC胭脂蟲紅A)、喹啉黃(E104，C.I.47005，FDC黃10)、赤蘚紅(E127，C.I.45430，FDC紅3)、偶氮玉紅(E122，C.I.14720，FDCCarmoisine)、莧菜紅(E123，C.I.16185，FDC紅2)、亮酸性綠(E142，C.I.44090，FDC綠S)。所給出的顏料的E號碼涉及EU編號。關於這一點，還參見「DeutscheForschungsgemeinschaft，FarbstoffefürLebensmittel，HaraldBoldtVerlagKG，Boppard(1978)；DeutscheLebensmittelrundschau74，第4期，第156頁(1978)；ArzneimittelfarbstoffverordnungAmFarbV，1980年8月25日。FDC號碼涉及由美國食品和藥品管理局(FDA)給出的在食品、藥品和化妝品方面的許可，其描述於美國食品和藥品管理局，食品安全和應用營養中心，化妝品和色料辦公室聯邦法規彙編(CodeofFederalRegulations)-第21篇ColorAdditiveRegulations(色料添加劑規範)第82部分，ListingofCertifiedProvisionallyListedColorsandSpecifications(已檢定的暫時列出的色料和技術規範列表)(CFR21Part82)。●增塑劑其它添加劑也可以是增塑劑。常用量為0至50，優選2至20，特別是5至10wt％。增塑劑可以根據類型(親脂或親水)和添加量而定影響聚合物層的功能性。增塑劑通過與聚合物的物理相互作用實現玻璃化轉變溫度的降低並取決於添加量而促進成膜。合適的物質通常具有100至20000的分子量並在分子中包含一個或多個親水基團，例如羥基、酯基或氨基。合適的增塑劑的例子是檸檬酸烷基酯、甘油酯、鄰苯二甲酸烷基酯、癸二酸烷基酯、蔗糖酯、失水山梨糖醇酯、癸二酸二乙酯、癸二酸二丁酯和聚乙二醇200至12000。優選增塑劑是檸檬酸三乙酯(TEC)和乙醯基檸檬酸三乙酯(ATEC)。還可提到通常在室溫下為液體的酯，例如檸檬酸酯、鄰苯二甲酸酯、癸二酸酯或蓖麻油。優選使用檸檬酸酯和癸二酸酯。向配製劑中添加增塑劑可以按已知方式，直接在水溶液中進行，或在混合物熱預處理之後進行。還可以使用增塑劑的混合物。多顆粒狀藥物劑型的製備含活性成分的包衣丸粒可以藉助製藥常用輔料並以本身已知的方式加工成多顆粒狀藥物劑型，特別是加工成含丸粒的片劑、微型片劑、膠囊、囊劑或重構用粉末，其可以被配製成使得所含丸粒在胃的pH範圍內被釋放。作為多顆粒狀藥物劑型形式的製備提供高劑量可靠性，並提供了丸粒在腸腔內良好分布的優點。本發明的多顆粒狀藥物劑型還可以包含具有不同活性成分和/或不同丸粒結構的各種不同的丸粒類型。壓製片劑例如在Beckert等人(1996)，「Compressionofenteric-coatedpelletstodisintegratingtablets」(enteric包衣丸粒壓製成解碎片劑)，InternationalJournalofPharmaceutics143，第13-23頁和在WO96/01624中描述了通過將製藥常用粘結劑與含活性成分的顆粒一起壓制而製備多顆粒狀藥物劑型。含活性成分的丸粒的膜包衣通常在流化床設備中施塗。通常通過合適的方法將成膜劑與增塑劑和隔離劑混合。在這種情況下，成膜劑可以作為溶液或懸浮液形式存在。用於成膜的輔料同樣可以經溶解或懸浮。可以使用有機或水性溶劑或分散劑。此外可以使用穩定劑以使分散體穩定化(例子吐溫80或其它合適的乳化劑或穩定劑)。隔離劑的例子是甘油單硬脂酸酯或其它合適的脂肪酸衍生物、矽酸衍生物或滑石。增塑劑的例子是丙二醇、鄰苯二甲酸酯、聚乙二醇、癸二酸酯或檸檬酸酯，以及文獻中提到的其它物質。可以在含活性成分的層和腸可溶性共聚物層之間施塗隔離層，其用於隔離活性成分和包衣材料以防止相互作用。這種層可以由惰性成膜劑(例如HPMC、HPC或(甲基)丙烯酸共聚物)或例如滑石或另一合適的製藥物質構成。同樣可以使用成膜劑和滑石或類似物質的組合。還可以施塗由經部分或完全中和的(甲基)丙烯酸酯共聚物分散體構成的隔離層。隔離層還可以由與位於下方的基質層中相同或不同的黏膜粘附性聚合物構成。可以由此方式預防活性成分或黏膜粘附性聚合物與成膜性(甲基)丙烯酸酯共聚物層的可能的相互作用或不相容性。通過將丸粒與適用於壓片的粘結劑混合，如果必要則添加崩解促進性物質和如果必要則添加潤滑劑，配製用於製備由包衣顆粒構成的片劑的混合物。混合可以在合適的機器中進行。對包衣顆粒造成損害的混合器是不合適的，例如犁鏵混合器。為了實現合適的短崩解時間，特定次序可能在向包衣顆粒中添加輔料時是必要的。通過與包衣顆粒與潤滑劑或脫模劑硬脂酸鎂預混，可以使其表面疏水化並由此避免粘附。適用於壓片的混合物通常包含3至15wt％崩解助劑，例如KollidonCL，和例如0.1至1wt％潤滑劑和脫模劑，例如硬脂酸鎂。按照所要求的包衣顆粒的比例確定粘結劑比例。典型的粘結劑是例如Cellactose、微晶纖維素、磷酸鈣、Ludipress、乳糖或其它合適的糖、硫酸鈣或澱粉衍生物。低堆密度的物質是優選的。典型的崩解助劑(崩解劑)是交聯的澱粉衍生物或纖維素衍生物，和交聯聚乙烯基吡咯烷酮。纖維素衍生物同樣適合。可以通過合適的粘結劑的選擇省去崩解助劑的使用。典型的潤滑劑和脫模劑是硬脂酸鎂或其它合適的脂肪酸鹽或在文獻中舉出的用於此目的的物質(例如月桂酸、硬脂酸鈣、滑石等)。利用合適的機器(例如具有外部潤滑的壓片機)或合適的配方，可以省去潤滑劑和脫模劑在混合物中的使用。適當時可以向混合物中添加用於改進流動性的助劑(例如高度分散的矽酸衍生物、滑石等)。壓片可以在常用壓片機，偏心或迴轉壓片機上，在5至40kN，優選10-20kN的壓力下進行。壓片機可以配有用於外部潤滑的系統。在適當時使用用於填充模具的特定系統，其避免藉助攪拌槳的模具填充過程。其它多顆粒狀藥物劑型作為壓製片劑或微型片劑的替代物，還可以將含活性成分的包衣丸粒加工成任何其它可口服多顆粒狀藥物劑型。包衣丸粒可以，例如，填充到膠囊，例如明膠膠囊中，或配製成囊劑或重構用粉末。本發明的有利效果本發明的藥物劑型適用於核酸活性成分的靶向和有效釋放。藥物劑型表現出高劑量可靠性並在胃中和在腸腔中良好分布。在此，所含核酸活性成分很大程度上受到保護以免物理或溶核失活，並可以以高比例活性成分能夠被機體吸收的方式在指定作用位點釋放。藥物劑型因此使用少量活性成分也足夠，因為僅有少量的活性成分損失。通過靶向輸送整體上降低了副作用的風險。可以根據治療目的而定可變地調節作用位點。因此，可以更好地控制活性成分吸收的時間點。因為它是口服藥物劑型，其與其它給藥形式相比總體上更好地被患者接受(患者依從性)。因此，可以使大量核酸活性成分用於通過口服的應用。給藥風險通常小於特別在腸胃外給藥的情況下。給藥成本也可以保持較低，因為給藥不需要熟練技術人員。親脂基質當活性成分以納米顆粒形式包埋入熔點高於37℃，優選高於45℃，特別優選高於55℃的親脂基質中且含活性成分的親脂基質包埋入由具有黏膜粘附作用的聚合物構成的基質中時，得到本發明的特別方面。在親脂基質中配製的目的是改進活性成分，優選微溶或難溶活性成分(DAB10，2003的意義上)的溶解度或生物利用率。親脂基質在本發明意義中是指這樣的物質或物質混合物活性成分可以在其中溶解、懸浮或乳化。所述親脂基質的一種或多種物質不同於常用製藥輔料和具有黏膜粘附作用的聚合物。所述親脂基質的一種或多種物質優選具有疏水或兩親特徵。親脂基質還可以被稱作兩親基質或類脂基質。親脂基質可以由單一物質(例如脂質)或物質混合物(例如脂質混合物)構成。在混合物的情況下，下文對根據DAB10的水溶性、分配係數和/或HLB值所述的性質在每種情況下由重量份數的算術平均值和混合物中的物質的值計算。所用物質必須是無毒的。親脂基質/具有黏膜粘附作用的聚合物在優選實施方案中，親脂基質與具有黏膜粘附作用的聚合物的可能的相互作用被考慮。為了避免不可控制的相互作用，形成親脂基質的所述一種或多種物質與具有黏膜粘附作用的聚合物應該優選具有相同的離子性質，即兩者應該一致地至少主要具有陽離子特徵或一致地具有陰離子特徵。在選擇具有相反離子性質的物質時，具有黏膜粘附作用的聚合物應該優選以至少50，特別優選100％的比例以被中和的形式存在。中和可以通過以已知方式添加酸或鹼進行。用於組配親脂基質的一種或多種物質親脂基質優選包含80至100，優選90至100，特別優選100wt％的具有(平均)HLB值為0至15，優選2至10的物質或物質混合物。親脂基質可以包含0至20，優選0至10wt％的製藥常用輔料，尤其是穩定劑、增稠劑或吸附劑。特別優選不存在任何製藥常用輔料。所述形成親脂基質的一種或多種物質可以例如屬於如下物質組油、脂肪、單-、二-或三酸甘油酯、脂肪酸、脂肪醇，尤其是C6至C20脂肪酸和/或C6至C20醇，包括它們的鹽、醚、酯或醯胺衍生物，磷脂、卵磷脂、乳化劑、類脂、脂質可溶性維生素或表面活性劑。親脂基質可以包含例如下列脂質製劑之一(Imwitor308)單酯含量大於80％的甘油單辛酸酯、(Imwitor312)單酯含量大於90％的甘油單月桂酸酯、(Imwitor491)單酯含量大於90％的甘油單硬脂酸(sterate)(C16+C18)酯、(Imwitor900P)單酯含量為40-55％且C18含量為40-60％的甘油單硬脂酸酯、(Imwitor900K)單酯含量為40-55％且C18含量為60-80％的甘油單硬脂酸酯、(Imwitor742)單酯含量為45-55％的中等鏈長C8和C10甘油酯、(Imwitor928)主要含C12且單酯含量為34-36％的飽和植物C10-C18脂肪酸的偏甘油酯、C8和C10甘油酯、辛酸鈉或癸酸鈉。親脂基質可以包含例如下列脂質製劑之一脂肪，例如飽和和不飽和脂肪酸的單-、二-、三-甘油酯及其混合物。特別是甘油硬脂酸酯、甘油棕櫚酸酯、甘油肉豆蔻酸酯、甘油棕櫚酸硬脂酸酯、甘油月桂酸酯、甘油辛酸酯、甘油油酸酯，這些酯的例子是Imwitor-308、-312、-491、-742、-900、-928、-988和Gelucire44/14、-50/13、Geleol、CompritolEATO、Dynasan114、Softisan、Witepsol、Dynacet212、椰油脂肪，油，例如蓖麻油、芝麻油、葵花油、棉籽油、玉米油、杏仁油、花生油、橄欖油、椰子油、胡蘿蔔油、小麥胚芽油、胡桃油，中性油，例如肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸異丙酯、中等鏈長甘油三酯(Miglyol)，短鏈脂族和芳族羧酸酯，例如鄰苯二甲酸二丁酯、癸二酸二乙酯、癸二酸二丁酯、檸檬酸三丁酯、乙醯基檸檬酸三丁酯、甘油三乙酸酯，蠟，例如巴西棕櫚蠟、蜂蠟、羊毛蠟，甘油山萮酸酯，脂肪酸醯胺，例如硬脂醯胺、棕櫚醯胺、月桂醯胺，脂族長鏈羧酸，例如硬脂酸、棕櫚酸、月桂酸、肉豆蔻酸、油酸、辛酸、亞油酸、亞麻酸，以及，例如，它們的Na、Al和Mg鹽，脂肪醇，例如硬脂醇、月桂醇、鯨蠟醇、肉豆蔻醇、甘油縮甲醛，W/O乳化劑，例如膽固醇、甘油單硬脂酸酯、乙二醇單硬脂酸酯、失水山梨糖醇單油酸酯(Span80)、失水山梨糖醇單棕櫚酸酯(Span40)、失水山梨糖醇單月桂酸酯(Span20)、失水山梨糖醇單硬脂酸酯(Span60)、失水山梨糖醇三油酸酯(Span85)、失水山梨糖醇三硬脂酸酯(Span65)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Arlacel83)、硬脂酸鈣、硬脂酸鋁、硬脂酸鎂、聚氧乙烯失水山梨糖醇三硬脂酸酯(Tween65)、聚氧乙烯失水山梨糖醇三油酸酯(Tween85)，非離子O/W乳化劑，例如聚乙二醇(Macrogol)硬脂酸酯400(ChremophorA)、聚乙二醇月桂基醚、聚乙二醇-20-失水山梨糖醇-單月桂酸酯、-單硬脂酸酯、-單棕櫚酸酯、-單油酸酯、聚乙二醇-1500-甘油三蓖麻醇酸酯、聚乙二醇甘油羥基硬脂酸酯(CremophorRH)、聚乙二醇-1000-甘油-單月桂酸酯、-單硬脂酸酯、-單油酸酯、蔗糖單硬脂酸酯、Polysorbat60(Tween60)、聚氧乙烯單硬脂酸酯(Myrj49)、Polysorbat80(Tween80)、Polysorbat40(Tween40)、Polysorbat20(Tween20)、泊洛沙姆(Poloxamer)407(LutrolF127)、泊洛沙姆188(LutrolF68)、聚氧乙烯蓖麻醇酸酯(CremophorEL)、聚氧乙烯-5-硬脂基硬脂酸酯，離子型O/W乳化劑，例如鯨蠟基硬脂基硫酸鹽(LanetteE)、月桂基硫酸鈉(TexaponZ)、甘氨膽酸鈉、常春藤苷配基，兩親乳化劑，例如雞蛋磷脂醯膽鹼(雞蛋卵磷脂)、大豆磷脂醯膽鹼(大豆卵磷脂)、甜菜鹼、磺基甜菜鹼、神經醯胺(鞘磷脂)，維生素，例如，視黃醇(維生素A)、膽鈣化醇(維生素D)、α-生育酚和α-生育酚乙酸酯(維生素E)、葉綠醌(微生物K)，其它輔料是半乳糖脂，例如單半乳糖基二醯基甘油、單半乳糖基二醯基甘油、三半乳糖基二醯基甘油，和芳香油，例如茴香油、香茅油、桉葉油、小茴香油、春黃菊油、小豆蔻油、松針油、莧蒿油、矮松油、薰衣草油、薄荷油、肉豆蔻油、丁香油、胡椒薄荷油、迷迭香油、鼠尾草油，和萜類，例如薄荷醇、芳樟醇、1，4-桉樹腦、除蟲菊酯、冰片、桉葉油醇、葉綠醇、淚柏醇、印苦楝素(Azadirachtin)、印楝素。含活性成分的脂質基質在內部基質層a)中的含量可以為1至50，優選10至20wt％。親脂基質優選包含至少50wt％甘油單辛酸酯，最多10wt％膽酸鈉，最多10wt％生育酚琥珀酸酯，在活性成分是PgP外排泵的底物的情況下含有1至5wt％的外排泵抑制劑，例如SolutolHS15，甘油三酯，特別是三硬脂酸酯，其中這些組分合計為100％。這種親脂基質可以直接引入黏膜粘附性聚合物中或以在水中乳化形式引入黏膜粘附性聚合物中。在後一種情況下，水相可以包含弱酸，例如檸檬酸。方法本發明還涉及具有下列步驟的製備多顆粒狀藥物劑型的方法a)通過劇烈混合或使成分熔融，用所述形成親脂基質的一種或多種物質並在適當時用其它製藥常用輔料使包含核酸活性成分的納米顆粒懸浮，由此製備含活性成分的親脂基質，b)通過在芯體上噴塗與含活性成分的親脂基質混合的黏膜粘附性聚合物或在無芯體時通過旋轉團聚、沉澱或噴霧法，製備預製丸粒(丸粒芯)，c)通過從分散體或有機溶液在得自步驟b)的預製丸粒上，噴塗任選可包含製藥常用輔料，尤其是增塑劑和隔離劑摻混物的陰離子聚合物或共聚物包衣，而製備丸粒，d)通過以本身已知的方式，在適當時使用製藥常用輔料，填充或引入得自步驟c)的丸粒，特別是通過加工成含丸粒的片劑、微型片劑、膠囊、囊劑或重構用粉末，而製備多顆粒狀藥物劑型。優選方法工藝步驟a)和b)優選如下進行a)如下製備內部基質層通過在水中劇烈混合各成分，用所述親脂基質的一種或多種物質和在適當時的其它製藥常用輔料製備包含核酸活性成分的納米顆粒的乳液或懸浮液，並製備平均粒度不大於60，優選不大於20微米的水包油製劑，b)將得自步驟a)的水包油製劑噴塗到任選可包含其它製藥常用輔料摻混物的黏膜粘附性聚合物上，由此製備預製丸粒，其中這些成分是以通過旋轉團聚、擠出或制粒產生的微粉化粉末形式存在，所述粉末例如具有10至100微米的平均粒度。具體實施例方式實施例實施例闡述了本發明的典型實施方式。實施例1包含陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的納米顆粒的製備將2毫克DNA(核酸活性成分)，例如由具有例如3000至10000個鹼基對的雙鏈質粒DNA構成的基因治療載體，其包含將要在人類細胞中表達並具有意圖的治療作用的基因，溶於4毫升pH7.4的磷酸鹽緩衝劑，並與2毫升小鼠單克隆抗人DNAIgM溶液(1毫克/毫升)混合併在37℃培養1小時。然後將1毫升LipofectinTM或優選3毫升(1毫克/毫升)改性EUDRAGITE(由25wt％甲基丙烯酸甲酯、25wt％甲基丙烯酸丁酯和50wt％甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物，低分子量，腎臟可通過的(gngig)Mw＝21000)混合併在緩慢攪拌下在37℃下保持大約30分鐘。此段時間後測量pH值並用0.001NHCl調節至7.4。在例如漩渦振蕩器(Vortex)上的劇烈混合後，在使用Lipofectin時產生平均直徑為大約250納米的納米顆粒，在使用改性EUDRAGITE時，產生平均直徑大約150nm的納米顆粒。通過透析提純納米顆粒的懸浮液。該懸浮液可以直接進一步加工，或可以通過凍幹分離納米顆粒。實施例2包含陽離子和陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的納米顆粒在用合適的人類細胞培養物的初步試驗中發現，當在陽離子EUDRAGITE(改性的)中添加例如10％比例的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物EUDRAGITL(改性的)時，可以實現核酸活性成分的最佳轉染速率。將2毫克DNA(核酸活性成分)，例如由具有例如3000至10000個鹼基對的雙鏈質粒DNA構成的基因治療載體，其包含將要在人類細胞中表達並具有意圖治療作用的基因，溶於4毫升pH7.4的磷酸鹽緩衝劑，並與2毫升小鼠單克隆抗人DNAIgM溶液(1毫克/毫升)混合併在37℃下培養1小時。然後將1.1毫升、4毫升(1毫克/毫升)改性EUDRAGITE(由25wt％甲基丙烯酸甲酯、25wt％甲基丙烯酸丁酯和50wt％甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物，低分子量，腎臟可通過的Mw＝大約21000)和0.4毫升(1毫克/毫升)改性EUDRAGITL(由50wt％甲基丙烯酸甲酯和50wt％甲基丙烯酸構成的共聚物，低分子量，腎臟可通過的Mw＝21000)混合併在緩慢攪拌下在37℃下保持大約30分鐘。在例如漩渦振蕩器上的劇烈混合後產生平均直徑為大約250納米的納米顆粒。通過透析提純納米顆粒的懸浮液。該懸浮液可以直接進一步加工，或可以通過凍幹分離納米顆粒。實施例3表面改性納米顆粒(包含陽離子(甲基)丙烯酸酯共聚物並具有陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物殼的納米顆粒)將2毫克DNA(核酸活性成分)，例如由具有例如3000至10000個鹼基對的雙鏈質粒DNA構成的基因治療載體，其包含將要在人類細胞中表達並具有意圖治療作用的基因，溶於4毫升pH7.4的Dulbecco磷酸鹽緩衝劑，並與2毫升小鼠單克隆抗人DNAIgM溶液(1毫克/毫升)混合併在37℃下培養1小時。然後將4毫升(1毫克/毫升)改性EUDRAGITE(由25wt％甲基丙烯酸甲酯、25wt％甲基丙烯酸丁酯和50wt％甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物，低分子量，腎臟可通過的Mw＝21000)混合併在緩慢攪拌下在37℃下保持大約30分鐘。此段時間後測量pH值並用0.001NHCl調節至7.4。混合入由改性EUDRAGITL(由50wt％甲基丙烯酸甲酯和50wt％甲基丙烯酸構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物，低分子量，腎臟可通過的，Mw＝大約21000)在磷酸鹽緩衝劑(pH7.4，0.5毫克/毫升)中形成的1毫升溶液(1mg/ml)，並且所得膠乳狀緩衝分散體通過添加0.001M檸檬酸而達到直至pH5.0。通過透析提純納米顆粒的懸浮液。該懸浮液可以直接進一步加工，或可以通過凍幹分離包覆的納米顆粒。實施例4通過將得自實施例1、2或3的納米顆粒包埋入包含殼聚糖並用酸調節至pH5.0至5.5的內部基質層中，製備黏膜粘附性的尚未包衣的丸粒(預製丸粒)黏膜粘附性溶液的製備將4克殼聚糖乙酸酯溶於20克水中。然後在快速攪拌下，加入2克檸檬酸一水合物。設定5.2的pH值。然後，在所得澄清的泛黃色粘稠溶液中添加0.4克十二烷酸鈉。在緩慢攪拌下向該溶液中混入得自實施例1、2或3的懸浮液。預製丸粒的製備使用流化床設備(Hüttling的Micro-Lab)，以5-8克/分鐘/千克的噴塗速率，在30℃的進入空氣溫度下將經混合的懸浮液噴塗到直徑為大約400-600微米的40克中性丸粒上。進入空氣在這種情況下被調節為35-45立方米/小時。這種情況下的收率為85-90％。實施例5(包衣)丸粒的製備在流化床法中用EUDRAGITL12.5(由50wt％甲基丙烯酸甲酯和50wt％甲基丙烯酸構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物，Mw＝大約200000，在異丙醇/丙酮3∶2中的12.5％濃度有機溶液)將根據實施例4製成的預製丸粒包衣。聚合物塗覆量為基於芯體重量計的40wt％。包衣用的懸浮液由以下物質組成EUDRAGITL12.553.3％檸檬酸三乙酯1.33％異丙醇38.3％滑石2.0％水5.0％獲得均勻包覆的抗胃液丸粒，其包覆層在十二指腸或空腸中在pH6.0以上快速溶解並釋放出黏膜粘附性預製丸粒。實施例6膠囊形式的多顆粒狀藥物製劑的製備用膠囊填充裝置將按實施例5製成的丸粒直接裝入硬明膠膠囊，尺寸0的膠囊，以產生具有550毫克填充重量的單位劑型。在口服後，膠囊在胃的pH範圍內快速溶解並釋放出丸粒，其在胃中已均勻分布。實施例7片劑形式的多顆粒狀藥物劑型的製備將按實施例5製成的丸粒與壓片助劑、粘結劑、崩解促進劑和潤滑劑一起配製。將550克丸粒與390克微晶纖維素、150克羧甲基澱粉鈉和10克硬脂酸鎂混合。將混合物在壓片機中壓製成總重量為1100毫克的小壓製件。在口服後，片劑在胃的pH範圍內崩解並釋放出丸粒，其在胃中已均勻分布。權利要求1.口服多顆粒狀藥物劑型，其包含平均直徑為50至2500微米的丸粒，這些丸粒基本上由下列部分構成a)包含納米顆粒的內部基質層，這些納米顆粒含有核酸活性成分並被包埋入由具有黏膜粘附作用的聚合物構成的基質中，其中該基質任選可包含其它製藥常用輔料，b)外部成膜化包衣，其基本上由任選可與製藥常用輔料，尤其是增塑劑一起配製的陰離子聚合物或共聚物構成，其特徵在於，將該多顆粒狀藥物劑型配製使得所含丸粒在胃的pH範圍內被釋放，通過陰離子聚合物或共聚物或其與輔料的配製劑及其層厚的選擇調節外部包衣，以使該包衣在腸中在4.0至8.0的pH範圍內在15至60分鐘內溶解，從而暴露出含活性成分的黏膜粘附性基質層，並且該層可以接合到腸黏膜上並在那裡釋放出活性成分，其中選擇具有黏膜粘附作用的聚合物以使其在基於外部包衣開始溶解時的pH值計±0.5pH單位的範圍內表現出至少ηb＝150至1000mPa·s的黏膜粘附作用和在15分鐘內10至750％的水吸收，且基質層中納米顆粒的活性成分含量最多為具有黏膜粘附作用的聚合物含量的40wt％。2.根據權利要求1的藥物劑型，其特徵在於納米顆粒具有20至1000納米的尺寸。3.根據權利要求1或2的藥物劑型，其特徵在於納米顆粒中所含的核酸以與陽離子物質形成的配合物形式存在。4.根據權利要求3的藥物劑型，其特徵在於陽離子物質是陽離子脂質、陽離子多肽和/或陽離子聚合物。5.根據權利要求4的藥物劑型，其特徵在於陽離子聚合物是具有叔或季氨基的(甲基)丙烯酸酯共聚物。6.根據權利要求5的藥物劑型，其特徵在於(甲基)丙烯酸酯共聚物由20-30wt％甲基丙烯酸甲酯、20-30wt％甲基丙烯酸丁酯和60-40wt％甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯形成的經自由基聚合的單元構成。7.根據權利要求3至6中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於納米顆粒中所含的核酸活性成分以與陽離子和陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物形成的配合物形式存在。8.根據權利要求7的藥物劑型，其特徵在於陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物含有5至60wt％的含陰離子基團的單體。9.根據權利要求7或8的藥物劑型，其特徵在於存在陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物，其由如下物質構成20至33wt％甲基丙烯酸和/或丙烯酸，5至30wt％丙烯酸甲酯和20至40wt％丙烯酸乙酯和大於10至30wt％甲基丙烯酸丁酯和非必要的0至10wt％能夠進行乙烯基共聚的其它單體，其中單體的比例合計為100wt％，條件是根據ISO11357-2，細目3.3.3的共聚物玻璃化轉變溫度(中點溫度Tmg)為55至70℃。10.根據權利要求3至9中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於納米顆粒包含平均分子量Mw為50000或更低的陽離子或陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物。11.根據權利要求1至10中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於納米顆粒具有採用平均分子量Mw為50000或更低的陰離子(甲基)丙烯酸酯共聚物的包囊。12.根據權利要求1至11中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於核酸活性成分是單鏈或雙鏈DNA或RNA或DNA-RNA嵌合體，其中可以存在有天然存在和/或非天然存在的合成改性核苷酸。13.根據權利要求1至12中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於核酸以與抗體和陽離子物質形成的配合物形式存在，所述抗體與核酸特異性結合。14.根據權利要求1至13中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於外部成膜化包衣是乙醇酸纖維素(Duodcell)、乙酸鄰苯二甲酸纖維素(CAP、Cellulosiacetas、PhEur、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、NF、Aquateric)、乙酸琥珀酸纖維素(CAS)、乙酸偏苯三酸纖維素(CAT)、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素(HPMCP、HP50、HP55)、乙酸琥珀酸羥丙基甲基纖維素(HPMCAS-LF、-MF、-HF)、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯(PVAP，Sureteric)、乙酸乙烯酯-乙烯基吡咯烷酮共聚物(PVAc，KollidonVA64)、乙酸乙烯酯∶巴豆酸9∶1共聚物(VAC:CRA，KollicoatVAC)和/或蟲膠。15.根據權利要求1至13中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於外部成膜化包衣由具有陰離子基團的單體含量為5至60wt％的(甲基)丙烯酸酯共聚物構成。16.根據權利要求1至15中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於外部包衣的層厚為20至200微米。17.根據權利要求1至16中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於內部基質包含C10至C20脂肪酸和/或C10至C20醇，包括它們的鹽、醚、酯或醯胺衍生物，和/或脂質和/或磷脂和/或脂質可溶性維生素和/或促滲劑。18.根據權利要求1至17中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於具有黏膜粘附作用的聚合物是殼聚糖，由20-40wt％甲基丙烯酸甲酯和60至80wt％甲基丙烯酸構成的(甲基)丙烯酸酯共聚物，和/或纖維素，特別是羧甲基纖維素鈉，交聯和/或未交聯聚丙烯酸，凝集素，藻酸鈉和/或果膠。19.根據權利要求18的藥物劑型，其特徵在於內部基質包含殼聚糖作為具有黏膜粘附作用的聚合物，其與在基質中或在其上塗覆有基質的芯體中或在該芯體上存在的酸或緩衝體系一起使用。20.根據權利要求19的藥物劑型，其特徵在於內部基質層包含殼聚糖並用酸或緩衝體系調節至pH5.0至5.5，並與在pH6.0至8.0的範圍中開始溶解的外部成膜化包衣組合。21.根據權利要求1至20中一項或多項的藥物劑型，其特徵在於在含活性成分的基質層和外部成膜化包衣層之間施塗隔離層。22.製備根據權利要求1至21中一項或多項的多顆粒狀藥物劑型的方法，其通過下列步驟進行a)以本身已知的方式將核酸活性成分與輔料一起配製成納米顆粒，b)通過噴塗到芯體上或在無芯體時通過旋轉團聚、沉澱或噴霧法，配製包含納米顆粒形式的核酸活性成分和具有黏膜粘附作用的聚合物並非必要地包含其它製藥常用輔料的內部基質層，以形成預製丸粒，並隨後c)通過噴塗將外部成膜化包衣施塗到預製丸粒上，其中包衣基本上由任選可與製藥常用輔料，尤其是增塑劑一起配製的陰離子聚合物構成，從而獲得含活性成分的包覆丸粒，和d)藉助製藥常用輔料並通過本身已知的方式，將所得丸粒加工成多顆粒狀藥物劑型，特別是加工成含丸粒的片劑、微型片劑、膠囊、囊劑或重構用粉末，其被配製使得所含丸粒在胃的pH範圍內被釋放。全文摘要本發明涉及包含尺寸為50至2500μm的丸粒的口服多顆粒藥物劑型，這些丸粒基本上由下列部分構成a)包含納米顆粒的內部基質層，這些納米顆粒含有核酸活性成分並被包埋在由具有黏膜粘附作用的聚合物構成的基質中，和b)外部成膜化包衣，其基本上由可任選與製藥常規輔料，尤其是增塑劑一起配製的陰離子聚合物或共聚物構成。文檔編號A61K31/7088GK101060835SQ200580037293公開日2007年10月24日申請日期2005年11月5日優先權日2004年12月10日發明者R·利齊奧,H-U·彼得萊特,D·特魯普提,M·古特斯查克申請人:羅姆有限公司