用於治療呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和copd的糖皮質激素與磷酸二酯酶－4抑制劑的...的製作方法
2023-07-19 16:47:16 2
專利名稱：用於治療呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和copd的糖皮質激素與磷酸二酯酶－4抑制劑的 ...的製作方法
技術領域：
本發明涉及糖皮質激素，特別是氯替潑諾，和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑(PDE-4-抑制劑)，特別是羥基吲哚-衍生物N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基]-2-氧代乙醯胺在呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)的治療中同時、順序或分別施用的新組合。
過敏性疾病和慢性阻塞性肺病(COPD)是以特徵為炎性細胞數量增加和炎症介質的釋放或分泌增加的炎性過程為基礎。近20年的研究已經揭示了呼吸道炎症是哮喘和COPD中呼吸機能障礙的中心環節。在鼻子和眼睛的過敏性性炎症中已觀測到類似的變化。通常，黏膜被大量細胞(包括肥大細胞，嗜酸性細胞和胸腺依賴性細胞)浸潤。這些細胞釋放出大量介質(尤其包括白介素-4(IL-4)，GM-CSF(粒細胞/巨噬細胞集落-刺激因子)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)，其最終引起炎症以及過敏性疾病和COPD的症狀。
現在，對所有過敏性疾病都採用類似的抗炎治療方法。這些疾病的病理學已經揭示出患者黏膜中的炎性過程根本上決定著症狀活動。糖皮質激素是目前最有效的用於治療哮喘、鼻炎或結膜炎的抗炎化合物。優選使用可通過吸入、鼻內或眼內局部施用的活性成分。在可吸入的糖皮質激素成功用於治療和預防哮喘患者的呼吸性炎症和永久性肺損傷的基礎上，該治療方法也已經被用於COPD患者，雖然尚無數據能清楚地證明這些活性成分在COPD患者中的長期效果(Whittaker AJ，Spiro SG；Curr Opin Pulm Med 2000；6104-9)。
糖皮質激素的一個最重要的抗炎特性來自對細胞因子釋放的抑制。眾所周知某些細胞因子例如IL-4，IL-5，GM-CSF和TNF-α涉及呼吸性炎症。糖皮質激素的功效可在某種程度上通過其對細胞因子合成和細胞因子釋放的抑制作用進行解釋(Marx etal.；Pulm PharmacolTher 2002；157-15)。
糖皮質激素的一個缺點來自其可能的全身性副作用諸如，例如，生長延遲或骨質疏鬆。降低局部施用糖皮質激素的副作用的風險的切實方法包括使用活性成份的最低有效劑量或限制活性成分的全身性利用率。通過使用所謂軟類固醇(soft steroids)開創了一種新途徑。與其它糖皮質激素(其中大多數僅在肝中經降解而轉變為藥效上無活性的代謝產物)相反，軟類固醇甚至在其給藥(鼻內，經眼睛或肺內)的位點上即發生部分代謝性失活。在這種局部部分代謝後，僅非常少的(或沒有)藥效上具有活性的物質到達全身性血液循環，因此預期在實施時不會出現類固醇-特異性副作用。該類新的活性成分的最突出的實例是氯替潑諾，其已獲準用於治療過敏性結膜炎和葡萄膜炎。
過敏性疾病和COPD的另一類治療包括磷酸二酯酶-4抑制劑。磷酸二酯酶可導致環腺苷一磷酸(cAMP)和環磷酸鳥苷(cGMP)的失活。磷酸二酯酶-4的抑制會導致細胞中cAMP的增加，然後導致實質上所有促炎症細胞或免疫細胞功能下調。疾病諸如哮喘、結膜炎、鼻炎或慢性阻塞性肺病的病理所涉及的炎性細胞優先表達磷酸二酯酶-4是令人感興趣的。
近年來在可用於治療過敏性疾病、哮喘或COPD的磷酸二酯酶-4抑制劑的發展中已取得了進展。例如活性成分羅氟司特、西洛司特或吡拉米司特已經顯示出對細胞因子釋放的體外抑制活性和在哮喘模型中的療效(Torphy et al.；Pulm Pharmacol Ther 1999；12131-5；Poppe et al.；Allergy 2000；55(Suppl 63)270；Giembycz MA；Expert Opin Investig Drugs 2001；101361-79；Ezeamuzie CI；EurJ Pharmacol 2001；41711-8)。DE 19 818 964，DE 19 917 504和US 6,251,923所公開的一類新的經取代的羥基吲哚，及DE 10 053 275和PCT/EP 01/12376所公開的新的7-氮雜吲哚是特別令人感興趣的。
目前令人驚訝地發現糖皮質激素和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑的新組合在治療呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和/或慢性阻塞性肺病中是有益的。磷酸二酯酶-4抑制劑，特別是羥基吲哚衍生物N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基]-2-氧代乙醯胺(可經口服、鼻內或吸入施用)，與局部的糖皮質激素，特別是氯替潑諾的添加治療能顯著地提高療效，且能顯著性地發生較少的副作用。
本發明的目的在於改善呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和慢性阻塞性肺病的治療，及其預防。存在於組合中的磷酸二酯酶-4抑制劑和糖皮質激素能成功地控制病理狀態下的炎症。此外，磷酸二酯酶-4抑制劑添加治療能導致糖皮質激素的較少使用，由此降低副作用的危險。
因此，本發明涉及包含固定或自由組合的糖皮質激素與至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑的組合物，和其用於製備藥劑的用途。本發明還涉及用於治療呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和/或慢性阻塞性肺病的藥劑，其包括固定或自由組合的作為活性成分的糖皮質激素和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑，及其製備方法。
為了本發明的目的，可以使用所有糖皮質激素。優選使用所謂的軟類固醇。根據本發明使用的糖皮質激素可以引用的實例是倍氯米松(9-氯-11β，17，21-三羥基-16β-甲基-1，4-孕二烯-3，20-二酮)，特別是倍氯美松雙丙酸酯，環索奈德(16α，17-亞丁二氧基-11β，21-二羥基-1，4-孕二烯-3，20-二酮)，環索奈德(參見，例如WO 98/52542及其中引用的文件)，氟替卡松(S-(氟甲基)6α，9-二氟-11β-硫代羧酸酯)，特別是丙酸氟替卡松，莫米松(9，21-二氟-11β，17-二羥基-16α-甲基-1，4-孕二烯-3，20-二酮)，特別是莫米松糠酸酯，和氯替潑諾，特別是氯替潑諾碳酸乙酯(氯甲基17α-[(乙氧羰基)氧]-11β-羥基-3-氧代androsta-1，4-二烯-17β-羧酸酯)。
在本發明優選實施方案中，氯替潑諾和其藥學上可接受的酯，特別是氯替潑諾碳酸乙酯，被用作軟類固醇。例如德國專利DE 3 126 732(相應美國專利4,996,335和相應日本專利JP-89011037)中已描述了氯替潑諾和氯替潑諾碳酸乙酯的製劑。
例如德國專利DE 3 786 174(相應專利EP 0 334 853和相應美國專利4,710,495)中描述了適於本發明的其它軟類固醇。
為了本發明的目的，可以使用所有磷酸二酯酶-4抑制劑。它們包括(特別是但非局限於)DE 19 818 964，DE 19 917 504和US 6,251,923所描述的經取代的羥基吲哚衍生物，和DE 10 053 275和PCT/EP01/12376所描述的新的7-氮雜吲哚衍生物。根據本發明使用的磷酸二酯酶-4抑制劑的實例是咯利普蘭(R)-4-[3-(環戊氧基)-4-甲氧基苯基]-2-吡咯烷酮)，羅氟司特(Byk-Gulden)，吡拉米司特(Rhone-Poulenc Rorer)，西洛司特(GlaxoSmithKline)和羥基吲哚衍生物N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-(1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基)-2-氧代乙醯胺。特別優選的是經取代的羥基吲哚衍生物N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基]-2-氧代乙醯胺(下文稱為「DFHO」)，其已被公開於例如DE 19 818 964中。本領域技術人員眾所周知的是，磷酸二酯酶-4抑制劑還能以藥學上可接受的鹽而被應用。
本發明的糖皮質激素(特別是軟類固醇)與至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑的組合可以是預防性地和在出現症狀後施用。其還可用於延緩或防止疾病的進展。
在優選的實施方案中，採用的是活性成分氯替潑諾碳酸乙酯與N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基]-2-氧代乙醯胺(DFHO)的組合。
下面對實施方案的描述意在具體解釋而非限制本發明。
抑制LPS-刺激的單核細胞釋放GM-CSF將EDTA化的人全血與Hanks′緩衝液按1∶1的比例混合。用最多40ml的血Hanks′混合液，小心地覆蓋Histopaque 1077溶液(15ml)，然後於室溫離心(2000rpm)30分鐘。吸取白細胞富集帶，用Hanks』緩衝液洗滌兩次然後轉至包含Glutamax I(Gibco BRL，Eggenstein)的RPMI 1640培養基。經由與細胞培養瓶超過2小時的附著而移除所述單核細胞。然後用培養基充分洗滌細胞以除去非附著細胞。將所得單核細胞用包含10％熱滅活的胎牛血清(FCS)和100U/ml青黴素和100μg/ml鏈黴素的RPMI 1640培養基在CO2培養箱中培養(5％CO2，96％相對溼度，37℃)。
將初級單核細胞以5×105細胞/孔接種在24-孔板中。用所述試樣預孵育細胞30分鐘。然後加入LPS，然後持續孵育24小時。抽取上清液，通過ELISA進行檢測。
通過用OptEIATM人GM-CSF ELISA試驗(Pharmingen，San Diego)測定細胞培養上清液中分泌的人GM-CSF的量。其在微量滴定板中實施。將抗-人單克隆抗體作為抗體與滴定板4℃過夜結合。在該包被和三次洗滌後，通過測定稀釋溶液TM(含有10％FCS的PBS，pH7.0)(Pharmingen，San Diego)的方法於室溫1小時飽和非特異性結合。隨後與試樣和標準物(重組人GM-CSF)於4℃孵育過夜。試樣可不經稀釋而製備或以1∶50的稀釋度(根據操作步驟自含有500pg/ml人GM-CSF的儲備液開始的標準稀釋度)製備。經由生物素化單克隆抗-人GM-CSF抗體和抗生物素蛋白-辣根過氧化物酶試劑於室溫1小時來檢測結合的人GM-CSF。所有步驟後，都用PBS/0.05％Tween 20洗滌5或7次。酶活性通過採用底物溶液TM(四甲基聯苯胺(TMB)和過氧化氫，Pharmingen，San Diego)作為底物於室溫30分鐘進行測定。用1M磷酸終止酶-底物反應，檢測450nm消光度。
結果首先，分別對N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基]-2-氧代乙醯胺(DFHO)和氯替潑諾建立劑量-活性曲線。從這些曲線中，分別計算出當DFHO為3.2μM氯替潑諾為53.7nM，從人單核細胞釋放的GM-CSF的IC50。在進一步的試驗中，在存在低於IC50濃度的各其它物質的情況下確定DFHO和氯替潑諾的IC50值。在這些情況下，加入5nM DFHO，會使氯替潑諾的IC50從53.7nM降至13.4nM。反之，加入10nM氯替潑諾會使DFHO的IC50從3.2μM降至0.06μM。
氯替潑諾對於從LPS-刺激的單核細胞中TNF和GM-CSF的釋放的所觀測到的IC50值與現有技術中對其它細胞系統所描述的IC50值相符。這意味著所使用的細胞系統是有效和適宜的，而為了採用該系統的試驗的目的而需要的研究所得到的結論是可靠的。DFHO的IC50值與現有專利文件中所描述的那些值相符。
當給予5nM DFHO時，氯替潑諾對TNF釋放的IC50的降低為65％而對GM-CSF釋放的降低則為75％。5nM DFHO的濃度遠低於該物質的IC50(分別為5.7μM和3.2μM)，因此當單獨給予5nM DFHO時未檢測到效果。
反之，當同時給予10nM氯替潑諾時，DFHO對TNF釋放的IC50的降低為99％而對GM-CSF釋放的降低則為98％。10nM氯替潑諾濃度遠低於該物質的IC50(分別為85.5nM和53.7nM)，因此當單獨給予10nM氯替潑諾時未檢測到效果。
此處本領域技術人員無法預測到的驚人發現是通過同時施用氯替潑諾和DFHO對抑制TNF和GM-CSF釋放產生了超加性效果。
下述劑型特別適於施用本發明的活性成分的組合。
由此，存在於組合中的活性成分可以例如作為兩種口服劑，或一種活性成分為口服劑形式而另一種為局部形式(鼻內，吸入)而分開施用。
在本發明的一個實施方案中，磷酸二酯酶-4抑制劑可經口服施用。此時採用慣用的藥物劑型，例如片劑、糖漿劑、膠囊、緩釋劑(持續釋放劑)、錠劑或泡騰顆粒劑。
固體藥物劑型例如片劑可包括惰性成分和載體諸如，例如，碳酸鈣、磷酸鈣、磷酸鈉、乳糖、澱粉、甘露醇、藻酸鹽、明膠、瓜爾膠、硬脂酸鎂或硬脂酸鋁、甲基纖維素、滑石、膠體矽、矽油、高分子量脂肪酸(例如硬脂酸)、瓊脂或植物性或動物性脂或油、固體高分子聚合物(例如聚乙二醇)；適於口服施用的製劑可(適當情況下)包括調味劑或增甜劑。膠囊形式中的組合物可通過一般慣用方法，例如通過使用前述載體在硬明膠膠囊殼中製備。對於軟明膠膠囊形式中的組合物，可以使用通常用於製備分散液或懸液的藥學載體，諸如，例如，可摻入軟明膠膠囊殼中的水性樹膠、纖維素、矽酸鹽或油。糖漿劑一般由化合物或其鹽在液體載體諸如，例如，乙醇、花生油、橄欖油、甘油或水中的懸液或溶液組成，可以存在調味劑和著色劑。
通過局部施用本發明的活性成分的組合能在即使較低的劑量下獲得治療上有效的濃度。由此原因，出於本發明的目的，優選局部用劑型(包括特別是鼻內和吸入劑型)。
鼻內製劑可用水溶液或油溶液、懸液或乳液進行施用。對於通過吸入來施用活性成分，其可採用以乾粉或氣霧劑呈遞的懸液、溶液或乳液的形式施用，其可以使用所有慣用噴射劑。
在本發明的優選實施方案中，磷酸二酯酶-4抑制劑組合物的形式是鼻腔噴霧劑或計量氣霧劑或用於吸入的計量乾粉。糖皮質激素組合物也優選局部用製劑，而對於軟類固醇氯替潑諾，鼻腔噴霧劑、計量氣霧劑或用於吸入的計量乾粉的配製方式也是優選的。
根據本發明應用的軟類固醇氯替潑諾碳酸乙酯優選在水中與諸如防腐劑、穩定劑、張度劑、稠化劑、懸液穩定劑、調整pH的輔料、緩衝系統和溼潤劑的其它成分一起被配製為懸液。關於適宜輔料的進一步描述可以參考例如DE 19 947 234。
本發明的藥物製劑可(除糖皮質激素和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑活性成分外)進一步包括諸如慣用防腐劑、穩定劑、稠化劑、調味劑等成分。
示例性實施方案氯替潑諾碳酸乙酯(1％)鼻腔噴霧懸液
製備將45kg純水加至具有均質化裝置的適宜攪拌容器中，然後將其中的微晶纖維素RC 591以高速均質化。然後經攪拌將物質聚山梨酯80，山梨醇溶液，依地酸鈉和苯扎氯銨一起溶解。
隨後將活性成分氯替潑諾碳酸乙酯高速均質化直至製成均勻懸液。然後用純水補至終體積然後進一步均質化。隨後將懸液排氣以便除去產生的氣泡。然後將所得懸液裝入瓶子中，隨後為瓶子裝備適宜的鼻腔噴霧泵。
在有益的實施方案中，該組合的活性組分的形式為固定組合，由此簡化患者使用。在此情況下，可同時、順次或分開地以自由或固定的組合施用活性成分。其可均為單劑型和作為兩個分開的劑型(可相同或不同)。遞送可同時、同時或分開進行，分開進行是指短和長的間隔諸如，例如，傍晚施用氯替潑諾和早晨施用磷酸二酯酶-4抑制劑，或反之亦然。
活性成分可每日一次至六次進行施用。活性成分優選每日一至兩次進行施用，特別優選每日兩次。一種或多種磷酸二酯酶-4抑制劑的劑量約為0.1～20mg/日·成人，優選0.2～5mg。糖皮質激素的劑量可以在許可的劑量範圍內，即0.1～1.6mg/日，優選0.2～0.8mg/日。實際的劑量要依賴於患者的一般狀況(年齡、體重等)和疾病的嚴重程度。
權利要求
1.包含固定或自由組合的糖皮質激素和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑的組合物。
2.如權利要求1的組合物，其特徵在於磷酸二酯酶-4抑制劑是咯利普蘭、吡拉米司特、羅氟司特、西洛司特、羥基吲哚衍生物N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基]-2-氧代乙醯胺(DFHO)或其藥學上可接受的鹽或其混合物。
3.如權利要求1或2的組合物，其特徵在於糖皮質激素是軟性類固醇。
4.如權利要求1-3任一項的組合物，其特徵在於糖皮質激素是倍氯米松、布地奈德、環索奈德、氟替卡松、莫米松或氯替潑諾或其藥學上可接受的酯。
5.如權利要求3或4的組合物，其特徵在於糖皮質激素是氯替潑諾碳酸乙酯。
6.用於治療呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和/或慢性阻塞性肺病的藥劑，其包含固定或游離組合的作為活性成分的糖皮質激素和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑，其中視需要聯用慣用的賦形劑或載體。
7.如權利要求6的藥劑，其特徵在於經口服施用。
8.如權利要求6的藥劑，其特徵在於經局部施用。
9.如權利要求8的藥劑，其特徵在於其可彼此同時、順次或分開地，鼻內或經吸入施用。
10.如權利要求8或9的藥劑，其特徵在於其是可吸入的液體或固體製劑。
11.如權利要求6的藥劑，其特徵在於一種活性成分經口服施用而至少一種活性成分經局部施用。
12.如權利要求6的藥劑，其特徵在於磷酸二酯酶-4抑制劑可經口服施用。
13.製備用於治療和預防呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和/或慢性阻塞性肺病的藥劑的方法，所述藥劑包括作為活性成分的糖皮質激素和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑，所述方法的特徵在於將糖皮質激素和磷酸二酯酶-4抑制劑各自或一起混合，其中視需要地包括慣用的賦形劑或載體，並將以這種方式獲得的混合物轉化為適用的劑型。
14.糖皮質激素和至少一種磷酸二酯酶-4抑制劑的固定或游離組合用於製備用於治療和預防呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和/或慢性阻塞性肺病的藥劑的用途。
15.如權利要求14的用途，其特徵在於糖皮質激素是氯替潑諾碳酸乙酯且磷酸二酯酶-4抑制劑是羥基吲哚衍生物N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟苄基)-5-羥基吲哚-3-基]-2-氧代乙醯胺(DFHO)。
全文摘要
本發明涉及糖皮質激素，特別是氯替潑諾，和至少一種磷酸二酯酶－4抑制劑(PDE－4－抑制劑)，特別是羥基吲哚－衍生物N－(3，5－二氯吡啶－4－基)－2－[1－(4－氟苄基)－5－羥基吲哚－3－基]－2－氧代乙醯胺在呼吸性疾病、過敏性疾病、哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)的治療中同時、順次或分開施用的新組合。
文檔編號A61P43/00GK1674939SQ03819057
公開日2005年9月28日 申請日期2003年8月4日 優先權日2002年8月9日
發明者M·洛克, R·赫曼 申請人:維亞特裡斯兩合公司