兩用elisa試劑盒的製作方法
2023-12-04 19:29:51
兩用elisa試劑盒的製作方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種兩用ELISA試劑盒，解決了現有酶標板加樣時操作複雜、費時費力、可靠性差的問題。技術方案包括盒體，以及盒體內的酶標板、標準品管、抗體管、稀釋液瓶和底物瓶，所述底物瓶包括單組分TMB底物瓶以及兩個化學發光底物瓶；所述酶標板包括板體及多個板孔，所述板孔具有非透明的側壁以及透明的底面，每個板孔的透明底面的外壁上均對應覆蓋有一片非透明的不乾膠層。本實用新型結構簡單、操作簡單、準確性好、省時省力，既可用於普通的色原法酶聯免疫吸附實驗，又可用於化學發光的酶聯免疫吸附實驗。
【專利說明】兩用ELISA試劑盒
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及免疫學檢測【技術領域】，具體的說是一種兩用ELISA試劑盒。
【背景技術】
[0002]現代免疫學中，ELISA是人們進行免疫檢測最普遍的手段，隨著科技的發展和科學研究的深入，科技人員對於ELISA的技術要求也越來越高，客戶在科研中對不同樣品的檢測，所需要的精度不一樣，所以可能對一個指標的檢測會同時用到化學發光試劑盒和普通TMB底物顯色的試劑盒進行檢測，這就需要備劑不同的試劑盒。
[0003]而不同的試劑盒，底物不同，酶標板也並不完全同。從底物類型上來分，酶標板分為:透明板和不透明板，透明板主要用於常規的色原顯色的酶聯免疫吸附試驗；不透明白目前主要有乳白色和黑色，其主要用於化學發光的酶聯免疫吸附試驗，目前該種板子生產廠家偏少，主要是因為其需求少。然而做為高靈敏度的代表的化學發光酶聯免疫實驗又是科研工作者經常涉及的問題，但是往往需求量又不大，所以經常為了一塊板子找遍東西南北，很多廠家有這種板子，但是量少了，上家不願意賣，或者只有整版型的，沒有可以拆卸的。
[0004]另一方面，在ELISA實驗過程中，樣品中往往有沉澱，或者膠體狀物質，需要實驗人員在ELISA實驗之前對樣品逐個離心，有時候一些絮狀的油脂物質並不是離心就能去除的，特別是對於血漿樣品，很容易產生纖維蛋白析出。而這些顆粒物質或者絮狀沉澱往往又嚴重影響實驗結果，主要是因為，這些塊狀或者膠狀物質粘結在板孔底部影響樣品與酶標板有效結合，同時這些塊狀或者膠狀物質非特異性的吸附樣品中待檢物或者檢測抗體，造成檢測結果亂七八糟；以往科研人員解決這些問題要先把樣品加入到離心管裡面，通過高速離心之後取上清，這樣操作不但費時費力，而且很容易在操作過程中造成樣品損失或者非特異性吸附，如果樣品過多，反覆離心還容易造成記號標錯，混淆樣品。
【發明內容】
[0005]本實用新型的目的是為了解決上述技術問題，提供一種結構簡單、操作方便、準確性好、省時省力，既可用於普通的色原法酶聯免疫吸附實驗，又可用於化學發光的酶聯免疫吸附實驗的兩用ELISA試劑盒。
[0006]技術方案包括盒體，以及盒體內的酶標板、標準品管、抗體管、洗滌液瓶、稀釋液瓶和底物瓶，所述底物瓶包括單組分TMB底物瓶以及兩個化學發光底物瓶；所述酶標板包括板體及多個板孔，所述板孔具有非透明的側壁以及透明的底面，每個板孔的透明底面的外壁上均對應覆蓋有一片非透明的不乾膠層。
[0007]所述板孔的上端開口處插裝有濾芯，所述濾芯包括濾蓋和濾膜，所述濾蓋上開有膜孔，所述膜孔中裝有濾膜。
[0008]所述濾蓋包括上段蓋體和下段蓋體，所述上段蓋體外徑大於板孔直徑，下段蓋體外徑小於等於板孔直徑。
[0009]所述濾膜位於下段蓋體對應的膜孔中，使濾膜上方的膜孔形成一個盛液槽。
[0010]針對【背景技術】中指出的試劑盒不通用的問題，除試劑盒內底物不同外，主要集中在酶標板不通用的問題上，發明人考慮對板孔進行改進，將板孔的側壁製成非透明，而將底面設計成透明，然後在每個板孔的透明底面的外壁上覆蓋非透明的不乾膠層。由於不乾膠層能夠方便的撕落，這樣，當某個板孔需要進行普通的色原法酶聯免疫吸附實驗時，只需撕下對應那一片的不乾膠層，露出相應板孔的透明底面即可；而當需要進行化學發光的酶聯免疫吸附實驗，由於不乾膠層的存在，使板孔的側面和底面均為不透明的狀態，可直接使用酶標板上的板孔即可。所述非透明可以設計為常用的白色或黑色。通過上述結構改進，實現了一板兩用的目的，非常靈活方便。基於酶標板改進後，可同步增加試劑盒內相應實驗用底物瓶，同時放入用於普通的色原法酶聯免疫吸附實驗的單組分TMB底物瓶，以及用於化學發光的酶聯免疫吸附實驗的兩個化學發光底物瓶(分別裝有化學發光底物A和底物B)，
[0011]進一步的，在酶標板的板孔上加設一個濾芯，使濾芯插裝在板孔的上端開口處，濾蓋開有裝有濾膜的濾孔，向板孔中加樣時，是將樣品加入到濾膜上，濾膜可以有效的阻擋大顆粒物質的通過，而不會阻擋蛋白等物質滲入。當加樣量較大時，將濾蓋分為上、下兩段蓋體，使濾膜設置在下段蓋體對應的膜孔中，一方面便於濾芯由板孔上插拔，另一方面，也使濾膜上方的膜孔形成一個盛液槽，以利於加樣、過濾和離心，防止樣品由膜濾中溢出。加樣時候只需要將樣品加入到濾膜上，然後進行整板的離心，然後將拔出濾芯就可以進行後續的實驗，後續的操作與ELISA試劑盒相同，無需將樣品單獨加入離心管後離心分離。
[0012]本實用新型試劑盒結構簡單、改造方便、操作簡便、省時省力、可靠性高，能有效避實驗中樣品混淆差錯的發生，一個試劑盒既可用於普通的色原法酶聯免疫吸附實驗，又可用於化學發光的聯免疫吸附實驗，非常靈活方便。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0013]圖1為本實用新型示意圖。
[0014]圖2為酶標板的主視圖。
[0015]圖3為板孔及濾芯的剖面放大圖。
[0016]其中，1-板體、2_板孔、2.1-側壁、2.2_底面、2.3_不幹I父層、3_濾芯、4_濾蓋、4.1-上段蓋體、4.2-下段蓋體、5_膜孔、6_濾膜、7_盒體，8-酶標板、9-標準品管、10-抗體管、11-稀釋液瓶、12-單組分TMB底物瓶、13-終止液瓶、14-發光化學底物瓶、15-洗滌液瓶。
【具體實施方式】
[0017]下面結合附圖對本實用新型作進一步解釋說明:
[0018]參見圖1，所述兩用ELISA試劑盒包括盒體7，以及盒體I內的酶標板8 (板孔內包被有捕捉抗體)、標準品管9 (內裝有標準品)、抗體管10 (內裝有HRP標記的捕捉抗體)、稀釋液瓶11 (內裝有標準品或樣品稀釋液)、單組分TMB底物瓶12 (內裝有單組份TMB底物)、洗滌液瓶15 (內裝有洗滌液)、終止液瓶13 (內裝有底物終止液)、和兩個發光化學底物瓶14 (分別裝有發光化學底物A和發光化學底物B)。本實用新型酶標板8包括板體I以及板體I上的多個板孔2 (板孔2內包被有捕捉抗體)，所述板孔2的上端開口處插裝有濾芯3，所述濾芯3包括濾蓋4和濾膜6，所述濾蓋4包括上段蓋體4.1和下段蓋體4.2，所述上段蓋體4.1外徑大於板孔2直徑，下段蓋體4.2外徑小於等於板孔2直徑。這樣有利於下段蓋體4.2插入板孔中實現與板孔2的插接，而露出在板孔2外的上段蓋體4.1則能夠方便操作者插拔，不會出現濾芯掉落入板孔2內的意外情況發生。所述下段蓋體4.2的外徑最好與板孔2匹配，保證插裝時兩者處於緊密連接的狀態，利於加樣，也保證離心操作時濾芯不會由板孔2中脫出。進一步的，所述濾膜6最好安裝在下段蓋體4.2對應的膜孔5中，這樣，濾膜6上方的膜孔可以形成一個盛液槽,一次樣加樣量大時,樣品可以集聚在上述盛液槽緩慢過濾，而不會導致大量加樣時樣品由濾芯溢出的問題發生。所述膜濾6為常用的硝酸纖維素膜、醋酸纖維素膜或者尼龍膜，孔徑為0.22um，使用之前應吸附足量的與待檢樣品非相關的蛋白，如濾膜經過I % BSA的PBS溶液浸泡，吸附足量的BSA蛋白，以防止後期使用中待檢樣品被此膜非特異性吸附；該膜可以有效的阻擋大顆粒物質的通過，而不會阻擋蛋白等物質滲入。
[0019]加樣時，取酶標板8，將樣品滴加至濾芯3的濾膜6上進行過濾，然後進行整板的離心，然後操作者握住蓋體上段4.1將濾芯3拔除就可以進行後續的實驗，後續的操作同現有技術。
[0020]針對不同酶聯免疫吸附實驗對板孔2的要求，所述板孔具有非透明的側壁2.1以及透明的底面2.2，每個板孔2透明的底面2.2外壁上均對應覆蓋有一片非透明的不乾膠層2.3。這樣，當某個板孔2需要進行普通的色原法酶聯免疫吸附實驗時，只需撕下對應那一片的不乾膠層2.3，露出相應板孔2的透明底面2.2即可；而當需要進行化學發光的酶聯免疫吸附實驗時，由於不乾膠層2.3的存在，使板孔2的側壁2.1和底面2.2均為不透明的狀態，可直接使用酶標板上的板孔即可，這樣可以在一塊酶標板上實現有的板孔用來做普通的色原法酶聯免疫吸附實驗，而有的孔板用來做化學發光的酶聯免疫吸附實驗，酶標板的應用變得非常靈活簡便。
【權利要求】
1.一種兩用試劑盒，包括盒體，以及盒體內的酶標板、標準品管、抗體管、洗滌液瓶、稀釋液瓶和底物瓶，其特徵在於，所述底物瓶包括單組分118底物瓶以及兩個化學發光底物瓶；所述酶標板包括板體及多個板孔，所述板孔具有非透明的側壁以及透明的底面，每個板孔的透明底面的外壁上均對應覆蓋有一片非透明的不乾膠層。
2.如權利要求1所述的兩用￡[1「試劑盒，其特徵在於，所述板孔的上端開口處插裝有濾芯，所述濾芯包括濾蓋和濾膜，所述濾蓋上開有膜孔，所述膜孔中裝有濾膜。
3.如權利要求2所述的兩用此試劑盒，其特徵在於，所述濾蓋包括上段蓋體和下段蓋體，所述上段蓋體外徑大於板孔直徑，下段蓋體外徑小於等於板孔直徑。
4.如權利要求2或3所述的兩用試劑盒，其特徵在於，所述濾膜位於下段蓋體對應的膜孔中，使濾膜上方的膜孔形成一個盛液槽。
【文檔編號】G01N33/53GK204214870SQ201420625733
【公開日】2015年3月18日 申請日期:2014年10月27日 優先權日:2014年10月27日
【發明者】冷毅斌, 劉旻, 吳娟, 胡勤芹, 王長樂 申請人:武漢伊萊瑞特生物科技有限公司