一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法
2023-12-05 00:31:31
一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法
【專利摘要】本發明涉及一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，屬於植物化學【技術領域】。它包括以下步驟：a、按重量份數，取金盞菊1份、石油醚2～7份和氫氧化鈉乙醇溶液1～3份，在氮氣保護下於30℃～70℃的條件下加熱1～3小時，隨後加入去離子水至葉黃素結晶析出，過濾，得葉黃素粗品；b、將所述葉黃素粗品用氯仿溶解，上樣於聚醯胺層析柱，先用水洗脫，再用甲醇-水梯度洗脫，合併流份，濃縮，即得高純度葉黃素。本發明的有益效果是：該方法簡單可行，成本低，所得葉黃素純度高、收率高。
【專利說明】一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於植物化學【技術領域】，具體涉及一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法。
【背景技術】
[0002]葉黃素(lutein)又名「植物黃體素」，屬含氧的四萜類類胡蘿蔔素，是蔬菜、水果、花卉等植物中廣泛存在的天然抗氧化劑，具有良好的抵禦游離基在人體內造成的細胞與器官損傷的能力，可預防由於機體衰老引發的冠心病、心血管硬化和腫瘤等疾病。另外，葉黃素是眼睛中僅有的兩種類胡蘿蔔素之一，對於預防老年性眼球視網膜黃斑區病變、白內障等眼部疾病具有獨特的功效。葉黃素呈鮮豔黃色，不溶於水，易溶於氯仿、四氫呋喃等有機溶劑，具有耐光、熱、酸、鹼，著色能力強等特點。作為一種具有雙重功效(增色和保健)的食品、醫藥添加劑，葉黃素在食品、藥品、化妝品等行業中受到人們越來越多的關注。
[0003]葉黃素的結構中有3個手性中心，因此存在多種異構體，化學合成比較困難。目前，葉黃素主要來自於植物提取，金盞菊中含有豐富的葉黃素，是近年來葉黃素提取的主要植物資源。植物中葉黃素多以葉黃素酯形式存在，游離葉黃素可被人體直接吸收利用，而葉黃素酯則必須在體內水解成游離葉黃素後才能被吸收。因此，葉黃素的提取工藝中，多採用皂化方式，將葉黃素酯轉變為游離態。
[0004]現有報導的葉黃素製備主要採用溶劑提取、皂化再經重結晶的方法。中國專利(申請號200810195251.4) 「葉黃素提取工藝」中採用正己烷-丙酮-甲醇複合溶劑進行葉黃素的提取，再通過氫 氧化鉀醇溶液進行皂化反應，反應產物用去離子水洗滌，離心得粗品，再用四氫呋喃/去離子水體系進行重結晶，所得晶體再經去離子水或乙醇洗滌，乾燥得葉黃素晶體。該方法存在耗時長、溶劑消耗量大、溶劑不易回收的問題。中國專利(申請號200510111767.2) 「葉黃素脂肪酸酯和葉黃素的製備方法」中採用大孔吸附樹脂提純葉黃素，採用石油醚-甲醇體系進行洗脫，但因石油醚與甲醇互溶性差，使得柱層析效果不理想。中國專利(申請號200810184478.9) 「從萬壽菊中提取葉黃素酯類化合物的方法」，採用矽膠精製葉黃素酯，但矽膠多為一次性使用，生產成本大，且經矽膠吸附後葉黃素酯有部分損失。綜上所述，針對現有技術存在的問題，提出操作簡便、成本低、生產周期短、產品純度高的葉黃素提取新方法，是提高金盞菊植物資源利用率、實現葉黃素大規模產業化生產亟待解決的關鍵問題。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，該方法簡單可行，成本低，所得葉黃素純度高、收率高。
[0006]本發明所採取的技術方案是一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，包括以下步驟:
[0007]a、按重量份數，取金盞菊1份、石油醚2~7份和氫氧化鈉乙醇溶液I~3份，在氮氣保護下於30°C~70°C的條件下加熱I~3小時，隨後加入去離子水至葉黃素結晶析出，過濾，得葉黃素粗品；
[0008]b、將所述葉黃素粗品用氯仿溶解，上樣於聚醯胺層析柱，先用水洗脫，再用甲醇-水梯度洗脫，合併流份，濃縮，即得高純度葉黃素。
[0009]特別優選的，用甲醇-水梯度洗脫時，採用甲醇:水=50~100:50~O的洗脫劑來進行洗脫。
[0010]作為優選，所述步驟a中的石油醚選用正己烷、丙酮、乙酸乙酯或四氫呋喃中的一種進行替換。
[0011]作為優選，所述步驟a中氫氧化鈉乙醇溶液的濃度為0.05~0.2g/ml。
[0012]作為優選，所述氫氧化鈉乙醇溶液選用氫氧化鈉甲醇溶液、氫氧化鈉丙醇溶液、氫氧化鉀甲醇溶液、氫氧化鉀乙醇溶液或氫氧化鉀丙醇溶液中的一種進行替換。
[0013]作為優選，所述步驟a中在過濾之後，加入水洗的工藝步驟。 [0014]作為優選，所述步驟b中葉黃素粗品用氯仿溶解後，用適量聚醯胺拌樣，乾燥後，再上樣於聚醯胺層析柱。
[0015]本發明還提供一種所述製備高純度葉黃素的方法製得的葉黃素。
[0016]本發明的有益效果在於:本發明採用提取與皂化同時進行的方法，簡化操作，並通過氮氣保護以防止葉黃素的氧化分解，最大程度地提取金盞菊中的葉黃素；本發明中首次採用聚醯胺樹脂進行葉黃素的精製，利用其與葉黃素形成氫鍵的選擇性吸附作用，除去胡蘿蔔素等其他雜質，達到獲取高純度葉黃素的目的。本發明所述葉黃素製備方法避免了重結晶提純方法耗時長、溶劑用量大的缺點，解決了葉黃素因不溶於水，在大孔吸附樹脂上分散差、吸附困難的問題；與矽膠相比，聚醯胺樹脂可重複利用，經濟性強，且本發明所得葉黃素產品純度高、收率高，可用於工業化生產。
【具體實施方式】
[0017]為使本領域技術人員詳細了解本發明的生產工藝和技術效果，下面以具體的生產實例來進一步介紹本發明的應用和技術效果。
[0018]實施例1:
[0019]a、按重量份數，取粉碎至20目的金盞菊1份、石油醚5份和濃度為0.lg/ml的氫氧化鈉乙醇溶液2份，在氮氣保護下於50°C的條件下加熱2小時，隨後加入去離子水至葉黃素結晶析出，過濾，得濾餅，用水洗滌一次，乾燥，得葉黃素粗品；
[0020]b、將所述葉黃素粗品用氯仿溶解，加入葉黃素粗品I倍重量的聚醯胺混勻後，乾燥，上樣於經預處理過的聚醯胺層析柱，先用水洗脫，除去高極性物質，再用甲醇:水=50:50的洗脫劑進行洗脫，隨後用甲醇:水=100:50的洗脫劑進行洗脫，每個流份收集30ml，採用TLC跟蹤監測洗脫液成分，合併10~30個流份，減壓濃縮，即得高純度葉黃素。經檢測，葉黃素的純度為95%，葉黃素的收率為90%。
[0021]實施例2:
[0022]a、按重量份數，取粉碎至40目的金盞菊1份、丙酮2份和濃度為0.2g/ml的氫氧化鈉甲醇溶液3份，在氮氣保護下於30°C的條件下加熱3小時，隨後加入去離子水至葉黃素結晶析出，過濾，得濾餅，用水洗滌一次，乾燥，得葉黃素粗品；[0023]b、將所述葉黃素粗品用氯仿溶解，加入葉黃素粗品2倍重量的聚醯胺混勻後，乾燥，上樣於經預處理過的聚醯胺層析柱，先用水洗脫，除去高極性物質，再用甲醇:水=75:50的洗脫劑進行洗脫，隨後用甲醇進行洗脫，每個流份收集30ml，採用TLC跟蹤監測洗脫液成分，合併15~35個流份，減壓濃縮，即得高純度葉黃素。經檢測，葉黃素的純度為94%，葉黃素的收率為91%。
[0024]實施例3:
[0025]a、按重量份數，取粉碎至60目的金盞菊1份、乙酸乙酯7份和濃度為0.05g/ml的氫氧化鉀乙醇溶液1份，在氮氣保護下於70°C的條件下加熱I小時，隨後加入去離子水至葉黃素結晶析出，過濾，得濾餅，用水洗滌一次，乾燥，得葉黃素粗品；
[0026]b、將所述葉黃素粗品用氯仿溶解，加入葉黃素粗品2倍重量的聚醯胺混勻後，乾燥，上樣於經預處理過的聚醯胺層析柱，先用水洗脫，除去高極性物質，再用甲醇:水=75:50的洗脫劑進行洗脫，隨後用甲醇:水=100:50的洗脫劑進行洗脫，每個流份收集30ml，採用TLC跟蹤監測洗脫液成分，合併10~30個流份，減壓濃縮，即得高純度葉黃素。經檢測，葉黃素的純度為93%，葉黃素的收率為91%。
[0027]實施例4: [0028]a、按重量份數，取粉碎至40目的金盞菊1份、四氫呋喃6份和濃度為0.08g/ml的氫氧化鉀丙醇溶液1份，在氮氣保護下於60°C的條件下加熱2小時，隨後加入去離子水至葉黃素結晶析出，過濾，得濾餅，用水洗滌一次，乾燥，得葉黃素粗品；
[0029]b、將所述葉黃素粗品用氯仿溶解，加入葉黃素粗品1.5倍重量的聚醯胺混勻後，乾燥，上樣於經預處理過的聚醯胺層析柱，先用水洗脫，除去高極性物質，再用甲醇:水=100:50的洗脫劑進行洗脫，隨後用甲醇進行洗脫，每個流份收集30ml，採用TLC跟蹤監測洗脫液成分，合併15~35個流份，減壓濃縮，即得高純度葉黃素。經檢測，葉黃素的純度為95%，葉黃素的收率為89.6%。
[0030]最後應說明的是，以上實施例僅用以說明而非限制本發明的技術方案，儘管參照上述實施例對本發明進行了詳細說明，本領域技術人員應當理解，依然可以對本發明進行修改或者等同替換，而不脫離本發明的精神和範圍的任何修改或局部替換，其均應涵蓋在本發明的權利要求範圍中。
【權利要求】
1.一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，其特徵在於:包括以下步驟: a、按重量份數，取金盞菊1份、石油醚2~7份和氫氧化鈉乙醇溶液I~3份，在氮氣保護下於30°C~70°C的條件下加熱I~3小時，隨後加入去離子水至葉黃素結晶析出，過濾，得葉黃素粗品； b、將所述葉黃素粗品用氯仿溶解，上樣於聚醯胺層析柱，先用水洗脫，再用甲醇-水梯度洗脫，合併流份，濃縮，即得高純度葉黃素。
2.根據權利要求1所述的一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，其特徵在於:所述步驟a中的石油醚選用正己烷、丙酮、乙酸乙酯或四氫呋喃中的一種進行替換。
3.根據權利要求1所述的一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，其特徵在於:所述步驟a中氫氧化鈉乙醇溶液的濃度為0.05~0.2g/ml。
4.根據權利要求3所述的一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，其特徵在於:所述氫氧化鈉乙醇溶液選用氫氧化鈉甲醇溶液、氫氧化鈉丙醇溶液、氫氧化鉀甲醇溶液、氫氧化鉀乙醇溶液或氫氧化鉀丙醇溶液中的一種進行替換。
5.根據權利要求1所述的一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，其特徵在於:所述步驟a中在過濾之後，加入水洗的工藝步驟。
6.根據權利要求1所述的一種用金盞菊製備高純度葉黃素的方法，其特徵在於:所述步驟b中葉黃素粗品 用氯仿溶解後，用適量聚醯胺拌樣，乾燥後，再上樣於聚醯胺層析柱。
7.一種基於權利要求1-6中任一項所述製備高純度葉黃素的方法製得的葉黃素。
【文檔編號】C07C403/24GK103992255SQ201410208386
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年5月17日 優先權日:2014年5月17日
【發明者】周志宏, 劉菲菲, 張寶洪, 王兵 申請人:雲南雲藥醫藥研究有限公司, 昆明風山漸醫藥研究有限公司