脈絡寧酯及其製備方法和用途的製作方法
2023-12-03 09:46:11
專利名稱：脈絡寧酯及其製備方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥領域，涉及脈絡寧酯及其製備方法和用途。該脈絡寧酯化學名為(E) -(5-formylfuran-2-yl) -methyl-3-(3, 4-dihydroxyphenyl) -acrylate,是從脈絡寧注射液中提取分離得到的一種酯類新化合物。
背景技術：
心血管系統疾病嚴重威脅著人們的生命和健康，在臨床上已成為死亡的第一殺手，世界各國都高度重視防治心血管藥的研發。中藥複方製劑脈絡寧注射液是在著名醫方「四妙勇安湯」臨床應用的基礎上研究開發出來的、具有自立智慧財產權的，並於1985年正式批准生產的中藥複方靜脈注射劑，由中藥石斛、玄參、牛膝、金銀花經科學提取精製而成。具有活血化淤、行氣止痛、養陰通絡和補益肝腎的功效，主要用於治療缺血性中風急性期、血栓閉塞性脈管炎、下肢深靜脈血栓形成、動脈硬化性閉塞症、腦梗塞、心絞痛、心肌梗死、血液循環障礙及其後遺症等疾病，總有效率可達94. 5%，與同類藥品比較具有見效快、療效高、療程短、價格低廉、副作用少、安全性高等優點。脈絡寧注射液在市場上經受近30年的考驗，深受廣大醫生和患者的歡迎，已成為全國名優中成藥。2009年7月入選國家新醫改基本藥物目錄基層版307種，為僅有的3個中藥注射劑品種之一，醫改給脈絡寧注射液帶來了新的成長契機，是一個走向更廣闊市場的極好機會，顯示著很強的生命力和廣闊的應用前景。由於中醫藥的複雜性和特殊性，中藥現代化進程中仍存在不少問題,針對重大疾病的優勢品種開發不足，大部分處於低水平重複的狀況嚴重，同時，針對農村地區的適合我國國情的質優價廉的中藥品種開發不足，要解決這些問題，必須採用國際先進技術和質量標準，提高我國中藥的研發水平，尤其是對中藥進行二次開發。把開展中藥新的藥用成分或部位和新臨床適應症的研究作為中藥二次開發的重點研究課題，通過嚴格的科學實驗，提供充足的實驗數據，提升原有品種的檔次，可以起到創新的效果，對提升我國醫藥產業的創新性、開發具有獨立核心智慧財產權的中藥產品，都具有劃時代意義。中藥現代化發展的重要推動力是創新，而中藥二次開發又是我國中藥創新藥物研發的重要源泉，是積極發展中醫藥的一種新途徑和新方法。中藥複方製劑脈絡寧注射液成分複雜，其中未知成分佔有相當比例，有效成分尚不明確、質量標準不夠合理等關鍵科學問題，是脈絡寧注射劑研發的核心技術問題。這些瓶頸問題一直困擾著企業生產，影響產品聲譽和銷售，國家食品藥品監督管理局在2007年頒布的《中藥、天然藥物注射劑基本技術要求》中規定了 「有效成分製成的注射劑，單一成分含量不得低於90% ;多成分製成的中藥注射劑，總固體中結構明確成分的含量不得少於60%，所測成分應大於80%」。因此，對脈絡寧注射液的二次開發顯得格外重要，迫在眉睫。
發明內容
本發明的目的是提供一種從脈絡寧注射液中提取的酯類新化合物——脈絡寧酯((E)-(5-formylfuran-2-yl)-methyl-3-(3, 4-dihydroxyphenyl)-acrylate)。本發明的另一個目的是提供上述化合物的製備方法。本發明還有一個目的是提供上述化合物在製備治療心血管疾病的藥物中的應用。本發明的目的是通過下列技術措施實現的本發明公開了該化合物的結構式如式I O
i7UQ
2 h H0Z 4,4
OH
式I分子式為=C15H12O6,分子量288。命名為脈絡寧酯(化學名為(E)-(5-formylfuran_2-yl)-methyl-3-(3，4-dihydroxyphenyl)-acrylate )。所述脈絡寧酯的製備方法，該方法以脈絡寧注射液為原料，採用矽膠柱、凝膠柱、大孔樹脂柱、反相柱中的一種或多種經過多次層析分離提純得到。所述的製備方法，其中娃膠柱採用200 300目娃膠；凝膠柱為SephadexLH-20 ;大孔樹脂為D101、AB-8、HP-20或MCI ;反相柱為0DS。所述的製備方法，該方法以脈絡寧注射液為原料，經S印hadex LH-20凝膠柱，採用甲醇、乙醇、2(Γ80%的甲醇-水、或者2(Γ80%的乙醇-水進行等度洗脫，洗脫液再經ODS反相柱，採用5 95%乙醇-水或5 95%甲醇-水進行梯度洗脫，洗脫液再經矽膠柱，採用石油醚-乙酸乙酯-丙酮溶劑系統、氯仿-甲醇、或者二氯甲烷-甲醇進行洗脫，洗脫液再經Sephadex LH-20凝膠柱，採用甲醇、乙醇進行洗脫，洗脫液採用重結晶分離提純，得到脈絡寧酯。所述的脈絡寧酯與藥學上可接受的藥用輔料組成的藥物製劑。所述的藥物製劑，其劑型為片劑、膠囊劑、顆粒劑或注射劑。所述的脈絡寧酯在製備治療心血管疾病的藥物中的應用。所述的應用，其中心血管疾病為導致心肌缺血和/或缺氧的疾病，尤其是心肌梗塞、心肌炎、心肌肥大、冠心病。本發明有益效果本發明提供的脈絡寧配是從脈絡寧注射液中提取分離得到的一種酯類新化合物，該化合物能夠減少LDH從心肌細胞胞漿中漏出，降低MDA含量，提高SOD活性，調節心肌細胞內iNOS表達及NO的合成，明顯提高H2O2及缺氧/復氧損傷心肌細胞的存活率，對心肌細胞具有保護作用，可用於製備治療心血管疾病的藥物中的應用。
圖I、化合物I的1H-NMR譜。圖2、化合物I的13C-NMR譜。圖3、化合物I的1H-1H COSY的譜。圖4、化合物I的HMQC譜。圖5、化合物I的HMBC譜。圖6、化合物I的ESI-MS譜。圖7、脈絡寧酯(化合物I )製備工藝流程圖。
具體實施方式
結合具體實施方式
對本發明作進一步說明，但本發明的內容並不僅僅限於所列舉的實施方式。實施例I.從脈絡寧注射液中分離和鑑定化合物II、儀器與材料質譜用PackardllOOMSD質譜檢測器(ESI-MS70V)測定；核磁共振譜用BrukerAV-300型核磁共振儀(TSM內標)測定；熔點用Reichert型微量熔點儀測定；S^hadexLH-20為Pharmacia公司產品，正相柱層析及薄層層析矽膠均為青島海洋化工廠產品，反相柱材料為YMCAA12S50，所用試劑均為分析純。高效液相分析柱為Nova-PakC18柱(3. 9 X 150mm,粒徑5 μ m, Waters公司),高效液相所用試劑為色譜純；2、藥品脈絡寧注射液，金陵藥業股份有限公司提供(批號為20110467，部頒標準)。3、製備方法開啟脈絡寧注射液700 支約 7000mL,經 Sephadex LH-20 柱(7. 5X 120cm), 50%乙醇洗脫，共收集10個流份,流份6反覆經ODS反相柱、娃膠柱、SephadexLH-20柱層析(如流分6經ODS反相柱，採用5-95%甲醇-水溶劑體系進行梯度洗脫，洗脫液再經矽膠柱(200目)，採用二氯甲烷-甲醇進行洗脫，洗脫液再經Sephadex LH-20凝膠柱，採用甲醇、乙醇進行洗脫，洗脫液採用重結晶分離提純)，分離提純過程中全程採用高效液相色譜監測，選擇特徵吸收峰比較大的流分進行下一級分離，從脈絡寧注射液中提純分離得到多個單體化合物，經化學、波譜方法鑑定分別為5_羥甲基糠醛(MLN-1)、肉桂酸(MLN-2)、綠原酸(MLN-3),6, 7- 二羥基香豆素(MLN-4)、琥珀酸(MLN-5)、長鏈脂肪烴(MLN-6)、脈絡寧酯(MLN-7 )、3，5- 二咖啡醯奎寧酸(MLN-8 )、對羥基肉桂酸(MLN-9 )、隱綠原酸(MLN-10 )、原兒茶酸(MLN-11 )、竹節參皂苷(MLN-14)，其中脈絡寧酯(化學名為(E) - (5-formylfuran-2-yl)-methyl-3-(3, 4-dihydroxyphenyl)-acrylate)是新化合物。4、化合物I (脈絡寧酯)結構經核磁共振譜鑑定如下化合物I :黃色針晶(氯仿-甲醇)，易溶於氯仿甲醇混合溶液。254nm有吸收，12蒸汽顯褐色、噴FeCl3M色劑顯藍色，5%-香草醛濃硫酸顯黑色。ESI-MS (m/z) 287 (M-H) _，311 (M+Na)+，分子量為288，結合氫譜、碳譜推測分子式為C15H1206。氫譜顯示12個質子信號，其中I個醛基氫質子Sh9.60(1H，s)，4個烯氫質子，其中 2 個反式烯氫質子 δΗ6. 34(1Η, d, J=15. 9Hz)和 δ Η7· 54(1H，d，J=15. 9Hz)、2 個順式烯氫質子 δ Η6· 84 (1Η, d, J=3. 5Ηζ)和 δ Η7· 53 (1Η, d, J=3. 5Hz)，I 個亞甲基 δ Η5· 27 (2Η, s)，3 個 ABX 系統的芳氫質子信號 δ η7· 08 (1Η, d, J=L 8Hz)、δ Η6· 77 (1Η, d, J = 8. IHz)和δ η7· 03 (1Η, dd, J=L 8，8. IHz)，2 個羥基質子信號 3_ΟΗ, 4-ΟΗ δ Η5_9 (2Η, brs)。碳譜顯示15個碳信號，其中I個醛基碳信號δ^78.5，1個酯羰基碳信號δε166. 0，10個芳碳信號，2個反式烯碳信號δε146. 3和δ c121. 8，I個亞甲基δ c57. 4。在1H-1H COSY相關譜中可以找到3組有相關關係的質子，即第一組δΗ7. 08(1H, d, J=L 8Ηζ), δ H6. 77 (1H, d, J = 8. 1Hz)和 δΗ7. 03(1H, dd, J=L 8, 8. 1Hz)；第二 組δ Η6· 34(1H，d，J=15. 9Hz)和 δ Η7· 54 (1H，d，J=15. 9Hz);第三組δ η6· 84 (1H, d, J=3. 5Hz)和 δ Η7· 53 (1Η, d, J=3. 5Hz)，結合 HMQC 譜可以推出以下 3 個簡單小
片段
權利要求
1.一種脈絡寧酯，其特徵在於該化合物的化學名為(E)-(5-formylfuran-2-yl)methyl-3-(3，4-dihydroxyphenyl) acrylate,結構式為
2.權利要求I所述脈絡寧酯的製備方法，其特徵在於以脈絡寧注射液為原料，採用矽膠柱、凝膠柱、大孔樹脂柱、反相柱中的一種或多種經過多次層析分離提純得到。
3.根據權利要求2所述的製備方法，其特徵在於矽膠柱採用20(Γ300目矽膠；凝膠柱為S印hadex LH-20 ;大孔樹脂為D101、AB-8、HP-20或MCI ;反相柱為ODS。
4.根據權利要求2所述的製備方法，其特徵在於該方法以脈絡寧注射液為原料，經Sephadex LH-20凝膠柱，採用甲醇、乙醇、20 80%的甲醇-水、或者20 80%的乙醇-水進行等度洗脫，洗脫液再經ODS反相柱，採用5、5%乙醇-水或5 95%甲醇-水進行梯度洗脫，洗脫液再經矽膠柱，採用石油醚-乙酸乙酯-丙酮溶劑系統、氯仿-甲醇、或者二氯甲烷-甲醇進行洗脫，洗脫液再經S印hadex LH-20凝膠柱，採用甲醇、乙醇進行洗脫，洗脫液採用重結晶分離提純，得到脈絡寧酯。
5.權利要求I所述的脈絡寧酯與藥學上可接受的藥用輔料組成的藥物製劑。
6.根據權利要求5所述的藥物製劑，其劑型為片劑、膠囊劑、顆粒劑或注射劑。
7.權利要求I所述的脈絡寧酯在製備治療心血管疾病的藥物中的應用。
8.根據權利要求7所述的應用，其特徵在於心血管疾病為導致心肌缺血和/或缺氧的疾病，尤其是心肌梗塞、心肌炎、心肌肥大、冠心病。
全文摘要
本發明屬於醫藥領域，公開了脈絡寧酯及其製備方法和應用。該脈絡寧酯的化學名為(E)-(5-formylfuran-2-yl)methyl-3-(3,4-dihydroxyphenyl)acrylate，結構式為該脈絡寧酯對心肌細胞具有保護作用，可用於製備治療心血管疾病的藥物。
文檔編號A61P9/00GK102838570SQ201210292520
公開日2012年12月26日 申請日期2012年8月17日 優先權日2012年8月17日
發明者馮煦, 湯衛國, 王奇志, 徐向陽, 王鳴, 蔡瑩, 陳雨, 趙友誼, 張蕙, 印敏 申請人:金陵藥業股份有限公司