藥用活性哌啶衍生物的製作方法

2023-12-05 18:15:11 2

專利名稱：藥用活性哌啶衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及用作葡糖基神經醯胺合酶抑制劑(GCS；UDP-葡萄糖神經醯胺葡糖基轉移酶UDP-葡萄糖N-醯基鞘氨醇D-葡糖基轉移酶，EC 2.4.1.80)的新的哌啶衍生物，用於它們的製備的方法和它們在醫學中的用途，具體地是在治療和預防由GCS介導的疾病症狀中的用途。化合物發現了在治療以下疾病中的用途糖脂貯積疾病、與糖脂積聚有關的疾病、其中糖脂合成異常的癌症、由使用細胞表面糖脂作為受體的有機體引起的感染性疾病、其中葡糖基神經醯胺合成是必需的或者重要的感染性疾病、其中過度的糖脂合成發生的疾病、神經元疾病和神經元損傷。還描述了它們的合成，以及含所述化合物的藥用製劑和採用這些化合物治療的方法。
GCS為細胞內酶，其催化尿苷二磷酸葡糖和神經醯胺成為糖脂、葡糖基神經醯胺。GCS在生物學中的作用目前屬於熱門的基礎和應用科學的課題。例如，許多研究者正在探索GCS在調節神經醯胺水平中的作用，因為這種分子可誘導程序性細胞死亡(J.Biol.Chem.，2000，Mar 10，275(10)，7138-43)。類似地，正在積極研究GCS在維持膽固醇/糖脂「卵筏」中的作用，卵閥為細胞表面膜的具體通透性和功能性的功能域，它們似乎參與多種信號傳導過程(Nature，1997，Jun 5，387(6633)，56-72)。
GCS也是治療某些人類疾病的靶點。葡糖基神經醯胺和結構相關的糖脂貯積於患有遺傳病的患者的溶酶體中，遺傳病是由必需的糖脂-降解酶之一的突變造成的(例如，高歇氏病，泰-沙二氏病，桑德霍夫氏病，GM1神經節糖苷沉積症和法布裡氏病)。糖脂貯積也作為帶有遺傳性貯積病例如尼-皮二氏病、粘多糖代謝病、粘脂貯積病IV型(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1998，May 26，95(11)，6373-8)和α-甘露糖苷過多症(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1991，Dec 15，88(24)，11330-4)的某些組織(例如神經組織)的次生作用發生。通過推理已經得出結論，GCS抑制劑可以應用於降低染病細胞中糖脂合成的速率以致於只有很少的糖脂被貯積，即一種稱之為底物喪失的治療方法。研究已證實事實上GCS抑制劑可以用於減少在糖脂貯積的細胞和動物模型中觀察到的糖脂聚積(Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1999，May 25，96(11)，6388-93；Science，1997，Apr 18，276(5311)，428-31；J.Clin.Invest.，2000，Jun，105(11)，1563-71)。另外，一份最新的臨床試驗報告顯示GCS抑制劑N-丁基脫氧吉瑞黴素(NB-DNJ)可以用於治療患有高歇氏病的人患者(Lancet，2000，Apr 29，355(9214)，1481-5)。在EP-A-0698012中公開了作為GCS抑制劑的亞氨基糖NB-DNJ的用途。EP-A-0536402和EP-A-0698012公開了脫氧半乳糖吉瑞黴素的N-烷基衍生物，例如N-丁基脫氧半乳糖吉瑞黴素(NB-DGJ)，也可以用於治療糖脂貯積疾病。EP-A-0698012也公開了甘露糖(NB-DMJ)、果糖(NB-DFJ)和N-乙醯基葡糖胺(NB-NAG)的相應N-丁基衍生物作為糖脂生物合成的抑制劑不起作用。
GCS抑制劑在治療人惡性腫瘤中的用途已被提出。腫瘤可以合成異常量的糖脂和/或於正常組織中不存在的糖脂。另外糖脂或者神經節苷脂特別由腫瘤細胞脫落並且釋放到細胞外空間和血流中。脫落了腫瘤糖脂的腫瘤和結合有神經節苷脂的細胞表面兩者都可以影響腫瘤宿主細胞相互作用，例如細胞-細胞接觸或者粘附(MethodsEnzymol.，2000，312，447-58)、細胞遷移(Mol.Chem.Neuropathol.，1995Feb-Apr，24(2-3)，121-35)、生長因子信號傳導過程(J.Biol.Chem.，2000Nov 3，275(44)，34213-23)、腫瘤刺激的血管形成(Acta.Oncol.，1997，36(4)，383-7)和腫瘤特異性免疫反應(J.Immunol.，1999 Oct1，163(7)，3718-26)。所有這些過程均可影響腫瘤產生和進展。已知糖脂尤其是葡糖基神經醯胺聚集於廣譜抗藥性(MDR)腫瘤細胞(Anticancer Res.，1998 Jan-Feb，18(1B)，475-80)中，並且用GCS抑制劑體外處理這些細胞可以逆轉MDR表型(J.Biol.Chem.，1997，Jan 17，272(3)，1682-7；Br.J.Cancer，1999，Oct，81(3)，423-30)。
細胞表面糖脂也在感染性疾病中起作用，用作結合病原菌(APMIS，1990，Dec，98(12)，1053-60，綜述)、真菌(Infect.Immun.，1990 Jul，58(7)，2085-90)和病毒(FEBS Lett，1984 May 7，170(1)，15-8)的受體。另外，細胞表面的糖脂通過細菌毒素(Methods Enzymol.，2000，312，459-73)例如霍亂毒素(神經節苷脂GMl)和Vero細胞毒素(globotriaosylceramide GB3)的B亞單位結合(J.Infect.Dis.，2001，suppl.70-73，183)。
GCS抑制劑的用途也可以適於多種其它的臨床適應症，它們與糖脂合成異常有關。人主動脈的動脈粥樣硬化病灶比未受影響的主動脈區域具有更高的神經節苷脂含量並且動脈粥樣硬化患者體內的血清神經節苷脂濃度高於正常個體(Lipids，1994，29(1)，1-5)。衍生於患有多囊腎疾病的患者的腎組織含有高水平的葡糖基神經醯胺和乳糖基神經醯胺(J.Lipid.Res.，1996，Jun，37(6)，1334-44)。糖尿病的動物模型中的腎肥大與糖脂合成增加有關(J.Clin.Invest.，1993，Mar，91(3)，797-803)。
糖脂代謝也可以在其它的神經疾病例如阿爾滋海默氏病和癲癇中起至關重要的作用。例如，尼-皮二氏病(NPC)患者神經元出現阿爾滋海默氏病中所觀察到的形態學的纖維纏結痕跡。
令人感興趣的是，通過澱粉樣β-蛋白結合的GM1神經節苷脂誘導構象變化，這支持纖維狀聚合物的形成，並且這種蛋白的纖維沉積作用是阿爾滋海默氏病的早期症狀(Yanagisawa等，(1995)，Nat.Med.1，1062-6；Choo-Smith等，(1997)，Biol.Chem.，272，22987-90)。因此，用藥物例如NB-DNJ減少GM1合成能夠抑制在阿爾滋海默氏病中觀察到的纖維化形成。
相反，初步臨床試驗顯示經GM1神經節苷脂治療患者似乎可以改善帕金森氏病、休克和脊髓損傷觀察到的神經退化進程(Alter，(1998)，Ann.NY Acad.Sci.845，391-4011；Schneider，(1998)，Ann.NY.Acad.Sci.，845，363-73；Geisler，(1998)，Ann.NY.Acad.Sci.，845，374-81)。聯合給予葡糖基神經醯胺合成抑制劑可能提供臨床醫師對這個治療過程的更大的控制。通過阻斷它們的神經糖脂合成，抑制劑像NB-DNJ可限制患者的特異性不協調行為。另外，抑制葡糖基神經醯胺合成將限制給予的糖脂代謝成為其它的，或許是非生產性的形式。因此，用抑制劑例如NB-DNJ調節葡糖基神經醯胺合成的能力可以在治療各種神經元疾病中是有用的。
也顯示亞氨基糖能夠可逆性誘導男性不育，因此可用作男性避孕藥。
在Anal.Biochem.，2000，284(1)，136-142中公開了作為分析參比物的化合物3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)，對這個化合物未公開或者提示有藥物用途。
WO 01/10429(在該申請的優先權日後公開)公開了化合物N-壬基-阿託伐他汀(3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S))及其在治療病毒感染中的用途。
Tet.Lett.，1990，31(47)6777-80公開了化合物3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)作為在合成3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2R，3R，4R，5S)中少量的副產物，對這個化合物未公開或者提示有藥物用途。化合物哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]-，(2S，3R，4R，5S)和哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(乙醯氧基)-2-[(乙醯氧基)-甲基]-，(2S，3R，4R，5S)作為在合成相應的(2R，3R，4R，5S)化合物中得到的副產物也被公開。
Tetrahedron，1997，53(9)，3407-16公開了化合物哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-二(乙醯氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]-，(2S，3S，4R，5S)和哌啶，1-甲基-3，4，5-二(乙醯氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)作為在合成相應的(2R，3S，4R，5S)化合物中得到的副產物。
Bioorganic and Medicinal Chemistry，1996，4(11)，1857-65公開了化合物哌啶，1-苯基甲基-3，4-二(苯基甲氧基)-5-(苯甲醯氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]-，(2S，3R，4R，5S)作為合成3，4，5-哌啶三醇，2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)的中間體。
給出GCS在廣泛的基礎和應用科學方面的重要性，開發提供調節這種酶的功能的方法的新的工具是必要的。迄今，我們已合成了許多用於抑制GCS的催化活性的新化合物。
本發明提供式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或者前藥 其中R為任選由C3-7環烷基取代和任選被-O-間隔的C1-16直鏈或支鏈烷基，所述氧與環氮至少被兩個碳原子分開，或者C1-10烷基芳基，其中芳基為苯基、吡啶基、噻吩基或者呋喃基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代，包括F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈烷基；和R1為氫，或C1-6直鏈或支鏈烷基；條件是化合物不是a)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；b)3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；或c)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)。
3位的羥基可以以R或者S構型存在。3位的羥基優選以R構型存在，即式(I)化合物具有立體化學(2S，3R，4R，5S)。
R優選為C1-16直鏈或支鏈的烷基或者C1-10烷基苯基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代，包括F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈的烷基。R更優選為C1-16直鏈或支鏈烷基。R甚至更優選為C3-10直鏈烷基，尤其是C4-7直鏈烷基。
用於本發明方法的化合物優選具有低於800，更優選低於600的分子量。
可被提及的本發明的具體化合物包括如下3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；及其藥學上可接受的鹽和前藥。
特別優選的化合物為3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)及其藥學上可接受的鹽。
可被提及的一組特別的本發明化合物為式(Ia)化合物或其藥學上可接受的鹽 式(Ia)
其中R為C1-16直鏈或支鏈的烷基或者C1-10烷基芳基，其中芳基為苯基、吡啶基、噻吩基或者呋喃基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代，包括F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈烷基；和R1為氫或者C1-6直鏈或支鏈烷基；條件是化合物不為a)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；b)3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；或c)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)。
如在此描述的那樣，本發明的化合物可以用於抑制GCS。因此，在第二方面，本發明提供式(I)化合物在醫療中的用途，但沒有條件a)和b)。除以上提及的那些，用於本發明這個方面的具體化合物包括化合物3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)。
合適地，式(I)化合物的藥學上可接受的鹽包括(但不限於)與無機酸形成的鹽，例如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、氫溴酸鹽和硝酸鹽，或者與有機酸形成的鹽，例如蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、枸櫞酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、甲磺酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、雙羥萘酸鹽、水楊酸鹽和硬脂酸鹽。
式(I)化合物的合適的前藥包括(但不限於)藥學上可接受的酯例如C1-6烷基酯。
本發明的一些化合物可以自溶劑例如含水溶劑或者有機溶劑中結晶或者重結晶。在這些情況下，可以形成溶劑合物。本發明在其範圍內包括化學計量的溶劑合物，包括水合物以及含可變化量的水的化合物，後者通過諸如冷凍乾燥的方法產生。
一些式(I)化合物可以以光學異構體的形式存在，例如非對映體和所有比例的異構體的混合物存在，例如外消旋混合物。本發明包括所有這些形式，尤其是純異構體形式。通過常規方法可以把不同的異構體形式彼此分離或者拆分開來，或者通過常規合成方法或者立體特異性或不對稱合成可以得到任何給定的異構體。
由於式(I)化合物打算用於藥用組合物，應易於理解的是它們每個優選以基本純的形式提供，例如至少60％純，更適合至少75％純且優選至少85％純，尤其是至少98％純(％為重量比重量基礎)。不純製備的化合物可以用於製備用於藥用組合物的更純的形式；這些不太純製備的化合物應含至少1％，更合適至少5％且優選10-59％的式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物。
在此使用的術語「烷基」無論其自身或者作為更大的基團例如「烷基芳基」的部分包括直和分支鏈基團。術語烷基也包括那些其中一個或者更多個氫原子被氟置換的基團。
通過本領域認可的方法，從已知的或者市場上可以得到的原料，可以製備式(I)的化合物。如果原料無法從商業來源獲得，在此描述它們的合成，或者通過本領域已知的方法可以製備它們。
具體地，通過以下方法可以製備式(I)的化合物，方法包括(a)使式(II)化合物 與NaBH3CN和式R2CHO的醛在乙酸-甲醇中反應，或者與NaBH(OAc)3和式R2CHO的醛在溶劑例如二氯甲烷中反應；其中R2為由C3-7環烷基任選取代且由-O-任選間隔的C1-15直和分支鏈烷基，所述氧被至少一個碳原子與CHO部分分開，或者其中芳基如在式(I)中定義的C0-9烷基芳基；或者(b)使式(III)化合物脫保護
其中R如式(I)中定義，並且P(可以相同或者不同)為羥基保護基團，例如苄基(Bn)。當P為CH2Ph時，在合適的溶劑例如醇如乙醇中，於氫氣和催化劑例如PdCl2或者披鈀炭存在下進行脫保護。應該理解，當P為CH2Ph且R為CH2Ph時，在這些條件下也可以除去R基團以得到式(II)化合物，而採用以上的方法a)優選產生其中R為CH2Ph的式(I)化合物。
式(II)化合物是已知的，參見例如Carbohydr.Res.，1993，246，377-81(2S3R4R5S)和Tet.Lett.，1997，38(45)，8009-12(2S3S4R5S)。
在無溶劑或在溶劑例如四氫呋喃中，通過使式(IV)化合物， 其中L(它可以是相同或者不同的)為離去基團，例如甲磺醯基，並且P如在式(III)中定義，與式RNH2的胺反應，其中R如在式(I)中定義，可以製備式(III)化合物。
化合物(IVa)，其中L為甲磺醯基且P為苄基，為已知化合物V.S.Rao等，Can.J.Chem.，(1981)，59(2)，333-8；P.A.Fowler等，Carbohydr.Res.，(1993)，246，377-81。
在鹼例如吡啶存在下，通過使2，3，4，6-四-O-苄基-D-半乳糖醇與甲磺醯氯反應，可以製備化合物(IVb)，其中L為甲磺醯基且P為苄基。
在此描述的任何新的中間體化合物也落入本發明的範圍內。
因此，本發明的另一方面提供如上定義的式(III)化合物，條件是化合物不為i)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)；ii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(乙醯氧基)-2-[(乙醯氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)；iii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-二(乙醯氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)；或者iv)哌啶，1-甲基-3，4，5-二(乙醯氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)。
在合成式(I)化合物期間，可以保護中間體化合物中的不穩定的官能團，例如羥基、羧基和氨基。在例如Protective Groups in OrganicChemistry，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，(Wiley-Interscience，NewYork，第2版，1991中給出了其中可以保護各種不穩定的官能團的方法和裂解得到的被保護的衍生物的方法的綜合討論。
在實施例中可發現製備式(I)化合物的其它細節。
式(I)化合物可以單獨製備或者作為含至少2個，例如5-500個化合物且更優選10-100個式(I)化合物的化合物庫來製備。通過組合的「裂分」和「混合」方法或者通過採用液相或固相化學的多平行合成，通過本領域技術人員已知的方法，可以製備式(I)化合物的庫。
因此，本發明的另一方面提供含至少2個式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽的化合物庫。
可以以通過本領域熟知的常規方法使式(I)化合物(「活性成分」)與標準藥用載體或者稀釋劑組合製備的常規劑型給予藥用有效的式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽。這些方法可以包括使成分混合、制粒和壓制或者溶解以適合於要求的製劑。
本發明另一方面提供含與一種或者更多種藥學上可接受的載體或賦形劑一起的一種或者更多種式(I)化合物(但不包括a)-b))的藥用製劑。
本發明的藥用組合物可以配製用於通過任何途徑給藥，並且包括那些以適於口服、局部或者非腸道給予包括人在內的哺乳動物的形式存在的組合物。
藥用製劑可以適於任何合適的途徑給藥，例如通過口服(包括頰或者舌下)、直腸、鼻、局部(包括頰、舌下或者經皮)、陰道或者非腸道(包括皮下、肌內、靜脈或者真皮內)途徑給予。通過藥學領域任何已知的方法，例如使活性成分與載體或者賦形劑混合在一起，可以製備這樣的製劑。
適於口服給藥的藥用製劑可以作為分散單位例如膠囊劑或片劑、散劑或顆粒劑、在含水或者不含水液體中的溶液劑或混懸劑、可食用泡沫劑或發泡劑(whips)，或水包油液體乳劑或油包水液體乳劑存在。
適於經皮給藥的藥用製劑可作為打算與接受者的表皮長時間保持緊密接觸的分散貼劑存在。例如，如通常在Pharmaceutical Research，3(6)，318，(1986)中描述的，活性成分可以通過離子導入法自貼劑傳遞。
適於局部給藥的藥用製劑可以配製為軟膏劑、霜劑、混懸劑、洗劑、散劑、溶液劑、糊劑、凝膠劑、浸漬劑、噴霧劑、氣溶膠或者油劑並且可以包含合適的常規添加劑，例如防腐劑、輔助藥物滲透的溶劑和在軟膏劑和霜劑中的軟化劑。
為應用於眼睛或者其它的外部組織，例如口腔和皮膚，製劑優選作為局部軟膏劑或者霜劑運用。當以軟膏劑配製時，活性成分可以與石蠟或者水混溶的軟膏劑基質一起使用。或者，活性成分可以以含有水包油霜劑基質或者油包水基質的霜劑配製。
適於眼部局部給藥的藥用製劑包括滴眼劑，其中活性成分溶解或者懸浮於合適的載體尤其是含水溶劑中。
適於口腔局部給藥的藥用製劑包括錠劑、軟錠劑和漱口劑。
適於直腸給藥的藥用製劑可以作為栓劑或者灌腸劑存在。
適於鼻給藥的其中載體為固體的藥用製劑包括具有例如在20-500微米範圍內的粒子大小的粗散末，它以鼻吸法的方式給藥，即通過把緊密貼住鼻子的裝有粉末的容器經鼻通道迅速吸入。其中載體為液體的合適的製劑，作為鼻噴霧劑或者作為鼻滴劑給藥，包括活性成分的含水或者油溶液。
適於經吸入給藥的藥用製劑包括細分的顆粒粉末或者霧劑，它們可以通過各種類型的可計量劑量的加壓氣溶膠、拋射劑或者吸入劑來生成。
適於陰道給藥的藥用製劑可以作為陰道栓劑、棉塞劑、霜劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或者噴霧製劑存在。
適於非腸道給藥的藥用製劑包括含水和非水滅菌注射溶液劑，後者可以含抗氧化劑、緩衝劑、殺菌劑和溶質，它們使製劑變得與打算給予的接受者的血液等滲，含水和非水滅菌混懸劑可含懸浮劑和增稠劑。製劑可以以單位劑量或者多劑量容器存在，例如密封的安瓿和小瓶，並且可以在冷凍乾燥(凍幹)條件下貯存，臨用前僅需加入滅菌液體載體，例如注射用水。自滅菌粉末、顆粒和片劑可以製備臨時用的注射溶液劑和混懸劑。
應理解的是除以上具體提及的成分外，製劑也可以包括本領域中的其它的常規視為研究中的製劑類型的試劑，例如那些適於口服給藥的製劑可以包括矯味劑。
本發明的藥用製劑優選適於口服給藥。
製劑也可以含適配的常規載體，例如霜劑或者軟膏劑基質和乙醇或者用於洗劑的油醇。這樣的載體可以作為製劑的約1％至最多98％存在。它們更通常佔製劑的約80％。
口服給藥的片劑和膠囊劑可以以單位劑量形式存在，並且可以含常規賦形劑例如粘合劑，如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠或者聚乙烯吡咯烷酮，填充劑例如乳糖、蔗糖、玉米澱粉、磷酸鈣、山梨醇或者甘氨酸。壓片潤滑劑例如硬脂酸鎂、滑石粉、聚乙二醇或者矽膠，崩解劑例如馬鈴薯澱粉，或者可接受的潤溼劑例如十二烷基硫酸鈉。按照正常藥學實踐中熟知的方法可以將片劑包衣。口服液體製劑可以以例如含水或者油混懸劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑或者酏劑的形式存在，或者可以作為臨用前用水或者其它合適的介質重構成的乾燥產品存在。這樣的液體製劑可以含常規添加劑，例如混懸劑，例如山梨醇、甲基纖維素、葡萄糖糖漿、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或者氫化食用脂肪、乳化劑，例如卵磷脂、山梨醇單油酸酯，或阿拉伯膠、非水介質(其可包括食用油)，例如杏仁油、油狀酯例如甘油、丙二醇或者乙醇；防腐劑，例如對-羥基苯甲酸甲酯或丙酯或者抗壞血酸，並且，如果需要，可以含常規矯味劑或者著色劑。
栓劑應含有常規栓劑基質，例如可可豆酯或者其它的甘油酯。
對非腸道給藥，採用化合物和滅菌介質可製備液體單位劑型，水為優選。依所採用的介質和濃度而定，化合物可以懸浮或者溶解在介質中。在製備溶液劑時，化合物可以溶解在注射用水中並且填充到合適的小瓶或者安瓿之前過濾滅菌，接著密封。
有利地，試劑例如局部麻醉劑、防腐劑和緩衝劑可以溶於介質中。為增強穩定性，填充到小瓶並真空除去水後，可以冷凍組合物。然後將凍乾粉末密封在小瓶中，臨用前同時提供注射用水可使之重構成為液體。基本上以相同的方法製備非腸道混懸劑，除了把化合物懸浮於介質中以替代溶解並且滅菌不能用過濾進行。懸浮於滅菌介質前，通過暴露於環氧乙烷可以使化合物滅菌。有利地，在組合物中可包含表面活性劑或者潤溼劑以便利於化合物的均勻分布。
依給藥方法而定，組合物可以含0.1％重量，優選10-60％重量的活性物質。
藥用製劑可以以每劑含預先確定量的活性成分的單位劑型存在。依所治療的病症、給藥途徑和患者的年齡、體重和病情而定，這樣的單位可含例如最多可達1g，合適地10mg-600mg，優選50mg-300mg且更優選50mg-150mg。如在此說明的那樣，優選的單位劑量製劑為那些含每天劑量或者亞劑量的，或它們的合適的部分的活性成分的製劑。
本領域技術人員應意識到根據受治療疾病的性質和程度、給藥的形式、途徑和部位，和受治療的具體哺乳動物，可以確定式(I)化合物的各自劑量的最佳定量和給藥間隔，並且通過常規技術可以確定這樣的最佳條件。本領域技術人員也應意識到可以由本領域技術人員採用常規療程測定試驗來確定最佳療程，即在指定的天數內每天給予式(I)化合物的劑量次數。
當以如上提及的劑量範圍給予式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物時，未表明具有毒理學作用。
本發明的化合物是有用的，其中它們能夠抑制葡糖基神經醯胺合酶。因此，本發明的化合物可用於治療各種糖脂貯積疾病，例如高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病、法布裡氏病、GM1神經節糖苷沉積症等。另外，也發現本發明的化合物可以用於治療其中發生糖脂聚集的症狀，例如尼-皮二氏病、粘多糖貯積病(MPS I、MPSIIIA、MPS IIIB、MPS VI和MPS VII)、粘脂貯積病IV型和α-甘露糖苷過多症。
本發明的化合物一般也用於治療其中糖脂合成異常的癌症，例如腦癌、神經母細胞瘤、惡性黑素瘤、腎腺瘤和廣譜抗藥性癌症。
本發明的化合物也可用於治療傳染性有機體或者經傳染性有機體產生的毒素引起的疾病，所述有機體採用細胞表面的糖脂作為傳染性有機體的受體。
本發明的化合物也可用於治療傳染性有機體引起的疾病，對所述有機體而言，葡糖基神經醯胺的合成是必需的或者重要的過程的，例如病原性真菌新型隱球菌。
本發明的化合物也可用於治療其中發生過度糖脂合成的疾病，例如(但不限於)動脈粥樣硬化、多囊腎疾病和糖尿病腎肥大。
本發明的化合物也可用於治療神經元疾病，例如阿爾滋海默氏病和癲癇，和神經元退化性疾病例如帕金森氏病。
本發明的化合物也可用於治療神經損傷例如脊髓損傷或者中風。
本發明的化合物也可用於治療肥胖症。
因此，在另外的方面，本發明提供(i)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))作為葡糖基神經醯胺合酶抑制劑的用途。
(ii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療糖脂貯積疾病的藥物中的用途。可治療的糖脂貯積疾病的實例包括(但不限於)高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病、法布裡氏病或者GM1神經節糖苷沉積症。
(iii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療尼-皮二氏病A和C型的藥物中的用途。
(iv)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療I型粘多糖貯積病、IIID型粘多糖貯積病、IIIA型粘多糖貯積病、VI型粘多糖貯積病或者VII型粘多糖貯積病的藥物中的用途。
(v)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療α-甘露糖苷過多症或者IV型粘脂貯積病的藥物中的用途。
(vi)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療其中糖脂合成異常的癌症的藥物中的用途，癌症包括(但不限於)神經癌症包括神經母細胞瘤、腦癌、腎腺瘤、惡性黑素瘤、多發性骨髓瘤和廣譜抗藥性癌症。
(vii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療阿爾滋海默氏病、癲癇或者中風的藥物中的用途。
(viii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療帕金森氏病的藥物中的用途。
(ix)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療脊髓損傷的藥物中的用途。
(x)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療由傳染性微生物或所述生物產生的毒素引起的疾病的藥物中的用途，所述傳染性微生物採用細胞表面的糖脂作為所述生物自身的受體。
(xi)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療由傳染性生物引起的疾病的藥物中的用途，對所述傳染性生物而言，葡糖基神經醯胺的合成是必需的或者重要的過程，例如(但不限於)與病原性真菌新型隱球菌的感染有關的病變。
(xii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療與異常糖脂合成有關的疾病，包括(但不限於)多囊腎疾病、糖尿病腎肥大和動脈粥樣硬化的藥物中的用途。
(xiii)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於通過給予神經節糖苷例如GM1神經節糖苷可以治療的病症的藥物中的用途。這樣疾病的實例包括帕金森症、中風和脊髓損傷。
(xiv)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於使雄性哺乳動物可逆性不育的藥物中的用途。
(xv)式(I)化合物(但不包括條件a)-c))在製備用於治療肥胖症的藥物(例如作為食慾抑制劑)中的用途。
(xvi)一種用於治療糖脂貯積疾病，例如高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病或者GM1神經節糖苷沉積症的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xvii)一種用於治療尼-皮二氏病A和C型的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xviii)一種用於治療I型粘多糖貯積病、IIID型粘多糖貯積病、IIIA型粘多糖貯積病、VI型粘多糖貯積病或者VII型粘多糖貯積病的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xvix)一種用於治療α-甘露糖苷過多症或者IV型粘脂貯積病的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xx)一種用於治療其中糖脂合成異常的癌症的方法，癌症包括(但不限於)神經癌症，包括神經母細胞瘤、腦癌、腎腺瘤、惡性黑素瘤、多發性骨髓瘤和廣譜抗藥性癌症，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxi)一種用於治療阿爾滋海默氏病、癲癇或者中風的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxii)一種用於治療帕金森氏病的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxiii)一種用於治療脊髓損傷的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxiv)一種用於治療由傳染性微生物或所述生物產生的毒素引起的疾病的方法，所述傳染性微生物利用細胞表面的糖脂作為所述生物自身的受體，該方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxv)一種用於治療由傳染性生物引起的疾病的方法，對所述傳染性生物而言，葡糖基神經醯胺的合成是必需的或者重要的過程，例如(但不限於)與病原性真菌新型隱球菌的感染有關的病變，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxvi)一種用於治療與異常糖脂合成有關的疾病包括(但不限於)多囊腎疾病、糖尿病腎肥大和動脈粥樣硬化的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxvii)一種用於治療通過給予神經節糖苷例如GM1神經節糖苷可以治療的病症的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。這樣的病症的實例為帕金森氏病、中風和脊髓損傷。
(xxviii)一種用於使雄性哺乳動物可逆性不育的方法，方法包括給予所述雄性哺乳動物有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
(xxix)一種用於治療肥胖症的方法，方法包括給予患者有效量的式(I)化合物(但不包括條件a)-c))的步驟。
本發明也提供式(I)化合物(但不包括條件a)-c))用於治療以上提及的疾病和病症的用途。


圖1顯示哺乳動物細胞內糖脂代謝的代表性途徑。經葡糖基神經醯胺合酶催化的反應，尿苷-二磷酸葡糖與神經醯胺裝配成為葡糖基神經醯胺被顯示。導致人糖脂貯積疾病的酶途徑以及經N-丁基脫氧吉瑞黴素(NB-DNJ)抑制的葡糖基神經醯胺合酶反應也被表示。縮寫UDP-Glc，尿苷-二磷酸葡糖；Cer，神經醯胺；Sial，唾液酸；Gal，半乳糖；GalNAc，N-乙醯基半乳糖胺；Glc，葡萄糖；和圖2顯示(a)自用50μM實施例2化合物(1)處理7天的MCF-7乳腺癌細胞提取的非極性類脂組分的薄層層析法(TLC)色譜圖，MCF-7乳腺癌細胞(2)和(3)表示葡糖基神經醯胺標準物；並且(b)表示相對於(1)代表性實施例2化合物處理的樣品和(2)未處理空白對照組背景，對TLC色譜圖的葡糖基神經醯胺譜帶強度的測量。
所有公開包括(但不限於)在這個說明書中引用的專利和專利申請，在此通過引用結合到本文中，就好象每一各自的公開通過充分概述專門地和獨立地指明在此通過引用結合到本文中。
現參照以下實施例描述本發明，實施例僅僅作為舉例說明並不視為對本發明的範圍的限制。
實施例1 3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-葡萄糖醇 將2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(glucitol)(45g)溶於吡啶(200ml)中並在0℃下於30分鐘內加入到甲磺醯氯(15ml)在吡啶(100ml)中的溶液中。把澄明的溶液在4℃下貯存過夜，之後TLC分析顯示反應完成。將反應混合物在乙酸乙酯和水/冰之間分配。先後用5％鹽酸和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機部分，乾燥(Na2SO4)並濃縮為黃/橙色油。將油與甲苯共沸並直接用於下一步。
b)哌啶，1-丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-葡萄糖醇(988mg)溶於正丙胺(10ml)中並在55℃下攪拌4天。TLC分析表明反應已經進行完全。濃縮反應混合物並經快速層析法(0→16％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(610mg，73％)。1H NMR(CDCl3)δ□0.9(3H，t)，1.4(2H，m)，2.45(2H，m)，2.6(1H，m)，2.8(1H，dd，J＝5，11Hz)，3.3(1H，m)，3.5(2H，m)，3.6(2H，m)，3.7(1H，dd)，4.4-4.8(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。
c)3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(610mg)溶於MeOH(10ml)中並在氫氣氛下於PdCl2(300mg)存在下攪拌過夜。TLC表明反應完成。通過硅藻土過濾反應混合物(隨後甲醇/水洗滌)，濃縮濾液。把溶液用水(10ml)稀釋並緩慢加入到已經用鹽酸預先洗滌的5gDowex 50X4-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然後用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產物部分，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(200 mg，90％)。1H NMR(D2O)δ 0.75(3H，t)，1.35(2H，m)，2.45(3H，m)，2.75(1H，dd，J＝5，12.5Hz)，3.0(1H，dd，J＝4，9Hz)，3.3(1H，t)，3.45(1H，m)，3.6(1H，dd，J＝5，10Hz)，3.7(2H，m)。
實施例2 3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-葡萄糖醇(實施例1a)，30g)溶於正丁胺(200ml)中並在50℃下攪拌4天。TLC分析表明反應已經進行完全。濃縮反應混合物並經快速層析法(0→16％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(23g，90％)。1HNMR(CDCl3)δ□0.9(3H，t)，1.2(2H，m)，1.4(2H，m)，2.5(2H，m)，2.7(1H，m)，2.9(1H，dd，J＝6，12Hz)，3.4(1H，m)，3.5(1H，AB四重峰J＝10Hz)，3.55(1H，m)，3.65(1H，m)，3.7(1H，dd，J＝2，13Hz)，3.8(1H，dd，J＝6，10Hz)，4.4-4.9(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(15g)溶於MeOH(300ml)中並在氫氣氛下於PdCl2(5g)存在下攪拌過夜。TLC表明反應完成。通過硅藻土過濾反應混合物(隨後甲醇/水洗滌)並把濾液濃縮為大約50ml。把溶液緩慢加入到已經用鹽酸預先洗滌的70g Dowex 50X12-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然後用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產物部分，得到為無色油的3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(4.8g，85％)。1H NMR(D2O)δ0.90(3H，t)，131(2H，m)，1.49(2H，m)，2.53(1H，dd)，2.63(1H，ddd)，2.72(1H，ddd)，2.87(1H，dd)，3.14(1H，q)，3.44(1H，t)，3.61(1H，ddd)，3.75(1H，dd)，3.85(1H，dd)，3.89(1H，dd)。
實施例3 3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-戊基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-葡萄糖醇(實施例1a)，1g)溶於正戊胺(10ml)中並在55℃下攪拌4天。TLC分析表明反應已經進行完全。濃縮反應混合物並經快速層析法(0→12％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-戊基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(680mg，76％)。1HNMR(CDCl3)δ□1.0(3H，t)，1.2(2H，m)，1.4(4H，m)，1.6(2H，m)，2.7(2H，m)，2.85(1H，m)，3.05(1H，dd，J＝5，10.5Hz)，3.55(1H，m)，3.7(2H，m)，3.85(2H，m)，3.95(1H，dd，J＝5，9Hz)，4.6-5.05(8H，m，OCH2Ph)，7.4-7.5(20H，m，ArH)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-戊基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(680mg)溶於MeOH(10ml)中並在氫氣氛下於PdCl2(300mg)存在下攪拌過夜。TLC表明反應完成。通過硅藻土過濾反應混合物(隨後甲醇/水洗滌)並濃縮濾液。把濃縮液用水稀釋並緩慢加入到已經用鹽酸預先洗滌的5g Dowex 50X4-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然後用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產物部分，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(240mg，90％)。1H NMR(D2O)δ0.75(3H，t)，1.15(4H，m)，1.35(2H，m)，2.35(1H，dd，J＝10，12.5Hz)，2.5(2H，m)，2.7(1H，dd，J＝5，12Hz)，3.0(1H，dd，J＝4，9Hz)，3.25(1H，t)，3.45(1H，m)，3.6(1H，dd，J＝5，10Hz)，3.75(2H，m)。
實施例4 3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-庚基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-葡萄糖醇(實施例1a)，1g)溶於正庚胺(10ml)中並在55℃下攪拌4天。TLC分析表明反應已經進行完全。濃縮反應混合物並經快速層析法(0→25％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-庚基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(690mg，76％)。1H NMR(CDCl3)δ□0.9(3H，t)，1.3(8H，m)，1.4(2H，m)，2.5(2H，m)，2.7(1H，m)，2.9(1H，dd，J＝5，11Hz)，3.4(1H，m)，3.55(2H，m)，3.7(2H，m)，3.8(1H，dd，J＝6，13Hz)，4.4-4.9(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-庚基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(690mg)溶於MeOH(10ml)中並在氫氣氛下於PdCl2(350mg)存在下攪拌過夜。TLC表明反應完成。通過硅藻土過濾反應混合物(隨後甲醇/水洗滌)並濃縮濾液。把濃縮液用水(5ml)稀釋並緩慢加入到已經用鹽酸預先洗滌的5g Dowex 50X4-200樹脂上。將樹脂用水洗滌，然後用1∶7濃氨水∶水的混合液洗脫。濃縮產物部分，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(260 mg，90％)。1H NMR(D2O)δ0.7(3H，t)，1.1(8H，m)，1.3(2H，m)，2.45(3H，m)，2.7(1H，dd，J＝5，10Hz)，2.95(1H，dd，J＝4，9Hz)，3.25(1H，t)，3.4(1H，m)，3.55(1H，dd，J＝5.5，9.5Hz)，3.65(2H，m)。
實施例5 3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)a)2，3，4，6-四-O-苄基-D-半乳糖醇 將2，3，4，6-四-O-苄基-D-吡喃半乳糖(107g)溶於乙醇(0.6L)中並在於0℃下攪拌的同時加入硼氫化鈉(31g)。攪拌過夜後，TLC分析表明反應完成。將乙醇溶液在水(3L)和乙醚(1.5L)之間分配。乾燥(Na2SO4)有機相，過濾並濃縮。經快速層析法(使用20→50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脫)純化生成的油，然後從乙酸乙酯/石油醚的混合物中結晶，得到為白色固體的2，3，4，6-四-O-苄基-D-半乳糖醇(97g，91％)。1H NMR(CDCl3)δ2.4(1H，bs)，3.35(1H，bs)，3.55(2H，m)，3.8(3H，m)，3.9(2H，m)，4.1(1H，m)，4.4-4.8(8H，m，OCH2Ph)，7.2-7.4(20H，m，ArH)。質譜m/z 543(M+H)+565(M+Na)+。
b)2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-半乳糖醇 在0℃下，將2，3，4，6-四-O-苄基-D-半乳糖醇(7.6g)於吡啶(20ml)中攪拌並加入甲磺醯氯(2.5ml)在吡啶(20ml)中的溶液。把溶液在4℃下貯存過夜。TLC分析顯示反應完成。將反應混合物在乙酸乙酯和水/冰之間分配。先後用5％鹽酸和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機部分，乾燥(Na2SO4)並濃縮，得到無色的油，將其直接用於下一步。
c)哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-半乳糖醇溶於正丁胺(50ml)中並在55℃下攪拌5天。濃縮反應混合物並經快速層析法(5→16％乙酸乙酯/石油醚的梯度洗脫)純化粗品油，得到為無色油的哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)(自2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-半乳糖醇得到4.8g，59％)。1H NMR(CDCl3)δ0.9(t，3H，J＝6Hz)，1.25(m，2H)，1.4(m，2H)，2.6(m，3H)，2.8(m，1H)，3.0(m，1H)，3.4(m，1H)，3.55(2H，m)，3.75(1H，m)，3.8(1H，m)，4.3-4.6(8H，m，OCH2Ph)，7.15-7.3(20H，m，ArH)。
d)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S) 將哌啶，1-丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)(4.8g)溶於甲醇(100ml)中並在氫氣氛下於PdCl2(2.5g)存在下攪拌過夜。TLC表明反應完成。通過硅藻土過濾反應混合物(隨後用甲醇/水洗滌)並濃縮為25ml水溶液。把該溶液緩慢加入到已經用鹽酸預先洗滌的40ml Amberlite IR-120(正)樹脂上。將樹脂用水洗滌，然後用1∶7濃氨水∶水的混合液(500ml)洗脫。濃縮產物部分，得到為無色油的3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)(1.27g，70％)。1H NMR(D2O)δ0.95(3H，t)，1.35(m，2H)，2.61(1H，dd)，2.70(1H，m)，2.87(1H，dd)，2.95(1H，ddd)，3.76(1H，ddd)，3.78(1H，dd)，3.90(1H，dd)，3.94(1H，ddd)，4.06(1H，dd)。
實施例6 3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-壬基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將粗品2，3，4，6-四-O-苄基-1，5-二-O-甲磺醯基-D-葡萄糖醇(實施例1a)，1.0g)溶於壬胺(1.2ml)中並在55℃下攪拌5天。濃縮反應混合物並經柱層析法(0→12％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到哌啶，1-壬基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(660mg，71％)。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ0.88(3H，t，J7Hz)；1.14-1.40(12H，m)；1.40-1.55(2H，m)；2.43-2.54(2H，m)；2.60-2.71(1H，m)；2.84(1H，dd，J＝12，5Hz)；3.30-3.36(1H，m)；3.42-3.57(2H，m)；3.64(1H，dd，9，5Hz)；3.67(1H，dd，J＝11，3Hz)；3.78(1H，dd，J＝9，6Hz)；4.47(2H，ABq)；4.56-4.72(4H，m)；4.78(2H，ABq)；7.18-7.42(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 將哌啶，1-壬基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(660mg)溶於MeOH(10ml)中並在氫氣氛下於PdCl2(300mg)存在下攪拌過夜。通過硅藻土過濾反應混合物(隨後用甲醇/水洗滌)並濃縮濾液。經吸取到Dowex 50X4-200樹脂(8g)上並用1∶7氨水∶水的混合液洗脫純化濃縮液，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(160mg，61％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.91(3H，m)；1.3(12H，bs)；1.45-1.58(2H，m)；2.53-2.69(2H，m)；2.70-2.84(2H，m)；3.00-3.07(1H，m)；3.35-3.42(1H，m)；3.49-3.58(1H，m)；3.70(1H，dd，J＝9，5Hz)；3.78-3.89(2H，m)。MS m/z 290.4(M+H)+。
實施例7 3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(1-乙基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(4.0g)溶於1-乙基丙胺(6ml)中並在55℃下攪拌4天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-15％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-(1-乙基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.46 g，33％)。1H NMR(CDCl3)δ 0.79-0.86(6H，m)，1.17-1.30(4H，m)，2.30-2.41(1H，m)，2.62-2.71(1H，m)，2.83(1H，dd，J＝12，5Hz)，3.30-3.34(1H，m)，3.43-3.53(2H，m)，3.66-3.73(2H，m)，3.83(1H，dd，J＝9，6Hz)，4.50(2H，s)，4.63-4.79(4H，m)，4.83(2H，ABq)，7.23-7.42(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(1-乙基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.46g)在甲醇(15ml)中的溶液中加入PdCl2(750mg)。將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。經吸取到8.5g Dowex 50X4-200樹脂上並用1∶728％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍幹後得到為白色固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(530mg，92％)。1H NMR(D2O)δ0.82(6H，t，J＝7Hz)，1.29-1.58(4H，m)，2.41-2.52(2H，m)，2.87(1H，dd，J＝13，5Hz)，3.16(1H，dd，J10，4Hz)，3.36-3.44(1H，m)，3.47-3.56(1H，m)，3.69-3.77(3H，m)。MS m/z 234(M+H)+。
實施例8 3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(3-甲基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(4.0g)溶於異戊胺(4ml)中並在55℃下攪拌4天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-20％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(3-甲基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.53g，67％)。1H NMR(CDCl3)δ0.80(6H，d，J＝6Hz)，1.12-1.33(3H，m)，2.39-2.50(2H，m)，2.59-2.70(1H，m)，2.79(1H，dd，J＝11，4Hz)，3.26-3.32(1H，m)，3.38-3.52(2H，m)，3.56-3.67(2H，m)，3.74(1H，dd，J＝11，6Hz)，4.43(2H，ABq)，4.52-4.67(4H，m)，4.75(2H，ABq)，7.18-7.30(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(3-甲基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.53 g)在甲醇(30ml)中的溶液中加入PdCl2(1.2g)。將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。經吸取到12g Dowex 50X4-200樹脂上並用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(960mg，97％)。1H NMR(D2O)δ0.83(6H，dd，J＝7，1Hz)，1.26-1.42(2H，m)，1.43-1.55(1H，m)，2.46(1H，dd，J＝12，10Hz)，2.57(1H，ddd，J＝12，10，6Hz)，2.68(1H，ddd，J＝12，10，6Hz)，2.81(1H，dd，J＝12，5Hz)，3.08(1H，dd，J＝10，5Hz)，3.36(1H，t，J＝9Hz)，3.54(1H，ddd，J＝10，9，5Hz)，3.68(1H，dd，J＝10，6Hz)，3.75-3.87(2H，m)。MS m/z 234(M+H)+。
實施例9 3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(2-苯基)乙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(5.0g)溶於苯乙胺(10ml)中並在55℃下攪拌3天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-30％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(2-苯基)乙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(3.2g，71％)。1H NMR(CDCl3)δ0.86-0.98(2H，m)，1.16-1.28(2H，m)，2.56-2.7(1H，m)，2.70-2.88(1H，m)，2.91(1H，dd，J＝11，4Hz)，2.98-3.06(1H，m)，3.41-3.46(1H，m)，3.46-3.60(2H，m)，3.66(1H，dd，J＝9，6Hz)，3.75(1H，dd，J 10，3Hz)，3.87(1H，dd，J＝10，6Hz)，4.52(2H，ABq)，4.60-4.74(4H，m)，4.83(2H，ABq)，7.10-7.38(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(2-苯基)乙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(4.0g)在甲醇(30ml)中的溶液中加入PdCl2(1.4g)。將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。將粗品物料吸取到20g Dowex 50X4-200樹脂上並用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫。把產物部分凍幹，然後經矽膠上的柱層析法(0-20％MeOH/二氯甲烷的梯度洗脫)純化，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(970mg，81％)。1H NMR(D2O)δ2.50(1H，dd，J＝12，10Hz)，2.68-2.97(5H，m)，3.3(1H，dd，J＝9，5Hz)，3.36(1H，t，J＝9Hz)，3.51-3.61(1H，m)，3.66-3.73(2H，m)，3.74-3.83(1H，m)，7.18-7.37(5H，m)。MS m/z 268(M+H)+。
實施例10 3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(3-苯基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(5.0g)溶於3-苯基丙胺(5ml)中並在55℃下攪拌3天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-25％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-(3-苯基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(4.25g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ1.72-1.84(2H，m)，2.54-2.64(4H，m)，2.70-2.80(1H，m)，2.87(1H，dd，J＝11，5Hz)，3.34-3.39(1H，m)，3.46-3.62(2H，m)，3.65-3.74(2H，m)，3.84(1H，dd，J＝10，6Hz)，4.52(2H，ABq)，4.62-4.75(4H，m)，4.84(2H，ABq)，7.12-7.39(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(3-苯基)丙基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(4.2g)在甲醇(40ml)中的溶液中加入PdCl2(1.6g)。
將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。將粗品物料吸取到20g Dowex 50X4-200樹脂上並用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫。把產物部分凍幹，然後經矽膠上的柱層析法(0-20％MeOH/二氯甲烷的梯度洗脫)純化，得到為澄明的樹膠的3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(1.36 g，71％)。1H NMR(D2O)δ1.69-1.82(2H，m)，2.44(1H，dd，J＝12，10Hz)，2.51-2.72(4H，m)，2.78(1H，dd，J＝13，5Hz)，3.05(1H，dd，J＝11，5Hz)，3.34(1H，t，J＝9Hz)，3.52(1H，ddd，J＝10，9，5Hz)，3.66(1H，dd，J＝10，5Hz)，3.71-3.81(2H，m)，7.17-7.35(5H，m)。MSm/z 282(M+H)+。
實施例11 3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(2-乙基)己基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(5.0g)溶於2-乙基己胺(5ml)中並在55℃下攪拌4天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-17.5％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(2-乙基)己基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.6g，57％)。1H NMR(CDCl3)δ 0.75-0.93(6H，m)，1.17-1.38(9H，m)，2.16(1H，dd，J＝13，6Hz)，2.25-2.36(2H，m)，2.52-2.60(1H，m)，3.02-3.09(1H，m)，3.24-3.36(2H，m)，3.40-3.51(2H，m)，3.60(1H，dd，J＝10，6Hz)，4.53(2H，ABq)，4.62-4.76(4H，m)，4.85(2H，ABq)，7.18-7.31(20H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(2-乙基)己基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(2.6g)在甲醇(20ml)中的溶液中加入PdCl2(900mg)。將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。將粗品物料吸取到13g Dowex 50X4-200樹脂上並用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫。然後把產物部分經矽膠上的柱層析法(0-10％MeOH/二氯甲烷的梯度洗脫)純化，凍幹後，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(320mg，28％)。1H NMR(CDCl3)δ0.68-0.80(6H，m)，1.08-1.32(9H，m)，2.30-2.46(3H，m)，2.60(1H，dd，J＝13，5Hz)，2.90(1H，dd，J＝12，6Hz)，3.30-3.38(1H，m)，3.40-3.49(1H，m)，3.55(1H，dd，J＝13，9Hz)，3.66(1H，dd，J＝9，5Hz)，3.74(1H，dd，J＝11，7Hz)。MS m/z276(M+H)+。
實施例12 3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-(2-乙基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(3.0g)溶於2-乙基丁胺(2.5ml)中並在55℃下攪拌4天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-12％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為無色油的哌啶，1-(2-乙基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.93 g，74％)(Rf0.25，20％乙酸乙酯/石油醚)，其直接用於下一步。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-(2-乙基)丁基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(1.93g)在甲醇(20ml)中的溶液中加入PdCl2(800mg)。將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。經吸取到10g Dowex 50X4-200樹脂上並用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍幹後，得到為白色固體的3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(735mg，94％)。1H NMR(CDCl3)δ0.78(6H，t，J＝7Hz)，1.14-1.30(5H，m)，2.32-2.48(3H，m)，2.63(1H，dd，J＝13，5Hz)，2.92(1H，dd，J＝13，6Hz)，3.37(1H，t，J＝9Hz)，3.47(1H，ddd，J＝10，9，4Hz)，3.57(1H，dd，J＝11，7Hz)，3.68(1H，dd，J＝9，6Hz)，3.77(1H，dd，J＝11，4Hz)。MS m/z 248(M+H)+。
實施例13 3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(2.5g)溶於DMF(3ml)中。加入二異丙基乙胺(1.5ml)和R(+)-β-甲基苯乙胺(1g)並把反應物在55℃下攪拌5天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-25％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(740mg，32％)。1H NMR(CDCl3)δ1.21-1.27(3H，m)，2.52-2.59(1H，m)，2.70-2.95(4H，m)，3.35-3.40(1H，m)，3.44-3.52(2H，m)，2.64(1H，dd，J＝12，9Hz)，3.74(1H，dd，J＝11，3Hz)，3.86(1H，dd，J＝9，6Hz)，4.47-4.69(6H，m)，4.83(2H，ABq)，7.17-7.37(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(740mg)在甲醇(15ml)中的溶液中加入PdCl2(300mg)。將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。經吸取到10g Dowex50X4-200樹脂上並用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍幹後，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(300mg，92％)。1H NMR(CDCl3)δ1.18(3H，d，J＝5Hz)，2.42(1H，dd，J＝12，9Hz)，2.56-2.87(5H，m)，3.29(1H，t，J＝9Hz)，3.39-3.66(4H，m)，7.07-7.23(5H，m)。MS m/z 282.3(M+H)+。
實施例14 3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)a)哌啶，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S) 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(2.5g)溶於DMF(3ml)中。加入二異丙基乙胺(1.5ml)和S(-)-β-甲基苯乙胺(1g)並把反應物在55℃下攪拌5天。將反應混合物在NaOH水溶液(1M，30ml)和乙酸乙酯(50ml)之間分配。用飽和NaHCO3水溶液洗滌有機相，經Na2SO4乾燥並濃縮。經矽膠上的柱層析法(0-17％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的粗品油，得到為淺黃色油的哌啶，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)(700mg，31％)。1H NMR(CDCl3)δ 1.17-1.21(3H，m)，2.55-2.64(1H，m)，2.79(1H，dd，J＝12，7Hz)，2.87(1H，dd，J＝13，6Hz)，2.98(1H，dd，J＝13，7Hz)，3.20-3.26(1H，m)，3.40-3.54(3H，m)，3.69(1H，dd，J＝10，2Hz)，3.84(1H，dd，J＝13，7Hz)，4.46-4.70(6H，m)，4.8(2H，ABq)，7.09-7.38(25H，m)。
b)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S) 向哌啶，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(700mg)在甲醇(15ml)中的溶液中加入PdCl2(300mg)。將反應混合物在氫氣氛下攪拌過夜。TLC分析表明反應完成，將其通過硅藻土墊過濾並濃縮。經吸取到10g Dowex50X4-200樹脂上並用1∶7 28％氨水∶水的混合液洗脫純化粗品物料，凍幹後，得到為膠質固體的3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)(250mg，81％)。1H NMR(CDCl3)δ1.17(3H，d，J＝5Hz)，2.45(1H，dd，J＝13，10Hz)，2.59(1H，dd，J＝13，4Hz)，2.64-2.86(3H，m)，2.95(1H，dd，J＝14，6Hz)，3.34(1H，t，J＝8Hz)，3.42-3.55(2H，m)，3.64(1H，dd，J＝8，5Hz)，3.74(1H，dd，J＝11，6Hz)，7.08-7.23(5H，m)。MS m/z 282.3(M+H)+。
實施例15 哌啶，1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)[保護的中間體] 將1，5-二-O-甲磺醯基-2，3，4，6-四-O-苄基-D-葡萄糖醇(25g)溶於4-甲氧基苄基胺(50ml)中並在55℃下攪拌4天。濃縮反應混合物並經矽膠上的柱層析法(0-23％乙醚/石油醚的梯度洗脫)純化生成的棕色油，得到為淺黃色油的哌啶，1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基-甲氧基)甲基]，(2S，3R，4R，5S)(17.1g，75％)。1H NMR(CDCl3)δ2.50-2.60(1H，m)，2.83(1H，dd，J＝13，4Hz)，3.39-3.44(1H，m)，3.51-3.61(2H，m)，3.64-3.80(3H，m)，3.84(3H，s)，3.70-3.77(2H，m)，4.54(2H，s)，4.58-4.69(4H，m)，4.85(2H，ABq)，6.87(2H，d，J＝7Hz)，7.18(2H，d，J＝7Hz)，7.26-7.40(20H，m)。
生物數據測試本發明的化合物(表1)以測定它們對半乳糖苷酶和葡糖基神經醯胺合酶的IC50濃度。在前者情況下，按照在Jacob和Scudder，Methods in Enzymology，(1994)，230，280中描述的方法進行試驗。在葡糖基神經醯胺合酶的情況下，按照在Platt等，J.Biol.Chem.，(1994)，269，27108中描述的方法進行試驗。
表1
表2顯示對人體酶的數據。必須按照在Platt等，J.Biol.Chem.，(1994)，269，27108中描述的，進行GCS的抑制作用試驗，酶源為在昆蟲細胞中表達的人重組GCS。如(Biochemical Genetics，A LaboratoryManual，Oxford University Press)描述的那樣，進行葡糖苷酶試驗，除將對-硝基苯基連接的底物用於替代甲基傘形酮連接的底物。
表2
因此，本發明的化合物對葡糖苷酶和半乳糖苷酶比化合物例如NB-DNJ或者NB-DGJ呈現更小的抑制作用(因此減少副作用)，同時保持對葡糖基神經醯胺合酶的活性。
權利要求
1.一種式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或者前藥 其中R為任選由C3-7環烷基取代和任選被-O-間隔的C1-16直鏈或支鏈烷基，所述氧與環氮通過至少兩個碳原子分開，或者C1-10烷基芳基，其中芳基為苯基、吡啶基、噻吩基或者呋喃基，其中苯基由一個或者更多個選自以下的取代基任選取代F、Cl、Br、CF3、OCF3、OR1和C1-6直鏈或支鏈烷基；和R1為氫，或C1-6直鏈或支鏈烷基；條件是化合物不是a)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；b)3，4，5-哌啶三醇，1-苯基甲基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)；或c)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)。
2.一種如在權利要求1中定義的化合物，其中3位羥基以R構型存在。
3.一種如在權利要求1或者2中定義的化合物，其中R為C1-16直鏈或支鏈烷基。
4.一種如在權利要求3中定義的化合物，其中R為C3-10直鏈烷基。
5.一種化合物選自3，4，5-哌啶三醇，1-丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-庚基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3S，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-壬基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-甲基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-苯基)乙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(3-苯基)丙基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(1-乙基)己基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-(2-乙基)丁基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2R)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)3，4，5-哌啶三醇，1-[(2S)-(2-甲基-2-苯基)乙基]-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)或其藥學上可接受的鹽或者前藥。
6.化合物3，4，5-哌啶三醇，1-戊基-2-(羥基甲基)-，(2S，3R，4R，5S)或其藥學上可接受的鹽或者前藥。
7.一種如在先前權利要求的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)和b)，它用於醫藥中。
8.一種藥用製劑，它包括至少一種如在權利要求1-6的任一項中定義化合物，但不包括條件a)和b)，任選與一或更多種藥學上可接受的載體、賦形劑和/或稀釋劑混合在一起。
9.一種用於製備如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物的方法，方法包括a)使式(II)化合物 與NaBH3CN和式R2CHO的醛在乙酸-甲醇中反應，其中R2為C1-15直或分支鏈烷基，或者在溶劑中與NaBH(OAc)3和式R2CHO的醛反應；其中R2為由C3-7環烷基任選取代且由-O-任選間隔的C1-15直或分支鏈烷基，所述氧通過至少一個碳原子與CHO部分分開，或者為其中芳基如在權利要求1中定義的C0-9烷基芳基；或者b)使式(III)化合物脫保護 其中R如在權利要求1中定義，並且P可以相同或者不同，為羥基保護基團。
10.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備葡糖基神經醯胺合酶抑制劑中的用途。
11.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療糖脂貯積疾病的藥物中的用途。
12.如在權利要求11中要求的用途，其中糖脂貯積疾病為高歇氏病、桑德霍夫氏病、泰-沙二氏病、法布裡氏病或者GM1神經節糖苷沉積症。
13.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療C型尼-皮二氏病、I型粘多糖貯積病、IIID型粘多糖貯積病、IIIA型粘多糖貯積病、VI型粘多糖貯積病、VII型粘多糖貯積病、α-甘露糖苷過多症或者IV型粘脂貯積病的藥物中的用途。
14.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療神經癌症包括神經母細胞瘤、腦癌、腎腺瘤、惡性黑素瘤、多發性骨髓瘤和廣譜抗藥性癌症的藥物中的用途。
15.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療阿爾滋海默氏病、癲癇、中風、帕金森氏病或者脊髓損傷的藥物中的用途。
16.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療由傳染性微生物或所述生物產生的毒素引起的疾病的藥物中的用途，所述傳染性微生物採用細胞表面的糖脂作為所述生物自身的受體，或者在製備用於治療由傳染性生物引起的疾病的藥物中的用途，對所述傳染性生物而言，葡糖基神經醯胺的合成是必需的或者重要的過程。
17.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療與異常糖脂合成有關的疾病例如多囊腎疾病、糖尿病腎肥大和動脈粥樣硬化的藥物中的用途。
18.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療通過給予神經節糖苷例如GM1神經節糖苷可以治療的病症的藥物中的用途。
19.如在權利要求1-6的任一項中定義的化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於使雄性哺乳動物可逆性不育的藥物中的用途。
20.式(I)化合物，但不包括條件a)-c)，在製備用於治療肥胖症的藥物中的用途。
21.一種式(III)化合物 其中R如在權利要求1中定義，並且P可以相同或者不同，為羥基保護基團，條件是化合物不為i)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)；ii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-三(乙醯氧基)-2-[(乙醯氧基)-甲基]，(2S，3R，4R，5S)；iii)哌啶，1-苯基甲基-3，4，5-二(乙醯氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)；或者iv)哌啶，1-甲基-3，4，5-二(乙醯氧基)-5-(苯基甲氧基)-2-[(苯基甲氧基)-甲基]，(2S，3S，4R，5S)。
全文摘要
式(I)化合物，其中R表示各種取代基，用作葡糖基神經醯胺合酶抑制劑。
文檔編號A61K31/445GK1496351SQ02806226
公開日2004年5月12日 申請日期2002年1月11日 優先權日2001年1月12日
發明者T·D·布特爾斯, T D 布特爾斯, R·A·德維克, 德維克, G·弗利特, 奧爾查德, M·G·奧爾查德, 普拉特, F·M·普拉特 申請人:牛津格萊克科學(英國)有限公司, 牛津大學校委會