雜環衍生物的製作方法

2023-12-05 18:33:36

專利名稱：雜環衍生物的製作方法
雜環衍生物本發明涉及雜環衍生物，涉及包含這些化合物的藥物組合物，以及它們在治療中 的用途，特別涉及它們在製備治療或預防精神病的藥物中的用途，其中所述治療或預防需 要增強由AMPA受體介導的突觸響應，所述精神病諸如精神分裂症、抑鬱症、以及學習和記 憶障礙。L-穀氨酸(L-glutamate)是位於哺乳動物中樞神經系統(CNS)中的最豐富的興 奮性神經遞質。L-穀氨酸在認知、情緒和運動功能的控制中扮演重要的角色，並且在精神 異常和神經障礙中這些過程是不平衡的。穀氨酸的生理學作用是通過兩種受體家族促代 謝(G-蛋白偶聯)受體和親離子(配體門控型離子通道)受體介導的。親離子受體負責介 導對細胞外的L-穀氨酸的快速突觸響應。基於分子和藥理學差異，親離子穀氨酸受體被 分為三個亞類，並按照最初被鑑定用來選擇性活化它們的小分子拮抗劑命名AMPA( a -氨 基-3-羥基-5-甲基-4-異噁唑-丙酸)、NMDA (N-甲基-D-天冬氨酸)和紅藻氨酸(2-羧 基-3-羧基甲基-4-異丙烯基吡咯烷)。AMPA受體在腦生理學中的重要性已經得到廣泛認 可，並且已經表明AMPA受體在CNS中控制大多數快速興奮性胺基酸傳遞，還對在諸如學習 和記憶的多種生理學過程中發揮作用的突觸可塑性有貢獻。為此，已經存在日益增長的對 AMPA受體的正向變構調節劑用於多種臨床適應症(包括精神分裂症，抑鬱症和阿爾茨海默 氏病)的效用的評定。AMPA受體亞單位通過四個不同的基因(稱作GluRl至4)編碼，其各自代表約900 個胺基酸的蛋白質。各個亞單位由大的細胞外的N-末端結構域組成，即由命名為S1和S2 的結構域所形成的L-穀氨酸的細胞外配體結合位點。跨膜結構域由三個跨膜區Ml、M3和 M4以及折返環(re-entrant loop)M2組成。這之後是長的細胞內C-末端結構域。所有四 個AMPA受體亞單位包含所謂的「翻_轉」的剪接變體，其在S2細胞外的結構域中編碼外顯 子的38個胺基酸的交替剪切中有差異(小於10個胺基酸的差異)。AMPA受體的其它異質 性由RNA編輯產生，最顯著的是位於GluR2亞單位的孔區(M2)的Q/R位點。據信，包含大 部分天然的GluR2亞單位的R變異體的特徵在於顯著降低的鈣通透性。另一個R/G編輯位 點位於帶有G形式的GluR2、GluR3和GluR4的S2結構域中，表現出加速從脫敏作用中恢復 的動力學。脫敏作用和失活作用的動力學是AMPA受體的重要功能特性，其控制對穀氨酸的 突觸響應的強度和持續時間。脫敏作用和失活作用的過程可以通過AMPA受體正向變構調 節劑來調控，所述調節劑從激動劑結合位點遠程地結合，但仍然影響激動劑結合，或者實際 上激動劑介導的受體構象變化與門控和/或脫敏作用相關聯。因此，一直努力開發特異地 針對這些特性的藥物，並且其在與穀氨酸能信號發送減少有關的多種CNS障礙的治療中具 有治療潛力。這些病症包括與年齡相關的記憶缺損、阿爾茨海默氏病、帕金森病、抑鬱症、精 神病、與精神病有關的認知缺陷、注意缺陷障礙和注意力缺陷多動症。已知用作AMPA受體調節劑的多種結構類別的化合物(參見G. Lynch，Current Opinion in Pharmacology，2006，6，82-88的近期綜述)。例如，與茴拉西坦有關的所謂的 苯甲醯胺化合物(參見 A. Arai 等人，J Pharmacol Exp. Ther.，2002，30，1075-1085)，苯並
5噻二嗪衍生物如 S-18689(參見 B. Pirotte，J Med. Chem.，1998，41，2946-2959)和聯芳基丙 基磺醯胺衍生物(參見P. L. Ornstein等人，JMed. Chem. 2000，43，4354-4358)。另一類別的 AMPA受體調節劑公開於國際專利申請W0 2005/040110和W0 2005/070916，其中詳述了用 作穀氨酸調節劑的不同雜環化合物。這些類別中的每一類化合物均表現出對AMPA受體的 不同程度的增強作用。但是，AMPA受體的持續激活與癲癇發作和其它促驚厥副作用有關(Yamada K. A.， Exp. Opin. Invest. Drugs 2000，9，765-777)。因此，還存在對其它的AMPA受體調節劑的需 要，所述調節劑具有對有利治療作用和不希望的神經中毒作用的最佳分離。J. Chem. Res.，1999，646涉及具有殺軟體動物和殺幼蟲活性的新的取代的噻吩並 [2，3-d]嘧啶酮衍生物和它們的縮合產物的合成。但是，不存在這種化合物將用作AMPA受 體調節劑的暗示。在本發明的第一個方面涉及式I的雜環衍生物 式I其中L 是(CH2)m，其中 m 是 1 或 2;R1是Ch烷基、C3_5環烷基、(V4烷基氧基、滷素或CN，所述CH烷基、C3_5環烷基和 (V4烷基氧基任選地被一個或多個滷素取代；R2是Ci_4烷基、C3_5環烷基或Ci_4烷基氧基，所述Ci_4烷基、C3_5環烷基和Ci_4烷基 氧基被選自OH、Ci_4烷基氧基和NR9!^的取代基取代；X^X3獨立地是N或CR3，其中R3是H或甲基；Y1是NR4或CHR4，其中R4是H或烷基；Y2是N或CR5，其中R5是H、烷基、C3_8環烷基或C6_1(1芳基；R6是H、(V4烷基或C3_5環烷基；Y3是0、S或NR7，其中R7是H或Ch烷基；Y4是N或CR8，其中R8是H或C:_4烷基； R9和R"1獨立地是H或Ci_4烷基，任選地被5-9元雜芳基環系統取代，所述雜芳基 環系統包含1-2個選自0、S和N的雜原子，或R9和R"1與它們所連接的N —起形成4-6元 飽和的或不飽和的雜環，所述雜環任選包含選自0、S和N的另外的雜原子或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。術語Ci_4烷基，如本文所定義的，表示具有1-4個碳原子的支鏈或非支鏈烷基基 團。這種基團的實例是甲基、乙基、異丙基和叔丁基。術語C3_8環烷基，如本文所定義的，表示具有3-8個碳原子的支鏈或非支鏈環烷基基團。這種基團的實例是環丙基、環戊基和2-甲基環己基。同樣地，術語C3_5環烷基，如本 文所定義的，表示具有3-5個碳原子的支鏈或非支鏈環烷基基團。這種基團的實例是環丙 基和環戊基。術語(V4烷基氧基，如本文所定義的，表示具有1-4個碳原子的支鏈或非支鏈烷基 氧基基團。這種基團的實例是甲氧基、乙氧基、異丙基氧基和叔丁基氧基。術語C6_1(l芳基，如本文所定義的，表示具有6-10個碳原子並且包含一個環或稠合 在一起的兩個環的芳香族基團，其中至少一個環是芳香族的。這種基團的實例包括苯基和萘基。術語滷素，如本文所定義的，表示氟、氯、溴或碘。包含1-2個選自0、S和N雜原子的5至9元雜芳基環系統的實例包括，但不限於， 呋喃、吡咯、噻吩、咪唑、吡唑(pyrrazole)、噻唑、吡啶、嘧啶、吲哚、吲唑和苯並噻吩。任選地包含選自0、S和N的另外的雜原子的4至6元飽和的或不飽和的雜環的實 例包括，但不限於，吡咯、咪唑、吡唑、噻唑、吡啶、哌啶、嗎啉和四氫吡啶。術語溶劑化物，如本文所定義的，指由溶劑和溶質(在本發明中，式I的化合物) 所形成的可變化學計量學的複合物。這種溶劑可以不幹擾溶質的生物學活性。適合的溶劑 的實例包括，但不限於，水、乙醇和乙酸。在本發明的一個實施方案中，L是CH2。在另一個實施方案中，L是(CH2)2。在本發明的一個進一步的實施方案中，R1是(V4烷基、Ci_4烷基氧基、滷素或CN，所 述Ci_4烷基和Ci_4烷基氧基任選地被一個或多個滷素取代。在一個進一步的實施方案中，R1 是Ci_4烷基或CN，所述(V4烷基任選地被1-3個滷素取代。在一個進一步的實施方案中，R1 是異丙基、叔丁基、CN或三氟甲基。在一個進一步的實施方案中，R1是三氟甲基。在本發明的另一個實施方案中，R2是(V4烷基，其被選自0H、(V4烷基氧基和NR9R1Q 取代。在一個進一步的實施方案中，R2是甲基，任選地被羥基、Ch烷基氧基或NR9Ri°取代，其 中R9和具有前述定義的含義。在一個進一步的實施方案中，R2是羥基甲基或CH2NR9R1(i。在本發明的另一個實施方案中，X1和X2是N並且X3是CR3，其中R3具有前述定義 的含義。在一個進一步的實施方案中，X1和X2是N並且X3是CH。在本發明的另一個實施方案中，X1和X3是N並且X2是CR3，其中R3具有前述定義 的含義。在本發明的另一個實施方案中，X1是CR3並且X2和X3是N，其中R3具有前述定義 的含義。在本發明的另一個實施方案中，R3是H或甲基。在一個進一步的實施方案中，R3是 H0在本發明的另一個實施方案中，Y1是NR4，其中R4具有前述定義的含義。在本發明的另一個實施方案中，Y2是N。在一個進一步的實施方案中，Y2是CR5，其 中R5具有前述定義的含義。在本發明的另一個實施方案中，Y3是0或S。在一個進一步的實施方案中，Y3是S。 在一個進一步的實施方案中，Y3是CR7，其中R7具有前述定義的含義。在本發明的另一個實施方案中，Y4是N。在一個進一步的實施方案中，Y4是CR8，其 中R8具有前述定義的含義。
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在本發明的另一個實施方案中，R4是H或Ci_4烷基。在另一個實施方案中，R4是H 或甲基。在一個進一步的實施方案中，R4是H。在一個進一步的實施方案中，Y1是NR4，其中 R4是H或甲基。在一個進一步的實施方案中，Y1是NR4，其中R4是H。在本發明的另一個實施方案中，R5是H，(V4烷基、C3_8環烷基或C6_1(1芳基。在一個 進一步的實施方案中，R5是H、甲基或苯基。在一個進一步的實施方案中，R5是H或甲基。 在一個進一步的實施方案中，Y2是CR5，其中R5是H或甲基。在本發明的另一個實施方案中，R6是H或(V4烷基。在一個進一步的實施方案中， R6是H或甲基。在本發明的另一個實施方案中，R7和R8獨立地是H或甲基。在一個進一步的實施 方案中，R7和R8是H。在本發明的另一個實施方案中，R9和獨立地是H或(V4烷基。在一個進一步的 實施方案中，R9和儼獨立地是H或Ci_4烷基，所述(V4烷基被吡咯、咪唑、噻唑、吡啶、D引哚 或吲唑取代。在一個進一步的實施方案中，R9和R"1獨立地是H或甲基，所述甲基被吡咯、咪 唑、噻唑、吡啶、吲哚或吲唑取代。在本發明的一個進一步的實施方案中，R9和R"1與它們所連接的N —起形成哌啶、 嗎啉、吡咯或咪唑環。在本發明的一個進一步的實施方案中，是式II的雜環衍生物式II 其中RLR6和m具有前述定義的含義。在本發明的一個進一步的實施方案中，是式III的雜環衍生物 式III其中RLR6和m具有前述定義的含義。
在本發明的一個進一步的實施方案中，是式IV的雜環衍生物 式IV其中Ri-R6、R8和m具有前述定義的含義。在本發明的一個進一步的實施方案中，是式V的雜環衍生物
式V
其中Ri-R6和m具有前述定義的含義。 在本發明的另一個實施方案中，是選自下述的雜環衍生物 或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。本發明的雜環衍生物通過有機化學領域公知的方法製備。請參考，例如，J. March, 『Advanced Organic Chemistry'4th Edition,John Wiley and Sons。在合成順序過程中，在 所關注的任何分子上保護敏感或反應基團可能是必要的和/或所需的。這藉助於常規的保 護基，諸如在 T.W.Greene 禾口 P.G.M.Wutts 『Protective Groups inOrganic Synthesis'2nd Edition, John Wiley and Sons，1991中所描述的那些來實現。所述保護基任選地在隨後 氨基噻吩衍生物(1)和吡唑衍生物(3)通過商購獲得，或通過本領域技術人員公 知的文獻操作或文獻操作的修飾來製備。例如，如在合成路線2所預示的，在有機鹼，諸如 二乙胺或N-甲基嗎啉的存在下，並且在合適的溶劑，諸如乙醇中通過2-氰基乙酸乙酯、酮 (5)和硫的縮合來製備氨基噻吩衍生物(1)。合成路線2 取代的吡咯衍生物可通過如在合成路線3中所說明的來製備。使用例如，三乙醯 氧基硼氫化鈉和乙酸在適合的溶劑，諸如N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)中，進行醛(7)的還 原氨化，提供胺(8)。或者，在適合的溶劑，諸如二乙醚中醛(7)經適合的格氏試劑處理，產 生羥基烷基衍生物(9)。使用例如，硼氫化鈉在適合的溶劑，諸如二氯甲烷和乙醇中還原酸 (7)，提供醇(10)。所述(10)的雜環核可通過經氫化鈉和碘甲烷在適合的溶劑，諸如N，N-二 甲基甲醯胺(DMF)中處理來進一步加工，產生N-甲基類似物(11)。合成路線3
適宜的階段使用本領域公知的方法除去。通式(I)的雜環衍生物的合成可如下述合成路線1-5中所概述地來完成。雜環衍生物諸如(4)如在合成路線1中所示來製備。在合適的溶劑，例如二噁燒 中氨基噻吩衍生物(1)經氯乙腈和HC1氣體處理，提供氯甲基衍生物(2)。在鹼諸如，叔丁 醇鉀的存在下，在例如四氫呋喃(THF)和N，N-二甲基甲醯胺(DMF)中氯甲基衍生物(2)與 吡唑衍生物(3)的進一步反應產生加合物(4)。合成路線1 醛衍生物類型(12)可通過如在合成路線4中所說明的來製備。在適合的溶劑，諸 如THF中，酯類類型(13)經試劑，諸如氫化鋁鋰還原，產生醇(14)。這之後在例如乙腈中經 二氧化錳或類似的試劑氧化，提供醛(13)。類似地，在適合的溶劑，例如THF中，酯(13)經 適合的格氏試劑，例如甲基溴化鎂處理，產生二烷基醇(15)。合成路線4 烷基胺衍生物類型(19)可如在合成路線5中所描述的製備。在適合的鹼例如，叔 丁醇鉀的存在下，在例如THF中氯甲基衍生物(2)經醇(16)處理，提供中間體(17)。醇通 過下述過程轉化為適合的離去基團，例如通過與甲烷磺醯氯在例如吡啶中反應，然後在適 合的鹼(例如在叔丁醇鉀)的存在下和在適合的溶劑(例如，在二甲基亞碸)中經胺置換， 提供所需的烷基胺衍生物(19)。合成路線5 本發明在其範圍內還包括根據本發明的雜環衍生物的所有立體異構形式，例如， 由於構型異構或幾何異構所產生的。這種立體異構形式是對映異構體，非對映異構體，順式 和反式異構體等等。例如，在其中R2是1-羥基乙基的情況下，化合物作為一對對映異構體 存在。在式I的雜環衍生物的單個立體異構體或其鹽或溶劑化物的情況下，本發明包括前 面提及的立體異構體，其基本上不含另一種立體異構體，即小於5%，優選小於2%，特別地 小於1 %。本發明範圍內還包括任何比例的立體異構體的混合物，例如包含基本上等量的兩 種立體異構體的外消旋混合物。對於手性化合物，由其得到純立體異構體的不對稱合成方法在本領域是公知 的，例如，用手性誘導合成、從手性中間體開始合成、對映選擇性酶轉化、在手性介質上使 用色譜法分離異構體。Chirality Inlndustry中描述了這些方法(由A. N. Collins， G. N. Sheldrake 和 J. Crosby 編輯，1992 John Wiley)。本發明的雜環衍生物，以游離鹼的形式，從反應混合物中作為藥學上可接受的鹽 分離出來。通過用有機酸或無機酸處理所述游離鹼得到這些鹽，這種酸的實例，包括但不限 於氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、馬來酸、丙二酸、甲磺 酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸和抗壞血酸。本發明的雜環衍生物還以無定形的形式存在。也可能是多晶形式。本發明的範圍 中也包括所有這些物理形式。溶劑化物的製備是眾所周知的。因此，例如，M. Caira等，J. Pharmaceutical Sci.， 93(3),601-611(2004)描述了抗真菌的氟康唑在乙酸乙酯以及水中的溶劑化物的製備。溶 劑化物、半溶劑化物、水合物等等的類似的製備在E. C. van Tonder等，AAPSPharmSciTech.， 5(1),article 12(2004)；和 A. L. Bingham 等，Chem. Commun.，603-604 (2001)中描述。典型 的、非限制性的過程包括在高於環境溫度下將本發明的化合物溶解在所需量的所需溶劑 (有機溶劑或水或其混合物)中，並且以足以形成晶體的速率冷卻所述溶液，隨後通過標準 方法分離所述晶體。分析技術諸如，例如I.R.光譜顯示晶體中的溶劑(或水)作為溶劑化 物(或水合物)存在。本發明還包括本文所描述的和要求保護的同位素-標記的化合物，所述化合物， 除了下述事實(即一個或多個原子被具有與通常天然發現的原子質量或質量數不同的原子質量或質量數的原子代替)之外與本文中所敘述的那些化合物相同。可被併入到本發 明的化合物之中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，諸如分別為2H、3H、 13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F 和 36C1。式I的某些同位素-標記的化合物(例如，經3H和14C標記的那些)可用於化合 物和/或底物的組織分布測定。由於氚標記的(即，3H)和碳_14(即，14C)同位素製備和檢 測的容易性，它們是特別優選的。此外，經較重的同位素，諸如氘(即，2H)取代由於更高的 代謝穩定性產生某些治療優點(例如，體內半衰期的增加或所需劑量的降低)，因此其在某 些情況下是優選的。式I的同位素標記的化合物一般可使用與合成路線和/或下述實施例 中所公開的那些類似的下列操作，通過用適宜的同位素標記的試劑取代非_同位素標記的 試劑來製備。本發明的範圍也預期包括本發明的化合物的前藥。前藥是充當藥物前體的化合 物，所述藥物前體在對受試者給藥時，通過代謝或其它的化學過程經歷轉化，從而產生了 式I的雜環衍生物或其溶劑化物或鹽。例如，其中X1是NH，氮基團可被加帽作為，例如醯 胺或氨基甲酸酯，在其對受試者給藥時經歷轉化回復為游離的羥基基團。在T. Higuchi和 V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987) 14 of the A. C. S. Symposium Series，and in BioreversibleGarriers in Drug Design，(1987)Edward B. Roche, ed.， AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press 中 [共了 )(寸Itfl^ 白勺 i寸ifeo 在 T. Higuchi 禾口 W. Stella，「Pro-drugs as Novel DeliverySystems，，，Vol. 14 of the
A.C. S. Symposium Series，and inBioreversible Carriers in Drug Design，ed. Edward
B.Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987 中提供對前 藥的用途的討論。在進一步的方面中，本發明的雜環衍生物和它們的藥學上可接受的鹽和溶劑化物 用於治療。同樣地，本發明的雜環衍生物用於製備用於治療或預防精神病的藥物，其中所述 精神病需要增強由AMPA受體介導的突觸響應。特別地，所述雜環衍生物用於製備治療下述 疾病的藥物，所述疾病包括神經變性障礙、認知或記憶功能障礙、記憶和學習障礙、注意力 障礙、創傷、中風、癲癇、阿爾茨海默氏病、抑鬱症、精神分裂症、精神障礙、焦慮、孤獨症、神 經病藥劑導致的障礙或疾病、物質濫用、酒精精神異常、帕金森病、睡眠障礙或睡眠發作或 睡眠剝奪導致的其它病症。本發明還包括用於治療任何前面提及的疾病和障礙的雜環衍生 物。本發明還包括治療包括人在內的哺乳動物的方法，所述哺乳動物罹患或易於罹患 抑鬱症或任何前面提及的障礙，所述方法包括對有此需要的受試者給予有效量的本發明的 雜環衍生物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。通過有效量或治療有效量是指有效抑制上 述疾病，從而產生所需的治療、改善、抑制或預防效果的本發明的化合物或組合物的量。本發明的雜環衍生物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物在本文中還被稱為活性 成分，其為達到治療效果必需的量，當然將隨特定化合物、給藥途徑、接受者的年齡和病況 以及待治療的特定障礙或疾病而變化。上述任何提及的障礙的適合的日劑量範圍是從0. 001到50mg/千克接受者(例如 人)體重/每日，優選從0. 01到20mg/千克體重/每日。所需的劑量可以作為一天內以適 宜間隔給藥的多次亞劑量提供。
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將3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-甲酸乙酯(95. 00g，0. 456mol)溶解於乾燥的 THF(IL)，並且將所得的溶液在丙酮/冰浴中冷卻。在30min內加入LiAlH4在THF(550mL， 0. 550mol)中的1M溶液，保持溫度< 10°C。然後，除去冷卻並且在室溫攪拌所述反應混合 物4h。再次冷卻反應並且邊冷卻(保持溫度< 20°C )邊加入1 1的THF 水的溶液 (250mL)，隨後加入5M HC1 (160mL)至中性/pH 6。加入EtOAc (1. 5L)並且攪拌所述混合物 30min，然後放置沉降過夜。通過過濾經過硅藻土(dicalite)除去所得的灰色顆粒固體，並 且經EtOAc洗滌。將合併的濾液經鹽水洗滌並且經MgS04乾燥，然後真空濃縮產生白色固 體(76. 00g,0. 457mol，100% ) 雖然可以單獨給予活性成分，但其優選作為藥物組合物存在。因此，本發明還提 供藥物組合物，其包含與一種或多種藥學上可接受的賦形劑混合的本發明的雜環衍生物， 所述賦形劑如描述於 Gennaro 等，Remmington :The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott,Williams and ffilkins,2000 中的那些；具體參見第 5 部分藥 物製造。術語「可接受的」指可與組合物的其它成分相容，並且對其接受者無害。適宜的賦 形劑描述於例如 the Handbook ofPharmaceutical Excipients, 2th Edition ；編輯 A. Wade 禾口 P. J. ffeller,American Pharmaceutical Association,Washington,ThePharmaceutical Press, London，1994中。組合物包括適於口、鼻、局部(包括頰、舌下和經皮)、非腸道(包 括皮下、靜脈內和肌內)或者直腸給藥的那些。本發明的雜環衍生物與一種或多種藥學上可接受的賦形劑的混合物可被壓制為 固體劑量單位，諸如片劑，或加工為膠囊或栓劑。藉助於藥學上適合的流體，也可以將所述 化合物用作注射製劑，以溶液劑、懸浮劑、乳劑的形式，或作為噴霧劑，例如鼻或頰噴霧劑。 為了製作例如片劑的劑量單位，還考慮使用諸如填充劑、著色劑、聚合物粘合劑等常規添力口 劑。總之，可以使用任何藥學上可接受的添加劑。本發明的化合物還適合在植入物、貼劑、 凝膠劑或任何其它用作即時和/或持續釋放的製劑中使用。可以用來製備和給予藥物組合物的適合的填充劑包括以適合的量使用的乳糖、澱 粉、纖維素和其衍生物等等，或其混合物。為了非腸道給藥，還可使用含有藥學上可接受的 分散劑和/或溼潤劑，諸如丙二醇或丁二醇的水性懸浮液、等滲鹽溶液和消毒的注射溶液。本發明還包括如本文前面所描述的藥物組合物以及適用於所述組合物的包裝材 料，所述包裝材料包括用於本文前面所描述的用途的藥物組合物的使用指南。本發明通過下述實施例進一步說明，所述實施例並非意欲限制本發明的保護範 圍。實施例16-甲基-2- ((4-((噻嗶-2-基甲基氨基)甲基)-3-(三氟甲基)-1H-吡嗶基) 甲基)噻吩並「2，3-dl嘧啶-4 (3H)-酮a) (3_(三氟甲基)-lH_吡唑-4-基)甲醇 1H 匪R(400MHz，CD30D) 8 4. 61 (s, 2H), 7. 75(s,lH)b)3_(三氟甲基)-lH_吡唑-4-甲醛 將(3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-基)甲醇(54. 00g,0. 325mol)懸浮於甲苯(2L)。 加入Mn02(113 . 00g，1.30mol)和4人的分子篩粉末(54. 00g)。在氮氣下所述反應混合物 經Dean-Stark分離器回流攪拌5. 5h。將所得的混合物熱過濾，並且使該餅狀物冷卻，然後 經1 1的DCM MeOH的溶液(3x500mL)洗滌。將合併的濾液真空濃縮產生所需的產物 (54. 00g，0. 329mol, 100% ) 1H WR(400MHz，DMSO) 8 8. 72 (s, 1H), 9. 91 (s, 1H)c) 2-氨基-5-甲基噻吩-3-甲酸乙酯 在30min 內將丙酸(29. 00g, 0. 499mol)，2-氰基乙酸乙酯(56. 50g, 0. 499mol) 和硫(15.98g，0.499mol)在乙醇(275mL)中的攪拌混合物加熱至65°C，同時滴加二乙胺 (36. 50g,0. 499mol)。將所述混合物在65°C攪拌18h，然後真空濃縮。通過快速柱色譜-矽膠 純化並且經10% EtOAc 異己烷洗脫產生所需的產物，為黃色油狀物(69. 00g，0. 372mol, 75% )。MS (ESI) :m/z 186[M+H] +。(1)2-(氯甲基)-6-甲基噻吩並[2，3-d]嘧啶_4(3H)_酮 將HC1氣體鼓泡經過2-氨基-5-甲基噻吩-3-甲酸乙酯(69. 00g,0. 372mol)和 氯乙腈(33.70g，0.447mol)在二噁烷(600mL)中的攪拌混合物6h。然後，將所述混合物真 空濃縮至約100-mL體積，澆注在水(1L)上並且所述混合物經NH40H鹼化。過濾並且烘箱 乾燥產生灰色固體(約60g)。將粗物質懸浮於二噁烷(1L)並加熱回流2h，然後真空濃縮。 這產生了所述標題化合物，為灰色固體(57. 88g，0. 270mol,72% )0MS (ESI) :216m/z[M+H] +。6)1-((6-甲基-4-氧代-3，4_二氫噻吩並[2，3-d]嘧啶_2_基)甲基)_3_(三氟 甲基)-lH-吡唑-4-甲醛 將3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-甲醛(3. 82g,23. 3mmol)和2-(氯甲基)-6-甲基 噻吩並[2, 3-d]嘧啶-4(3H)-酮(5. 00g,23. 3mmol)懸浮於 THF DMF(180mL 20mL)並 且加入叔丁醇鉀(5.23g，46.6mmol)。將所得的混合物在室溫攪拌18h。然後，將所述混合 物經EtOAc (500mL)稀釋並且與水(200mL) —起振搖。將分離的水相經稀釋的HC1溶液酸 化至PH 5，並且再次與有機層一起振搖。然後，將分離的有機物經鹽水(2x200mL)洗滌，並 且經1%304乾燥，然後真空濃縮。通過快速柱色譜-矽膠純化，並且經50%異己烷EtOAc 洗脫，然後是經EtOAc洗脫，產生所需的產物，為淺黃色固體(4. 65g，13. 6mmol,58% )。MS (ESI) :341m/z[M_Hr。f)6_甲基-2-((4_((噻唑-2-基甲基氨基)甲基)-3_(三氟甲基)-lH_ 口比 唑-1-基)甲基)噻吩並[2，3-d]嘧啶-4 (3H)-酮 將1_((6-甲基-4-氧代-3，4-二氫噻吩並[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基)_3_(三 氟甲基)-lH-吡唑-4-甲醛(0. 55g, 1. 62mmol)和噻唑 _2_ 基甲胺(925mg，8. lOmmol)在 DCM(llmL)中的混合物經乙酸(lmL)酸化至pH 5，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1. 72g， 8. lOmmol)。將所得的混合物在室溫攪拌過夜。將所述反應混合物經MeOH淬滅，通過SCX 柱並且經在MeOH中的2M NH3洗脫。所述樣品真空濃縮。通過快速柱色譜-矽膠純化，並 且經3-5%Me0H DCM(3滴DIPEA/升)洗脫，然後經第二個快速柱純化，並且經3_4 % MeOH DCM(3滴DIPEA/升)洗脫，產生所述標題化合物，為白色固體(172mg，0. 391mmol， 24% )。MS (ESI) :441m/z[M+H] +。實施例22- ((4- (2-羥基丙烷-2-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑基)甲基)~6~甲基噻 吩並「2，3-d]嘧啶_4(3H)_酮￡1)2-(3-(三氟甲基)-111-吡唑-4-基)丙烷-2-醇 在15min內向3_(三氟甲基)_1H_吡唑-4-甲酸乙酉旨(649mg，3. 12mmol)在 THF (6. 50mL)的攪拌溶液中滴加甲基溴化鎂(2. 57g，21. 5mmol)使得溫度保持在0°C或小於0°C。將所述反應混合物攪拌過夜並使其恢復至室溫。這個階段的分析表明存在未反應的原 料。將所述反應混合物再次冷卻至<10°c，並且在15min內滴加更多的甲基溴化鎂(2. 57g， 21. 5mmol)，並且將所得的白色懸浮液攪拌另外的24h。將所述反應混合物冷卻至_5°C並且 經飽和的NH4C1溶液淬滅。將所述混合物真空濃縮，並且使殘餘物在二乙醚和水之間分配。 分離有機相，經飽和的鹽水(x2)洗滌，經MgS04乾燥，過濾並且真空濃縮，產生粗的產物，為 黃色油狀物，所述黃色油狀物靜置之後部分固化。通過快速柱色譜-矽膠純化，並且經40% EtOAc 異己烷洗脫，產生所述標題化合物，為白色固體(417mg，2. 149mmol,69% ) 。
MS (ESI) :193m/z[M_Hr。匕)2-((4-(2-羥基丙烷-2-基)-3-(三氟甲基)-111-吡唑-1-基)甲基)_6_甲基 噻吩並[2，3-d]嘧啶-4 (3H)-酮 將2-(3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-基)丙烷-2-醇(73mg,0. 376mmol)和叔丁醇 鉀(127mg，l. 13mmol)在THF(2mL)中的混合物攪拌 2min。向其中加入2-(氯甲基)-6-甲 基噻吩並[2，3-d]嘧啶_4(3H)_酮(81mg，0.376mmol)並且將所得的混合物攪拌18h。所 述反應混合物經飽和的NH4C1溶液淬滅，並且真空濃縮。使殘餘物在DCM和水之間分配，並 且分離有機相。將水層經另外的DCM萃取，並且將所述合併的有機物經飽和的鹽水洗滌，經 MgS04乾燥，過濾並且真空濃縮，產生亮黃色膠狀物。所述膠狀物通過製備型LCMS純化，產 生產物，為白色固體(5mg，0. 014mmol，4% )。MS (ESI) :371m/z[M_Hr。實施例32-((4-(2-羥基乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑基)甲基)~6~甲基噻吩並 「2,3-dl 嘧啶 _4(3H)_ 酮 將2-(3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-基)乙醇(50mg，0. 278mmol),2-(氯甲 基)-6_ 甲基噻吩並[2，3-d]嘧啶 _4(3H)_酮(60mg，0. 278mmol)和叔丁醇鉀(62mg，0. 07mL, 0. 555mmol)在THF(3mL)中的混合物加熱至75°C保持4h。使得所述反應混合物冷卻至室 溫，然後過濾並且真空濃縮。將殘餘物通過製備型反相HPLC純化，產生所述標題化合物，為 白色固體(32mg，0. 089mmol，32% )。MS (ESI) :359m/z [M+H] +。實施例42-((4-(l~羥基乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-6-甲基噻吩並 「2,3-dl 嘧啶 _4(3H)_ 酮
將1_((6-甲基-4-氧代-3，4-二氫噻吩並[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基)_3_(三氟 甲基)-lH-吡唑-4-甲醛(100mg，0. 292mmol)溶解於二乙醚(10mL)，並且經乾冰/丙酮浴 冷卻至-78°C。所述反應在氮氣氛下進行。滴加甲基溴化鎂(35mg，0. 292mmol)，並且使得所 述反應混合物溫熱至室溫，並且攪拌2h。加入水並且所述反應混合物萃取進入EtOAc (x3)。 所述合併的EtOAc層經鹽水洗滌，經MgS04乾燥，過濾並且真空濃縮。通過製備型反相HPLC 純化，產生所述標題產物(8mg，0. 023mmol,8% )。MS (ESI) :359m/z[M+H] +。實施例52-((4-(羥基甲基)-3-(三氟甲基)_1!1-吡唑-1-基)甲基)-6_甲基噻吩並「2, 3-dl 嘧啶-4 (3H)-酮將1-((6-甲基-4-氧代-3，4-二氫噻吩並[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基)_3_(三氟 甲基)-lH-吡唑-4-甲醛(100mg，0. 292mmol)溶解於 1 1 的 DCM MeOH 的溶液(2mL)， 並且加入硼氫化鈉(33mg，0.876mmol)。在30min後，通過加入水(lmL)使得所述混合物淬 滅，然後真空濃縮。通過快速柱色譜-矽膠純化，並且經3% MeOH DCM洗脫，產生白色固 體，然後從異丙醇中重結晶所述白色固體並且冷凍乾燥，產生所述標題化合物，為白色固體 (28mg，0. 081mmol,28% )。MS (ESI) :343m/z[M-Hr。實施例62- ((4-(羥基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-3,6- 二甲基噻吩並 「2,3-dl 嘧啶 _4(3H)_ 酮 將2-((4_(羥基甲基)-3_(三氟甲基)-lH_吡唑-1-基)甲基)-6-甲基噻吩並 [2，3-d]嘧啶-4(3H)-酮(240mg，0. 697mmol)溶解於 DMF(5mL)。加入 NaH(17mg，0. 708mmol) 並且在60°C加熱所述反應混合物lh，隨後使其冷卻至室溫，然後進一步經冰/鹽浴冷卻
至0°C。一次性加入碘甲烷(1. 14g，0.50mL，8.03mmol)並且將所述反應混合物在室溫攪拌 lh，隨後使其溫熱至室溫，然後靜置過夜。將所述反應混合物經2M HC1酸化，並且萃取進入 EtOAc (x3) 所述EtOAc層經鹽水洗滌，經MgS04乾燥，過濾並且真空濃縮。通過製備型反 相HPLC純化，產生所述標題化合物，為白色固體(76mg，0. 213mmol，31% )。 將在NMP(3mL)中的 3_(氨基甲基)吡啶(47mg,0. 438mmol)和 1-((6-甲基-4-氧 代-3，4-二氫噻吩並[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基)-3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-甲醛 (30mg,0. 088mmol)以及在NMP (200 yl)中的10 % AcOH的溶液振搖30min，然後加入三 乙醯氧基硼氫化鈉(93mg，0.438mmol)。將所得的混合物振搖過夜。通過加入1 1的 AcOH Me0H(200u 1)淬滅所述混合物，過濾通過原棉並且通過製備型LCMS純化。然後，將 所述樣品傳遞至SCX柱，經在Me0H(5mL)中的7M NH3洗脫，產生所述標題化合物，為白色固 體(27mg，0. 063mmol, 12% ) 以類似於實施例7的方式，使用噻唑-5-基-甲基胺鹽酸鹽(50mg，0. 438mmol)代 替3-(氨基甲基)吡啶，產生所述標題化合物(7mg,0.015mmol,17% ) MS (ESI) :441m/z[M+H] +。實施例92-((4_(((lH-苯並「dl咪唑-2-基)甲基氨基)甲基)-3_(三氟甲基)-lH_吡 唑-1-基)甲基)-6-甲基噻吩並「2, 3-dl嘧啶_4 (3H)-酮
20 以類似於實施例7的方式，使用2_(氨基甲基)苯並咪唑二鹽酸鹽水合物(65mg， 0. 438mmol)代替3_(氨基甲基)吡啶，產生所述標題化合物(10mg,0. 021mmol, 24% ) 0MS (ESI) :474m/z[M+H] +。實施例102-((4-(((1H-咪唑-2-基)甲基氨基)甲基)-3_(三氟甲基)-lH_吡唑-1-基) 甲基)-6-甲基噻吩並「2, 3-dl嘧啶_4 (3H)-酮 以類似於實施例7的方式，使用1H-咪唑-2-基甲胺(50mg，0. 511mmol)代替 3_(氨基甲基)吡啶，產生所述標題化合物(8mg，0.019mmol，18% )。MS (ESI) :424m/z[M+H] +。實施例112- ((4-(羥基甲基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)甲基)-6-甲基苯基噻 吩並「2，3-d]嘧啶_4(3H)_酮a) 1-((6-甲基-4-氧代-5-苯基-3，4-二氫噻吩並[2，3_d]嘧啶_2_基)甲 基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲醛 向3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-甲醛(100mg，0.609mmol)和叔丁醇鉀(137mg， 1. 22mmol)在THF(3mL)中的攪拌懸浮液中加入2-(氯甲基)-6-甲基-5-苯基噻吩並[2， 3-d]嘧啶-4 (3H)-酮(177mg，0. 609mmol)，並且將所得的溶液在室溫攪拌2天。所述反應 混合物經水淬滅，並且真空濃縮，產生粗的產物，為米色固體(97mg，0.232mmol，38% )。所 述物質無需進一步純化即可使用。 2-((4-(羥基甲基)-3-(三氟甲基)-111-吡唑-1-基)甲基)-6-甲基-5-苯基 噻吩並[2，3-d]嘧啶-4 (3H)-酮 向1-((6_甲基-4-氧代-5-苯基-3，4-二氫噻吩並[2，3_d]嘧啶-2-基)甲 基)-3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-甲醛(97mg，0. 232mmol)在 DCM(2mL)和 Me0H(2mL)中的 攪拌溶液中加入硼氫化鈉(26mg，0.696mmol)，並且將所述混合物攪拌過夜。加入硼氫化鈉 (53mg, 1. 39mmol)，並且攪拌所述混合物另外的20h。所述反應混合物經水淬滅並且真空濃 縮。將殘餘物溶解在1 1的DMS0 MeCN中，過濾並且通過製備型LCMS純化，產生所述 標題化合物，為白色固體(10mg，0. 024mmol,10% )。MS (ESI) :421m/z[M+H] +。實施例122-((4-(2_(1!!-咪唑-1-基)乙基)-3_(三氟甲基)-lH_吡唑-1-基)甲基)_6_甲 某_吩並「2，3-d]嘧啶_4(3H)_酮a)甲磺酸2-(l_((6-甲基_4_氧代_3，4_ 二氫噻吩並[2，3_d]嘧啶_2_基)甲 基)-3_(三氟甲基)-lH-吡唑-4-基)乙酯 將2-((4-(2-羥基乙基)-3-(三氟甲基)_111-吡唑-1-基)甲基)-6-甲基噻吩 並[2，3-d]嘧啶 _4(3H)_ 酮(1. 99g,5. 55mmol)完全溶解於吡啶(0. 44g,20mL,5. 55mmol), 並且在丙酮/氯化鈉/冰浴中冷卻。內部溫度維持在-10°C。分批加入甲基磺醯氯(2.07g， 1. 40mL, 18. lmmol)並且溫度放熱至0°C。將所述混合物在0°C攪拌1 h，並且加入去離子水 直到固體沉澱出來。過濾所述反應，經水洗滌，並且真空濃縮產生所述標題化合物，為淺黃 色固體(2. llg，4. 83mmol,87% )。MS (ESI) :437m/z[M+H] +。13)2-((4-(2-(111-咪唑-1-基)乙基)-3_(三氟甲基)-lH_ 吡唑-1-基)甲 基)-6-甲基噻吩並[2，3-d]嘧啶-4 (3H)-酮 將甲磺酸2- (1- ((6-甲基-4-氧代_3，4- 二氫噻吩並[2，3-d]嘧啶_2_基)甲基)-3-(三氟甲基)-lH-吡唑-4-基)乙酯(150mg，0. 344mmol)，1H-咪唑(23mg， 0. 344mmol)和叔丁醇鉀(116mg，1. 03mmol)溶解於DMSO (3mL)，並且通過微波輻射將所得的 混合物加熱至70°C保持30min。粗的混合物的LCMS分析表明未完全反應，因此通過微波 輻射將所述混合物加熱至100°C保持lh。將所述混合物過濾，並且通過製備型LCMS純化。 然後，將所述樣品傳遞至SCX柱，經在MeOH中的2M NH3洗脫，產生所述標題產物(15mg， 0. 037mmol, 11% )。MS (ESI) :409m/z[M+H] +。實施例13^((1-((6-甲基-4-氧代-3,4_二氫噻吩並「2,3-dl嘧啶基)甲基)_3_(三 氟甲某)-lH-吡卩半-4-某)甲某)乙醯胺a)2-((4_(氨基甲基)-3_(三氟甲基)-lH_吡唑-1-基)甲基)_6_甲基噻吩並 [2，3-d]嘧啶 _4(3H)_ 酮
將1_((6-甲基-4-氧代-3，4-二氫噻吩並[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基)_3_(三 氟甲基)-lH-吡唑-4-甲醛(2. 92mmol，lg)和羥胺鹽酸鹽(3. 21mmol,0. 223g)在乙醇 (7mL)中的溶液加熱至80°C，並且所述溫度保持3h。使得所述反應混合物冷卻至室溫，並 且經乙醚和庚烷稀釋，然後通過過濾收集所得的沉澱。將所述固體溶解在乙酸(5mL)和鋅 (7. 79mmol,0.510g)中並且整體在室溫攪拌3天，偶爾經聲處理振搖。所述反應混合物過 濾通過硅藻土，並且所述硅藻土墊經MeOH洗滌，然後在減壓下濃縮濾液。將殘餘物溶解於 MeOH,並且應用至SCX柱，所述SCX柱已經經相同的溶劑平衡，然後經2NNH3/Me0H洗脫，產 生亮黃色固體(271mg，0. 79mmol,50. 6% ) MS (ESI) :344m/z[M+H] +。b)N-((l_((6-甲基-4-氧代-3，4_二氫噻吩並[2，3_d]嘧啶_2_基)甲基)_3_(三 氟甲基)-lH-吡唑-4-基)甲基)乙醯胺
向2-((4_(氨基甲基)-3_(三氟甲基)-lH_吡唑-1-基)甲基)_6_甲基噻吩 並[2,3-d]嘧啶-4(3H)-酮(0. 087mmol,30mg)和 DIPEA(0. 175mmol,0. 029ml,22. 59mg) 在DCM(lmL)中的溶液中加入乙醯氯(0. 175mmol,0. 012ml, 13. 72mg) 0整體在室溫攪拌 過夜，然後所述反應混合物在減壓下濃縮，並且殘餘物通過反相HPLC純化，產生白色固體 (8. 7mg，23mmol。25. 8% )。MS (ESI) :386m/z[M+H] +。
實施例142-((3-(羥基甲基)-4-(三氟甲基)_1!1-吡咯-1-基)甲基)_6_甲基噻吩並「2, 3-dl 嘧啶-4 (3H)-酮￡1)4-(三氟甲基)-111-吡咯-3-甲酸甲酯 在50mL的圓底燒瓶中加入在Et20(5mL)中的氫化鈉(3. 24mmol,78mg)。將對甲苯 磺醯甲基異腈(3. 24mmol,634mg)和(E)-甲基_4，4，4-三氟甲基丁-2-烯酸酯(3. 24mmol, 500mg)的混合物加入到Et20/DMS0的2 1的混合物(15mL 7. 5mL)中。這使其輕微溫 熱，並且攪拌30min。加入H20(10mL)並且所述反應混合物經Et20(3x20mL)萃取。將合併 的Et20層經鹽水洗滌，經MgS04乾燥，過濾並且在減壓下除去溶劑，產生粗的產物(590mg)， 為黃色/橙色固體。通過快速矽膠色譜柱(洗脫液1 4 EtOAc 庚烷)純化，產生所需 的產物(154mg，0. 797mmol,25% ) 匪R (400MHz，MeOD) : S 3. 79 (s，3H)，7. 20 (s，1H)，7. 50 (s，1H)。b)2-((3_(羥基甲基)-4_(三氟甲基)-lH_吡咯-1-基)甲基)-6_甲基噻吩並 [2，3-d]嘧啶 _4(3H)_ 酮在小瓶中加入在DMF(2mL)中的4_(三氟甲基)_1H_吡咯_3_甲酸甲酯 (0. 129mmol,25mg)和氫化鈉(60 % 分散在油中，0. 432mmol，10. 4mg)。加入 2_(氯甲 基)-6_甲基噻吩並[2, 3-d]嘧啶_4(3H)_酮(0. 129mmol，27. 8mg)。反應物在65°C加熱 3h，然後使其冷卻至室溫並且放置靜置過夜。加入H20(10mL)並且所述反應混合物萃取進 入EtOAc (3xl0mL)。將合併的EtOAc層經鹽水洗滌，經MgS04乾燥，過濾並且在減壓下除 去溶劑，產生粗的中間體。將其溶解於THF(5mL)並且加入LiAlH4在THF中的溶液(2M， 1. 295mmol,0. 65mL)。所述反應混合物在室溫攪拌2h，隨後小心地加入Me0H(5mL)，然後在 室溫攪拌30min。在減壓下除去溶劑，產生粗的產物，所述粗的產物經HPLC純化，產生所需 的產物(2. 5mg,7. 3umol,6% )。MS (ESI) :344m/z[M+H] +。 實施例15-生物測定A:Ca2+流入的螢光測定本發明的化合物可使用生物測定來檢測，所述生物測定使用本領域的標準技術， 諸如但不限於，通過FLEXstation(由MolecularDevices，Sunnyvale, CA製造)來測量通 過AMPA(GluRl)受體的正調節所介導的Ca2+流入。採用使用螢光探針的光學示值讀數來 測量在細胞內離子濃度或膜電位中的離子通道依賴性變化。所述測定利用功能性同數的 GluRl (i)AMPA受體的Ca2+的導電性來產生穀氨酸-依賴性Ca2+響應。Ca2+通過離子通道的 流入可在FLEXstation中使用鈣敏感性染料，諸如但不限於Fluo-3 (Molecular Devices, Sunnyvale，CA)，通過細胞內Ca2+水平的增加間接測量。在穀氨酸的存在下，AMPA受體的正 向調節劑將導致Ca2+通過離子通道的流入，所述流入可在FLEXstation中使用鈣敏感性染 料Fluo-3，通過細胞內Ca2+水平的增加間接測量。在37°C /5% C02，HEK. GluRl(i)細胞在補充有 10% fetaclonell、1 %非必需氨基 酸和150iig/mL潮黴素的DMEM中保存。在測定的二十四小時之前，用胰酶採集細胞，並且 3. 5xl04/孔的密度接種到Costar96孔透明底的黑色板上。在不存在潮黴素下，細胞與5iiM fluo3_AM 裝載於DMEM培養基，並且在 37°CC02溫孵一小時。在裝載染料之後，細胞經200ii 1含有0.625mM的丙磺舒(陰 離子交換蛋白的抑制劑)的低鈣溶液(10mM hepes, pH 7. 4,160mM NaCl,4. 5mM KCl,2mM CaCl2, ImM MgCl2，lOmM葡萄糖)洗滌一次以除去染料。然後，向每個孔加入200 u 1的低鈣 溶液。在Flexstation向每個孔加入50 u 1的含穀氨酸+/-測定化合物的高鈣溶液(10mM Hepes, pH 7. 4,160mM NaCl,4. 5mMKCl,20mM CaCl2, ImM MgCl2 和 lOmM 葡萄糖)並且確保 能在FLEXstation上監測響應。本發明的化合物表現出對AMPA受體的正調節，其具有 0. 3u M-30 ii M的EC50值。例如，實施例1產生1 y M的EC50。B:膜片鉗記錄使用膜片鉗技術的全細胞模式(Hamillet a/.，Pflugers Arch. 1981，39， 85-100)來測量從出生後的大鼠外皮神經元中穀氨酸-誘發的電流。將含有培養物的玻 璃蓋玻片轉移至安置在倒置顯微鏡(Nikon，Kingston, UK)的鏡臺上的記錄槽(Warner Instrument Corp.，Hamden，CT)。該記錄槽含有 l_2ml 細胞外溶液(145mM NaCl,5. 4mM KC1, lOmM HEPES, 0. 8mM MgCl2，1. 8CaCl2，lOmM 葡萄糖和 30mM 蔗糖，經 1M NaOH 調整至 pH 7.4) 並且不斷地在lml/min的速率讀數。使用Axopatch 200B放大器(Axon Instruments Ltd., Foster City, CA)在室溫(20-22°C )進行記錄。使用Signal 軟體(Cambridge Electronic Design Ltd.，Cambridge，UK)進行數據 採集和分析。使用模型 P-87 電極鉗子(Sutterlnstruments Co.，Novarto，CA)由 GC120F-10 玻璃(HarvardApparatus，Edenbridge UK)製造移液管。當用細胞內溶液(140mM葡萄糖酸 鉀，20mM HEPES, 1. ImM EGTA，5mM磷酸肌酸，3mM ATP,0. 3mM GTP,0. ImM Caca 2,5mM MgCl2, 用1M K0H調整至pH 7. 4with)填充時，膜片電極具有3-5MQ之間的典型的電阻。細胞在_60mV的保持電位被電壓鉗制，並且使用12通道半快速藥物應用裝置 (DAD-12. Digitimer Ltd.，ffelwyn Garden city, UK)應用穀氨酸(0. 5mM)。每 30s 應用激 動劑穀氨酸Is。使用全細胞模式，響應未隨時間減少。在應用之間，鹽水流動以清除系統 中的任何死體積。對於每次應用，從基線和穩態電流之間的差異中繪製穩態電流，並且在
25300ms內平均。 配製細胞外溶液中的化合物的兩個溶液，一個含穀氨酸和一個不含。所述方案是 化合物應用10秒，化合物+穀氨酸應用1秒，然後經鹽水洗滌10秒，然後經10秒的延遲。 當化合物不溶時，使用0. 5% DMS0作為共-溶劑。在表I中，結果用在細胞外溶液中以10pM 濃度的本發明的化合物在穩態電流中增加的百分數來表示。使用這種技術，實施例1顯示 以10iiM穩態電流增加235 士 44%。
權利要求
式I的雜環衍生物式I或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其中L是(CH2)m，其中m是1或2；R1是C1-4烷基、C3-5環烷基、C1-4烷基氧基、滷素或CN，所述C1-4烷基、C3-5環烷基和C1-4烷基氧基任選地被一個或多個滷素取代；R2是C1-4烷基、C3-5環烷基或C1-4烷基氧基，所述C1-4烷基、C3-5環烷基和C1-4烷基氧基被選自OH、C1-4烷基氧基和NR9R10的取代基取代；X1-X3獨立地是N或CR3，其中R3是H或甲基；Y1是NR4或CHR4，其中R4是H或C1-4烷基；Y2是N或CR5，其中R5是H、C1-4烷基、C3-8環烷基或C6-10芳基；R6是H、C1-4烷基或C3-5環烷基；Y3是O、S或NR7，其中R7是H或C1-4烷基；Y4是N或CR8，其中R8是H或C1-4烷基；R9和R10獨立地是H或C1-4烷基，任選地被5-9元雜芳基環系統取代，所述雜芳基環系統包含1-2個選自O、S和N的雜原子，或R9和R10與它們所連接的N一起形成4-6元飽和的或不飽和的雜環，所述雜環任選包含選自O、S和N的另外的雜原子。FPA00001137025700011.tif
2.根據權利要求1的雜環衍生物，其中R1是CF3。
3.根據權利要求1或權利要求2的雜環衍生物，其中R2是甲基，任選地被羥基或NR9Rw 取代。
4.根據權利要求1-3中任一項的雜環衍生物，其中X1和X2是N並且X3是CH。
5.根據權利要求1-4中任一項的雜環衍生物，其中Y1是NR4並且R4是H或甲基。
6.根據權利要求1-5中任一項的雜環衍生物，其中Y2是CR5並且R5是H或甲基。
7.根據權利要求1-6中任一項的雜環衍生物，其中R6是H或甲基。
8.根據權利要求1-7中任一項的雜環衍生物，其中Y3是S。
9.根據權利要求1-8中任一項的雜環衍生物，其中Y4是N。
10.根據權利要求1-9中任一項的雜環衍生物，其中m是1。
11.雜環衍生物，選自 或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
12.根據權利要求1-11中任一項的雜環衍生物，所述雜環衍生物用於治療。
13.藥物組合物，包含與一種或多種藥學上可接受的助劑混合的根據權利要求1-11中任一項的雜環衍生物。
14.根據權利要求1-11中任一項的雜環衍生物，用於治療或預防精神病，其中所述精 神病需要增強由AMPA受體介導的突觸響應。
全文摘要
本發明涉及式I的雜環衍生物式(I)其中變量如在說明書中所定義，或涉及其藥學上可接受的鹽或其溶劑化物。本發明還涉及藥物組合物，所述藥物組合物包含所述雜環衍生物並且涉及它們在治療中的用途，例如在治療或預防精神病中的用途，其中所述治療或預防要求增強由AMPA受體介導的突觸響應，所述精神病包括精神分裂症、抑鬱症以及學習和記憶障礙，諸如阿爾茨海默氏病。
文檔編號A61P25/18GK101855227SQ200880115686
公開日2010年10月6日 申請日期2008年11月11日 優先權日2007年11月13日
發明者A·J·裡昂斯, C·賈米森, E·M·莫伊爾, J·K·F·麥克林, M·G·加拉格爾 申請人:歐加農股份有限公司