定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法

2023-12-10 00:45:56 2

專利名稱：定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法
技術領域：
本發明屬於藥物分析檢測領域，涉及一種用於風寒喘咳，胸腹脹滿，亦可用於支氣管哮喘，支氣管炎的藥物，具體涉及定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法。
背景技術：
定喘止咳膠囊為已收載於《中華人民共和國衛生部藥品標準》中藥成方製劑第十冊的定喘止咳糖漿的改劑品種，具有宣肺平喘，理氣止咳的功效。是一種用於風寒喘咳，胸腹脹滿，支氣管哮喘，支氣管炎的良藥。定喘止咳膠囊的內容物為棕褐色的顆粒；味苦、微甜。定喘止咳膠囊的1000粒處方如下麻黃375g ；杏仁500g ；厚樸375g ；陳皮375g ；柴胡WOg ；紫蘇葉375g ；甘草WOg。定喘止咳膠囊的製備方法如下以上七味，麻黃、陳皮、厚樸、柴胡、紫蘇葉加8倍量的水，蒸餾8小時提取揮髮油，藥渣與甘草、苦杏仁各加水10倍量煎煮兩次，第一次2小時，第二次1小時，合併煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 10 1. 22 (600C )的清膏，減壓乾燥，粉碎，加澱粉和微粉矽膠適量混勻，制粒，加入揮髮油，混勻，悶潤，裝入膠囊，製成 1000粒，即得。目前的定喘止咳膠囊執行標準為國家食品藥品監督管理局標準YBZ(^642006，該標準通過薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VE B)分別定性檢測膠囊內容物中的麻黃、陳皮、厚樸，而含量測定也是通過薄層色譜法檢測鹽酸麻黃鹼，對產品質量控制標準是每粒膠囊含麻黃以鹽酸麻黃鹼計不少於0. 20mg。但是薄層色譜法檢測的重現性較差， 準確性和靈敏度都不高。因此，有必要進一步提高定喘止咳膠囊中有效成分檢測的靈敏度。

發明內容
本發明的目的是提供一種定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法。達到方便的、準確的對定喘止咳膠囊產品中每粒膠囊含麻黃以鹽酸麻黃鹼計不少於0. 20mg的定量檢測的目的。本發明的目的是通過以下技術方案來實現的。本發明提供一種定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法，其定喘止咳膠囊的1000粒處方如下麻黃375g ；杏仁500g ；厚樸375g ；陳皮375g ；柴胡250g ；紫蘇葉375g ；甘草 250g ；其特徵是其定喘止咳膠囊本品中的麻黃是採用高效液相色譜法檢測鹽酸麻黃鹼， 照高效液相色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI D)測定；具體地，所述檢測麻黃以鹽酸麻黃鹼的高效液相色譜條件如下色譜柱以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；流動相乙腈和0. 02mol/L磷酸二氫鉀溶液混合體積比為15 85至3 97，加含0.2%至0.5%的三乙胺，用磷酸調pH值至 2. 5至3. 5 ；流速0. 8 1. 2mL/min ；柱溫10 30°C ；紫外檢測波長為206 210nm，理論板數按鹽酸麻黃鹼峰計算應不低於4000 ；優選地，所述方法還包括通過以下方法製備對照品溶液取鹽酸麻黃鹼對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含20μ g的溶液，即得；優選地，所述方法還包括通過以下方法製備供試品溶液取本品內容物，研細，取 3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入鹼性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡 30分鐘，用功率250KW、頻率40Hz的超聲處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重複操作1 3次，合併上清液，50°C以下低溫蒸乾，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調PH值至9，用乙醚提取3 5次，每次30ml，合併乙醚液，揮幹，殘渣加甲醇溶解， 置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得；優選地，所述方法還包括以下方法進行測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 20 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；另一方面，本發明還提供一種定喘止咳膠囊的質量控制方法，所述方法採用上述方法檢測定喘止咳膠囊中的有效成分；優選地，所述定喘止咳膠囊每個製劑單位含麻黃以鹽酸麻黃鹼(CltlH15NO · HCl)計，不得少於0. 20mg。上面所述製備對照品溶液方法取鹽酸麻黃鹼對照品適量，精密稱定10mg，加甲醇製成每Iml含20 μ g的溶液，即得。本發明的優點和效果1、本發明申請人經過幾年大量的實驗和摸索，提出定喘止咳膠囊有效成分採用高效液相色譜法檢測鹽酸麻黃鹼的檢測方法，並且重新修訂了該品種的質量標準，已經經過陝西省食品藥品檢驗所的覆核認可，克服了現有技術中的薄層色譜法檢測的重現性較差， 準確性和靈敏度都不高的問題。證明了本發明提供的方法簡便、穩定、精密度高、重現性好， 能有效表徵定喘止咳膠囊的質量，2、通過實踐證明，達到方便的、準確的對定喘止咳膠囊產品中每粒膠囊含麻黃以鹽酸麻黃鹼計不少於0. 20mg的定量檢測的目的；實現了方便、有效地檢測麻黃以鹽酸麻黃鹼計的含量來有利於監控產品質量的目的。


圖1是鹽酸麻黃鹼對照品高效液相色譜圖；圖2是定喘止咳膠囊供試品高效液相色譜圖；圖3鹽酸麻黃鹼紫外掃描圖譜。以下，結合附圖來詳細說明本發明的實施方案。
具體實施例方式以下參照具體的實施例來說明本發明。本領域技術人員能夠理解，這些實施例僅用於說明本發明，其不以任何方式限制本發明的範圍。以下各實施例中使用的供試樣品定喘止咳膠囊均來源於本發明的申請人。以下各實施例中使用的對照品鹽酸麻黃鹼購自中國食品藥品鑑定研究院。實施例1即定喘止咳膠囊中鹽酸麻黃鹼的檢測的實施例本實施例通過高效液相色譜法，檢測了定喘止咳膠囊中麻黃以鹽酸麻黃鹼的含量。(1)色譜條件與系統適應性
色譜柱十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑(5 μ m，250mmX 4. 6mm)，即設備的規格型號色譜柱的填料直徑為5 μ m，柱長250mm，柱直徑4. 6mm ；流動相乙腈-0. 02mol/L磷酸二氫鉀溶液(體積比4 96)(其中含0.2%三乙胺，用磷酸調pH值至2. 7)；流速1ml/ min ；柱溫:30°C ；紫外檢測波長:207nm ；也可選流速0. 8,0. 9,1. 1、1. 2ml/min ；對應柱溫 15、18、20、25°C ；對應紫外檢測波長206、208、209、210nm ；理論板數按鹽酸麻黃鹼峰計算應不低於4000。(2)對照品溶液的製備取鹽酸麻黃鹼對照品10mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取2ml置IOml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml含鹽酸麻黃鹼20 μ g)。(3)供試品溶液的製備取本品內容物，研細，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加鹼性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，超聲(功率250KW，頻率40Hz)處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重複操作3次，合併上清液，低溫蒸乾(50°C以下)，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調pH值至9，用乙醚提取5次，每次30ml，合併乙醚液， 揮幹，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得。(4)測定方法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每粒含麻黃以鹽酸麻黃鹼(CltlH15NO · HCl)計，不得少於0. 20mg。附圖1為對照品溶液高效液相色譜圖，注18. 2min處為鹽酸麻黃鹼峰。附圖2為供試品溶液高效液相色譜圖，注18. 2min處為鹽酸麻黃鹼峰。實施例2即檢測波長的確定的實施例取鹽酸麻黃鹼對照品適量，加甲醇配製成每Iml含鹽酸麻黃鹼20μ g的對照品溶液，在190 400nm範圍內掃描。從紫外掃描圖譜可以看出，鹽酸麻黃鹼甲醇溶液的最大吸收波長為208nm。見圖3鹽酸麻黃鹼紫外掃描圖譜。實施例3即含量測定的實施例(1)色譜條件以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈-0. 02mol/l磷酸二氫鉀溶液(體積比 15 85)(其中含0.5%三乙胺，用磷酸調pH值至3.0，為流動相；流速選其中之一均可 0. 8,0. 9,1. 0,1. 1、1. 2ml/min ；柱溫20°C選其中之一均可10、16、20、23、25、27、28、30°C ； 檢測波長為選其中之一均可206、207、208、209、210nm。理論板數按鹽酸麻黃鹼峰計算應不低於4000。(2)對照品溶液的製備與實施例1相同，不再贅述。(3)供試品溶液的製備取本品內容物，研細，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加鹼性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，超聲(功率250KW，頻率40Hz)處理15分鐘， 離心，取上清液，藥渣按上述方法重複操作1次，合併上清液，低溫蒸乾(50°C以下)，殘渣
5加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調pH值至9，用乙醚提取3次G次也可)，每次 30ml，合併乙醚液，揮幹，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取^iil 至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得。(4)測定法與實施例1相同。實施例4即含量測定的實施例(1)色譜條件以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈-0. 02mol/l磷酸二氫鉀溶液(體積比 10 90)(其中含0.3%三乙胺，用磷酸調pH值至2. 8)為流動相；流速1. 2ml/min ；柱溫 250C ；檢測波長為209nm。理論板數按鹽酸麻黃鹼峰計算應不低於4000。(2)對照品溶液的製備與實施例1相同。(3)供試品溶液的製備取本品內容物，研細，取約3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加鹼性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30分鐘，超聲(功率250KW，頻率40Hz)處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重複操作2次，合併上清液，低溫蒸乾(50°C以下)，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調pH值至9，用乙醚提取4次，每次30ml，合併乙醚液， 揮幹，殘渣加甲醇溶解，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，力口流動相定容至刻度，搖勻，濾過，即得。(4)測定法與實施例1相同。實施例5即幹擾試驗的實施例按實施例1 (3)的方法製備供試品溶液，同時製備不含麻黃的陰性供試品溶液及鹽酸麻黃鹼對照品溶液，各取10 μ 1進樣。結果表明，空白供試品對鹽酸麻黃鹼的測定無幹擾。通過此幹擾試驗證實了其他成分對鹽酸麻黃鹼的檢測無幹擾。實施例6即線性範圍的考察的實施例取鹽酸麻黃鹼對照品溶液(0. 322mg/ml)適量，分別配製成濃度為0. 007728, 0. 01288,0. 02576,0. 03864,0. 05152,0. 07728mg/ml 對照品溶液，各取 10 μ 1 進樣，記錄色譜圖，測定峰面積，結果見表1。並以峰面積A對進樣量M進行回歸，得標準曲線方程。表1鹽酸麻黃鹼對照品測定結果
權利要求
1.一種定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法，其定喘止咳膠囊的1000粒處方如下麻黃375g ；杏仁500g ；厚樸375g ；陳皮375g ；柴胡WOg ；紫蘇葉375g ；甘草WOg ；其特徵是 其定喘止咳膠囊本品中的麻黃是採用高效液相色譜法檢測鹽酸麻黃鹼，照高效液相色譜法 (中國藥典2010年版一部附錄VID)測定；具體地，所述檢測麻黃以鹽酸麻黃鹼的高效液相色譜條件如下色譜柱以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；流動相乙腈和0. 02mol/L磷酸二氫鉀溶液混合體積比為15 85至3 97，加含0.2%至0.5%的三乙胺，用磷酸調pH值至2. 5至 3. 5 ；流速0. 8 1. 2mL/min ；柱溫10 30°C ；紫外檢測波長為206 210nm，理論板數按鹽酸麻黃鹼峰計算應不低於4000 ；優選地，所述方法還包括通過以下方法製備對照品溶液取鹽酸麻黃鹼對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每Iml含20 μ g的溶液，即得；優選地，所述方法還包括通過以下方法製備供試品溶液取本品內容物，研細，取3g， 精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入鹼性甲醇(5ml濃氨加入IOOml甲醇)溶液30ml，浸泡30 分鐘，用功率250KW、頻率40Hz的超聲處理15分鐘，離心，取上清液，藥渣按上述方法重複操作1 3次，合併上清液，50°C以下低溫蒸乾，殘渣加飽和氯化鈉溶液30ml溶解，用濃氨試液調PH值至9，用乙醚提取3 5次，每次30ml，合併乙醚液，揮幹，殘渣加甲醇溶解，置 25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，精密取2ml至IOml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻， 濾過，即得；優選地，所述方法還包括以下方法進行測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 20 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
2.根據權利要求1所述的一種定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法，其特徵是採用上述方法檢測定喘止咳膠囊中的有效成分；優選地，所述定喘止咳膠囊每個製劑單位含麻黃以鹽酸麻黃鹼(CltlH15NO · HCl)計，不得少於0. 20mg。
3.根據權利要求1所述的一種定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法，其特徵是上面所述製備對照品溶液方法取鹽酸麻黃鹼對照品適量，精密稱定10mg，加甲醇製成每Iml含 20 μ g的溶液，即得。
全文摘要
本發明屬於藥物分析檢測領域，涉及定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法。目前其含量測定通過薄層色譜法檢測鹽酸麻黃鹼，但其重現性較差，準確性和靈敏度都不高。本發明的目的是提供一種定喘止咳膠囊有效成分的檢測方法。採用高效液相色譜法檢測鹽酸麻黃鹼，照高效液相色譜法測定；色譜柱以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，流動相乙腈和磷酸二氫鉀溶液混合，加三乙胺，用磷酸調pH值至2.5至3.5；流速1mL/min；柱溫20℃；紫外檢測波長為208nm，理論板數按鹽酸麻黃鹼峰計算應不低於4000。本發明效果達到方便的、準確的對定喘止咳膠囊產品中每粒膠囊含麻黃以鹽酸麻黃鹼計不少於0.20mg的定量檢測的目的。
文檔編號G01N30/88GK102507821SQ20111033041
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月26日 優先權日2011年10月26日
發明者杜小英, 王宇 申請人:陝西方舟製藥有限公司