一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法與流程
2023-10-25 03:17:32
本發明屬於植物萃取
技術領域：
，具體為一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法。
背景技術：
：大豆，豆科大豆屬一年生草本，是一種其種子含有豐富植物蛋白質的作物，從大豆分離出蛋白以其優異的保水性能和凝膠性能，廣泛的應用在各類食品中，特別是火腿腸，注射烤肉，各種冷凍調理食品等；現有技術中採用鹼溶酸沉法從大豆提取蛋白，其操作方法包括如下步驟：在提取工段，加入與提取罐串聯設計的平衡罐，並且，在提取罐與平衡罐之間還設有乳化泵。物料在提取罐浸提完成後，經乳化泵研磨粉碎後進入平衡罐進行進一步浸提，然後再進入分離機進行分離；分離後經過酸沉中和後噴霧乾燥；上述操作方法雖然簡單，但是該生產過程中只有大部分7S和11S蛋白被回收，提取率低，造成蛋白損失，同時又由於提取後的殘液中仍含有大量的蛋白，而使在處理這些殘液時也造成處理困難，不利於節能減排降耗的技術缺陷。技術實現要素：為了解決上述技術問題，本發明公開的一種高提取率大豆分離蛋白的生產，其實現的目的是將大豆蛋白中小分子蛋白交聯形成大分子蛋白，提高提取率，同時易於處理提取後的殘液、排出後對環境無負擔。為實現上述目的，本發明提供的技術方案為，一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法，包括如下步驟，(1)浸提：將原材料脫脂豆粕、水添加進提取罐中浸提，得到提取液；(2)添加改性酶：向步驟(1)所述的提取罐中添加改性酶；(3)酶改性：在提取罐中攪拌改性酶、提取液，使其充分混合，然後經乳化均質泵輸送至平衡罐中，平衡罐用乳化均質泵循環剪切，充分提取豆粕中的蛋白；(4)酶改性後提取液的離心分離：將步驟(3)得到的酶改性後提取液進行離心分離，得到固相1和液相1，再將固相1、液相1經水洗滌，得到固相2和液相2；(5)酸沉：將步驟(4)得到的液相2調節PH值後，進行沉降，得到酸沉液；(6)酸沉液的離心分離：將步驟(5)得到的酸沉液進行離心分離，得到固相3；(7)中和：向步驟(6)得到的固相3中添加水進行中和，得到中和料液；(8)乾燥:將步驟(7)得到的中和料液噴霧乾燥，回收得到大豆分離蛋白。本發明應用酶改性法對大豆中的蛋白進行提取，對低溫豆粕中小分子及部分7S蛋白和11S蛋白進行酶法改性，使蛋白在從大豆萃取中小分子蛋白通過交聯形成大分子蛋白，在酸沉時能夠沉澱回收，降低乳清水中的蛋白含量，提高蛋白回收率；同時也降低了汙水處理難度，降低能耗。進一步的，所述步驟(1)中脫脂豆粕與水的質量比為1:8-15，水可將脫脂豆粕溶解充分，幫助浸提脫脂豆粕中的蛋白質。進一步的，所述步驟(1)中將原材料脫脂豆粕添加至水中，調節PH值至6.8-7.8進行提取，在進行浸提時，脫脂豆粕與水充分混合，PH給予的環境要利於脫脂豆粕中的蛋白被提取出來，選擇該PH條件，不會給下一步酶改性帶來不良影響，與後續步驟配合，可利於脫脂豆粕中的蛋白被完全提取出來，提高提取率。進一步的，所述步驟(1)中在提取罐中提取大豆蛋白，溫度控制在37℃-45℃，該溫度為後續添加的改性酶作用於蛋白提取液最有利的溫度條件，在該溫度下，改性酶可充分發揮其活性作用，使小分子蛋白交聯形成大分子蛋白，配合後續步驟，充分的被提取出來。進一步的，所述步驟(2)中先將改性酶加水稀釋後，將改性酶稀釋液添加進步驟(1)中的提取罐。經稀釋後添加便於酶和中和底物混合均勻，提高酶反應均勻度。進一步的，所述步驟(2)中添加的改性酶為穀氨醯胺轉氨酶。優選的為TG-H型，該種酶反應迅速，能夠有效的將大豆蛋白中的蛋白質分子和小分子伯胺之間的連接,利用該反應可以將一些限制性胺基酸引人蛋白質以提高其營養價值。同時能夠形成蛋白質分子內或分子間的ε-(γ-穀氨醯基)-賴氨酸異肽鍵使蛋白質分子發生交聯，從而改變食品的質構，提高產品的持水性。進一步的，先將穀氨醯胺轉氨酶與水按照質量比為1:9-19稀釋，再將穀氨醯胺轉氨酶稀釋液添加進步驟(1)中的提取罐。進一步的，所述步驟(2)中改性酶添加進提取罐的質量，以蛋白乾物質質量作為參照計算，添加改性酶的質量為蛋白乾物質質量的0.3‰-1.5‰，能夠有效聚合小分子蛋白，同時保證分離效果，添加過多造成分離效果差，過少不能有效的聚合小分子蛋白。進一步的，所述步驟(3)先將提取罐中的改性酶、提取液攪拌20min-25min，再將其輸送至平衡罐中。使酶與蛋白充分反應。進一步的，所述步驟(3)在平衡罐中提取豆粕中蛋白的時間為0.5h-1.5h。提高豆粕的細胞壁破損程度，提高萃取效果，同時提高酶解時間，保證酶解效果。進一步的，所述步驟(5)中將步驟(4)得到的液相2調節PH值至4.5-4.8，進行沉降處理，蛋白質的等電點一般在PH4.6左右，故選取的PH環境使蛋白質充分的溶解在鹼液中，同時該鹼性環境對後續改性酶無影響，保證了經過整個生產方法所得到的大豆蛋白保水性、凝膠性能的提高。進一步的，所述步驟(7)中，固相3與水按照1：3-5的質量比混合，調節PH值至6.5-7.5後，得到中和料液。綜上，本發明具有以下有益效果，採用本發明方法提取大豆中的大豆蛋白，在從大豆萃取蛋白過程中，提取出的小分子蛋白通過交聯形成大分子蛋白，在酸沉時能夠充分沉澱回收，不僅提高了蛋白回收率，也沒有破壞蛋白其他的性能，反而還提高了蛋白保水、凝膠性能，同時由於將低了提取後乳清水中的蛋白含量，就也降低了汙水處理難度，進而降低了生產能耗，是一種易於實現規模化生產、可持續發展性強的生產方法。附圖說明圖1為本發明生產方法流程圖。具體實施方式下面結合圖1所示的生產方法流程圖、具體的實施例對本發明做進一步的詳細描述。實施例一：本發明提供的一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法，流程圖如圖1所示，包括如下步驟，(1)浸提：將原材料低溫脫脂豆粕、水添加進提取罐中浸提，得到提取液，提取的時間、溫度以混合均勻，經過整個步驟後回收率最高為準；低溫脫脂豆粕是豆粕的加工工藝，這裡採用的低溫豆粕的衡量指標是NSI＞78，是行業通用的原料；(2)添加改性酶：向步驟(1)所述的提取罐中添加改性酶；所選用的改性酶保證不會影響後續步驟得到的回收率，以及不會破壞蛋白保水能力、凝膠能力即可；(3)酶改性：在提取罐中攪拌改性酶、提取液，使其充分混合，然後經乳化均質泵輸送至平衡罐中，注意平衡罐的液位，防止溢出，平衡罐用乳化均質泵循環剪切，充分提取豆粕中的蛋白；所指的平衡罐用乳化均質泵循環剪切操作為，乳化均質泵循環向平衡管中輸入改性酶、提取液的混合液，並持續給平衡罐輸出動力，使平衡罐在該動能的作用下，不斷晃動平衡罐中的液體，使其混合均勻，達到均質的效果；(4)酶改性後提取液的離心分離：將步驟(3)得到的酶改性後提取液進行離心分離，得到固相1和液相1，再將固相1、液相1經水洗滌，得到固相2和液相2；離心採用現有技術任意一種方法即可，例如採用離心機、離心泵等進行離心；(5)酸沉：將步驟(4)得到的液相2調節PH值後，進行沉降，得到酸沉液，經酶改性的提取液，在此調節的PH環境中，能夠充分溶解蛋白，保證從大豆中提取出來的蛋白質不會被分解破壞即可；(6)酸沉液的離心分離：將步驟(5)得到的酸沉液進行離心分離，得到固相3；(7)中和：向步驟(6)得到的固相3中添加水進行中和，得到中和料液；(7)乾燥:將步驟(7)得到的中和料液噴霧乾燥，回收得到大豆分離蛋白，噴霧乾燥是系統化技術應用於物料乾燥的一種方法，於乾燥室中將稀料經霧化後，在與熱空氣的接觸中，水分迅速汽化，即得到乾燥產品。該法能直接使溶液、乳濁液乾燥成粉狀或顆粒狀製品，可省去蒸發、粉碎等工序，為現有技術中常用的方法，噴霧乾燥的溫度以能夠得到乾燥粉末為準即可，不會影響蛋白溶於水中的凝膠能力。本發明方法在沒有特殊說明下，溫度條件均為常溫條件。以下為採用本發明方法檢測蛋白回收率的試驗：採用凱氏定氮法：測定大豆分離蛋白CP值，測定水分後，計算純幹大豆分離蛋白中含有的粗蛋白量，在測定所用原料低溫豆粕的CP值，同樣測定水分後，計算純幹低溫豆粕中含有的有的粗蛋白量，計算大豆分離蛋白中的粗蛋白量佔原料豆粕中粗蛋白量的比例：蛋白回收率採用下述計算公式計算：m：大豆分離蛋白的質量；CP1：大豆分離蛋白的粗蛋白值；M:原料低溫豆粕的質量；CP2:原料低溫豆粕的粗蛋白值；w1：大豆分離蛋白的水分；w2：原料低溫豆粕的水分；下述為具體的試驗操作過程：試樣處理：稱取充分混勻的固體試樣0.2g～2g、半固體試樣2g～5g或液體試樣10g～25g；(約相當於30mg～40mg氮)，精確至0.001g，移入乾燥的100mL、250mL或500mL定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅(4.1)、6g硫酸鉀(4.2)及20mL硫酸(4.3)，輕搖後於瓶口放一小漏鬥，將以45°角斜支於有小孔的石棉網上。小心加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止後，加強火力，並保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色並澄清透明後，再繼續加熱0.5h～1h。取下放冷，小心加入20mL水。放冷後，移入100mL容量瓶中，並用少量水洗定氮瓶，洗液併入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。同時做試劑空白試驗。測定：裝好定氮蒸餾裝置，向水蒸氣發生器內裝水至2/3處，加入數粒玻璃珠，加甲基紅乙醇溶液數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加熱煮沸水蒸氣發生器內的水並保持沸騰。向接收瓶內加入10.0mL硼酸溶液及1滴～2滴混合指示液，並使冷凝管的下端插入液面下，根據試樣中氮含量，準確吸取2.0mL～10.0mL試樣處理液由小玻杯注入反應室，以10mL水洗滌小玻杯並使之流入反應室內，隨後塞緊棒狀玻塞。將10.0mL氫氧化鈉溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其緩緩流入反應室，立即將玻塞蓋緊，並加水於小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾。蒸餾10min後移動蒸餾液接收瓶，液面離開冷凝管下端，再蒸餾1min。然後用少量水衝洗冷凝管下端外部，取下蒸餾液接收瓶。以硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定至終點，其中2份甲基紅乙醇溶液與1份亞甲基藍乙醇溶液指示劑，顏色由紫紅色變成灰色，pH5.4；1份甲基紅乙醇溶液與5份溴甲酚綠乙醇溶液指示劑，顏色由酒紅色變成綠色，pH5.1。同時作試劑空白。計算公式如下：式中：X——試樣中蛋白質的含量，單位為克每百克(g/100g)；V1——試液消耗硫酸或鹽酸標準滴定液的體積，單位為毫升(mL)；V2——試劑空白消耗硫酸或鹽酸標準滴定液的體積，單位為毫升(mL)；V3——吸取消化液的體積，單位為毫升(mL)；c——硫酸或鹽酸標準滴定溶液濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；0.0140——1N硫酸或鹽酸標準溶液1ml相當於氮克數；m——試樣的質量，單位為克(g)；F——氮換算為蛋白質的係數大豆蛋白製品為6.25；以重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，蛋白質含量≥1g/100g時，結果保三位有效數字；蛋白質含量＜1g/100g時，結果保留兩位有效數字。可採用上述檢測方法，得到通過現有技術得到的蛋白含量，經多次試驗驗證，本發明可將豆粕蛋白回收率由現有技術的75％提高到80％；採用上述方法同樣可以檢測到，提取後大豆乳清水中蛋白的含量，經試驗驗證，本發明可將大豆乳清水中蛋白的含量由現有技術的24％降至20％。實施例二：本發明提供的一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法，包括如下步驟，(1)浸提：將原材料脫脂豆粕、水按照1：8的質量比添加進提取罐中，調節PH值至6.8，溫度控制在37℃提取，得到提取液；(2)添加改性酶：向步驟(1)所述的提取罐中添加穀氨醯胺轉氨酶TG-H，添加改性酶時可直接加入，也可使用靜態混合器連續加入，攪拌至均勻混合，改性酶添加的質量，以蛋白乾物質質量作為參照計算，添加改性酶的質量為蛋白乾物質質量的0.3‰；(3)酶改性：在提取罐中攪拌改性酶、提取液20min，使其充分混合，然後經乳化均質泵輸送至平衡罐中，平衡罐用乳化均質泵循環剪切，充分提取豆粕中的蛋白，將改性酶添加進提取罐中，用於充分提取出大豆蛋白，提高回收率，同時還可以用於提高蛋白的保水性和凝膠性；(4)酶改性後提取液的離心分離：將步驟(3)得到的酶改性後提取液進行離心分離，得到固相1和液相1，再將固相1、液相1經水洗滌，得到固相2和液相2；(5)酸沉：將步驟(4)得到的液相2調節PH值至4.5，進行沉降，得到酸沉液，酸沉是一種在提取蛋白質方法中常用的技術手段，具體為加入鹼液使蛋白質充分溶解在鹼液中，提高蛋白質提取率的方法；(6)酸沉液的離心分離：將步驟(5)得到的酸沉液進行離心分離，得到固相3；(7)中和：向步驟(6)得到的固相3與水按照1：3的質量比混合，調節PH值至6.5得到中和料液；(8)乾燥:將步驟(7)得到的中和料液噴霧乾燥，回收得到大豆分離蛋白。本發明方法在沒有特殊說明下，溫度條件均為常溫條件。採用上述方法，除了能夠將提取率提高至80％，提取後的乳清水溶液中蛋白含量降至20％，還能夠提高提取出的蛋白保水性能和凝膠性能，將現有技術提取出大豆蛋白的保水能力從6.8提高到8.0；以下是對本發明方法得到大豆蛋白保水性檢測實驗：分別稱取現有技術提取出的大豆蛋白、本發明提取出的大豆蛋白1.00g，置於50mL離心管中，加蒸餾水10mL。待其全部潤溼後，用玻璃棒攪拌5min，使蛋白懸浮液分散均勻，在2500r/min下離心25min。讀出未被分離蛋白吸收的水(析出的水)的毫升數讀數v。取3次的平均值，按下式計算保水性：保水性/(mL.g-1)＝10-V/1.0以下是經過上述實驗方法得到的保水性數據：檢測項目本發明方案現有方案保水性7.3-8.06.2-7.2以下是對本發明方法得到大豆蛋白、現有技術得到大豆蛋白凝膠性能對比實驗：量取88±1ml氯化鈉(2.5％)溶液倒入豆漿機幹磨杯中。用託盤天平分別稱取現有技術得到的大豆蛋白、本發明得到的大豆蛋白12.0±0.1克，倒入上述溶液中，並用玻璃棒攪拌到無乾粉，安裝好十字刀座，放在豆槳機上攪拌1分鐘。將攪拌液全部倒入150ml離心管,放入離心機，離心(2500轉/min)5min。取出後去除上層懸浮物，倒入100ml燒杯中，用直鋼勺將樣品中汽泡趕淨，並攪拌均勻。將上述燒杯放入80±1℃水浴鍋中加熱30min(水浴鍋水位以沒過杯中凝膠為準)取出後放入盛自來水的盆中冷卻到室溫；用勺柄沿燒杯壁輕輕將樣品取出(注意保持杯內膠體原形轉動燒杯取出凝膠)，放在鋼板上，用物性測定儀檢測。檢測參數：檢測前速度:2.0mm/sec；檢測速度:1.0mm/sec；檢測後速度:10.0mm/sec；下壓距離:25.00mm；探頭:P/0,5R；觸力:5.0g；下述為得到的凝膠性結果：檢測項目本發明方案現有方案凝膠性140-17090-120由上可以明確，本發明改進的生產方法，得到的大豆蛋白保水性、凝膠性均較於現有技術得到的大豆蛋白顯著提高。12％凝膠由105g提高到155g。實施例三：本發明提供的一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法，包括如下步驟，(1)浸提：將原材料脫脂豆粕、水按照1：15的質量比添加進提取罐中，調節PH值至7.8，溫度控制在45℃提取，得到提取液；(2)添加改性酶：向步驟(1)所述的提取罐中添加加改性酶，選用的改性酶為穀氨醯胺轉氨酶TG-H，改性酶與水按照質量比為1:9稀釋，再穀氨醯胺轉氨酶稀釋液添加進提取罐中，改性酶添加的質量，以蛋白乾物質質量作為參照計算，添加改性酶的質量為蛋白乾物質質量的1.5‰；(3)酶改性：在提取罐中攪拌改性酶、提取液2.5h，使其充分混合，然後經乳化均質泵輸送至平衡罐中，在平衡罐中用乳化均質泵循環剪切提取0.5h，充分提取豆粕中的蛋白，將改性酶添加進提取罐中，用於充分提取出大豆蛋白，提高回收率，同時還可以用於提高蛋白的保水性和凝膠性；(4)酶改性後提取液的離心分離：將步驟(3)得到的酶改性後提取液進行離心分離，得到固相1和液相1，再將固相1、液相1經水洗滌，得到固相2和液相2；(5)酸沉：將步驟(4)得到的液相2調節PH值至4.8，進行沉降，得到酸沉液，酸沉是一種在提取蛋白質方法中常用的技術手段，具體為加入鹼液使蛋白質充分溶解在鹼液中，提高蛋白質提取率的方法；(6)酸沉液的離心分離：將步驟(5)得到的酸沉液進行離心分離，得到固相3；(7)中和：向步驟(6)得到的固相3與水按照1：5的質量比混合，調節PH值至7.8得到中和料液；(8)乾燥:將步驟(7)得到的中和料液噴霧乾燥，回收得到大豆分離蛋白。本發明方法在沒有特殊說明下，溫度條件均為常溫條件。採用上述方法，除了能夠將提取率提高至80％，提取後的乳清水溶液中蛋白含量降至20％，還能夠提高提取出的蛋白保水性能和凝膠性能，將現有技術提取出大豆蛋白的保水能力從6.8提高到8.0，凝膠性能提升至170左右，提高回收率，減輕了處理提取後廢液對環境的負擔，同時又能夠提升大豆產品品質，拓展了大豆分離蛋白的應用領域。實施例四：本發明提供的一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法，包括如下步驟，(1)浸提：將原材料脫脂豆粕、水按照1：10的質量比添加進提取罐中，調節PH值至7.1，溫度控制在40℃提取，得到提取液；(2)添加改性酶：向步驟(1)所述的提取罐中添加加改性酶，選用的改性酶為穀氨醯胺轉氨酶TG-H，改性酶與水按照質量比為1:19稀釋，再穀氨醯胺轉氨酶稀釋液添加進提取罐中，改性酶添加的質量，以蛋白乾物質質量作為參照計算，添加改性酶的質量為蛋白乾物質質量的1‰；(3)酶改性：在提取罐中攪拌改性酶、提取液25min，使其充分混合，然後經乳化均質泵輸送至平衡罐中，在平衡罐中用乳化均質泵循環剪切提取1.5h，充分提取豆粕中的蛋白，將改性酶添加進提取罐中，用於充分提取出大豆蛋白，提高回收率，同時還可以用於提高蛋白的保水性和凝膠性；(4)酶改性後提取液的離心分離：將步驟(3)得到的酶改性後提取液進行離心分離，得到固相1和液相1，再將固相1、液相1經水洗滌，得到固相2和液相2；(5)酸沉：將步驟(4)得到的液相2調節PH值至4.6，進行沉降，得到酸沉液，酸沉是一種在提取蛋白質方法中常用的技術手段，具體為加入鹼液使蛋白質充分溶解在鹼液中，提高蛋白質提取率的方法；(6)酸沉液的離心分離：將步驟(5)得到的酸沉液進行離心分離，得到固相3；(7)中和：向步驟(6)得到的固相3與水按照1：4的質量比混合，調節PH值至7.0得到中和料液；(8)乾燥:將步驟(7)得到的中和料液噴霧乾燥，回收得到大豆分離蛋白。本發明方法在沒有特殊說明下，溫度條件均為常溫條件。採用上述方法，除了能夠將提取率提高至80％，提取後的乳清水溶液中蛋白含量降至20％，還能夠提高提取出的蛋白保水性能和凝膠性能，將現有技術提取出大豆蛋白的保水能力從6.8提高到8.0，凝膠性能提升至170左右，提高回收率，減輕了處理提取後廢液對環境的負擔，同時又能夠提升大豆產品品質，拓展了大豆分離蛋白的應用領域。實施例五：本發明提供的一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法，包括如下步驟，(1)浸提：將原材料脫脂豆粕、水按照1：9的質量比添加進提取罐中，調節PH值至6.9，溫度控制在42℃提取，得到提取液；(2)添加改性酶：向步驟(1)所述的提取罐中添加加改性酶，選用的改性酶為穀氨醯胺轉氨酶TG-H，改性酶與水按照質量比為1:13稀釋，再穀氨醯胺轉氨酶稀釋液添加進提取罐中，改性酶添加的質量，以蛋白乾物質質量作為參照計算，添加改性酶的質量為蛋白乾物質質量的1.3‰；(3)酶改性：在提取罐中攪拌改性酶、提取液1h，使其充分混合，然後經乳化均質泵輸送至平衡罐中，在平衡罐中用乳化均質泵循環剪切提取1h，充分提取豆粕中的蛋白，將改性酶添加進提取罐中，用於充分提取出大豆蛋白，提高回收率，同時還可以用於提高蛋白的保水性和凝膠性；(4)酶改性後提取液的離心分離：將步驟(3)得到的酶改性後提取液進行離心分離，得到固相1和液相1，再將固相1、液相1經水洗滌，得到固相2和液相2；(5)酸沉：將步驟(4)得到的液相2調節PH值至4.7，進行沉降，得到酸沉液，酸沉是一種在提取蛋白質方法中常用的技術手段，具體為加入鹼液使蛋白質充分溶解在鹼液中，提高蛋白質提取率的方法；(6)酸沉液的離心分離：將步驟(5)得到的酸沉液進行離心分離，得到固相3；(7)中和：向步驟(6)得到的固相3與水按照1：3.5的質量比混合，調節PH值至6.8得到中和料液；(8)乾燥:將步驟(7)得到的中和料液噴霧乾燥，回收得到大豆分離蛋白。本發明方法在沒有特殊說明下，溫度條件均為常溫條件。採用上述方法，除了能夠將提取率提高至80％，提取後的乳清水溶液中蛋白含量降至20％，還能夠提高提取出的蛋白保水性能和凝膠性能，將現有技術提取出大豆蛋白的保水能力從6.8提高到8.0，凝膠性能提升至170左右，提高回收率，減輕了處理提取後廢液對環境的負擔，同時又能夠提升大豆產品品質，拓展了大豆分離蛋白的應用領域。實施例六：本發明提供的一種高提取率大豆分離蛋白的生產方法，包括如下步驟，(1)浸提：將原材料脫脂豆粕、水按照1：13的質量比添加進提取罐中，調節PH值至7.5，溫度控制在38℃提取，得到提取液；(2)添加改性酶：向步驟(1)所述的提取罐中添加加改性酶，選用的改性酶為穀氨醯胺轉氨酶TG-H，改性酶與水按照質量比為1:16稀釋，再穀氨醯胺轉氨酶稀釋液添加進提取罐中，改性酶添加的質量，以蛋白乾物質質量作為參照計算，添加改性酶的質量為蛋白乾物質質量的0.6‰；(3)酶改性：在提取罐中攪拌改性酶、提取液2h，使其充分混合，然後經乳化均質泵輸送至平衡罐中，在平衡罐中用乳化均質泵循環剪切提取0.7h，充分提取豆粕中的蛋白，將改性酶添加進提取罐中，用於充分提取出大豆蛋白，提高回收率，同時還可以用於提高蛋白的保水性和凝膠性；(4)酶改性後提取液的離心分離：將步驟(3)得到的酶改性後提取液進行離心分離，得到固相1和液相1，再將固相1、液相1經水洗滌，得到固相2和液相2；(5)酸沉：將步驟(4)得到的液相2調節PH值至4.7，進行沉降，得到酸沉液，酸沉是一種在提取蛋白質方法中常用的技術手段，具體為加入鹼液使蛋白質充分溶解在鹼液中，提高蛋白質提取率的方法；(6)酸沉液的離心分離：將步驟(5)得到的酸沉液進行離心分離，得到固相3；(7)中和：向步驟(6)得到的固相3與水按照1：4.5的質量比混合，調節PH值至7.5得到中和料液；(8)乾燥:將步驟(7)得到的中和料液噴霧乾燥，回收得到大豆分離蛋白。本發明方法在沒有特殊說明下，溫度條件均為常溫條件。採用上述方法，除了能夠將提取率提高至80％，提取後的乳清水溶液中蛋白含量降至20％，還能夠提高提取出的蛋白保水性能和凝膠性能，將現有技術提取出大豆蛋白的保水能力從6.8提高到8.0，凝膠性能提升至170左右，提高回收率，減輕了處理提取後廢液對環境的負擔，同時又能夠提升大豆產品品質，拓展了大豆分離蛋白的應用領域。以上所述僅為本發明的優選實施例而已，並不用於限制本發明，對於本領域的技術人員來說，凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。當前第1頁1 2 3