珠蚌均質多糖及其在製備保肝保健品和保肝藥物中的應用的製作方法

2023-10-11 21:13:24

>組別病變評分正常對照組模型組聯苯雙酯陽性對照組多糖灌胃小劑量組多糖灌胃大劑量組多糖腹腔注射小劑量組多糖腹腔注射大劑量組0.00±0.00l.80±1.300.45±0.39*0.67±0.50*0.50±0.53*1.10±0.990.15±0.24**與模型組比較P＜0.05小結實驗結果表明，CCl4模型組與空白對照組比較，血清ALT、AST和MDA均明顯升高，SOD顯著降低，病理切片有顯著性差異，說明造模是成功的；珠蚌多糖灌胃兩個劑量組及腹腔注射大劑量組能顯著降低血清中ALT、AST和MDA水平，提高SOD的活性；珠蚌多糖腹腔注射小劑量組與模型組比較沒有顯著性差異，但呈現出一定的趨勢；指標顯示珠蚌多糖具有保肝作用。病理檢查結果表明，珠蚌多糖ZBP(ZBP-I∶ZBP-II3∶1)能明顯減輕肝臟的病理損害，顯示珠蚌多糖ZBP對肝臟有保護作用。2.珠蚌均質多糖ZBP(ZBP-I∶ZBP-II3∶1)對D-GalH誘導急性化學性肝損傷小鼠血清中ALT、AST、SOD、MDA及對肝組織的影響小鼠正常飼養2天，隨機分成7組，每組10隻，雌雄各半，分別處理如下I正常對照組灌胃給以0.9％氯化鈉注射液，連續6天；IID-GalN模型組灌胃給以0.9％氯化鈉注射液，連續6天；III聯苯雙酯陽性對照組150mg/kg灌胃，連續6天；IV多糖灌胃小劑量組250mg/kg灌胃，連續6天；V多糖灌胃大劑量組500mg/kg灌胃，連續6天；VI多糖腹腔注射小劑量組150mg/kg腹腔注射，連續6天；VII多糖腹腔注射大劑量組300mg/kg腹腔注射，連續6天；末次給藥後1h，除正常對照組外，其餘6組均腹腔注射D-GalH800mg/kg，造成急性化學性肝損害模型。禁食16h後，再給藥1次，1h後眼眶取血，2000rpm離心10min，取血清，利用全自動生化分析儀測定ALT(血清谷丙轉氨酶)和AST(血清穀草轉氨酶)，採用試劑盒測定SOD(超氧化物歧化酶)和MDA(丙二醛)。剖取肝臟，經10％福馬林溶液固定，常規取材，脫水，石蠟包埋，製片，HE染色。結果處理數據用SPSS軟體包處理，各項數據以X±SD表示，用T檢驗比較組間差異的顯著性。病理切片由病理專業人員在光學顯微鏡下閱片(1)有無肝細胞變性。變性有兩種類型，如胞漿疏鬆、淡染則為肝細胞水腫，如胞漿內出現大小不等的張力空泡則為肝細胞脂肪變性；(2)有無肝細胞壞死，根據壞死範圍大小不等又分為點狀壞死、灶狀壞死。每低倍視野壞死灶少於3個為輕度(+)，每低倍視野壞死灶3個至6個為中度(++)；(3)有無肝細胞萎縮；(4)小葉內、門管區有無炎細胞浸潤；(5)門管區有無結締組織增生。根據損傷由輕到重的程度依次標記為「-」、「+」、「++」、「+++」、「++++」。其中「-」為無明顯病變，「++++」為嚴重的病變，又換算記分為0分，1分，2分，3分，4分，累加所有分數，計算出每組動物的均分(X±SD)，分值越高提示損傷程度越嚴重。結果珠蚌多糖ZBP對D-GalH誘導急性化學性肝損傷小鼠血清中ALT、AST、SOD、MDA的影響*與正常對照組比較P＜0.05；**與D-GalH模型組比較P＜0.05實驗結果表明，珠蚌多糖對CCl4和D-GalH所誘導的小鼠急性化學性肝損傷均有保護作用，能使升高的ALT、AST和MDA水平降低，並提高SOD的活性，病理檢查結果表明，珠蚌均質多糖ZBP(ZBP-I∶ZBP-II3∶1)能明顯減輕肝臟的病理損害，顯示珠蚌多糖對肝臟有保護作用。權利要求1.一種珠蚌均質多糖，其特徵在於從該多糖中分離得到兩個單體均質多糖ZBP-I和ZBP-II，它們的結構均為α-D-(1，4)葡聚糖，其糖苷鍵以1→4連接為主，存在1→3連接、1→2連接、1→6連接的支鏈或/和非還原末端，並且其空間結構不同於澱粉；ZBP-I的重均分子量Mw為1076998，數均分子量Mn為786806，Z均分子量為1473612，多分散係數D為1.37；ZBP-II的重均分子量Mw為1122048，數均分子量Mn為819558，Z均分子量Mz為1679023，多分散係數D為1.28；ZBP-I和ZBP-II均不含N、S元素，C、H、O的原子個數比分別為1.10∶2.44∶1.00和1.02∶2.28∶1.00，總糖含量分別為112.02％和110.63％。2.權利要求1所述的珠蚌均質多糖ZBP-I和ZBP-II在製備保肝的保健品中的應用。3.權利要求1所述的珠蚌均質多糖ZBP-I和ZBP-II在製備保肝藥物中的應用。全文摘要一種珠蚌均質多糖從中分離得到的兩個單體均質多糖ZBP－I，ZBP－II的結構均為α－D－(1，4)葡聚糖，糖苷鍵以1→4連接為主，存在1→3連接、1→2連接、1→6連接的支鏈或(和)非還原末端，但其空間結構不同於澱粉；ZBP－I的重均分子量為1076998，多分散係數為1.37；ZBP－II的重均分子量Mw為1122048，多分散係數D為1.28；ZBP－I和ZBP－II均不含N、S元素，C、H、O的原子個數比約為1∶2∶1，總糖含量分別為112.02％和110.63％。經實驗研究結果表明珠蚌均質多糖對肝臟有顯著的保護作用，可明顯減輕由於化學損傷導致的肝細胞腫脹、炎性的侵潤、變性甚至壞死，因此，珠蚌均質多糖可作為製備保肝藥物和保肝的保健品。文檔編號A61P1/16GK1935847SQ20061009684公開日2007年3月28日申請日期2006年10月20日優先權日2006年10月20日發明者吳皓,吳永霞,狄留慶,池玉梅,李偉申請人:南京中醫藥大學