一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法

2023-10-11 21:02:09

一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法
【專利摘要】本發明公開了一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，步驟：1）將香菇粉碎，高壓處理；2）加入正己烷或石油醚中，提取，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；3)將脂肪酸提取液濃縮得到香菇的脂肪酸提取物；將提取後的殘渣加入木瓜蛋白酶的水溶液，超聲處理，再反應，得到分解液；4）將分解液濃縮，得到香菇多糖和胺基酸的提取物；5）將香菇多糖和胺基酸的提取物用蒸餾水溶解；6）超濾，得到截留量為8000-14000的溶液和濾過液；濃縮，得到胺基酸的提取物；7）將截留的溶液濃縮，加入乙醇沉澱，離心分離棄上清，收集沉澱物得到香菇的多糖提取物。本發明對香菇中脂肪酸、多糖和胺基酸的提取量較傳統方法有顯著提高。
【專利說明】一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法。
【背景技術】
[0002]香菇是一種真菌，屬擔子菌綱傘菌目口蘑科香菇屬。我國是世界上香菇生產大國，產量佔世界總產的七成。現代醫學認為香菇「為補償維生素D的藥劑，預防佝僂病，並治貧血」。古書中也對香菇有記載:《本草綱目》中記載香菇「幹平、無毒」；《醫林纂要》中香菇「甘、寒」；《日用本草》中香菇「益氣、不飢、治風破血」；《本經逢原》中香菇「大益胃氣」。
[0003]香燕中含有很多的營養成分具有一定的藥用價值,科學研究表明，香燕具有抗癌、抗氧化、降低膽固醇活性、抗菌抗病毒、抑制和免疫調節的生物活性。
[0004]香菇中含有少量的脂肪酸，但是不飽和脂肪酸的含量很高，亞油酸含量達90%，對防治心血管病有很好的作用。
[0005]香菇幹品中的碳水化合物含量高達50%，多糖已證實有很好的抗癌效用，研究表明香菇多糖可以增強腹腔巨噬細胞的吞噬能力，提高機體抗腫瘤功能，是理想的免疫促進劑。
[0006]香菇中含有較高含量的胺基酸，人體必需的八種胺基酸中，香菇含有七種，因此可以作為補充胺基酸的首選食品。胺基酸對防止肝硬化、軟骨病、降低膽固醇、降血壓有一定的功效。
[0007]目前提取脂肪酸的方法主要採用石油醚或正己烷利用索氏提取器提取、超聲波提取或微波提取，提取多糖和胺基酸主要採取水提法，目前的方法只是採用單一的方法進行提取，提取率較低，並且目前的方法沒有對香菇中的物質進行綜合的利用，造成了一定程度上的浪費。

【發明內容】

[0008]本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法。
[0009]本發明的技術方案概述如下:
[0010]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0011]1)將香菇子實體粉碎，在表壓0.1~0.25Mpa、109~135°C的條件下，在高壓蒸汽滅菌鍋中處理1~3h ;
[0012]2)採用以下三種方法之一種進行操作:
[0013]方法一:按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:10~20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中 ，用索氏提取器，在60°C~70°C，提取6h~8h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘禮:；
[0014]方法二:按香菇子實體粉末與石油醚質量比為1:10~20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入石油醚中，在超聲波清洗儀中，在超聲頻率為80~100Hz條件下，提取時間為lh~3h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；[0015]方法三:按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:10~20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用微波爐，在微波功率為500W~800W的條件下，提取40s~70s，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0016]3)將所述脂肪酸提取液在30~50°C、表壓-0.06~-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮得到香菇的脂肪酸提取物；
[0017]將所述提取後的殘渣加入15~20質量倍的質量濃度為1.2%~3.0%木瓜蛋白酶的水溶液，在功率90W-200W，超聲處理10-30min，再在52°C~70°C，反應6h~8h，得到分解液；
[0018]4)將分解液在40~60°C、表壓-0.06~-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到香菇多糖和胺基酸的提取物；
[0019]5)將所述香菇多糖和胺基酸的提取物用蒸餾水溶解；
[0020]6)將步驟5)獲得的溶液進行超濾，得到截留量為8000-14000的溶液和濾過液；或將步驟5)獲得的溶液進行透析，得到截留量為8000-14000的溶液和透析液；所述濾過液或透析液即為胺基酸溶液，在40~60°C、表壓-0.06~-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；
[0021]7)在40°C~60°C的溫度和表壓-0.06~-0.1MPa的壓力下，將所述截留量為8000-14000的溶液置於旋轉蒸發儀中減壓濃縮至原體積的1/10~1/4，加入乙醇至乙醇質量濃度到達70%以上進行沉澱，離心分離棄上清，收集沉澱物用無水乙醇進行洗滌脫色3~5次，離心分離，收集二次沉澱物，得到香菇的多糖提取物。
[0022]所述步驟1)中高壓處理的壓力為0.1Mpa，溫度為121°C。
[0023]本發明在適宜的條件下對原料進行了高壓前處理破壞細胞結構，增加脂肪酸、多糖和蛋白質的溶出，超聲處理和酶處理又進一步破壞了香菇細胞的細胞壁，加大了多糖和胺基酸的溶出。提取率較高，做到了對香菇中的物質進行綜合的利用，減少了浪費。
[0024]傳統的方法脂肪酸的提取率為1.51 μ l/g，本發明的方法脂肪酸的提取率增加至19.20μ 1/g (P=0.004〈0.01)，傳統的方法多糖和胺基酸的提取率分別為10.46mg/g和49.06mg/g，本發明的方法多糖和胺基酸的提取率分別增加至29.74mg/g (P=0.005<0.01)和61.50mg/g (P=0.08)。本發明對香菇中三種有效成分脂肪酸、多糖和胺基酸的提取量較傳統方法有顯著提高。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1為香菇經傳統方法提取和依照本專利方法提取得到的脂肪酸、多糖、胺基酸的得率比較；
[0026]圖2為香菇經傳統方法提取和依照本專利方法提取得到的脂肪酸、多糖、胺基酸提取物的還原力比較。
【具體實施方式】
[0027]下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。
[0028]實施例1
[0029]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:[0030]1)取香菇的整個子實體，在電磨中粉碎，取5.00g在高壓蒸汽滅菌鍋中在表壓為lOOKPa, 121°C處理 lh ；
[0031]2)按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:10的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用索氏提取器，在70°C，提取8h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0032]3)將所述脂肪酸提取液在40°C、表壓-0.09Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮得到香菇的脂肪酸提取物；
[0033]將所述提取後的殘渣加入20質量倍的質量濃度為1.2%木瓜蛋白酶的水溶液，在功率200W，超聲處理lOmin，再在52°C，反應8h，得到分解液；
[0034]4)將分解液在50°C、表壓-0.09Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到香菇多糖和胺基酸的提取物；
[0035]5)將所述香菇多糖和胺基酸的提取物用蒸餾水溶解；
[0036]6)將步驟5)獲得的溶液用分子截留量為8000-14000的透析袋進行透析，重複5次，得到截留量為8000-14000的溶液和透析液；透析液即為胺基酸溶液，在60°C、表壓-0.06Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；幹膏得率22.7%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為29.7% ；
[0037]7)在60°C的溫度和表壓-0.09MPa的壓力下，將截留量為8000-14000的溶液置於旋轉蒸發儀中減壓濃縮至原體積的1/6，加入乙醇至乙醇質量濃度到達71%進行沉澱，離心分離棄上清，收集沉澱物用無水乙醇進行洗滌脫色4次，離心分離，收集二次沉澱物，得到香菇的多糖提取物。幹膏得率2.17%，用硫酸苯酚法測得香菇多糖的含量為72.2%。
`[0038]脂肪酸提取物的含量測定:
[0039]1)脂肪酸提取物加入到體積濃度為5%的H2S04-Me0H溶液中，脂肪酸提取物與5%H2S04-Me0H的料液體積比為1:20，反應溫度為60°C，反應時間為8h，得到脂肪酸甲酯化的產物。
[0040]2)脂肪酸甲酯化的產物用正己烷萃取，脂肪酸甲酯化產物與正己烷的體積比為1:3，萃取5次，提取物進行合併，脂肪酸提取物在40°C的溫度和表壓-0.09Mpa的壓力範圍在旋轉蒸發器中進行濃縮至5ml，得香菇脂肪酸甲酯化產物，用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為 48.7 μ 1。
[0041]實施例2
[0042]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0043]1)取香菇的整個子實體，在電磨中粉碎，取5.00g在高壓蒸汽滅菌鍋中在表壓為165KPa, 109°C處理 2h ；
[0044]2)按香菇子實體粉末與石油醚質量比為1:15的比例，將步驟(1)獲得的產物加入石油醚中，在超聲波清洗儀中，在超聲頻率為100Hz條件下，提取時間為2h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0045]3)將所述脂肪酸提取液在40°C、表壓-0.09Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮得到香菇的脂肪酸提取物；
[0046]將所述提取後的殘渣加入17質量倍的質量濃度為2.0%木瓜蛋白酶的水溶液，在功率90W，超聲處理30min，再在70°C，反應7h，得到分解液；
[0047]4)將分解液在50°C、表壓-0.09Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到香菇多糖和胺基酸的提取物；
[0048]5)將所述香菇多糖和胺基酸的提取物用蒸餾水溶解；
[0049]6)將步驟5)獲得的溶液用分子截留量為8000-14000的透析袋進行透析，重複5次，得到截留量為8000-14000的溶液和透析液；透析液即為胺基酸溶液，在40°C、表壓-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；幹膏得率27.3%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為22.5% ；
[0050]7)在40°C的溫度和表壓-0.1MPa的壓力下，將截留量為8000-14000的溶液置於旋轉蒸發儀中減壓濃縮至原體積的1/10，加入乙醇至乙醇質量濃度到達80%進行沉澱，離心分離棄上清，收集沉澱物用無水乙醇進行洗滌脫色5次，離心分離，收集二次沉澱物，得到香菇的多糖提取物。幹膏得率3.28%，用硫酸苯酚法測得香菇多糖的含量為90.7%。
[0051]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:
[0052]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為96.1 μ 1。
[0053]實施例3
[0054]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0055]1)取香菇的整個子實體，在電磨中粉碎，取5.00g在高壓蒸汽滅菌鍋中在表壓為250KPa, 135°C處理 3h ；
[0056]2)按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:15的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用微波爐，微 波功率為800W，提取時間為40s，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0057]3)將所述脂肪酸提取液在30°C、表壓_0.06Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮得到香菇的脂肪酸提取物；
[0058]將所述提取後的殘渣加入15質量倍的質量濃度為3.0%木瓜蛋白酶的水溶液，在功率150W，超聲處理20min，再在52°C，反應6h，得到分解液；
[0059]4)將分解液在60°C、表壓-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到香菇多糖和胺基酸的提取物；
[0060]5)將所述香菇多糖和胺基酸的提取物用蒸餾水溶解；
[0061]6)將步驟5)獲得的溶液用分子截留量為8000-14000的透析袋進行透析，重複5次，得到截留量為8000-14000的溶液和透析液；透析液即為胺基酸溶液，在50°C、表壓-0.09Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；幹膏得率21.3%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為18.6% ；
[0062]7)在50°C的溫度和表壓-0.06MPa的壓力下，將截留量為8000-14000的溶液置於旋轉蒸發儀中減壓濃縮至原體積的1/4，加入乙醇至乙醇質量濃度到達90%進行沉澱，離心分離棄上清，收集沉澱物用無水乙醇進行洗滌脫色3次，離心分離，收集二次沉澱物，得到香菇的多糖提取物。幹膏得率1.62%，用硫酸苯酚法測得多糖的含量為91.0%。
[0063]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:
[0064]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為85.3 μ 1。
[0065]實施例4
[0066]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0067]1)同實施例2;[0068]2)按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:10的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用索氏提取器，在60°C，提取7h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0069]3)將所述脂肪酸提取液在50°C、表壓-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮得到香菇的脂肪酸提取物；
[0070]將所述提取後的殘渣加入18質量倍的質量濃度為2.0%木瓜蛋白酶的水溶液，在功率170W，超聲處理15min，再在60°C，反應7h，得到分解液；
[0071]4)將分解液在40°C、表壓-0.06Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到香菇多糖和胺基酸的提取物；
[0072]5)同實施例2 ；
[0073]6)將步驟5)獲得的溶液進行超濾，得到截留量為8000-14000的溶液和濾過液；所述濾過液為胺基酸溶液，在50°C、表壓-0.09Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；胺基酸的提取物幹膏得率22.0%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為 23.9% ；
[0074]7)同實施例2。
[0075]香菇的多糖提取物幹膏得率2.64%，用硫酸苯酚法測得多糖的含量為77.3% ；
[0076]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:
[0077]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為88.4μ 1。
[0078]實施例5
[0079]—種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0080]1)同實施例2;
[0081]2)按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用索氏提取器，在65°C，提取6h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0082]3)-5)同實施例 2;
[0083]6)將步驟5)獲得的溶液進行超濾，得到截留量為8000-14000的溶液和濾過液；所述濾過液為胺基酸溶液，在40°C、表壓-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；胺基酸的提取物幹膏得率24.8%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為 22.6% ；
[0084]7)同實施例2。
[0085]香菇的多糖提取物幹膏得率1.83%，用硫酸苯酚法測得多糖的含量為80.6% ；
[0086]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:
[0087]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為72.8 μ 1。
[0088]實施例6
[0089]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0090]1)同實施例2;
[0091]2)按香菇子實體粉末與石油醚質量比為1:10的比例，將步驟(1)獲得的產物加入石油醚中，在超聲波清洗儀中，在超聲頻率為80Hz條件下，提取時間為3h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0092]3)-5)同實施例 2;
[0093]6)將步驟5)獲得的溶液進行超濾，得到截留量為8000-14000的溶液和濾過液；所述濾過液為胺基酸溶液，在60°C、表壓-0.06Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；胺基酸的提取物幹膏得率21.9%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為 20.3% ；
[0094]7)同實施例2。
[0095]香菇的多糖提取物幹膏得率2.47%，用硫酸苯酚法測得多糖的含量為75.9% ；
[0096]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:
[0097]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為89.7 μ 1。
[0098]實施例7
[0099]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0100]1)同實施例2;
[0101]2)按香菇子實體粉末與石油醚質量比為1:20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入石油醚中，在超聲波清洗儀中， 在超聲頻率為90Hz條件下，提取時間為lh，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0102]3)-7)同實施例 2。
[0103]胺基酸的提取物幹膏得率26.1%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為21.5% ；
[0104]香菇的多糖提取物幹膏得率2.89%，用硫酸苯酚法測得多糖的含量為73.5% ；
[0105]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:
[0106]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為84.0μ 1。
[0107]實施例8
[0108]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0109]1)同實施例1;
[0110]2)按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:10的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用微波爐，在微波功率為500W的條件下，提取70s，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0111]3)-7)同實施例 2。
[0112]胺基酸的提取物幹膏得率25.7%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為24.1% ；
[0113]香菇的多糖提取物幹膏得率2.34%，用硫酸苯酚法測得多糖的含量為82.6% ；
[0114]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:
[0115]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為90.5μ 1。
[0116]實施例9
[0117]一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，包括如下步驟:
[0118]1)同實施例1;
[0119]2)按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用微波爐，在微波功率為600W的條件下，提取60s，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；
[0120]3)-7)同實施例 2。
[0121]胺基酸的提取物幹膏得率23.4%，用茚三酮比色法測得胺基酸的含量為19.6% ；
[0122]香菇的多糖提取物幹膏得率2.13%，用硫酸苯酚法測得多糖的含量為85.2% ；
[0123]脂肪酸提取物的含量測定同實施例1:[0124]用氣相色譜測得脂肪酸甲酯的量為87.9 μ 1。
[0125]本發明人將利用上述本發明提供的方法實施例2及現有提取方法從香菇中提取脂肪酸、多糖、胺基酸的得率繪製成圖，結果見圖1。注:圖1中脂肪酸的含量單位為μ 1/g ;多糖和胺基酸提取物的得率=幹膏得率*含量*1000。 [0126]另外，本發明人對圖1中提取的脂肪酸、多糖和胺基酸提取物的還原力能力進行了實驗，結果見圖2。
【權利要求】
1.一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，其特徵包括如下步驟:1)將香菇子實體粉碎，在表壓0.1~0.25Mpa、109~135°C的條件下，在高壓蒸汽滅菌鍋中處理1~3h ;2)採用以下三種方法之一種進行操作:方法一:按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:10~20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用索氏提取器，在60°C~70°C，提取6h~8h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；方法二:按香菇子實體粉末與石油醚質量比為1:10~20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入石油醚中，在超聲波清洗儀中，在超聲頻率為80~100Hz條件下，提取時間為lh~3h，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；方法三:按香菇子實體粉末與正己烷質量比為1:10~20的比例，將步驟(1)獲得的產物加入正己烷中，用微波爐，在微波功率為500W~800W的條件下，提取40s~70s，過濾，得到脂肪酸提取液和提取後的殘渣；3)將所述脂肪酸提取液在30~50°C、表壓-0.06~-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮得到香菇的脂肪酸提取物；`將所述提取後的殘渣加入15~20質量倍的質量濃度為1.2%~3.0%木瓜蛋白酶的水溶液，在功率90W-200W，超聲處理10-30min，再在52°C~70°C，反應6h~8h，得到分解液；4)將分解液在40~60°C、表壓-0.06~-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到香菇多糖和胺基酸的提取物；5)將所述香菇多糖和胺基酸的提取物用蒸餾水溶解；6)將步驟5)獲得的溶液進行超濾，得到截留量為8000-14000的溶液和濾過液；或將步驟5)獲得的溶液進行透析，得到截留量為8000-14000的溶液和透析液；所述濾過液或透析液即為胺基酸溶液，在40~60°C、表壓-0.06~-0.1Mpa的條件下，在旋轉蒸發器中進行濃縮，得到胺基酸的提取物；7)在40°C~60°C的溫度和表壓-0.06~-0.1MPa的壓力下，將所述截留量為8000-14000的溶液置於旋轉蒸發儀中減壓濃縮至原體積的1/10~1/4，加入乙醇至乙醇質量濃度到達70%以上進行沉澱，離心分離棄上清，收集沉澱物用無水乙醇進行洗滌脫色3~5次，離心分離，收集二次沉澱物，得到香菇的多糖提取物。
2.根據權利要求1所述的一種從香菇中綜合獲取有效成分的方法，其特徵在於所述步驟1)中高壓處理的壓力為0.1Mpa，溫度為121°C。
【文檔編號】C07C227/40GK103627510SQ201210299705
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2012年8月21日 優先權日:2012年8月21日
【發明者】陳海霞, 張寧, 章鈺, 馬利帥 申請人:天津大學