一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法

2023-10-11 19:58:39 1

一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法
【專利摘要】本發明公開了一種抗宮炎軟膠囊質量檢測方法，包括採用了高效液相色譜法對抗宮炎軟膠囊中烏藥醚內酯、本品每粒含烏藥以烏藥醚內酯計應不得少於為0.23mg，同時對鹽酸水蘇鹼的含量進行測定；對益母草進行薄層鑑別，同時對廣東紫珠、和烏藥進行鑑別。本發明測定效率高，精確度高，測定含量準確，能有效地檢測和控制產品質量。
【專利說明】一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法

【技術領域】
[0001] 本發明屬於中藥製劑的質量檢測領域，特別涉及抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法。【背景技術】
[0002] 抗宮炎軟膠囊由廣東紫珠幹浸膏、益母草幹浸膏、烏藥幹浸膏三味藥物組成，具有 清溼熱，止帶下，用於因慢性宮頸炎引起的溼熱下注，赤白帶下，宮頸糜爛，出血等症。廣東 紫珠幹浸膏是處方中主藥，具有收斂止血，散瘀，清熱解毒，用於衄血，咯血，吐血，便血，崩 漏，外傷出血，肺熱咳嗽，咽喉腫痛，熱毒瘡瘍，水火燙傷等症。益母草幹浸膏為常見的婦科 用藥，具有活血調經，利尿消腫，清熱解毒。用於月經不調，痛經經閉，惡露不盡，水腫尿少， 瘡瘍腫毒等症，為處方中有效成分之一。烏藥幹浸膏具有行氣止痛，溫腎散寒。用於寒凝氣 滯，胸腹脹痛，氣逆喘急，膀胱虛冷，遺尿尿頻，疝氣寒痛，經寒腹痛等症。三味藥組成經典的 婦科方子，為婦科之良藥。該產品執行的國家標準為YBZ09182006-201IZ，該標準中，對廣東 紫珠幹浸膏、和烏藥幹浸膏只做了鑑別，無定量指標；對益母草幹浸膏只做了含量控制，無 定性指標，質量控制指標不太完善，不能夠完全對產品進行更有效的質量控制。


【發明內容】

[0003] 本發明的目的在於克服上述缺點而提供的一種測定效率高，精確度高，測定含量 準確，能有效地檢測產品質量的抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法。
[0004] 本發明是一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法，包括以下步驟： (1) 烏藥醚內酯的含量測定： 色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈-水（56:44)為流動相；檢測波長為235nm，理論塔板數按烏藥醚內酯峰計算應不低於2000 ; 對照品溶液的製備：取烏藥醚內酯對照品l〇mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，用甲醇溶 解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取IOml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得(每Iml中 含烏藥醚內酯40μg); 供試品溶液的製備：取本品內容物lg，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚50ml，提取 4小時，提取液揮幹，殘渣用甲醇分次溶解，轉移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過， 取續濾液，即得； 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定，即得； 其中：本品每粒含烏藥以烏藥醚內酯計應不得少於為0. 23mg ; (2)益母草薄層鑑別：稱取本品內容物0.5g，加乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾 液加在中性氧化鋁柱（100-200目，5g，內徑為Icm)上，用乙醇20ml洗脫，收集濾液與洗脫 液，蒸乾，殘渣加乙醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸水蘇鹼對照品，加乙醇製成每 Iml含2mg的溶液，作為對照品溶液；分別吸取供試品溶液10μ1、對照品溶液4μ1點於同 一矽膠G薄層板上，以丙酮-無水乙醇-鹽酸（10:10:1)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以 10%硫酸乙醇溶液和稀碘化鉍鉀試液-碘化鉀碘試液（1:1)混合液，供試品色譜中，在與對 照品相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0005]上述的一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法，其中還包括： (1)廣東紫珠的鑑別： 取本品內容物2g，加60%乙醇50ml，鹽酸Iml，置水浴上加熱回流4小時，濾過，濾液置 水浴上蒸至15ml，加水20ml，搖勻，濾過，濾液用乙醚振搖提取3次，每次15ml，合併乙醚液， 置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液。另取廣東紫珠對照藥材5g，同法 製成對照藥材溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩 種溶液各5μ1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸（5 : 4 : 1)為展 開劑，展開，取出，晾乾，置氨氣中燻約5分鐘，置紫外燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在 與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
[0006] (2)烏藥的鑑別： 取本品內容物3g，加石油醚（30-60°C) 30ml，振搖，放置過夜，濾過，濾液揮幹，殘渣加 石油醚Iml使溶解，作為供試品溶液。另取烏藥對照藥材3g，同法製成對照藥材溶液。照 薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各1μ1，分別點於 同一矽膠H薄層板上，以石油醚（30-60°C)_乙酸乙酯（4 : 1)為展開劑，展開，取出，晾乾， 噴以1%香草醛硫酸溶液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的 斑點。
[0007] (3)鹽酸水蘇鹼的含量測定 色譜條件與系統適應性試驗：以氨基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以乙腈-水（82:18)為流 動相；檢測波長為192nm;柱溫為22°C。理論板數按鹽酸水蘇鹼峰計算應不低於4000。
[0008] 對照品溶液的製備：取鹽酸水蘇鹼對照品適量，精密稱定，加流動相製成每Iml含 鹽酸水蘇鹼40μg的溶液，搖勻，即得。
[0009] 供試品溶液的製備：取裝量差異項下的本品內容物，混勻，取lg，精密稱定，置具 塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇 補足減失重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ml至中性氧化鋁柱（100- 200目，4g，內徑 I. 5cm，溼法裝柱，甲醇預洗)上，用甲醇IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣用流動相分次溶 解並轉移至25ml量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
[0010] 測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各?〇μ1，注入液相色譜儀 (LC-15C島津），測定，即得。
[0011] 本品每粒含益母草以鹽酸水蘇鹼（C7H13NO2 ·HC1)計，不得少於0.64mg。
[0012] 本發明與現有技術相比，具有明顯的有益效果，由以上技術方案可知：採用了高效 液相色譜法對抗宮炎軟膠囊增加了烏藥幹浸膏中烏藥醚內酯的含量測定，質量檢測方法簡 單易行，準確可靠，精確度高。同時增加了對益母草的薄層鑑別，從而保證了對一個品種採 取至少兩個含量測定指標，對所有組方採取定性檢查來有效控制產品質量的措施。本發明 能更好地檢測該中藥製劑的質量，保證用藥的安全性、有效性，從而確保其臨床療效。

【具體實施方式】
[0013] 以下通過實驗例來進一步說明本發明方法的有益效果。
[0014]實驗例：烏藥醚內酯的含量測定 (1)流動相的選擇： 流動相1 :甲醇-乙腈-水（35 :25 :40); 流動相2 :甲醇-乙腈-水（355 :255 :40); 流動相3 :甲醇-水（60 :40); 流動相4:甲醇-水（40:60); 流動相5 :乙腈-水（60 :40); 流動相6 :乙腈-水（56 :44); 通過以上對比試驗結果的分析，流動相6具有保留時間適當，樣品分離效果好、陰性無 幹擾等特點。同時根據後續試驗分析總結，當烏藥醚內酯理論塔板數達到3000時，分離均 大於1. 5,故以烏藥醚內酯峰計理論塔板數應不低於3000。
[0015] (2)供試品溶液製備方法篩選 根據倍半萜類化合物的理化特性，我們分別採用不同的提取方法，以烏藥醚內酯的含 量作為指標，結果見下表。
[0016]

【權利要求】
1. 一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法，包括以下步驟： (1) 烏藥醚內酯的含量測定： 色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以56:44的乙 腈-水為流動相；檢測波長為235nm，理論塔板數按烏藥醚內酯峰計算應不低於2000 ; 對照品溶液的製備：取烏藥醚內酯對照品l〇mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用甲醇溶 解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取l〇ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每lml中 含烏藥醚內酯40iig; 供試品溶液的製備：取本品內容物lg，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚50ml，提取 4小時，提取液揮幹，殘渣用甲醇分次溶解，轉移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過， 取續濾液，即得； 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 U 1，注入液相色譜儀，測定，即得； (2) 益母草薄層鑑別：稱取本品內容物0. 5g，加乙醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾 液加在100-200目，5g，內徑為lcm的中性氧化鋁柱上，用乙醇20ml洗脫，收集濾液與洗脫 液，蒸乾，殘渣加乙醇5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸水蘇鹼對照品，加乙醇製成每 lml含2mg的溶液，作為對照品溶液；分別吸取供試品溶液10 ill、對照品溶液4 ill點於同 一矽膠G薄層板上，以10:10:1的丙酮-無水乙醇-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以 10%硫酸乙醇溶液和1:1的稀碘化鉍鉀試液-碘化鉀碘試液混合液，供試品色譜中，在與對 照品相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
2. 如權利要求1所述的一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法，其中： (1) 廣東紫珠的鑑別： 取本品內容物2 g，加60%乙醇50ml，鹽酸lml，置水浴上加熱回流4小時，濾過，濾液 置水浴上蒸至15ml，加水20ml，搖勻，濾過，濾液用乙醚振搖提取3次，每次15ml，合併乙醚 液，置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取廣東紫珠對照藥材5g，同 法製成對照藥材溶液；照中國藥典2010年版一部附錄VI B薄層色譜法；試驗，吸取上述兩 種溶液各5iU，分別點於同一矽膠G薄層板上，以5 : 4 : 1的甲苯-甲酸乙酯-甲酸為展 開劑，展開，取出，晾乾，置氨氣中燻約5分鐘，置365nm紫外燈下檢視； 供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點； (2) 烏藥的鑑別： 取本品內容物3g，加30-60°C石油醚30ml，振搖，放置過夜，濾過，濾液揮幹，殘渣加石 油醚lml使溶解，作為供試品溶液； 另取烏藥對照藥材3 g，同法製成對照藥材溶液；照中國藥典2010年版一部附錄VI B 薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各lul，分別點於同一矽膠H薄層板上，以4 : 1的 30-60°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以1%香草醛硫酸溶液； 供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (3) 鹽酸水蘇鹼的含量測定 色譜條件與系統適應性試驗：以氨基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以82:18的乙腈-水為 流動相；檢測波長為192nm ;柱溫為22°C ; 理論板數按鹽酸水蘇鹼峰計算應不低於4000 ; 對照品溶液的製備：取鹽酸水蘇鹼對照品適量，精密稱定，加流動相製成每lml含鹽酸 水蘇鹼40 ii g的溶液，搖勻，即得； 供試品溶液的製備：取裝量差異項下的本品內容物，混勻，取lg，精密稱定，置具塞錐 形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減 失重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ml至100- 200目，4g，內徑1. 5cm，溼法裝柱，甲醇 預洗的中性氧化鋁柱上，用甲醇l〇〇ml洗脫，收集洗脫液，蒸乾，殘渣用流動相分次溶解並 轉移至25ml量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得； 測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 Ul，注入液相色譜儀，測定，即 得。
3. 如權利要求1或2所述的一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法，其中：本品每粒含益 母草以鹽酸水蘇鹼（C7H13N02 ? HC1)計，不得少於0. 64mg。
4. 如權利要求3所述的一種抗宮炎軟膠囊的質量檢測方法，其中：本品每粒含烏藥以 烏藥醚內酯計應不得少於為〇. 23mg。
【文檔編號】G01N30/90GK104483402SQ201410720487
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月2日 優先權日:2014年12月2日
【發明者】羅偉 申請人:貴州匯正製藥有限責任公司