中藥寄生藤的醫藥用途的製作方法
2023-10-22 17:56:52 2
專利名稱：中藥寄生藤的醫藥用途的製作方法
技術領域：
本發明是關於中藥寄生藤的製藥用途，具體地說是寄生藤在製備治療過敏性皮炎、蕁麻疹藥物中的應用，在製備治療骨結核、淋巴結核、皮膚結核、慢性骨髓炎、松毛蟲病骨質破壞、股骨頭壞死、骨質增生、非化膿性軟骨膜炎、扁平疣、傳染性軟疣和痛風藥物中的應用。
背景技術：
寄生藤，又名藤香、入地寄生、熊膽藤、左扭香、列子、藤酸公、青藤公，英文名稱為Henslowia Frutescens Cnamp，屬檀香科植物。它生於灌木叢中，常寄生在其它植物的地下莖或根上。寄生藤產在我國華南各省，藥源十分豐富。
寄生藤在許多中草藥書籍中尚未有記載，《中藥大辭典》中雖有記載，但僅提到主治散血、消腫、止痛，治刀傷、跌打且只作為外用藥，沒有涉及治療過敏性皮炎、蕁麻疹、骨結核、淋巴結核、皮膚結核、慢性骨髓炎、松毛蟲病骨質破壞、股骨頭壞死、骨質增生、非化膿性軟骨膜炎、扁平疣、傳染性軟疣和痛風藥物中的應用，其他醫藥文獻資料亦無這一方面的報導。
發明內容
在多年的臨床實踐中，發明人用中草藥寄生藤製劑治療過敏性皮炎、蕁麻疹、骨結核、淋巴結核、皮膚結核、慢性骨髓炎、松毛蟲病骨質破壞、股骨頭壞死、骨質增生、非化膿性軟骨膜炎、扁平疣、傳染性軟疣和痛風等病症，收到了滿意的效果，發現了寄生藤一些可靠的新用途。
因此，本發明的目的之一就是克服以前應用抗組胺藥物或皮質類固醇藥物在治療過敏性皮炎、蕁麻疹時的副作用，而提供寄生藤在製備治療過敏性皮炎、蕁麻疹藥物中的應用。
本發明的另一目的是提供寄生藤在製備治療骨結核、淋巴結核、皮膚結核藥物中的應用。
本發明的另一目的是提供寄生藤在製備治療慢性骨髓炎、松毛蟲病骨質破壞、股骨頭壞死藥物中的應用。
本發明的另一目的是提供寄生藤在製備治療骨質增生、非化膿性軟骨膜炎藥物中的應用。
本發明的另一目的是提供寄生藤在製備治療扁平疣、傳染性軟疣藥物中的應用。
本發明的另一目的是提供寄生藤在製備治療痛風藥物中的應用。
本發明的內容就是寄生藤在製備治療過敏性皮炎藥物中的應用；寄生藤在製備治療蕁麻疹藥物中的應用；寄生藤在製備治療骨結核藥物中的應用；寄生藤在製備治療淋巴結核藥物中的應用；寄生藤在製備治療皮膚結核藥物中的應用；寄生藤在製備治療慢性骨髓炎藥物中的應用；寄生藤在製備治療松毛蟲病骨質破壞藥物中的應用；寄生藤在製備治療股骨頭壞死藥物中的應用；寄生藤在製備治療骨質增生藥物中的應用；寄生藤在製備治療非化膿性軟骨膜炎藥物中的應用；寄生藤在製備治療扁平疣藥物中的應用；寄生藤在製備治療傳染性軟疣藥物中的應用和寄生藤在製備治療痛風藥物中的應用。
寄生藤在製備上述治療各種疾病的藥物時，可以是以單獨的寄生藤為原料製備成藥劑，也可以將寄生藤與其他藥物配合製成複方製劑。
一般將寄生藤製備成上述用途的藥物時，先對寄生藤進行提取，然後將寄生藤提取物單獨地或者加入複方中以常規的製劑工藝製備成藥劑。
這裡所說的對寄生藤的提取，可以是用寄生藤的水提物，如水煎劑，水煎劑的濃縮液，或寄生藤水提液醇沉後經噴霧乾燥得到的粉劑；也可以是以乙醇或其他有機溶劑對寄生藤進行提取。
當然也可以將寄生藤原藥直接製備成單方或複方的製劑。
這裡所說的用寄生藤製成的藥劑可以是臨床上能夠使用的各種不同劑型，如片劑、口服液、粉劑、丸劑、膠囊、注射劑(包括靜脈輸液劑)、膏劑、酊劑、散劑和衝劑等。
寄生藤用於製備上述藥物的特點是該藥物僅對單核巨噬細胞有強烈的抑制作用，對金葡菌、桿菌有抑制作用，而對免疫系統無影響，因此對治療上述疾病有抗炎抑菌的特殊療效。並且，該藥物的毒性極小，避免抗生素的副作用。
具體的實施方式上述治療慢性骨髓炎、松毛蟲病骨質破壞、股骨頭壞死、骨質增生的藥物採用內服的方法使用；治療上列其餘疾病的藥物採用內服和外用相配合的方法使用。內服的具體方法可採用下列方法之一1.將寄生藤洗淨、涼幹、切片，再用水煎服，成人劑量為每日含15-20克寄生藤的湯藥，一日分兩次服用；2.將寄生藤用酒浸泡，製成藥酒，每天服含10克寄生藤的藥酒，分兩次服用；3.將寄生藤洗淨、曬乾、粉碎、過120目篩，製成乾粉散劑或裝入膠囊，每天服含5克寄生藤的藥粉，分兩次服用；當然也可以製成注射劑，進行肌肉注射或靜脈注射。外用的具體方法可以製成軟膏外敷，也可以製成洗劑外洗溼敷。
在臨床治療中，對過敏性皮炎、蕁麻疹一般採用藥物抗組胺或類固醇，但是，抗組胺對患者有嗜睡的副作用；類固醇屬於一種皮質激素類藥，它會影響患者的腸胃、血壓，甚至引起胃出血。並且，對患有結核、糖尿病的患者禁止使用類固醇。對骨結核、淋巴結核、皮膚結核病的患者，一般採用異煙肼或利福平或乙胺丁醇，但是這些藥物對病人的肝臟有損害，且抑制骨髓的造血功能。治療慢性骨髓炎一般採用青黴素或克霖黴素，但是，由於長期使用青黴素或克霖黴素，患者已有抗藥性，並且使用上述藥物不夠安全，時有發生過敏性休克的病例。對於松毛蟲病骨質破壞、股骨頭壞死、骨質增生、非化膿性軟骨膜炎和痛風病，一般採用皮質激素類藥治療，但隨之帶來的是上述皮質激素類藥的副作用。對於扁平疣和傳染性軟疣病，一般採用抗病毒類藥物，如阿昔洛韋，其缺點是療程比較長，治療費用高。另外，中草藥雷公藤在臨床中時有替代抗菌素或抗病毒類藥治療上列疾病中一些疾病的情況，但是，雷公藤有影響人體免疫功能的副作用。
在長期的臨床實驗中證明，使用中草藥寄生藤的製劑治療上述疾病，不但可以達到上面常用藥物的效果，甚至超過其效果。並且，沒有任何副作用，其治療費用又低廉的多。
下面通過實驗數據來證實本發明所說的寄生藤的新用途。
實驗(一)寄生藤抗過敏、抗炎和急性毒性實驗。
一.實驗材料寄生藤藥液，濃度為1∶1(1g生藥/ml)及1∶6.67(6.67g生藥/ml)。
地塞米松片，山東省濟寧市第三製藥廠生產，批號9901133伊文思藍，中國醫藥(集團)上海化學試劑公司(進口分裝)，批號23860。
卵蛋白，Sigma生產。
百日咳疫苗，山東省衛生防疫站提供。
其他試劑皆為分析純。
小鼠、大鼠均由山東中醫藥大學提供。
二.實驗方法與結果1.寄生藤藥液對二甲苯所致小鼠耳廓炎症作用的影響。取健康小鼠50隻，雌雄各半，體重18-22g，隨機分成5組，每組10隻，分別口服不同濃度的寄生藤藥液、地塞米松和等同劑量的生理鹽水，劑量0.2ml/10g，連續三天，於末次給藥1小時後，每隻小鼠右耳塗50ul二甲苯，1.5小時後，處死小鼠並剪下兩耳，用直徑7.5毫米打孔器在相同的位置打下耳片，電子天平稱重，實驗結果見表一
表一 寄生藤藥液對二甲苯致炎作用的影響(X±SD).
與生理鹽水組比較*P＜0.012.寄生藤藥液對伊文思藍滲出的影響取健康小鼠50隻，雌雄各半，體重18-22克，隨機分成5組，每組10隻，分別口服不同濃度的寄生藤藥液及地塞米松和等同劑量的生理鹽水，每次0.2ml/10g，連續5天，於末次給藥1小時後，每隻小鼠均靜脈注射0.5％伊文思藍0.1ml/10g，隨即腹腔注射1％醋酸0.2ml/只，20分鐘脫頸椎處死，自腹白線剪開皮膚肌肉，用6ml生理鹽水分兩次洗滌腹腔，吸管吸取洗滌液，用轉速3000轉/分的離心機離心旋轉15分鐘，取上面的清液；再用721分光光度計於590nm測定光密度，並根據標準曲線方程計算腹腔內滲入的伊文思藍量，實驗結果見表二表二 寄生藤藥液對滲出的影響(X±SD)
與生理鹽水組比較*P＜0.013.寄生藤藥液抗過敏作用觀察取大鼠5隻，體重100-200克，以1％卵蛋白0.5ml肌注，隔日一次，共3次，同時腹腔注射百日咳核疫苗2×10，14天後，乙醚淺麻，自腹主靜脈取血，分離血清，得致敏抗血清，-20C保存備用。
另取大鼠20隻，雌雄各半，體重150-200克，連續給藥15天，於第14天用8％的硫化鈉脫毛，脫毛後第二天在乙醚淺麻的情況下，在大鼠的背部脊柱兩側注射致敏抗血清，每側2-3點，每點間隔1.5-2.0釐米，致敏抗血清以1∶10梯度稀釋，每點注射致敏抗血清0.1ml，48小時後進行抗原攻擊，靜脈注射0.5％伊文思藍0.5ml和1％卵蛋白生理鹽水溶液0.5ml，經30分鐘後，斷頸處死動物，剪下背部皮膚，檢查測量注射各點的藍色反應斑點直徑，實驗結果見表三。
表三 寄生藤藥液對皮膚過敏的影響(X±SD)
與生理鹽水組比較*p＜0.014.寄生藤藥液急性毒性實驗經預試未測到藥物的半數致死量，故測其最大給藥量。取小鼠20隻，雌雄各半，以濃度1∶6.67(6.67g生藥/ml)藥液灌胃，0.3ml/10g，3次/天，然後連續觀察7天，結果給藥後小鼠未見明顯的毒性反應，小鼠飲食、行為、背毛、糞便等未見異常，未見動物有死亡，7天後處死動物，活檢動物心、肝、脾、肺、腎等重要器官未發現有明顯改變，故寄生藤藥液最大給藥量至少為0.3ml/10g×6.67g/ml×3＝600.3g/kg，臨床用量為20克生藥/日，動物用量折合為人用量的1800倍，證明此藥臨床應用比較安全。
實驗(二)中藥寄生藤的抗炎作用實驗一.材料與方法6-8周BALB/c純系小鼠(上海必凱實驗動物有限公司提供)；藥物配置，用0.5克寄生藤幹藥/ml的水溶液，經0.2nm孔徑的濾器過濾後作為原藥液備用；RPMI1640培養基(Hyclone)，胎牛血清(Hyclone)。
NO的測定，採用Griess法，反應後570nm測定OD值；小鼠TNFα，IL-1β，IL-2，IFNγ的檢測均採用ELISA法(RD公司)，450nm測定OD值；二.小鼠腹腔巨噬細胞的分離取8周齡BALB/c小鼠4隻，引頸處死，用無菌注射器吸取5ml冷的培養基進行腹腔無菌灌洗，將所有灌洗液混勻，並記數細胞濃度；1000rpm離心10分鐘，去除上清，用含10％胎牛血清的RPMI1640培養基配成1*10/ml的細胞懸液，並接種致24孔細胞培養板，置37C，5％CO2的孵箱中孵育，2小時後將培養板輕輕振蕩並去除上清和懸浮細胞，重新往孔內添加新鮮完全培養基後備用。
三.小鼠脾臟淋巴細胞的分離取8周齡BALB/c小鼠1隻，引頸處死，無菌分離脾臟並將其研磨，經400目鋼網過濾後，再用Tris-NH4Cl裂解紅細胞，PBS洗二遍後用含10％胎牛血清的RPMI1640培養基配成1*10/ml的細胞懸液備用。
四.藥物對巨噬細胞和淋巴細胞的活化抑制作用將分離的小鼠腹腔巨噬細胞和淋巴細胞鋪24孔培養板，每孔1ml，將預製的藥物以1％為起始濃度，依次倍比稀釋後加入，共作4個濃度，每個濃度置3個復孔，同時設空白對照和陽性對照。培養8小時後，巨噬細胞實驗組中以1ug/ml的濃度加入LPS，淋巴細胞實驗組以5ug/ml的濃度加入ConA，繼續培養48小時後吸取上清，巨噬細胞測定NO，TNFα，IL-1β，淋巴細胞測定IL-2IFN-γ。
五.藥物對細菌的直接抑制作用實驗用LB培養基配製2％的營養瓊脂，高壓滅菌後加入不同濃度的藥物(1％，5％，10％)，每個濃度鋪3塊10釐米平皿，20ml/皿，冷卻後開蓋置於室內臺面靜置30分鐘；再置入37度恆溫孵箱中培養48小時觀察並記數菌落數目。結果如下表四所示。
*與1號組相比P＜0.05上面的實驗說明，寄生藤藥液對金葡菌的抑制作用較弱，對桿菌的抑制作用較強，對黴菌無抑制作用。
六. 藥物對巨噬細胞和淋巴細胞形態學的影響從顯微鏡觀察發現，(參看圖6、圖7)藥物對巨噬細胞有強且迅速的毒性作用，在0.25％的藥物濃度以上，8小時內胞漿出現即可出現空胞，隨後發生固縮性死亡，但胞核相對完整，說明藥物直接作用於胞漿成分使細胞出現死亡；同濃度的藥物對淋巴細胞沒有顯著的形態學變化，說明藥物對免疫系統的損傷極小。
七.藥物對巨噬細胞活化的抑制作用在先與藥物作用2小時後，再用強的巨噬細胞刺激劑LPS刺激，發現上清中NO和IL-1β，TNFα的含量明顯降低，但沒有明顯的藥物濃度相關性。上述實驗結果，可參看以下的附圖，進行說明。
從實驗(二)可以證明，寄生藤藥液的抗炎作用其一是因為該藥對單核巨噬細胞系統具有強烈的抑制作用，抑制巨噬細胞分泌炎症介質，即抑制炎症反應；其二是該藥有較強的抑菌作用，特別對桿菌及金葡菌有較強的抑菌作用，故對炎症的致病細菌有直接的抗菌作用。
圖1為巨噬細胞上清中NO的含量。圖中，標有*的組值與陽性對照比P＜0.01。
圖2為巨噬細胞培養上清中IL-1的含量。圖中，標有*的組值與陽性對照比P＜0.01，標有#的組值與陽性對照比P＜0.01。
圖3為巨噬細胞培養上清中TNF-α的含量。圖中，標有#的組值與陽性對照比P＜0.01。
圖4為淋巴細胞培養上清中IL-2的濃度。圖中，標有*的組值與陽性對照比P＜0.01。
圖5為淋巴細胞培養上清中IFN-γ的含量。圖中，標有#的組值與陽性對照比P＞0.05。
圖6為在顯微鏡觀察的陰性對照照片。
圖7為在顯微鏡觀察的藥物作用8小時的照片。
權利要求
1.寄生藤在製備治療過敏性皮炎藥物中的應用。
2.寄生藤在製備治療蕁麻疹藥物中的應用。
3.寄生藤在製備治療骨結核藥物中的應用。
4.寄生藤在製備治療淋巴結核藥物中的應用。
5.寄生藤在製備治療皮膚結核藥物中的應用。
6.寄生藤在製備治療慢性骨髓炎藥物中的應用。
7.寄生藤在製備治療松毛蟲病骨質破壞藥物中的應用。
8.寄生藤在製備治療股骨頭壞死藥物中的應用。
9.寄生藤在製備治療骨質增生藥物中的應用。
10.寄生藤在製備治療非化膿性軟骨膜炎藥物中的應用。
11.寄生藤在製備治療扁平疣藥物中的應用。
12.寄生藤在製備治療傳染性軟疣藥物中的應用。
13.寄生藤在製備治療痛風藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了寄生藤的新的藥物用途，用寄生藤可以製備成治療過敏性皮炎、蕁麻疹、骨結核、淋巴結核、皮膚結核、慢性骨髓炎、松毛蟲病骨質破壞、股骨頭壞死、骨質增生、扁非化膿性軟骨膜炎、扁平疣、傳染性軟疣和痛風等疾病的藥物。
文檔編號A61P31/06GK1562283SQ20041002688
公開日2005年1月12日 申請日期2004年4月14日 優先權日2004年4月14日
發明者陳積正 申請人:陳積正