微生物及其用途的製作方法

2023-09-22 08:41:20 3

本發明涉及生物工程領域，具體的，本發明涉及微生物及其用途，更具體的，本發明涉及微生物、獲得番茄紅素的方法和微生物在製備番茄紅素中的用途。

背景技術：

番茄紅素的開發生產主要有天然產物提取、化學合成、微生物發酵等方法。天然產物提取主要是通過成熟果實的萃取純化獲得番茄紅素，然而這種生產方式受氣候、品種、地理位置、成熟度等諸多不可控因素影響，具有明顯的季節性，含量不穩定性，並且大面積種植、養殖的成本較高，含量通常也比較低。另外，高純度的番茄紅素在萃取純化技術上非常困難，這些共同造成了番茄紅素的成品十分昂貴。化學合成法具有原料易得價廉、反應條件溫和、反應速率快、產物容易與反應體系分離的優點，但由於雙鍵立體選擇性難以控制及不同程度的化學試劑殘留，其產品的質量、安全性及使用範圍都受到了限制。微生物發酵法主要是利用微生物的生物代謝，將葡萄糖、澱粉、黃豆餅粉等廉價原料轉化為番茄紅素，這種方法不受季節、地域、氣候等因素的影響，原料易獲取、生產周期短、工藝操作簡單、成本低廉、產物質量可控、產物易純化、安全性高，並且環境汙染較少，不僅解決了因種植植物等而佔用大量耕地的問題，也解決了化學合成不環保的弊端。最重要的是，發酵法生產的番茄紅素屬於天然型產品，其活性與天然植物提取的活性成分一致，被認為是番茄紅素生產最有前景的方法。

技術實現要素：

本發明旨在至少在一定程度上解決相關技術中的技術問題之一。

目前研究較多的番茄紅素產生菌的主要是三孢布拉氏黴菌。但是三孢布拉氏黴菌在傳代過程中容易發生退化現象，使得番茄紅素產量減少，另伴有黃麴黴毒素等有毒成分的合成，另一方面，這兩種微生物的生長周期相較於酵母和大腸桿菌較長，大大降低了其生產效率，從而造成了生產番茄紅素的難度加大。

為此，本發明的一個目的在於提出了一種微生物，該微生物生產番茄紅素的產量高，生產周期短，生產效率高。

在本發明的第一方面，本發明提出了一種微生物。根據本發明的實施例，所述微生物過表達包括選自thmg1，btcarg，pacrtb，mccrti，ino2，yap1，spt15-5，taf25-3，gapn，pyc2，smae1，mdh2，pos5，pntab，adh2，acs6，ald6，eute，erg12，idi1，erg10，mvd1，erg13，erg8基因的至少之一；以及沉默包括選自gal1，gal7，gal10，gal80，rox1，vba5，dos2，ypl062w，yjl064w，yer130c，yer134c，ynr063w，exg1，yor292c，sfk1，mef1基因的至少之一。利用根據本發明實施例的微生物，生產番茄紅素的產量高，生產周期短，生產效率高。

根據本發明的實施例，上述微生物還可以進一步包括如下附加技術特徵至少之一：

根據本發明的實施例，所述微生物是酵母菌。酵母菌的生長周期短，利用本發明實施例的微生物生產番茄紅素的效率進一步提高。

根據本發明的實施例，所述微生物進一步包括可操作調控erg9基因。根據本發明的實施例，所述可操作調控erg9基因包括但不限於替換erg9基因的啟動子，進而使得erg9基因的表達可以根據需要進行調控，使微生物生產番茄紅素的效率進一步提高。

在本發明的第二方面，本發明提出了一種獲得番茄紅素的方法。根據本發明的實施例，所述方法包括：將前面所述的微生物進行發酵處理；以及將發酵處理產物進行萃取處理，以便獲得所述番茄紅素。利用根據本發明實施例的獲得番茄紅素的方法，能夠高產量、高效率獲得番茄紅素，且番茄紅素的純度高。

根據本發明的實施例，上述獲得番茄紅素的方法還可以進一步包括如下附加技術特徵至少之一：

根據本發明的實施例，利用根據本發明實施例的獲得番茄紅素的方法，獲得的番茄紅素產量更高、效率更高，純度也更高。

根據本發明的實施例，所述發酵處理是通過如下方式實現的：將所述微生物進行基礎發酵處理和兩級分批補料發酵處理，所述基礎發酵處理是在基本發酵培養基中進行的，所述兩級分批補料發酵處理是通過在所述基本發酵培養基基礎上依次補加第一補料培養基和第二補料培養基實現的，其中，所述基本發酵培養基為含有2％蛋白腖，1％酵母提取物，0.8％kh2po4和2％葡萄糖的ypd含鹽培養基；所述第一補料培養基為含有500g/l葡萄糖，5g/lmgso4，3.5g/lk2so4，0.28g/lna2so4和10g/l酵母提取物的ypd含鹽培養基；所述第二補料培養基為乙醇或甘油。發明人通過實驗發現，採用上述發酵處理方式，微生物的擴增速率高、番茄紅素的產率也進一步提高。

根據本發明的實施例，所述萃取處理包括：將所述發酵處理產物進行超聲破碎處理及有機萃取處理。發明人對發酵產物進行萃取處理過程中發現，將發酵處理後產物進行超聲破碎處理，相比於採用鹽酸蒸煮的方法，番茄紅素的降解大幅降低，萃取處理後獲得的番茄紅素的產量進一步提高。

在本發明的第三方面，本發明提出了前面所述微生物在製備番茄紅素中的用途。如前所述，利用本發明實施例的微生物，生產番茄紅素的產量高，生產周期短，生產效率高。

附圖說明

圖1是根據本發明實施例1的敲除盒片段1的結構示意圖；

圖2是根據本發明實施例1的敲除盒片段2的結構示意圖；

圖3是根據本發明實施例1的敲除盒片段3的結構示意圖；

圖4是在敲除gal1/7/10和gal1/7/10/80的菌株中的不同啟動子的強度；

圖5是第二代工程菌株搖瓶發酵結果；

圖6是根據本發明實施例4的敲除盒片段4的結構示意圖；以及

圖7是根據本發明實施例的發酵培養基的篩選結果圖。

具體實施方式

下面詳細描述本發明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用於解釋本發明，而不能理解為對本發明的限制。

微生物

在本發明的第一方面，本發明提出了一種微生物。根據本發明的實施例，該微生物過表達包括選自thmg1，btcarg，pacrtb，mccrti，ino2，yap1，spt15-5，taf25-3，gapn，pyc2，smae1，mdh2，pos5，pntab，adh2，acs6，ald6，eute，erg12，idi1，erg10，mvd1，erg13，erg8基因的至少之一；以及沉默包括選自gal1，gal7，gal10，gal80，rox1，vba5，dos2，ypl062w，yjl064w，yer130c，yer134c，ynr063w，exg1，yor292c，sfk1，mef1基因的至少之一。利用根據本發明實施例的微生物，生產番茄紅素的產量高，生產周期短，生產效率高。

本申請所述的微生物用於生產番茄紅素，相比於現有技術，其產量得到了顯著提高，能夠至少達到2g/l。

根據本發明的具體實施例，所述微生物還可以進一步包括可操作調控erg9基因。本申請所述的可操作調控erg9基因是指替換erg原始的啟動子，從而實現通過葡萄糖調控erg9的表達，從而增加番茄紅素的產量。

需要說明的是，發明人通過實驗，發現：表達btcarg，pacrtb，mccrti基因能夠達到在酵母體內高效合成番茄紅素的目的；沉默gal1，7，10或gal1，7，10，80能夠達到利用半乳糖誘導或利用葡萄糖濃度調節生產番茄紅素的目的；表達ino2，yap1，spt15-5，taf25-3基因是抗逆基因，可以增加番茄紅素的產量；表達gapn，pyc2，smae1，mdh2，pos5，pntab中的一個或多個基因能夠平衡酵母體內的還原力，可以增加番茄紅素的產量；表達adh2，acs2，ald6，eute中的一個或多個基因能夠增加合成番茄紅素的前體物質的供應，增加番茄紅素的產量；表達erg12，idi1，erg10，mvd1，erg13，erg8中的一個或多個基因，能夠平衡有關番茄紅素合成中的mva途徑，增加番茄紅素的產量；沉默rox1，vba5，dos2，ypl062w，yjl064w，yer130c，yer134c，ynr063w，exg1，yor292c，sfk1，mef1基因的至少之一，能夠從整體上調節酵母系統，從而增加番茄紅素的產量。利用根據本發明實施例的微生物，番茄紅素的產量得到顯著提高。

獲得番茄紅素的方法

在本發明的第二方面，本發明提出了一種獲得番茄紅素的方法。根據本發明的實施例，該方法包括：將前面所述的微生物進行發酵處理；以及將發酵處理產物進行萃取處理，以便獲得所述番茄紅素。利用根據本發明實施例的獲得番茄紅素的方法，能夠高產量、高效率獲得番茄紅素，且番茄紅素的純度高。

根據本發明的具體實施例，所述發酵處理是通過基礎發酵處理和兩級分批補料發酵處理進行的，具體如下所述：

將保種管從-80度冰箱中取出放置冰上解凍，然後劃ypd平板，於30度培養箱中培養，然後挑取單克隆至含5ml基本發酵培養基(為包含2％蛋白腖，1％酵母提取物，0.8％kh2po4和2％葡萄糖的ypd含鹽培養基)(ypd是常用於培養酵母的一種培養基)的pa瓶中，30度搖床中培養，轉速為220rmp。待種子液變渾濁後(一般為指數期，od＝5-8，14-18小時)轉接至50ml新鮮的基本發酵培養基中(250ml三角瓶)，轉接量為1％左右。放於30度搖床中培養，轉速為220rmp。待種子液長至對數期時(一般14-18小時)轉接至200ml新鮮的基本發酵培養基中(500ml三角瓶)，轉接量為1％左右。放於30度搖床中培養，轉速為220rmp。長至對數期的種子液作為上罐種子液。初始接種od調至0.5，所需種子液體積根據公式進行計算(如發酵液體積為2500ml，種子液od值為n，則接種種子液體積為25000﹡0.5/nml)。開始發酵後，控制ph值為5.5，通氣量為1.5vvm，初始攪拌速率設置為300rpm，溶氧維持在30％以上(300-600rpm)。

當培養時葡萄糖濃度降至2g/l左右時開始補料葡萄糖(以補加第一補料培養基的形式提供，第一補料培養基為含有500g/l葡萄糖，5g/lmgso4，3.5g/lk2so4，0.28g/lna2so4和10g/l酵母提取物的ypd含鹽培養基)，初始補料速率為10ml/l發酵液/h，以維持發酵液中葡萄糖的殘留濃度在1g/l左右，每兩個小時取樣測量一次od600值和檢測一次葡萄糖含量，當葡萄糖濃度低於1g/l時增加補料速率。當od值增加緩慢時(開始進入穩定期)停止補料葡萄糖，此時開始監測乙醇殘留量，當乙醇濃度降至5g/l時開始補料乙醇或者是甘油(第二補料培養基，包含乙醇或甘油)，初始補料速率為10ml/l發酵液/h。隨後每4h取樣檢測一次乙醇或甘油含量，當乙醇或甘油濃度低於5g/l時調整補料速率。顏色有變化後開始提取產物檢測產物變化，當番茄紅素濃度不再增加時結束髮酵。

其中，發明人發現，在基本發酵培養基中培養菌體，相比於現有技術的培養基，菌體的生長速度和生長狀態均顯著優於現有技術，補加的第一補料培養基，有效保證了菌體的快速和健康的生長，補加的第二補料培養基，有效提高了番茄紅素的產量。根據本發明的再一具體實施例，所述萃取處理包括：將所述發酵處理後產物進行超聲破碎處理以及有機萃取處理。發明人對發酵處理後的萃取過程進行了優化篩選，發明人發現，採用超聲處理的方式相比於採用鹽酸蒸煮的方式，番茄紅素的降解速率大幅降低，番茄紅素的產量穩定。另外，需要說明的是，本申請所述的「有機萃取處理」是指採取有機溶劑對超聲破碎處理產物進行萃取，有機萃取的方式不受特別限制，如根據本發明的具體實施例，可以採用丙酮溶劑從超聲破碎處理產物中萃取番茄紅素。

用途

在本發明的第三方面，本發明提出了前面所述的微生物在製備番茄紅素中的用途。發明人經過實驗證實，本申請所述的微生物在生產番茄紅素方面具有顯著的優勢，番茄紅素的產量高、番茄紅素的降解速率低，生產周期短。

下面詳細描述本發明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用於解釋本發明，而不能理解為對本發明的限制。實施例中未註明具體技術或條件的，按照本領域內的文獻所描述的技術或條件或者按照產品說明書進行。所用試劑或儀器未註明生產廠商者，均為可以通過市購獲得的常規產品。

實施例1第一代工程菌株j1011-3的構建

在本實施例中，發明人詳細介紹了j1011-3菌株的構建過程。

首先構建δleu2：pgal1-btcarg(blakesleatrispora)敲除盒，即敲除盒片段1，設計上、下遊引物pcr擴增各片段，使其相互之間有60-80bp的重疊片段，再通過同源重組的方式將所有片段重組在一起，通過酶切線性化得到δleu2：：pgal1-btcarg(blakesleatrispora)敲除盒，如敲除盒片段1如圖1所示，敲除盒片段1具有如seqidno：1所示的核苷酸序列。利用酵母自身的同源重組機制將該片段通過醋酸鋰法酵母轉化分別整合到酵母30000b基因組上，整合位點為leu2，由於原酵母中的leu2沒有活性，而整合後的同源左臂含有leu2完整基因，固轉化後採用sd-leu固體板(合成酵母氮源ynb6.7g/l，葡萄糖20g/l，缺亮氨酸的混合胺基酸粉末1.3g/l，2％瓊脂粉)進行篩選，得到的轉化子通過分純培養後提取酵母基因組進行pcr驗證，成功驗證的菌株命名為j1011-1。

ataacgagaacacacaggggcgctatcgcacagaatcaaattcgatgactggaaattttttgttaatttcagaggtcgcctgacgcatatacctttttcaactgaaaaattgggagaaaaaggaaaggtgagagcgccggaaccggcttttcatatagaatagagaagcgttcatgactaaatgcttgcatcacaatacttgaagttgacaatattatttaaggacctattgttttttccaataggtggttagcaatcgtcttactttctaacttttcttaccttttacatttcagcaatatatatatatatatttcaaggatataccattctaatgtctgcccctaagaagatcgtcgttttgccaggtgaccacgttggtcaagaaatcacagccgaagccattaaggttcttaaagctatttctgatgttcgttccaatgtcaagttcgatttcgaaaatcatttaattggtggtgctgctatcgatgctacaggtgttccacttccagatgaggcgctggaagcctccaagaaggctgatgccgttttgttaggtgctgtgggtggtcctaaatggggtaccggtagtgttagacctgaacaaggtttactaaaaatccgtaaagaacttcaattgtacgccaacttaagaccatgtaactttgcatccgactctcttttagacttatctccaatcaagccacaatttgctaaaggtactgacttcgttgttgtcagagaattagtgggaggtatttactttggtaagagaaaggaagacgatggtgatggtgtcgcttgggatagtgaacaatacaccgttccagaagtgcaaagaatcacaagaatggccgctttcatggccctacaacatgagccaccattgcctatttggtccttggataaagctaatgttttggcctcttcaagattatggagaaaaactgtggaggaaaccatcaagaacgaattccctacattgaaggttcaacatcaattgattgattctgccgccatgatcctagttaagaacccaacccacctaaatggtattataatcaccagcaacatgtttggtgatatcatctccgatgaagcctccgttatcccaggttccttgggtttgttgccatctgcgtccttggcctctttgccagacaagaacaccgcatttggtttgtacgaaccatgccacggttctgctccagatttgccaaagaataaggtcaaccctatcgccactatcttgtctgctgcaatgatgttgaaattgtcattgaacttgcctgaagaaggtaaggccattgaagatgcagttaaaaaggttttggatgcaggtatcagaactggtgatttaggtggttccaacagtaccaccgaagtcggtgatgctgtcgccgaagaagttaagaaaatccttgcttaaatttaactccttaagttactttaatgatttagtttttattattaataattcatgctcatgacatctcatatacacgtttataaaacttaaatagattgaaaatgtattaaagattcctcagggattcgatttttttggaagtttttgtttttttttccttgagatgctgtagtatttgggaacaattatacaatcgaaagatatatgcttacattcgaccgttttagccgtgatcattatcctatagtaacataacctgaagcataactgacactactatcatcaatacttgtcacatgagaactctgtgaataattaggccactgaaatttgatgcctgaaggaccggcatcacggattttcgataaagcacttagtatcacactaattggcttttcgcgcaaattaaagccttcgagcgtcccaaaaccttctcaagcaaggttttcagtataatgttacatgcgtacacgcgtttgtacagaaaaaaaagaaaaatttgaaatataaataacgttcttaatactaacataactataaaaaaataaatagggacctagacttcaggttgtctaactccttccttttcggttagagcggatgtggggggagggcgtgaatgtaagcgtgacataactaattacatgatatcgacaaaggaaaaggggcctgtttatattgaattttcaaaaattcttactttttttttggatggacgcaaagaagtttaataatcatattacatggcaataccaccatatacatatccatatctaatcttacttatatgttgtggaaatgtaaagagccccattatcttagcctaaaaaaaccttctctttggaactttcagtaatacgcttaactgctcattgctatattgaagtacggattagaagccgccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccggtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattctacaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaaccttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagccttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataaatgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattacttcttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaacgtcaaggagaaaaaactataatgttgacatcttcaaaatctattgagtcttttccaaaaaatgttcaaccatatggtaagcactaccagaatggtttggagccagtcggtaagtctcaagaagacattttattggaaccattccattacttatgttcaaacccaggtaaagatgtcagaactaaaatgattgaagctttcaacgcttggttgaaggtccctaaggacgatttaattgttattactagagttattgaaatgttacattctgcttctttgttaattgacgatgttgaagatgattctgttttgagaaggggtgtcccagctgcacatcacatttatggtacaccacaaactattaattgtgcaaactacgtttactttttggctttgaaagaaattgctaagttaaataaaccaaatatgattactatttacactgatgaattgataaatttgcatagaggtcaaggtatggaattgttctggagggatacattgacatgtccaacagaaaaagaatttttggatatggttaatgataagactggaggtttgttgagattagctgttaaattaatgcaagaagcatctcaatcaggtactgattatactggtttagtttcaaaaattggtatacactttcaagttagagatgattatatgaatttgcagtctaaaaattatgctgataataaaggtttttgtgaggatttaacagaaggtaaattctctttcccaattatacattctattagatctgatccatctaatagacaattgttgaacattttgaaacaaagatcttcttctattgaattgaaacaatttgctttgcaattattggaaaatactaatactttccaatattgtagagattttttgagagttttggaaaaagaagctagagaagaaattaaattgttgggtggtaacattatgttggaaaagattatggatgttttgtctgttaatgaataagtctgaagaatgaatgatttgatgatttctttttccctccatttttcttactgaatatatcaatgatatagacttgtatagtttattatttcaaattaagtagctatatatagtcaagataacgtttgtttgacacgattacattattcgtcgacatcttttttcagcctgtcgtggtagcaatttgaggagtattattaattgaataggttcattttgcgctcgcataaacagttttcgtcagggacagtatgttggaatgagtggtaattaatggtgacatgacatgttatagcaataaccttgatgtttacatcgtagtttaatgtacaccccgcgaattcgttcaagtaggagtgcaccaattgcaaagggaaaagctgaatgggcagttcgaataaaagattctctttttttatgatatttgtacataaactttataaatgaaattcataatagaaacgacacgaaattacaaaatggaatatgttcatagggtagacgaaactatatacgcaatctacatacatttatcaagaaggagaaaaaggaggatgtaaaggaatacaggtaagcaaattgatactaatggctcaacgtgataaggaaaaagaattgcactttaacattaatattgacaaggaggagggcaccacacaaaaagttaggtgtaacagaaaatcatgaaactatgattcctaatttatatattggaggattttctctaaaaaaaaaaaaatacaacaaataaaaaacactcaatgacctgaccatttgatggagtttaagtcaataccttcttgaaccatttcccataatggtgaaagttccctcaagaattttactctgtcagaaacggccttaacgacgtagtcgacctcctcttcagtactaaatctaccaataccaaatctgatggaagaatgggctaatgcatcatccttacccagcgcatgtaaaacataagaaggttctagggaagcagatgtacaggctgaacccgaggataatgcgatatcccttagtgccatcaataaagattctccttccacgtaggcgaaagaaacgttaacacaccctggataacgatgatctggagatccgttcaacgtggtatgttcagcggataatagacctttgactaatttatcggatagtcttttgatgtgagcttggtcgttgtc(seqidno：1)。

再構建δura3：pgal1-pacrtb(pantoeaagglomerans)；pgal10-mccrti(mucorcircinelloides)敲除盒，即敲除盒片段2，敲除盒片段2具有如seqidno：2所示的核苷酸序列。設計上、下遊引物pcr擴增各片段，使其相互之間有60-80bp的重疊片段，再通過同源重組的方式將所有片段重組在一起，通過酶切線性化得到δura3：：pgal1-pacrtb(pantoeaagglomerans)；pgal10-mccrti(mucorcircinelloides)敲除盒，敲除盒片段2如圖2所示。利用酵母自身的同源重組機制將該片段通過醋酸鋰法酵母轉化分別整合到酵母j1011-2基因組上，整合位點為ura3，轉化後採用sd-his固體板(合成酵母氮源ynb6.7g/l，葡萄糖20g/l，缺組氨酸的混合胺基酸粉末1.3g/l，2％瓊脂粉)進行篩選，得到的轉化子通過分純培養後提取酵母基因組進行pcr驗證，成功驗證的菌株命名為j1011-2。

acgcagataattccaggtattttgaagcagaacttttatttatcatcgaattgactattgcattatttctattttgcaaagaggagaaagaattaggaaagttcatacttcaaaaagttttccaactttctcacacgaaaggcctcacgaaaaggactgttcgtagaatgctaacatacaaaattttgttaatttcgttatgtgcggatcagacggagtacttgtccaaattaataaacgatgagctgttaaaaaagggggatatttttacccaaaaattttttgcaactaatcaaggtaaggaatttttgaagagactattttcattgaccgaatcagagttttatagaggatttttactaggaaatgagaatttttggaaatttttaagaaaagttacagcaatgaaagagcagagcgagagcatttttgaatatttaaatgaatcgatcaagacagacagcaatattttgacaaatgagaacttcatgtgggtcctaggactattagatgaaatttcatcaatgggtgccgttggaaatcactgggaaatagaatacaagaaattgacagaaagtggtcataaaattgataaggagaatccatacaagaaatcgatcgaattatcattgaaatccattcaactaacatcacacttgctggaagataataacgatctgcgtaaaaacgagatattcgctattattcaagctttggcacatcaatgcatcaatccgtgtaagcagataagtgaatttgcagtggtaacgctagagcagacgctcatcaataaaatcgaaattccaactaatgagatggaatcggtagaagaattaattgagggcggattactaccgttgctaaattcgagtgaaacacaggaagaccagaaaatcctcatttcatccatattaacaataatttcaaatgtttatttgcattatttgaaactagggaagacaagcaacgaaacgtttttgaaaattttgagtattttcaataaatttgtagaggactcagatattgaaaaaaagctacagcaattaatacttgataagaagagtattgagaagggcaacggttcatcatctcatggatctgcacatgaacaaacaccagagtcaaacgacgttgaaattgaggctactgcgccaattgatgacaatacagacgatgataacaaaccgaagttatctgatgtagaaaaggattaaagatgctaagagatagtgatgatatttcataaataatgtaattctatatatgttaattaccttttttgcgaggcatatttatggtgaaggataagttttgaccatcaaagaaggttaatgtggctgtggtttcagggtccataaagcttttcaattcatcattttttttttattcttttttttgatttcggtttccttgaaatttttttgattcggtaatctccgaacagaaggaagaacgaaggaaggagcacagacttagattggtatatatacgcatatgtagtgttgaagaaacatgaaattgcccagtattcttaacccaactgcacagaacaaaaacctgcaggaaacgaaggtacccaattcgccctatagtgagtcgtattacgcgcgctcactggccgtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgcagcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcccaacagttgcgcagcctgaatggcgaatggcgcgacgcgccctgtagcggcgcattaagcgcggcgggtgtggtggttacgcgcagcgtgaccgctacacttgccagcgccctagcgcccgctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagctctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaaaaacttgattagggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgccctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaacactcaaccctatctcggtctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggcctattggttaaaaaatgagctgatttaacaaaaatttaacgcgaattttaacaaaatattaacgtttacaatttcctgatgcggtattttctccttacgcatctgtgcggtatttcacaccgcatagatccgtcgagttcaagagaaaaaaaaagaaaaagcaaaaagaaaaaaggaaagcgcgcctcgttcagaatgacacgtatagaatgatgcattaccttgtcatcttcagtatcatactgttcgtatacatacttactgacattcataggtatacatatatacacatgtatatatatcgtatgctgcagctttaaataatcggtgtcactacataagaacacctttggtggagggaacatcgttggtaccattgggcgaggtggcttctcttatggcaaccgcaagagccttgaacgcactctcactacggtgatgatcattcttgcctcgcagacaatcaacgtggagggtaattctgctagcctctgcaaagctttcaagaaaatgcgggatcatctcgcaagagagatctcctactttctccctttgcaaaccaagttcgacaactgcgtacggcctgttcgaaagatctaccaccgctctggaaagtgcctcatccaaaggcgcaaatcctgatccaaacctttttactccacgcgccagtagggcctctttaaaagcttgaccgagagcaatcccgcagtcttcagtggtgtgatggtcgtctatgtgtaagtcaccaatgcactcaacgattagcgaccagccggaatgcttggccagagcatgtatcatatggtccagaaaccctatacctgtgtggacgttaatcacttgcgattgtgtggcctgttctgctactgcttctgcctctttttctgggaagatcgagtgctctatcgctaggggaccaccctttaaagagatcgcaatctgaatcttggtttcatttgtaatacgctttactagggctttctgctctgtcatctttgccttcgtttatcttgcctgctcattttttagtatattcttcgaagaaatcacattactttatataatgtataattcattatgtgataatgccaatcgctaagaaaaaaaaagagtcatccgctaggggaaaaaaaaaaatgaaaatcattaccgaggcataaaaaaatatagagtgtactagaggaggccaagagtaatagaaaaagaaaattgcgggaaaggactgtgttatgacttccctgactaatgccgtgttcaaacgatacctggcagtgactcctagcgctcaccaagctcttaaaacgggaatttatggtgcactctcagtacaatctgctctgatgccgcatagttaagccagccccgacacccgccaacacgcgctgacgcgccctgacgggcttgtctgctcccggcatccgcttacagacaagctgtgagcaaattaaagccttcgagcgtcccaaaaccttctcaagcaaggttttcagtataatgttacatgcgtacacgcgtttgtacagaaaaaaaagaaaaatttgaaatataaataacgttcttaatactaacataactataaaaaaataaatagggacctagacttcaggttgtctaactccttccttttcggttagagcggatgtggggggagggcgtgaatgtaagcgtgacataactaattacatgatatcgacaaaggaaaaggggcctgttcaaataacattagaattatgaactctaaaaacttctggcaacaaattgttaataaaagaagctggagtttgaccgtttgattgtggaaagaaatagaaaaacatgaacataacccagaatgcagctcttaaccaaaaccaaactggaaatgttgattcagcatctggttcttccaatggtgcttgagtgttttccatttcgatctttcttggctttggtgttttaccgaaagacttaacaacttgatcagaagtcaactttgaacctgccaaaacaattggaacacctgtacctggatgagttgaagcaccaacgaaaaacaaattatcgtatctacctgtagaatccttagttgatggtctgaaccacaaaacttgcaaaacatcatgagacaaacccaagattgaacctctccacaaattaaacttagattgccaaactgctggatcgttaacttgttcatgttcgatcaaatcagcgaagtttgacatgcccaatcttctttcaataactgccaaaaccatctttcttgccttatcaaccatagctggataattttctgtagatgcgtcaccagtttttgacttcatatgaccgattggaaccaaaacaataacagaatctttaccatctggtgcagcagatggatcgattcttgatggaacgttaacgtagaaagaagcttctgatggcaaaccgaaatccttaaaaatttcatcgaatgattcttggtatgcttcagccaagaaaatgttatgaacatccaattgtggaaccttagtagacattgaccagtagaaagagatagatgaagatgtcaatttcttagaagccaatgtgttttgagtccatctacatggtggtaacaaattatggtatgcgtaaaccaaatcagcattacaaacaactgcatcagcatcgatgatatgaccgttttccaatgtaacaccagtaacttgctttgttgcatcatcagtattaatctttgcaactggagcgttatatatgaattcagcatcgtacttttgctttgcgatagcttccaacttttgaacaaccatattaaaaccacctcttggataccaaataccttcagcaaattcagtgtattgcaacaaagagtaaactgctggagcatcgtatggtgacatgcccatgtacattgtttggaaagtaaaagccattctcattttcttagtcttgaagtacttagatgctctatcatagattttaccgaacaaatgcaatctaaaaatttctggtgcgtatttaattctgatcaaatcccagatagattcgaaatttttcttcaaagcgatcaatgtacctgattcgtaatggatatgagtttccttcatgaaatctaaaaatctaccgaaacccaatggaccttcaactctatccaattcagctttcattctagtcaaatctgaagacaattggatagattcaccatcatcgaaatgaaccttgtagttgttatcacatctcaacaattccaaatgatcttggattctttcatccaaatctgcgaaagcatcttcgaagtactttggcatcaaatacaaagatggaccttgatcgaatctatgaccttgatgatggatcaatgaacatctaccaccaccaaaatcattcttttcaacaactgtaactttaaaaccttctctagccaatcttgcagctgttgcagtaccaccaacaccagcaccgatgataacgatatgtttcttagacatttatattgaattttcaaaaattcttactttttttttggatggacgcaaagaagtttaataatcatattacatggcaataccaccatatacatatccatatctaatcttacttatatgttgtggaaatgtaaagagccccattatcttagcctaaaaaaaccttctctttggaactttcagtaatacgcttaactgctcattgctatattgaagtacggattagaagccgccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccggtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattctacaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaaccttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagccttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataaatgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattacttcttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaacgtcaaggagaaaaaactataatgtcacaaccaccattattggaccacgctacacaaactatggcaaacggttctaaatctttcgctactgctgctaaattattcgacccagcaacaagaagatctgtattgatgttgtacacctggtgtagacattgcgatgacgttatagatgaccaaactcacggttttgcttcagaagctgcagccgaagaagaagctacacaaagattggcaagattaagaactttgacattagctgcattcgaaggtgccgaaatgcaagatccagcttttgccgctttccaagaagttgcattaacccatggtattactcctagaatggctttggatcacttagacggttttgcaatggatgtcgcccaaacaagatacgtaaccttcgaagacactttaagatattgttaccatgtcgccggtgttgtcggtttgatgatggctagagtaatgggtgttagagatgaaagagttttagatagagcatgtgacttgggtttagccttccaattgacaaacatagctagagatataatagatgacgcagccatagacagatgctatttgccagctgaatggttacaagatgcaggtttgactcctgaaaattacgctgcaagagaaaacagagccgctttagccagagttgctgaaagattgatagatgcagccgaaccatattacatctcttcacaagctggtttgcatgatttgccacctagatgcgcatgggccattgctaccgcaagatctgtttacagagaaatcggtattaaagtcaaggctgcaggtggttccgcatgggatagaagacaacacacttctaaaggtgaaaagatcgctatgttgatggccgctcctggtcaagttattagagcaaagaccaccagagtcaccccaagaccagccggtttatggcaaagacctgtttaaattgaattgaattgaaatcgatagatcaatttttttcttttctctttccccatcctttacgctaaaataatagtttattttattttttgaatattttttatttatatacgtatatatagactattatttatcttttaatgattattaagatttttattaaaaaaaattacgctcctcttttaatgcctttatgcagttttttttcccattcgatatttctatgttcgggttcagcgtattttaagtttaataactcgaaaattctgcgttcgttgtaaatgcatgtatactaaactcacaaattagagcttcaatttaattatatcagttattacccgggaatctcggtcgtaatgatttctataatgacgaaaaaaaaaaaattggaaagaaaaagcttcatggcctttataaaaaggaactatccaatacctcgccagaaccaagtaacagtattttacggggcacaaatcaagaacaataagacaggactgtaaagatggacgcattgaactccaaagaacaacaagagttccaaaaagtagtggaacaaaagcaaatgaaggatttcatgcgtttgtactctaatctggtagaaagatgtttcacagactgtgtcaatgacttcacaacatcaaagctaaccaataaggaacaaacatgcatcatgaagtgctcagaaaagttcttgaagcatagcgaacgtgtagggcagcgtttccaagaacaaaacgctgccttgggacaaggcttgggccgataaggtgtactggcgtatatatatctaattatgtatctctggtgtagcccatttttagcatgtaaatataaagagaaaccatatctaatctaaccaaatccaaacaaaattcaatagttactatcgcttttttctttctgtatcgcaaataagtgaaaattaaaaaagaaagattaaattggaagttggatatgggctggaacagcagcagtaatcggtatcgggttcgccactaatgacgtcctacgattgcactcaacagaccttgacgctcacgccgtagcgggcgacaagtcaaacggaacaaccgttgccgttcccatcggagtccgacctaggccgaactccgtgaatttctgataacaacggtcggtaaagactggttccccagtatatttcttctctcaggagcaggggccaatgccaaaagcgacattaacccggaggacaaggctccactgtgttccaccgaatttcccacctgataatatctgataacccgcccataggtggggatccttctgtaaacaggtttcttaatcgtaggaattaccactgttccactgccaatcgcagctcccagagtttcgttcccagccgcgagcaccacagcgtaccatgtgcgccacgaggcctcaaacgtaaaacaatcgaaacgaaaagaaacagactataggggagtatagagacagccggccaataagaagaggaaaaagaaatactagcgtttatcaatgtgggtcgttaacatatcctgttgacaatgattacaggttaaaaggtagcgtaagtgaatattaactatggatattcttatacttagataagagacatataaaacacacgatgattgattgatttttatgaccaatatatgtaattcgtaattcagatagtttttatacttttaatgtgtgccgaaccatattactagtatatgtaactaccatgttatgttcaattggcagatctttaactcggctttagttatccaagttacttgcaatatttccttctgcgagagtacatttgcccttaaacg(seqidno：2)。

再構建δgal1，δgal7，δgal10:pgal10-thmg1敲除盒，即敲除盒片段3，敲除盒片段3具有如seqidno：3所示的核苷酸序列。設計上、下遊引物pcr擴增各片段，使其相互之間有60-80bp的重疊片段，再通過同源重組的方式將所有片段重組在一起，通過酶切線性化得到δgal1，δgal7，δgal10::pgal10-thmg1敲除片段，敲除盒片段3的結構如圖3所示。利用酵母自身的同源重組機制將該片段通過醋酸鋰法酵母轉化分別整合到酵母j1011-2基因組上，整合位點為gal1，gal7和gal10，轉化後採用sd-trp固體板(合成酵母氮源ynb6.7g/l，葡萄糖20g/l，缺色氨酸的混合胺基酸粉末1.3g/l，2％瓊脂粉)進行篩選，得到的轉化子通過分純培養後提取酵母基因組進行pcr驗證，成功驗證的菌株命名為j1011-3.

ttcaccgattctgagcgaatcacaggtgagaaatttggattcgaaataaacctaaaaaaactatccaataaggcttccataggcttcgtatttcccgaccattccaattggaaaaattgagcgctgtcttccatgatcttagataaagccttaatacttggctcatttccatttgaggttagctctagcaactggtaaagcatttgaagaccagttggatcatctctatgctgcctatagtaagtggaaaataaagtagtaataacgatacctgtcacgttcgaaacgagattattgttcgaattataaaggccatgtataatgtttgatttgacgtatcctaagtcgtggctattgctcttaattaaattgtttccccctagcattgaatttttcaacagcataccggcggtagctctattgttctgaagatcctgtagggagtagtgttgcttcaatacatcatcagattcgccttcaattaaaatataacacaaataattgagaaattcaggttgcagctggaagttctccatagcttccattgcgttattacgaatctctggatttggtgacatacagttctgtaaaagagttgctagttgcaacacatagtcttcggcgggcttccatgtcgatgccatctttattcacttaactactgctaacaattctggaaaccaaagactgcggaatattctgatatgtattactactattcgctgctcttctgcataattaatactgaaaagtttttcatacttttaaacataacctttttttaagcaaaactctatgacccggattagaaaactacgaaaagagggtaataacataggtgcaggatttccatcgataacgacgccgacaatgagccttgctgcaacatccaattaggactaataactatcgtaggaatttctacgtaataaacttcaacagagcctaaaatttgaaaataaataatctagaggggaaacttaaagaaattctattcttgtcaataaagtggaaatctgtcagatgtcacagtttctttatttgtgacacatattttcaacataaattcaggcattagtgctgtaagcacaaaaagttgtggcgatatgaatattccagattttacttacaagctgcattgtagtcttacaattctttttttctttttttttttttatggaaaggaccactcttacataactagaatagcattaagaatcagatttacagataaagatgacattattttatatatatattgtcactccgttcaagtcgacaaccaataaaaaatttaaaaaaagccaggcagttaatagaaaaaatatgatatgaatgaatattccactttcttttcacagcttgtctgtaagcggatgccgggagcagacaagcccgtcagggcgcgtcagcgggtgttggcgggtgtcggggctggcttaactatgcggcatcagagcagattgtactgagagtgcaccataaacgacattactatatatataatataggaagcatttaatagacagcatcgtaatatatgtgtactttgcagttatgacgccagatggcagtagtggaagatattctttattgaaaaatagcttgtcaccttacgtacaatcttgatccggagcttttctttttttgccgattaagaattaattcggtcgaaaaaagaaaaggagagggccaagagggagggcattggtgactattgagcacgtgagtatacgtgattaagcacacaaaggcagcttggagtatgtctgttattaatttcacaggtagttctggtccattggtgaaagtttgcggcttgcagagcacagaggccgcagaatgtgctctagattccgatgctgacttgctgggtattatatgtgtgcccaatagaaagagaacaattgacccggttattgcaaggaaaatttcaagtcttgtaaaagcatataaaaatagttcaggcactccgaaatacttggttggcgtgtttcgtaatcaacctaaggaggatgttttggctctggtcaatgattacggcattgatatcgtccaactgcatggagatgagtcgtggcaagaataccaagagttcctcggtttgccagttattaaaagactcgtatttccaaaagactgcaacatactactcagtgcagcttcacagaaacctcattcgtttattcccttgtttgattcagaagcaggtgggacaggtgaacttttggattggaactcgatttctgactgggttggaaggcaagagagccccgaaagcttacattttatgttagctggtggactgacgccagaaaatgttggtgatgcgcttagattaaatggcgttattggtgttgatgtaagcggaggtgtggagacaaatggtgtaaaagactctaacaaaatagcaaatttcgtcaaaaatgctaagaaataggttattactgagtagtatttatttaagtattgtttgtgcacttgcctatgcggtgtgaaataccgcacagatgcgtaaggagaaaataccgcatcaggaaattgtaaacgttaatattttgttaaaattcgcgttaaatttttgttaaatcagctcattttttaaccaataggccgaaatcggcaaaatcccttataaatcaaaagaatagaccgagatagggttgagtgttgttccagtttggaacaagagtccactattaaagaacgtggactccaacgtcaaagggcgaaaaaccgtctatcagggcgatggcccactacgtgaaccatcaccctaatcaagttttttggggtcgaggtgccgtaaagcactaaatcggaaccctaaagggagcccccgatttagagcttgacggggaaagccggcgaacgtggcgagaaaggaagggaagaaagcgaaaggagcgggcgctagggcgctggcaagtgtagcggtcacgctgcgcgtaaccaccacacccgccgcgcttaatgcgccgctacagggcgcgtcgcgccattcgccattcaggctgcgcaactgttgggaagggcgatcggtgcgggcctcttcgctattacgccagctggcgaaagggggatgtgctgcaaggcgattaagttgggtaacgccagggttttcccagtcacgacgttgtaaaacgacggccagtgagcgcgcgtaatacgactcactatagggcgaattgggtactacacggtccaatggataaacattttttatcaacactatgatatataaatataatagtttttcgtatatatattcctttttttggtcaatttttgaaattttcgtagaaaagggagagacaaaacacattatatcaatgaaaacgtacaaaaagtagataaagtcagtgcttaaacacgtcttttccttaaaaatactttattatttttattttattgagagggtggtttaaaaatagaaatagagagagaggtacatacataaacatacgcgcacaaaagcagagattaggatttaatgcaggtgacggacccatctttcaaacgatttatatcagtggcgtccaaattgttaggttttgttggttcagcaggtttcctgttgtgggtcatatgactttgaaccaaatggccggctgctagggcagcacataaggataattcacctgccaagacggcacaggcaactattcttgctaattgacgtgcgttggtaccaggagcggtagcatgcgggcctcttacacctaataagtccaacatggcaccttgtggttctagaacagtaccaccaccgatggtacctacttcgatggatggcatggatacggaaattctcaaatcaccgtccacttctttcatcaatgttatacagttggaactttcaacattttgtgcaggatcttgtcctaatgccaagaaaacagctgtcactaaattagctgcatgtgcgttaaatccaccaacagacccagccattgcagatccaaccaaattcttagcaatgttcaactcaaccaatgcggaaacatcactttttaacacttttctgacaacatcaccaggaatagtagcttctgcgacgacactcttaccacgaccttcgatccagttgatggcagctggttttttgtcggtacagtagttaccagaaacggagacaacctccatatcttcccagccatactcttctaccatttgctttaatgagtattcgacacctttagaaatcatattcatacccattgcgtcaccagtagttgttctaaatctcatgaagagtaaatctcctgctagacaagtttgaatatgttgcagacgtgcaaatcttgatgtagagttaaaagcttttttaattgcgttttgtccctcttctgagtctaaccatatcttacaggcaccagatcttttcaaagttgggaaacggactactgggcctcttgtcataccatccttagttaaaacagttgttgcaccaccgccagcattgattgccttacagccacgcatggcagaagctaccaaacaaccctctgtagttgccattggtatatgataagatgtaccatcgataaccaaggggcctataacaccaacgggcaaaggcatgtaacctataacattttcacaacaagcgccaaatacgcggtcgtagtcataatttttatatggtaaacgatcagatgctaatacaggagcttctgccaaaattgaaagagccttcctacgtaccgcaaccgctctcgtagtatcacctaattttttctccaaagcgtacaaaggtaacttaccgtgaataaccaaggcagcgacctctttgttcttcaattgttttgtatttccactacttaataatgcttctaattcttctaaaggacgtattttcttatccaagctttcaatatcgcgggaatcatcttcctcactagatgatgaaggtcctgatgagctcgattgcgcagatgataaacttttgactttcgatccagaaatgactgttttattggttaaaaccatttatattgaattttcaaaaattcttactttttttttggatggacgcaaagaagtttaataatcatattacatggcaataccaccatatacatatccatatctaatcttacttatatgttgtggaaatgtaaagagccccattatcttagcctaaaaaaaccttctctttggaactttcagtaatacgcttaactgctcattgctatattgaagtacggattagaagccgccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccggtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattctacaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaaccttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagccttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataaatgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattacttcttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaacgtcaaggagaaaaaactatagcgcaatgattgaatagtcaaagattttttttttttaattttttttttttcatagaactttttatttaaataaatcacgtctatatatgtatcagtataacgtaaaaaaaaaaacaccgtcagttaaacaaaacataaataaaaaaaaaaagaagtgtcaaatcaagtgtcaaatgtatacttcttttttttactttgttcagaacaacttctcatttttttctactcataactttagcatcacaaagtacacaataataacgagtagtaacacttttatagttcatacatgcttcaactacttaataaatgattgtatgataatgttttcaatgtaagagatttcgattatccacaaactttgaaacacagggacacaattcttgatatgctttcaaccgctgcgttttggatacctattcttgacataatatgactaccattttgttattgtacgtggggcagttgacgtcttatcatatgtcaaagtcatttgcgaagttcttggcaagttgccaactgacgagatgcagtaaaaagagattgccgtcttgaaactttttgtccttttttttttccggggactctacgagaaccctttgtcctactgattaattttgtactgaatttggacaattcagattttagtagacaagcgcgaggaggaaaagaaatgacagaaaaattccgatggacaagaagataggaaaaaaaaaaagctttcaccgatttcctagaccggaaaaaagtcgtatgacatcagaatgaaaaattttcaagttagacaaggacaaaatcaggacaaattgtaaagatatgataaatcatttgattcagcgccaatttgcccttttccattttccattaaatctctgttctctcttacttatatgatgattaggtatcatctgtataaaactcctttcttaatttcactctaaagcataccccatagagaagatctttcggttcgaagacattcctacgcataataagaataggagggaataatgccagacaatctatcattacatttaagcggctcttcaaaaagattgaactctcgccaacttatggaatcttccaatgagacctttgcgccaaataatgtggatttggaaaaagagtataagtcatctcagagtaatataactaccgaagtttatgaggcatcgagctttgaagaaaaagtaagctcagaaaaacctcaatacagctcattctggaagaaaatctattatgaatatgtggtcgttgacaaatcaatcttgggtgtttctattctggattcatttatgtacaaccaggacttgaagcccgtcgaaaaagaaaggcgggtttggtcctggtacaattattgttacttctggcttgctgaatgtttcaatatcaacacttggcaaattgcagctacaggtctacaactgggtctaaattggtggcagtgttggataacaatttggattgggtacggtttcgttggtgcttttgttgttttggcctctagagttggatctgcttatcatttgtcattccctatatcatctagagcatcattcggtattttcttctctttatggcctgttattaatagagtcgtcatggccatcgtttggtatagtgtccaagcttatattgcggcaactcccgtatcattaa(seqidno：3)。

更進一步，發明人通過實驗驗證，j1011-3具有高產番茄紅素的性能，同時過表達btcarg，pacrtb，mccrti基因所獲得的酵母菌株，其番茄紅素的產量優於其它基因組合。

在以下實驗中，發明人進一步對j1011-3菌株進行改造，具體如下所述：

實施例2啟動子和終止子的選擇

為了能用半乳糖進行誘導，需要敲除代謝半乳糖的基因gal1,gal7,gal10。因此特徵啟動子的背景菌株為敲除基因gal1,7,10。半乳糖價格較高，並不適用於工業化生產，因此在敲除基因gal1,7,10的基礎上敲除gal80，以期通過對葡萄糖量的控制達到對基因表達的調控。所得到的啟動子信息用於構建控制類胡蘿蔔素合成相關基因的表達。

如圖4所示，在δgal1/7/10/80菌株和δgal1/7/10菌株中不論是誘導型啟動子或是組成型啟動子在穩定期強度基本一致。可見，敲除gal80可以起到不加半乳糖即可誘導基因表達，誘導強度跟與半乳糖誘導強度相當。

酵母屬於真核生物，在其體內過表達基因需要選擇合適的啟動子和終止子，經過反覆多次實驗，發明人選擇了pgal1，pgal7，pgal10，pgal1-10，pgal10-1和phxt1作為表達基因的啟動子。其中，pgal1具有如seqidno：4所示的核苷酸序列，pgal7具有如seqidno：5所示的核苷酸序列，pgal10具有如seqidno：6所示的核苷酸序列，pgal1-10具有如seqidno：7所示的核苷酸序列，pgal10-1具有如seqidno：8所示的核苷酸序列，phxt1具有如seqidno：9所示的核苷酸序列。

agtacggattagaagccgccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccggtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattctacaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaaccttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagccttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataaatgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattacttcttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaacgtcaaggagaaaaaactata(seqidno：4)。

gacggtagcaacaagaatatagcacgagccgcgaagttcatttcgttacttttgatatcgctcacaactattgcgaagcgcttcagtgaaaaaatcataaggaaaagttgtaaatattattggtagtattcgtttggtaaagtagagggggtaatttttcccctttattttgttcatacattcttaaattgctttgcctctccttttggaaagctatacttcggagcactgttgagcgaaggctcattagatatattttctgtcattttccttaacccaaaaataagggaaagggtccaaaaagcgctcggacaactgttgaccgtgatccgaaggactggctatacagtgttcacaaaatagccaagctgaaaataatgtgtagctatgttcagttagtttggctagcaaagatataaaagcaggtcggaaatatttatgggcattattatgcagagcatcaacatgataaaaaaaaacagttgaatattccctcaaaa(seqidno：5)。

tacttcaatatagcaatgagcagttaagcgtattactgaaagttccaaagagaaggtttttttaggctaagataatggggctctttacatttccacaacatataagtaagattagatatggatatgtatatggtggtattgccatgtaatatgattattaaacttctttgcgtccatccaaaaaaaaagtaagaatttttgaaaattcaatataa(seqidno：6)。

tatagttttttctccttgacgttaaagtatagaggtatattaacaattttttgttgatacttttatgacatttgaataagaagtaatacaaaccgaaaatgttgaaagtattagttaaagtggttatgcagcttttgcatttatatatctgttaatagatcaaaaatcatcgcttcgctgattaattaccccagaaataaggctaaaaaactaatcgcattattatcctatggttgttaatttgattcgttgatttgaaggtttgtggggccaggttactgccaatttttcctcttcataaccataaaagctagtattgtagaatctttattgttcggagcagtgcggcgcgaggcacatctgcgtttcaggaacgcgaccggtgaagaccaggacgcacggaggagagtcttccgtcggagggctgtcgcccgctcggcggcttctaatccgtacttcaatatagcaatgagcagttaagcgtattactgaaagttccaaagagaaggtttttttaggctaagataatggggctctttacatttccacaacatataagtaagattagatatggatatgtatatggtggtattgccatgtaatatgattattaaacttctttgcgtccatccaaaaaaaaagtaagaatttttgaaaattcaatataa(seqidno：7)。

ttatattgaattttcaaaaattcttactttttttttggatggacgcaaagaagtttaataatcatattacatggcaataccaccatatacatatccatatctaatcttacttatatgttgtggaaatgtaaagagccccattatcttagcctaaaaaaaccttctctttggaactttcagtaatacgcttaactgctcattgctatattgaagtacggattagaagccgccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccggtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattctacaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaaccttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagccttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataaatgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattacttcttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaacgtcaaggagaaaaaactata(seqidno：8)。

gattttacgtatatcaactagttgacgattatgatatctttatagattttaaggtggggaaagaacatgagaccccagatggaattgattatggggacattgttgcctttatatataatttcaatatactaattcaaatgattaaaaacgtgagggggacacgcaacttcgggtgttaagaaatattttgctacattagataatggtggagtttcctggcttgtcggataaaagccatcaaatgtcgcagcagctcatgtttacgtttgctgtcttctgcccacgtcatatgagtggtattcttctatcagcacttgatgaatattctttttctcatatatctgaaagacaaaagatcggcacggcaatgccctgcagcatttcttcctagtttttccgaatttccattacgtattggatcttgtgcgcatatttgtcagtccttcacggaaaaaaaaaaagagcactgggtcacttcggaaaaacttttgactcaatgcaacagtgtcataatcctttgcgctgtctctttgaagaaaaatcaggagtgcaagatatcgattaattccttggaagttatgatggttagtcttagtttaactctcttgaagaagggttttttcagttggtcaacactctttagaggtaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaagagaattcttcatgtaatttaccatgattctacgtttttgcaagcaaaaatgaagataatccgagcgcatgcgcaagtagtccctgccatgccgcttcggaaaaactttcgaaaccaatactccttacatccgccttgaatttaggacctacaattgttgtctcttctgcttgaaccaataagccctagaaaccttacaccctaatttgcacaagaaaactacgaaaaaattttttcctcttttttccgcagctccaatctcgccctgctatttttttggttcggagaaaaatagtcggtcgatatgaattgaagtttcattgtggccactcgtttaggaatggaataacctccgcgaatggaaaaaaagaactcggaatatcaaaaattccggctcaaaggaaaaatttgcttcaggaggggggaattatattccagatgagacctgca(seqidno：9)。

選擇任意的終止子(比如tadh2，tgal10，tcyc1，tgpm1和tpgk1等)作為表達基因的終止子，這些元件的組合搭配能夠實現多個基因的過表達。

實施例3第二代工程菌株的構建

在本實施例中，發明人以j1011-3菌株為基礎，在j1011-3菌株上調整btcarg(blakesleatrispora)，pacrtb(pantoeaagglomerans)和mccrti(mucorcircinelloides)這三個基因的拷貝數，獲得第二代菌株。

其中第二代工程菌株的具體特性如表1所示。按照設計選擇合適的啟動子和終止子，用上、下遊引物pcr擴增各片段，使其相互之間有60-80bp的重疊片段，再通過同源重組的方式將所有片段重組在一起，通過酶切線性化得到各相應片段，利用酵母自身的同源重組機制將該片段通過醋酸鋰法酵母轉化分別整合到酵母j1011-3基因組上，轉化後採用篩選抗性固體板進行篩選，得到的轉化子通過分純培養後提取酵母基因組進行pcr驗證，成功驗證的菌株詳見表1。

表1：第二代工程菌株

其中，mccrti具有如seqidno：10所示的核苷酸序列，pacrtb具有如seqidno：11所示的核苷酸序列，btcarg具有如seqidno：12所示的核苷酸序列。

atgtctaagaaacatatcgttatcatcggtgctggtgttggtggtactgcaacagctgcaagattggctagagaaggttttaaagttacagttgttgaaaagaatgattttggtggtggtagatgttcattgatccatcatcaaggtcatagattcgatcaaggtccatctttgtatttgatgccaaagtacttcgaagatgctttcgcagatttggatgaaagaatccaagatcatttggaattgttgagatgtgataacaactacaaggttcatttcgatgatggtgaatctatccaattgtcttcagatttgactagaatgaaagctgaattggatagagttgaaggtccattgggtttcggtagatttttagatttcatgaaggaaactcatatccattacgaatcaggtacattgatcgctttgaagaaaaatttcgaatctatctgggatttgatcagaattaaatacgcaccagaaatttttagattgcatttgttcggtaaaatctatgatagagcatctaagtacttcaagactaagaaaatgagaatggcttttactttccaaacaatgtacatgggcatgtcaccatacgatgctccagcagtttactctttgttgcaatacactgaatttgctgaaggtatttggtatccaagaggtggttttaatatggttgttcaaaagttggaagctatcgcaaagcaaaagtacgatgctgaattcatatataacgctccagttgcaaagattaatactgatgatgcaacaaagcaagttactggtgttacattggaaaacggtcatatcatcgatgctgatgcagttgtttgtaatgctgatttggtttacgcataccataatttgttaccaccatgtagatggactcaaaacacattggcttctaagaaattgacatcttcatctatctctttctactggtcaatgtctactaaggttccacaattggatgttcataacattttcttggctgaagcataccaagaatcattcgatgaaatttttaaggatttcggtttgccatcagaagcttctttctacgttaacgttccatcaagaatcgatccatctgctgcaccagatggtaaagattctgttattgttttggttccaatcggtcatatgaagtcaaaaactggtgacgcatctacagaaaattatccagctatggttgataaggcaagaaagatggttttggcagttattgaaagaagattgggcatgtcaaacttcgctgatttgatcgaacatgaacaagttaacgatccagcagtttggcaatctaagtttaatttgtggagaggttcaatcttgggtttgtctcatgatgttttgcaagttttgtggttcagaccatcaactaaggattctacaggtagatacgataatttgtttttcgttggtgcttcaactcatccaggtacaggtgttccaattgttttggcaggttcaaagttgacttctgatcaagttgttaagtctttcggtaaaacaccaaagccaagaaagatcgaaatggaaaacactcaagcaccattggaagaaccagatgctgaatcaacatttccagtttggttttggttaagagctgcattctgggttatgttcatgtttttctatttctttccacaatcaaacggtcaaactccagcttcttttattaacaatttgttgccagaagtttttagagttcataattctaatgttatttga(seqidno：10)。

atgtcacaaccaccattattggaccacgctacacaaactatggcaaacggttctaaatctttcgctactgctgctaaattattcgacccagcaacaagaagatctgtattgatgttgtacacctggtgtagacattgcgatgacgttatagatgaccaaactcacggttttgcttcagaagctgcagccgaagaagaagctacacaaagattggcaagattaagaactttgacattagctgcattcgaaggtgccgaaatgcaagatccagcttttgccgctttccaagaagttgcattaacccatggtattactcctagaatggctttggatcacttagacggttttgcaatggatgtcgcccaaacaagatacgtaaccttcgaagacactttaagatattgttaccatgtcgccggtgttgtcggtttgatgatggctagagtaatgggtgttagagatgaaagagttttagatagagcatgtgacttgggtttagccttccaattgacaaacatagctagagatataatagatgacgcagccatagacagatgctatttgccagctgaatggttacaagatgcaggtttgactcctgaaaattacgctgcaagagaaaacagagccgctttagccagagttgctgaaagattgatagatgcagccgaaccatattacatctcttcacaagctggtttgcatgatttgccacctagatgcgcatgggccattgctaccgcaagatctgtttacagagaaatcggtattaaagtcaaggctgcaggtggttccgcatgggatagaagacaacacacttctaaaggtgaaaagatcgctatgttgatggccgctcctggtcaagttattagagcaaagaccaccagagtcaccccaagaccagccggtttatggcaaagacctgtttaa(seqidno：11)。

atgttgacatcttcaaaatctattgagtcttttccaaaaaatgttcaaccatatggtaagcactaccagaatggtttggagccagtcggtaagtctcaagaagacattttattggaaccattccattacttatgttcaaacccaggtaaagatgtcagaactaaaatgattgaagctttcaacgcttggttgaaggtccctaaggacgatttaattgttattactagagttattgaaatgttacattctgcttctttgttaattgacgatgttgaagatgattctgttttgagaaggggtgtcccagctgcacatcacatttatggtacaccacaaactattaattgtgcaaactacgtttactttttggctttgaaagaaattgctaagttaaataaaccaaatatgattactatttacactgatgaattgataaatttgcatagaggtcaaggtatggaattgttctggagggatacattgacatgtccaacagaaaaagaatttttggatatggttaatgataagactggaggtttgttgagattagctgttaaattaatgcaagaagcatctcaatcaggtactgattatactggtttagtttcaaaaattggtatacactttcaagttagagatgattatatgaatttgcagtctaaaaattatgctgataataaaggtttttgtgaggatttaacagaaggtaaattctctttcccaattatacattctattagatctgatccatctaatagacaattgttgaacattttgaaacaaagatcttcttctattgaattgaaacaatttgctttgcaattattggaaaatactaatactttccaatattgtagagattttttgagagttttggaaaaagaagctagagaagaaattaaattgttgggtggtaacattatgttggaaaagattatggatgttttgtctgttaatgaataa(seqidno：12)。

更進一步，發明人通過實驗驗證，結果如圖5所示，在搖瓶條件下，j1011-5，6，7和j1011-33～36具有比j1011-3更高產番茄紅素的性能。

實施例4沉默基因的工程菌株的構建

在本實施例中，發明人詳細介紹了在上述工程菌的基礎上敲除另外一些基因獲得沉默基因工程菌株的實驗過程。

在釀酒酵母中，有很多潛在的基因在敲除後對細胞積累番茄紅素化合物有明顯的影響，因此構建一系列背景菌株用於增加番茄紅素產量。構建方法為在需要滅活的基因中以潮黴素抗性基因為標記構建相應的敲除盒片段，敲除盒片段見圖4。將該片段通過醋酸鋰法酵母轉化分別整合到上述工程菌中，最後用含有潮黴素抗性的平板進行篩選得到疑似帶有抗性的菌株，用pcr進行驗證，得到的第四代工程菌株見表2。其中，敲除盒片段中的滅活基因序列可從ncbi上下載，從而可以設計得到圖6的敲除框。

表2：沉默工程菌株特性

更進一步，發明人通過實驗驗證，j1011-9,10,11,13,15,19都具有比j1011-3更高產番茄紅素的性能。

實施例5過表達基因的工程菌株的構建

在本實施例中，發明人詳細介紹了在上述工程菌株上過表達相關的實驗過程。

選擇合適的啟動子和終止子構建表3中相關基因的表達框，在實施例4的基礎上選擇合適的基因作為插入位點，通過設計上、下遊引物pcr擴增各片段，使其相互之間有60-80bp的重疊片段，再通過同源重組的方式將所有片段重組在一起，通過酶切線性化得到即可實現沉默基因又能過表達基因的基因片段。利用酵母自身的同源重組機制將該片段通過醋酸鋰法酵母轉化分別整合到上述工程菌株基因組上，轉化後採用篩選平板進行篩選，得到的轉化子通過分純培養後提取酵母基因組進行pcr驗證，成功驗證的菌株詳見表3。

更進一步，發明人通過實驗驗證，j1011-4和j1011-20～32都具有高產番茄紅素的性能。

表3：過表達基因的工程菌株

其中，ino2基因具有如seqidno：13所示的核苷酸序列，gapn基因具有如seqidno：14所示的核苷酸序列，pyc2基因具有如seqidno：15所示的核苷酸序列，smae1基因具有如seqidno：16所示的核苷酸序列，mdh2基因具有如seqidno：17所示的核苷酸序列，pos5基因具有如seqidno：18所示的核苷酸序列，pnta基因具有如seqidno：19所示的核苷酸序列，pntb基因具有如seqidno：20所示的核苷酸序列，adh2基因具有如seqidno：21所示的核苷酸序列，acs6基因具有如seqidno：22所示的核苷酸序列，ald6基因具有如seqidno：23所示的核苷酸序列，eute基因具有如seqidno：24所示的核苷酸序列，erg12基因具有如seqidno：25所示的核苷酸序列，idi1基因具有如seqidno：26所示的核苷酸序列，erg10基因具有如seqidno：27所示的核苷酸序列，mvd1基因具有如seqidno：28所示的核苷酸序列，erg13基因具有如seqidno：29所示的核苷酸序列，thmg1基因具有如seqidno：30所示的核苷酸序列，erg8基因具有如seqidno：31所示的核苷酸序列，yap1基因具有如seqidno：32所示的核苷酸序列。spt15-5基因具有如seqidno：51所示的核苷酸序列。taf25-3基因具有如seqidno：52所示的核苷酸序列。

atgtcccaagcaactgggaacgaattactgggtatcctagatctggataacgatatagactttgaaactgcttaccaaatgctcagcagtaacttcgacgaccaaatgtctgcgcacatacatgaaaacacgtttagtgcaacttcccctcctctgttaacacacgagctcggcataattcctaacgtggcaaccgtgcaaccctctcacgtagaaactatacctgccgataaccaaactcatcatgctcctttgcatactcatgctcactatctaaatcacaaccctcatcaaccaagcatgggttttgatcaaacgcttggtctcaagttgtctccttccagttcggggttgttgagcacgaatgaatcgaatgccattgaacagtttttagacaatctaatatcacaggatatgatgtcttccaacgcttccatgaactccgattcacatctacatataagatcaccaaaaaagcagcataggtataccgaattaaatcaaagatatcctgaaacacatccacacagtaacacaggggagttacccacaaacacagcagatgtgccaactgagttcaccacgagggaaggacctcatcagcctatcggcaatgaccactacaacccgccaccgttttcagtacctgagatacgaatcccagactctgatattccagccaatatcgaggacgaccctgtgaaggtacggaaatggaaacacgttcaaatggagaagatacgaagaataaacaccaaagaagcctttgaaaggctcattaaatcagtaaggaccccaccaaaggaaaacgggaaaagaattcccaagcatattcttttaacttgtgtaatgaacgatatcaagtccattagaagcgcaaatgaagcactacagcacatactggatgattcctga(seqidno：13)。

atgactaagcaatacaagaactacgttaacggtgaatggaagttgtctgaaaacgaaattaaaatctatgaacctgcttcaggtgcagaattaggttccgttccagctatgagtacagaagaagtagattacgtttacgcttctgctaagaaagcccaacctgcttggagagcattgtcatatatcgaaagagctgcatacttacataaggttgctgatatattgatgagagacaaggaaaagattggtgcaatcttatctaaagaagtagccaagggttataaatccgctgttagtgaagttgtcagaaccgctgaaattataaactacgccgctgaagaaggtttaagaatggaaggtgaagttttggaaggtggttctttcgaagcagcctctaaaaagaaaattgcagtagttagaagagaacctgtcggtttagtattggccatttcccctttcaattatccagtaaacttagctggtagtaagatcgccccagctttgattgctggtaatgttatagcctttaaaccacctacacaaggttctatttcaggtttgttattggcagaagccttcgctgaagcaggtttgcctgctggtgtttttaacacaattaccggtagaggttccgaaatcggtgactacattgtcgaacaccaagctgtaaacttcatcaacttcactggttctacaggtataggtgaaagaatcggtaaaatggctggtatgagaccaattatgttagaattgggtggtaaagattctgcaatagttttagaagatgccgacttagaattgaccgctaagaatatcattgccggtgcttttggttattccggtcaaagatgtactgcagtcaaaagagttttagtcatggaaagtgttgccgatgaattggtcgaaaagataagagaaaaggttttggcattgactatcggtaatcctgaagatgacgccgacatcactccattgatcgatacaaagtcagctgactacgttgaaggtttgattaatgatgcaaacgacaagggtgcaaccgccttgactgaaattaaaagagagggtaacttaatctgcccaatcttgttcgataaggttactacagacatgagattagcttgggaagaaccatttggtcctgtcttgccaataatcagagttacatctgtcgaagaagctatcgaaatatctaataagtcagaatatggtttgcaagcatcaatctttacaaacgatttccctagagcctttggtattgctgaacaattggaagtaggtaccgttcatatcaacaacaagacacaaagaggtaccgataattttccattcttgggtgctaagaaatctggtgcaggtatccaaggtgtcaaatactccattgaagctatgaccactgtaaagagtgtcgtatttgatattaaataa(seqidno：14)。

atgtatccaagggtctatgaagatttccaaaagatcagagaaacatacggtgatttatcagttctaccaaccaaaaatttcctagcaccagcagaacctgatgaagaaatcgaagtcaccatcgaacaaggtaagactttgattatcaaattgcaagctgttggtgacttaaataagaaaactgggcaaagagaagtgtattttgaattgaacggtgaattaagaaagatcagagttgcagacaagtcacaaaacatacaatctgttgctaaaccaaaggctgatgtccacgatactcaccaaatcggtgcaccaatggctggtgttatcatagaagttaaagtacataaagggtctttggtgaaaaagggcgaatcgattgctgttttgagtgccatgaaaatggaaatggttgtctcttcaccagcagatggtcaagttaaagatgttttcattagggatggtgaaagtgttgacgcatcagatttgttggttgtcctagaagaagaaaccctacccccatcccaaaaaaagtaa(seqidno：15)。

atgtggcctattcagcaatcgcgtttatattcttctaacactagatcgcataaagctaccacaacaagagaaaatactttccaaaagccatacagcgacgaggaggtcactaaaacacccgtcggttctcgcgccagaaagatcttcgaagctcctcacccacatgccactcgtttgactgtagaaggtgccatagaatgtcccttggagagctttcaacttttaaactctcctttatttaacaagggttctgcatttacacaagaagaaagggaagcgtttaatttagaagcattgctaccaccacaagtgaacactttggacgaacaactggaaagaagctacaagcagttatgctatttgaagacgcccttggccaaaaacgacttcatgacgtctttgagagtacagaacaaagtcctatattttgcattaataaggaaacatatcaaggaattagttcctatcatttacaccccaaccgaaggtgatgctattgctgcctattcccacaggttcagaaagccagaaggtgtgtttttagacattaccgaacctgattccatcgaacgtagattggctacatacggtggagacaaagatgtagactacatcgttgtgtcggattcggaaggtattctgggaattggtgaccaaggtatcggtggtgtacgtattgctatctccaaattggcattgatgacgctgtgcggtggtattcatcccggccgtgtgctacctgtgtgtttggacgtcggtactaacaacaagaaactagcccgtgacgaattgtacatgggtaacaagttctccagaatcaggggtaagcaatatgacgacttcttggaaaaattcatcaaggccgttaagaaagtgtatccaagcgccgttctgcatttcgaagatttcggtgttaagaacgctagaagattgctagaaaagtacaggtacgaattgccatcattcaacgatgacattcagggcaccggtgccgtcgtgatggcctcgttgattgctgctttgaaacataccaacagagacttgaaagacaccagagtgcttatttacggtgccgggtctgcgggcctcggtatcgcagaccaaattgtgaatcatatggtcacgcacggcgttgacaaggaagaagcgcgcaagaaaatcttcttgatggacagacgtgggttaattctacaatcttacgaggctaactccactcccgcccaacacgtatacgctaagagtgatgcggaatgggctggtatcaacacccgctctttacatgatgtggtggagaacgtcaaaccaacgtgtttggttggctgctccacacaagcaggcgcattcactcaagatgtcgtagaagaaatgcacaagcacaatcctagaccgatcattttcccattatccaaccctactagactacacgaagccgttcctgccgatttaatgaagtggaccaacaacaacgctcttgtagctaccggatctcctttcccacctgttgacggttaccgtatctcggagaacaacaattgttactctttcccaggtatcggtttaggtgccgtactatcgcgtgccaccactatcacagacaagatgatctccgctgcagtggaccaactagccgaattgtcgccactaagagagggcgactcgagacctgggttgctacccggcctggacaccatcaccaacacctctgcgcgtctagctaccgctgtgatcttgcaagcactcgaggagggaaccgcccgtatcgagcaagaacaagtaccgggaggagctcccggcgaaactgtcaaggttcctcgtgactttgacgaatgtttacagtgggtcaaagcccaaatgtgggagcctgtgtacagacctatgatcaaggtccaacatgacccatcggtgcacaccaaccaattgtag(seqidno：16)。

atgcctcactcagttacaccatccatagaacaagattcgttaaaaattgccattttaggtgctgccggtggtatcgggcagtcgttatcgctgcttttgaaagctcagttgcaataccagttaaaggagagcaaccggagcgttacccacattcatctggctctttacgatgtcaaccaagaagccatcaacggtgttaccgccgacttgtctcatatagacacccccatttccgtgtcgagccactctcctgcaggtggcattgagaactgtttgcataacgcttctattgttgtcattcctgcaggtgttccaagaaaacctggcatgactcgtgatgacttatttaacgtgaatgctggtatcattagccagctcggtgattctattgcagaatgttgtgatctttccaaggtcttcgttcttgtcatttccaaccctgttaattctttagtcccagtgatggtttctaacattcttaagaaccatcctcagtctagaaattccggcattgaaagaaggatcatgggtgtcaccaagctcgacattgtcagagcgtccacttttctacgtgagataaacattgagtcagggctaactcctcgtgttaactccatgcctgacgtccctgtaattggcgggcattctggcgagactattattccgttgttttcacagtcaaacttcctatcgagattaaatgaggatcaattgaaatatttaatacatagagtccaatacggtggtgatgaagtggtcaaggccaagaacggtaaaggtagtgctaccttatcgatggcccatgccggttataagtgtgttgtccaatttgtttctttgttattgggtaacattgagcagatccatggaacctactatgtgccattaaaagatgcgaacaacttccccattgctcctggggcagatcaattattgcctctggtggacggtgcagactactttgccataccattaactattactacaaagggtgtttcctatgtggattatgacatcgttaataggatgaacgacatggaacgcaaccaaatgttgccaatttgcgtctcccagttaaagaaaaatatcgataagggcttggaattcgttgcatcgagatctgcatcatcttaa(seqidno：17)。

atgtttgtcagggttaaattgaataaaccagtaaaatggtataggttctatagtacgttggattcacattccctaaagttacagagcggctcgaagtttgtaaaaataaagccagtaaataacttgaggagtagttcatcagcagatttcgtgtccccaccaaattccaaattacaatctttaatctggcagaaccctttacaaaatgtttatataactaaaaaaccatggactccatccacaagagaagcgatggttgaattcataactcatttacatgagtcataccccgaggtgaacgtcattgttcaacccgatgtggcagaagaaatttcccaggatttcaaatctcctttggagaatgatcccaaccgacctcatatactttatactggtcctgaacaagatatcgtaaacagaacagacttattggtgacattgggaggtgatgggactattttacacggcgtatcaatgttcggaaatacgcaagttcctccggttttagcatttgctctgggcactctgggctttctattaccgtttgattttaaggagcataaaaaggtctttcaggaagtaatcagctctagagccaaatgtttgcatagaacacggctagaatgtcatttgaaaaaaaaggatagcaactcatctattgtgacccatgctatgaatgacatattcttacataggggtaattcccctcatctcactaacctggacattttcattgatggggaatttttgacaagaacgacagcagatggtgttgcattggccactccaacgggttccacagcatattcattatcagcaggtggatctattgtttccccattagtccctgctattttaatgacaccaatttgtcctcgctctttgtcattccgaccactgattttgcctcattcatcccacattaggataaagataggttccaaattgaaccaaaaaccagtcaacagtgtggtaaaactttctgttgatggtattcctcaacaggatttagatgttggtgatgaaatttatgttataaatgaggtcggcactatatacatagatggtactcagcttccgacgacaagaaaaactgaaaatgactttaataattcaaaaaagcctaaaaggtcagggatttattgtgtcgccaagaccgagaatgactggattagaggaatcaatgaacttttaggattcaattctagctttaggctgaccaagagacagactgataatgattaa(seqidno：18)。

atgcgaattggcataccaagagaacggttaaccaatgaaacccgtgttgcagcaacgccaaaaacagtggaacagctgctgaaactgggttttaccgtcgcggtagagagcggcgcgggtcaactggcaagttttgacgataaagcgtttgtgcaagcgggcgctgaaattgtagaagggaatagcgtctggcagtcagagatcattctgaaggtcaatgcgccgttagatgatgaaattgcgttactgaatcctgggacaacgctggtgagttttatctggcctgcgcagaatccggaattaatgcaaaaacttgcggaacgtaacgtgaccgtgatggcgatggactctgtgccgcgtatctcacgcgcacaatcgctggacgcactaagctcgatggcgaacatcgccggttatcgcgccattgttgaagcggcacatgaatttgggcgcttctttaccgggcaaattactgcggccgggaaagtgccaccggcaaaagtgatggtgattggtgcgggtgttgcaggtctggccgccattggcgcagcaaacagtctcggcgcgattgtgcgtgcattcgacacccgcccggaagtgaaagaacaagttcaaagtatgggcgcggaattcctcgagctggattttaaagaggaagctggcagcggcgatggctatgccaaagtgatgtcggacgcgttcatcaaagcggaaatggaactctttgccgcccaggcaaaagaggtcgatatcattgtcaccaccgcgcttattccaggcaaaccagcgccgaagctaattacccgtgaaatggttgactccatgaaggcgggcagtgtgattgtcgacctggcagcccaaaacggcggcaactgtgaatacaccgtgccgggtgaaatcttcactacggaaaatggtgtcaaagtgattggttataccgatcttccgggccgtctgccgacgcaatcctcacagctttacggcacaaacctcgttaatctgctgaaactgttgtgcaaagagaaagacggcaatatcactgttgattttgatgatgtggtgattcgcggcgtgaccgtgatccgtgcgggcgaaattacctggccggcaccgccgattcaggtatcagctcagccgcaggcggcacaaaaagcggcaccggaagtgaaaactgaggaaaaatgtacctgctcaccgtggcgtaaatacgcgttgatggcgctggcaatcattctttttggctggatggcaagcgttgcgccgaaagaattccttgggcacttcaccgttttcgcgctggcctgcgttgtcggttattacgtggtgtggaatgtatcgcacgcgctgcatacaccgttgatgtcggtcaccaacgcgatttcagggattattgttgtcggagcactgttgcagattggccagggcggctgggttagcttccttagttttatcgcggtgcttatagccagcattaatattttcggtggcttcaccgtgactcagcgcatgctgaaaatgttccgcaaaaattaa(seqidno：19)

atgtctggaggattagttacagctgcatacattgttgccgcgatcctgtttatcttcagtctggccggtctttcgaaacatgaaacgtctcgccagggtaacaacttcggtatcgccgggatggcgattgcgttaatcgcaaccatttttggaccggatacgggtaatgttggctggatcttgctggcgatggtcattggtggggcaattggtatccgtctggcgaagaaagttgaaatgaccgaaatgccagaactggtggcgatcctgcatagcttcgtgggtctggcggcagtgctggttggctttaacagctatctgcatcatgacgcgggaatggcaccgattctggtcaatattcacctgacggaagtgttcctcggtatcttcatcggggcggtaacgttcacgggttcggtggtggcgttcggcaaactgtgtggcaagatttcgtctaaaccattgatgctgccaaaccgtcacaaaatgaacctggcggctctggtcgtttccttcctgctgctgattgtatttgttcgcacggacagcgtcggcctgcaagtgctggcattgctgataatgaccgcaattgcgctggtattcggctggcatttagtcgcctccatcggtggtgcagatatgccagtggtggtgtcgatgctgaactcgtactccggctgggcggctgcggctgcgggctttatgctcagcaacgacctgctgattgtgaccggtgcgctggtcggttcttcgggggctatcctttcttacattatgtgtaaggcgatgaaccgttcctttatcagcgttattgcgggtggtttcggcaccgacggctcttctactggcgatgatcaggaagtgggtgagcaccgcgaaatcaccgcagaagagacagcggaactgctgaaaaactcccattcagtgatcattactccggggtacggcatggcagtcgcgcaggcgcaatatcctgtcgctgaaattactgagaaattgcgcgctcgtggtattaatgtgcgtttcggtatccacccggtcgcggggcgtttgcctggacatatgaacgtattgctggctgaagcaaaagtaccgtatgacatcgtgctggaaatggacgagatcaatgatgactttgctgataccgataccgtactggtgattggtgctaacgatacggttaacccggcggcgcaggatgatccgaagagtccgattgctggtatgcctgtgctggaagtgtggaaagcgcagaacgtgattgtctttaaacgttcgatgaacactggctatgctggtgtgcaaaacccgctgttcttcaaggaaaacacccacatgctgtttggtgacgccaaagccagcgtggatgcaatcctgaaagctctgtaa(seqidno：20)

atgtctattccagaaactcaaaaagccattatcttctacgaatccaacggcaagttggagcataaggatatcccagttccaaagccaaagcccaacgaattgttaatcaacgtcaagtactctggtgtctgccacaccgatttgcacgcttggcatggtgactggccattgccaactaagttaccattagttggtggtcacgaaggtgccggtgtcgttgtcggcatgggtgaaaacgttaagggctggaagatcggtgactacgccggtatcaaatggttgaacggttcttgtatggcctgtgaatactgtgaattgggtaacgaatccaactgtcctcacgctgacttgtctggttacacccacgacggttctttccaagaatacgctaccgctgacgctgttcaagccgctcacattcctcaaggtactgacttggctgaagtcgcgccaatcttgtgtgctggtatcaccgtatacaaggctttgaagtctgccaacttgagagcaggccactgggcggccatttctggtgctgctggtggtctaggttctttggctgttcaatatgctaaggcgatgggttacagagtcttaggtattgatggtggtccaggaaaggaagaattgtttacctcgctcggtggtgaagtattcatcgacttcaccaaagagaaggacattgttagcgcagtcgttaaggctaccaacggcggtgcccacggtatcatcaatgtttccgtttccgaagccgctatcgaagcttctaccagatactgtagggcgaacggtactgttgtcttggttggtttgccagccggtgcaaagtgctcctctgatgtcttcaaccacgttgtcaagtctatctccattgtcggctcttacgtggggaacagagctgataccagagaagccttagatttctttgccagaggtctagtcaagtctccaataaaggtagttggcttatccagtttaccagaaatttacgaaaagatggagaagggccaaattgctggtagatacgttgttgacacttctaaataa(seqidno：21)。

atgtctcagactcacaagcatgctattcctgctaacatagctgacagatgcttaataaatccagaacagtatgaaactaaatacaagcaatctataaacgatcctgacactttctggggagagcagggtaagatattggactggattacaccataccaaaaggtcaagaacacttcatttgctcctggtaatgtttctattaaatggtacgaggacggtacattaaacttagcagcaaactgcttggacaggcacttgcaagagaacggagacagaactgcaataatttgggagggtgacgacgcatctcaatctaagcacatatcatacagagagttacacagagacgtttgcagattcgctaacacattgttggatttgggaataaagaaaggtgacgttgttgcaatttatatgcctatggttcctgaggctgctgtcgctatgttggcttgcgcaaggataggagctgtccattctgtcatttttggtggtttttcacctgaggcaatagcaggtaggataattgattcatcttcaaggttggtcataactgcagatgagggagtcagggcaggaagatctattccattgaagaagaacgttgacgatgcattgaagaacccaaacgttacttctgtcgagcacgtcattgtcttaaaaagaactggaaacgacatagactggcaagagggtagggacttatggtggagggacttgattgagaaggcttcacctgaacaccagccagaggcaatgaatgcagaagacccattgtttattttatatacatctggatctacaggaaagccaaagggagtcttgcatactacaggtggttacttggtctatgcagcaacaacttttaagtatgtcttcgactaccaccctggtgacatttactggtgcacagctgacgttggatgggtcacaggtcactcttacttgttgtacggacctttggcatgcggtgctactacattgatgttcgagggagtccctaactggcctacacctgctaggatgtgccaggttgtcgacaagcaccaggtcaacatactgtacacagcaccaacagctattagggcattgatggcagagggtgacaaggcaattgagggaacagacaggtcttctttgagaatattgggatctgtcggtgagccaataaacccagaggcatgggagtggtactggaagaagataggaaaggagaaatgtccagtcgtcgacacatggtggcagacagagacaggtggatttatgataactcctttgccaggagctatagagttgaaggctggttcagcaacaaggccattcttcggagtccagcctgcattggtcgacaacgagggtcatccacaggaaggtgctacagagggtaacttagtcattactgactcttggcctggtcaggctaggacattgttcggtgaccatgagaggttcgagcagacttacttttctacatttaaaaatatgtacttttctggagacggtgctagaagggatgaagatggttactattggataactggtagggtcgatgatgtcttaaacgtctcaggacacaggttgggaactgctgaaattgaatcagcattggtcgctcaccctaagatagctgaggcagctgtcgtcggaattcctcacgcaattaagggacaggcaatttacgcatacgtcactttgaaccacggtgaagagccatcaccagagttgtacgcagaggttaggaactgggtcaggaaggagattggacctttggcaactccagacgtcttgcactggacagactcattgcctaagacaaggtctggaaaaataatgaggagaatattgaggaaaattgctgctggagatacttcaaacttgggtgacacttctacattggctgacccaggtgttgtcgagaaaccattggaggaaaaacaggcaatagctatgccatcttaa(seqidno：22)。

atgactaagctacactttgacactgctgaaccagtcaagatcacacttccaaatggtttgacatacgagcaaccaaccggtctattcattaacaacaagtttatgaaagctcaagacggtaagacctatcccgtcgaagatccttccactgaaaacaccgtttgtgaggtctcttctgccaccactgaagatgttgaatatgctatcgaatgtgccgaccgtgctttccacgacactgaatgggctacccaagacccaagagaaagaggccgtctactaagtaagttggctgacgaattggaaagccaaattgacttggtttcttccattgaagctttggacaatggtaaaactttggccttagcccgtggggatgttaccattgcaatcaactgtctaagagatgctgctgcctatgccgacaaagtcaacggtagaacaatcaacaccggtgacggctacatgaacttcaccaccttagagccaatcggtgtctgtggtcaaattattccatggaactttccaataatgatgttggcttggaagatcgccccagcattggccatgggtaacgtctgtatcttgaaacccgctgctgtcacacctttaaatgccctatactttgcttctttatgtaagaaggttggtattccagctggtgtcgtcaacatcgttccaggtcctggtagaactgttggtgctgctttgaccaacgacccaagaatcagaaagctggcttttaccggttctacagaagtcggtaagagtgttgctgtcgactcttctgaatctaacttgaagaaaatcactttggaactaggtggtaagtccgcccatttggtctttgacgatgctaacattaagaagactttaccaaatctagtaaacggtattttcaagaacgctggtcaaatttgttcctctggttctagaatttacgttcaagaaggtatttacgacgaactattggctgctttcaaggcttacttggaaaccgaaatcaaagttggtaatccatttgacaaggctaacttccaaggtgctatcactaaccgtcaacaattcgacacaattatgaactacatcgatatcggtaagaaagaaggcgccaagatcttaactggtggcgaaaaagttggtgacaagggttacttcatcagaccaaccgttttctacgatgttaatgaagacatgagaattgttaaggaagaaatttttggaccagttgtcactgtcgcaaagttcaagactttagaagaaggtgtcgaaatggctaacagctctgaattcggtctaggttctggtatcgaaacagaatctttgagcacaggtttgaaggtggccaagatgttgaaggccggtaccgtctggatcaacacatacaacgattttgactccagagttccattcggtggtgttaagcaatctggttacggtagagaaatgggtgaagaagtctaccatgcatacactgaagtaaaagctgtcagaattaagttgtaa(seqidno：23)。

atgaatcaacaggatattgaacaggtggtgaaagcggtactgctgaaaatgcaaagcagtgacacgccgtccgccgccgttcatgagatgggcgttttcgcgtccctggatgacgccgttgcggcagccaaagtcgcccagcaagggttaaaaagcgtggcaatgcgccagttagccattgctgccattcgtgaagcaggcgaaaaacacgccagagatttagcggaacttgccgtcagtgaaaccggcatggggcgcgttgaagataaatttgcaaaaaacgtcgctcaggcgcgcggcacaccaggcgttgagtgcctctctccgcaagtgctgactggcgacaacggcctgaccctaattgaaaacgcaccctggggcgtggtggcttcggtgacgccttccactaacccggcggcaaccgtaattaacaacgccatcagcctgattgccgcgggcaacagcgtcatttttgccccgcatccggcggcgaaaaaagtctcccagcgggcgattacgctgctcaaccaggcgattgttgccgcaggtgggccggaaaacttactggttactgtggcaaatccggatatcgaaaccgcgcaacgcttgttcaagtttccgggtatcggcctgctggtggtaaccggcggcgaagcggtagtagaagcggcgcgtaaacacaccaataaacgtctgattgccgcaggcgctggcaacccgccggtagtggtggatgaaaccgccgacctcgcccgtgccgctcagtccatcgtcaaaggcgcttctttcgataacaacatcatttgtgccgacgaaaaggtactgattgttgttgatagcgtagccgatgaactgatgcgtctgatggaaggccagcacgcggtgaaactgaccgcagaacaggcgcagcagctgcaaccggtgttgctgaaaaatatcgacgagcgcggaaaaggcaccgtcagccgtgactgggttggtcgcgacgcaggcaaaatcgcggcggcaatcggccttaaagttccgcaagaaacgcgcctgctgtttgtggaaaccaccgcagaacatccgtttgccgtgactgaactgatgatgccggtgttgcccgtcgtgcgcgtcgccaacgtggcggatgccattgcgctagcggtgaaactggaaggcggttgccaccacacggcggcaatgcactcgcgcaacatcgaaaacatgaaccagatggcgaatgctattgataccagcattttcgttaagaacggaccgtgcattgccgggctggggctgggcggggaaggctggaccaccatgaccatcaccacgccaaccggtgaaggggtaaccagcgcgcgtacgtttgtccgtctgcgtcgctgtgtattagtcgatgcgtttcgcattgtttaa(seqidno：24)。

atgtcattaccgttcttaacttctgcaccgggaaaggttattatttttggtgaacactctgctgtgtacaacaagcctgccgtcgctgctagtgtgtctgcgttgagaacctacctgctaataagcgagtcatctgcaccagatactattgaattggacttcccggacattagctttaatcataagtggtccatcaatgatttcaatgccatcaccgaggatcaagtaaactcccaaaaattggccaaggctcaacaagccaccgatggcttgtctcaggaactcgttagtcttttggatccgttgttagctcaactatccgaatccttccactaccatgcagcgttttgtttcctgtatatgtttgtttgcctatgcccccatgccaagaatattaagttttctttaaagtctactttacccatcggtgctgggttgggctcaagcgcctctatttctgtatcactggccttagctatggcctacttgggggggttaataggatctaatgacttggaaaagctgtcagaaaacgataagcatatagtgaatcaatgggccttcataggtgaaaagtgtattcacggtaccccttcaggaatagataacgctgtggccacttatggtaatgccctgctatttgaaaaagactcacataatggaacaataaatacaaacaattttaagttcttagatgatttcccagccattccaatgatcctaacctatactagaattccaaggtctacaaaagatcttgttgctcgcgttcgtgtgttggtcaccgagaaatttcctgaagttatgaagccaattctagatgccatgggtgaatgtgccctacaaggcttagagatcatgacaaagttaagtaaatgtaaaggcaccgatgacgaggccgtagaaactaataatgaactgtatgaacaactattggaattgataagaataaatcatggactgcttgtctcaatcggtgtttctcatcctggattagaacttattaaaaatctgagcgatgatttgagaattggctccacaaaacttaccggtgctggtggcggcggttgctctttgactttgttacgaagagacattactcaagagcaaattgacagtttcaaaaagaaattgcaagatgattttagttacgagacatttgaaacagacttgggtgggactggctgctgtttgttaagcgcaaaaaatttgaataaagatcctaaaatcaaatccctagtattccaattatttgaaaataaaactaccacaaagcaacaaattgacgatctattattgccaggaaacacgaatttaccatggacttcataa(seqidno：25)。

atgactgccgacaacaatagtatgccccatggtgcagtatctagttacgccaaattagtgcaaaaccaaacacctgaagacattttggaagagtttcctgaaattattccattacaacaaagacctaatacccgatctagtgagacgtcaaatgacgaaagcggagaaacatgtttttctggtcatgatgaggagcaaattaagttaatgaatgaaaattgtattgttttggattgggacgataatgctattggtgccggtaccaagaaagtttgtcatttaatggaaaatattgaaaagggtttactacatcgtgcattctccgtctttattttcaatgaacaaggtgaattacttttacaacaaagagccactgaaaaaataactttccctgatctttggactaacacatgctgctctcatccactatgtattgatgacgaattaggtttgaagggtaagctagacgataagattaagggcgctattactgcggcggtgagaaaactagatcatgaattaggtattccagaagatgaaactaagacaaggggtaagtttcactttttaaacagaatccattacatggcaccaagcaatgaaccatggggtgaacatgaaattgattacatcctattttataagatcaacgctaaagaaaacttgactgtcaacccaaacgtcaatgaagttagagacttcaaatgggtttcaccaaatgatttgaaaactatgtttgctgacccaagttacaagtttacgccttggtttaagattatttgcgagaattacttattcaactggtgggagcaattagatgacctttctgaagtggaaaatgacaggcaaattcatagaatgctataa(seqidno：26)。

atgtctcagaacgtttacattgtatcgactgccagaaccccaattggttcattccagggttctctatcctccaagacagcagtggaattgggtgctgttgctttaaaaggcgccttggctaaggttccagaattggatgcatccaaggattttgacgaaattatttttggtaacgttctttctgccaatttgggccaagctccggccagacaagttgctttggctgccggtttgagtaatcatatcgttgcaagcacagttaacaaggtctgtgcatccgctatgaaggcaatcattttgggtgctcaatccatcaaatgtggtaatgctgatgttgtcgtagctggtggttgtgaatctatgactaacgcaccatactacatgccagcagcccgtgcgggtgccaaatttggccaaactgttcttgttgatggtgtcgaaagagatgggttgaacgatgcgtacgatggtctagccatgggtgtacacgcagaaaagtgtgcccgtgattgggatattactagagaacaacaagacaattttgccatcgaatcctaccaaaaatctcaaaaatctcaaaaggaaggtaaattcgacaatgaaattgtacctgttaccattaagggatttagaggtaagcctgatactcaagtcacgaaggacgaggaacctgctagattacacgttgaaaaattgagatctgcaaggactgttttccaaaaagaaaacggtactgttactgccgctaacgcttctccaatcaacgatggtgctgcagccgtcatcttggtttccgaaaaagttttgaaggaaaagaatttgaagcctttggctattatcaaaggttggggtgaggccgctcatcaaccagctgattttacatgggctccatctcttgcagttccaaaggctttgaaacatgctggcatcgaagacatcaattctgttgattactttgaattcaatgaagccttttcggttgtcggtttggtgaacactaagattttgaagctagacccatctaaggttaatgtatatggtggtgctgttgctctaggtcacccattgggttgttctggtgctagagtggttgttacactgctatccatcttacagcaagaaggaggtaagatcggtgttgccgccatttgtaatggtggtggtggtgcttcctctattgtcattgaaaagatatga(seqidno：27)。

atgaccgtttacacagcatccgttaccgcacccgtcaacatcgcaacccttaagtattgggggaaaagggacacgaagttgaatctgcccaccaattcgtccatatcagtgactttatcgcaagatgacctcagaacgttgacctctgcggctactgcacctgagtttgaacgcgacactttgtggttaaatggagaaccacacagcatcgacaatgaaagaactcaaaattgtctgcgcgacctacgccaattaagaaaggaaatggaatcgaaggacgcctcattgcccacattatctcaatggaaactccacattgtctccgaaaataactttcctacagcagctggtttagcttcctccgctgctggctttgctgcattggtctctgcaattgctaagttataccaattaccacagtcaacttcagaaatatctagaatagcaagaaaggggtctggttcagcttgtagatcgttgtttggcggatacgtggcctgggaaatgggaaaagctgaagatggtcatgattccatggcagtacaaatcgcagacagctctgactggcctcagatgaaagcttgtgtcctagttgtcagcgatattaaaaaggatgtgagttccactcagggtatgcaattgaccgtggcaacctccgaactatttaaagaaagaattgaacatgtcgtaccaaagagatttgaagtcatgcgtaaagccattgttgaaaaagatttcgccacctttgcaaaggaaacaatgatggattccaactctttccatgccacatgtttggactctttccctccaatattctacatgaatgacacttccaagcgtatcatcagttggtgccacaccattaatcagttttacggagaaacaatcgttgcatacacgtttgatgcaggtccaaatgctgtgttgtactacttagctgaaaatgagtcgaaactctttgcatttatctataaattgtttggctctgttcctggatgggacaagaaatttactactgagcagcttgaggctttcaaccatcaatttgaatcatctaactttactgcacgtgaattggatcttgagttgcaaaaggatgttgccagagtgattttaactcaagtcggttcaggcccacaagaaacaaacgaatctttgattgacgcaaagactggtctaccaaaggaataa(seqidno：28)。

atgaaactctcaactaaactttgttggtgtggtattaaaggaagacttaggccgcaaaagcaacaacaattacacaatacaaacttgcaaatgactgaactaaaaaaacaaaagaccgctgaacaaaaaaccagacctcaaaatgtcggtattaaaggtatccaaatttacatcccaactcaatgtgtcaaccaatctgagctagagaaatttgatggcgtttctcaaggtaaatacacaattggtctgggccaaaccaacatgtcttttgtcaatgacagagaagatatctactcgatgtccctaactgttttgtctaagttgatcaagagttacaacatcgacaccaacaaaattggtagattagaagtcggtactgaaactctgattgacaagtccaagtctgtcaagtctgtcttgatgcaattgtttggtgaaaacactgacgtcgaaggtattgacacgcttaatgcctgttacggtggtaccaacgcgttgttcaactctttgaactggattgaatctaacgcatgggatggtagagacgccattgtagtttgcggtgatattgccatctacgataagggtgccgcaagaccaaccggtggtgccggtactgttgctatgtggatcggtcctgatgctccaattgtatttgactctgtaagagcttcttacatggaacacgcctacgatttttacaagccagatttcaccagcgaatatccttacgtcgatggtcatttttcattaacttgttacgtcaaggctcttgatcaagtttacaagagttattccaagaaggctatttctaaagggttggttagcgatcccgctggttcggatgctttgaacgttttgaaatatttcgactacaacgttttccatgttccaacctgtaaattggtcacaaaatcatacggtagattactatataacgatttcagagccaatcctcaattgttcccagaagttgacgccgaattagctactcgcgattatgacgaatctttaaccgataagaacattgaaaaaacttttgttaatgttgctaagccattccacaaagagagagttgcccaatctttgattgttccaacaaacacaggtaacatgtacaccgcatctgtttatgccgcctttgcatctctattaaactatgttggatctgacgacttacaaggcaagcgtgttggtttattttcttacggttccggtttagctgcatctctatattcttgcaaaattgttggtgacgtccaacatattatcaaggaattagatattactaacaaattagccaagagaatcaccgaaactccaaaggattacgaagctgccatcgaattgagagaaaatgcccatttgaagaagaacttcaaacctcaaggttccattgagcatttgcaaagtggtgtttactacttgaccaacatcgatgacaaatttagaagatcttacgatgttaaaaaataa(seqidno：29)。

atggttttaaccaataaaacagtcatttctggatcgaaagtcaaaagtttatcatctgcgcaatcgagctcatcaggaccttcatcatctagtgaggaagatgattcccgcgatattgaaagcttggataagaaaatacgtcctttagaagaattagaagcattattaagtagtggaaatacaaaacaattgaagaacaaagaggtcgctgccttggttattcacggtaagttacctttgtacgctttggagaaaaaattaggtgatactacgagagcggttgcggtacgtaggaaggctctttcaattttggcagaagctcctgtattagcatctgatcgtttaccatataaaaattatgactacgaccgcgtatttggcgcttgttgtgaaaatgttataggttacatgcctttgcccgttggtgttataggccccttggttatcgatggtacatcttatcatataccaatggcaactacagagggttgtttggtagcttctgccatgcgtggctgtaaggcaatcaatgctggcggtggtgcaacaactgttttaactaaggatggtatgacaagaggcccagtagtccgtttcccaactttgaaaagatctggtgcctgtaagatatggttagactcagaagagggacaaaacgcaattaaaaaagcttttaactctacatcaagatttgcacgtctgcaacatattcaaacttgtctagcaggagatttactcttcatgagatttagaacaactactggtgacgcaatgggtatgaatatgatttctaaaggtgtcgaatactcattaaagcaaatggtagaagagtatggctgggaagatatggaggttgtctccgtttctggtaactactgtaccgacaaaaaaccagctgccatcaactggatcgaaggtcgtggtaagagtgtcgtcgcagaagctactattcctggtgatgttgtcagaaaagtgttaaaaagtgatgtttccgcattggttgagttgaacattgctaagaatttggttggatctgcaatggctgggtctgttggtggatttaacgcacatgcagctaatttagtgacagctgttttcttggcattaggacaagatcctgcacaaaatgttgaaagttccaactgtataacattgatgaaagaagtggacggtgatttgagaatttccgtatccatgccatccatcgaagtaggtaccatcggtggtggtactgttctagaaccacaaggtgccatgttggacttattaggtgtaagaggcccgcatgctaccgctcctggtaccaacgcacgtcaattagcaagaatagttgcctgtgccgtcttggcaggtgaattatccttatgtgctgccctagcagccggccatttggttcaaagtcatatgacccacaacaggaaacctgctgaaccaacaaaacctaacaatttggacgccactgatataaatcgtttgaaagatgggtccgtcacctgcattaaatcctaa(seqidno：30)

atgtcagagttgagagccttcagtgccccagggaaagcgttactagctggtggatatttagttttagatacaaaatatgaagcatttgtagtcggattatcggcaagaatgcatgctgtagcccatccttacggttcattgcaagggtctgataagtttgaagtgcgtgtgaaaagtaaacaatttaaagatggggagtggctgtaccatataagtcctaaaagtggcttcattcctgtttcgataggcggatctaagaaccctttcattgaaaaagttatcgctaacgtatttagctactttaaacctaacatggacgactactgcaatagaaacttgttcgttattgatattttctctgatgatgcctaccattctcaggaggatagcgttaccgaacatcgtggcaacagaagattgagttttcattcgcacagaattgaagaagttcccaaaacagggctgggctcctcggcaggtttagtcacagttttaactacagctttggcctccttttttgtatcggacctggaaaataatgtagacaaatatagagaagttattcataatttagcacaagttgctcattgtcaagctcagggtaaaattggaagcgggtttgatgtagcggcggcagcatatggatctatcagatatagaagattcccacccgcattaatctctaatttgccagatattggaagtgctacttacggcagtaaactggcgcatttggttgatgaagaagactggaatattacgattaaaagtaaccatttaccttcgggattaactttatggatgggcgatattaagaatggttcagaaacagtaaaactggtccagaaggtaaaaaattggtatgattcgcatatgccagaaagcttgaaaatatatacagaactcgatcatgcaaattctagatttatggatggactatctaaactagatcgcttacacgagactcatgacgattacagcgatcagatatttgagtctcttgagaggaatgactgtacctgtcaaaagtatcctgaaatcacagaagttagagatgcagttgccacaattagacgttcctttagaaaaataactaaagaatctggtgccgatatcgaacctcccgtacaaactagcttattggatgattgccagaccttaaaaggagttcttacttgcttaatacctggtgctggtggttatgacgccattgcagtgattactaagcaagatgttgatcttagggctcaaaccgctaatgacaaaagattttctaaggttcaatggctggatgtaactcaggctgactggggtgttaggaaagaaaaagatccggaaacttatcttgataaatag(seqidno：31)。

atgagtgtgtctaccgccaagaggtcgctggatgtcgtttctccgggttcattagcggagtttgagggttcaaaatctcgtcacgatgaaatagaaaatgaacatagacgtactggtacacgtgatggcgaggatagcgagcaaccgaagaagaagggtagcaaaactagcaaaaagcaagatttggatcctgaaactaagcagaagaggactgcccaaaatcgggccgctcaaagagcttttagggaacgtaaggagaggaagatgaaggaattggagaagaaggtacaaagtttagagagtattcagcagcaaaatgaagtggaagctacttttttgagggaccagttaatcactctggtgaatgagttaaaaaaatatagaccagagacaagaaatgactcaaaagtgctggaatatttagcaaggcgagatcctaatttgcatttttcaaaaaataacgttaaccacagcaatagcgagccaattgacacacccaatgatgacatacaagaaaatgttaaacaaaagatgaatttcacgtttcaatatccgcttgataacgacaacgacaacgacaacagtaaaaatgtggggaaacaattaccttcaccaaatgatccaagtcattcggctcctatgcctataaatcagacacaaaagaaattaagtgacgctacagattcctccagcgctactttggattccctttcaaatagtaacgatgttcttaataacacaccaaactcctccacttcgatggattggttagataatgtaatatatactaacaggtttgtgtcaggtgatgatggcagcaatagtaaaactaagaatttagacagtaatatgttttctaatgactttaattttgaaaaccaatttgatgaacaagtttcggagttttgttcgaaaatgaaccaggtatgtggaacaaggcaatgtcccattcccaagaaacccatctcggctcttgataaagaagttttcgcgtcatcttctatactaagttcaaattctcctgctttaacaaatacttgggaatcacattctaatattacagataatactcctgctaatgtcattgctactgatgctactaaatatgaaaattccttctccggttttggccgacttggtttcgatatgagtgccaatcattacgtcgtgaatgataatagcactggtagcactgatagcactggtagcactggcaataagaacaaaaagaacaataataatagcgatgatgtactcccattcatatccgagtcaccgtttgatatgaaccaagttactaatttttttagtccgggatctaccggcatcggcaataatgctgcctctaacaccaatcccagcctactgcaaagcagcaaagaggatataccttttatcaacgcaaatctggctttcccagacgacaattcaactaatattcaattacaacctttctctgaatctcaatctcaaaataagtttgactacgacatgttttttagagattcatcgaaggaaggtaacaatttatttggagagtttttagaggatgacgatgatgacaaaaaagccgctaatatgtcagacgatgagtcaagtttaatcaagaaccagttaattaacgaagaaccagagcttccgaaacaatatctacaatcggtaccaggaaatgaaagcgaaatctcacaaaaaaatggcagtagtttacagaatgctgacaaaatcaataatggcaatgataacgataatgataatgatgtcgttccatctaaggaaggctctttactaaggtgttcggaaatttgggatagaataacaacacatccgaaatactcagatattgatgtcgatggtttatgttccgagctaatggcaaaggcaaaatgttcagaaagaggggttgtcatcaatgcagaagacgttcaattagctttgaataagcatatgaactaa(seqidno：32)。

atggccgatgaggaacgtttaaaggagtttaaaggggcaaacaagatagtgtttgatccaaataccagacaagtatgggaaaaccagaatcgagatggaacaaaaccagcaactactttccagagtgaagaggtcataaaaagagctgccccagaatctgaaaaagacacctccgccacatcaagtattgttccagagctatagaacattgtggcaactgtgactttggggagcaggttagatctgaaaacagttgcgctacatgcccgtatgcagaatataacccctagcgttttgctgctgtcatcatgcgtatagagagccaaaaactacagctttaatttttgcctcagggaaaatggttgttaccggtgcaaaaagtgaggatgactcaaagctggccagaagaatatatgcaggaattatccaaaaaatcaggtttgcagctaaattcacagacttcaaaatacaaaatattgtcggttcgtgtgacgttaatttccctatacgtctagaagggttagcattcagtcatggtactttctcctcctatgagccagaattgtttcctggtttgatctatagaatggtgaagccgaaaattgtgttgttaatttttgtttcaggaaagattgttcttctggagcaaagcaaagggaggaaatttaccaagcttttgaagctatatacccagttctaagtgaatttagaaaaatgtga(seqidno：51)

atggattttgaggaagattacgatgcggagtttgatgataatcaagaaggacaattagaaacaccttttccatcggttgcgggagccgatgatggggacaatgataatgatgactctgtcgcagaaaacatgaagaagaagcaaaagagagaggctgtagtggatgatgggagtgaaaatgcatttggtatacccgaatttacaagaaaagataagactctggaggagattttagagatgatggacagtactcctcctatcattcccgatgcagtaatagactactatttaaccaaaaacgggtttaacgtagcatatgtacaagtgaaacgacttttagcacttgctactcagaaatttgttagtgatatagctaaggatgcctacgaatattccaggatcaggtcttccgtagcggtatctaatgctaacaacagtcaggcgagagctaggcagctattgcaaggacagcgacagactggcgtgcagcagatttcacaacaacaacatcaacagaatgagaagactacagcaagcatagttgttctgacggtgaacgatcccagtagcgctgttgctgaatacgggctcaatataggtcgcccagacttttatcgttag(seqidno：52)

實施例8新一代工程菌株的構建

根據實施例1～7，將有效果的改造進行疊加組合，如將有效果的敲除基因ypl062w,yer130c,yer134c,exg1等兩兩組合進行敲除，結果顯示雙基因敲除會得到產量更高的菌株。

在此基礎上，我們將有效果的改造進行疊加組合，形成新一代的工程菌株，菌株特性如下表4.

表4.新一代工程菌株的特徵

註：「√」代表該基因被敲除，"+"代表該基因過表達一個拷貝，"*"代表該基因過表達至少2個拷貝，「-」代表該基因不被操作(即不被敲除或不過表達)

更進一步，發明人通過研究證明，新一代工程菌株j1011-37～84具有高產番茄紅素的性能。

實施例9新二代工程菌株的構建

在上一代工程菌株的基礎上，我們挑選了18個優勢菌株，在此基礎上構建了新二代的工程菌株探究gapn和eute基因對番茄紅素產量的影響，菌株特性如下表5.

表5.新二代工程菌株的特徵

註：「√」代表該基因被過表達，「-」代表該基因不被過表達

更進一步，發明人通過研究證明，新一代工程菌株j1011-85～138具有高產番茄紅素的性能。

實施例10工程菌搖瓶培養發酵過程

在本實施例中，發明人詳細介紹了實施例1～9所獲得的工程菌株的發酵培養過程。

搖瓶發酵採用兩級種子培養，將平板上的重組菌株挑到含有5mlypd培養基的pa瓶中，30度搖床搖起一級種子液，過夜培養(一般14-18h)後，菌體長到對數生長期(od在5-8左右)，再以1％的接種量將菌株轉移到含有50mlypd培養基的250ml搖瓶中，搖瓶培養得到二級種子液。約14-18h後，測二級種子的od600值，然後計算接種到含有200ml發酵培養基ypdg的500ml搖瓶中，使菌體終濃度od600＝0.5，需要多少的二級種子液，然後取出算出的體積並離心，去掉上清，再用對應的發酵培養基將菌體懸浮並加入相應的500ml搖瓶中，置於30度搖床開始搖瓶發酵。每隔一段時間(約4h)取樣測定細胞濃度，並在8h後將搖瓶上的報紙去掉，約48h後開始取樣存於-80度冰箱留待測定番茄紅素的產生情況。

實施例11產物萃取方式比較

在本實施例中，發明人對發酵處理後所獲得的產物進行萃取的方式進行了篩選，篩選過程如下所述。

方法一：從冰箱中取出樣品解凍，取500μl發酵液於15ml離心管(冰上預冷)中，5000g4度離心2min來收集菌體，去上清後再用1ml純水重懸洗滌菌體，再加入1ml3n的hcl並沸水浴3min來破碎細胞，離心去掉hcl後用水洗滌一次。再向其中加入1ml的丙酮(hplc級別)，0.2g玻璃珠，1％的抗氧化劑，震蕩5min，然後5000g4度離心2min，轉移上清到50ml的離心管中；再次重複加入上述提取液，並震蕩，然後收集萃取液，直至菌體無明顯黃色；混勻收集到的丙酮萃取液，取出2ml，12000rpm離心10分鐘，再取上清1.2ml至棕色的hplc進樣瓶中，進行hplc分析。

方法二：從冰箱中取出樣品解凍，取500μl發酵液於15ml離心管(冰上預冷)中，5000g4度離心2min來收集菌體，去上清後再用1ml純水重懸並洗滌菌體。再向其中加入4ml的丙酮(hplc級別)，0.2g玻璃珠，1％的抗氧化劑，震蕩5min，然後冰浴超聲5-10min，然後5000g4度離心2min，轉移上清到50ml的離心管中；再次重複加入上述提取液，並震蕩，然後收集萃取液，直至菌體無明顯黃色；混勻收集到的丙酮萃取液，取出2ml，12000rpm離心10分鐘，再取上清1.2ml至棕色的hplc進樣瓶中，進行hplc分析。

檢測方法：番茄紅素的檢測使用四元hplc進行的，檢測器是紫外檢測器，番茄紅素的吸收波長是474nm，色譜柱agilentzorbaxc18(150mm*4.6mm*5μm)，流動相a(乙腈：水＝9：1)和流動相b(甲醇：異丙醇＝3：2)按如下條件分析：0-90％b(0-15min)，90％b(15-30min)，90％-0b(30-35min)，流速1ml/min。

結果顯示：方法一中產物經鹽酸煮過後，番茄紅素會降解，產量檢測不穩定，且該方法得到的樣品間隔一段時間再檢測，甚至能從100mg/l降解到10mg/l，方法二得到的樣品比較穩定，間隔一段時間再檢測，只從100mg/l到90mg/l。說明方法二的提取方案比方法一更穩定更好。

實施例12工程菌發酵罐培養發酵方法比較

在本實施例中，發明人對發酵培養基的條件進行了優化篩選，實驗過程如下所述：

本實施例中的菌種採用j1011-3，種子培養基採用ypd培養基，發酵培養基採用搖瓶優化過的4種培養基進一步探索發酵罐水平的最優培養基，各種培養基配方如下：

①培養基1號：ypd培養基

2.5l分批培養基：2％蛋白腖，1％酵母提取物和2％葡萄糖；

1l葡萄糖補料培養基：500g/l葡萄糖；400g/l酵母浸粉

500ml乙醇補料培養基:100％純乙醇。

②培養基2號:ypd含鹽培養基

2.5l分批培養基：2％蛋白腖，1％酵母提取物，0.8％kh2po4和2％葡萄糖；

1l葡萄糖補料培養基：500g/l葡萄糖，5g/lmgso4，3.5g/lk2so4，0.28g/lna2so4，10g/l酵母提取物。

1l乙醇補料培養基:100％乙醇。

③培養基3號：mmg培養基

2.5l分批培養基：2％葡萄糖，15g/l(nh4)2so4，8g/lkh2po4，3g/lmgso4，0.72g/lznso4.7h2o，10ml/l金屬溶液母液和12ml/l維生素溶液母液；

1l葡萄糖補料培養基：500g/l葡萄糖，9g/lkh2po4，2.5g/lmgso4，3.5g/lk2so4，0.28g/lna2so4，10ml/l金屬溶液母液和12ml/l維生素溶液母液，10g/l酵母提取物。

④培養基4號：mme培養基

2.5l分批培養基：2％葡萄糖，15g/l(nh4)2so4，8g/lkh2po4，3g/lmgso4，0.72g/lznso4.7h2o，10ml/l金屬溶液母液和12ml/l維生素溶液母液；

1l葡萄糖補料培養基：500g/l葡萄糖，9g/lkh2po4，2.5g/lmgso4，3.5g/lk2so4，0.28g/lna2so4，10ml/l金屬溶液母液和12ml/l維生素溶液母液，10g/l酵母提取物。

金屬鹽母液：15g/ledta，5.75g/lznso4，0.32g/lmncl2，0.50g/lcuso4，0.47gcocl2，0.48gna2moo4，2.9g/lcacl2，2.8g/lfeso4。121度滅菌20分鐘。

維生素母液：0.05g/lbiotin，1.0g/lcalciumpantothenate，1.0g/lnicotinicacid，25.0g/lmyoinositol，1g/lthiaminehydrochloride，1g/lpyridoxolhydrochloride，0.2g/lp-aminobenzoicacid。過濾除菌。

上罐培養採用fed-batch方式，首先是分批培養，待碳源葡萄糖基本消耗完後開始補料，補料採用兩級補料方式，分別為葡萄糖補料階段(用於合成菌株)和乙醇(甘油)補料階段(用於產物合成)。具體方法如下：

將保種管從-80度冰箱中取出放置冰上解凍，然後劃ypd平板，於30度培養箱中培養，然後挑取單克隆至含5mlypd培養基的pa瓶中，30度搖床中培養，轉速為220rmp。待種子液變渾濁後(一般為指數期，od＝5-8，14-18小時)轉接至50ml新鮮的ypd培養基中(250ml三角瓶)，轉接量為1％左右。放於30度搖床中培養，轉速為220rmp。待種子液長至對數期時(一般14-18小時)轉接至200ml新鮮的ypd培養基中(500ml三角瓶)，轉接量為1％左右。放於30度搖床中培養，轉速為220rmp。長至對數期的種子液作為上罐種子液。初始接種od調至0.5，所需種子液體積根據公式進行計算。(如發酵液體積為2500ml，種子液od值為n，則接種種子液體積為25000﹡0.5/nml)。開始發酵後，控制ph值為5.5，通氣量為1.5vvm，初始攪拌速率設置為300rpm，溶氧維持在30％以上(300-600rpm)。

當分批培養時葡萄糖濃度降至2g/l左右時開始補料葡萄糖，初始補料速率為10ml/l發酵液/h，以維持發酵液中葡萄糖的殘留濃度在1g/l左右，每兩個小時取樣測量一次od600值和檢測一次葡萄糖含量，當葡萄糖濃度低於1g/l時增加補料速率。其中，在發酵培養基1的葡萄糖補料階段每2小時補料一次酵母提取物(400g/l，每次補加20ml)。當od值增加緩慢時(開始進入穩定期)停止補料葡萄糖，此時開始監測乙醇殘留量，當乙醇濃度降至5g/l時開始補料乙醇或者是甘油，初始補料速率為10ml/l發酵液/h。隨後每4h取樣檢測一次乙醇或甘油含量，當乙醇或甘油濃度低於5g/l時調整補料速率。顏色有變化後開始提取產物檢測產物變化，當番茄紅素濃度不再增加時結束髮酵。

產物檢測方式與實施例9中方法二相同。

結果如圖7所示，結果顯示:儘管培養基3號(mmg培養基)的細胞量最大，但是培養基2號(ypd加鹽培養基)產量最高，番茄紅素產量達到了1950mg/l，所以該培養基為最優培養基，發酵策略是優化的兩步補料發酵，先補葡萄糖長菌體，在生長的穩定期補乙醇來提高產量。

實施例13菌株的上罐發酵培養

在本實施例中，發明人按照實施例12中得到的最佳發酵培養方式對構建的部分工程菌株進行了發酵，結果如表6所示。

表6：

可以看出，根據本發明實施例構建的工程菌株具有高產番茄紅素的性能

在本說明書的描述中，參考術語「一個實施例」、「一些實施例」、「示例」、「具體示例」、或「一些示例」等的描述意指結合該實施例或示例描述的具體特徵、結構、材料或者特點包含於本發明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術語的示意性表述不必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特徵、結構、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領域的技術人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特徵進行結合和組合。

儘管上面已經示出和描述了本發明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例性的，不能理解為對本發明的限制，本領域的普通技術人員在本發明的範圍內可以對上述實施例進行變化、修改、替換和變型。

sequencelisting

武漢臻智生物科技有限公司

微生物及其用途

pidc3171214

52

patentinversion3.3

1

4917

dna

artificial

敲除盒片段1的核苷酸序列

1

ataacgagaacacacaggggcgctatcgcacagaatcaaattcgatgactggaaattttt60

tgttaatttcagaggtcgcctgacgcatatacctttttcaactgaaaaattgggagaaaa120

aggaaaggtgagagcgccggaaccggcttttcatatagaatagagaagcgttcatgacta180

aatgcttgcatcacaatacttgaagttgacaatattatttaaggacctattgttttttcc240

aataggtggttagcaatcgtcttactttctaacttttcttaccttttacatttcagcaat300

atatatatatatatttcaaggatataccattctaatgtctgcccctaagaagatcgtcgt360

tttgccaggtgaccacgttggtcaagaaatcacagccgaagccattaaggttcttaaagc420

tatttctgatgttcgttccaatgtcaagttcgatttcgaaaatcatttaattggtggtgc480

tgctatcgatgctacaggtgttccacttccagatgaggcgctggaagcctccaagaaggc540

tgatgccgttttgttaggtgctgtgggtggtcctaaatggggtaccggtagtgttagacc600

tgaacaaggtttactaaaaatccgtaaagaacttcaattgtacgccaacttaagaccatg660

taactttgcatccgactctcttttagacttatctccaatcaagccacaatttgctaaagg720

tactgacttcgttgttgtcagagaattagtgggaggtatttactttggtaagagaaagga780

agacgatggtgatggtgtcgcttgggatagtgaacaatacaccgttccagaagtgcaaag840

aatcacaagaatggccgctttcatggccctacaacatgagccaccattgcctatttggtc900

cttggataaagctaatgttttggcctcttcaagattatggagaaaaactgtggaggaaac960

catcaagaacgaattccctacattgaaggttcaacatcaattgattgattctgccgccat1020

gatcctagttaagaacccaacccacctaaatggtattataatcaccagcaacatgtttgg1080

tgatatcatctccgatgaagcctccgttatcccaggttccttgggtttgttgccatctgc1140

gtccttggcctctttgccagacaagaacaccgcatttggtttgtacgaaccatgccacgg1200

ttctgctccagatttgccaaagaataaggtcaaccctatcgccactatcttgtctgctgc1260

aatgatgttgaaattgtcattgaacttgcctgaagaaggtaaggccattgaagatgcagt1320

taaaaaggttttggatgcaggtatcagaactggtgatttaggtggttccaacagtaccac1380

cgaagtcggtgatgctgtcgccgaagaagttaagaaaatccttgcttaaatttaactcct1440

taagttactttaatgatttagtttttattattaataattcatgctcatgacatctcatat1500

acacgtttataaaacttaaatagattgaaaatgtattaaagattcctcagggattcgatt1560

tttttggaagtttttgtttttttttccttgagatgctgtagtatttgggaacaattatac1620

aatcgaaagatatatgcttacattcgaccgttttagccgtgatcattatcctatagtaac1680

ataacctgaagcataactgacactactatcatcaatacttgtcacatgagaactctgtga1740

ataattaggccactgaaatttgatgcctgaaggaccggcatcacggattttcgataaagc1800

acttagtatcacactaattggcttttcgcgcaaattaaagccttcgagcgtcccaaaacc1860

ttctcaagcaaggttttcagtataatgttacatgcgtacacgcgtttgtacagaaaaaaa1920

agaaaaatttgaaatataaataacgttcttaatactaacataactataaaaaaataaata1980

gggacctagacttcaggttgtctaactccttccttttcggttagagcggatgtgggggga2040

gggcgtgaatgtaagcgtgacataactaattacatgatatcgacaaaggaaaaggggcct2100

gtttatattgaattttcaaaaattcttactttttttttggatggacgcaaagaagtttaa2160

taatcatattacatggcaataccaccatatacatatccatatctaatcttacttatatgt2220

tgtggaaatgtaaagagccccattatcttagcctaaaaaaaccttctctttggaactttc2280

agtaatacgcttaactgctcattgctatattgaagtacggattagaagccgccgagcggg2340

cgacagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccggtcgcgttcc2400

tgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattctacaatactag2460

cttttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaaccttcaaatca2520

acgaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagccttatttctgg2580

ggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataaatgcaaaagc2640

tgcataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattacttcttattcaaa2700

tgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaacgtcaaggaga2760

aaaaactataatgttgacatcttcaaaatctattgagtcttttccaaaaaatgttcaacc2820

atatggtaagcactaccagaatggtttggagccagtcggtaagtctcaagaagacatttt2880

attggaaccattccattacttatgttcaaacccaggtaaagatgtcagaactaaaatgat2940

tgaagctttcaacgcttggttgaaggtccctaaggacgatttaattgttattactagagt3000

tattgaaatgttacattctgcttctttgttaattgacgatgttgaagatgattctgtttt3060

gagaaggggtgtcccagctgcacatcacatttatggtacaccacaaactattaattgtgc3120

aaactacgtttactttttggctttgaaagaaattgctaagttaaataaaccaaatatgat3180

tactatttacactgatgaattgataaatttgcatagaggtcaaggtatggaattgttctg3240

gagggatacattgacatgtccaacagaaaaagaatttttggatatggttaatgataagac3300

tggaggtttgttgagattagctgttaaattaatgcaagaagcatctcaatcaggtactga3360

ttatactggtttagtttcaaaaattggtatacactttcaagttagagatgattatatgaa3420

tttgcagtctaaaaattatgctgataataaaggtttttgtgaggatttaacagaaggtaa3480

attctctttcccaattatacattctattagatctgatccatctaatagacaattgttgaa3540

cattttgaaacaaagatcttcttctattgaattgaaacaatttgctttgcaattattgga3600

aaatactaatactttccaatattgtagagattttttgagagttttggaaaaagaagctag3660

agaagaaattaaattgttgggtggtaacattatgttggaaaagattatggatgttttgtc3720

tgttaatgaataagtctgaagaatgaatgatttgatgatttctttttccctccatttttc3780

ttactgaatatatcaatgatatagacttgtatagtttattatttcaaattaagtagctat3840

atatagtcaagataacgtttgtttgacacgattacattattcgtcgacatcttttttcag3900

cctgtcgtggtagcaatttgaggagtattattaattgaataggttcattttgcgctcgca3960

taaacagttttcgtcagggacagtatgttggaatgagtggtaattaatggtgacatgaca4020

tgttatagcaataaccttgatgtttacatcgtagtttaatgtacaccccgcgaattcgtt4080

caagtaggagtgcaccaattgcaaagggaaaagctgaatgggcagttcgaataaaagatt4140

ctctttttttatgatatttgtacataaactttataaatgaaattcataatagaaacgaca4200

cgaaattacaaaatggaatatgttcatagggtagacgaaactatatacgcaatctacata4260

catttatcaagaaggagaaaaaggaggatgtaaaggaatacaggtaagcaaattgatact4320

aatggctcaacgtgataaggaaaaagaattgcactttaacattaatattgacaaggagga4380

gggcaccacacaaaaagttaggtgtaacagaaaatcatgaaactatgattcctaatttat4440

atattggaggattttctctaaaaaaaaaaaaatacaacaaataaaaaacactcaatgacc4500

tgaccatttgatggagtttaagtcaataccttcttgaaccatttcccataatggtgaaag4560

ttccctcaagaattttactctgtcagaaacggccttaacgacgtagtcgacctcctcttc4620

agtactaaatctaccaataccaaatctgatggaagaatgggctaatgcatcatccttacc4680

cagcgcatgtaaaacataagaaggttctagggaagcagatgtacaggctgaacccgagga4740

taatgcgatatcccttagtgccatcaataaagattctccttccacgtaggcgaaagaaac4800

gttaacacaccctggataacgatgatctggagatccgttcaacgtggtatgttcagcgga4860

taatagacctttgactaatttatcggatagtcttttgatgtgagcttggtcgttgtc4917

2

9008

dna

artificial

敲除盒片段2的核苷酸序列

2

acgcagataattccaggtattttgaagcagaacttttatttatcatcgaattgactattg60

cattatttctattttgcaaagaggagaaagaattaggaaagttcatacttcaaaaagttt120

tccaactttctcacacgaaaggcctcacgaaaaggactgttcgtagaatgctaacataca180

aaattttgttaatttcgttatgtgcggatcagacggagtacttgtccaaattaataaacg240

atgagctgttaaaaaagggggatatttttacccaaaaattttttgcaactaatcaaggta300

aggaatttttgaagagactattttcattgaccgaatcagagttttatagaggatttttac360

taggaaatgagaatttttggaaatttttaagaaaagttacagcaatgaaagagcagagcg420

agagcatttttgaatatttaaatgaatcgatcaagacagacagcaatattttgacaaatg480

agaacttcatgtgggtcctaggactattagatgaaatttcatcaatgggtgccgttggaa540

atcactgggaaatagaatacaagaaattgacagaaagtggtcataaaattgataaggaga600

atccatacaagaaatcgatcgaattatcattgaaatccattcaactaacatcacacttgc660

tggaagataataacgatctgcgtaaaaacgagatattcgctattattcaagctttggcac720

atcaatgcatcaatccgtgtaagcagataagtgaatttgcagtggtaacgctagagcaga780

cgctcatcaataaaatcgaaattccaactaatgagatggaatcggtagaagaattaattg840

agggcggattactaccgttgctaaattcgagtgaaacacaggaagaccagaaaatcctca900

tttcatccatattaacaataatttcaaatgtttatttgcattatttgaaactagggaaga960

caagcaacgaaacgtttttgaaaattttgagtattttcaataaatttgtagaggactcag1020

atattgaaaaaaagctacagcaattaatacttgataagaagagtattgagaagggcaacg1080

gttcatcatctcatggatctgcacatgaacaaacaccagagtcaaacgacgttgaaattg1140

aggctactgcgccaattgatgacaatacagacgatgataacaaaccgaagttatctgatg1200

tagaaaaggattaaagatgctaagagatagtgatgatatttcataaataatgtaattcta1260

tatatgttaattaccttttttgcgaggcatatttatggtgaaggataagttttgaccatc1320

aaagaaggttaatgtggctgtggtttcagggtccataaagcttttcaattcatcattttt1380

tttttattcttttttttgatttcggtttccttgaaatttttttgattcggtaatctccga1440

acagaaggaagaacgaaggaaggagcacagacttagattggtatatatacgcatatgtag1500

tgttgaagaaacatgaaattgcccagtattcttaacccaactgcacagaacaaaaacctg1560

caggaaacgaaggtacccaattcgccctatagtgagtcgtattacgcgcgctcactggcc1620

gtcgttttacaacgtcgtgactgggaaaaccctggcgttacccaacttaatcgccttgca1680

gcacatccccctttcgccagctggcgtaatagcgaagaggcccgcaccgatcgcccttcc1740

caacagttgcgcagcctgaatggcgaatggcgcgacgcgccctgtagcggcgcattaagc1800

gcggcgggtgtggtggttacgcgcagcgtgaccgctacacttgccagcgccctagcgccc1860

gctcctttcgctttcttcccttcctttctcgccacgttcgccggctttccccgtcaagct1920

ctaaatcgggggctccctttagggttccgatttagtgctttacggcacctcgaccccaaa1980

aaacttgattagggtgatggttcacgtagtgggccatcgccctgatagacggtttttcgc2040

cctttgacgttggagtccacgttctttaatagtggactcttgttccaaactggaacaaca2100

ctcaaccctatctcggtctattcttttgatttataagggattttgccgatttcggcctat2160

tggttaaaaaatgagctgatttaacaaaaatttaacgcgaattttaacaaaatattaacg2220

tttacaatttcctgatgcggtattttctccttacgcatctgtgcggtatttcacaccgca2280

tagatccgtcgagttcaagagaaaaaaaaagaaaaagcaaaaagaaaaaaggaaagcgcg2340

cctcgttcagaatgacacgtatagaatgatgcattaccttgtcatcttcagtatcatact2400

gttcgtatacatacttactgacattcataggtatacatatatacacatgtatatatatcg2460

tatgctgcagctttaaataatcggtgtcactacataagaacacctttggtggagggaaca2520

tcgttggtaccattgggcgaggtggcttctcttatggcaaccgcaagagccttgaacgca2580

ctctcactacggtgatgatcattcttgcctcgcagacaatcaacgtggagggtaattctg2640

ctagcctctgcaaagctttcaagaaaatgcgggatcatctcgcaagagagatctcctact2700

ttctccctttgcaaaccaagttcgacaactgcgtacggcctgttcgaaagatctaccacc2760

gctctggaaagtgcctcatccaaaggcgcaaatcctgatccaaacctttttactccacgc2820

gccagtagggcctctttaaaagcttgaccgagagcaatcccgcagtcttcagtggtgtga2880

tggtcgtctatgtgtaagtcaccaatgcactcaacgattagcgaccagccggaatgcttg2940

gccagagcatgtatcatatggtccagaaaccctatacctgtgtggacgttaatcacttgc3000

gattgtgtggcctgttctgctactgcttctgcctctttttctgggaagatcgagtgctct3060

atcgctaggggaccaccctttaaagagatcgcaatctgaatcttggtttcatttgtaata3120

cgctttactagggctttctgctctgtcatctttgccttcgtttatcttgcctgctcattt3180

tttagtatattcttcgaagaaatcacattactttatataatgtataattcattatgtgat3240

aatgccaatcgctaagaaaaaaaaagagtcatccgctaggggaaaaaaaaaaatgaaaat3300

cattaccgaggcataaaaaaatatagagtgtactagaggaggccaagagtaatagaaaaa3360

gaaaattgcgggaaaggactgtgttatgacttccctgactaatgccgtgttcaaacgata3420

cctggcagtgactcctagcgctcaccaagctcttaaaacgggaatttatggtgcactctc3480

agtacaatctgctctgatgccgcatagttaagccagccccgacacccgccaacacgcgct3540

gacgcgccctgacgggcttgtctgctcccggcatccgcttacagacaagctgtgagcaaa3600

ttaaagccttcgagcgtcccaaaaccttctcaagcaaggttttcagtataatgttacatg3660

cgtacacgcgtttgtacagaaaaaaaagaaaaatttgaaatataaataacgttcttaata3720

ctaacataactataaaaaaataaatagggacctagacttcaggttgtctaactccttcct3780

tttcggttagagcggatgtggggggagggcgtgaatgtaagcgtgacataactaattaca3840

tgatatcgacaaaggaaaaggggcctgttcaaataacattagaattatgaactctaaaaa3900

cttctggcaacaaattgttaataaaagaagctggagtttgaccgtttgattgtggaaaga3960

aatagaaaaacatgaacataacccagaatgcagctcttaaccaaaaccaaactggaaatg4020

ttgattcagcatctggttcttccaatggtgcttgagtgttttccatttcgatctttcttg4080

gctttggtgttttaccgaaagacttaacaacttgatcagaagtcaactttgaacctgcca4140

aaacaattggaacacctgtacctggatgagttgaagcaccaacgaaaaacaaattatcgt4200

atctacctgtagaatccttagttgatggtctgaaccacaaaacttgcaaaacatcatgag4260

acaaacccaagattgaacctctccacaaattaaacttagattgccaaactgctggatcgt4320

taacttgttcatgttcgatcaaatcagcgaagtttgacatgcccaatcttctttcaataa4380

ctgccaaaaccatctttcttgccttatcaaccatagctggataattttctgtagatgcgt4440

caccagtttttgacttcatatgaccgattggaaccaaaacaataacagaatctttaccat4500

ctggtgcagcagatggatcgattcttgatggaacgttaacgtagaaagaagcttctgatg4560

gcaaaccgaaatccttaaaaatttcatcgaatgattcttggtatgcttcagccaagaaaa4620

tgttatgaacatccaattgtggaaccttagtagacattgaccagtagaaagagatagatg4680

aagatgtcaatttcttagaagccaatgtgttttgagtccatctacatggtggtaacaaat4740

tatggtatgcgtaaaccaaatcagcattacaaacaactgcatcagcatcgatgatatgac4800

cgttttccaatgtaacaccagtaacttgctttgttgcatcatcagtattaatctttgcaa4860

ctggagcgttatatatgaattcagcatcgtacttttgctttgcgatagcttccaactttt4920

gaacaaccatattaaaaccacctcttggataccaaataccttcagcaaattcagtgtatt4980

gcaacaaagagtaaactgctggagcatcgtatggtgacatgcccatgtacattgtttgga5040

aagtaaaagccattctcattttcttagtcttgaagtacttagatgctctatcatagattt5100

taccgaacaaatgcaatctaaaaatttctggtgcgtatttaattctgatcaaatcccaga5160

tagattcgaaatttttcttcaaagcgatcaatgtacctgattcgtaatggatatgagttt5220

ccttcatgaaatctaaaaatctaccgaaacccaatggaccttcaactctatccaattcag5280

ctttcattctagtcaaatctgaagacaattggatagattcaccatcatcgaaatgaacct5340

tgtagttgttatcacatctcaacaattccaaatgatcttggattctttcatccaaatctg5400

cgaaagcatcttcgaagtactttggcatcaaatacaaagatggaccttgatcgaatctat5460

gaccttgatgatggatcaatgaacatctaccaccaccaaaatcattcttttcaacaactg5520

taactttaaaaccttctctagccaatcttgcagctgttgcagtaccaccaacaccagcac5580

cgatgataacgatatgtttcttagacatttatattgaattttcaaaaattcttacttttt5640

ttttggatggacgcaaagaagtttaataatcatattacatggcaataccaccatatacat5700

atccatatctaatcttacttatatgttgtggaaatgtaaagagccccattatcttagcct5760

aaaaaaaccttctctttggaactttcagtaatacgcttaactgctcattgctatattgaa5820

gtacggattagaagccgccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtgc5880

gtcctggtcttcaccggtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctcc5940

gaacaataaagattctacaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagta6000

acctggccccacaaaccttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatgc6060

gattagttttttagccttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatct6120

attaacagatatataaatgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacattt6180

tcggtttgtattacttcttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatat6240

acctctatactttaacgtcaaggagaaaaaactataatgtcacaaccaccattattggac6300

cacgctacacaaactatggcaaacggttctaaatctttcgctactgctgctaaattattc6360

gacccagcaacaagaagatctgtattgatgttgtacacctggtgtagacattgcgatgac6420

gttatagatgaccaaactcacggttttgcttcagaagctgcagccgaagaagaagctaca6480

caaagattggcaagattaagaactttgacattagctgcattcgaaggtgccgaaatgcaa6540

gatccagcttttgccgctttccaagaagttgcattaacccatggtattactcctagaatg6600

gctttggatcacttagacggttttgcaatggatgtcgcccaaacaagatacgtaaccttc6660

gaagacactttaagatattgttaccatgtcgccggtgttgtcggtttgatgatggctaga6720

gtaatgggtgttagagatgaaagagttttagatagagcatgtgacttgggtttagccttc6780

caattgacaaacatagctagagatataatagatgacgcagccatagacagatgctatttg6840

ccagctgaatggttacaagatgcaggtttgactcctgaaaattacgctgcaagagaaaac6900

agagccgctttagccagagttgctgaaagattgatagatgcagccgaaccatattacatc6960

tcttcacaagctggtttgcatgatttgccacctagatgcgcatgggccattgctaccgca7020

agatctgtttacagagaaatcggtattaaagtcaaggctgcaggtggttccgcatgggat7080

agaagacaacacacttctaaaggtgaaaagatcgctatgttgatggccgctcctggtcaa7140

gttattagagcaaagaccaccagagtcaccccaagaccagccggtttatggcaaagacct7200

gtttaaattgaattgaattgaaatcgatagatcaatttttttcttttctctttccccatc7260

ctttacgctaaaataatagtttattttattttttgaatattttttatttatatacgtata7320

tatagactattatttatcttttaatgattattaagatttttattaaaaaaaattacgctc7380

ctcttttaatgcctttatgcagttttttttcccattcgatatttctatgttcgggttcag7440

cgtattttaagtttaataactcgaaaattctgcgttcgttgtaaatgcatgtatactaaa7500

ctcacaaattagagcttcaatttaattatatcagttattacccgggaatctcggtcgtaa7560

tgatttctataatgacgaaaaaaaaaaaattggaaagaaaaagcttcatggcctttataa7620

aaaggaactatccaatacctcgccagaaccaagtaacagtattttacggggcacaaatca7680

agaacaataagacaggactgtaaagatggacgcattgaactccaaagaacaacaagagtt7740

ccaaaaagtagtggaacaaaagcaaatgaaggatttcatgcgtttgtactctaatctggt7800

agaaagatgtttcacagactgtgtcaatgacttcacaacatcaaagctaaccaataagga7860

acaaacatgcatcatgaagtgctcagaaaagttcttgaagcatagcgaacgtgtagggca7920

gcgtttccaagaacaaaacgctgccttgggacaaggcttgggccgataaggtgtactggc7980

gtatatatatctaattatgtatctctggtgtagcccatttttagcatgtaaatataaaga8040

gaaaccatatctaatctaaccaaatccaaacaaaattcaatagttactatcgcttttttc8100

tttctgtatcgcaaataagtgaaaattaaaaaagaaagattaaattggaagttggatatg8160

ggctggaacagcagcagtaatcggtatcgggttcgccactaatgacgtcctacgattgca8220

ctcaacagaccttgacgctcacgccgtagcgggcgacaagtcaaacggaacaaccgttgc8280

cgttcccatcggagtccgacctaggccgaactccgtgaatttctgataacaacggtcggt8340

aaagactggttccccagtatatttcttctctcaggagcaggggccaatgccaaaagcgac8400

attaacccggaggacaaggctccactgtgttccaccgaatttcccacctgataatatctg8460

ataacccgcccataggtggggatccttctgtaaacaggtttcttaatcgtaggaattacc8520

actgttccactgccaatcgcagctcccagagtttcgttcccagccgcgagcaccacagcg8580

taccatgtgcgccacgaggcctcaaacgtaaaacaatcgaaacgaaaagaaacagactat8640

aggggagtatagagacagccggccaataagaagaggaaaaagaaatactagcgtttatca8700

atgtgggtcgttaacatatcctgttgacaatgattacaggttaaaaggtagcgtaagtga8760

atattaactatggatattcttatacttagataagagacatataaaacacacgatgattga8820

ttgatttttatgaccaatatatgtaattcgtaattcagatagtttttatacttttaatgt8880

gtgccgaaccatattactagtatatgtaactaccatgttatgttcaattggcagatcttt8940

aactcggctttagttatccaagttacttgcaatatttccttctgcgagagtacatttgcc9000

cttaaacg9008

3

7319

dna

artificial

敲除盒片段3的核苷酸序列

3

ttcaccgattctgagcgaatcacaggtgagaaatttggattcgaaataaacctaaaaaaa60

ctatccaataaggcttccataggcttcgtatttcccgaccattccaattggaaaaattga120

gcgctgtcttccatgatcttagataaagccttaatacttggctcatttccatttgaggtt180

agctctagcaactggtaaagcatttgaagaccagttggatcatctctatgctgcctatag240

taagtggaaaataaagtagtaataacgatacctgtcacgttcgaaacgagattattgttc300

gaattataaaggccatgtataatgtttgatttgacgtatcctaagtcgtggctattgctc360

ttaattaaattgtttccccctagcattgaatttttcaacagcataccggcggtagctcta420

ttgttctgaagatcctgtagggagtagtgttgcttcaatacatcatcagattcgccttca480

attaaaatataacacaaataattgagaaattcaggttgcagctggaagttctccatagct540

tccattgcgttattacgaatctctggatttggtgacatacagttctgtaaaagagttgct600

agttgcaacacatagtcttcggcgggcttccatgtcgatgccatctttattcacttaact660

actgctaacaattctggaaaccaaagactgcggaatattctgatatgtattactactatt720

cgctgctcttctgcataattaatactgaaaagtttttcatacttttaaacataacctttt780

tttaagcaaaactctatgacccggattagaaaactacgaaaagagggtaataacataggt840

gcaggatttccatcgataacgacgccgacaatgagccttgctgcaacatccaattaggac900

taataactatcgtaggaatttctacgtaataaacttcaacagagcctaaaatttgaaaat960

aaataatctagaggggaaacttaaagaaattctattcttgtcaataaagtggaaatctgt1020

cagatgtcacagtttctttatttgtgacacatattttcaacataaattcaggcattagtg1080

ctgtaagcacaaaaagttgtggcgatatgaatattccagattttacttacaagctgcatt1140

gtagtcttacaattctttttttctttttttttttttatggaaaggaccactcttacataa1200

ctagaatagcattaagaatcagatttacagataaagatgacattattttatatatatatt1260

gtcactccgttcaagtcgacaaccaataaaaaatttaaaaaaagccaggcagttaataga1320

aaaaatatgatatgaatgaatattccactttcttttcacagcttgtctgtaagcggatgc1380

cgggagcagacaagcccgtcagggcgcgtcagcgggtgttggcgggtgtcggggctggct1440

taactatgcggcatcagagcagattgtactgagagtgcaccataaacgacattactatat1500

atataatataggaagcatttaatagacagcatcgtaatatatgtgtactttgcagttatg1560

acgccagatggcagtagtggaagatattctttattgaaaaatagcttgtcaccttacgta1620

caatcttgatccggagcttttctttttttgccgattaagaattaattcggtcgaaaaaag1680

aaaaggagagggccaagagggagggcattggtgactattgagcacgtgagtatacgtgat1740

taagcacacaaaggcagcttggagtatgtctgttattaatttcacaggtagttctggtcc1800

attggtgaaagtttgcggcttgcagagcacagaggccgcagaatgtgctctagattccga1860

tgctgacttgctgggtattatatgtgtgcccaatagaaagagaacaattgacccggttat1920

tgcaaggaaaatttcaagtcttgtaaaagcatataaaaatagttcaggcactccgaaata1980

cttggttggcgtgtttcgtaatcaacctaaggaggatgttttggctctggtcaatgatta2040

cggcattgatatcgtccaactgcatggagatgagtcgtggcaagaataccaagagttcct2100

cggtttgccagttattaaaagactcgtatttccaaaagactgcaacatactactcagtgc2160

agcttcacagaaacctcattcgtttattcccttgtttgattcagaagcaggtgggacagg2220

tgaacttttggattggaactcgatttctgactgggttggaaggcaagagagccccgaaag2280

cttacattttatgttagctggtggactgacgccagaaaatgttggtgatgcgcttagatt2340

aaatggcgttattggtgttgatgtaagcggaggtgtggagacaaatggtgtaaaagactc2400

taacaaaatagcaaatttcgtcaaaaatgctaagaaataggttattactgagtagtattt2460

atttaagtattgtttgtgcacttgcctatgcggtgtgaaataccgcacagatgcgtaagg2520

agaaaataccgcatcaggaaattgtaaacgttaatattttgttaaaattcgcgttaaatt2580

tttgttaaatcagctcattttttaaccaataggccgaaatcggcaaaatcccttataaat2640

caaaagaatagaccgagatagggttgagtgttgttccagtttggaacaagagtccactat2700

taaagaacgtggactccaacgtcaaagggcgaaaaaccgtctatcagggcgatggcccac2760

tacgtgaaccatcaccctaatcaagttttttggggtcgaggtgccgtaaagcactaaatc2820

ggaaccctaaagggagcccccgatttagagcttgacggggaaagccggcgaacgtggcga2880

gaaaggaagggaagaaagcgaaaggagcgggcgctagggcgctggcaagtgtagcggtca2940

cgctgcgcgtaaccaccacacccgccgcgcttaatgcgccgctacagggcgcgtcgcgcc3000

attcgccattcaggctgcgcaactgttgggaagggcgatcggtgcgggcctcttcgctat3060

tacgccagctggcgaaagggggatgtgctgcaaggcgattaagttgggtaacgccagggt3120

tttcccagtcacgacgttgtaaaacgacggccagtgagcgcgcgtaatacgactcactat3180

agggcgaattgggtactacacggtccaatggataaacattttttatcaacactatgatat3240

ataaatataatagtttttcgtatatatattcctttttttggtcaatttttgaaattttcg3300

tagaaaagggagagacaaaacacattatatcaatgaaaacgtacaaaaagtagataaagt3360

cagtgcttaaacacgtcttttccttaaaaatactttattatttttattttattgagaggg3420

tggtttaaaaatagaaatagagagagaggtacatacataaacatacgcgcacaaaagcag3480

agattaggatttaatgcaggtgacggacccatctttcaaacgatttatatcagtggcgtc3540

caaattgttaggttttgttggttcagcaggtttcctgttgtgggtcatatgactttgaac3600

caaatggccggctgctagggcagcacataaggataattcacctgccaagacggcacaggc3660

aactattcttgctaattgacgtgcgttggtaccaggagcggtagcatgcgggcctcttac3720

acctaataagtccaacatggcaccttgtggttctagaacagtaccaccaccgatggtacc3780

tacttcgatggatggcatggatacggaaattctcaaatcaccgtccacttctttcatcaa3840

tgttatacagttggaactttcaacattttgtgcaggatcttgtcctaatgccaagaaaac3900

agctgtcactaaattagctgcatgtgcgttaaatccaccaacagacccagccattgcaga3960

tccaaccaaattcttagcaatgttcaactcaaccaatgcggaaacatcactttttaacac4020

ttttctgacaacatcaccaggaatagtagcttctgcgacgacactcttaccacgaccttc4080

gatccagttgatggcagctggttttttgtcggtacagtagttaccagaaacggagacaac4140

ctccatatcttcccagccatactcttctaccatttgctttaatgagtattcgacaccttt4200

agaaatcatattcatacccattgcgtcaccagtagttgttctaaatctcatgaagagtaa4260

atctcctgctagacaagtttgaatatgttgcagacgtgcaaatcttgatgtagagttaaa4320

agcttttttaattgcgttttgtccctcttctgagtctaaccatatcttacaggcaccaga4380

tcttttcaaagttgggaaacggactactgggcctcttgtcataccatccttagttaaaac4440

agttgttgcaccaccgccagcattgattgccttacagccacgcatggcagaagctaccaa4500

acaaccctctgtagttgccattggtatatgataagatgtaccatcgataaccaaggggcc4560

tataacaccaacgggcaaaggcatgtaacctataacattttcacaacaagcgccaaatac4620

gcggtcgtagtcataatttttatatggtaaacgatcagatgctaatacaggagcttctgc4680

caaaattgaaagagccttcctacgtaccgcaaccgctctcgtagtatcacctaatttttt4740

ctccaaagcgtacaaaggtaacttaccgtgaataaccaaggcagcgacctctttgttctt4800

caattgttttgtatttccactacttaataatgcttctaattcttctaaaggacgtatttt4860

cttatccaagctttcaatatcgcgggaatcatcttcctcactagatgatgaaggtcctga4920

tgagctcgattgcgcagatgataaacttttgactttcgatccagaaatgactgttttatt4980

ggttaaaaccatttatattgaattttcaaaaattcttactttttttttggatggacgcaa5040

agaagtttaataatcatattacatggcaataccaccatatacatatccatatctaatctt5100

acttatatgttgtggaaatgtaaagagccccattatcttagcctaaaaaaaccttctctt5160

tggaactttcagtaatacgcttaactgctcattgctatattgaagtacggattagaagcc5220

gccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccg5280

gtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattct5340

acaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaac5400

cttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagcc5460

ttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataa5520

atgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattactt5580

cttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaac5640

gtcaaggagaaaaaactatagcgcaatgattgaatagtcaaagattttttttttttaatt5700

ttttttttttcatagaactttttatttaaataaatcacgtctatatatgtatcagtataa5760

cgtaaaaaaaaaaacaccgtcagttaaacaaaacataaataaaaaaaaaaagaagtgtca5820

aatcaagtgtcaaatgtatacttcttttttttactttgttcagaacaacttctcattttt5880

ttctactcataactttagcatcacaaagtacacaataataacgagtagtaacacttttat5940

agttcatacatgcttcaactacttaataaatgattgtatgataatgttttcaatgtaaga6000

gatttcgattatccacaaactttgaaacacagggacacaattcttgatatgctttcaacc6060

gctgcgttttggatacctattcttgacataatatgactaccattttgttattgtacgtgg6120

ggcagttgacgtcttatcatatgtcaaagtcatttgcgaagttcttggcaagttgccaac6180

tgacgagatgcagtaaaaagagattgccgtcttgaaactttttgtccttttttttttccg6240

gggactctacgagaaccctttgtcctactgattaattttgtactgaatttggacaattca6300

gattttagtagacaagcgcgaggaggaaaagaaatgacagaaaaattccgatggacaaga6360

agataggaaaaaaaaaaagctttcaccgatttcctagaccggaaaaaagtcgtatgacat6420

cagaatgaaaaattttcaagttagacaaggacaaaatcaggacaaattgtaaagatatga6480

taaatcatttgattcagcgccaatttgcccttttccattttccattaaatctctgttctc6540

tcttacttatatgatgattaggtatcatctgtataaaactcctttcttaatttcactcta6600

aagcataccccatagagaagatctttcggttcgaagacattcctacgcataataagaata6660

ggagggaataatgccagacaatctatcattacatttaagcggctcttcaaaaagattgaa6720

ctctcgccaacttatggaatcttccaatgagacctttgcgccaaataatgtggatttgga6780

aaaagagtataagtcatctcagagtaatataactaccgaagtttatgaggcatcgagctt6840

tgaagaaaaagtaagctcagaaaaacctcaatacagctcattctggaagaaaatctatta6900

tgaatatgtggtcgttgacaaatcaatcttgggtgtttctattctggattcatttatgta6960

caaccaggacttgaagcccgtcgaaaaagaaaggcgggtttggtcctggtacaattattg7020

ttacttctggcttgctgaatgtttcaatatcaacacttggcaaattgcagctacaggtct7080

acaactgggtctaaattggtggcagtgttggataacaatttggattgggtacggtttcgt7140

tggtgcttttgttgttttggcctctagagttggatctgcttatcatttgtcattccctat7200

atcatctagagcatcattcggtattttcttctctttatggcctgttattaatagagtcgt7260

catggccatcgtttggtatagtgtccaagcttatattgcggcaactcccgtatcattaa7319

4

457

dna

artificial

啟動子pgal1的核苷酸序列

4

agtacggattagaagccgccgagcgggcgacagccctccgacggaagactctcctccgtg60

cgtcctggtcttcaccggtcgcgttcctgaaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctc120

cgaacaataaagattctacaatactagcttttatggttatgaagaggaaaaattggcagt180

aacctggccccacaaaccttcaaatcaacgaatcaaattaacaaccataggataataatg240

cgattagttttttagccttatttctggggtaattaatcagcgaagcgatgatttttgatc300

tattaacagatatataaatgcaaaagctgcataaccactttaactaatactttcaacatt360

ttcggtttgtattacttcttattcaaatgtcataaaagtatcaacaaaaaattgttaata420

tacctctatactttaacgtcaaggagaaaaaactata457

5

500

dna

artificial

啟動子pgal7的核苷酸序列

5

gacggtagcaacaagaatatagcacgagccgcgaagttcatttcgttacttttgatatcg60

ctcacaactattgcgaagcgcttcagtgaaaaaatcataaggaaaagttgtaaatattat120

tggtagtattcgtttggtaaagtagagggggtaatttttcccctttattttgttcataca180

ttcttaaattgctttgcctctccttttggaaagctatacttcggagcactgttgagcgaa240

ggctcattagatatattttctgtcattttccttaacccaaaaataagggaaagggtccaa300

aaagcgctcggacaactgttgaccgtgatccgaaggactggctatacagtgttcacaaaa360

tagccaagctgaaaataatgtgtagctatgttcagttagtttggctagcaaagatataaa420

agcaggtcggaaatatttatgggcattattatgcagagcatcaacatgataaaaaaaaac480

agttgaatattccctcaaaa500

6

215

dna

artificial

啟動子pgal10的核苷酸序列

6

tacttcaatatagcaatgagcagttaagcgtattactgaaagttccaaagagaaggtttt60

tttaggctaagataatggggctctttacatttccacaacatataagtaagattagatatg120

gatatgtatatggtggtattgccatgtaatatgattattaaacttctttgcgtccatcca180

aaaaaaaagtaagaatttttgaaaattcaatataa215

7

668

dna

artificial

啟動子pgal1-10的核苷酸序列

7

tatagttttttctccttgacgttaaagtatagaggtatattaacaattttttgttgatac60

ttttatgacatttgaataagaagtaatacaaaccgaaaatgttgaaagtattagttaaag120

tggttatgcagcttttgcatttatatatctgttaatagatcaaaaatcatcgcttcgctg180

attaattaccccagaaataaggctaaaaaactaatcgcattattatcctatggttgttaa240

tttgattcgttgatttgaaggtttgtggggccaggttactgccaatttttcctcttcata300

accataaaagctagtattgtagaatctttattgttcggagcagtgcggcgcgaggcacat360

ctgcgtttcaggaacgcgaccggtgaagaccaggacgcacggaggagagtcttccgtcgg420

agggctgtcgcccgctcggcggcttctaatccgtacttcaatatagcaatgagcagttaa480

gcgtattactgaaagttccaaagagaaggtttttttaggctaagataatggggctcttta540

catttccacaacatataagtaagattagatatggatatgtatatggtggtattgccatgt600

aatatgattattaaacttctttgcgtccatccaaaaaaaaagtaagaatttttgaaaatt660

caatataa668

8

668

dna

artificial

啟動子pgal10-1的核苷酸序列

8

ttatattgaattttcaaaaattcttactttttttttggatggacgcaaagaagtttaata60

atcatattacatggcaataccaccatatacatatccatatctaatcttacttatatgttg120

tggaaatgtaaagagccccattatcttagcctaaaaaaaccttctctttggaactttcag180

taatacgcttaactgctcattgctatattgaagtacggattagaagccgccgagcgggcg240

acagccctccgacggaagactctcctccgtgcgtcctggtcttcaccggtcgcgttcctg300

aaacgcagatgtgcctcgcgccgcactgctccgaacaataaagattctacaatactagct360

tttatggttatgaagaggaaaaattggcagtaacctggccccacaaaccttcaaatcaac420

gaatcaaattaacaaccataggataataatgcgattagttttttagccttatttctgggg480

taattaatcagcgaagcgatgatttttgatctattaacagatatataaatgcaaaagctg540

cataaccactttaactaatactttcaacattttcggtttgtattacttcttattcaaatg600

tcataaaagtatcaacaaaaaattgttaatatacctctatactttaacgtcaaggagaaa660

aaactata668

9

1123

dna

artificial

啟動子phxt1的核苷酸序列

9

gattttacgtatatcaactagttgacgattatgatatctttatagattttaaggtgggga60

aagaacatgagaccccagatggaattgattatggggacattgttgcctttatatataatt120

tcaatatactaattcaaatgattaaaaacgtgagggggacacgcaacttcgggtgttaag180

aaatattttgctacattagataatggtggagtttcctggcttgtcggataaaagccatca240

aatgtcgcagcagctcatgtttacgtttgctgtcttctgcccacgtcatatgagtggtat300

tcttctatcagcacttgatgaatattctttttctcatatatctgaaagacaaaagatcgg360

cacggcaatgccctgcagcatttcttcctagtttttccgaatttccattacgtattggat420

cttgtgcgcatatttgtcagtccttcacggaaaaaaaaaaagagcactgggtcacttcgg480

aaaaacttttgactcaatgcaacagtgtcataatcctttgcgctgtctctttgaagaaaa540

atcaggagtgcaagatatcgattaattccttggaagttatgatggttagtcttagtttaa600

ctctcttgaagaagggttttttcagttggtcaacactctttagaggtaaaaaaaaaaaaa660

aaaaaaaaaaaaagagaattcttcatgtaatttaccatgattctacgtttttgcaagcaa720

aaatgaagataatccgagcgcatgcgcaagtagtccctgccatgccgcttcggaaaaact780

ttcgaaaccaatactccttacatccgccttgaatttaggacctacaattgttgtctcttc840

tgcttgaaccaataagccctagaaaccttacaccctaatttgcacaagaaaactacgaaa900

aaattttttcctcttttttccgcagctccaatctcgccctgctatttttttggttcggag960

aaaaatagtcggtcgatatgaattgaagtttcattgtggccactcgtttaggaatggaat1020

aacctccgcgaatggaaaaaaagaactcggaatatcaaaaattccggctcaaaggaaaaa1080

tttgcttcaggaggggggaattatattccagatgagacctgca1123

10

1740

dna

artificial

mccrti的核苷酸序列

10

atgtctaagaaacatatcgttatcatcggtgctggtgttggtggtactgcaacagctgca60

agattggctagagaaggttttaaagttacagttgttgaaaagaatgattttggtggtggt120

agatgttcattgatccatcatcaaggtcatagattcgatcaaggtccatctttgtatttg180

atgccaaagtacttcgaagatgctttcgcagatttggatgaaagaatccaagatcatttg240

gaattgttgagatgtgataacaactacaaggttcatttcgatgatggtgaatctatccaa300

ttgtcttcagatttgactagaatgaaagctgaattggatagagttgaaggtccattgggt360

ttcggtagatttttagatttcatgaaggaaactcatatccattacgaatcaggtacattg420

atcgctttgaagaaaaatttcgaatctatctgggatttgatcagaattaaatacgcacca480

gaaatttttagattgcatttgttcggtaaaatctatgatagagcatctaagtacttcaag540

actaagaaaatgagaatggcttttactttccaaacaatgtacatgggcatgtcaccatac600

gatgctccagcagtttactctttgttgcaatacactgaatttgctgaaggtatttggtat660

ccaagaggtggttttaatatggttgttcaaaagttggaagctatcgcaaagcaaaagtac720

gatgctgaattcatatataacgctccagttgcaaagattaatactgatgatgcaacaaag780

caagttactggtgttacattggaaaacggtcatatcatcgatgctgatgcagttgtttgt840

aatgctgatttggtttacgcataccataatttgttaccaccatgtagatggactcaaaac900

acattggcttctaagaaattgacatcttcatctatctctttctactggtcaatgtctact960

aaggttccacaattggatgttcataacattttcttggctgaagcataccaagaatcattc1020

gatgaaatttttaaggatttcggtttgccatcagaagcttctttctacgttaacgttcca1080

tcaagaatcgatccatctgctgcaccagatggtaaagattctgttattgttttggttcca1140

atcggtcatatgaagtcaaaaactggtgacgcatctacagaaaattatccagctatggtt1200

gataaggcaagaaagatggttttggcagttattgaaagaagattgggcatgtcaaacttc1260

gctgatttgatcgaacatgaacaagttaacgatccagcagtttggcaatctaagtttaat1320

ttgtggagaggttcaatcttgggtttgtctcatgatgttttgcaagttttgtggttcaga1380

ccatcaactaaggattctacaggtagatacgataatttgtttttcgttggtgcttcaact1440

catccaggtacaggtgttccaattgttttggcaggttcaaagttgacttctgatcaagtt1500

gttaagtctttcggtaaaacaccaaagccaagaaagatcgaaatggaaaacactcaagca1560

ccattggaagaaccagatgctgaatcaacatttccagtttggttttggttaagagctgca1620

ttctgggttatgttcatgtttttctatttctttccacaatcaaacggtcaaactccagct1680

tcttttattaacaatttgttgccagaagtttttagagttcataattctaatgttatttga1740

11

930

dna

artificial

pacrtb的核苷酸序列

11

atgtcacaaccaccattattggaccacgctacacaaactatggcaaacggttctaaatct60

ttcgctactgctgctaaattattcgacccagcaacaagaagatctgtattgatgttgtac120

acctggtgtagacattgcgatgacgttatagatgaccaaactcacggttttgcttcagaa180

gctgcagccgaagaagaagctacacaaagattggcaagattaagaactttgacattagct240

gcattcgaaggtgccgaaatgcaagatccagcttttgccgctttccaagaagttgcatta300

acccatggtattactcctagaatggctttggatcacttagacggttttgcaatggatgtc360

gcccaaacaagatacgtaaccttcgaagacactttaagatattgttaccatgtcgccggt420

gttgtcggtttgatgatggctagagtaatgggtgttagagatgaaagagttttagataga480

gcatgtgacttgggtttagccttccaattgacaaacatagctagagatataatagatgac540

gcagccatagacagatgctatttgccagctgaatggttacaagatgcaggtttgactcct600

gaaaattacgctgcaagagaaaacagagccgctttagccagagttgctgaaagattgata660

gatgcagccgaaccatattacatctcttcacaagctggtttgcatgatttgccacctaga720

tgcgcatgggccattgctaccgcaagatctgtttacagagaaatcggtattaaagtcaag780

gctgcaggtggttccgcatgggatagaagacaacacacttctaaaggtgaaaagatcgct840

atgttgatggccgctcctggtcaagttattagagcaaagaccaccagagtcaccccaaga900

ccagccggtttatggcaaagacctgtttaa930

12

963

dna

artificial

btcarg的核苷酸序列

12

atgttgacatcttcaaaatctattgagtcttttccaaaaaatgttcaaccatatggtaag60

cactaccagaatggtttggagccagtcggtaagtctcaagaagacattttattggaacca120

ttccattacttatgttcaaacccaggtaaagatgtcagaactaaaatgattgaagctttc180

aacgcttggttgaaggtccctaaggacgatttaattgttattactagagttattgaaatg240

ttacattctgcttctttgttaattgacgatgttgaagatgattctgttttgagaaggggt300

gtcccagctgcacatcacatttatggtacaccacaaactattaattgtgcaaactacgtt360

tactttttggctttgaaagaaattgctaagttaaataaaccaaatatgattactatttac420

actgatgaattgataaatttgcatagaggtcaaggtatggaattgttctggagggataca480

ttgacatgtccaacagaaaaagaatttttggatatggttaatgataagactggaggtttg540

ttgagattagctgttaaattaatgcaagaagcatctcaatcaggtactgattatactggt600

ttagtttcaaaaattggtatacactttcaagttagagatgattatatgaatttgcagtct660

aaaaattatgctgataataaaggtttttgtgaggatttaacagaaggtaaattctctttc720

ccaattatacattctattagatctgatccatctaatagacaattgttgaacattttgaaa780

caaagatcttcttctattgaattgaaacaatttgctttgcaattattggaaaatactaat840

actttccaatattgtagagattttttgagagttttggaaaaagaagctagagaagaaatt900

aaattgttgggtggtaacattatgttggaaaagattatggatgttttgtctgttaatgaa960

taa963

13

915

dna

artificial

ino2基因的核苷酸序列

13

atgtcccaagcaactgggaacgaattactgggtatcctagatctggataacgatatagac60

tttgaaactgcttaccaaatgctcagcagtaacttcgacgaccaaatgtctgcgcacata120

catgaaaacacgtttagtgcaacttcccctcctctgttaacacacgagctcggcataatt180

cctaacgtggcaaccgtgcaaccctctcacgtagaaactatacctgccgataaccaaact240

catcatgctcctttgcatactcatgctcactatctaaatcacaaccctcatcaaccaagc300

atgggttttgatcaaacgcttggtctcaagttgtctccttccagttcggggttgttgagc360

acgaatgaatcgaatgccattgaacagtttttagacaatctaatatcacaggatatgatg420

tcttccaacgcttccatgaactccgattcacatctacatataagatcaccaaaaaagcag480

cataggtataccgaattaaatcaaagatatcctgaaacacatccacacagtaacacaggg540

gagttacccacaaacacagcagatgtgccaactgagttcaccacgagggaaggacctcat600

cagcctatcggcaatgaccactacaacccgccaccgttttcagtacctgagatacgaatc660

ccagactctgatattccagccaatatcgaggacgaccctgtgaaggtacggaaatggaaa720

cacgttcaaatggagaagatacgaagaataaacaccaaagaagcctttgaaaggctcatt780

aaatcagtaaggaccccaccaaaggaaaacgggaaaagaattcccaagcatattctttta840

acttgtgtaatgaacgatatcaagtccattagaagcgcaaatgaagcactacagcacata900

ctggatgattcctga915

14

1428

dna

artificial

gapn基因的核苷酸序列

14

atgactaagcaatacaagaactacgttaacggtgaatggaagttgtctgaaaacgaaatt60

aaaatctatgaacctgcttcaggtgcagaattaggttccgttccagctatgagtacagaa120

gaagtagattacgtttacgcttctgctaagaaagcccaacctgcttggagagcattgtca180

tatatcgaaagagctgcatacttacataaggttgctgatatattgatgagagacaaggaa240

aagattggtgcaatcttatctaaagaagtagccaagggttataaatccgctgttagtgaa300

gttgtcagaaccgctgaaattataaactacgccgctgaagaaggtttaagaatggaaggt360

gaagttttggaaggtggttctttcgaagcagcctctaaaaagaaaattgcagtagttaga420

agagaacctgtcggtttagtattggccatttcccctttcaattatccagtaaacttagct480

ggtagtaagatcgccccagctttgattgctggtaatgttatagcctttaaaccacctaca540

caaggttctatttcaggtttgttattggcagaagccttcgctgaagcaggtttgcctgct600

ggtgtttttaacacaattaccggtagaggttccgaaatcggtgactacattgtcgaacac660

caagctgtaaacttcatcaacttcactggttctacaggtataggtgaaagaatcggtaaa720

atggctggtatgagaccaattatgttagaattgggtggtaaagattctgcaatagtttta780

gaagatgccgacttagaattgaccgctaagaatatcattgccggtgcttttggttattcc840

ggtcaaagatgtactgcagtcaaaagagttttagtcatggaaagtgttgccgatgaattg900

gtcgaaaagataagagaaaaggttttggcattgactatcggtaatcctgaagatgacgcc960

gacatcactccattgatcgatacaaagtcagctgactacgttgaaggtttgattaatgat1020

gcaaacgacaagggtgcaaccgccttgactgaaattaaaagagagggtaacttaatctgc1080

ccaatcttgttcgataaggttactacagacatgagattagcttgggaagaaccatttggt1140

cctgtcttgccaataatcagagttacatctgtcgaagaagctatcgaaatatctaataag1200

tcagaatatggtttgcaagcatcaatctttacaaacgatttccctagagcctttggtatt1260

gctgaacaattggaagtaggtaccgttcatatcaacaacaagacacaaagaggtaccgat1320

aattttccattcttgggtgctaagaaatctggtgcaggtatccaaggtgtcaaatactcc1380

attgaagctatgaccactgtaaagagtgtcgtatttgatattaaataa1428

15

537

dna

artificial

pyc2基因的核苷酸序列

15

atgtatccaagggtctatgaagatttccaaaagatcagagaaacatacggtgatttatca60

gttctaccaaccaaaaatttcctagcaccagcagaacctgatgaagaaatcgaagtcacc120

atcgaacaaggtaagactttgattatcaaattgcaagctgttggtgacttaaataagaaa180

actgggcaaagagaagtgtattttgaattgaacggtgaattaagaaagatcagagttgca240

gacaagtcacaaaacatacaatctgttgctaaaccaaaggctgatgtccacgatactcac300

caaatcggtgcaccaatggctggtgttatcatagaagttaaagtacataaagggtctttg360

gtgaaaaagggcgaatcgattgctgttttgagtgccatgaaaatggaaatggttgtctct420

tcaccagcagatggtcaagttaaagatgttttcattagggatggtgaaagtgttgacgca480

tcagatttgttggttgtcctagaagaagaaaccctacccccatcccaaaaaaagtaa537

16

1923

dna

artificial

smae1基因的核苷酸序列

16

atgtggcctattcagcaatcgcgtttatattcttctaacactagatcgcataaagctacc60

acaacaagagaaaatactttccaaaagccatacagcgacgaggaggtcactaaaacaccc120

gtcggttctcgcgccagaaagatcttcgaagctcctcacccacatgccactcgtttgact180

gtagaaggtgccatagaatgtcccttggagagctttcaacttttaaactctcctttattt240

aacaagggttctgcatttacacaagaagaaagggaagcgtttaatttagaagcattgcta300

ccaccacaagtgaacactttggacgaacaactggaaagaagctacaagcagttatgctat360

ttgaagacgcccttggccaaaaacgacttcatgacgtctttgagagtacagaacaaagtc420

ctatattttgcattaataaggaaacatatcaaggaattagttcctatcatttacacccca480

accgaaggtgatgctattgctgcctattcccacaggttcagaaagccagaaggtgtgttt540

ttagacattaccgaacctgattccatcgaacgtagattggctacatacggtggagacaaa600

gatgtagactacatcgttgtgtcggattcggaaggtattctgggaattggtgaccaaggt660

atcggtggtgtacgtattgctatctccaaattggcattgatgacgctgtgcggtggtatt720

catcccggccgtgtgctacctgtgtgtttggacgtcggtactaacaacaagaaactagcc780

cgtgacgaattgtacatgggtaacaagttctccagaatcaggggtaagcaatatgacgac840

ttcttggaaaaattcatcaaggccgttaagaaagtgtatccaagcgccgttctgcatttc900

gaagatttcggtgttaagaacgctagaagattgctagaaaagtacaggtacgaattgcca960

tcattcaacgatgacattcagggcaccggtgccgtcgtgatggcctcgttgattgctgct1020

ttgaaacataccaacagagacttgaaagacaccagagtgcttatttacggtgccgggtct1080

gcgggcctcggtatcgcagaccaaattgtgaatcatatggtcacgcacggcgttgacaag1140

gaagaagcgcgcaagaaaatcttcttgatggacagacgtgggttaattctacaatcttac1200

gaggctaactccactcccgcccaacacgtatacgctaagagtgatgcggaatgggctggt1260

atcaacacccgctctttacatgatgtggtggagaacgtcaaaccaacgtgtttggttggc1320

tgctccacacaagcaggcgcattcactcaagatgtcgtagaagaaatgcacaagcacaat1380

cctagaccgatcattttcccattatccaaccctactagactacacgaagccgttcctgcc1440

gatttaatgaagtggaccaacaacaacgctcttgtagctaccggatctcctttcccacct1500

gttgacggttaccgtatctcggagaacaacaattgttactctttcccaggtatcggttta1560

ggtgccgtactatcgcgtgccaccactatcacagacaagatgatctccgctgcagtggac1620

caactagccgaattgtcgccactaagagagggcgactcgagacctgggttgctacccggc1680

ctggacaccatcaccaacacctctgcgcgtctagctaccgctgtgatcttgcaagcactc1740

gaggagggaaccgcccgtatcgagcaagaacaagtaccgggaggagctcccggcgaaact1800

gtcaaggttcctcgtgactttgacgaatgtttacagtgggtcaaagcccaaatgtgggag1860

cctgtgtacagacctatgatcaaggtccaacatgacccatcggtgcacaccaaccaattg1920

tag1923

17

1134

dna

artificial

mdh2基因的核苷酸序列

17

atgcctcactcagttacaccatccatagaacaagattcgttaaaaattgccattttaggt60

gctgccggtggtatcgggcagtcgttatcgctgcttttgaaagctcagttgcaataccag120

ttaaaggagagcaaccggagcgttacccacattcatctggctctttacgatgtcaaccaa180

gaagccatcaacggtgttaccgccgacttgtctcatatagacacccccatttccgtgtcg240

agccactctcctgcaggtggcattgagaactgtttgcataacgcttctattgttgtcatt300

cctgcaggtgttccaagaaaacctggcatgactcgtgatgacttatttaacgtgaatgct360

ggtatcattagccagctcggtgattctattgcagaatgttgtgatctttccaaggtcttc420

gttcttgtcatttccaaccctgttaattctttagtcccagtgatggtttctaacattctt480

aagaaccatcctcagtctagaaattccggcattgaaagaaggatcatgggtgtcaccaag540

ctcgacattgtcagagcgtccacttttctacgtgagataaacattgagtcagggctaact600

cctcgtgttaactccatgcctgacgtccctgtaattggcgggcattctggcgagactatt660

attccgttgttttcacagtcaaacttcctatcgagattaaatgaggatcaattgaaatat720

ttaatacatagagtccaatacggtggtgatgaagtggtcaaggccaagaacggtaaaggt780

agtgctaccttatcgatggcccatgccggttataagtgtgttgtccaatttgtttctttg840

ttattgggtaacattgagcagatccatggaacctactatgtgccattaaaagatgcgaac900

aacttccccattgctcctggggcagatcaattattgcctctggtggacggtgcagactac960

tttgccataccattaactattactacaaagggtgtttcctatgtggattatgacatcgtt1020

aataggatgaacgacatggaacgcaaccaaatgttgccaatttgcgtctcccagttaaag1080

aaaaatatcgataagggcttggaattcgttgcatcgagatctgcatcatcttaa1134

18

1245

dna

artificial

pos5基因的核苷酸序列

18

atgtttgtcagggttaaattgaataaaccagtaaaatggtataggttctatagtacgttg60

gattcacattccctaaagttacagagcggctcgaagtttgtaaaaataaagccagtaaat120

aacttgaggagtagttcatcagcagatttcgtgtccccaccaaattccaaattacaatct180

ttaatctggcagaaccctttacaaaatgtttatataactaaaaaaccatggactccatcc240

acaagagaagcgatggttgaattcataactcatttacatgagtcataccccgaggtgaac300

gtcattgttcaacccgatgtggcagaagaaatttcccaggatttcaaatctcctttggag360

aatgatcccaaccgacctcatatactttatactggtcctgaacaagatatcgtaaacaga420

acagacttattggtgacattgggaggtgatgggactattttacacggcgtatcaatgttc480

ggaaatacgcaagttcctccggttttagcatttgctctgggcactctgggctttctatta540

ccgtttgattttaaggagcataaaaaggtctttcaggaagtaatcagctctagagccaaa600

tgtttgcatagaacacggctagaatgtcatttgaaaaaaaaggatagcaactcatctatt660

gtgacccatgctatgaatgacatattcttacataggggtaattcccctcatctcactaac720

ctggacattttcattgatggggaatttttgacaagaacgacagcagatggtgttgcattg780

gccactccaacgggttccacagcatattcattatcagcaggtggatctattgtttcccca840

ttagtccctgctattttaatgacaccaatttgtcctcgctctttgtcattccgaccactg900

attttgcctcattcatcccacattaggataaagataggttccaaattgaaccaaaaacca960

gtcaacagtgtggtaaaactttctgttgatggtattcctcaacaggatttagatgttggt1020

gatgaaatttatgttataaatgaggtcggcactatatacatagatggtactcagcttccg1080

acgacaagaaaaactgaaaatgactttaataattcaaaaaagcctaaaaggtcagggatt1140

tattgtgtcgccaagaccgagaatgactggattagaggaatcaatgaacttttaggattc1200

aattctagctttaggctgaccaagagacagactgataatgattaa1245

19

1533

dna

artificial

pnta基因的核苷酸序列

19

atgcgaattggcataccaagagaacggttaaccaatgaaacccgtgttgcagcaacgcca60

aaaacagtggaacagctgctgaaactgggttttaccgtcgcggtagagagcggcgcgggt120

caactggcaagttttgacgataaagcgtttgtgcaagcgggcgctgaaattgtagaaggg180

aatagcgtctggcagtcagagatcattctgaaggtcaatgcgccgttagatgatgaaatt240

gcgttactgaatcctgggacaacgctggtgagttttatctggcctgcgcagaatccggaa300

ttaatgcaaaaacttgcggaacgtaacgtgaccgtgatggcgatggactctgtgccgcgt360

atctcacgcgcacaatcgctggacgcactaagctcgatggcgaacatcgccggttatcgc420

gccattgttgaagcggcacatgaatttgggcgcttctttaccgggcaaattactgcggcc480

gggaaagtgccaccggcaaaagtgatggtgattggtgcgggtgttgcaggtctggccgcc540

attggcgcagcaaacagtctcggcgcgattgtgcgtgcattcgacacccgcccggaagtg600

aaagaacaagttcaaagtatgggcgcggaattcctcgagctggattttaaagaggaagct660

ggcagcggcgatggctatgccaaagtgatgtcggacgcgttcatcaaagcggaaatggaa720

ctctttgccgcccaggcaaaagaggtcgatatcattgtcaccaccgcgcttattccaggc780

aaaccagcgccgaagctaattacccgtgaaatggttgactccatgaaggcgggcagtgtg840

attgtcgacctggcagcccaaaacggcggcaactgtgaatacaccgtgccgggtgaaatc900

ttcactacggaaaatggtgtcaaagtgattggttataccgatcttccgggccgtctgccg960

acgcaatcctcacagctttacggcacaaacctcgttaatctgctgaaactgttgtgcaaa1020

gagaaagacggcaatatcactgttgattttgatgatgtggtgattcgcggcgtgaccgtg1080

atccgtgcgggcgaaattacctggccggcaccgccgattcaggtatcagctcagccgcag1140

gcggcacaaaaagcggcaccggaagtgaaaactgaggaaaaatgtacctgctcaccgtgg1200

cgtaaatacgcgttgatggcgctggcaatcattctttttggctggatggcaagcgttgcg1260

ccgaaagaattccttgggcacttcaccgttttcgcgctggcctgcgttgtcggttattac1320

gtggtgtggaatgtatcgcacgcgctgcatacaccgttgatgtcggtcaccaacgcgatt1380

tcagggattattgttgtcggagcactgttgcagattggccagggcggctgggttagcttc1440

cttagttttatcgcggtgcttatagccagcattaatattttcggtggcttcaccgtgact1500

cagcgcatgctgaaaatgttccgcaaaaattaa1533

20

1389

dna

artificial

pntb基因的核苷酸序列

20

atgtctggaggattagttacagctgcatacattgttgccgcgatcctgtttatcttcagt60

ctggccggtctttcgaaacatgaaacgtctcgccagggtaacaacttcggtatcgccggg120

atggcgattgcgttaatcgcaaccatttttggaccggatacgggtaatgttggctggatc180

ttgctggcgatggtcattggtggggcaattggtatccgtctggcgaagaaagttgaaatg240

accgaaatgccagaactggtggcgatcctgcatagcttcgtgggtctggcggcagtgctg300

gttggctttaacagctatctgcatcatgacgcgggaatggcaccgattctggtcaatatt360

cacctgacggaagtgttcctcggtatcttcatcggggcggtaacgttcacgggttcggtg420

gtggcgttcggcaaactgtgtggcaagatttcgtctaaaccattgatgctgccaaaccgt480

cacaaaatgaacctggcggctctggtcgtttccttcctgctgctgattgtatttgttcgc540

acggacagcgtcggcctgcaagtgctggcattgctgataatgaccgcaattgcgctggta600

ttcggctggcatttagtcgcctccatcggtggtgcagatatgccagtggtggtgtcgatg660

ctgaactcgtactccggctgggcggctgcggctgcgggctttatgctcagcaacgacctg720

ctgattgtgaccggtgcgctggtcggttcttcgggggctatcctttcttacattatgtgt780

aaggcgatgaaccgttcctttatcagcgttattgcgggtggtttcggcaccgacggctct840

tctactggcgatgatcaggaagtgggtgagcaccgcgaaatcaccgcagaagagacagcg900

gaactgctgaaaaactcccattcagtgatcattactccggggtacggcatggcagtcgcg960

caggcgcaatatcctgtcgctgaaattactgagaaattgcgcgctcgtggtattaatgtg1020

cgtttcggtatccacccggtcgcggggcgtttgcctggacatatgaacgtattgctggct1080

gaagcaaaagtaccgtatgacatcgtgctggaaatggacgagatcaatgatgactttgct1140

gataccgataccgtactggtgattggtgctaacgatacggttaacccggcggcgcaggat1200

gatccgaagagtccgattgctggtatgcctgtgctggaagtgtggaaagcgcagaacgtg1260

attgtctttaaacgttcgatgaacactggctatgctggtgtgcaaaacccgctgttcttc1320

aaggaaaacacccacatgctgtttggtgacgccaaagccagcgtggatgcaatcctgaaa1380

gctctgtaa1389

21

1047

dna

artificial

adh2基因的核苷酸序列

21

atgtctattccagaaactcaaaaagccattatcttctacgaatccaacggcaagttggag60

cataaggatatcccagttccaaagccaaagcccaacgaattgttaatcaacgtcaagtac120

tctggtgtctgccacaccgatttgcacgcttggcatggtgactggccattgccaactaag180

ttaccattagttggtggtcacgaaggtgccggtgtcgttgtcggcatgggtgaaaacgtt240

aagggctggaagatcggtgactacgccggtatcaaatggttgaacggttcttgtatggcc300

tgtgaatactgtgaattgggtaacgaatccaactgtcctcacgctgacttgtctggttac360

acccacgacggttctttccaagaatacgctaccgctgacgctgttcaagccgctcacatt420

cctcaaggtactgacttggctgaagtcgcgccaatcttgtgtgctggtatcaccgtatac480

aaggctttgaagtctgccaacttgagagcaggccactgggcggccatttctggtgctgct540

ggtggtctaggttctttggctgttcaatatgctaaggcgatgggttacagagtcttaggt600

attgatggtggtccaggaaaggaagaattgtttacctcgctcggtggtgaagtattcatc660

gacttcaccaaagagaaggacattgttagcgcagtcgttaaggctaccaacggcggtgcc720

cacggtatcatcaatgtttccgtttccgaagccgctatcgaagcttctaccagatactgt780

agggcgaacggtactgttgtcttggttggtttgccagccggtgcaaagtgctcctctgat840

gtcttcaaccacgttgtcaagtctatctccattgtcggctcttacgtggggaacagagct900

gataccagagaagccttagatttctttgccagaggtctagtcaagtctccaataaaggta960

gttggcttatccagtttaccagaaatttacgaaaagatggagaagggccaaattgctggt1020

agatacgttgttgacacttctaaataa1047

22

1959

dna

artificial

acs6基因的核苷酸序列

22

atgtctcagactcacaagcatgctattcctgctaacatagctgacagatgcttaataaat60

ccagaacagtatgaaactaaatacaagcaatctataaacgatcctgacactttctgggga120

gagcagggtaagatattggactggattacaccataccaaaaggtcaagaacacttcattt180

gctcctggtaatgtttctattaaatggtacgaggacggtacattaaacttagcagcaaac240

tgcttggacaggcacttgcaagagaacggagacagaactgcaataatttgggagggtgac300

gacgcatctcaatctaagcacatatcatacagagagttacacagagacgtttgcagattc360

gctaacacattgttggatttgggaataaagaaaggtgacgttgttgcaatttatatgcct420

atggttcctgaggctgctgtcgctatgttggcttgcgcaaggataggagctgtccattct480

gtcatttttggtggtttttcacctgaggcaatagcaggtaggataattgattcatcttca540

aggttggtcataactgcagatgagggagtcagggcaggaagatctattccattgaagaag600

aacgttgacgatgcattgaagaacccaaacgttacttctgtcgagcacgtcattgtctta660

aaaagaactggaaacgacatagactggcaagagggtagggacttatggtggagggacttg720

attgagaaggcttcacctgaacaccagccagaggcaatgaatgcagaagacccattgttt780

attttatatacatctggatctacaggaaagccaaagggagtcttgcatactacaggtggt840

tacttggtctatgcagcaacaacttttaagtatgtcttcgactaccaccctggtgacatt900

tactggtgcacagctgacgttggatgggtcacaggtcactcttacttgttgtacggacct960

ttggcatgcggtgctactacattgatgttcgagggagtccctaactggcctacacctgct1020

aggatgtgccaggttgtcgacaagcaccaggtcaacatactgtacacagcaccaacagct1080

attagggcattgatggcagagggtgacaaggcaattgagggaacagacaggtcttctttg1140

agaatattgggatctgtcggtgagccaataaacccagaggcatgggagtggtactggaag1200

aagataggaaaggagaaatgtccagtcgtcgacacatggtggcagacagagacaggtgga1260

tttatgataactcctttgccaggagctatagagttgaaggctggttcagcaacaaggcca1320

ttcttcggagtccagcctgcattggtcgacaacgagggtcatccacaggaaggtgctaca1380

gagggtaacttagtcattactgactcttggcctggtcaggctaggacattgttcggtgac1440

catgagaggttcgagcagacttacttttctacatttaaaaatatgtacttttctggagac1500

ggtgctagaagggatgaagatggttactattggataactggtagggtcgatgatgtctta1560

aacgtctcaggacacaggttgggaactgctgaaattgaatcagcattggtcgctcaccct1620

aagatagctgaggcagctgtcgtcggaattcctcacgcaattaagggacaggcaatttac1680

gcatacgtcactttgaaccacggtgaagagccatcaccagagttgtacgcagaggttagg1740

aactgggtcaggaaggagattggacctttggcaactccagacgtcttgcactggacagac1800

tcattgcctaagacaaggtctggaaaaataatgaggagaatattgaggaaaattgctgct1860

ggagatacttcaaacttgggtgacacttctacattggctgacccaggtgttgtcgagaaa1920

ccattggaggaaaaacaggcaatagctatgccatcttaa1959

23

1503

dna

artificial

ald6基因的核苷酸序列

23

atgactaagctacactttgacactgctgaaccagtcaagatcacacttccaaatggtttg60

acatacgagcaaccaaccggtctattcattaacaacaagtttatgaaagctcaagacggt120

aagacctatcccgtcgaagatccttccactgaaaacaccgtttgtgaggtctcttctgcc180

accactgaagatgttgaatatgctatcgaatgtgccgaccgtgctttccacgacactgaa240

tgggctacccaagacccaagagaaagaggccgtctactaagtaagttggctgacgaattg300

gaaagccaaattgacttggtttcttccattgaagctttggacaatggtaaaactttggcc360

ttagcccgtggggatgttaccattgcaatcaactgtctaagagatgctgctgcctatgcc420

gacaaagtcaacggtagaacaatcaacaccggtgacggctacatgaacttcaccacctta480

gagccaatcggtgtctgtggtcaaattattccatggaactttccaataatgatgttggct540

tggaagatcgccccagcattggccatgggtaacgtctgtatcttgaaacccgctgctgtc600

acacctttaaatgccctatactttgcttctttatgtaagaaggttggtattccagctggt660

gtcgtcaacatcgttccaggtcctggtagaactgttggtgctgctttgaccaacgaccca720

agaatcagaaagctggcttttaccggttctacagaagtcggtaagagtgttgctgtcgac780

tcttctgaatctaacttgaagaaaatcactttggaactaggtggtaagtccgcccatttg840

gtctttgacgatgctaacattaagaagactttaccaaatctagtaaacggtattttcaag900

aacgctggtcaaatttgttcctctggttctagaatttacgttcaagaaggtatttacgac960

gaactattggctgctttcaaggcttacttggaaaccgaaatcaaagttggtaatccattt1020

gacaaggctaacttccaaggtgctatcactaaccgtcaacaattcgacacaattatgaac1080

tacatcgatatcggtaagaaagaaggcgccaagatcttaactggtggcgaaaaagttggt1140

gacaagggttacttcatcagaccaaccgttttctacgatgttaatgaagacatgagaatt1200

gttaaggaagaaatttttggaccagttgtcactgtcgcaaagttcaagactttagaagaa1260

ggtgtcgaaatggctaacagctctgaattcggtctaggttctggtatcgaaacagaatct1320

ttgagcacaggtttgaaggtggccaagatgttgaaggccggtaccgtctggatcaacaca1380

tacaacgattttgactccagagttccattcggtggtgttaagcaatctggttacggtaga1440

gaaatgggtgaagaagtctaccatgcatacactgaagtaaaagctgtcagaattaagttg1500

taa1503

24

1404

dna

artificial

eute基因的核苷酸序列

24

atgaatcaacaggatattgaacaggtggtgaaagcggtactgctgaaaatgcaaagcagt60

gacacgccgtccgccgccgttcatgagatgggcgttttcgcgtccctggatgacgccgtt120

gcggcagccaaagtcgcccagcaagggttaaaaagcgtggcaatgcgccagttagccatt180

gctgccattcgtgaagcaggcgaaaaacacgccagagatttagcggaacttgccgtcagt240

gaaaccggcatggggcgcgttgaagataaatttgcaaaaaacgtcgctcaggcgcgcggc300

acaccaggcgttgagtgcctctctccgcaagtgctgactggcgacaacggcctgacccta360

attgaaaacgcaccctggggcgtggtggcttcggtgacgccttccactaacccggcggca420

accgtaattaacaacgccatcagcctgattgccgcgggcaacagcgtcatttttgccccg480

catccggcggcgaaaaaagtctcccagcgggcgattacgctgctcaaccaggcgattgtt540

gccgcaggtgggccggaaaacttactggttactgtggcaaatccggatatcgaaaccgcg600

caacgcttgttcaagtttccgggtatcggcctgctggtggtaaccggcggcgaagcggta660

gtagaagcggcgcgtaaacacaccaataaacgtctgattgccgcaggcgctggcaacccg720

ccggtagtggtggatgaaaccgccgacctcgcccgtgccgctcagtccatcgtcaaaggc780

gcttctttcgataacaacatcatttgtgccgacgaaaaggtactgattgttgttgatagc840

gtagccgatgaactgatgcgtctgatggaaggccagcacgcggtgaaactgaccgcagaa900

caggcgcagcagctgcaaccggtgttgctgaaaaatatcgacgagcgcggaaaaggcacc960

gtcagccgtgactgggttggtcgcgacgcaggcaaaatcgcggcggcaatcggccttaaa1020

gttccgcaagaaacgcgcctgctgtttgtggaaaccaccgcagaacatccgtttgccgtg1080

actgaactgatgatgccggtgttgcccgtcgtgcgcgtcgccaacgtggcggatgccatt1140

gcgctagcggtgaaactggaaggcggttgccaccacacggcggcaatgcactcgcgcaac1200

atcgaaaacatgaaccagatggcgaatgctattgataccagcattttcgttaagaacgga1260

ccgtgcattgccgggctggggctgggcggggaaggctggaccaccatgaccatcaccacg1320

ccaaccggtgaaggggtaaccagcgcgcgtacgtttgtccgtctgcgtcgctgtgtatta1380

gtcgatgcgtttcgcattgtttaa1404

25

1332

dna

artificial

erg12基因的核苷酸序列

25

atgtcattaccgttcttaacttctgcaccgggaaaggttattatttttggtgaacactct60

gctgtgtacaacaagcctgccgtcgctgctagtgtgtctgcgttgagaacctacctgcta120

ataagcgagtcatctgcaccagatactattgaattggacttcccggacattagctttaat180

cataagtggtccatcaatgatttcaatgccatcaccgaggatcaagtaaactcccaaaaa240

ttggccaaggctcaacaagccaccgatggcttgtctcaggaactcgttagtcttttggat300

ccgttgttagctcaactatccgaatccttccactaccatgcagcgttttgtttcctgtat360

atgtttgtttgcctatgcccccatgccaagaatattaagttttctttaaagtctacttta420

cccatcggtgctgggttgggctcaagcgcctctatttctgtatcactggccttagctatg480

gcctacttgggggggttaataggatctaatgacttggaaaagctgtcagaaaacgataag540

catatagtgaatcaatgggccttcataggtgaaaagtgtattcacggtaccccttcagga600

atagataacgctgtggccacttatggtaatgccctgctatttgaaaaagactcacataat660

ggaacaataaatacaaacaattttaagttcttagatgatttcccagccattccaatgatc720

ctaacctatactagaattccaaggtctacaaaagatcttgttgctcgcgttcgtgtgttg780

gtcaccgagaaatttcctgaagttatgaagccaattctagatgccatgggtgaatgtgcc840

ctacaaggcttagagatcatgacaaagttaagtaaatgtaaaggcaccgatgacgaggcc900

gtagaaactaataatgaactgtatgaacaactattggaattgataagaataaatcatgga960

ctgcttgtctcaatcggtgtttctcatcctggattagaacttattaaaaatctgagcgat1020

gatttgagaattggctccacaaaacttaccggtgctggtggcggcggttgctctttgact1080

ttgttacgaagagacattactcaagagcaaattgacagtttcaaaaagaaattgcaagat1140

gattttagttacgagacatttgaaacagacttgggtgggactggctgctgtttgttaagc1200

gcaaaaaatttgaataaagatcctaaaatcaaatccctagtattccaattatttgaaaat1260

aaaactaccacaaagcaacaaattgacgatctattattgccaggaaacacgaatttacca1320

tggacttcataa1332

26

867

dna

artificial

idi1基因的核苷酸序列

26

atgactgccgacaacaatagtatgccccatggtgcagtatctagttacgccaaattagtg60

caaaaccaaacacctgaagacattttggaagagtttcctgaaattattccattacaacaa120

agacctaatacccgatctagtgagacgtcaaatgacgaaagcggagaaacatgtttttct180

ggtcatgatgaggagcaaattaagttaatgaatgaaaattgtattgttttggattgggac240

gataatgctattggtgccggtaccaagaaagtttgtcatttaatggaaaatattgaaaag300

ggtttactacatcgtgcattctccgtctttattttcaatgaacaaggtgaattactttta360

caacaaagagccactgaaaaaataactttccctgatctttggactaacacatgctgctct420

catccactatgtattgatgacgaattaggtttgaagggtaagctagacgataagattaag480

ggcgctattactgcggcggtgagaaaactagatcatgaattaggtattccagaagatgaa540

actaagacaaggggtaagtttcactttttaaacagaatccattacatggcaccaagcaat600

gaaccatggggtgaacatgaaattgattacatcctattttataagatcaacgctaaagaa660

aacttgactgtcaacccaaacgtcaatgaagttagagacttcaaatgggtttcaccaaat720

gatttgaaaactatgtttgctgacccaagttacaagtttacgccttggtttaagattatt780

tgcgagaattacttattcaactggtgggagcaattagatgacctttctgaagtggaaaat840

gacaggcaaattcatagaatgctataa867

27

1197

dna

artificial

erg10基因的核苷酸序列

27

atgtctcagaacgtttacattgtatcgactgccagaaccccaattggttcattccagggt60

tctctatcctccaagacagcagtggaattgggtgctgttgctttaaaaggcgccttggct120

aaggttccagaattggatgcatccaaggattttgacgaaattatttttggtaacgttctt180

tctgccaatttgggccaagctccggccagacaagttgctttggctgccggtttgagtaat240

catatcgttgcaagcacagttaacaaggtctgtgcatccgctatgaaggcaatcattttg300

ggtgctcaatccatcaaatgtggtaatgctgatgttgtcgtagctggtggttgtgaatct360

atgactaacgcaccatactacatgccagcagcccgtgcgggtgccaaatttggccaaact420

gttcttgttgatggtgtcgaaagagatgggttgaacgatgcgtacgatggtctagccatg480

ggtgtacacgcagaaaagtgtgcccgtgattgggatattactagagaacaacaagacaat540

tttgccatcgaatcctaccaaaaatctcaaaaatctcaaaaggaaggtaaattcgacaat600

gaaattgtacctgttaccattaagggatttagaggtaagcctgatactcaagtcacgaag660

gacgaggaacctgctagattacacgttgaaaaattgagatctgcaaggactgttttccaa720

aaagaaaacggtactgttactgccgctaacgcttctccaatcaacgatggtgctgcagcc780

gtcatcttggtttccgaaaaagttttgaaggaaaagaatttgaagcctttggctattatc840

aaaggttggggtgaggccgctcatcaaccagctgattttacatgggctccatctcttgca900

gttccaaaggctttgaaacatgctggcatcgaagacatcaattctgttgattactttgaa960

ttcaatgaagccttttcggttgtcggtttggtgaacactaagattttgaagctagaccca1020

tctaaggttaatgtatatggtggtgctgttgctctaggtcacccattgggttgttctggt1080

gctagagtggttgttacactgctatccatcttacagcaagaaggaggtaagatcggtgtt1140

gccgccatttgtaatggtggtggtggtgcttcctctattgtcattgaaaagatatga1197

28

1191

dna

artificial

mvd1基因的核苷酸序列

28

atgaccgtttacacagcatccgttaccgcacccgtcaacatcgcaacccttaagtattgg60

gggaaaagggacacgaagttgaatctgcccaccaattcgtccatatcagtgactttatcg120

caagatgacctcagaacgttgacctctgcggctactgcacctgagtttgaacgcgacact180

ttgtggttaaatggagaaccacacagcatcgacaatgaaagaactcaaaattgtctgcgc240

gacctacgccaattaagaaaggaaatggaatcgaaggacgcctcattgcccacattatct300

caatggaaactccacattgtctccgaaaataactttcctacagcagctggtttagcttcc360

tccgctgctggctttgctgcattggtctctgcaattgctaagttataccaattaccacag420

tcaacttcagaaatatctagaatagcaagaaaggggtctggttcagcttgtagatcgttg480

tttggcggatacgtggcctgggaaatgggaaaagctgaagatggtcatgattccatggca540

gtacaaatcgcagacagctctgactggcctcagatgaaagcttgtgtcctagttgtcagc600

gatattaaaaaggatgtgagttccactcagggtatgcaattgaccgtggcaacctccgaa660

ctatttaaagaaagaattgaacatgtcgtaccaaagagatttgaagtcatgcgtaaagcc720

attgttgaaaaagatttcgccacctttgcaaaggaaacaatgatggattccaactctttc780

catgccacatgtttggactctttccctccaatattctacatgaatgacacttccaagcgt840

atcatcagttggtgccacaccattaatcagttttacggagaaacaatcgttgcatacacg900

tttgatgcaggtccaaatgctgtgttgtactacttagctgaaaatgagtcgaaactcttt960

gcatttatctataaattgtttggctctgttcctggatgggacaagaaatttactactgag1020

cagcttgaggctttcaaccatcaatttgaatcatctaactttactgcacgtgaattggat1080

cttgagttgcaaaaggatgttgccagagtgattttaactcaagtcggttcaggcccacaa1140

gaaacaaacgaatctttgattgacgcaaagactggtctaccaaaggaataa1191

29

1476

dna

artificial

erg13基因的核苷酸序列

29

atgaaactctcaactaaactttgttggtgtggtattaaaggaagacttaggccgcaaaag60

caacaacaattacacaatacaaacttgcaaatgactgaactaaaaaaacaaaagaccgct120

gaacaaaaaaccagacctcaaaatgtcggtattaaaggtatccaaatttacatcccaact180

caatgtgtcaaccaatctgagctagagaaatttgatggcgtttctcaaggtaaatacaca240

attggtctgggccaaaccaacatgtcttttgtcaatgacagagaagatatctactcgatg300

tccctaactgttttgtctaagttgatcaagagttacaacatcgacaccaacaaaattggt360

agattagaagtcggtactgaaactctgattgacaagtccaagtctgtcaagtctgtcttg420

atgcaattgtttggtgaaaacactgacgtcgaaggtattgacacgcttaatgcctgttac480

ggtggtaccaacgcgttgttcaactctttgaactggattgaatctaacgcatgggatggt540

agagacgccattgtagtttgcggtgatattgccatctacgataagggtgccgcaagacca600

accggtggtgccggtactgttgctatgtggatcggtcctgatgctccaattgtatttgac660

tctgtaagagcttcttacatggaacacgcctacgatttttacaagccagatttcaccagc720

gaatatccttacgtcgatggtcatttttcattaacttgttacgtcaaggctcttgatcaa780

gtttacaagagttattccaagaaggctatttctaaagggttggttagcgatcccgctggt840

tcggatgctttgaacgttttgaaatatttcgactacaacgttttccatgttccaacctgt900

aaattggtcacaaaatcatacggtagattactatataacgatttcagagccaatcctcaa960

ttgttcccagaagttgacgccgaattagctactcgcgattatgacgaatctttaaccgat1020

aagaacattgaaaaaacttttgttaatgttgctaagccattccacaaagagagagttgcc1080

caatctttgattgttccaacaaacacaggtaacatgtacaccgcatctgtttatgccgcc1140

tttgcatctctattaaactatgttggatctgacgacttacaaggcaagcgtgttggttta1200

ttttcttacggttccggtttagctgcatctctatattcttgcaaaattgttggtgacgtc1260

caacatattatcaaggaattagatattactaacaaattagccaagagaatcaccgaaact1320

ccaaaggattacgaagctgccatcgaattgagagaaaatgcccatttgaagaagaacttc1380

aaacctcaaggttccattgagcatttgcaaagtggtgtttactacttgaccaacatcgat1440

gacaaatttagaagatcttacgatgttaaaaaataa1476

30

1509

dna

artificial

thmg1基因的核苷酸序列

30

atggttttaaccaataaaacagtcatttctggatcgaaagtcaaaagtttatcatctgcg60

caatcgagctcatcaggaccttcatcatctagtgaggaagatgattcccgcgatattgaa120

agcttggataagaaaatacgtcctttagaagaattagaagcattattaagtagtggaaat180

acaaaacaattgaagaacaaagaggtcgctgccttggttattcacggtaagttacctttg240

tacgctttggagaaaaaattaggtgatactacgagagcggttgcggtacgtaggaaggct300

ctttcaattttggcagaagctcctgtattagcatctgatcgtttaccatataaaaattat360

gactacgaccgcgtatttggcgcttgttgtgaaaatgttataggttacatgcctttgccc420

gttggtgttataggccccttggttatcgatggtacatcttatcatataccaatggcaact480

acagagggttgtttggtagcttctgccatgcgtggctgtaaggcaatcaatgctggcggt540

ggtgcaacaactgttttaactaaggatggtatgacaagaggcccagtagtccgtttccca600

actttgaaaagatctggtgcctgtaagatatggttagactcagaagagggacaaaacgca660

attaaaaaagcttttaactctacatcaagatttgcacgtctgcaacatattcaaacttgt720

ctagcaggagatttactcttcatgagatttagaacaactactggtgacgcaatgggtatg780

aatatgatttctaaaggtgtcgaatactcattaaagcaaatggtagaagagtatggctgg840

gaagatatggaggttgtctccgtttctggtaactactgtaccgacaaaaaaccagctgcc900

atcaactggatcgaaggtcgtggtaagagtgtcgtcgcagaagctactattcctggtgat960

gttgtcagaaaagtgttaaaaagtgatgtttccgcattggttgagttgaacattgctaag1020

aatttggttggatctgcaatggctgggtctgttggtggatttaacgcacatgcagctaat1080

ttagtgacagctgttttcttggcattaggacaagatcctgcacaaaatgttgaaagttcc1140

aactgtataacattgatgaaagaagtggacggtgatttgagaatttccgtatccatgcca1200

tccatcgaagtaggtaccatcggtggtggtactgttctagaaccacaaggtgccatgttg1260

gacttattaggtgtaagaggcccgcatgctaccgctcctggtaccaacgcacgtcaatta1320

gcaagaatagttgcctgtgccgtcttggcaggtgaattatccttatgtgctgccctagca1380

gccggccatttggttcaaagtcatatgacccacaacaggaaacctgctgaaccaacaaaa1440

cctaacaatttggacgccactgatataaatcgtttgaaagatgggtccgtcacctgcatt1500

aaatcctaa1509

31

1356

dna

artificial

erg8基因的核苷酸序列

31

atgtcagagttgagagccttcagtgccccagggaaagcgttactagctggtggatattta60

gttttagatacaaaatatgaagcatttgtagtcggattatcggcaagaatgcatgctgta120

gcccatccttacggttcattgcaagggtctgataagtttgaagtgcgtgtgaaaagtaaa180

caatttaaagatggggagtggctgtaccatataagtcctaaaagtggcttcattcctgtt240

tcgataggcggatctaagaaccctttcattgaaaaagttatcgctaacgtatttagctac300

tttaaacctaacatggacgactactgcaatagaaacttgttcgttattgatattttctct360

gatgatgcctaccattctcaggaggatagcgttaccgaacatcgtggcaacagaagattg420

agttttcattcgcacagaattgaagaagttcccaaaacagggctgggctcctcggcaggt480

ttagtcacagttttaactacagctttggcctccttttttgtatcggacctggaaaataat540

gtagacaaatatagagaagttattcataatttagcacaagttgctcattgtcaagctcag600

ggtaaaattggaagcgggtttgatgtagcggcggcagcatatggatctatcagatataga660

agattcccacccgcattaatctctaatttgccagatattggaagtgctacttacggcagt720

aaactggcgcatttggttgatgaagaagactggaatattacgattaaaagtaaccattta780

ccttcgggattaactttatggatgggcgatattaagaatggttcagaaacagtaaaactg840

gtccagaaggtaaaaaattggtatgattcgcatatgccagaaagcttgaaaatatataca900

gaactcgatcatgcaaattctagatttatggatggactatctaaactagatcgcttacac960

gagactcatgacgattacagcgatcagatatttgagtctcttgagaggaatgactgtacc1020

tgtcaaaagtatcctgaaatcacagaagttagagatgcagttgccacaattagacgttcc1080

tttagaaaaataactaaagaatctggtgccgatatcgaacctcccgtacaaactagctta1140

ttggatgattgccagaccttaaaaggagttcttacttgcttaatacctggtgctggtggt1200

tatgacgccattgcagtgattactaagcaagatgttgatcttagggctcaaaccgctaat1260

gacaaaagattttctaaggttcaatggctggatgtaactcaggctgactggggtgttagg1320

aaagaaaaagatccggaaacttatcttgataaatag1356

32

1953

dna

artificial

yap1基因的核苷酸序列

32

atgagtgtgtctaccgccaagaggtcgctggatgtcgtttctccgggttcattagcggag60

tttgagggttcaaaatctcgtcacgatgaaatagaaaatgaacatagacgtactggtaca120

cgtgatggcgaggatagcgagcaaccgaagaagaagggtagcaaaactagcaaaaagcaa180

gatttggatcctgaaactaagcagaagaggactgcccaaaatcgggccgctcaaagagct240

tttagggaacgtaaggagaggaagatgaaggaattggagaagaaggtacaaagtttagag300

agtattcagcagcaaaatgaagtggaagctacttttttgagggaccagttaatcactctg360

gtgaatgagttaaaaaaatatagaccagagacaagaaatgactcaaaagtgctggaatat420

ttagcaaggcgagatcctaatttgcatttttcaaaaaataacgttaaccacagcaatagc480

gagccaattgacacacccaatgatgacatacaagaaaatgttaaacaaaagatgaatttc540

acgtttcaatatccgcttgataacgacaacgacaacgacaacagtaaaaatgtggggaaa600

caattaccttcaccaaatgatccaagtcattcggctcctatgcctataaatcagacacaa660

aagaaattaagtgacgctacagattcctccagcgctactttggattccctttcaaatagt720

aacgatgttcttaataacacaccaaactcctccacttcgatggattggttagataatgta780

atatatactaacaggtttgtgtcaggtgatgatggcagcaatagtaaaactaagaattta840

gacagtaatatgttttctaatgactttaattttgaaaaccaatttgatgaacaagtttcg900

gagttttgttcgaaaatgaaccaggtatgtggaacaaggcaatgtcccattcccaagaaa960

cccatctcggctcttgataaagaagttttcgcgtcatcttctatactaagttcaaattct1020

cctgctttaacaaatacttgggaatcacattctaatattacagataatactcctgctaat1080

gtcattgctactgatgctactaaatatgaaaattccttctccggttttggccgacttggt1140

ttcgatatgagtgccaatcattacgtcgtgaatgataatagcactggtagcactgatagc1200

actggtagcactggcaataagaacaaaaagaacaataataatagcgatgatgtactccca1260

ttcatatccgagtcaccgtttgatatgaaccaagttactaatttttttagtccgggatct1320

accggcatcggcaataatgctgcctctaacaccaatcccagcctactgcaaagcagcaaa1380

gaggatataccttttatcaacgcaaatctggctttcccagacgacaattcaactaatatt1440

caattacaacctttctctgaatctcaatctcaaaataagtttgactacgacatgtttttt1500

agagattcatcgaaggaaggtaacaatttatttggagagtttttagaggatgacgatgat1560

gacaaaaaagccgctaatatgtcagacgatgagtcaagtttaatcaagaaccagttaatt1620

aacgaagaaccagagcttccgaaacaatatctacaatcggtaccaggaaatgaaagcgaa1680

atctcacaaaaaaatggcagtagtttacagaatgctgacaaaatcaataatggcaatgat1740

aacgataatgataatgatgtcgttccatctaaggaaggctctttactaaggtgttcggaa1800

atttgggatagaataacaacacatccgaaatactcagatattgatgtcgatggtttatgt1860

tccgagctaatggcaaaggcaaaatgttcagaaagaggggttgtcatcaatgcagaagac1920

gttcaattagctttgaataagcatatgaactaa1953

33

1149

dna

artificial

pacrty(pantoeaananatis)基因的核苷酸序列

33

atgcaaccacattacgatttgatcttggttggtgcaggtttggctaacggtttgatcgct60

ttgagattgcaacaacaacaaccagatatgagaatcttgttgattgatgctgcaccacaa120

gcaggtggtaatcatacatggtcttttcatcatgatgatttgactgaatcacaacataga180

tggattgctccattagttgttcatcattggccagattaccaagttagattcccaacaaga240

agaagaaagttgaactctggttacttctgtatcacttcacaaagattcgctgaagttttg300

caaagacaatttggtccacatttgtggatggatacagctgttgcagaagttaatgcagaa360

tctgttagattgaagaaaggtcaagttattggtgctagagcagttattgatggtagaggt420

tatgctgcaaattctgctttatcagttggttttcaagcttttattggtcaagaatggaga480

ttgtctcatccacatggtttatcttcaccaattattatggatgctactgttgatcaacaa540

aacggttacagattcgtttactctttgccattgtcaccaactagattgttgatcgaagat600

acacattacatcgataacgctactttggatccagaatgtgcaagacaaaacatctgtgat660

tacgctgcacaacaaggttggcaattgcaaacattgttgagagaagaacaaggtgctttg720

ccaattactttatctggtaatgctgatgcattttggcaacaaagaccattggcttgttca780

ggtttgagagcaggtttatttcatccaactacaggttactctttgccattagctgttgca840

gttgctgatagattgtcagctttggatgtttttacatctgcatcaatccatcatgctatt900

actcattttgcaagagaaagatggcaacaacaaggtttctttagaatgttgaacagaatg960

ttgtttttagcaggtccagctgattctagatggagagttatgcaaagattttatggtttg1020

ccagaagatttgattgcaagattttacgctggtaaattgactttgacagatagattgaga1080

attttatcaggtaaaccaccagttccagttttggctgcattacaagctattatgactaca1140

catagataa1149

34

1809

dna

artificial

pbcarra(phycomycesblakesleeanus)基因的核苷酸序列

34

atgttgacatacatggaagttcatttgtacttcactttgccagttttggcattgttggca60

tttttgtacaagccatttttcactacaaaagatagattcaaatacattttcttgtgtaca120

gttgctttcgcaactgcttctccatgggataactacatcgtttaccataaggcatggtca180

tattgtccagaatgtgttacagctgttattggttacgttccattggaagaatacatgttt240

ttcatcatcatgactttgattactgttacttttacttctttgacaatgagatggacttta300

ccatctttctttattagaccagaaacaccagttttccaatctgtttgtgttagatacatt360

ccaattgttggtttcttgactattgctgcaaaagcatgggcttcttcaattccagattca420

catccattttatggtgcatgtattttgtggtatgtttgtccagttttagctttgttatgg480

attggttctggtgaatatatgttgagaagatggaaggcagttttattttcaatcgctgtt540

ccaacaattttcttgtgttgggttgatcaatacgcaattgctagaggtacttgggatatc600

tctagaagaacatcaactggtatcatggttttgccatctttgccattggaagaattcttg660

tttttcttgttgatcgatacagttttggttttcgcatcatgtgctactgatagagcacat720

gctatcgttcatatctatatcacaccaatgaaccataataaggtttctacttggtacatg780

gatttcttttatttgtgttgggcatttttgcaaactgatcaagctttatctggtgaaaca840

ttatcagatttggatgctacttggagaattttgagagaagcatctgcttcattctacaca900

gcatcttcagttttctcttttgaagctagacaagatttgggtgttttgtacggtttttgt960

agagcaactgatgatttggctgataacaacgatgtttctgttccagatagaaagaaacaa1020

ttggaattagttagaggtttcgttagacaaatgttcgattcaaagcatggtcatccagat1080

attgattggacacaatactctggttcaatcccagattcttttattgctgcttttagatct1140

tttactagattgagagatgttttggaaattaaagctgttgaagaattgttggatggttac1200

acattcgatttggaacaaagagaagttaaaaatgaagatgatttggtttactactctgca1260

tgtgttgcttcttcagttggtgaaatgtgtactagagttttaatggcttcagaaccaggt1320

ggtaatagaacaatgttgaaatggactgttgaaagagcaagagatatgggtttggctttg1380

caattgacaaacatcgcaagagatatcgttactgattctaagcaattgggtagatcatac1440

gttccaagagattggttgacatctcaagaatcagctttgttaaaagctggtaaagctaga1500

gaattaggtgacgaaagattgagacaaatcgcattgaagatggtttacactgctgatgat1560

ttgaatttgatggcatctagagctattgattacttaccaccatcttcaagatgtggtgtt1620

agagctgcatgtaacgtttacacagctatcggtgtttcattgcataaagcaaatggttac1680

ccagatagagctcatttgacaaagttggaaagaatgaaggttacttttagatgtgtttat1740

ggttttagaaaaggtcatcaaggtgttcaaggtgaccgtggtaaatctcaagcttttact1800

gttatttga1809

35

1161

dna

artificial

pagcrty(pantoeaagglomerans)基因的核苷酸序列

35

atgccaagatatgatttgattttggttggtgcaggtttggctaacggtttgatcgctttg60

agattgagacaacaaagaccatctttgagaatcttgttgatcgatgcagaaagagaacca120

ggtgctaatcatacttggtcatttcatgctgaagatttgactgaaacacaacatagatgg180

attgcaccattggttgttcatcattggccaggttatgaagttagattcccacaaagatct240

agatcattgaactctggttacttctgtgttacttcagaaagattcgttcaagttattaga300

gatagattcgctccagatttgttgttgaacacaagagttgcaggtattgcttctagaact360

gttacattagatgatggtagagttttggaatcagatgctgttattgatggtagaggttat420

caaccagatgctgcattgtgtatgggttttcaatcttttgttggtcaagaatggcaatta480

tcagaaccacatggtttgactgcaccaattattatggatgctacagttgatcaacaagca540

ggttacagattcgtttactctttgccattttcagctgatactttgttgatcgaagataca600

cattacattgataatgcaacattggaaggtgacagagctagacaaaatattagagcatac660

gctgcacaacaaggttggagattggatagattgttgagagaagaacaaggtgctttacca720

attactttgacaggtgacgttgctgcattttggcaaaaacatgatttgccatgttctggt780

ttaagagctggtttgtttcatccaactacaggttactcattaccattggctgttgcatta840

gctgatagattggctcaaatgcaaacttttacatctgaaactttgcatgcaacaattcaa900

caatttgcatcacaagcttggcaacaacaaagatttttcagaatgttgaacagaatgtta960

tttttggcaggtccagctgatcaaagatggcaagttatgcaaagattttatggtttacca1020

gaaggtttgattgcaagattttacgctggtaaattgactttgccagatagattgagaatt1080

ttgtctggtaaaccaccagttccagttttagctgcattgcaagctattatgacaccacat1140

agacaacaagcaatgcaataa1161

36

1755

dna

artificial

dslcy(dunaliellasalina)基因的核苷酸序列

36

atgttacaaacattgtcaggtagatctacttcattgttatcttcaccaccacaattgcca60

tctcaacatgtttactctgttaagtcaacaagaatctgtggtgctgaatctttacaatca120

ccacaagctgcattaggtactagaacattgaatgtcacaagatcaactacacatgcaaga180

gaagcttctagagcaagaactagagcacaagctttgttacaaagaacaccagaaactcca240

tacttttcaccaccaaaaccatctgttgatggtccagttcaatattactatagagaacca300

tcaccatggccaactcaacaagatgttcaagttgcttatcatgatttgcaaagacaacca360

gctgcagatttgttagttgttggttctggtccatcaggtttggcagttgctgaaagagtt420

gctgcaggtggtttttctgtttgtgttattgatttggatccatacgctccaatgattcca480

aattatggttgttgggttgatgaaatgcaagctatgggtttagaagaatgtttggaagtt540

gtttggccaaaggcaaaggtttggttggataacgataagtcaggtgaaagatttttgaga600

agaccatacggtagaatggatagaccaatgttgaagaaattgttgttgcaaaagtgtgct660

tctaacggtgttacatttttgacttctaaagtttcaggtgtttctcatggtgacggtact720

tcaacagttactttgtctgatggtagaacaatgcaaggtactatggttttagatgctaca780

ggtcatgcaagaaagttggttaagtacgatcaagaattcaatccaggttaccaaggtgct840

tatggtattactgcagaagttgaatctcatccattcgaattggatacaatgttgtttatg900

gattggagagatgaacatactcattcaaatccagttatgagagcttctaaccaagcattg960

ccaacatttttgtacgctatgccatacactaaaaataaggttttcttggaagaaacatct1020

ttggttgctagaccagcagttggtttcgatactttgaaggaaagattgatggcaagaatg1080

gaatggttgggtattaaagttacaaaggttgaagatgaagaatactgtttgattccaatg1140

ggtggtgctttgccacaacatccacaaagagttttaggtattggtggtactgctggtatg1200

gttcatccatcaacaggttttatgatgactagaatgttaggttctgctccagttgttgca1260

gatgctattgttgatcaattgtctagaccaacagataaagctactacagcaggtgctgca1320

agacaattagttactgaacaaggtgcagaagaaatggctgcagctgtttggcaagcagct1380

tggccagttgaaagaatcagacaaagaatttttatggaattcggtatggaagttttgttg1440

tcattgaatttgcaacaaactagagatttctttgcagctttcttttctttgtcagatttt1500

cattggcaaggtttcttgtcttcaagattgtcttttacacaattgatcggttttggttta1560

tcattgtttgttgaagcttctccagaaactagattgttgttgttgagattgggtattcca1620

ggtgttgttcaaatgttgttcgttttgttgccaacagttactggttactacaagcaagat1680

actacagttaaggataagaaattcgctcatgatagagcagctgcagcttctatttcagca1740

gctaaacaacaataa1755

37

1785

dna

artificial

rdcrtybr(rhodosporidiumdiobovatum)基因的核苷酸序列

37

atgggtggttatgattactggttggttcatgcaagatggacaattccaccatctgttgct60

ttgtggttggtttttagaaagttgagaacttggagagatgtttacaagacatgtttcttg120

atcactattgcagttactgctacaatcccatgggattcatatttgatcagaaacagaatc180

tggtcttacccagattcttcagttgttggtccaactttgttcgctatcccatacgaagaa240

gttttctttttctttgttcaaacatatttgacttcaacattgtacgctgttttaactaga300

ccaattgttcatccagttttgttaccaagaacaccatctgaaggtagagcagttagatgg360

actggtacagctttgttatgtggtgtttttgctttggcatgggctaaattagaagaaggt420

ggtgaaggtacttatttggcattgattgttggttgggttgctccatttttgacattgtta480

tggtgggttgcatcaactcatattattgctatgccaagatctacattgttattggcaatt540

tttgctccaactttctttttgtgggaattggatgcaagagctttacaaagaggtacatgg600

gttattgaaaagggtactaagttgggttgggattttagaggtttggaaatcgaagaagct660

gttttctttttgttgacaaacgttatgatcgttttcggtatggctgcatgtgatcattgt720

ttggctgttcatgatttgagatcatacgataaaggtacttcttcagtttttccaccattg780

catgatttcggtccaatcttgattaattctccagatgcaaagcaagctcaaagaattgat840

gatttgagagctgcaatcgaaatcttgtcagttcattctaagtcattttctacagcttct900

atggttttcgatggtagattgagattggatttgttggcattgtatgcttggtgtagagtt960

tgtgatgatttggttgataatgcatcttcagttgctgcagctgaagctaacatcagaatg1020

atctcttcatgtttggatttgttgtacccaccatcaacttctacaccaacttcacatcca1080

gttagaatttctaatgaagctattgcagctgcattaccaggtttgtcagaaccagaaaga1140

ggttcttttagattgttggctttgttgccaattacaagaccaccattggatgaattgttg1200

gatggttttagaactgatttgtcatttttggcatttgctggtgaaaaagctgcaggtggt1260

aaaccatcaggtggttcaacatctatcccatctgaattgccaattaaaactgatgaagat1320

ttgttggtttacgctaacaacgttgcatcttcagttgctgatttgtgtgttcaattagtt1380

tgggcacattgtgctacttcagttccagaaccagaacaaagagcaattttgtctgctgca1440

agagaaatgggtcaagctttgcaattggttaacatcgcaagagatgttccagctgatttg1500

gaaatccatagaatatatttgccaggtagaggtttagatgttccagttgcagatttgtca1560

ccagatagaagagaattattgagaagagctagagaaatggctgcacattctagaggtgca1620

attgaaagattgccaagagaagctagaggtggtattagagctgcatgtgatgtttactta1680

tctattggtggtgcagttgataaagctttggatgaaggtagagttttagaaagagcaaga1740

gttgctaaaggtacaagagcatggaaagcttggactgcattataa1785

38

2022

dna

artificial

xdcrtyb(xanthophyllomycesdendrorhouscrtyb)基因的核苷酸序列

38

atgacagctttggcttattatcaaattcacttgatatatactttgccaatattgggtttg60

ttgggtttgttgacatcacctattttgacaaaattcgatatttataagatttctatttta120

gtttttattgctttttcagctacaactccatgggattcttggattataagaaacggtgct180

tggacttacccatcagctgagtctggacagggtgtcttcggtacattcttggatgttcca240

tatgaagagtatgcgttcttcgttattcaaactgtcataacaggtttggtttatgttttg300

gctactaggcatttattaccatcattagcattgccaaaaacaagatcatcagcattatct360

ttggcattgaaagcattgatacctttgcctataatttatttgttcactgcacatccttct420

ccatctccagatccattggtcacagatcattacttttatatgagagcattgtctttgttg480

attacaccaccaactatgttgttagctgctttgtcaggtgaatacgcatttgactggaag540

tcaggaagagctaaatctactattgctgctattatgataccaactgtttatttgatatgg600

gtcgactacgttgcagtcggtcaagattcttggtctattaatgacgaaaaaattgtcggt660

tggagattgggaggtgtcttgcctattgaagaggctatgtttttcttattgactaatttg720

atgatagttttgggtttatctgcatgtgaccacacacaggcattgtacttgttgcacggt780

aggactatatacggaaataagaaaatgccatcatctttcccattgattacaccaccagtt840

ttatctttattcttttcatctaggccatactcttctcaaccaaaaagggatttggaattg900

gctgtcaaattgttagaagaaaaatctagatcttttttcgtcgcttctgcaggtttccca960

tcagaagtcagagagaggttggtcggtttgtacgcattctgcagggtcactgacgacttg1020

attgattctccagaagtttcttcaaatccacacgctactatagatatggtttctgacttt1080

ttgacattattgttcggtccaccattgcacccatctcaaccagataagattttgtcatca1140

ccattgttgccaccttcacacccatcaagacctactggaatgtacccattaccaccacct1200

ccatctttgtcacctgctgagttagttcaattcttgacagaaagagttccagttcaatac1260

cattttgcatttagattgttggctaaattgcaaggtttaattcctagatatccattagat1320

gaattgttgagaggttacacaacagacttgattttcccattgtctactgaagctgtccag1380

gctaggaagacaccaattgagacaactgctgacttgttggactacggtttgtgtgtcgct1440

ggttcagtcgcagagttgttggtctacgtctcttgggcttctgcaccatctcaagttcca1500

gctactattgaagagagagaagctgtcttggttgcttctagggagatgggtactgctttg1560

caattggtcaatattgctagggacataaagggtgacgctactgaaggtagattttattta1620

cctttatcatttttcggtttaagggacgaatctaaattagctataccaactgattggact1680

gaaccaaggccacaggacttcgataagttgttgtctttatctccatcttcaacattacca1740

tcttctaatgcttctgagtcttttagatttgagtggaaaacttactcattgcctttagtt1800

gcttatgcagaagatttggcaaaacattcttacaaaggtattgacaggttgccaacagag1860

gttcaggcaggtatgagggcagcttgcgcatcttacttgttgattggtagagagattaag1920

gtcgtctggaagggtgacgttggtgaaaggaggactgttgctggttggagaagggttagg1980

aaggtcttgtcagtcgtcatgtctggttgggaaggtcaataa2022

39

1236

dna

artificial

selcy(synechococcuselongatuspcc7942)基因的核苷酸序列

39

atgtttgatgctttagttattggttctggtccagcaggtttggctattgctgcagaatta60

gcacaaagaggtttgaaagttcaaggtttatcaccagttgatccatttcatccatgggaa120

aatacttatggtatttggggtccagaattggattctttgggtttggaacatttgtttggt180

catagatggtcaaattgtgtttcttactttggtgaagctccagttcaacatcaatacaac240

tacggtttgttcgatagagcacaattgcaacaacattggttaagacaatgtgaacaaggt300

ggtttgcaatggcaattgggtaaagctgcagctattgctcatgattcacatcattcttgt360

gttactacagcagctggtcaagaattgcaagcaagattagttgttgatactacaggtcat420

caagcagcttttattcaaagaccacattcagatgcaattgcttatcaagcagcttacggt480

attattggtcaattttctcaaccaccaatcgaaccacatcaattcgttttgatggattac540

agatcagatcatttgtctccagaagaaagacaattgccaccaacatttttgtatgctatg600

gatttgggtaacgatgtttacttcgttgaagaaacatcattagcagcttgtccagctatc660

ccatacgatagattgaagcaaagattataccaaagattggcaactagaggtgttacagtt720

caagttattcaacatgaagaatactgtttgttcccaatgaatttgccattaccagatttg780

actcaatctgttgttggttttggtggtgcagcttcaatggttcatccagcttctggttac840

atggttggtgctttgttaagaagagcaccagatttggcaaatgctattgcagctggtttg900

aatgcttcttcatctttaactacagcagaattggctactcaagcatggagaggtttgtgg960

ccaacagaaaagattagaaagcattacatctatcaatttggtttggaaaagttgatgaga1020

ttttcagaagctcaattgaaccatcatttccaaactttctttggtttgccaaaggaacaa1080

tggtacggtttcttgactaacacattgtctttgccagaattgatccaagctatgttgaga1140

ttgtttgcacaagctccaaatgatgttagatggggtttgatggaacaacaaggtagagaa1200

ttgcaattattttggcaagctattgcagctagataa1236

40

1845

dna

artificial

mccarrp(mucorcircinelloides)基因的核苷酸序列

40

atgttgttgacatacatggaagttcatttgtactacactttgccagttttaggtgttttg60

tcttggttatcaagaccatattacactgctacagatgcattgaagtttaaattcttgact120

ttggttgcttttactacagcttctgcatgggataactacatcgtttaccataaggcttgg180

tcatattgtccaacttgtgttacagcagttattggttacgttccattggaagaatacatg240

tttttcatcatcatgactttgttgacagttgcttttacaaatttggttatgagatggcat300

ttgcattctttctttatcagaccagaaactccagttatgcaatcagttttggttagattg360

gttccaatcactgctttgttgatcacagcttacaaagcatggcatttggcagttccaggt420

aaaccattgttttatggttcttgtatcttgtggtacgcttgtccagttttggcattgtta480

tggtttggtgctggtgaatacatgatgagaagaccattggctgttttagtttcaatcgca540

ttgccaacattgtttttatgttgggttgatgttgttgctattggtgcaggtacttgggat600

atctctttggctacttcaactggtaaatttgttgttccacatttgccagttgaagaattc660

atgtttttcgcattgattaatactgttttggttttcggtacatgtgctatcgatagaact720

atggcaatcttgcatttgtttaaaaataagtctccataccaaagaccataccaacattct780

aagtcatttttgcatcaaatcttggaaatgacatgggctttctgtttgccagatcaagtt840

ttgcattctgatactttccatgatttgtctgtttcatgggatatcttgagaaaggcttct900

aagtcattctacacagcttcagcagtttttccaggtgacgttagacaagaattgggtgtt960

ttatatgctttttgtagagcaactgatgatttgtgtgataatgaacaagttccagttcaa1020

acaagaaaggaacaattgatcttgactcatcaattcgtttctgatttgttcggtcaaaag1080

acttcagctccaacagcaatcgattgggatttctacaacgatcaattgccagcttcttgt1140

atctcagcttttaaatcttttacaagattgagacatgttttagaagctggtgcaattaaa1200

gaattgttggatggttacaagtgggatttggaaagaagatctatcagagatcaagaagat1260

ttgagatactactcagcttgtgttgcatcttcagttggtgaaatgtgtacaagaatcatc1320

ttggctcatgcagataaaccagcttctagacaacaaactcaatggattattcaaagagca1380

agagaaatgggtttggttttgcaatacacaaacatcgctagagatatcgttactgattca1440

gaagaattgggtagatgttacttaccacaagattggttgactgaaaaggaagttgctttg1500

atccaaggtggtttggcaagagaaatcggtgaagaaagattgttgtctttgtcacataga1560

ttgatctatcaagctgatgaattgatggttgttgcaaataagggtattgataaattgcca1620

tctcattgtcaaggtggtgttagagctgcatgtaatgtttacgcttctattggtacaaag1680

ttgaagtcatacaagcatcattacccatctagagctcatgttggtaactcaaagagagtt1740

gaaatcgcattgttgtctgtttacaatttgtacactgctccaattgcaacatcttcaact1800

acacattgtagacaaggtaaaatgagaaatttgaatactatttga1845

41

1827

dna

artificial

btcarra(blakesletrispora)基因的核苷酸序列

41

atgtcaattttgacatacttggaatttcatttatactatactttgccagtcttggctgct60

ttgtgttggttgttgaaaccattccattcacaacaagataatttgaaatataaattcttg120

atgttgatggctgcttcaactgcttctatatgggataattacattgtttatcatagggct180

tggtggtactgcccaacttgtgttgttgctgttattggttatgttccattggaagaatac240

atgttttttattataatgactttaatgactgtcgcattttctaattttgtcatgagatgg300

cacttgcatacgttcttcattagaccaaatacttcttggaaacaaacattgttggttagg360

ttggttccagtttctgctttattggctattacttaccatgcttggcatttaactttgcca420

aataaatcttctttttacggttcttgtattttgtggtacgcttgcccagtcttggcaatt480

ttgtggttgggtgcaggtgaatacattttaagaagacctgttgcagtcttgttatcaatt540

gttattccatctgtttatttgtgttgggcagatattgttgctatttctgctggtacatgg600

catatatctttgagaacatctacaggtaagatggtcgtcccagacttgcctgtcgaagaa660

tgtttgttttttactttgataaacacagttttggtttttgctacatgtgctattgataga720

gctcaagctatattacatttatacaaatcttctgttcaaaatcagaaccctaaacaggct780

atttctttgtttcaacacgtcaaggagttggcatgggctttctgtttgcctgaccaaatg840

ttgaataatgaattgtttgacgatttaacaatttcttgggatattttaagaaaagcttca900

aagtctttttacactgcttctgctgtcttcccatcttacgtcaggcaagatttgggagtc960

ttgtacgctttctgtagggctacagacgacttgtgtgacgatgaatcaaaatctgttcaa1020

gagagaagggaccagttggacttgacaagacaattcgttagagatttattttctcagaaa1080

acttcagctccaattgtcattgattgggaattataccaaaatcaattacctgcatcttgc1140

atatctgctttcagagcatttactagattgaggcatgttttggaagttgatccagttgaa1200

gaattattggacggatacaagtgggacttggagaggaggcctattttggacgaacaagac1260

ttggaagcttactctgcttgcgtcgcttcttctgtcggagagatgtgcactagggtcatt1320

ttggctcaagatcaaaaagaaaatgatgcttggattattgacagagctagagaaatgggt1380

ttggttttacaatatgttaatattgctagagacattgtcactgactcagaaacattgggt1440

aggtgctacttgcctcagcaatggttgagaaaggaagaaactgaacaaattcaacaagga1500

aatgctagatctttaggtgaccaaagattattgggtttgtcattaaaattggtcggtaag1560

gcagatgctattatggttagagcaaagaagggaattgataagttgccagctaattgtcaa1620

ggtggtgtcagggcagcttgtcaagtctatgctgctataggttctgttttgaagcaacaa1680

aagacaacttacccaacaagggctcacttgaagggatctgaaagggctaaaattgcttta1740

ttgtctgtttacaacttgtaccagtctgaagacaagcctgtcgctttgaggcaggctaga1800

aaaattaaatcttttttcgttgattaa1827

42

735

dna

artificial

brecrtw(brevundimonassp.sd212)基因的核苷酸序列

42

atgactgctgcagttgctgaaccaagaattgttccaagacaaacttggattggtttgaca60

ttagctggtatgattgttgcaggttggggttctttgcatgtttacggtgtttacttccat120

agatggggtacttcttcattggttattgttccagctattgttgcagttcaaacatggtta180

tctgttggtttgtttattgttgctcatgatgcaatgcatggttcattagctccaggtaga240

ccaagattgaatgctgcagttggtagattgacattaggtttgtacgcaggttttagattc300

gatagattgaagactgctcatcatgcacatcatgctgcaccaggtacagctgatgatcca360

gatttttatgctccagcaccaagagcatttttaccatggttcttgaatttctttagaact420

tactttggttggagagaaatggctgttttgacagcattggttttgatcgctttgttcggt480

ttgggtgctagaccagcaaatttgttaactttttgggctgcaccagctttgttgtcagca540

ttgcaattgtttactttcggtacatggttaccacatagacatacagatcaaccatttgct600

gatgcacatcatgctagatcttcaggttacggtccagttttgtctttgttgacttgtttc660

catttcggtagacatcatgaacatcatttgacaccatggagaccatggtggagattgtgg720

cgtggtgaatcataa735

43

1335

dna

artificial

crbkt（chlamydomonasreinhardtii）基因的核苷酸序列

43

atgggtccaggtattcaaccaacttctgctagaccatgttcaagaacaaagcattctaga60

ttcgcattgttagctgcagctttgactgctagaagagttaagcaattcactaagcaattc120

agatctagaagaatggctgaagatatcttgaagttgtggcaaagacaatatcatttgcca180

agagaagattcagataagagaacattgagagaaagagttcatttgtacagaccaccaaga240

tctgatttgggtggtattgctgttgcagttactgttattgctttgtgggcaacattgttc300

gtttacggtttgtggttcgttaagttgccatgggctttaaaagttggtgaaactgcaaca360

tcatgggctactattgcagctgttttcttttctttggaattcttgtacacaggtttgttt420

attactacacatgatgcaatgcatggtactattgctttgagaaacagaagattgaacgat480

ttcttgggtcaattggcaatttcattgtatgcttggttcgattactctgttttgcataga540

aagcattgggaacatcataaccatacaggtgaaccaagagttgatccagattttcataga600

ggtaatccaaatttggcagtttggtttgctcaattcatggtttcttacatgactttgtct660

caattcttgaagatcgcagtttggtcaaatttgttattgttagctggtgcaccattagct720

aatcaattgttgtttatgacagcagctccaatcttgtctgcttttagattgttttattac780

ggtacttacgttccacatcatccagaaaaaggtcatactggtgcaatgccatggcaagtt840

tctagaacatcttcagcttcaagattgcaatcatttttgacatgttaccatttcgatttg900

cattgggaacatcatagatggccatacgctccatggtgggaattaccaaaatgtagacaa960

attgcaagaggtgcagctttggctccaggtccattaccagttccagcagctgcagctgca1020

actgctgcaacagctgcagctgcagctgcagctactggttcaccagctccagcatcaaga1080

gctggttctgcatcttcagcttcagcagctgcatctggttttggttcaggtcattcaggt1140

tctgttgctgcacaaccattgtcttcattaccattgttatctgaaggtgttaaaggtttg1200

gttgaaggtgcaatggaattagttgctggtggttcttcatctggtggtggtggtgaaggt1260

ggtaaaccaggtgctggtgaacatggtttgttacaaagacaaagacaattagcaccagtt1320

ggtgttatggcttaa1335

44

963

dna

artificial

hpbkt(haematococcuspluvialis)基因的核苷酸序列

44

atgcatgttgcttcagcattgatggttgaacaaaaaggttctgaagctgcagcttcttca60

ccagatgttttaagagcttgggcaactcaatatcatatgccatcagaatcttcagatgca120

gctagaccagcattgaaacatgcttacaaaccaccagcttctgatgcaaagggtatcact180

atggctttgacaatcatcggtacttggacagcagttttcttgcatgctatcttccaaatc240

agattgccaacttcaatggatcaattgcattggttaccagtttctgaagctacagcacaa300

ttgttaggtggttcttcatctttgttgcatatcgcagctgtttttattgttttggaattc360

ttgtacactggtttgtttattactacacatgatgcaatgcatggtacaatcgctttgaga420

catagacaattgaacgatttgttgggtaacatctgtatctcattgtacgcttggttcgat480

tactctatgttgcatagaaagcattgggaacatcataaccatactggtgaagttggtaaa540

gatccagattttcataaaggtaatccaggtttagttccatggtttgcttcttttatgtca600

tcttacatgtctttgtggcaatttgctagattagcatggtgggctgttgttatgcaaatg660

ttgggtgcaccaatggctaatttgttagtttttatggcagctgcaccaatcttgtcagct720

tttagattgttttatttcggtacatacttaccacataagccagaaccaggtccagctgca780

ggttcacaagttatggcatggtttagagctaaaacttcagaagcatctgatgttatgtca840

tttttgacatgttaccattttgatttgcattgggaacatcatagatggccatttgctcca900

tggtggcaattgccacattgtagaagattatctggtagaggtttggttccagctttagca960

taa963

45

882

dna

artificial

hpcrtz(haematococcuspluvialis)基因的核苷酸序列

45

atgttgtctaagttgcaatctatctcagttaaggctagaagagttgaattagcaagagat60

atcactagaccaaaggtttgtttgcatgctcaaagatgttcattggttagattaagagtt120

gctgcaccacaaactgaagaagctgttggtacacaacaagctgcaggtgcaggtgacgaa180

cattctgcagatgttgctttgcaacaattagatagagcaattgctgaaagaagagctaga240

agaaagagagaacaattgtcataccaagctgcagctattgcagcttctattggtgtttca300

ggtatcgcaatcttcgctacttacttgagattcgctatgcatatgacagttggtggtgct360

gttccatggggtgaagttgcaggtactttgttattggttgttggtggtgcattgggtatg420

gaaatgtatgcaagatacgctcataaagcaatttggcatgaatctccattgggttggtta480

ttgcataaatcacatcatactccaagaacaggtccattcgaagctaacgatttgttcgca540

attattaacggtttgccagctatgttgttgtgtacattcggtttctggttgccaaatgtt600

ttaggtactgcttgttttggtgcaggtttgggtatcacattgtacggtatggcctacatg660

tttgttcatgatggtttagttcatagaagatttccaactggtccaattgctggtttgcca720

tacatgaagagattgacagttgcacatcaattgcatcattctggtaaatacggtggtgct780

ccatggggcatgtttttgggtccacaagaattacaacatattccaggtgcagctgaagaa840

gttgaaagattggttttggaattggattggtcaaaaagataa882

46

528

dna

artificial

pacrtz(pantoeaagglomerans)基因的核苷酸序列

46

atgttgtggatctggaacgctttgatcgttttggttactgttattggtatggaaatcaca60

gctgcattggcacatagatatattatgcatggttggggttggggttggcatttgtctcat120

catgaaccacataagggttggttcgaagttaacgatttgtacgctgttgttttcgctgca180

ttgtctatcttgttgatatatttgggttcaactggtgtttggccattgcaatggattggt240

gctggtatgacattgtacggtttgttgtacttcatcgttcatgatggtttggttcatcaa300

agatggccttttagatacgttccaagaagaggttatttgagaagattgtacatggctcat360

agaatgcatcatgcagttagaggtaaagaaggttgtgtttcttttggtttcttgtacgct420

ccaccattgtcaaagttgcaagcaactttgagagaaagacatggtgttaaaagaggtgct480

gcaagagatcaaagatcagttgaaagagatgctccacctggtaaataa528

47

894

dna

artificial

hpcrtz-v(haematococcuspluvialis)基因的核苷酸序列

47

atggcattgtctaaaatgcaaccaatgggtgttcaaggtagaagaattgctttaccaaga60

gatatttctagaccacaaatgccatcacaaagacaaccattggctcaagttttaagagtt120

gctgcaccagatactgaagcagttgaatcttcaagagttcaaccatctgttggtgctggt180

aatcaacaaacagcagatgatgctttgcaacaattggatagatcaatcgctttgagaaga240

gcacaaagaaagagagaacaattgacttaccaagctgcagctattgcagcttcagttggt300

atctcttcattggcaatcttggctacttacacaagattttctatgcatatcacttcagat360

ggtgaaatgccatggtctgatttgttaggtacattgtcattagttgcaggtggtgctttt420

ggtatggaaatgtatgcaagatacgctcataaagcattgtggcatgaatctccattaggt480

tggttgttacataaatcacatcatactccaagaacaggtccattcgaagctaacgatttg540

ttcgcaattattaacggtttaccagctatgttgttatgttattacggtttttgggaacct600

ggtatggttggtgcttcttgttttggtgcaggtttgggtatcactttgtacggtatggct660

tacatgttcatccatgatggtttggttcatagaagatttccaactggtccaatctctgat720

ttgccatacatgaagagattgacagttgcacatcaaatccatcattctggtaaatacgat780

ggtgctccatggggcatgtttttgggtccacaagaattagaagctatttctggtgcaaca840

gaagaattggatagattagttgctgatttggattggtcaaaaagaagagtttaa894

48

930

dna

artificial

aacbfd(adonisaestivaliscbfd)基因的核苷酸序列

48

atgttggcatcaatggctgcagctacttctatcacatcttcatctagagcttttagattt60

catagaggtttgtttttaaacactaagccaaacatcagaaacccaccatgtttgttattt120

tcaccattgttgatgagaaatagaaatggtgctggtgcattgactatctgtttcgttgca180

gaaagaacaagaggtagagaaatcccacaaatcgaagaagatgaaaagaatatggatgaa240

gttttcgaacaaatgaactcagcttctgttagagttgcagaaaagttggctagaaagaaa300

tctgaaagattcacttatttgatcgcagctttgatgtcatctatgggtatcacatcaatg360

gctatcttgtctgtttactacagattttcatggcaaatggaaggtggtgacattccagtt420

actgaaatgttgggtacatttgcattatctgttggtgcagctgttggtatggaattttgg480

gctagatgggcacatagagctttgtggcatgcttcattatggcatatgcatgaatctcat540

cataaaccaagagaaggtccattcgaattgaacgatgttttcgcaattattaacgctgtt600

ccagctatcgcattgttgaacttcggtttctttcataaaggtttgattccaggtttatgt660

tttggtgcaggtttgggtattactgtttttggtatggcttacatgtttgttcatgatggt720

ttagttcatagaagatttccagttggtccaatcgctaacgttccatacttcagaaaggtt780

gcagctgcacatcaaatccatcatactgataagttccaaggtgttccatacggtttgttt840

ttaggtccaaaagaattggaagaagttggtggtaatgaagaattagaaaaagaaattgaa900

agaagaattaaaagaatgaatgctttataa930

49

2241

dna

artificial

xdcrtr(xanthophyllomycesdendrorhous)基因的核苷酸序列

49

atggctactttgtctgatttggttattttgttgttgggtgctttgttggcattgggtttc60

tacaataaggatagattgttgggttcttcatcttcatctgcatctactacatcaggttca120

tctgctgcaactgctaatggttctaaaccaacatactcaaacggtaacggtaacgctttt180

aaaggtgacccaagagatttcgttgcaagaatgaaggatcaaaagaaaagattggctgtt240

ttctatggttctcaaactggtacagcagaagaatacgctacaagaatcgctaaggaagca300

aagtcaagattcggtgtttcatctttggtttgtgatatcgaagaatacgatttcgaaaag360

ttggatcaagttccagaagattgtgctattgttttctgtatggcaacttacggtgaaggt420

gaaccaacagataacgctgttcaattcattgaaatgatctctcaagatgatccagaattt480

tctgaaggttcaactttggatggtttgaagtacgttgttttcggtttgggtaataagaca540

tacgaacaatacaatgttgttggtagacaattggatgcaagattaactgctttgggtgca600

acaagagttggtgaaagaggtgaaggtgacgatgataagtctatggaagaagattatttg660

gcttggaaagatgatatgtttgctgcattagctactacattgtcttttgaagaaggtgca720

tcaggtgaaactccagattttgttgttacagaagttccaaaccatccaatcgaaaaggtt780

ttccagggtgaattgtcatctagagctttattgggttctaaaggtgttcatgatgctaaa840

aatccatatgcttcaccagttttagcatgtagagaattgtttactggtggtgacagaaac900

tgtatccatttggaattcgatatcacaggttctggtatcacttaccaaacaggtgaccat960

gttgcagtttggccatcaaacccagatgttgaagttgaaagattgttggctgttttaggt1020

ttgacttctccagaaaagagaagaatgatcatccaagttgtttcattggatccaactttg1080

gcaaaagttccatttccaacaccaactacatacgatgctgtttttagacattacttggat1140

atctctgctgttgcatcaagacaaactttagctgttttggcaaaatatgctccatctgaa1200

caagctgcagaattcttgactagattgggtacagataaacaagcataccatacagaagtt1260

gtcggtggtcatttgagattggctgaagttttacaattggctgctggtaatgatattact1320

gttatgccaacagctgaaaacactacagtttggaacatcccattcgatcatgttgtttct1380

gatgtttcaagattgcaaccaagattctactctatctcatcttcaccaaagttgcatcca1440

aactcaatccatgttactgctgttattttgaagtacgaatctcaagctacagatagacat1500

ccagcaagatgggttttcggtttgggtactaactacttattgaacgttaagcaagctgca1560

aacaacgaaactacaccaatgatctctgatggtcaagatgatgttccagaacatgtttca1620

gctccaaaatatacattagaaggtccaagaggttcatacaagcatgatgatcaattgttt1680

aaagttccaatccatgttagaagatctacttttagattgccaacatcaccaaagatccca1740

gttattatgattggtccaggtactggtgttgctccttttagaggttttattcaagaaaga1800

attgctttggcaagaagatctattgctaaaaatggtccagatgctttagcagattgggct1860

ccaatatatttgttttatggttcaagagatgaacaagatttcttgtatgcagaagaatgg1920

ccagcatacgaagctgaattgcagggtaaattcaaaatccatgttgctttttctagatca1980

ggtccaagaaaaccagatggttctaagatctatgttcaagatttgttgtgggatcaaaag2040

gaagttattaaatctgctatcgttgaaaagagagcatcagtttacatttgtggtgacggt2100

agaaacatgtcaaaggatgttgaacaaaagttggctgcaatgttggctgaatctaaaaat2160

ggttcagctgcagttgaaggtgctgcagaggttaagtctttgaaggaaagatcaagattg2220

ttgatggatgtttggtcttaa2241

50

1674

dna

artificial

xdcrts(xanthophyllomycesdendrorhous)基因的核苷酸序列

50

atgtttattttggttttgttaacaggtgcattgggtttagctgcattttcttgggcttca60

attgctttcttttctttgtatttggctccaagaagatcttcattgtacaatttgcaaggt120

ccaaaccatacaaactacttcactggtaatttcttggatatcttgtctgcaagaacaggt180

gaagaacatgctaagtacagagaaaagtacggttctactttgagatttgctggtattgct240

ggtgcaccagttttgaactcaactgatccaaaggtttttaatcatgttatgaaagaagca300

tatgattacccaaaacctggtatggctgcaagagttttgagaattgctacaggtgacggt360

gttgttactgctgaaggtgaagcacataagagacatagaagaatcatgatcccatcttta420

tcagctcaagctgttaagtctatggttccaattttcttggaaaagggtatggaattggtt480

gataagatgatggaagatgctgcagaaaaagatatggctgttggtgaatcagcaggtgaa540

aagaaagctacaagattggaaactgaaggtgttgatgttaaagattgggttggtagagca600

acattggatgttatggctttggcaggtttcgattacaagtctgattcattgcaaaataag660

actaacgaattgtacgttgcttttgttggtttaacagatggttttgcaccaactttggat720

tcttttaaagctatcatgtgggatttcgttccatacttcagaacaatgaagagaagacat780

gaaatcccattgactcaaggtttagcagtttcaagaagagttggtattgaattgatggaa840

caaaagaaacaagctgttttaggttctgcttcagatcaagcagttgataagaaagatgtt900

caaggtagagatatcttgtctttgttagttagagctaacattgctgcaaatttgccagaa960

tctcaaaagttgtcagatgaagaagttttggcacaaatctctaatttgttgttcgctggt1020

tacgaaacttcttcaacagttttgacttggatgttccatagattgtcagaagataaggct1080

gttcaggataagttgagagaagaaatctgtcaaatcgatacagatatgccaactttggat1140

gaattgaacgcattgccatatttggaagctttcgttaaggaatctttgagattggatcca1200

ccatcaccatacgcaaacagagaatgtttgaaggatgaagatttcatcccattggctgaa1260

ccagttattggtagagatggttctgttattaatgaagttagaatcacaaagggtactatg1320

gttatgttgccattgtttaatatcaacagatcaaagtttatatatggtgaagatgctgaa1380

gaattcagaccagaaagatggttggaagatgttacagattctttgaactcaatcgaagca1440

ccatacggtcatcaagcttcttttatttcaggtccaagagcatgttttggttggagattt1500

gctgttgcagaaatgaaggcatttttgttcgttacattgagaagagttcaattcgaacca1560

atcatctctcatccagaatacgaacatatcactttgatcatctcaagaccaagaattgtt1620

ggtagagaaaaagaaggttaccaaatgagattacaagttaaaccagttgaataa1674

51

720

dna

artificial

spt15-5基因的核苷酸序列

51

atggccgatgaggaacgtttaaaggagtttaaaggggcaaacaagatagtgtttgatcca60

aataccagacaagtatgggaaaaccagaatcgagatggaacaaaaccagcaactactttc120

cagagtgaagaggtcataaaaagagctgccccagaatctgaaaaagacacctccgccaca180

tcaagtattgttccagagctatagaacattgtggcaactgtgactttggggagcaggtta240

gatctgaaaacagttgcgctacatgcccgtatgcagaatataacccctagcgttttgctg300

ctgtcatcatgcgtatagagagccaaaaactacagctttaatttttgcctcagggaaaat360

ggttgttaccggtgcaaaaagtgaggatgactcaaagctggccagaagaatatatgcagg420

aattatccaaaaaatcaggtttgcagctaaattcacagacttcaaaatacaaaatattgt480

cggttcgtgtgacgttaatttccctatacgtctagaagggttagcattcagtcatggtac540

tttctcctcctatgagccagaattgtttcctggtttgatctatagaatggtgaagccgaa600

aattgtgttgttaatttttgtttcaggaaagattgttcttctggagcaaagcaaagggag660

gaaatttaccaagcttttgaagctatatacccagttctaagtgaatttagaaaaatgtga720

52

621

dna

artificial

taf25-3基因的核苷酸序列

52

atggattttgaggaagattacgatgcggagtttgatgataatcaagaaggacaattagaa60

acaccttttccatcggttgcgggagccgatgatggggacaatgataatgatgactctgtc120

gcagaaaacatgaagaagaagcaaaagagagaggctgtagtggatgatgggagtgaaaat180

gcatttggtatacccgaatttacaagaaaagataagactctggaggagattttagagatg240

atggacagtactcctcctatcattcccgatgcagtaatagactactatttaaccaaaaac300

gggtttaacgtagcatatgtacaagtgaaacgacttttagcacttgctactcagaaattt360

gttagtgatatagctaaggatgcctacgaatattccaggatcaggtcttccgtagcggta420

tctaatgctaacaacagtcaggcgagagctaggcagctattgcaaggacagcgacagact480

ggcgtgcagcagatttcacaacaacaacatcaacagaatgagaagactacagcaagcata540

gttgttctgacggtgaacgatcccagtagcgctgttgctgaatacgggctcaatataggt600

cgcccagacttttatcgttag621