一種pH敏感的還原響應性納米凝膠及其製備方法

2023-10-30 18:14:02

專利名稱：一種pH敏感的還原響應性納米凝膠及其製備方法
技術領域：
本發明涉及凝膠材料領域，特別是一種PH敏感的還原響應性納米水凝膠的製備方法。
背景技術：
納米凝膠是一種尺寸介於1(Γ1000納米且能夠在水溶液中分散的水凝膠顆粒，通常由物理或化學交聯的聚合物網絡結構所組成。它不僅具有水含量高，生物相容性好和可調節的化學和機械性能，而且高的比表面積可耦合生物大分子，交聯網絡可包覆治療分子， 可調節的粒徑尺寸利於調節其體內分布。這些特性使納米凝膠在組織工程、生物醫學置入物、生物納米技術和藥物傳遞系統方面有著廣泛的應用潛力。目前，納米凝膠的製備方法歸納起來可分為物理方法和化學方法。物理方法是利用親水性天然高分子或合成高分子在交聯劑的存在下通過物理方式(如攪拌、超聲等方式) 作用使分子自聚集或粒子分散獲得納米凝膠。化學方法一般是在功能交聯劑的存在下採用親水性或水溶性單體進行非均相聚合製備。海藻酸鈉是一種無毒、具有良好生物相容性、生物可降解的天然多糖，已被廣泛應用於醫藥、化妝品、食品等領域。在藥物製劑中，以海藻酸鈉為基質材料製備納米粒子載體的研究已有報導，其製備方法可概括為離子交聯法、復凝聚法和自組裝法三種。離子交聯法是利用海藻酸鈉易與多價陽離子結合的性質製備納米粒子，如文獻 (European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceuticsj 2009 ；73(1) :25-33)才艮道了用鈣離子交聯海藻酸鈉製備出一系列平均粒徑為39Γ558ηπι的納米粒子。美國專利US2007/0202183A1公開了一種海藻酸鈉納米膠囊的製備方法，該方法是將海藻酸鈉的水溶液加入到含表面活性劑的油相中，獲得半固化的膠囊，再經鈣離子交聯得到粒徑為 IOO^lOOOnm的納米膠囊。中國專利CN101549158公開了一種海藻酸鈉肝靶向納米給藥系統及其製備方法，以甘草次酸為肝靶向化合物，通過海藻酸鈉的羧基與甘草次酸-乙二胺的胺基反應製得甘草次酸-海藻酸鈉，再通過鈣離子交聯獲得海藻酸鈉肝靶向載藥納米粒。復凝聚法是利用海藻酸鈉聚陰離子的性質與聚陽離子聚合物複合製備納米粒子， 如文獻(Nanomedicine Nanotechnology, Biology and Medicine，2007 ;3 :239-243)報導了海藻酸鈉與殼聚糖複合製得了平均粒徑為2 !!的納米粒子。自組裝法則是對海藻酸鈉進行疏水改性，使其成為兩親性高分子然後在溶液中自組裝形成納米粒子，如中國專利CN101565469公開了一種醯胺接枝的海藻酸鈉納米材料的製備方法與應用，在海藻酸鈉羧基基團上用化學合成的方法接枝疏水性醯胺進行疏水修飾形成兩親性材料，然後在去離子水中自組裝形成粒徑在4(Tl000nm之間的納米粒子，該納米粒子可作為多種疏水性藥物的緩釋載體。文獻(Journal of Agricultural and Food, 2011 ；59:1962-1967)報導了用油酸醯氯對海藻酸鈉進行疏水改性，然後產物在水溶液中自組裝形成平均粒徑為20(T400nm的納米粒子，用作維生素D3的緩釋載體。海藻酸鈉納米粒子作為藥物載體具有諸多優點(1)可使大分子藥物順利通過上皮組織，促進藥物的滲透吸收；(2)可延長藥物在體內的循環時間，有效地提高藥物的利用度，增加藥物的吸收；(3)可降低藥物的不良反應，減少副作用；(4)通過對海藻酸鈉納米粒子進行適當的修飾，能賦予它對特定器官或病灶組織的靶向作用。然而，目前文獻報導的海藻酸鈉納米粒子及其製備方法尚存在以下不足 粒子的穩定性不高，體內易導致納米粒子過早崩解，藥物或活性劑提前釋放。粒子用作靶細胞的藥物載體，不能響應細胞內環境釋放藥物。納米粒子粒徑分布較寬，且容易聚集。離子交聯法和復凝聚法製備的海藻酸鈉納米粒子不能負載疏水性的藥物。個別製備方法如美國專利US2007/0202183A1還使用了表面活性劑及油相有機溶劑。人體細胞內外的氧化還原電位有很大差別，使得藥物的運輸有潛在的響應性信號。氧化還原電勢作為刺激響應性信號在藥物的傳遞方面受到越來越多的重視，其中研究最廣的就是利用二硫鍵的可逆斷裂性能製備還原響應性納米載體。這類還原響應性納米載體主要利用二硫鍵在還原性物質如穀胱甘肽和二硫蘇糖醇的作用下斷裂，從而引起載體結構的變化從而誘發其性能的變化，實現在特定環境下的功能作用。研究表明，穀胱甘肽是細胞中含量比較豐富的一種三肽，它在細胞內的濃度要遠高於在細胞外的濃度，這種濃度上的差異為設計還原響應性的納米凝膠提供了可能。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是為了解決現有技術中存在的問題，提供一種新型的PH敏感的還原響應性納米水凝膠的製備方法，該方法製備的納米水凝膠結構均勻，穩定性高，可以實現原位載藥，在生物醫學置入物、生物納米技術和藥物傳遞系統等領域有著廣泛的應用潛力。本發明解決其技術問題採用以下的技術方案
本發明提供的PH敏感的還原響應性納米凝膠，其有效組成為二硫鍵交聯的海藻酸鈉衍生物，該納米凝膠由以下方法製成取海藻酸鈉的水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 :(0.01 10)向其中加入高碘酸鹽，避光反應得到雙醛海藻酸鈉；然後取雙醛海藻酸鈉的水溶液與4-巰基苯胺的乙醇溶液，按照雙醛海藻酸鈉的醛基與4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :(0.0廣10)，於(T25°C避光攪拌混合均勻後加入硼氫化物反應， 獲得巰基化海藻酸鈉；巰基化海藻酸鈉在水溶液中自組裝並經溶液中的氧氣氧化形成二硫鍵交聯的納米粒，即得所述PH敏感的還原響應性納米凝膠。所述的海藻酸鈉水溶液，按W/V計，其濃度為0. 59Γ5%。所述的雙醛海藻酸鈉水溶液重量濃度為彡5%，優選重量濃度為0. 019Tl%。所述的4-巰基苯胺的乙醇溶液的重量濃度為< 50%，優選重量濃度為 0. 019Tl0%。本發明提供的ρΗ敏感的還原響應性納米水凝膠的製備方法，其步驟包括 (1)雙醛海藻酸鈉的製備
取海藻酸鈉的水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 :(0.01 10) 向其中加入高碘酸鹽，控制溫度2(T40°C，避光攪拌反應後加入乙二醇終止反應；然後加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物，該產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥即得不同氧化程度的雙醛海藻酸鈉；
(2)巰基化海藻酸鈉的製備
取雙醛海藻酸鈉的水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為 1 :(0. 0廣10)，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，攪拌反應Mi後加入NaBH4,用0. IMHCl調節pH 值為7. 0，控溫在4°C以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後，冷凍乾燥即得；
(3)還原響應性納米凝膠的製備
取0. 5^5mg/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，即得所述還原響應性納米水凝膠。上述方法製備的還原響應性納米水凝膠，其用於生物醫學置入物、生物納米技術或藥物傳遞系統領域。上述方法製備的還原響應性納米水凝膠，其用於製備還原響應性的靶向納米凝膠。或者，通過上述方法步驟(1)、(2)和(3)製備的還原響應性納米凝膠表面羧基耦合靶分子或靶分子衍生物，獲得還原響應性的主動靶向納米凝膠。所述還原響應性納米凝膠表面羧基耦合靶分子或靶分子衍生物為特異性的配體， 或高度特異性抗體，或者是至少一種特異性的配體與至少一種高度特異性抗體。所述特異性的配體為葉酸及其衍生物、轉鐵蛋白、麥胚凝集素、半乳糖及其衍生物、甘露糖及其衍生物中的一種。所述高度特異性抗體為Fab抗體片段、肺內皮細胞抗體34A、急性髓系白血病細胞CD33抗體、抗人表皮生長因子受體2的單克隆抗體Mabs或抗B細胞淋巴瘤的單克隆抗體 LL2。本發明採用無毒、可生物降解且水溶性良好的海藻酸鈉為基質，通過巰基化，在水溶液中自組裝並經溶液中的氧氣氧化形成二硫鍵交聯的納米凝膠，其與現有技術相比具有以下的主要優點
(1)在氧化交聯之前，通過室溫攪拌，巰基化海藻酸鈉在水溶液中可自組裝形成納米粒，不需要加入乳化劑等其他物質。(2)通過溶液中空氣氧化巰基原位形成二硫鍵交聯，不僅能鎖定納米粒的形態，而且獲得的納米凝膠具有很好的穩定性。(3)採用原位交聯方式可實現藥物的原位負載，方便劑型成型，作為藥物的緩控釋載體具有潛在的應用價值；而且由於整個交聯過程可在室溫或室溫以下進行，非常適合熱不穩定藥物的負載與劑型的成型。(4)由於形成二硫鍵交聯，納米凝膠內的藥物可避免提前釋放出來；一旦進入目標細胞，又能響應細胞內的穀胱甘肽濃度的升高，發生二硫鍵斷裂釋放藥物，從而具有智能控釋性。(5)納米凝膠表面的羧基通過耦合靶分子或靶分子衍生物，可獲得靶向納米凝膠。(6)載體基質材料具有無毒和可生物降解性。


圖1為本發明製備的pH敏感的還原響應性納米凝膠的透射電鏡圖。
圖2為本發明製備的還原響應性納米凝膠在不同pH緩衝溶液中的粒徑變化曲線圖。
具體實施例方式下面結合實施例及附圖對本發明作進一步說明，但並不局限於下面所述內容。本發明提供了有別於現有技術的pH敏感的還原響應性納米凝膠，其有效組成為二硫鍵交聯的海藻酸鈉衍生物。該納米凝膠由以下方法製成取海藻酸鈉的水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 :(0.01 10)向其中加入高碘酸鹽，避光反應得到雙醛海藻酸鈉；然後取雙醛海藻酸鈉的水溶液與4-巰基苯胺的乙醇溶液，按照雙醛海藻酸鈉的醛基與4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :(0.0廣10)，於(T25°C避光攪拌混合均勻後加入硼氫化物反應，獲得巰基化海藻酸鈉；巰基化海藻酸鈉在水溶液中自組裝並經溶液中的氧氣氧化形成二硫鍵交聯的納米粒，即得所述PH敏感的還原響應性納米凝膠。按W/V計，所述的海藻酸鈉水溶液的濃度為0. 59Γ5%。所述的雙醛海藻酸鈉水溶液重量濃度為< 5%，其中優選重量濃度為0. 019Tl%。所述的4-巰基苯胺的乙醇溶液的重量濃度為< 50%，其中優選重量濃度為 0. 019Tl0%。本發明還提供了以下方法製備pH敏感的還原響應性納米凝膠，例如 實施例1
(1)取1% (W/V)的海藻酸鈉水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 0.5向其中加入高碘酸鹽，在25°C下避光攪拌反應後加入乙二醇終止反應。然後，加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物。產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥得到氧化度為44. 36%的雙醛海藻酸鈉。(2)取重量百分比為0. 3%的上述雙醛海藻酸鈉水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與 4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :1，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，混合攪拌反應他後加入 NaBH4,用0. IMHCl調節pH值為7. 0，控溫在4°C以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後， 冷凍乾燥得到巰基含量為四8. 9 μ mol/g的巰基化海藻酸鈉。(3)取lmg/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，獲得平均粒徑為171nm的還原響應性納米水凝膠(圖1)。將製備的還原響應性納米凝膠均分為兩組， 一組置於穀胱甘肽濃度為0，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米凝膠粒徑為168nm，多分散係數為0. 063 ；另一組置於穀胱甘肽濃度為10mM，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米粒子粒徑為 197nm，多分散係數為0. 183。實施例2
(1)取2% (W/V)的海藻酸鈉水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 0.5向其中加入高碘酸鹽，在25°C下避光攪拌反應他後加入乙二醇終止反應。然後，加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物。產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥得到氧化度為42. 57%的雙醛海藻酸鈉。(2)取重量百分比為0. 2%的上述雙醛海藻酸鈉水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與 4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :0. 75，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，混合攪拌反應他後加入NaBH4,用0. IMHCl調節pH值為7. 0，控溫在4V以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後，冷凍乾燥得到巰基含量為270. 1 μ mol/g的巰基化海藻酸鈉。(3)取lmg/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，獲得平均粒徑為ISOnm的還原響應性納米水凝膠。將製備的還原響應性納米凝膠均分為兩組，一組置於穀胱甘肽濃度為0，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米凝膠粒徑為177nm，多分散係數為0. 060 ；另一組置於穀胱甘肽濃度為10mM，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米粒子粒徑為 236nm，多分散係數為0. 218。實施例3
(1)取1% (w/ν)的海藻酸鈉水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 0. 25向其中加入高碘酸鹽，在25°C下避光攪拌反應他後加入乙二醇終止反應。然後，加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物。產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥得到氧化度為24. 66%的雙醛海藻酸鈉。(2)取重量百分比為0. 3%的上述雙醛海藻酸鈉水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與 4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :1. 25，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，混合攪拌反應他後加入NaBH4,用0. IMHCl調節pH值為7. 0，控溫在4°C以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後，冷凍乾燥得到巰基含量為191. 8 μ mol/g的巰基化海藻酸鈉。(3)取lmg/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，獲得平均粒徑為203nm的還原響應性納米水凝膠。將製備的還原響應性納米凝膠均分為兩組，一組置於穀胱甘肽濃度為0，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米凝膠粒徑為200nm，多分散係數為0. 088 ；另一組置於穀胱甘肽濃度為10mM，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米粒子粒徑為 278nm，多分散係數為0. 223。實施例4
(1)取3% (W/V)的海藻酸鈉水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 0.5向其中加入高碘酸鹽，在25°C下避光攪拌反應他後加入乙二醇終止反應。然後，加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物。產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥得到氧化度為40. 87%的雙醛海藻酸鈉。(2)取重量百分比為0. 25%的上述雙醛海藻酸鈉水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 1. 5，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，混合攪拌反應他後加入NaBH4，用0. IMHCl調節pH值為7. 0，控溫在4°C以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後，冷凍乾燥得到巰基含量為310. 6 μ mol/g的巰基化海藻酸鈉。(3)取lmg/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，獲得平均粒徑為IMnm的還原響應性納米水凝膠。將製備的還原響應性納米凝膠均分為兩組，一組置於穀胱甘肽濃度為0，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米凝膠粒徑為152nm，多分散係數為0. 065 ；另一組置於穀胱甘肽濃度為10mM，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米粒子粒徑為 186nm，多分散係數為0. 199。實施例5:
(1)取1% (w/ν)的海藻酸鈉水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 0.5向其中加入高碘酸鹽，在25°C下避光攪拌反應後加入乙二醇終止反應。然後，加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物。產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥得到氧化度為49. 78%的雙醛海藻酸鈉。
(2)取重量百分比為0. 2%的上述雙醛海藻酸鈉水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與 4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :1. 5，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，混合攪拌反應他後加入NaBH4,用0. IMHCl調節pH值為7. 0，控溫在4°C以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後，冷凍乾燥得到巰基含量為321. 5ymol/g的巰基化海藻酸鈉。(3)取ang/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，獲得平均粒徑為150nm的還原響應性納米水凝膠。將製備的還原響應性納米凝膠均分為兩組，一組置於穀胱甘肽濃度為0，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米凝膠粒徑為147nm，多分散係數為0. 096 ；另一組置於穀胱甘肽濃度為10mM，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米粒子粒徑為 202nm，多分散係數為0. 232。實施例6
(1)取洲(W/V)的海藻酸鈉水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 0. 75向其中加入高碘酸鹽，在25°C下避光攪拌反應他後加入乙二醇終止反應。然後，加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物。產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥得到氧化度為56. 88%的雙醛海藻酸鈉。(2)取重量百分比為0. 1%的上述雙醛海藻酸鈉水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與 4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :2，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，混合攪拌反應他後加入 NaBH4,用0. IMHCl調節pH值為7. 0，控溫在4°C以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後， 冷凍乾燥得到巰基含量為356. 5 μ mol/g的巰基化海藻酸鈉。(3)取ang/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，獲得平均粒徑為143nm的還原響應性納米水凝膠。將製備的還原響應性納米凝膠均分為兩組，一組置於穀胱甘肽濃度為0，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米凝膠粒徑為140nm，多分散係數為0. 080 ；另一組置於穀胱甘肽濃度為10mM，pH7. 4的緩衝溶液中，測得納米粒子粒徑為 211nm，多分散係數為0. 215。比較上述實施例1、2、3、4、5、6中製備的還原響應性納米凝膠分別置於穀胱甘肽濃度為0，pH7. 4的緩衝溶液和穀胱甘肽濃度為10mM，pH7. 4的緩衝溶液中的粒徑大小及多分散係數，可以得到製備的還原響應性納米凝膠在IOmM的穀胱甘肽溶液中粒徑變大，多分散係數變大，說明本發明製備的還原響應性納米凝膠具有還原響應性。將上述實施例1、2、3、4中製備的還原響應性納米凝膠平分為7組，分別調節pH值為2. 2,3. 0,4. 0,5. 0,6. 0,7. 0和8. 0，測定還原響應性納米凝膠的粒徑大小。結果顯示，本發明製備的還原響應性納米凝膠具有良好的pH敏感性(圖2)。在圖2中，曲線a是實施例 1中還原響應性納米凝膠的粒徑變化曲線；曲線b是實施例2中還原響應性納米凝膠的粒徑變化曲線；曲線c是實施例3中還原響應性納米凝膠的粒徑變化曲線；曲線d是實施例4 中還原響應性納米凝膠的粒徑變化曲線。本發明提供的pH敏感的還原響應性納米凝膠的製備方法，還可以採用以下的原料
按W/ν計，所述的海藻酸鈉水溶液的濃度為0. 59Γ5%。所述的雙醛海藻酸鈉水溶液重量濃度為< 5%，其中優選重量濃度為0. 019Tl%。所述的4-巰基苯胺的乙醇溶液的重量濃度為< 50%，其中優選重量濃度為 0. 019Tl0%。
本發明提供的pH敏感的還原響應性納米凝膠，或者由本發明提供的方法製備的 PH敏感的還原響應性納米凝膠，其用於製備還原響應性的靶向納米凝膠。本發明提供的上述方法中，通過步驟(1)、(2)和(3)製備的還原響應性納米凝膠表面羧基耦合靶分子或靶分子衍生物，其用於製備還原響應性的主動靶向納米凝膠。
權利要求
1.一種pH敏感的還原響應性納米凝膠，其特徵是該納米凝膠的有效組成為二硫鍵交聯的海藻酸鈉衍生物，該納米凝膠由以下方法製成取海藻酸鈉的水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 :(0.01 10)向其中加入高碘酸鹽，避光反應得到雙醛海藻酸鈉；然後取雙醛海藻酸鈉的水溶液與4-巰基苯胺的乙醇溶液，按照雙醛海藻酸鈉的醛基與4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1 :(0.0廣10)，於(T25°C避光攪拌混合均勻後加入硼氫化物反應，獲得巰基化海藻酸鈉；巰基化海藻酸鈉在水溶液中自組裝並經溶液中的氧氣氧化形成二硫鍵交聯的納米粒，即得所述PH敏感的還原響應性納米凝膠。
2.根據權利要求1所述的pH敏感的還原響應性納米凝膠，其特徵在於按W/V計，所述的海藻酸鈉水溶液的濃度為0. 59Γ5%。
3.根據權利要求1所述的pH敏感的還原響應納米凝膠，其特徵在於所述的雙醛海藻酸鈉水溶液重量濃度為< 5%。
4.根據權利要求3所述的pH敏感的還原響應納米凝膠，其特徵在於所述的雙醛海藻酸鈉水溶液的優選重量濃度為0. 019Tl%。
5.根據權利要求1所述的PH敏感的還原響應納米凝膠，其特徵在於所述的4-巰基苯胺的乙醇溶液的重量濃度為<50%。
6.根據權利要求5所述的pH敏感的還原響應納米凝膠，其特徵在於所述的4-巰基苯胺的乙醇溶液的優選重量濃度為0. 019Γ10%。
7.—種pH敏感的還原響應性納米水凝膠的製備方法，其特徵是採用以下方法製備還原響應性納米凝膠，其步驟包括(1)雙醛海藻酸鈉的製備取海藻酸鈉的水溶液，按照海藻酸鈉的糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1 :(0. 01 10) 向其中加入高碘酸鹽，控制溫度2(T40°C，避光攪拌反應他後加入乙二醇終止反應；然後加入乙醇使其析出沉澱，並減壓抽濾獲得白色產物，該產物經去離子水重新溶解，並用乙醇重新析出後，乾燥即得不同氧化程度的雙醛海藻酸鈉；(2)巰基化海藻酸鈉的製備取雙醛海藻酸鈉的水溶液，按雙醛海藻酸鈉的醛基與4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為 1 :(0. 0廣10)，加入4-巰基苯胺的乙醇溶液，攪拌反應Mi後加入NaBH4,用0. IMHCl調節pH 值為7. 0，控溫在4°C以下繼續攪拌反應lh，在氮氣保護下透析後，冷凍乾燥即得；(3)還原響應性納米凝膠的製備取0. 5^5mg/mL巰基化海藻酸鈉的去離子水溶液，靜置24h後超聲3min，即得所述還原響應性納米水凝膠。
8.—種pH敏感的還原響應性納米水凝膠的用途，其特徵在於將權利要求7所述方法製備的還原響應性納米水凝膠用於生物醫學置入物、生物納米技術或藥物傳遞系統領域。
9.一種pH敏感的還原響應性納米水凝膠的用途，其特徵在於將權利要求7所述方法製備的還原響應性納米水凝膠用於製備還原響應性的靶向納米凝膠；或者，通過步驟(1)、 (2)和(3)製備的還原響應性納米凝膠表面羧基耦合靶分子或靶分子衍生物，獲得還原響應性的主動靶向納米凝膠。
10.根據權利要求9所述的用途，其特徵在於所述還原響應性納米凝膠表面羧基耦合靶分子或靶分子衍生物為特異性的配體，或高度特異性抗體，或者是至少一種特異性的配體與至少一種高度特異性抗體；所述特異性的配體為葉酸及其衍生物、轉鐵蛋白、麥胚凝集素、半乳糖及其衍生物、甘露糖及其衍生物中的一種；所述高度特異性抗體為Fab抗體片段、肺內皮細胞抗體34A、急性髓系白血病細胞 CD33抗體、抗人表皮生長因子受體2的單克隆抗體Mabs或抗B細胞淋巴瘤的單克隆抗體 LL2。
全文摘要
本發明涉及pH敏感的還原響應性納米凝膠，其有效組成為二硫鍵交聯的海藻酸鈉衍生物，其製備方法為取海藻酸鈉的水溶液，按照其糖單元與高碘酸鹽的摩爾比為1(0.01～10)向其中加入高碘酸鹽，避光反應得到雙醛海藻酸鈉；取雙醛海藻酸鈉的水溶液與4-巰基苯胺的乙醇溶液，按照雙醛海藻酸鈉的醛基與4-巰基苯胺的胺基的摩爾比為1(0.01~10)，於0~25℃避光攪拌混勻後加入硼氫化鈉，獲得巰基化海藻酸鈉；巰基化海藻酸鈉在水溶液中自組裝並經溶液中的氧氣氧化，得到所述納米凝膠。本發明製得的納米凝膠具有穩定性、pH敏感性和還原響應性，在生物醫學置入物、生物納米技術和藥物傳遞系統等領域有潛在的應用價值。
文檔編號C08J3/075GK102250365SQ20111011712
公開日2011年11月23日 申請日期2011年5月9日 優先權日2011年5月9日
發明者孫豔娟, 常丹, 張曉花, 殷以華, 鄭化, 雷靜 申請人:武漢理工大學