一種快速檢測皂苷含量的方法
2023-12-05 22:41:46 1
一種快速檢測皂苷含量的方法
【專利摘要】本發明提供一種快速檢測皂苷含量的方法，採用衰減全反射-紫外可見光譜儀測量柱層析過程中上樣流出液、水洗流出液、洗脫液等多種液體的光譜圖，用化學計量學方法建立皂苷含量和光譜圖的定量模型，在分析待測樣品時，直接掃描未知濃度層析流出液的紫外-可見光光譜圖，然後將光譜圖數據輸入定量模型中，計算得到層析流出液中的皂苷含量值。該方法簡單快速，無汙染，樣品不需要稀釋或者過濾，可用於柱層析過程不同流出液中皂苷含量的快速測定，有助於監控柱層析過程，提高過程質量控制水平。
【專利說明】一種快速檢測皂苷含量的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於醫藥領域，特別涉及一種快速檢測皂苷含量的方法。
【背景技術】
[0002]皂苷類成分廣泛存在於五加科、豆科、遠志科、葫蘆科、薯蕷科、百合科和玄參科的植物中，具有擴張血管、降低心肌耗氧量、延長凝血時間、調血脂、清除自由基、抗炎、抗氧化、解熱、鎮靜和抗癌等多種藥理作用。皂苷類成分也是諸如人參和三七等多種名貴藥材的主要有效成分。近年來，以皂苷為主要活性成分的中藥製劑在心腦血管疾病、糖尿病等慢性疾病的治療中取得了良好效果。
[0003]柱層析工藝是精製皂苷的常用工藝，所得產物具有雜質少、色素少、總皂苷含量高等優點，有利於降低病人用藥劑量，減少不良反應。柱層析往往是生產中的關鍵工藝，對藥品質量影響較大，具有耗時長，影響因素多，控制難度大等特點。目前的柱層析工藝多以大孔樹脂為分離材料，主要包括上樣、水洗、洗脫、再生等四個基本工序。上樣、水洗和洗脫等3個工序都具有明顯的除雜能力。但如果控制不當，上樣流出液和水洗流出液中都可能會出現皂苷損失；洗脫工序則可能出現皂苷沒有完全洗脫等不良生產狀況。因此，為了減少皂苷損失，提高生產效率，有必要快速檢測柱層析過程流出液中的皂苷含量，以準確判斷各個工序的終點。
[0004]目前常用的皂苷檢測方法有高效液相色譜法、毛細管電泳法、近紅外光譜法和紫外光譜法等。其中高效液相色譜法分析時間較長，毛細管電泳法穩定性較差。另外，高效液相色譜法、毛細管電泳法和近紅外光譜法設備昂貴。相比近紅外光譜，紫外光譜意義相對明確。常規的紫外-可見光譜設備具有價格較低，分析速度快等優點。但由於此範圍內的光波穿透性能弱，在一般的生產過程流出液中吸收值太高，無法用於測定液體中成分的濃度。稀釋法和降低光程法是兩種常用於減少紫外光譜吸收值的方法。稀釋法的弊端在於使設備或者步驟變得複雜，而且在結果中引入了稀釋誤差。降低光程法要求比色皿中液體厚度變薄，但是薄了之後很容易造成堵塞，同時液體對比色皿的腐蝕對光程的影響也會變大。
[0005]衰減全反射-紫外可見光譜(ATR-UV)技術通過測定反射光譜的強度獲得樣品溶液信息，提供了一種解決困難的新思路。衰減全反射-紫外可見光譜技術測定溶液中成分的濃度可以達到普通紫外-可見分光光度法測定成分濃度的1000倍以上。由於具備分析時間短，設備成本低，光譜意義相對明確，無需稀釋，不受液體中小顆粒影響等多個優點，衰減全反射-紫外可見光譜技術非常適合用於快速檢測大孔樹脂柱層析過程流出液中的皂苷含量。
【發明內容】
[0006]本發明針對常規技術存在的不足，結合衰減全反射-紫外可見光譜技術的特點，提供一種快速檢測皂苷含量的方法，是一種快速檢測層析過程中皂苷含量的方法，通過以下步驟實現:(1)測定層析過程流出液校正集樣本中的皂苷含量
採用高效液相色譜法測定層析過程中上樣流出液、水洗流出液和乙醇洗脫液校正集樣本的皂苷含量；色譜條件:色譜柱為Waters ACQUITY CSH C18 (50 mmX2.1 mm 1.d.，1.7Mm);流動相:0.01 %甲酸水(A)-0.01 %甲酸乙腈(B)，線性梯度洗脫程序:0 min 19 % B,6 min 20 % B, 8.5 min 31 % B, 11 min 33 % B, 17 min 90 % B,運行 19 min ;流速:0.35ml/min ;檢測波長:203 nm ;柱溫:40 °C ;進樣量:5 μ?。按外標兩點法方程計算含量。
[0007]對照品溶液的製備:取三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd 5種對照品或人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1 3種對照品適量，精密稱定，加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)溶解,製成每I ml約含各對照品為0.3 mg/ml和0.03 mg/ml的混合對照品溶液1、2，於4°C保存。臨用時10000 rpm離心10 min，取上清液備用。
[0008]供試品溶液的製備:分別將上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品過濾，取續濾液，備用。精密量取續濾液適量加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)成適當濃度，混勻，10000 rpm離心10 min，取上清液，即為供試品溶液。
[0009](2)紫外掃描得到校正集樣本的紫外-可見光譜圖
取層析過程中獲取的上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品，直接用衰減全反射-紫外可見光譜儀進行掃描，掃描的光譜區間是190nm~800nm，解析度為0.1nm-1nm,光譜掃描三次之後，取平均值作為校正集樣本。
[0010](3)採用偏最小二乘法或者主成分回歸法分別對上樣和水洗流出液、乙醇洗脫液構建定量模型
使用Simca、Unscrambler或者Minitab軟體處理數據，在構建光譜圖和阜苷含量定量模型時使用的方法是偏最小二乘法或者主成分回歸法，使用交叉驗證法確定最佳主成分數，當定量模型的相關係數到0.9以上時，認為模型已經建立完成。
[0011](4)層析過程流出液中皂苷含量的快速測定
將光纖探頭裝於層析柱出口管路，直接掃描未知濃度的層析過程流出液的光譜圖，層析過程流出液包括上樣流出液、水洗流出液和洗脫液，紫外掃描的光譜範圍和解析度要求和建立標準集樣本時相同，將光譜數據代入構建的定量模型中，作為預測集，就可以得到層析過程流出液中皂苷的含量。其中溶劑為水的流出液適用於採用上樣流出液和水洗流出液構建的定量模型；溶劑為乙醇水溶液的洗脫液適用於採用洗脫液構建的定量模型。
[0012]本發明的另一個目的是提供所述方法在快速檢測皂苷含量中的應用。
[0013]本發明提供了一種快速檢測柱層析過程流出液中皂苷含量的方法。該方法採用衰減全反射-紫外可見光譜儀測量柱層析過程中上樣流出液、水洗流出液、洗脫液等多種液體的光譜圖，並使用化學計量學方法建立皂苷含量和光譜圖的定量模型，計算得到皂苷含量。該方法首先收集柱層析過程中上樣流出液、水洗流出液和洗脫液作為校正集樣本，然後掃描得到校正集樣本的紫外-可見光譜圖作為標準光譜圖，再使用液相色譜法檢測得到校正集樣本中皂苷的含量，最後建立紫外-可見光光譜圖和皂苷含量之間的定量模型。在分析待測樣品時，直接掃描未知濃度層析流出液的紫外-可見光光譜圖，然後將光譜圖數據輸入定量模型中，計算得到層析流出液中的皂苷含量值。該測量方法簡單快速，無汙染，樣品不需要稀釋或者過濾，可用於柱層析過程不同流出液中皂苷含量的快速測定，有助於監控柱層析過程，提高過程質量控制水平。本發明的方法操作過程簡單、快速，樣品溶液無需稀釋或者過濾，所需設備為衰減全反射-紫外可見光譜儀，定量模型構建完畢後，無需專業背景的人員也可完成定量分析過程，因此，可以很好地在中藥生產企業進行推廣，作為柱層析過程質量控制的一種手段。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1是三七層析流出液光譜擬合效果。
[0015]圖2是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的上樣出口液皂苷濃度曲線。
[0016]圖3是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的水洗出口液皂苷濃度曲線。
[0017]圖4是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的的洗脫液皂苷濃度曲線。
[0018]圖5是人參層析流出液光譜擬合效果。
[0019]圖6是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的上樣出口液皂苷濃度曲線。
[0020]圖7是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的水洗出口液皂苷濃度曲線。
[0021]圖8是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的洗脫液皂苷濃度曲線。
[0022]圖9是西洋參層析流出液光譜擬合效果。
[0023]圖10是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的西洋參皂苷上樣出口液皂苷濃度曲線。
[0024]圖11是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的西洋參皂苷水洗出口液皂苷濃度曲線。
[0025]圖12是採用衰減全反射-紫外可見光譜計算得到的西洋參皂苷洗脫液皂苷濃度曲線。
【具體實施方式】
[0026]本發明結合附圖和實施例作進一步的說明。
[0027]實施例1
取三七藥材15kg，分別用80%(v/v)的乙醇70L回流提取3次，每次6小時。合併提取液後減壓濃縮至濃縮液密度為1.15g/ml。一邊攪拌，一邊在濃縮液中加入5倍體積的水，靜置48h後過濾得到上清液用於柱層析。層析柱高150cm，內徑12cm，裝填DlOl大孔樹脂8公斤。上清液以1.5BV/h的流速上樣，同時收集層析柱出口處不同時刻的流出液作為上樣流出液樣品。上樣6BV後停止，改用水衝洗層析柱。水衝洗流速為2BV/h，水體積為10BV。水衝洗時收集不同時刻層析柱出口處的流出液作為水洗流出液樣品。水衝洗結束後改用80%(ν/ν)的乙醇對層析柱進行洗脫，洗脫時乙醇流速為lBV/h，洗脫體積為5BV。乙醇洗脫時收集不同時刻層析柱出口處的流出液作為洗脫液樣品。
[0028]採用液相色譜法測定上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品中的皂苷含量。液相色譜分析為:色譜柱為 Waters ACQUITY CSH C18 (50 mmX2.1 mm 1.d.，1.7 Mm);流動相:
0.01 %甲酸水(A)-0.01 %甲酸乙腈(B)，線性梯度洗脫程序:0 min 19 % B, 6 min 20 %B, 8.5 min 31 % B, 11 min 33 % B, 17 min 90 % B,運行 19 min ;流速:0.35 ml/min ;檢測波長:203 nm ;柱溫:40 V ;進樣量:5 μ?。
[0029]對照品溶液的製備:取三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd對照品適量，精密稱定，加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)溶解，製成每I ml約含三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd對照品為0.3 mg/ml和0.03mg/ml的混合對照品溶液1、2，於4°C保存。臨用時10000 rpm離心10 min,取上清液備用。
[0030]供試品溶液的製備:分別將上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品過濾，取續濾液，備用。精密量取續濾液適量加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)成適當濃度，混勻，10000 rpm離心10 min，取上清液，即為供試品溶液。
[0031]含量測定:分別精密吸取混合對照品溶液1、2和供試品溶液各5 μ?，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標兩點法方程計算三七層析上樣流出液、水洗流出液和洗脫液中5種皂苷含量，作為參比數據。
[0032]取三七柱層析過程中獲取的上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品，直接用衰減全反射-紫外可見光譜儀進行掃描。掃描的光譜區間是190nm~800nm，解析度為
0.lnm-lnm。光譜掃描三次之後，取平均值作為校正集樣本。
[0033]使用Simca軟體分別處理上樣和水洗流出液、乙醇洗脫液數據。在構建光譜圖和5種皂苷含量定量模型時使用的方法是主成分回歸法。使用交叉驗證法確定最佳主成分數。當定量模型的相關係數到0.9以上時，認為模型已經建立完成。模型建立的效果參見圖1，可以看到計算值和實驗值符合良好。
[0034]用之前得到的上清液進行另一次層析。層析柱高160cm，內徑15cm，裝填DlOl大孔樹脂7公斤。將衰減全反射-紫外可見光譜儀探頭接在層析柱出口管路上。上清液以
1.2BV/h的流速上樣，開動光譜儀採集上樣流出液光譜。上樣5BV後停止，改用水衝洗層析柱。水衝洗流速為2.5BV/ h，水體積為5BV。水衝洗時開動光譜儀採集水洗流出液光譜。水衝洗結束後改用70%(v/v)的乙醇對層析柱進行洗脫，洗脫時乙醇流速為lBV/h，洗脫體積為5BV。乙醇洗脫時開動光譜儀採集洗脫液光譜。採集上樣流出液、水洗流出液和洗脫液光譜時掃描的光譜範圍和解析度要求和建立標準集樣本時相同。將光譜數據代入構建的定量模型中，作為預測集，就可以得到上樣流出液、水洗流出液和洗脫液中5種皂苷的含量。檢測得到的皂苷濃度參見圖2-圖4。
[0035]實施例2
取人參藥材15kg，分別用80%(v/v)的乙醇60L回流提取3次，每次6小時。合併提取液後減壓濃縮至濃縮液密度為1.10g/ml。一邊攪拌，一邊在濃縮液中加入5倍體積的水，靜置24h後過濾得到上清液用於柱層析。層析柱高150cm，內徑12cm，裝填HPDlOO大孔樹脂7公斤。上清液以1.5BV/h的流速上樣，同時收集層析柱出口處不同時刻的流出液作為上樣流出液樣品。上樣6BV後停止，改用水衝洗層析柱。水衝洗流速為2BV/h，水體積為10BV。水衝洗時收集不同時刻層析柱出口處的流出液作為水洗流出液樣品。水衝洗結束後改用80%(ν/ν)的乙醇對層析柱進行洗脫，洗脫時乙醇流速為lBV/h，洗脫體積為5BV。乙醇洗脫時收集不同時刻層析柱出口處的流出液作為洗脫液樣品。
[0036]採用液相色譜法測定上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品中的皂苷含量。液相色譜分析條件為:色譜柱為 Waters ACQUITY CSH C18 (50 mmX2.1 mm 1.d.,1.7 Mm);流動相:0.01 %甲酸水(A)-0.01 %甲酸乙腈(B)，線性梯度洗脫程序:0 min 19 % B, 6 min20 % B, 8.5 min 31 % B, 11 min 33 % B, 17 min 90 % B,運行 19 min ;流速:0.35 ml/min ;檢測波長:203 nm ;柱溫:40 V ;進樣量:5 μ?。
[0037]對照品溶液的製備:取人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1對照品適量，精密稱定，加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)溶解，製成每I ml約含人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷RbJi照品為0.3 mg/ml和0.03 mg/ml的混合對照品溶液1、2，於4°C保存。臨用時10000 rpm離心10 min,取上清液備用。
[0038]供試品溶液的製備:分別將上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品過濾，取續濾液，備用。精密量取續濾液適量加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)成適當濃度，混勻，10000 rpm離心10 min，取上清液，即為供試品溶液。
[0039]含量測定:分別精密吸取混合對照品溶液1、2和供試品溶液各5 μ?，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標兩點法方程計算人參或西洋參層析上樣流出液、水洗流出液和洗脫液中3種皂苷含量，作為參比數據。
[0040]取人參柱層析過程中獲取的上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品，直接用衰減全反射-紫外可見光譜儀進行掃描。掃描的光譜區間是190nm~800nm，解析度為
0.lnm-lnm。光譜掃描三次之後，取平均值作為校正集樣本。
[0041]使用Unscrambler軟體分別處理上樣和水洗流出液、乙醇洗脫液數據。在構建光譜圖和3種皂苷含量定量模型時使用的方法是偏最小二乘法。使用交叉驗證法確定最佳主成分數。當定量模型的相關係數到0.9以上時，認為模型已經建立完成。模型建立的效果參見圖5，可以看到計算值和實驗值符合良好。
[0042]用之前得到的上清液進行另一次層析。層析柱高160cm，內徑15cm，裝填HPD100大孔樹脂7公斤。將衰減全反射-紫外可見光譜儀探頭接在層析柱出口管路上。上清液以
1.2BV/h的流速上樣，開動光譜儀採集上樣流出液光譜。上樣5BV後停止，改用水衝洗層析柱。水衝洗流速為3BV/h，水體積為9BV。水衝洗時開動光譜儀採集水洗流出液光譜。水衝洗結束後改用70%(v/v)的乙醇對層析柱進行洗脫，洗脫時乙醇流速為lBV/h，洗脫體積為5BV。乙醇洗脫時開動光譜儀採集洗脫液光譜。採集上樣流出液、水洗流出液和洗脫液光譜時掃描的光譜範圍和解析度要求和建立標準集樣本時相同。將光譜數據代入構建的定量模型中，作為預測集，就可以得到上樣流出液、水洗流出液和洗脫液中3種皂苷的含量。其中溶劑為水的上樣和水洗流出液適用於採用上樣和水洗流出液構建的定量模型；溶劑為乙醇水溶液的洗脫液適用於採用洗脫液構建的定量模型。檢測得到的皂苷濃度參見圖6-8。
[0043]實施例3
取西洋參藥材15kg，分別用80%(ν/ν)的乙醇60L回流提取3次，每次6小時。合併提取液後減壓濃縮至濃縮液密度為1.10g/ml。一邊攪拌，一邊在濃縮液中加入5倍體積的水，靜置24h後過濾得到上清液用於柱層析。層析柱高150cm，內徑12cm，裝填DlOl大孔樹脂7公斤。上清液以1.5BV/h的流速上樣，同時收集層析柱出口處不同時刻的流出液作為上樣流出液樣品。上樣6BV後停止，改用水衝洗層析柱。水衝洗流速為2BV/h，水體積為10BV。水衝洗時收集不同時刻層析柱出口處的流出液作為水洗流出液樣品。水衝洗結束後改用60%(ν/ν)的乙醇對層析柱進行洗脫，洗脫時乙醇流速為lBV/h，洗脫體積為5BV。乙醇洗脫時收集不同時刻層析柱出口處的流出液作為洗脫液樣品。
[0044]採用液相色譜法測定上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品中的皂苷含量。液相色譜分析條件包為:
色譜柱為 Waters A CQUITY CSH C18 (50 mmX2.1 mm 1.d.，1.7 Mm);流動相:0.01 %甲酸水(A)-0.01 %甲酸乙腈(B)，線性梯度洗脫程序:0 min 19% B,6 min 20 % B,8.5min 31% B, 11 min 33% B, 17 min 90 % B,運行19 min ;流速:0.35 ml/min ;檢測波長:203 nm ;柱溫:40 V ;進樣量:5 μ?。
[0045]對照品溶液的製備:取人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1對照品適量，精密稱定，加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)溶解，製成每I ml約含人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷RbJi照品為0.3 mg/ml和0.03 mg/ml的混合對照品溶液1、2，於4°C保存。臨用時10000 rpm離心10 min,取上清液備用。
[0046]供試品溶液的製備:分別將上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品過濾，取續濾液，備用。精密量取續濾液適量加70 %甲醇-水溶液(ν/ν)成適當濃度，混勻，10000 rpm離心10 min，取上清液，即為供試品溶液。
[0047]含量測定:分別精密吸取混合對照品溶液1、2和供試品溶液各5 μ?，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標兩點法方程計算人參或西洋參層析上樣流出液、水洗流出液和洗脫液中3種皂苷含量，作為參比數據。
[0048]取西洋參柱層析過程中獲取的上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品，直接用衰減全反射-紫外可見光譜儀進行掃描。掃描的光譜區間是190nm~800nm，解析度為
0.lnm-lnm。光譜掃描三次之後，取平均值作為校正集樣本。
[0049]使用Minitab軟體分別處理上樣和水洗流出液、乙醇洗脫液數據。在構建光譜圖和3種皂苷含量定量模型時使用的方法是主成分回歸法。使用交叉驗證法確定最佳主成分數。當定量模型的相關係數到0.9以上時，認為模型已經建立完成。模型建立的效果參見圖9，可以看到計算值和實驗值符合良好。
[0050]用之前得到的上清液進行另一次層析。層析柱高160cm，內徑15cm，裝填DlOl大孔樹脂7公斤。將衰減全反射-紫外可見光譜儀探頭接在層析柱出口管路上。上清液以
1.2BV/h的流速上樣，開動光譜儀採集上樣流出液光譜。上樣5BV後停止，改用水衝洗層析柱。水衝洗流速為3BV/h，水體積為9BV。水衝洗時開動光譜儀採集水洗流出液光譜。水衝洗結束後改用70%(v/v)的乙醇對層析柱進行洗脫，洗脫時乙醇流速為lBV/h，洗脫體積為5BV。乙醇洗脫時開動光譜儀採集洗脫液光譜。採集上樣流出液、水洗流出液和洗脫液光譜時掃描的光譜範圍和解析度要求和建立標準集樣本時相同。將光譜數據代入構建的定量模型中，作為預測集，就可以得到上樣流出液、水洗流出液和洗脫液中3種皂苷的含量。其中溶劑為水的上樣和水洗流出液適用於採用上樣和水洗流出液構建的定量模型；溶劑為乙醇水溶液的洗脫液適用於採用洗脫液構建的定量模型。檢測得到的皂苷濃度參見圖10-12。
【權利要求】
1.一種快速檢測皂苷含量的方法，通過以下步驟實現: (1)測定層析過程流出液校正集樣本中的皂苷含量 採用高效液相色譜法測定層析過程中上樣流出液、水洗流出液和乙醇洗脫液校正集樣本的皂苷含量；色譜條件:色譜柱為Waters ACQUITY CSH C18, 50 mmX2.1 mm 1.d.，1.7Mm ;流動相:0.01 %甲酸水(A)-0.01 %甲酸乙腈(B);線性梯度洗脫程序:0 min 19 % (B),6 min 20 % (B),8.5 min 31 % (B), 11 min 33 % (B), 17 min 90 % (B);運行 19 min ；流速:0.35 ml/min ;檢測波長:203 nm ;柱溫:40 V ;進樣量:5 μ?,按外標兩點法方程計算含量; (2)紫外掃描得到校正集樣本的紫外-可見光譜圖 取層析過程中獲取的上樣流出液、水洗流出液和洗脫液樣品，直接用衰減全反射-紫外可見光譜儀進行掃描，掃描的光譜區間是190nm~800nm，解析度為0.1nm-1nm,光譜掃描三次之後，取平均值作為校正集樣本； (3)採用偏最小二乘法或者主成分回歸法分別對上樣和水洗流出液、乙醇洗脫液構建定量模型 使用Simca、Unscrambler或者Minitab軟體處理數據，在構建光譜圖和阜苷含量定量模型時使用的方法是偏最小二乘法或者主成分回歸法，使用交叉驗證法確定最佳主成分數，當定量模型的相關係數到0.9以上時，認為模型已經建立完成； (4)層析過程流出液中皂苷含量的快速測定 將光纖探頭裝於層析柱出口管路，直接掃描未知濃度的層析過程流出液的光譜圖，層析過程流出液包括上樣流出液、水洗流出液和洗脫液，紫外掃描的光譜範圍和解析度要求和建立標準集樣本時相同，將光譜數據代入構建的定量模型中，作為預測集，得到層析過程流出液中皂苷的含量。
2.根據權利要求1所述的一種快速檢測皂苷含量的方法，其特徵在於，步驟(4)中溶劑為水的流出液適用於採用上樣流出液和水洗流出液構建的定量模型；溶劑為乙醇水溶液的洗脫液適用於採用洗脫液構建的定量模型。
3.根據權利要求1所述的一種快速檢測皂苷含量的方法在快速檢測皂苷含量中的應用。
【文檔編號】G01N30/88GK103792313SQ201410026540
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2014年1月21日 優先權日:2014年1月21日
【發明者】瞿海斌, 程翼宇, 龔行楚 申請人:浙江大學