一種水溶性富勒烯及其應用的製作方法

2023-12-06 06:17:06

專利名稱：一種水溶性富勒烯及其應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及化工領域，特別是一種水溶性富勒烯及其應用。
背景技術：
作為碳元素的第三種同素異形體富勒烯家庭的發現，是上世紀自然科學發展史最重要的突破之一。Kroto等三人也因為他們在富勒烯研究中開創性的工作而榮獲1996年諾貝爾化學獎。富勒烯以其獨特的結構和性質倍受人們重視，近十年來，幾乎全世界所有著名大學和研究所的科學家都進行了與富勒烯有關的研究。它已成為當今物理、化學、材料及生命科學研究者共同關心的課題。富勒烯分子的重要科學意義，被美國《Science》雜誌評為1991年的「明星分子」。在納米材料中，包括富勒烯、碳納米管在內的碳納米材料一直是近年來國際科學的前沿領域之一。富勒烯是由60個碳原子組成的球形分子，包含12個五元環和20個六元環，直徑為O. 71nm。近年來，富勒烯在生物醫藥領域的研究相當引人矚目，·研究發現富勒烯具有多種特殊的生物學效應(I)可抑制多種酶的活性，包括HIV蛋白酶以及逆轉錄酶；(2)對腫瘤細胞顯示出細胞毒性；(3)具有神經保護劑的作用；(4)還具有在可見光照射下產生氧自由基、切割DNA的作用。富勒烯作為一種優良的光敏劑表現在其在可見光照射的情況下可以產生活性氧，活性氧包括單線態氧、超氧負離子等。富勒烯光照下產生活性氧為高度反應性的，並且可以表現出明顯的細胞毒性，比如裂解細胞中的DNA，抑制細胞的有絲分裂以及生長，還可以抑制細胞蛋白水解酶的活性。由此推斷，富勒烯可以用於腫瘤的治療。為此利用富勒烯作為光敏劑開展光動力療法，即使其在腫瘤組織中蓄積，利用光照產生活性氧來選擇性的破壞腫瘤組織。透明質酸(HA)，又名玻尿酸，是一種酸性粘多糖，它是一種水溶性高分子聚合物，具有良好的生物可吸收性、生物兼容性、黏稠性及保水性。在細胞膜的表面有4類透明質酸的特定受體一⑶44(⑶分化群)、RHAMM(HA中介的遊動性受體)、IVd4及LEC(肝內皮細胞受體)，其中CD44在腫瘤細胞中的含量較高，而且不同的腫瘤細胞所含有的CD44的結構也不同。受體介導的腫瘤靶向性透明質酸納米藥物載體的研究。有報導證明，CD44可以抑制細胞的凋亡，其與單克隆抗體類(mAbs)或HA結合,不僅能抑NT淋巴細胞的凋亡,還能提高B淋巴細胞的存活率。它具有很好的靶向作用，無毒，並且能夠抑制癌細胞擴張。目前將富勒烯表面接枝一種具有靶向腫瘤細胞作用的高分子水溶性聚合物透明質酸，得到一種新的水溶性富勒烯，及其作為光敏劑和藥物轉運載體在腫瘤治療中的應用尚未見報導，因此，本發明的研製成功具有統計學上的意義和實際的臨床意義。

發明內容
針對上述情況，為解決現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種水溶性富勒烯及其應用，可有效解決現有腫瘤治療藥物副作用大、不能很好的抑制腫瘤細胞增殖的問題。
其解決的技術方案是一種富勒烯-透明質酸聚合物，即水溶性富勒烯，它是在原始的富勒烯經過純化處理的基礎上，與氨化試劑反應，將富勒烯表面連接上反應活性較強的氨基後，再與透明質酸反應，生成富勒烯-透明質酸聚合物，其中，透明質酸和富勒烯的質量含量比為O. 18-0. 25:1。水溶性富勒烯的製備方法，包括以下步驟
1)將氨化試劑20ml和氫氧化鈉Ig混合，再加入水和無水乙醇的重量比為I:5的混合溶劑60ml，攪拌均勻後，逐滴加入含有富勒烯的有機溶液50ml，在30-50°C、200r/min下攪拌反應1-7天，除去上層的有機溶劑，蒸除水和無水乙醇的混合溶劑，再用無水乙醇或甲醇500ml抽濾洗滌15次，在20-60°C下，真空乾燥24_72h，得氨基富勒烯；所述的氨化試劑為乙二胺、1，3-丙二胺、1，6-己二胺中的一種；所述的含有富勒烯的有機溶液由富勒烯和有機溶劑組成，每Iml的有機溶液中含富勒烯Img ;所述的有機溶劑為甲苯、苯、四氫呋喃中的一種或兩種以上的混合物；
2)稱取上述得到的氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、l-乙基_(3-二甲基氨基丙基) 碳醯二亞胺鹽酸鹽(EDC · HCl) 160mg、N-羥基琥珀醯亞胺(NHS) 120mg在20ml甲醯胺或N，N- 二甲基甲醯胺中混合均勻，在40-60 V、200r/min下攪拌反應24h，再用無水乙醇或丙酮500ml抽濾洗滌20次，除去未反應的I-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在20-60°C下，真空乾燥24-72h，得富勒烯-透明質酸聚合物，即水溶性富勒烯。富勒烯-透明質酸聚合物作為光敏劑在腫瘤治療中的應用分為體外和體內兩部分
1)將製得的富勒烯-透明質酸聚合物溶於水中製成溶液，加入到癌細胞A中進行培養，給藥後3h後用光源B光照，光照30-120min，繼續培養24小時，測定癌細胞A的存活率；
2)將製得的富勒烯-透明質酸聚合物溶於水中製成溶液，靜脈注射到荷瘤小鼠C體內，給藥後3h後用光源D光照，光照時間為30-120min，測量荷瘤小鼠C的腫瘤體積大小。上述步驟I中的癌細胞A為器官表面或者內部出現的各種實體瘤，肺癌，鼻咽癌，食道癌，胃癌，肝癌，大腸癌，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，白血病，胰腺癌，宮頸癌，喉癌，甲狀腺癌，舌癌，腦瘤(顱內腫瘤)，小腸腫瘤，膽囊癌，膽管癌，腎癌，前列腺癌，陰莖癌，睪丸腫瘤，子宮內膜癌，絨毛膜癌，陰道惡性腫瘤，外陰惡性腫瘤，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，皮膚癌，惡性黑色素瘤中的一種。上述步驟I中的光源B為400-800nm波長的寬波長光源或者雷射中的一種。優選532nm雷射。上述步驟2中的荷瘤小鼠C為器官表面或者內部出現的各種實體瘤，肺癌，鼻咽癌，食道癌，胃癌，肝癌，大腸癌，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，白血病，胰腺癌，宮頸癌，喉癌，甲狀腺癌，舌癌，腦瘤(顱內腫瘤)，小腸腫瘤，膽囊癌，膽管癌，腎癌，前列腺癌，陰莖癌，睪丸腫瘤，子宮內膜癌，絨毛膜癌，陰道惡性腫瘤，外陰惡性腫瘤，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，皮膚癌，惡性黑色素瘤中的一種。上述步驟2中的光源D為400-800nm波長的寬波長光源或者雷射中的一種。優選532nm雷射。本發明的富勒烯-透明質酸聚合物作為光敏劑來進行光動力治療體內深度腫瘤時，這些光源不能夠穿透照射時，可以通過適用與所述部位的方法來改善外部光源照射的穿透力進行腫瘤的治療。本發明的富勒烯-透明質酸聚合物作為光敏劑可以製成任意的藥物製劑劑型，比如注射劑、注射用無菌粉針、分散劑、貼劑、凝膠劑、植入劑等。本發明的富勒烯-透明質酸聚合物可以加入各種製劑的添加劑，比如生理鹽水、葡萄糖、緩衝溶液和防腐劑等以便於製備成需要的劑型。給藥方式可以為靜脈注射、肌肉注射、瘤內注射和皮下注射、透皮給藥、體內植入方式等。富勒烯-透明質酸聚合物作為藥物轉運載體在腫瘤治療中的應用，分為以下幾個步驟
1)將製得的富勒烯-透明質酸聚合物和抗腫瘤藥物A通過方式B進行結合；
2)將裝載藥物的富勒烯-透明質酸聚合物進行抗腫瘤細胞C和體內的抗腫瘤D的評 價。上述步驟I中的抗腫瘤藥物A為難溶性抗腫瘤藥物、水溶性藥物和核酸藥物，比如多西紫杉醇、紫杉醇、阿黴素、順鉬、卡鉬、柔紅黴素、寡義反核苷酸、小幹擾RNA和酶類藥物中的一種或幾種。上述步驟I中的方式B為超聲、攪拌、探超和旋轉蒸發中的一種或幾種。上述步驟2中的腫瘤細胞C為器官表面或者內部出現的各種實體瘤，肺癌，鼻咽癌，食道癌，胃癌，肝癌，大腸癌，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，白血病，胰腺癌，宮頸癌，喉癌，甲狀腺癌，舌癌，腦瘤(顱內腫瘤)，小腸腫瘤，膽囊癌，膽管癌，腎癌，前列腺癌，陰莖癌，睪丸腫瘤，子宮內膜癌，絨毛膜癌，陰道惡性腫瘤，外陰惡性腫瘤，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，皮膚癌，惡性黑色素瘤中的一種。上述步驟2中的腫瘤D為器官表面或者內部出現的各種實體瘤，肺癌，鼻咽癌，食道癌，胃癌，肝癌，大腸癌，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，白血病，胰腺癌，宮頸癌，喉癌，甲狀腺癌，舌癌，腦瘤(顱內腫瘤)，小腸腫瘤，膽囊癌，膽管癌，腎癌，前列腺癌，陰莖癌，睪丸腫瘤，子宮內膜癌，絨毛膜癌，陰道惡性腫瘤，外陰惡性腫瘤，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，皮膚癌，惡性黑色素瘤中的一種。本發明的富勒烯-透明質酸聚合物作為藥物轉運載體可以更多的分布在腫瘤組織中，與正常組織相比，它可以長期的高濃度的保留在腫瘤組織中，這樣當採用適當的手段使用光源進行照射時能夠在腫瘤組織中產生更多的活性氧，並且可以使其裝載的藥物在腫瘤部位濃度提高。但也會分布在正常的組織器官中，為了避免產生的活性氧對正常組織產生損傷，可以通過一些手段來加以改善，比如可以在富勒烯-透明質酸聚合物上裝載一些具有靶向性質的靶頭，也可以使用抗體等手段介導，可以使用臨床手段比如說內窺鏡的方式來直接輸送載藥系統到達靶組織，聚焦光照面積等方式。本發明的富勒烯-透明質酸聚合物作為藥物轉運載體可以製成任意的藥物製劑劑型，比如注射劑、注射用無菌粉針、分散劑、貼劑、凝膠劑、植入劑等。本發明的富勒烯-透明質酸聚合物可以加入各種製劑的添加劑，比如生理鹽水、葡萄糖、緩衝溶液和防腐劑等以便於製備成需要的劑型。給藥方式可以為靜脈注射、肌肉注射、瘤內注射和皮下
注射等。本發明物理以及化學穩定性良好，製備條件容易滿足，原料來源豐富，成本低，副作用小，是腫瘤治療藥物載體上的創新。
具體實施例方式以下結合實施例對本發明的具體實施方式
作進一步詳細說明。實施例I
1)將乙二胺20ml和氫氧化鈉Ig加入水和無水乙醇重量比為1:5的混合溶液60ml,攪拌均勻後，逐滴加入lmg/ml的富勒烯的甲苯溶液50ml,在30°C、200r/min下攪拌反應7天，除去上層的甲苯，蒸除水和無水乙醇的混合溶液，再用無水乙醇500ml抽濾洗滌15次，在40°C下，真空乾燥48h，得氨基富勒烯；
2)稱取上述氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、I-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽160mg、N-輕基琥拍醯亞胺120mg在20ml甲醯胺中混合均勻，在40°C、200r/ min下攪拌反應24h,再用無水乙醇500ml抽濾洗漆20次,除去未反應的I-乙基_(3_ 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在40°C下，真空乾燥48h，得水溶性富勒烯35mg。實施例2
1)將1，3_丙二胺20ml和氫氧化鈉Ig加入水和無水乙醇重量比為1:5的混合溶液60ml,攪拌均勻後,逐滴加入lmg/ml的富勒烯的苯溶液50ml,在30°C、200r/min下攪拌反應7天，除去上層的苯，蒸除水和無水乙醇的混合溶液，再用甲醇500ml抽濾洗滌15次，在20°C下，真空乾燥72h，得氨基富勒烯；
2)稱取上述氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、l-乙基_(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽160mg、N-羥基琥珀醯亞胺120mg在20mlN，N-二甲基甲醯胺中混合均勻，在40°C、200r/min下攪拌反應24h，再用丙酮500ml抽濾洗滌20次，除去未反應的I-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在40°C下，真空乾燥48h，得水溶性富勒烯32mg。實施例3
I)將1,6-己二胺20ml和氫氧化鈉Ig加入水和無水乙醇重量比為1:5的混合溶液60ml中，攪拌均勻後，逐滴加入lmg/ml的富勒烯的四氫呋喃溶液50ml，在30°C、200r/min下攪拌反應7天，除去上層的四氫呋喃，蒸除水和無水乙醇的混合溶液，再用甲醇500ml抽濾洗滌15次，在60°C下，真空乾燥24h，得氨基富勒烯；
2)稱取上述氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、l-乙基_(3- 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽160mg、N-輕基琥拍醯亞胺120mg在20mlN, N- 二甲基甲醯胺中混合均勻，在40°C、200r/min下攪拌反應24h，再用丙酮500ml抽濾洗滌20次，除去未反應的I-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在40°C下，真空乾燥48h,得水溶性富勒烯30mg。相關試驗資料如下
一、使用光照射本發明水溶性富勒烯對腫瘤細胞生長的抑制活性的測定通過光照射水溶性富勒烯在體外抗腫瘤活性將PC3前列腺癌細胞(由上海細胞庫提供)用作待考察的癌細胞。將PC3細胞培養在含胎牛血清(FBS) 10%，青鏈黴素混合液1%的RPMI1640培養基中，培養箱條件為37°C、5% CO2,每2 3天傳代一次。收集對數期細胞，調整細胞懸液濃度，96孔板每孔加入200 μ 1，鋪板使待測細胞調密度至6 X IO3個/孔，(邊緣孔用無菌PBS填充)。置於5% CO2, 37 °C孵育24 h，至細胞單層鋪滿孔底(96孔平底板)，加入濃度梯度(12. 5、25、50、100μ g/ml)的水溶性富勒烯透明質酸，設置復孔為4 6個。光照組放置在400W可見光中60min，保持光照過程中溫度在37°C，光照結束後用鋁箔包裹細胞板置於CO2培養箱中孵育24 h，對於不光照組而言，則直接用鋁箔包裹細胞板置於CO2培養箱中孵育24 h，終止培養，吸出含藥培養基，每孔用150 μ I PBS洗2遍，加入預冷的10% TCA 200 μ 1,4 °C放置I h。倒掉固定液，每孔用去離子水洗5遍，甩幹，空氣乾燥。每孔加入100 μ I的SRB溶液，靜置放置10 min，未與蛋白結合的SRB用1%醋酸洗5遍，空氣乾燥。結合的SRB用150 μ I 10 mmol/L非緩衝Tris鹼溶解。在515 nm處測定每孔的OD值。存活率的計算公式存活率=實驗組OD值/對照組OD值，其中實驗組和對照組均為扣除空白對照組後的值。結果表明，當用光照射60min,水溶性富勒烯透明質酸的加入直接影響了 PC3細胞的增殖。二、光照射時，水溶性富勒烯的體內抗腫瘤活性測定
取小鼠S180腹水瘤細胞，用注射用生理鹽水以3:1比例稀釋後，每隻小鼠於腹腔注射0.3 ml,小鼠餵養7天後，抽取小鼠S180腹水瘤細胞，計數後以注射用生理鹽水稀釋成濃度為2 X IO6個/ml的細胞懸液,皮下接種與小鼠右前肢上部。小鼠接種腫瘤7天後,取其中24隻腫瘤體積彡100 mm3昆明小鼠，隨機分為4組，每組6隻。具體分組如下(I)對照組(NS組)生理鹽水；(2)生理鹽水雷射組；(3)水溶性富勒烯透明質酸組；(4)水溶性富勒烯透明質酸雷射組。4組均採用靜脈給藥的方式，其中光照組使用的光源為532nm綠相光源，功率為300mW，給藥3h後雷射照射腫瘤部位，一次照射時間為lOmin。每2天給藥一次，每次注射生理鹽水或者2mg/ml的水溶性富勒烯透明質酸100 μ 1，共給藥7次。整個實驗過程中每日觀察小鼠生活狀態，每2 d稱其體重並使用遊標卡尺測量小鼠肉瘤的長徑(A)與短
徑(B)，按公式腫瘤體積
權利要求
1.一種水溶性富勒烯，其特徵在於，該水溶性富勒烯是在富勒烯分子上通過化學鍵連接透明質酸製成，透明質酸和富勒烯的質量比為O. 18-0. 25:1，所述的富勒烯為C6tl富勒烯。
2.權利要求I所述的水溶性的富勒烯的製備方法，其特徵在於，包括以下步驟 1)將氨化試劑20ml和氫氧化鈉Ig混合，再加入水和無水乙醇的重量比為1:5的混合溶劑60ml，攪拌均勻後，逐滴加入含有富勒烯的有機溶液50ml，在30-50°C、200r/min下攪拌反應1-7天，除去上層的有機溶劑，蒸除水和無水乙醇的混合溶劑，再用無水乙醇或甲醇500ml抽濾洗滌15次，在20-60°C下，真空乾燥24_72h，得氨基富勒烯；所述的氨化試劑為乙二胺、1，3-丙二胺、1，6-己二胺中的一種；所述的含有富勒烯的有機溶液由富勒烯和有機溶劑組成，每Iml的有機溶液中含富勒烯Img ;所述的有機溶劑為甲苯、苯、四氫呋喃中的一種或兩種以上的混合物； 2)稱取上述得到的氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、l-乙基_(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽160mg、N-羥基琥珀醯亞胺120mg在20ml甲醯胺或N，N-二甲基甲醯胺中混合均勻，在40-60°C、200r/min下攪拌反應24h,再用無水乙醇或丙酮500ml抽濾洗漆20次，除去未反應的I-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在20-60°C下，真空乾燥24-72h，得富勒烯-透明質酸聚合物，即水溶性富勒烯。
3.根據權利要求2所述的水溶性富勒烯的製備方法，其特徵在於，I)將乙二胺20ml和氫氧化鈉Ig加入水和無水乙醇重量比為1:5的混合溶液60ml，攪拌均勻後，逐滴加入Img/ml的富勒烯的甲苯溶液50ml,在30°C、200r/min下攪拌反應7天,除去上層的甲苯,蒸除水和無水乙醇的混合溶液，再用無水乙醇500ml抽濾洗滌15次，在40°C下，真空乾燥48h，得氨基富勒烯； 2)稱取上述氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、I-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽160mg、N-輕基琥拍醯亞胺120mg在20ml甲醯胺中混合均勻，在40°C、200r/min下攪拌反應24h,再用無水乙醇500ml抽濾洗漆20次,除去未反應的I-乙基_(3_ 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在40°C下，真空乾燥48h，得水溶性富勒烯35mg。
4.根據權利要求2所述的水溶性富勒烯的製備方法，其特徵在於，I)將1，3-丙二胺20ml和氫氧化鈉Ig加入水和無水乙醇重量比為1:5的混合溶液60ml，攪拌均勻後，逐滴加入lmg/ml的富勒烯的苯溶液50ml,在30°C、200r/min下攪拌反應7天,除去上層的苯,蒸除水和無水乙醇的混合溶液，再用甲醇500ml抽濾洗滌15次，在20°C下，真空乾燥72h，得氨基富勒烯； 2)稱取上述氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、l-乙基_(3- 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽160mg、N-羥基琥珀醯亞胺120mg在20mlN，N-二甲基甲醯胺中混合均勻，在40°C、200r/min下攪拌反應24h，再用丙酮500ml抽濾洗滌20次，除去未反應的I-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在40°C下，真空乾燥48h，得水溶性富勒烯32mg。
5.根據權利要求2所述的水溶性富勒烯的製備方法，其特徵在於，I)將1，6-己二胺20ml和氫氧化鈉Ig加入水和無水乙醇重量比為1:5的混合溶液60ml中，攪拌均勻後，逐滴加入lmg/ml的富勒烯的四氫呋喃溶液50ml,在30°C、200r/min下攪拌反應7天,除去上層的四氫呋喃，蒸除水和無水乙醇的混合溶液，再用甲醇500ml抽濾洗滌15次，在60°C下，真空乾燥24h，得氨基富勒烯； 2)稱取上述氨基富勒烯50mg與透明質酸80mg、l-乙基_(3- 二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽160mg、N-羥基琥珀醯亞胺120mg在20mlN，N-二甲基甲醯胺中混合均勻，在40°C、200r/min下攪拌反應24h，再用丙酮500ml抽濾洗滌20次，除去未反應的I-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳醯二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀醯亞胺和透明質酸，在40°C下，真空乾燥48h,得水溶性富勒烯30mg。
6.根據權利要求I或2-5任何一項所述的水溶性富勒烯，其特徵在於，所述的水溶液富勒烯的粒徑為30-300nm。
7.根據權利要求I或2-5任何一項所述的水溶性富勒烯在抗腫瘤光動力治療的光敏劑中的應用。
8.權利要求I或2-5任何一項所述的水溶性富勒烯在作為抗腫瘤藥物載體中的應用。
全文摘要
本發明涉及水溶性富勒烯及其應用，可有效解決現有腫瘤治療藥物副作用大、不能很好的抑制腫瘤細胞增殖的問題，其解決的技術方案是，在原始的富勒烯經過純化處理的基礎上，與氨化試劑反應，將富勒烯表面連接上反應活性較強的氨基後，再與透明質酸反應，生成富勒烯-透明質酸聚合物，其中，透明質酸和富勒烯的質量含量比為0.18-0.25:1，本發明物理以及化學穩定性良好，製備的條件容易滿足，原料來源豐富，成本低，副作用小，是腫瘤治療藥物載體上的創新。
文檔編號A61P35/00GK102898542SQ20121040670
公開日2013年1月30日 申請日期2012年10月23日 優先權日2012年10月23日
發明者張紅嶺, 史進進, 張振中, 劉豔, 葉凡, 高君, 劉瑞瑗, 馬柔柔, 餘曉媛, 張靜, 王蕾, 侯琳 申請人:鄭州大學