用於調控sirtuin基因表達的方法

2023-12-09 09:29:26 2

用於調控sirtuin基因表達的方法
【專利摘要】本發明提供了用於在動物中調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老的方法。方法包括向動物施用一種或多種異黃酮，優選的量是從約0.001至約10g/kg/天。
【專利說明】用於調控SIRTUIN基因表達的方法
[0001]相關申請的交叉引用
[0002]本申請要求2011年4月15日提交的美國臨時申請系列號61/517228的優先權，其公開內容通過引用整合到本文中。
[0003]發明背景 發明領域
[0004]本發明一般涉及用於調控基因表達的方法，特別涉及用於在動物中調控sirtuin基因表達的方法。
[0005]相關領域描述
[0006]異黃酮是在植物，如豆類和豆科植物(特別是大豆)中發現的天然存在的化學化合物。異黃酮模擬雌激素的效應，並調節雌激素代謝。其結果是，已知異黃酮降低腫瘤細胞增殖，誘導腫瘤細胞凋亡，調控激素平衡，並降低乳腺癌和前列腺癌、心臟病、骨質疏鬆和若干其他疾病和病症的風險。
[0007]蛋白質表達是基因表達的亞成分(subcomponent)。蛋白質表達表示DNA翻譯成多肽鏈之後的階段，該多肽鏈最終摺疊成蛋白質。蛋白質表達通常被用於表示對特定細胞或組織中的一種或多種蛋白質的量或濃度的量度。
[0008]Sirtuin是低等生物中調控壽命的NAD+依賴性酶的家族,所述低等生物包括酵母、蠕蟲和蠅類。尚不清楚sirtuin如何影響壽命。迄今為止，已經在哺乳動物中鑑別出7個家族成員。SIRT6和SIRT7是核蛋白。SIRT3、SIRT4和SIRT5是線粒體蛋白。SIRTl和SIRT2是在核和細胞質中均發現的蛋白質。哺乳動物的sirtuin與細胞脅迫抗性、基因組穩定性、腫瘤發生和能量代謝相關。參見Finkel等人，Nature460, 587-591 (2009)。
[0009]SIRTl表現出介導與能量限制相關的壽命延長。SIRTl的激活通過調控熱量限制期間的能量消耗來提高壽命。SIRTl還表現出降低(6-澱粉樣蛋白斑的產生。(6-澱粉樣蛋白斑的積累與阿爾茨海默病相關。參見Donmez等人，Celll42，320-332 (2010)。異黃酮衍生物對SIRTl的活化和表達表現出差異性效應。據報導，白藜蘆醇——SIRTl的激活
劑-促進線粒體的生物發生，並保護其免受代謝病。參見Rasbach等人,JPharmacol Exp
Ther325，536-543 (2008)。雖然白藜蘆醇是有效的，但它對氧高度敏感，難以維持其穩定性。
[0010]熱量限制通過激活sirtuin,增加了壽命、促進健康、延遲衰老和衰老相關疾病。在人和寵物中難以實踐熱量限制。
[0011]因此，需要用於在動物中調控sirtuin基因表達的組合物和方法。還需要用於調控sirtuin基因表達從而調控sirtuin表達，模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老的組合物和方法。這類療法在衰老的人和其他動物中將特別有效，用於改善所有涉及動物的整體生活質量。對於伴侶動物，這類療法將導致改善主人的滿意度，改善主人-伴侶動物的關係。
[0012]發明概述
[0013]因此，本發明的目標是提供用於調控動物中的sirtuin基因表達的方法。[0014]本發明的另一個目標是提供用於在動物中模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老的方法。
[0015]本發明的另一個目標是提供用於在動物中調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老的組合物。
[0016]一個或多個上述或其它目標是通過向動物施用一種或多種治療有效量的異黃酮實現的。在普通的實施方案中，向動物施用的異黃酮的量是從約0.001至約10g/kg/天。
[0017]本發明的其他目標、特徵和優點對於本領域技術人員是顯而易見的。
[0018]發明詳述
[0019]定義
[0020]術語「異黃酮」意指可用於本發明的異黃酮，及其天然的或合成的類似物、衍生物、前體和代謝物。異黃酮指3-苯基色酮,是黃酮的異構體形式,其中苯基與苯並批喃環的3位而非2位連接。可以在多種來源中發現異黃酮，所述來源包括但不限於大豆。異黃酮的非限制性例子包括大豆黃素；大豆苷；6-0_丙二醯大豆黃素；6-0_乙醯大豆黃素；染料木黃酮；
6-0-丙二醯染料木黃酮；6-0_乙醯染料木黃酮；黃豆黃素；6-0_丙二醯黃豆黃素；6-0_乙醯黃豆黃素；鷹嘴豆素甲；芒柄花素；德鳶尾素；櫻黃素；紅車軸草異黃酮；glycitinn ;二氫大豆黃素；雌馬酚；0_脫甲基安哥拉紫檀素；大豆黃素7，4' -二-O-硫酸酯；大豆黃素
7-0-β-D-葡糖苷酸；大豆黃素4』-O-硫酸酯；6，7，5'-三羥基異黃酮；6，7，3'，4'-四羥基異黃酮；7，8，4'-三羥基異黃酮；5，6，7，4'-四羥基異黃酮；二氫染料木黃酮；對乙苯酚；3'，4'，5，7-四羥基異黃`酮；染料木黃酮4』-O-硫酸酯；染料木黃酮7-0-β-D-葡糖苷酸；染料木黃酮4』 -O-硫酸酯；和4' ,5,7-三羥基異黃酮.[0021]術語「動物」意指任何可以從sirtuin基因表達調控受益的動物，例如人、禽、牛類動物(bovine)、犬科動物(canine)、馬類動物(equine)、貓科動物(feline)、hicrine、狼類動物(lupine)、鼠類動物(murine)、羊類動物(ovine)和豬類(porcine)動物。
[0022]術語「伴侶動物」意指家養動物，例如貓、狗、兔、豚鼠、雪貂、倉鼠、小鼠、沙鼠、馬、
牛、山羊、綿羊、驢、豬等。
[0023]術語「治療有效量」意指本發明化合物⑴治療或預防文中所述的特定疾病、病患或病症的量，(ii)減弱、緩和或消除特定疾病、病患或病症的一種或多種症狀的量或者(iii)預防或延緩文中所述的特定疾病、病患或病症的一種或多種症狀的發作的量。
[0024]術語「治療」包含預防性即預防治療和姑息治療。
[0025]術語「藥學上可接受的」和「營養學上可接受的」表明物質或組合物必須是在化學和/或毒理學上與製劑包含的其他成分和/或要用其治療的哺乳動物是相容的。
[0026]術語「動物的健康和/或身心健康」意指動物的整個身體、精神和社交是健康幸福的，不僅僅是無疾病或不衰弱。
[0027]術語「延長盛年期」意指延長動物過健康生活的歲數，並不僅僅延長動物活著的歲數，例如動物在其生命盛年期相對更長的一段時間內是健康的。
[0028]術語「聯合」意指將本發明的組合物(I)在食品組合物中一起施用至動物或者(2)利用相同或不同的施用途徑，在大約相同時間或周期地，以相同或不同頻率單獨施用至動物。「周期地」意指將組合物以對於特定化合物或組合物可接受的日程施用。「大約相同的時間」通常意指將組合物在相同的時間或者互相在大約72小時之內施用。[0029]術語「膳食補充劑」意指除動物正常飲食之外，旨在被攝入的產品。膳食補充劑可以是任何形式的，例如固體、液體、凝膠、片劑、膠囊、粉末等。優選地，將其以方便的劑型例如囊劑提供。可將膳食補充劑以散裝(bulk)零售包裝例如散裝粉末、液體、凝膠或油狀物提供。類似地，可將所述補充劑以散裝量提供以被包括在其他食品項目例如點心、零食(treats)、補充物棒、飲料等中。
[0030]術語「衰老」意指使動物達到或超過動物物種和/或該物種中的品種的50%平均生命預期的老齡。例如，如果給定的狗品種的平均生命預期是12年，則該品種的「衰老動物」是6歲或更老。
[0031]術語「食物」或「食物產品」或「食物組合物」意指預期用於動物包括人食用的產品或組合物，並為動物提供營養。
[0032]術語「規律的」意指至少每個月施用本發明的組合物，並更優選每周施用。在一些實施方案中，更頻繁的施用或消費例如每周兩次或三次是優選的。還更優選的是包括至少每天消費一次的方案，例如當本發明的組合物是至少每天一次消費的食物組合物的組分時。
[0033]術語「單一包裝」意指將套盒(kit)的組件物理聯合在一個或多個容器中或與一個或多個容器物理聯合，並視為生產、分配、銷售或使用的單位。容器包括但不限於包、盒、紙板箱、瓶、包裝例如收縮包裝、釘連的或其他方式附著的部件或其組合。單一包裝可以是物理關聯的單個本發明的組合物和食物組合物的容器，從而它們被認為是生產、分配、銷售或使用的單位。
[0034]術語「虛擬包裝」意指套盒的組件通過關於一個或多個物理或虛擬的套盒組件的說明(directions)聯繫在一起，所述說明指導使用者如何獲得其他組件，例如含有一個組件和說明的包或者其他容器，所述說明指導使用者訪問站點、獲取記錄信息或回傳服務、看可視信息或者接觸看護者或指導者以獲得如何使用所述套盒或者安全性或者有關一個或多個套裝組件技術信息的指導。`
[0035]除非另外指明，文中表述的劑量表示為毫克/千克體重/天(mg/kg/天)。
[0036]除非另外具體指明，文中表述的所有百分數是基於乾物質的相對組合物重量的百分數。技術人員將理解術語「基於乾物質」意指組合物中存在的成分的濃度或百分數是已除去組合物中任何游離水分後測量或測定的。
[0037]如全文所用，文中以速記(shorthand)方式使用範圍，以避免必須陳列和描述範圍內的各個值和每一值。如果合適的話，可將範圍內的任何適當值選為範圍的上限值、下限值或端點。
[0038]如文中所用，除非上下文另外清楚說明，單數形式的詞包括其複數形式，且反之亦然。因此，「一種(a/an)」和「該(the)」的說法通常包括各術語的複數。例如「一種補充劑」、「一種方法」或「一種食物」的說法包括複數的所述「補充劑」、「方法」或「食物」。類似地，詞「包含」應解釋為包含在內，而不應進行排除性解釋。同樣，術語「包括」和「或」都應解釋為包括在內的，除非根據上下文該解釋是被清楚禁止的。類似地，特別是當置於一系列術語後面時，術語「示例」僅是示範性和解釋性的，並不應認為是唯一的或全部的。
[0039]文中公開的方法和組合物和其他進步不限於文中描述的具體的方法、策略和試劑，因為正如技術人員將理解的，它們可以改變。此外，文中所用的術語僅是用於描述特定實施方案的目的，並不意欲限制以及不用於限制所公開或所要求保護的範圍。
[0040] 除非另外定義，所有技術和科學術語、專業術語和文中所用的縮寫具有本發明領域內或者使用該術語的領域內的普通技術人員通常所理解的含義。儘管任何組合物、方法、 製品或其他類似於或相當於文中所述的那些的手段或物質可用於實施本發明，但是文中描述了優選的組合物、方法、製品或其他手段或物質。
[0041]將文中引用或提到的所有專利、專利申請、出版物、技術和/或學術論文，以及其它參考文獻以法律允許的程度全部引入文中作為參考。所述參考文獻的討論僅旨在總結其中所做的主張。並不是承認任何所述專利、專利申請、出版物或參考文獻或者其任何部分是相關的、具體的或是現有技術的。尤其保留挑戰所述相關的、具體的或現有技術的專利、專利申請、出版物和其它參考文獻的任何主張的準確度和適當性的權利。
[0042]本發明
[0043]在一個方面，本發明提供了用於調控動物中的sirtuin基因表達的方法。方法包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達。
[0044]在另一個方面，本發明提供了用於模擬動物中的熱量限制的方法。方法包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且因此模擬動物中的熱量限制。
[0045]在另一個方面，本發明提供了用於預防和治療動物中的阿爾茨海默病的方法。方法包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且因此預防和治療動物中的阿爾茨海默病。
[0046]在另一個方面，本發明提供了用於增加動物壽命的方法。方法包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且因此增加動物壽命。
[0047]在另一個方面，本發明提供了用於延緩動物衰老的方法。方法包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且因此延緩動物衰老。
[0048]本發明是基於這樣的發現，即，向動物施用異黃酮調控動物中的sirtuin基因表達，和sirtuin影響與動物相關的多種功能，例如模擬動物的熱量限制、預防和治療動物的阿爾茨海默病、增加動物壽命和延緩動物衰老等。
[0049]調控sirtuin基因表達調控了動物中的血清素(serotonin)的量。在優選的實施方案中，sirtuin基因是上調的，並且因此增加動物中的sirtuin的量。
[0050]調控的sirtuin基因和血清素是SIRT2和SIRT3。研發用於支持本發明的數據顯示，SIRT6的基因不受向動物施用異黃酮的調控。
[0051]在一個實施方案中，表達的sirtuin 基因是 SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5 或 SIRT7的至少一種。在另一個實施方案中，表達的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一種。在另一個實施方案中，表達的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
[0052]在另一個方面，本發明提供了用於調控動物中的SIRTl表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
[0053]在另一個方面，本發明提供了用於調控動物中的SIRT2表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
[0054]在另一個方面，本發明提供了用於調控動物中SIRT3表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。[0055]在另一個方面，本發明提供了用於調控動物中SIRT4表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
[0056]在另一個方面，本發明提供了用於調控動物中SIRT5表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
[0057]在另一個方面，本發明提供了用於調控動物中SIRT7表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
[0058]在多個實施方案中，動物是任何具有調控sirtuin基因表達的需要的動物，所述需要包括但不限於模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老。在一個實施方案中，動物是人或伴侶動物，優選犬科動物或貓科動物。在另一個實施方案中，動物是衰老的動物。
[0059]異黃酮是本領域技術人員已知的任何異黃酮。在多個實施方案中，異黃酮選自形式為糖苷配基、糖苷、乙醯糖苷和丙二醯糖苷的異黃酮。優選的，異黃酮選自鷹嘴豆素甲、大豆黃素、大豆苷、黃豆黃素、芒柄花素、雌馬酚、染料木黃酮、德鳶尾素、羽扇豆異黃酮、櫻黃素、紅車軸草異黃酮和glycitinn。在一個實施方案中，異黃酮是從大豆獲得的大豆異黃酮，或通過飼餵大豆或大豆提取物給動物向動物施用的異黃酮。在另一個實施方案中，異黃酮是用一個或多個木脂體或coumestan取代的異黃酮,所述木脂體或coumestan如松脂醇、落葉松樹脂醇、閉聯異松樹脂醇(secoisolariciresinol)、馬臺樹脂醇、羥基馬臺樹脂醇、丁香樹脂醇、芝麻素、腸二醇、腸內酯和擬雌內酯。
[0060]向動物施用調控sirtuin基因表達的異黃酮的任何量。
[0061]在優選的實施方案中，向動物施用一種或多種異黃酮，施用的量是從約0.1至約10克異黃酮，優選從約0.5至約7.5克，更優選從約I至約5克。
[0062]在多個實施方案 中，向動物施用的異黃酮的量是從約0.1至約10克異黃酮/天(g/天)，優選從約0.5至約7.5g/天，更優選從約I至約5g/天。
[0063]在其他實施方案中，向動物施用的異黃酮的量是從約0.001至約10克異黃酮/千克體重(g/kg/bw),優選從約0.05至約5g/kg/bw,更優選從約0.01至約lg/kg/bw。
[0064]在其他實施方案中，向動物施用的異黃酮的量是從約0.001至約10克異黃酮每千克體重/天(g/kg/bw/天)，優選從約0.05至約5g/kg/bw/天，更優選從約0.01至約Ig/kg/bw/ 天。
[0065]在另一個方面，本發明提供了用於調控sirtuin基因表達的包含治療有效量的異黃酮的組合物。在另一個實施方案中，本發明提供了用於調控sirtuin基因表達並且因此能夠實現模擬動物的熱量限制、預防和治療動物的阿爾茨海默病、增加動物壽命和延緩動物衰老中的一種或多種的包含治療有效量的異黃酮的組合物。
[0066]可利用任何適當的施用途徑、以任何適當的形式，將本發明的組合物施用至動物。例如，可將組合物以食物組合物、以膳食補充劑、以藥物組合物、以營養品組合物或者作為藥物施用。類似地，可利用各種施用途徑包括口腔、鼻內、靜脈內、肌內、胃內、經幽門、皮下、直腸等施用組合物。優選地，將組合物口服施用至動物。最優選地，將組合物作為膳食補充劑或者作為食物組合物的成分口服施用至動物。
[0067]在優選的實施方案中，將本發明的組合物作為適合動物包括人和伴侶動物例如狗和貓消費的食物組合物成分施用至動物。此類食物組合物包括預期為動物提供必需飲食需求的完善食物或者食物補充劑例如動物零食。
[0068]在各實施方案中，食物組合物例如寵物食物組合物或寵物零食組合物包含大約5%至大約50%的粗蛋白。粗蛋白物質可包含植物蛋白例如大豆粉、大豆蛋白濃縮物、玉米谷蛋白粉、小麥谷蛋白、棉杆和花生粉或者動物蛋白例如釀蛋白、白蛋白和肉蛋白。文中可用的肉蛋白的示例包括牛肉、豬肉、羔羊肉、馬肉、禽肉、魚肉及其混合物。
[0069]食物組合物還可含有大約5%至大約40%的脂肪。適當的脂肪示例包括動物脂肪和植物脂肪。優選地，脂肪源是動物脂肪源例如牛/羊脂(tallow)或者油脂(grease)。還可使用植物油例如玉米油、葵花籽油、紅花油、葡萄籽油、大豆油、橄欖油和其他富含單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸的油。
[0070]食物組合物還可包含大約10%至大約60%的碳水化合物。適當的碳水化合物的示例包括穀物或穀類例如米、玉米、黍、高粱、紫花苜蓿、大麥、大豆、油菜(canola)、燕麥、小麥、黑麥、黑小麥和其混合物。組合物還可任選地含有其他物質例如幹乳清和其他的乳副產品。
[0071]所述食物組合物的含水量可根據食物組合物的性質而變化。食物組合物可以是幹組合物(例如粗塊食物(kibble))、半溼潤組合物、溼組合物或其任何混合物。在優選的實施方案中，組合物是完全和營養均衡的寵物食物。在所述實施方案中，寵物食物可以是「溼食物」、「乾食物」或者中等含水量的食物。「溼食物」描述通常在罐或錫箔袋中銷售的寵物食物，並通常具有大約70%至大約90%的含水量。「乾食物」描述具有與溼食物相似組成的寵物食物，但是含有有限的含水量，通常在大約5%至大約15%或者大約20%的範圍內(通常作為小餅乾樣粗塊食物(kibbles)存在)。在一優選的實施方案中，組合物具有大約5%至大約20%的含水量。乾食物產品包括各種不同含水量的食物，從而它們是相對耐貯存的，並對微生物或真菌損害或汙染是耐受的。還優選的是乾食物組合物，其是擠出的食物產品，例如寵物食物或者用於人或伴侶動物的快餐食物。
·[0072]食物組合物還可含有一種或多種纖維源。術語「纖維」包括食物中所有「填充物(bulk) 」源，不論是可消化的或不可消化的，可溶解的或不溶解的，可發酵的或不可發酵的。優選的纖維是植物例如海生植物來源的，但是也可使用微生物來源的纖維。正如本領域普通技術人員應該知道的，可利用多種可溶的或不溶的纖維。纖維源可以是甜菜漿(來自於甜菜)、阿拉伯樹膠、塔爾哈(talha)膠、蚤草、米糠、角豆樹豆膠、柑橘果肉、果膠、低聚果糖、短鏈果寡糖、甘露果寡糖、大豆纖維、阿拉伯半乳聚糖、低聚半乳糖、阿拉伯糖基木聚糖或其混合物。
[0073]或者，纖維源可以是可發酵纖維。以前已描述了可發酵纖維用於為伴侶動物的免疫系統提供益處。還可將技術人員已知的提供增加腸道中益生菌的生長的益生元的可發酵纖維或其他組合物加入所述組合物中，以增加本發明提供的對動物免疫系統的益處。
[0074]在一些實施方案中，食物組合物的灰分含量是從低於1%至大約15%，優選大約5%至大約10%。
[0075]在優選實施方案中，組合物是食物組合物，其包含大約15%至大約50%的蛋白質、大約5%至大約40%的脂肪、大約5%至大約10%的灰分含量，並具有大約5%至大約20%的含水量。在其他實施方案中，食物組合物還含有文中所述的益生元或益生菌。
[0076]當以食物組合物施用時，異黃酮的量作為組合物的百分比是食物組合物的大約0.1至大約40%、優選大約3至大約30%、更優選大約5至大約20%。在各實施方案中，食物組合物包含大約 1%、2%、4%、6%、8%、10%、12%、14%、16%、18%、20%、22%、24%、 26%、28%、30%、32%、34%、36%、38% 或 40%。
[0077]在另一實施方案中，將組合物以膳食補充劑施用至動物。膳食補充劑可具有任何適當的形式，例如肉湯、飲用水、飲料、酸乳、粉末、顆粒、糊、混懸液、咀嚼劑、小片(morseI)、 零食、點心、小球(pellet)、丸劑、膠囊劑、片劑、囊劑或任何其他適合遞送的形式。膳食補充劑可含有組合物和任選的化合物例如維生素、防腐劑、益生菌、益生元和抗氧化劑。這使得能夠將補充劑小量地施用至動物，或者可在施用至動物前，將補充劑稀釋。施用至動物前， 膳食補充劑可能需要與食物組合物或者與水或其他稀釋劑混合。當以膳食補充劑施用時， 組合物包括補充劑的大約0.1至大約90%，優選大約3至大約70%，更優選大約5至大約 60%。
[0078]在另一實施方案中，將組合物以藥物組合物或營養品組合物施用至動物。藥物組合物包含本發明的組合物，以及一種或多種藥學或營養學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。通常，通過將化合物或組合物與下列物質混合製備藥物組合物:賦形劑、緩衝劑、粘合齊[|、增塑劑、著色劑、稀釋劑、壓縮劑(compressing agents)、潤滑劑、矯味劑、潤溼劑等,包括技術人員已知的可用於生產藥物和配製適於作為藥物施用至動物的組合物的其他成分。 當以藥物組合物或營養品組合物施用時，組合物包括本發明的組合物的大約0.1至大約 90 %，優選大約3至大約70 %，更優選大約5至大約60 %。
[0079]可根據需要、根據預期或者規律地將本發明的組合物施用至動物。規律施用的目標是向動物提供覿律和連貫劑量的組合物或者由所述攝入產生的直接或間接的代謝產物。 所述規律和連貫的施用將預期產生組合物或者其直接或間接代謝產物的恆定血液水平。因此，規律施用可以是每月一次、每周一次、每天一次或每天多次。類似地，施用可以是每隔一天、一周或者一月，每隔兩天、兩周或者兩月，每隔三天、三周或者三月等。施用可以是每天多次。當用作日常飲食需求的補充劑時，可將組合物例如經口服或以其它方式直接施用至動物。或者，可將組合物與日常飼料或食物包括流體例如飲用水相接觸或者混合在一起，或者靜脈內聯合用於接受所述治療的動物。施用還可作為動物膳食方案的一部分實現。例如， 膳食方案可包含以實現本發明方法的有效的量，使動物規律地攝取組合物。
[0080]根據本發明的方法，組合物的施用包括作為飲食方案的一部分的施用可跨越從動物分娩到成年生活的一段時間。在各實施方案中，動物是人或伴侶動物例如狗或貓。在一些實施方案中，動物是年輕或正成長的動物。在更優選的實施方案中，動物是衰老的動物。在其他實施方案中，當動物已達到其預計或預期壽命的超過大約30%、40%或50%時，例如規律地或長期規律地，開始施用。在一些實施方案中，動物已達到其預期壽命的40%、45% 或50 %。還在其他實施方案中，動物是更老的，已達到其可能壽命的60 %、66 %、70 %、75 % 或80%。壽命的確定基於保險精算表格、計算、估計等，並可考慮過去、現在和未來的已知是積極或消極地影響壽命的影響或因素。當確定壽命時，種類、性別、大小、遺傳因素、環境因素和應激源、現在和過去的健康狀況、過去和現在的營養狀況、應激源等的考慮還可影響或者被考慮在內。
[0081]向動物施用一段時間的本發明的組合物，所述時間是實現本發明的一個或多個目標所需要的，所述目標例如，調控sirtuin基因表達；模擬熱量限制；預防和治療阿爾茨海默病；增加壽命；延緩動物衰老；改善生活質量；和促進動物的健康和身心健康。優選的，向動物規律的施用組合物。
[0082]在另一個方面，本發明提供了包含治療有效量的本發明的組合物的治療組合物，用於調控sirtuin基因表達；模擬熱量限制；預防和治療阿爾茨海默病；增加壽命；延緩動物衰老；改善生活質量；和促進動物的健康和身心健康中的一種或多種。治療組合物含有的本發明的組合物的量足以向動物施用這樣的量的本發明的組合物，即，當根據對於特定組合物的預期或推薦施用組合物時，所述量從約0.005至約1000mg/kg/天,優選從約0.01至約500mg/kg/天,最優選從約0.05至約250mg/kg/天。通常,本發明的組合物包括從約I至約90%的治療組合物，優選從約3至約70%，更優選從約5至約60%。在某些實施方案中，本發明的組合物包括90 %以上的治療組合物。
[0083]在各實施方案中，組合物還含有一種或多種物質例如維生素、礦物質、益生菌、益生元、鹽和功能添加劑包括例如palatants、著色劑、乳化劑和抗微生物劑或其他防腐劑。可用於所述組合物的礦物質包括例如鈣、磷、鉀、鈉、鐵、氯化物、硼、銅、鋅、鎂、錳、碘、硒等。文中可用的其他維生素的示例包括脂溶性維生素例如A、D、E和K。菊糖、胺基酸、酶、輔酶等可用於包括在各實施方案中。
[0084]在各實施方案中，組合物包含下述物質中的至少一種:(1) 一種或多種益生菌；
(2)—種或多種滅活益生菌；(3)滅活益生菌的一種或多種成分(例如蛋白質、脂質、糖蛋白等)，其具有與益生菌相似或相同的促進健康的益處；(4) 一種或多種益生元；以及(5)其組合。可將益生菌或其成分整合至含有組合物的組合物中(例如均勻或非均勻地分布於組合物中)或者施用到含有組合物的組合物中(例如與載體一起或者無載體條件下，局部施用)。所述方法是技術人員已知的，例如US5968569和相關專利。
[0085]典型的益生菌 包括但不限於益生菌菌株，所述益生菌菌株選自:乳桿菌屬(Lactobacilli)、雙歧桿菌屬(Bifidobacteria)或腸球菌屬(Enterococci)例如路氏乳桿菌(Lactobacillus reuteii)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)、動物乳桿菌(Lactobacillus animal is)、瘤胃乳桿菌(Lactobacillus ruminis)、約氏乳桿菌(Lactobacillus johnsonii)、幹釀乳桿菌(Lactobacillus casei)、副幹釀乳桿菌(Lactobacillus paracasei)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)、發酵乳桿菌(Lactobacillus fermentum)和雙歧桿菌(Bifidobacterium sp.)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)和腸球菌(Enterococcus sp.)。在一些實施方案中，益生菌菌株選自路氏乳桿菌(NCC2581 ；CNCM 1-2448)、路氏乳桿菌(NCC2592 ；CNCM 1-2450)、鼠李糖乳桿菌(NCC2583 ；CNCM 1-2449)、路氏乳桿菌(NCC2603 ；CNCM1-2451)、路氏乳桿菌(NCC2613 ；CNCM 1-2452)、嗜酸乳桿菌(NCC2628 ；CNCM 1-2453)、青春雙歧桿菌(Bifidobacteriumadolescentis)(例如 NCC2627)、雙歧桿菌 NCC2657 或者屎腸球菌 SF68 (NCIMB10415)。含有本發明組合物的組合物包含如下量的益生菌，所述量足夠提供大約IO4-大約IO12Cfu/動物/天，優選IO5-大約IO11Cfu/動物/天，最優選IO7-1OiciCfu/動物/天。當益生菌是被殺死的或滅活的時，被殺死的或滅活的益生菌或其成分的量應產生與活的微生物類似的有益作用。許多所述益生菌及其益處是技術人員已知的，例如EP1213970B1、EP1143806B1、US7189390、EP1482811B1、EP1296565B1和US6929793。在一優選的實施方案中，益生菌是屎腸球菌SF68(NCMB10415)。在一實施方案中，利用技術人員已知的方法和材料將益生菌包封於載體中。
[0086]如所述的，組合物可含有一種或多種益生元，例如低聚果糖、低聚葡萄糖、低聚半乳糖、低聚異麥芽糖、低聚木糖、大豆低聚糖、乳果寡糖(Iactosucrose)、乳果糖和異麥芽酮糖。在一實施方案中，益生元是菊苣根、菊苣根提取物、菊糖或其組合。通常，將益生元以足夠積極地刺激腸道中的健康微生物群落並使這些「好」細菌繁殖的量施用。典型的量是大約I克至大約10克每份或者對於動物推薦的每日膳食纖維的大約5%至大約40%。通過任何適當的方法，可以使益生菌和益生元成為組合物的一部分。一般來講，可將所述物質與組合物混合或者將其例如通過噴灑或噴霧施用至組合物的表面。當所述物質是套盒的一部分時，可將所述物質與其他物質混合或置於它們自己的包裝中。通常，基於乾物質，食物組合物含有大約0.1%至大約10%的益生元，優選大約0.3%至大約7%、最優選大約0.5%至大約5%的益生元。可利用技術人員已知的方法例如US5952033將益生元整合到組合物中。
[0087]技術人員可確定組合物、食物成分、維生素、礦物質、益生菌、益生元、抗氧化劑或擬用於製備要施用至特定動物的特定組合物的其他成分的適當的量。在決定如何最好地配製特定組合物和其他成分時，所述技術人員會考慮動物種類、年齡、大小、體重、健康等。可考慮的其他因素包括組合物的類型(例如寵物食物組合物vs.膳食補充劑)、各成分需要的劑量、不同動物對特定類型組合物的平均消費量(例如根據種類、體重、活性/能量要求等)，以及組合物的生產要求。
[0088]在另一方面，本發明提供了適用於向動物施用異黃酮的套盒。根據套盒組件的需求，所述套盒在單一包裝中的獨立容器中或在虛擬包裝中的獨立容器中包含，異黃酮和一種或多種的(I)適合被動物消耗的一種或多種成分；(2)如何組合異黃酮和其他套盒組件以生產用於調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老的組合物的說明；(3)如何使用異黃酮調控sirtuin基因表達的說明；(4)如何使用異黃酮模擬熱量限制的說明；(5)如何使用異黃酮預防和治療阿爾茨海默病的說明；(6)如何使用異黃酮增加壽命的說明；`(7)如何使用異黃酮延緩衰老的說明；(8) —種或多種益生菌；(9) 一種或多種失活的益生菌；(10) —種或多種失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；(11) 一種或多種益生元；(12)用於製備或組合套盒組件來生產適合向動物施用的組合物的裝置；和(13)用於向動物施用組合的或製備的套盒組件的裝置。在一個實施方案中，套盒包括小藥囊中的組合物。
[0089]當套盒包含虛擬包裝時，套盒局限於與一種或多種物理套盒組件組合的虛擬環境中的說明。套盒以足夠調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老的量包含異黃酮和其他成分。通常，僅在動物消費之前，將異黃酮和其他適當的套盒組件混合。套盒可含有在任何不同組合和/或混合物中的套盒組件。在一實施方案中，套盒含有包含異黃酮的盒，以及用於動物消費的食物的容器。套盒可含有其他組件，例如用於混合異黃酮和成分的裝置或者用於容納混合物的裝置例如食物碗。在另一實施方案中，將異黃酮與其他促進動物健康的營養補充劑例如維生素和礦物質混合。所述組件各自提供於單一包裝的不同容器中或者以不同包裝中的不同組件的混合物提供。在優選的實施方案中，套盒含有異黃酮和一種或多種適合於動物消費的其他成分。優選地，所述套盒含有說明書，其描述如何將異黃酮與其他成分組合，以形成用於動物消費的食物組合物，通常通過將異黃酮與其他成分混合或者通過將異黃酮施用於其他成分，例如通過將異黃酮灑在食物組合物上。
[0090]在另一方面，本發明提供了用於交流信息或說明的工具，所述信息或說明是關於一種或多種的(I)使用異黃酮調控sirtuin基因表達；(2)使用異黃酮模擬熱量限制；(3) 使用異黃酮預防和治療阿爾茨海默病；(4)使用異黃酮增加壽命；(5)使用異黃酮延緩衰老；(6)使用異黃酮促進健康衰老；(7)如果消費者對本發明的方法和組合物有疑問，用於消費者使用的聯繫信息；(8)關於異黃酮的營養信息；所述工具包含含有所述信息或說明的一種或多種物理或電子文檔、數字存儲介質、光存儲介質、音頻呈現、視聽顯示或視覺顯示。所述交流工具用於說明利用本發明的益處，以及傳達用於施用異黃酮和含有異黃酮的食物組合物至動物的許可的方法。所述工具包含含有所述信息或說明的一種或多種物理或電子文檔、數字存儲介質、光存儲介質、音頻呈現、視聽顯示或視覺顯示。優選地，所述工具選自展示網站、視覺顯示報攤、小冊子、產品標籤、包裝說明書、廣告、分發的印刷品、公告、 錄音帶、錄像帶、DVD、⑶-ROM、計算機可讀晶片、計算機可讀卡、計算機可讀磁碟、USB裝置、 火線(FireWire)裝置、計算機內存和其任何組合。[0091]另一方面，本發明提供生產包含異黃酮和一種或多種其他適合動物消費的成分 (例如蛋白質、脂肪、碳水化合物、纖維、維生素、礦物質、益生菌、益生元等中的一種或多種)的食物組合物的方法。該方法包括將適合於動物消費的一種或多種成分與異黃酮混合。或者，該方法包括將異黃酮單獨或與其他成分聯合或組合施用至食物組合物上，例如作為包衣或覆蓋物(topping)。食物組合物的生產和/或加工期間，可將異黃酮在任何時間加入。所述組合物可以依據本領域任何適合的方法製備。
[0092]在另一個方面，本發明提供了可用於含有異黃酮或本發明的任何組合物的包裝。 包裝包含至少一種適合於容納異黃酮或本發明的任何組合物的材料，以及附著到所述材料上的標籤，所述標籤包含字、圖、圖樣、簡稱、標語、短語或其它裝置或其組合，其指明該包裝包含異黃酮或本發明的任何組合物，具有涉及調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命、延緩衰老和促進健康衰老的有益性質。通常，這類裝置包括印刷在材料上的詞語「促進健康衰老」、「老年支持」、「老年人幫手」或等價的表述。任何適合含有異黃酮或本發明的任何組合物的包裝構造和包裝材料都可用於本發明，例如，用紙、 塑料、箔、金屬等生產的袋子、盒子、瓶子、罐頭、小袋等。在優選的實施方案中，包裝還包括異黃酮或本發明的任何組合物。在多個實施方案中，包裝還包括至少一個窗口，其允許在不打開包裝的條件下看到包裝內容物。在一些實施方案中，窗口是包裝材料的透明部分。在其它方面，窗口是包裝材料的缺失部分。在優選的實施方案中，包裝含有適用於特定動物的食物組合物，如人、犬科動物或貓科動物，適合標籤時，優選用於狗或貓的伴侶動物食物組合物。在優選的實施方案中，包裝是包含本發明的食物組合物的罐頭或小袋。
[0093]在另一個方面，本發明提供了異黃酮用於製備藥物的用途，所述藥物用於調控 sirtuin基因表達；模擬熱量限制；預防和治療阿爾茨海默病；增加壽命；延緩衰老；促進健康衰老；改善生活質量；和促進動物的健康和身心健康中的一種或多種。一般而言，通過混合化合物或組合物(即，異黃酮或包含異黃酮的組合物)與賦形劑、緩衝劑、粘合劑、增塑劑、著色劑、稀釋劑、壓縮劑、潤滑劑、矯味劑、潤溼劑和技術人員已知的可用於生產藥物和配製適於施用至動物的藥物的其他成分混合，來製備藥物。[0094]在另一個方面，本發明提供了用於調控動物的sirtuin表達的方法。方法包括向動物施用治療有效量的一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin表達。
[0095]對於本發明的所有方法，施用治療有效量的異黃酮。在優選的實施方案中，向動物施用的一種或多種異黃酮的量是從約0.1至約10克異黃酮，優選從約0.5至約7.5克，更優選從約I至約5克。在多個實施方案中，向動物施用的異黃酮的量是從約0.1至約10克異黃酮/天(g/天)，優選從約0.5至約7.5g/天,更優選從約I至約5g/天。在其他實施方案中，向動物施用的異黃酮的量是從約0.001至約10克異黃酮/千克體重(g/kg/bw)，優選從約0.05至約5g/kg/bw,更優選從約0.01至約lg/kg/bw。使用任何合適的方法施用異黃酮，優選口服。在一個實施方案中，異黃酮作為食物組合物的一部分施用，例如整合到食物組合物中或用於食物組合物上。當整合到食物組合物中時,異黃酮通常對於用於生產食物組合物的成分是內在的，例如大豆中的異黃酮。在另一種情況下，異黃酮作為膳食補充劑的一部分施用，例如在丸劑或膠囊中。
實施例
[0096]還可通過下述實施例進一步解釋本發明，但是將理解這些實施例僅用於解釋目的，而不預期限制本發明的範圍，除非另外具體說明。
[0097]實施例1
[0098]材料和方法
[0099]處理:將終末分化的狗脂肪細胞暴露在200、25和O μ M雌馬酚下24小時。收集細胞進行RNA分離。
[0100]RNA 分離:根據生產商的說明，使用 Quiashredder (Qiagen, Valencia, CA)柱將處理的細胞樣品渦旋和均質化。收集均質化的裂解液，向其中添加1份等體積的64%乙醇。然後，將該混合物一次應用700 μ L於RNAqueous?過濾柱(Ambion Inc.,Austin,TX),10，OOOrpm離心I分鐘。使用700uL洗滌溶液#1和500uL洗滌溶液#2/3洗滌柱，每次洗漆10, OOOrpm離心I分鐘。通過離心(10，OOOrpm)乾燥過濾柱I分鐘。使用30uL等體積的70-80°C洗脫溶液，離心(如上述)洗脫RNA三次。用DNA酶處理獲得的RNA，並將其在Beckman DU640B 分光光度計(Beckman Coulter, Inc., Brea, CA)中 260am 定量。此外,根據生產商的說明，使用生物分析儀(Agilent, Santa Clara, CA)評估數量和質量。
[0101]定量PCR:各自對每條引物/探針組運行所有樣品，確定應該使用何種標準曲線。使用具有給定目標的最低CT(循環閾值)的實驗樣品的系列稀釋的RNA，生成標準曲線。逆轉錄1-2個樣品，使用1:5系列稀釋液作為給定目標的標準曲線。運行包括sirtuin-1、-2、-3和-6在內的目標。將值針對根據定量PCR確定的親環蛋白A(PPIA)的水平歸一化。根據每個最低樣品歸一化值計算歸納法。每組運行η = 3次。結果顯示在表I中。
[0102]表1
[0103]在用0、25或200uM雌馬酚處理的狗的脂肪細胞中的Sirtuin基因表達
[0104]
[0[25 [200
【權利要求】
1.用於在調控動物中的sirtuin基因表達的方法，包括向動物施用一種或多種治療有效量的異黃酮。
2.權利要求1的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRTl、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
3.權利要求1的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一種。
4.權利要求1的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRI7的至少一種。
5.權利要求1的方法，其中異黃酮選自形式為糖苷配基、糖苷、乙醯糖苷和丙二醯糖苷的異黃酮。
6.權利要求1的方法，其中異黃酮選自鷹嘴豆素甲、大豆黃素、大豆苷、黃豆黃素、芒柄花素、雌馬酚、染料木黃酮、德鳶尾素、羽扇豆異黃酮、櫻黃素、紅車軸草異黃酮和glycitinn。
7.權利要求1的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.001至約10g/kg/天。
8.權利要求1的方法，其中規律的向動物施用異黃酮。
9.權利要求8的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.1至約10g。
10.權利要求1的方法，其中異黃酮作為膳食補充劑或食物組合物向動物施用。
11.權利要求10的方法，其中異黃酮在食物組合物中施用，且異黃酮包括從約0.001至約40%的食物組合物。·
12.權利要求10的方法，其中配製食物組合物，從而向動物提供完全且平衡的營養。
13.權利要求10的方法，其中食物組合物或膳食補充劑還包含一種或多種益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；和一種或多種 碰生兀。
14.權利要求1的方法，其中動物是人或伴侶動物。
15.權利要求14的方法，其中伴侶動物是犬科動物。
16.權利要求15的方法，其中伴侶動物是貓科動物。
17.權利要求1的方法，其中動物是衰老的動物。
18.用於模擬動物中的熱量限制的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且從而模擬熱量限制。
19.權利要求18的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRTl、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
20.權利要求18的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一種。
21.權利要求18的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
22.權利要求18的方法，其中異黃酮選自形式為糖苷配基、糖苷、乙醯糖苷和丙二醯糖苷的異黃酮。
23.權利要求18的方法，其中異黃酮選自鷹嘴豆素甲、大豆黃素、大豆苷、黃豆黃素、芒柄花素、雌馬酚、染料木黃酮、德鳶尾素、羽扇豆異黃酮、櫻黃素、紅車軸草異黃酮和glycitinn。
24.權利要求18的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.001至約10g/kg/天。
25.權利要求18的方法，其中規律的向動物施用異黃酮。
26.權利要求25的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.1至約10g。
27.權利要求18的方法，其中異黃酮作為膳食補充劑或食物組合物向動物施用。
28.權利要求27的方法，其中異黃酮在食物組合物中施用，且異黃酮包括從約0.001至約40%的食物組合物。
29.權利要求27的方法，其中配製食物組合物，從而向動物提供完全且平衡的營養。
30.權利要求27的方法，其中食物組合物或膳食補充劑還包含一種或多種益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；和一種或多種益生元。
31.權利要求18的方法，其中動物是人或伴侶動物。
32.權利要求31的方法，其中伴侶動物是犬科動物。
33.權利要求32的方法，其中伴侶動物是貓科動物。
34.權利要求18的方法，其中動物是衰老的動物。
35.用於預防和治療動物中的阿爾茨海默病的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且從而預防和治療動物中的阿爾茨海默病。
36.權利要求35的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
37.權利要求35的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一種。
38.權利要求35的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
39.權利要求35的方法，其中異黃酮選自形式為糖苷配基、糖苷、乙醯糖苷和丙二醯糖苷的異黃酮。
40.權利要求35的方法，其中異黃酮選自鷹嘴豆素甲、大豆黃素、大豆苷、黃豆黃素、芒柄花素、雌馬酚、染料木黃酮、德鳶尾素、羽扇豆異黃酮、櫻黃素、紅車軸草異黃酮和glycitinn。
41.權利要求35的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.001至約10g/kg/天。
42.權利要求35的方法，其中規律的向動物施用異黃酮。
43.權利要求42的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.1至約10g。
44.權利要求35的方法，其中異黃酮作為膳食補充劑或食物組合物施用。
45.權利要求44的方法，其中異黃酮在食物組合物中施用，且異黃酮包括從約0.001至約40%的食物組合物。
46.權利要求44的方法，其中配製食物組合物，從而向動物提供完全且平衡的營養。
47.權利要求44的方法，其中食物組合物或膳食補充劑還包含一種或多種益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；和一種或多種益生元。
48.權利要求35的方法，其中動物是人或伴侶動物。
49.權利要求48的方法，其中伴侶動物是犬科動物。
50.權利要求49的方法，其中伴侶動物是貓科動物。
51.權利要求35的方法，其中動物是衰老的動物。
52.用於增加動物壽命的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且從而增加壽命。
53.權利要求52的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT1、SIRT2、SIRT3、SIRT4、 SIRT5或SIRT7的至少一種。
54.權利要求52的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一種。
55.權利要求52的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
56.權利要求52的方法，其中異黃酮選自形式為糖苷配基、糖苷、乙醯糖苷和丙二醯糖苷的異黃酮。
57.權利要求52的方法，其中異黃酮選自鷹嘴豆素甲、大豆黃素、大豆苷、黃豆黃素、芒柄花素、雌馬酚、染料木黃酮、德鳶尾素、羽扇豆異黃酮、櫻黃素、紅車軸草異黃酮和 glycitinn。
58.權利要求52的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.001至約10g/kg/天。
59.權利要求52的方法，其中規律的向動物施用異黃酮。
60.權利要求59的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.1至約10g。
61.權利要求52的方法，其中異黃酮作為膳食補充劑或食物組合物施用。
62.權利要求61的方法，其中異黃酮在食物組合物中施用，且異黃酮包括從約0.001至約40%的食物組合物。
63.權利要求61的方法，其中配製食物組合物，從而向動物提供完全且平衡的營養。
64.權利要求61的方法，其中食物組合物或膳食補充劑還包含一種或多種益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；和一種或多種.、/./ 1.~碰生兀。
65.權利要求52的方法，其中動物是人或伴侶動物。
66.權利要求65的方法，其中伴侶動物是犬科動物。
67.權利要求66的方法，其中伴侶動物是貓科動物。
68.權利要求52的方法，其中動物是衰老的動物。
69.用於延緩動物衰老的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮，用於調控sirtuin基因表達並且從而延緩動物衰老。
70.權利要求69的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRTl、SIRT2、SIRT3、SIRT4、 SIRT5或SIRT7的至少一種。
71.權利要求69的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT2或SIRT3的至少一種。
72.權利要求69的方法，其中表達的sirtuin基因是SIRT4、SIRT5或SIRT7的至少一種。
73.權利要求69的方法，其中異黃酮選自形式為糖苷配基、糖苷、乙醯糖苷和丙二醯糖苷的異黃酮。
74.權利要求69的方法，其中異黃酮選自鷹嘴豆素甲、大豆黃素、大豆苷、黃豆黃素、芒柄花素、雌馬酚、染料木黃酮、德鳶尾素、羽扇豆異黃酮 、櫻黃素、紅車軸草異黃酮和 glycitinn。
75.權利要求69的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.001至約10g/kg/天。
76.權利要求69的方法，其中規律的向動物施用異黃酮。
77.權利要求76的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.1至約10g。
78.權利要求69的方法，其中異黃酮作為膳食補充劑或食物組合物施用。
79.權利要求78的方法，其中異黃酮在食物組合物中施用，且異黃酮包括從約0.001至約40%的食物組合物。
80.權利要求78的方法，其中配製食物組合物，從而向動物提供完全且平衡的營養。
81.權利要求78的方法，其中食物組合物或膳食補充劑還包含一種或多種益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；和一種或多種 碰生兀。
82.權利要求69的方法，其中動物是人或伴侶動物。
83.權利要求82的方法，其中伴侶動物是犬科動物。
84.權利要求83的方法，其中伴侶動物是貓科動物。
85.權利要求69的方法，其中動物是衰老的動物。
86.包含治療有效量的異黃酮的組合物，其用於一種或多種的在動物中調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老。
87.權利要求86的組合物，其包含治療有效量的異黃酮，用於調控sirtuin基因表達，並且從而能夠在動物中實現模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老中的一種或多種。
88.權利要求86的組合物，其含有的異黃酮的量為足以向動物施用大約從約0.001至約10g/kg/天的異黃酮的量。
89.藥物或營養品組合物，其包含異黃酮和一種或多種藥學或營養學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
90.包裝，其包含至少一種適合於容納異黃酮的材料，以及附著到所述包裝上的標籤，所述標籤包含字、圖、圖樣、簡稱、標語、短語或其它裝置或其組合，其指明該包裝的內含物包含異黃酮。
91.權利要求90的包裝，其中附著到所述包裝上的標籤包含字、圖、圖樣、簡稱、標語、短語或其它裝置或其組合，其指明該包裝的內含物包含具有與促進健康衰老相關的有益性質的異黃酮。
92.權利要求91的包裝，其中有益性質是調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命、延緩衰老和促進健康衰老中的一種或多種。
93.權利要求90的包裝，其還包含異黃酮。
94.權利要求90的包裝，其還包含至少一個窗口。
95.用於交流信息或說明的工具，所述信息或說明是關於一種或多種的(I)使用異黃酮調控sirtuin基因表達；(2)使用異黃酮模擬熱量限制；(3)使用異黃酮預防和治療阿爾茨海默病；(4)使用異黃酮增加壽命；(5)使用異黃酮延緩衰老；(6)使用異黃酮促進健康衰老；(7)如果消費者對本發明的方法和組合物有疑問，用於消費者使用的聯繫信息；和(8)關於異黃酮的營養信息；所述工具包含含有所述信息或說明的一種或多種物理或電子文檔、數字存儲介質、光存儲介質、音頻呈現、視聽顯示或視覺顯示。
96.權利要求95的工具，其選自展示網站、視覺顯示報攤、小冊子、產品標籤、包裝說明書、廣告、分發的印刷品、公告、錄音帶、錄像帶、DVD、CD-ROM、計算機可讀晶片、計算機可讀卡、計算機可讀磁碟、USB裝置、火線裝置、計算機內存和其任何組合。。
97.適用於向動物施用異黃酮的套盒，根據套盒組件的需求，其在單一包裝中的獨立容器中或在虛擬包裝中的獨立容器中包含，異黃酮和一種或多種的(I)適合被動物消耗的一種或多種成分；(2)如何組合異黃酮和其他套盒組件以生產用於調控sirtuin基因表達、模擬熱量限制、預防和治療阿爾茨海默病、增加壽命和延緩衰老的組合物的說明；(3)如何使用異黃酮調控sirtuin基因表達的說明；(4)如何使用異黃酮模擬熱量限制的說明；(5)如何使用異黃酮預防和治療阿爾茨海默病的說明；(6)如何使用異黃酮增加壽命的說明；(7) 如何使用異黃酮延緩衰老的說明；(8) —種或多種益生菌；(9) 一種或多種失活的益生菌；(10)一種或多種失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；(11) 一種或多種益生元；(12)用於製備或組合套盒組件來生產適合向動物施用的組合物的裝置；和(13)用於向動物施用組合的或製備的套盒組件的裝置。
98.權利要求97的套盒，其中異黃酮在小藥囊中。
99.權利要求97的套盒，其包含異黃酮和一種或多種適合被動物消耗的成分。
100.權利要求97的套盒，包括異黃酮和一種或多種益生菌。
101.用於調控動物中的SIRTl表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
102.用於調控動物中的SIRT2表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。·
103.用於調控動物中的SIRT3表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
104.用於調控動物中的SIRT4表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
105.用於調控動物中的SIRT5表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
106.用於調控動物中的SIRT7表達的方法，包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
107.用於調控動物中的sirtuin表達的方法,包括以治療有效量向動物施用一種或多種異黃酮。
108.權利要求107的方法，其中異黃酮選自形式為糖苷配基、糖苷、乙醯糖苷和丙二醯糖苷的異黃酮。
109.權利要求107的方法，其中異黃酮選自鷹嘴豆素甲、大豆黃素、大豆苷、黃豆黃素、芒柄花素、雌馬酚、染料木黃酮、德鳶尾素、羽扇豆異黃酮、櫻黃素、紅車軸草異黃酮和 glycitinn。
110.權利要求107的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.001至約10g/kg/天。
111.權利要求107的方法，其中規律的向動物施用異黃酮。
112.權利要求111的方法，其中施用的異黃酮的量是從約0.1至約10g。
113.權利要求107的方法，其中異黃酮作為膳食補充劑或食物組合物向動物施用。
114.權利要求113的方法，其中異黃酮在食物組合物中施用，且異黃酮包括從約0.001至約40 %的食物組合物。
115.權利要求113的方法，其中配製食物組合物，從而向動物提供完全且平衡的營養。
116.權利要求113的方法，其中食物組合物或膳食補充劑還包含一種或多種益生菌；失活的益生菌；失活的益生菌的促進與益生菌相似或相同的健康益處的組分；和一種或多種益生元。
117.權利要求107的方法，其中動物是人或伴侶動物。
118.權利要求117的方法，其中伴侶動物是犬科動物。
119.權利要求118的方法，其中伴侶動物是貓科動物。
120.權利要求107的方·法，其中動物是衰老的動物。
【文檔編號】A61P39/06GK103596563SQ201280029380
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2012年3月26日 優先權日:2011年4月15日
【發明者】Y·潘, R·P·米德爾頓 申請人:雀巢產品技術援助有限公司