超低IgG新生牛血清生產工藝的製作方法
2023-10-29 22:09:32 1
專利名稱：超低IgG新生牛血清生產工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及超低IgG新生牛血清生產工藝。
背景技術：
牛血清是人用生物製品疫苗、動物疫苗產品中重要的原材料之一，關係到人和動物的健康和社會的和諧，所以牛血清產品一直受各國政策的扶持。牛血清主要用於科研院所的中心實驗室、人用生物製品疫苗及動物疫苗的生產和研究等領域。隨著生物技術的快速發展，牛血清的需求量與日俱增。超低IgG胎牛血清和新生牛血清的生產單位國內沒有，所以，該產品不僅市場前景十分廣闊，而且填補一項空白，並對國際學術界的影響具有推動作用，其成功必然會帶來巨大的經濟效益和社會效益。
發明內容
本發明的目的在於提供一種超低IgG新生牛血清生產工藝，主要是利用金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術相結合的生產工藝進行分離IgG或其亞型及片段(如Fe,Fab)等。SPA能與人及多種哺乳動物血清IgG分子中的Fe片段結合。SPA除與IgG結合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結合。SPA菌對各類免疫球蛋白的吸附率=IgGS90% 98%、IgM為2% 30%、IgA為I. 5% 20%。SPA-S印harose4B親和層析去除牛血清中r-IgG生產工藝是技術關鍵。而超低IgG胎牛和新生牛血清的生產工藝(r-IgG<5 10ug/ml)為本發明的創新點。本發明的超低IgG胎牛血清和新生牛血清，是利用親和層析工藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG ( 5ug/ml水平，而保持生物學活性不變。隨著基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術的不斷發展，特別是生物醫藥領域疫苗的快速發展，都是通過細胞培養來實現的。而且細胞是病毒、蛋白的表達載體，細胞質量直接影響蛋白的表達量或病毒的滴度，故篩選、馴化優質細胞是關鍵。細胞培養的發展，培養基的質量又是關鍵，而培養基的主要成份中動物血清對細胞的生長繁殖發揮著重要，甚至是難以替代的作用。在動物血清的應用中牛血清又是最為廣泛的，而牛血清中IgG含量的高低對於細胞的表達和提高抗體的滴度非常重要，所以超低IgG牛血清生產工藝的研究迫在眉睫。本發明主要技術是利用SPA_Sepharose4B的親和層析法去除牛血清中r球蛋白。主要技術指標是牛血清中免疫球蛋白(r-IgG)含量達到彡5 10ug/ml，而生物活性不變。主要技術經濟指標本發明的超低IgG新生牛特別是的生產單位國內沒有。所以，其成功必然會帶來巨大的經濟效益和社會效益。本發明是在比較現有成熟技術基礎上，進行優化組合併融合國際先進技術而完善建立的。其適用於規模化生產，填補了國內空白。本發明的超低IgG新生牛血清生產工藝，是通過親和層析工藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG ( 5ug/ml水平，而保持生物學活性不變；通過金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術相結合的生產工藝進行分離IgG或其亞型及片段(如Fe、Fab) ；SPA能與人及多種哺乳動物血清IgG分子中的Fe片段結合；SPA除與IgG結合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結合；SPA菌對各類免疫球蛋白的吸附率IgG*90% 98%、IgM* 2% 30%、IgA 為 I. 5% 20% ;SPA_S印harose4B 親和層析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG彡5 10ug/ml。本發明的社會效益(I)填補國內的空白，打破國外市場的壟斷地位該項目國內剛剛起步，創業項目的完成必將填補國內的空白，打破國外同類產品對國內牛血清市場的壟斷地位。(2)促進生物製藥業的健康發展全面完成後公司生產的牛血清可以廣泛應用於國內各生物尖端領域，保證生物製藥業和試驗的科學性，促進生物製品事業的健康發展和社會的和諧穩定。
(3)促進就業項目完成後，可吸納生產、研發和銷售人員。本發明用的主要原材料是犢牛血和成牛血的下遊副產品，廢牛血的綜合利用將極大促進畜牧業的健康發展，既提高農民的收入，同時又治理環境。
具體實施例方式本發明的超低IgG新生牛血清生產エ藝，是通過親和層析エ藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG ^ 5ug/ml水平，而保持生物學活性不變；通過金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術相結合的生產エ藝進行分離IgG或其亞型及片段(如Fe、Fab) ；SPA能與人及多種哺乳動物血清IgG分子中的Fe片段結合；SPA除與IgG結合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結合；SPA菌對各類免疫球蛋白的吸附率IgG 為 90% 98%、IgM 為 2% 30%、IgA 為 I. 5% 20% ；SPA-Sepharose4B 親和層析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG彡5 10ug/ml。
權利要求
1.一種超低IgG新生牛血清生產エ藝，其特徵在於通過親和層析エ藝去除胎牛和新生牛血清中的Y球蛋白，使FBS y球蛋白含量減到IgG <5ug/ml水平，而保持生物學活性不變；通過金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術相結合的生產エ藝進行分離IgG或其亞型及片段(如Fc、Fab) ；SPA能與人及多種哺乳動物血清IgG分子中的Fe片段結合；SPA除與IgG結合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結合；SPA菌對各類免疫球蛋白的吸附率IgG 為 90% 98%、IgM 為 2% 30%、IgA 為 I. 5% 20% ；SPA-Sepharose4B 親和層析去除牛血清中r-IgG,超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG≤5 10ug/ml。
全文摘要
本發明涉及一種超低IgG新生牛血清生產工藝。通過親和層析工藝去除胎牛和新生牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量減到IgG≤5ug/ml水平，而保持生物學活性不變；通過金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)與親和層析技術相結合的生產工藝進行分離IgG或其亞型及片段(如Fc、Fab)；SPA能與人及多種哺乳動物血清IgG分子中的Fc片段結合；SPA除與IgG結合外，還能與血清中少量的IgM和IgA結合；SPA菌對各類免疫球蛋白的吸附率IgG為90％～98％、IgM為2％～30％、IgA為1.5％～20％；SPA-Sepharose4B親和層析去除牛血清中r-IgG，超低IgG胎牛和新生牛血清的r-IgG≤5～10ug/ml。
文檔編號C12N5/00GK102757930SQ201110105789
公開日2012年10月31日 申請日期2011年4月27日 優先權日2011年4月27日
發明者李卓 申請人:長春安貝生物科技有限公司