在分析用載體上沉積和分布試劑用的掩模片的製作方法

2023-10-22 23:00:37 2

專利名稱：在分析用載體上沉積和分布試劑用的掩模片的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種在分析用載體上沉積和分布一種或多種試劑用的掩模片，具體而言，所述分析用載體為一種用於電泳的載體，例如瓊脂糖凝膠。
本發明對於常規分析來說是有利的，特別是對於在上下文中的臨床分析類型是有利的。
本發明還涉及一種掩模片，旨在使一種或多種試劑沉積並分布在分析用載體上。該掩模片與一種具有定位裝置的設備結合使用，當所述掩模片被用來沉積並分布所述試劑時，該定位裝置允許所述掩模片在所述載體附近相對於分析用載體進行定位。
這些定位裝置也可以與導向裝置結合使用，或可以包括導向裝置，用於當掩模片被定位在分析用載體附近時移動所述掩模片，並允許試劑被分布於載體上的限定區域上，該限定區域包括被指定用於培養試劑和樣本成分的區域。
本發明的所述設備允許人工對試劑進行沉積和分布。也可以配置成對這些試劑進行自動沉積，並可選擇地進行分布。
在本發明的一些實施例中，將試劑裝入掩模片中的步驟也可以以人工或自動方式實施。有利的是，本發明的掩模片比現有的掩模片更加易於裝載。
另一方面，本發明提供了一種用於將試劑沉積並分布於分析用載體上的方法。
在本發明的一個特定實施例中，該方法被用於對試劑進行沉積和分布，以實施免疫固定，通過該方法檢測或者確定一種生物樣本中含有的特定成分的量，所述成分已經通過電泳法分離在載體例如瓊脂糖凝膠上。
本發明還涉及一種應用所述掩模片的免疫固定方法。
另一方面，本發明提供一種試劑盒，包括按照本發明的掩模片。
按照本發明的一種試劑盒有利地適合於實施一種使用本發明的掩模片的免疫固定。
本發明也涉及用於對所述掩模片進行定位和導向的裝置。
應當記得，免疫固定是一種特別是在臨床分析實驗室中廣泛採用的常規分析，該方法可以對生物樣本進行以對其中所含有的病變蛋白進行以分型為目的分析。
結合電泳法使用，在電泳凝膠體上形成沉澱物的這種技術在很長一段時間裡是公知的。具體地，該技術已經在Alper CA和Johnson AM Vox.Sang.17445(1969)，Cawley LP et al.，Clin.Chem.221262(1976)，RitchieRF和Smith R Clin.Chem.22497，1735，1982(1976)中被公開。這種技術允許在不同生物樣本特別是在生物液體例如血清，尿或腦脊髓液中辨別異常。
這種技術主要包括以下步驟(1)利用電泳法從試驗血清或液體中將蛋白質成分分離在一種載體上，這種載體例如是凝膠體，這種凝膠體例如是瓊脂糖凝膠；(2)與分離蛋白的特異抗體進行免疫反應；(3)對形成的免疫合成物進行顯色。
實施這些步驟的條件已經在現有技術中公開。
使用的設備也包括在相同的電泳載體上產生基準狹道(軌跡)等的可能性，具體是在相同的凝膠體上，通過使用蛋白質固定劑對存在於樣本上的所有分離蛋白質進行固定而獲得，所述蛋白質固定劑例如包括多價抗血清。
用於對待分析的生物樣本進行的、且用於在控制的溫度下的遷移並用於沉積試劑(例如包括抗血清和固定劑)的新的半自動技術允許免疫固定的輪廓小型化，並保持理想的敏感度和解析度。這種小型化允許在同一電泳載體上特別是在同一凝膠體上承載大量待分析的樣本。
這樣，我們已經用幾年時間在單個8×10cm的電泳凝膠體上從進行一個免疫固定發展到進行9個免疫固定(例如，使用SEBIA出售的商標為Hydragel9 IF的免疫固定試劑盒)。這就節約了分析時間，並減小了試劑的消耗，從而降低了分析的成本。
為了在這種條件下進行免疫固定從而使試劑沉積的目的，例如歐洲專利EP-B1-0 526 271公開了一種用於分配試劑、通常具體為抗血清和固定劑的掩模片或裝置，其能夠克服現有技術的裝置或掩模片所產生的問題，且更安全和易於使用。從而，例如使用在EP-B1-0 526 271中所描述的掩模片，在三個樣本的三行中的同一電泳凝膠體上進行9個免疫固定，對於每一個樣本，必須移出6種試劑(固定劑，抗-IgG抗血清，抗-IgA抗血清，抗-IgM抗血清，抗-k抗血清和抗-O抗血清)，即總共54次移液操作。
這些手動移液操作證明是長時間且困難的，即使使用重複劑量移液器也是這樣的。
在第一方面中，本發明提供一種用於將試劑沉積和分布在分析用載體上的掩模片，這種設計考慮了其應用，所述應用包括將其移動，以進行將試劑分布到分析用載體的預定區域上的步驟。因此本發明的掩模片可以被認為是一種使用中可移動的掩模片。
本發明還限制了試劑的消耗，特別是昂貴的抗血清和免疫固定反應情況下的固定劑的消耗，因此降低了所進行的分析的成本。它還有利於將試劑加載到掩模片中，特別是通過限制移液操作的次數和/或通過使掩模片被自動加樣。
另外，在改善的或甚至簡化的操作條件下，所述掩模片確保了恆定的結果質量。尤其是，在使用本發明的裝置培養被分布的試劑階段之後，不再必須去掉留在凝膠體和掩模片之間的多餘試劑，這和使用EP-B1-0 526271中提出的掩模片時的情況相同。
使用本發明的掩模片，在分散和分布試劑之後，在掩模片和分析用載體之間不再有自由的試劑，這是由於，起初被引入的所有試劑已經沉積在分析用載體上。因此，不必泵去可能存在於分析用載體上的任何多餘試劑。
因此，本發明提供了一種將試劑沉積和分布在一種用於分析生物樣本的分析用載體上的掩模片，包括——一個下表面和一個上表面，它們至少局部地相互平行，它們隔開構成掩模片厚度的距離；——一個或多個劃定的區域(狹道)，它們位於掩模片下表面的水平面上，並包括一個從掩模片下表面凸出的元件(凸出元件)，各凸出元件包括構成相對於水平面傾斜的斜面的一部分；——與一狹道相連的一個開口，該開口在掩模片的整個厚度上從掩模片上表面的一個上部孔到一個下部孔橫過所述掩模片，所述下部孔位於狹道斜面的最低點附近的狹道中；所述掩模片是這樣的，即其包含的一個或多個狹道能夠通過毛細作用將加載入每個開口並要沉積在分析用載體上的試劑保持在所述狹道和所述分析用載體的表面之間，所述掩模片朝向該表面放置。
用在本發明中的術語「掩模片」通常表示一塊板，該板被設計成允許對準分析用載體上的劃定區域定位，如果必須與相關的裝置相結合，其中當試劑被加載到掩模片中並與劃定區域接觸時，試劑必須被沉積並分布。
本發明的掩模片的尺寸是這樣的，即，當操作時掩模片與分析用載體緊鄰時，其不會覆蓋分析用載體的整個表面，加載在掩模片上的試劑被沉積並分布於載體上。特別是掩模片的寬度(包括其狹道的長度)小於分析用載體的電泳遷移狹道的長度，這是由於掩模片的狹道的長度小於分析用載體的電泳遷移狹道的長度。試劑在這些狹道上的分布是由於此後所述的掩模片在分析用載體上的移動引起的，而且是由於試劑在所述載體上的移動而引起的——這是作為掩模片狹道結構所可以產生的結果。
本發明的掩模片可以在分析用載體上方移動，為的是分布試劑。
所述開口被指定為「與各狹道相連」，在本發明的上下文中這指的是如此設定其下部孔，以便將加載到掩模片的開口中的試劑供給到狹道的斜面上，以允許試劑被沉積到分析用載體上，並且以便通過毛細作用而將試劑保持在載體和狹道之間，並在掩模片移動期間將試劑分布在分析用載體上。
所述開口例如是一個垂直於掩模片上表面的孔，從一側到另一側橫穿掩模片。所述開口的下部孔優選地位於鄰近斜面的最低點處的斜面中。通過位於狹道斜面——相對於水平面——的最低點的「附近」，當試劑沿狹道上升時，所述開口的下部孔使得液體試劑分布在狹道中。
所述開口的上部孔可以垂直於所述下部孔。或者是，其可以被沿著相對於該垂直面傾斜的平面定位，假定其允許所述試劑在與試劑沉積和分布在分析用載體上相匹配的條件下被供給所述下部孔。
有利的是，與狹道相連的開口由掩模片上表面中的一個圓形孔開口形成，所述開口由一個垂直於掩模片的上表面並從一側到另一側橫穿掩模片的孔構成，其由一個例如圓柱部開口中的截頭圓錐端部延伸到所述掩模片的下表面中，經由位於斜面的最低點附近的狹道中的孔。在通向下部孔中的圓柱部開口可以分配壓力，所述壓力是當加載試劑時由例如移液器施加在下部孔的邊緣上的，這樣就提高了掩模片的強度。
有利的是，所述截錐開口引導一填充移液器，當將試劑注入所述狹道和所述分析用載體之間時在移液器的端部和所述掩模片之間提供密封。
如果需要，上述開口可以被改為所述圓錐部分經由具有圓形截面的圓柱形部分而延伸到所述開口的上部孔。
根據本發明的一個特定實施例，被公開的所述開口也可以這樣的，即，上部孔大於開口的下部孔，例如如果所述孔為圓形則上部孔的直徑大於下部孔的直徑。
如上所述的特定掩模片適合於將試劑分布在用於生物樣本的分析用載體上，該掩模片可以被限定為包括
——一個下表面和一個上表面，它們至少局部地相互平行，它們隔開一構成掩模片厚度的距離；——一個或多個狹道，其中每個包括一從掩模片的下表面向下凸起的細長形狀的凸出元件，所述凸出元件包括構成相對於水平面傾斜的斜面的一部分；——與每一狹道相連的一個開口，該開口在掩模片的整個厚度上從掩模片上表面的一個上部孔到一個下部孔橫過所述掩模片，所述下部孔位於狹道斜面的最低點附近的狹道中；所述掩模片是這樣的，即其包含的一個或多個狹道能夠通過毛細作用將加載入每個開口並沉積在分析用載體上的試劑保持在所述狹道和分析用載體的表面之間，所述掩模片朝向該表面放置。
掩模片的狹道呈細長形狀和被稱為斜面形。它們的所有斜面均沿相同方向傾斜。
所述斜面旨在藉助如上文所指出的毛細作用保持試劑，並保證試劑被送到斜面的最低點，以便當掩模片移動時對試劑進行分布。
如上所述的本發明的另一種特別優選的掩模片包括——一個下表面和一個上表面，它們至少局部地相互平行，它們隔開一構成掩模片厚度的距離；——一個或多個狹道，其中每個包括一從掩模片的下表面向下凸起的凸出元件，所述凸出元件由一呈截頭平行六面體形狀的隆起構成，且所述凸出元件包括構成相對於水平面傾斜的斜面的一部分；——與每一狹道相連的一個開口，該開口在掩模片的整個厚度上從掩模片上表面的一個上部孔到一個下部孔橫過所述掩模片，所述下部孔位於狹道斜面的最低點附近的狹道中；所述掩模片是這樣的，即其包含的一個或多個狹道能夠通過毛細作用將加載入每個開口並沉積在分析用載體上的試劑保持在所述狹道和分析用載體的表面之間，所述掩模片朝向該表面放置。
當所述凸出元件由一呈細長形狀的元件構成或由呈截頭平行六面體形狀的隆起構成時，所述凸出元件具有上表面，該上表面與掩模片的下表面的部分相重合，所述凸出元件從所述的掩模片的下表面的部分凸出，所述凸出元件還具有一下表面，該下表面與沿著至少一相對於水平面的斜面的上表面相分離，位於每個狹道的開口的所述下部孔附近的所述斜面的最低點為最靠近與其相面對的分析用載體的點，且該點位於當處於使用位置時其被帶到的位置附近。
包括一從掩模片的下表面凸出的斜面的所述凸出元件能夠通過使掩模片沿著分析用載體的一個區域移動，而使載入掩模片中的試劑有利地沉積和分布，其中所述區域在相對於此載體水平的平面中朝向掩模片的一個或多個狹道。
在本發明的另一個實施例中，所述掩模片具有一個或多個狹道，每個狹道包括一個從其下表面凸出的凸出元件，所述凸出元件包括一空心球體，其空腔用於接收試劑，其尺寸適應於必須由試劑覆蓋的分析用載體的區域的寬度，當所述掩模片被移動時，經由形成在所述球體中的一孔，所述試劑由毛細作用保持在球體空腔中，且被分布在分析用載體上。這種掩模片也具有上文限定的細長形狀的凸出元件的特徵。
在本發明的一個特定實施例中，所述掩模片的下表面和上表面彼此完全平行，並遠離構成狹道的區域，即遠離構成狹道的斜面的區域。
在如上所述的本發明的實施例中，在掩模片的每個狹道處所述斜面與狹道相符合，而不考慮凸起元件的形狀。
或者是，所述斜面可僅延伸過所述狹道的一部分。一個例子是，在其斜面的最低點處包括一下部孔的所述狹道可以延伸超過所述斜面，例如處於水平面中。在另外的變化中，所述斜面可以由多個斜面構成。
當根據本發明的掩模片與用於分析生物樣本——例如一種電泳凝膠體——的載體結合使用時，該掩模片被置於分析用載體的「附近」這意味著所述掩模片不與載體的其上沉積並分布試劑的區域(試劑培養區域)相接觸，且被沉積在所述載體上的一種或多種試劑由掩模片狹道和所述分析用載體之間的毛細作用保持在所述載體上，這就允許它們被分布在該分析用載體的預定區域上，在掩模片於載體上平行於分析用載體移動期間，所述預定區域位於面對掩模片的狹道的位置。在本發明的特定實施例中，上述不接觸狀態更具體的是這種不接觸狀態允許試劑減少的開始就使其沉積在分析用載體上，根據本發明的一個特定實施例，這種減少實際上引起了與分析用載體暫時地接觸，這將在下文中描述和舉例說明。
形成在每個掩模片狹道的凸出元件處的斜面是這樣的，即其被稱為是最低點的點是最靠近由位於使用位置的分析用載體構成的水平平面的點。結果是，所述狹道的斜面的被稱為是最高點的點是最遠離由位於該操作位置的分析用載體構成的水平平面的點。掩模片的面對載體的每個狹道的下表面相對於所述水平面傾斜。
在沉積於所述分析用載體上的試劑分布期間，所述狹道相對於分析用載體的水平平面的位置和與每個狹道相連的開口的下部孔的位置保證了試劑達到狹道的斜面的最下點，在該點，施加在所述試劑上的毛細作用力達到最大。
構成所述試劑的液體可以分布在整個狹道上，或僅分布在所述狹道的一部分上。
所述一種或多種試劑可使用本發明的掩模片以一種控制的方式被沉積或分布在分析用載體的限定區域上，而不在掩模片的狹道和分析用載體之間建立任何接觸。
遠離分析用載體的在使用期間與掩模片的狹道排齊的區域，由於移動，可以在所述掩模片和分析用載體之間建立接觸，所述掩模片可以沿著該載體平行於分析用載體地滑動，而不將其損壞。
在本發明的一個特定實施例中，在使用期間沒有掩模片的點與分析用載體接觸，但也有掩模片的可能例外的區域——其被定位在分析用載體的附近。
優選的是，當掩模片必須被支撐以便將其定位在靠近分析用載體處時，這在遠離所述分析用載體處完成，例如安放所述載體的平面(或板)上完成。
當考慮所述掩模片、狹道或斜面的上表面和下表面時，這些概念被認為是參照掩模片在分析用載體上的位置而作出的，其本身位於水平的位置。換言之，當掩模片處於使用位置中時，掩模片的下表面和每個狹道或每個斜面的下表面面對分析用載體的表面。這樣相對於其限定凸出元件的斜面的水平面可以是分析用載體在其處於水平位置時被應用的水平面。
本發明還涉及一掩模片，其將試劑沉積並分布於分析用載體上的應用體現本發明的原理，即利用限定在掩模片中的斜面和面對所述狹道的分析用載體的區域之間的毛細作用來保持試劑，所述掩模片區別於上述掩模片之處在於，構成掩模片的每個狹道的斜面由在其使用過程中賦予掩模片相對於分析用載體的傾斜形成。在這種情況中，掩模片的下表面平行於與分析用載體相對的凸出元件的下表面，所述斜面是由掩模片的傾斜位置相對於分析用載體的傾斜而產生的。
在該特定實施例中，對掩模片限定的狹道的特徵是，其中當斜面通過使用相對於分析用載體傾斜的掩模片構成時，斜面與狹道成為一體並可換位。
當狹道成細長形狀時，其可以具有平行立面體形狀，其形狀限定了藉助毛細作用而將試劑保持在狹道和分析用載體之間的區域。在使用過程中，橫過掩模片的開口位於靠近斜面的最低點的狹道上的一處，所述斜面由相對於分析用載體傾斜的掩模片形成。
本發明的掩模片具有這樣的尺寸，即與分析用載體的尺寸相匹配，其中試劑將被沉積和分布在分析用載體上，而且此掩模片的狹道具有和液體試劑的容積以及分析用載體上的所述限定區域的形狀和尺寸相匹配的形狀和尺寸，其中所述試劑將被沉積和分布在分析用載體上，例如為了使用生物樣本的成分培養試劑的目的。
為了在掩模片和分析用載體被設置成彼此平行時，將一種或多種試劑沉積並分布在生物樣本分析用載體上，所述掩模片被從分析用載體的區域設置到一處於分析用載體平面之上的水平平面上，在該平面的高度掩模片被最初定位，且該平面與試劑的最初沉積點相對應，以便將試劑分布在分析用載體的與掩模片狹道相對的區域上。
為了將一種或多種試劑沉積並分布在樣本分析用載體上，當所述掩模片的狹道的斜面不是由狹道的結構而形成的，而是由在掩模片上形成的相對於分析用載體的傾斜而形成的時(反之亦然)，所述掩模片被移動到一特定傾斜的平面上，其採用如下特徵，即與所描述的其中狹道在其結構中包括一斜面的掩模片的特徵相同。
每次移動都允許掩模片在分析用載體的用於接收試劑的全部限定區域之上通過，這種移動被稱為「掃移」(sweep)。例如第一掃移可以從與電泳載體的陽極相對應的區域朝向與該載體的陰極相對應的區域進行，或者可以沿著相反的方向即從陰極到陽極的方向進行，以便覆蓋整個必須接收試劑的限定區域，在電泳載體(例如一種凝膠體)的情況下，這些區域與電泳遷移狹道相對應。在下文段落中，根據上述指示，當所提到的陽極是為了使試劑的沉積定位或使掩模片相對於分析用載體的移動方向定位時，必須理解這種定位或這種移動能夠從陰極開始相面對地實施。
在將試劑加載到與狹道相連的開口中之後的掃移分析用載體的預定表面的移位期間，本發明的掩模片可將所述試劑沉積並分布到分析用載體上的全部預定區域上，因為所有的試驗生物樣本位於掩模片移位的方向。
這樣就不必對每個待處理的樣本進行試劑的多重移液操作。當掩模片的所有狹道被使用時，所需進行的移液操作的次數與必須沉積到分析用載體的一行上的試劑的數量相對應，從而通常與設置在掩模片中的開口數相對應。
此外，每種加載入掩模片中的試劑的量與當每種試劑必須被加載於分析用載體上的每個樣本時通常使用的每種試劑的量相比較可以明顯地減少。
藉助示例，如果本發明的掩模片旨在沉積和分布試劑，以進行免疫固定，從而檢測已由電泳所分析的生物樣本的特定組分，當對每個測試樣本(即，通常為一種能夠固定樣本中的組分的固定劑，從而在電泳載體上產生一基準輪廓，具體為抗-IgG、IgA、IgM、N和O抗血清)使用6個試劑時，每個加載入掩模片中的試劑的量與當使用固定的掩模片例如在EP-B1-0526271中所描述的掩模片時而為每個待處理的樣本所加載的量相比較被減少4.5倍。
每個加載在掩模片的每個狹道上的試劑的量由使用該試劑所覆蓋的培養區域的尺寸的函數確定，例如由在掩模片的移位方向上建立的樣本的行數的函數確定。當掩模片被用於為了免疫固定而進行沉積和分布時，所述培養區域包括電泳載體的區域或與電泳載體的區域相同，該電泳載體的區域包括用於待分析的樣本的電泳輪廓。
藉助示例，包括三組在一行上的六個狹道的掩模片可以被用於進行九個樣本的免疫固定，或甚至是12或18個樣本(例如，這樣分布，即以三個不同樣本成行，每個樣本佔據掩模片的用於電泳的分析用載體的6個狹道)的免疫固定。
有利的是，所述掩模片被載入一定量的試劑，從而在一次掃移中，必須被分配試劑的分析用載體上的每個預定區域已經被試劑均勻覆蓋，為了確定每個試劑的加載量，我們考慮分析用載體的每次掃移的掩模片路徑和被覆蓋在分析用載體上的區域的寬度。通常，每次加載的試劑的量在4μl到15μl之間變化，例如試劑的量為15，10，8，6或4μl。
藉助示例，我們發現，4μl試劑的量足以以均勻的方式覆蓋175mm2的分析用載體表面，相應地，在分析用載體上分布試劑0.02μl/mm2。
優選的是，本發明的掩模片是剛性掩模片，或者被加固裝置加固，例如所述加固裝置可以參與掩模片的定位和/或導向。
用於製造掩模片的材料的選擇理論上沒有限制。
例如，該掩模片可以由一種能夠被模製以形成光滑表面的材料製造，特別是一種塑料材料。
該材料可以是透明的或半透明的；材料的例子例如有聚碳酸酯，聚甲基丙烯酸酯，聚乙烯，結晶聚苯乙烯和有機玻璃。
本發明的掩模片可以是一次性使用的。
當連入適合的定位裝置和適當的導向裝置時，例如可以是搭扣配合，賦予掩模片的剛度可以使其沿著預定平面移位，這種移動相對於分析用載體可以是水平的或傾斜的。
在本發明的一個優選實施例中，具有由上述所限定的性質的掩模片包括許多相互平行的狹道，所述狹道分布在掩模片的整個長度上。
當所述掩模片包括許多相互平行的狹道時，這種情況是非常頻繁發生的，狹道之間的距離(狹道相互之間的距離)由掩模片上的狹道的數量的函數確定，且需要防止試劑之間特別是固定劑和抗血清之間的任何相互作用。
有利的是，不同平行狹道之間的距離是恆定的。該距離可以較小，例如小於3mm，具體是約為2.5mm，最好是2mm或更大，特別是防止相鄰狹道的固定劑和抗血清之間的相互作用。
用於分布每種試劑的分析用載體的區域的寬度至少等於面對該區域的掩模片狹道的寬度。
藉助示例，可與分析用載體上的電泳輪廓的分布相對應的狹道的寬度和培養表面的寬度相近似，且約為2.5mm。在另外的一個示例中，寬度為3.5mm。
為了防止相鄰試劑之間的相互作用，還可以配置掩模片的狹道，以防止用於沉積試劑的不同區域之間的重疊或防止用於沉積在分析用載體上的試劑的任何可能擴散的區域之間的重疊，或者是能夠以可防止可能發生的相互作用的方式進行試劑的加載和使試劑下降到分析用載體上。在下文中對試劑的加載和下降的實施例進行了描述，包括例如但並不是必須的是一位於分析用載體外側的加載步驟，其能夠避免這種類型的相互作用，但允許保持狹道平行且對齊。
關於上述的相互作用，它是特別適合的，以保證為了產生每個樣本的參考輪廓的試劑不會與特定試劑(具體是抗血清)相互作用，這種相互作用可能使樣本的特定組分的檢測發生錯誤。
為此目的，當特定裝置存在於掩模片的結構中時，掩模片的第一實施例包括許多相互平行的狹道，這些狹道分布在掩模片的整個長度上，且相互之間具有恆定間隙，且包括分布在掩模片的整個長度上的相互平行的狹道的第一序列，和平行於所述第一序列狹道的相互平行的狹道的第二序列，其中下部孔位於相同的水平平面上，所述第二狹道序列形成一準線，其相對於由第一狹道序列形成的準線偏移。
在一種改變了的掩模片中，第二狹道序列的偏移準線由通過增加所述第一序列的所述狹道和所述第二序列的另一狹道之間的間隙而代替。
與第一系列的狹道相比較第二狹道序列的偏移或該狹道序列的間隙是為了防止第二狹道序列的試劑與其它狹道的試劑在沉積在分析用載體上期間發生的相互作用。通常，這些偏移狹道或更大間隙的狹道是為了接收用於免疫固定的固定劑，所述固定劑能夠固定電泳輪廓的蛋白質，以便產生一參考輪廓。
當所述掩模片不包含一序列偏移狹道或一序列與其它狹道相比具有不同間隙的狹道，所討論的試劑之間的相互作用可以被避免，條件是例如必須在兩次掃移中將這些試劑分別加載和沉積在分析用載體上。
作為一個例子，固定劑被沉積在電泳載體的陽極側，然後在加載抗血清之前通過掃移而被分配在例如從陽極偏移的位置上，例如相對於第一加載過程的位置而進一步朝向陰極約5mm的位置。或者是，抗血清可以被加載在陰極位置上。
然而並不總需要藉助兩個階段的加載，特別是當試劑的加載過程不會導致試劑之間的煩人的相互作用時。即使所有的試劑被同時加載到分析用載體的表面之外，這種相互作用也可以被防止，而且當所有試劑的同時下降可在分析用載體上完成時，也不產生煩人的相互作用。
當掩模片這樣形成時，即狹道的斜面由掩模片相對於分析用載體的傾斜而形成而不是由狹道的結構形成時，狹道和狹道組不需要偏移，且所述試劑可根據它們的性質在若干個階段被加載並沉積。
本發明的掩模片可以這樣製造，使得狹道被組成若干組，每組例如由一相對於其它彼此對齊的狹道以偏移方式定位的狹道組成，並由在下一個偏移狹道之前被對齊的狹道組成，此外，本發明的掩模片結構是這樣的，其結構以及如果需要其使用條件允許試劑的沉積和分布，而不會使沉積在分析用載體的不同區域上的不同試劑之間發生相互作用。
特別是對於最初沉積在分析用載體上的試劑，可發現在試劑的分布之前，所述試劑在分析用載體上發生局部擴散的現象。
關於試劑的沉積，為了避免任何局部擴散現象的後果，有利的是選擇遠離對可攜帶待檢測的樣本成分的分析用載體的區域的掩模片，即例如遠離包含電泳輪廓的區域的掩模片來沉積試劑。
在免疫固定的情況下，所述試劑被沉積在例如一區域中——該區域遠離與電泳輪廓相對應的區域，例如沉積在相對於這些輪廓的載體陽極一側。
有利的是，本發明的掩模片是這樣的，即從一側到另一側橫過該掩模片的開口垂直於該掩模片的上表面和下表面。
該掩模片的開口的形狀必須允許足夠量的試劑被沉積於其中，從而允許試劑沉積並分布在分析用載體的整個預定區域上，而不需為掩模片再加載試劑。
此外，該開口的形狀和位置與藉助毛細作用將一定量的試劑保持在掩模片的狹道和分析用載體之間相適合，直到在用於將試劑分布在分析用載體上的操作過程中引入的量用盡為止。
當將試劑沉積到分析用載體上時，當掩模片被加載到分析用載體之上時，伴隨著在加載試劑過程中對狹道進行填充，適當的是在掩模片和移液器的端部或用於將試劑加載到掩模片之中的任何其它裝置之間設置一密封。
開口的容積可以被設計成允許在分析用載體的外部加載試劑，在這種情況下，試劑必須藉助毛細作用被保持在開口的整體部分中，直到它們被沉積到分析用載體之上。在這種情況下，掩模片被定位以保證其所容納的試劑在分析用載體上的沉積。這種定位必須保證在液體和分析用載體之間建立接觸，可能應用特定特徵來保證這種接觸。
有利的是，在每條狹道中，所述開口可以接收多於反應所需量的試劑。
本發明的掩模片可以使用較少的試劑量，例如大約15μl或10μl。然而，橫過掩模片和為了接收這些試劑的開口尺寸可以被確定，以允許多於有效使用量的試劑量可以被接受。例如，開口容積可接收高達約30μl的試劑量。
掩模片的幾何特徵，特別是適應於沉積物的數量，它們的寬度和這些沉積物的間距的、在所述分析用載體上成行地形成的狹道的數量和狹道之間的距離(狹道間距)。本發明的掩模片具有足夠的長度，以包括形成在一行中的幾條狹道，和相對於操作中掩模片被放置時於該狹道面對的分析用載體的培養表面的電泳遷移狹道的長度的限定寬度(較小)。
可以理解，這就成為本裝置的一個特點，即同一掩模片可以被用來在同一凝膠體上產生具有相同數量和尺寸特徵的若干行沉澱物。這些已在分析用載體上成行地產生的沉澱物行相互平行，且垂直於電泳遷移的方向。
有利的是，當掩模片和分析用載體之間的距離為2mm或更小時，優選是在0.1到1.5mm之間的範圍內，本發明的掩模片的幾何結構允許藉助毛細作用將試劑沉積並保持在掩模片的每條狹道和分析用載體之間。掩模片和分析用載體之間的這個距離根據所考慮的掩模片上的點而變化；特別是，該距離在掩模片上的最靠近載體的點(對應於狹道的斜面或掩模片的斜面上的最低點)處最好約為0.1到0.5mm，而在掩模片上最遠離分析用載體的點處，該距離最好小於2mm，有利的是小於1.5mm或更小。
在這些限制中，所述斜面的傾斜必須是這樣的，即掩模片與分析用載體的間隙與用於將試劑保持在狹道和分析用載體之間的毛細力相適合。
藉助示例，本發明的掩模片被這樣製成，即狹道彼此間隔1.5mm或更大的距離。優選的是，狹道之間的間隙為2.5mm。狹道寬度優選是2.5mm。
為存放固定劑的掩模片也可以偏移；例如，當掩模片位於使用位置時，其可以位於較其它狹道更靠近陽極的位置，在由電泳凝膠體組成的分析用載體附近。
一種特定的掩模片的特徵在於，用於固定劑的狹道不與其它狹道對齊，且與由其它狹道形成的準線相比偏移5mm的距離，優選是6到7mm的距離。
一種適合於本發明的特定的掩模片，且特別是一種掩模片——其適合於與一種10cm長、約8cm寬(在陰極和陽極之間)的電泳凝膠體一起使用，所述掩模片的每條狹道具有以下的尺寸——長度3到15mm；——寬度1到10mm；——斜面的傾斜度從水平傾斜1°到10°。
一種適合於與上述凝膠體一起使用的特別優選的掩模片，其每條狹道具有以下尺寸——長度7mm；——寬度2.5mm；——斜面的傾斜度從水平傾斜5°。
在這些特定實施例中，上述掩模片的其它特徵可與上述的特定特徵當然相關。具體是，狹道間距有利的是2.5mm，和/或用於特定試劑的狹道準線和用於固定劑的狹道準線之間的偏移為6到7mm。
而且，在本發明的特別優選實施例中，掩模片是這樣的，即橫過其的開口具有上述特徵，即考慮具有一形成約50°角的圓錐狀部分。
在本發明的不同實施例中，掩模片的厚度有利的是在1到10mm的範圍內。
當本發明的掩模片被用於將試劑沉積並分布在電泳載體上，其特徵還在於，其可以與在電泳載體上分散的生物樣本的定位特徵相適應；特別是，所述掩模片可以——將掩模片上的狹道的行對齊，垂直於電泳遷移的方向；——將掩模片定位在分析用載體附近，以藉助毛細作用將試劑保持在掩模片的狹道和分析用載體之間；——對掩模片進行定位，使其橫過電泳遷移方向，以允許發生在分析用載體上的電泳遷移的行與掩模片狹道的行對齊。
為了與不同的分析用載體一起使用，藉助示例，根據本發明的一種掩模片可以包括範圍為1到24條狹道，優選的是在6到24條狹道的範圍內，特別是6，9，12，15或18條狹道。
如果為了用於電泳分離之後的免疫固定反應，對於佔據電泳載體的同一行的三種不同樣本，和對於給定樣本的行數(例如2或更多，特別是3或4)，一包括18條狹道的掩模片對於每個樣本可以沉積一種用於產生參考輪廓的固定劑和5種特定的試劑例如抗血清，特別是抗-IgG，抗-IgA，抗-IgM，抗-IgN和抗-IgO。採用相同特徵，還可以製造具有6或12條狹道的掩模片。
本發明還涉及一種如上限定的掩模片，該掩模片與定位裝置相聯，所述定位裝置旨在將掩模片的狹道的下表面保持在分析用載體的表面附近，在分析用載體的表面附近，所述掩模片將試劑沉積並分布在分析用載體上。
適合的定位裝置可以由支座構成，所述支座可以被放置在分析用載體上遠離包括生物樣本的培養表面的位置，這些支座的尺寸是這樣的，即掩模片不與在其與試劑的培養表面相對應的部分之上的分析用載體相接觸。
根據上文，所述定位裝置也可以與用於對掩模片進行導向的裝置結合使用，以允許其以一種被控制的方式被放置在分析用載體上。
這樣，另一方面，本發明提供一種裝置，其用於將一種或多種試劑沉積並分布在用於生物樣本的分析用載體上，包括a)一種如上所限定的掩模片；b)用於對掩模片進行定位和導向的裝置，其使掩模片定位，從而將掩模片保持在分析用載體的表面附近，並可對掩模片進行導向使其在平行於所述載體表面的水平面上掃移分析用載體的表面，以便可將試劑沉積並分布在分析用載體的每個沿著掩模片狹道排列的預定區域上。
在本發明的一個變型中，使用的掩模片是這樣的，即狹道的斜面是由掩模片相對於分析用載體的傾斜形成的。在這種情況下，本發明提供一種裝置，用於將一種或多種試劑沉積並分布在用於生物樣本的分析用載體上，包括a)一種如上所限定的掩模片；b)用於對掩模片進行定位和導向的裝置，其可使掩模片定位，從而將掩模片被保持在分析用載體的表面附近，並可對掩模片進行導向使其在傾斜於所述載體表面的預定平面上掃移分析用載體的表面，以便可將試劑沉積並分布在分析用載體的每個沿著掩模片狹道排列的預定區域上。
在本發明的一個特定實施例中，如上限定的裝置是這樣的，即用於對掩模片定位和導向的裝置能夠在分析用載體和掩模片上最靠近所述載體的點(與斜面的最低點相應)之間建立一個距離，該距離在0.1mm到0.5mm的範圍內，並在距掩模片的最遠點(相應於斜面的最高點)和載體之間建立一個距離，該距離小於2mm，最好是1.5mm或更小。
分析用載體和最靠近所述載體的掩模片上的點之間的距離優選是0.5mm。
如果能夠適當地存在於電泳設備中，本發明的用於對掩模片進行定位和導向的裝置可以是任何適合的裝置。例如一路徑限制器(course limiter)可以是一擋止件。
有利的是，所述導向裝置包括一路徑限制器，以限制掩模片移位路徑。
在本發明的一個特定實施例中，所述定位和導向裝置可允許掩模片沿著分析用載體自動移位。然而，如果通過多次往返移位是適合的，本發明的掩模片易於手動放置，以便通過掃移來將包含在掩模片中的試劑覆蓋在分析用載體上的整個預定區域。
本發明還涉及一種用於將一種或多種試劑沉積並分布在包含生物樣本的分析用載體上的方法，該方法包括以下步驟——將如上文限定的掩模片或如上限定的裝置定位在分析用載體的附近；——將一種或多種試劑加載在掩模片上，以將一種或多種試劑沉積在分析用載體上，藉助毛細作用將所述試劑保持在所述載體和所述掩模片的狹道之間；——通過掃移分析用載體使掩模片移位，以允許將一種或多種試劑分布在分析用載體上的限定區域中，所分布的一種或多種試劑的量足以使其與存在於所述分析用載體上的生物樣本的成分相互反應。
當掩模片的狹道包括斜面部分時，所述掩模片被放置在相對於分析用載體的平面的水平平面上，並位於載體之上且平行於所述載體。
當掩模片的狹道不包括斜面時，並因此以相對於分析用載體傾斜的方式被定位以形成所述斜面，該掩模片平行於分析用載體的平面移位，如果掩模片傾斜則所述載體自身處於水平位置。
當掩模片被定位在分析用載體附近時，且一旦試劑與分析用載體接觸時，其可立即通過掃移將試劑放置在所述分析用載體之上。
當試劑被分布在分析用載體的預定區域上時，例如分布在與生物樣本的電泳遷移狹道相對應的區域上時，這些區域構成了所述試劑與樣本成分的培養區域。
使用本發明的掩模片的一個優點在於這樣一個事實，即當分布結束時，且載入掩模片中的試劑的量用盡時，掩模片可以迅速地從構成分析用載體的培養區域的限定區域上移走。
與本發明的掩模片的應用相聯繫的另一個優點是，允許使試劑均勻分布在培養區域上。
有利的是，使用超過需要用來覆蓋分析用載體的在樣本組分和試劑之間發生培養的區域的試劑量的試劑。一種過多的試劑量為大於在分析用載體上掃移速率約2cm/s的情況下，藉助一次通過(一次掃移)分配的試劑量。
留在分析用載體的被掃移表面的每單位區域上的試劑量取決於表面區域特別是掃移長度。其隨著掃移速率的減小而升高。
掩模片相對於分析用載體移位的速率通常在0.5到2cm/s的範圍內。
藉助示例，為了將試劑分布在陽極和陰極之間的寬度(與掃移長度對應)為8cm的電泳載體上，可以實現分別包括一個外移和回移的行程的兩個位移，每個位移需要約3秒。在這種情況中，在每條狹道上可以沉積6μl到10μl的試劑量。
在低速——即約0.5cm每秒時，而且對於2.5mm的狹道寬度，被導入狹道下的劑量為3-4μl的試劑將在70mm的行程後被耗盡。
與分析用載體相比較，對於2.5mm寬的狹道和對於70mm的掩模片掃移路徑，使用的試劑容量優選的為8到10μl/狹道。
當已進行第一掃移後，即使移位較慢-例如在0.5cm/s時，一些試劑會被留在狹道下方，而且特別是如果在2cm/s的平均速度下移位時會是這樣。
其它掃移將必須完全耗盡被導入的試劑。掃移次數可以作為被導入各狹道的試劑的容量的函數而變化。
實際上，使用的各試劑的容積是這樣的，以便4次掃移就足以耗盡所述試劑。
對於加載到各開口中的10μl試劑量，掩模片然後例如經過兩次往返行程從而掃移70mm的長度。一旦所有試劑已經在這四次過往之後被分布到該表面上，抽出掩模片，而不會發生不希望的分布的風險，且培養階段正好開始。
根據本發明的一個特定實施例，兩次掃移(一次XXX往返移位)將試劑分布在載體上。即使在掃移之後，在分析用載體上仍然殘留有少量試劑，在培養之前不必將其去除。掩模片的操作條件確保了一種均勻的分布。
如果減小掃移長度，可以有利地減少分布在每個狹道上的試劑量。
如上所述，上面我們已經指出，用於實現將一種或多種試劑沉積和分布在分析用載體上的方法的掩模片優選的是這樣一種掩模片，其中，用於固定劑且能夠固定生物樣本的成分以產生一參考輪廓的狹道相對於其它狹道偏移。
在固定劑狹道和例如用於特殊抗血清的狹道之間的偏移避免了當試劑被沉積在分析用載體上時它們之間的相互反應。當所有試劑被加載到掩模片上並一起被沉積時，該偏移被特定地調節。
或者是，例如當用於固定劑的狹道不偏移時，掩模片在兩次行程中被加載，以首先沉積抗血清其次沉積固定劑。這種兩步加載或者可以通過首先加載並沉積固定劑然後加載並沉積特定試劑而進行。
或者是，如果用於試劑在分析用載體上沉積的條件是這樣的，即，它們不會導致試劑間的相互反應，特別是在特定試劑和固定劑之間(如果有任何固定劑的話)的相互反應，所述加載可以一步完成。
當掩模片是這樣的，即它已經被用在一種傾斜位置中，以在狹道中產生與分析用載體相對的斜面，狹道彼此沒有偏移，但是，加載必須是不可相互反應的試劑(例如固定劑和抗血清)，要麼分兩步進行初次加載的試劑通過掃移而先於在第二步中加載的試劑(例如抗血清)進行，要麼在將試劑沉積在分析用載體上時在可避免幹擾的相互反應的條件下進行。
在一種特定的執行過程中，這樣進行本發明的沉積和分布方法，以便在遠離包括生物樣本的分析用載體表面的區域處給掩模片加載試劑。
當進行這種加載時其中加載需要一定量的時間(30秒到2分鐘)，由於擴散，在此位置由試劑覆蓋的分析用載體的區域比狹道本身寬。如果這種加載垂直於一包括要被顯示出來的樣本成分的輪廓的區域來進行，這種擴散可引起輪廓的非正常增加——其在試劑與生物樣本成分的培養之後被顯示出來。
如果遠離包括樣本成分的分析用載體表面的區域對掩模片加載時，由試劑從沉積區域的擴散所引起的缺點就不會出現。
當分析用載體的表面尺寸允許時，所述加載可以在所述樣本的電泳遷移輪廓所在的區域之外的所述陽極部分實施。或者是加載可以在所述樣本的電泳遷移輪廓所述的區域之外的陰極部分實施。
當分析用載體的表面尺寸不允許在包含樣品電泳遷移輪廓的區域之外進行的這種沉積，可以在載體表面外側對掩模片加載，例如，在一塑料薄膜片上，該膜片與分析用載體接觸且位於此載體的表面平面中，但延伸超過此表面。
本發明還涉及一種用於將一種或多種試劑沉積和分布在包括生物樣本的分析用載體上的方法，所述方法包括下述步驟——將一種或多種試劑加載在掩模片上，以將一種或多種試劑沉積在分析用載體上，藉助毛細作用將所述試劑保持在所述載體和所述掩模片的狹道之間；——將如上文限定的掩模片或如上文限定的裝置定位在分析用載體附近；
——通過掃移分析用載體使掩模片移位，以將一種或多種試劑分布在分析用載體上的限定區域中，所分布的一種或多種試劑的量足以使其與存在於所述分析用載體上的生物樣本的成分相互反應。
如上所示的實施沉積和分布的特徵在這種情況下也可以應用。
在將可動掩模片設置在分析用載體上之前對其加載的過程中，所有試劑已經被導入與掩模片的各狹道相連的開口的上部孔中，為此掩模片然後用作儲存裝置。儘管各開口都存在著較低的孔，但是這些試劑由於毛細作用而被保持在它們中。
在上述結構中，當掩模片被加載在分析用載體上時，試劑被直接導入掩模片的狹道和分析用載體之間，其中所述掩模片已經被放置在距離所述載體的預定距離處(相對較低的點約為0.5mm)。
為此，在排出已經被保持在移液器的頂部中的試劑的過程期間，在此頂端和掩模片的上部孔之間設置一個密封，例如通過將移液器保持在垂直位置，同時在靠近開口下部孔的圓錐部分中，移液器的頂部輕輕抵靠掩模片開口的底部。當此較低的圓錐部分由一柱狀部分延伸時，所述柱狀部分的直徑(例如0.8mm)不允許移液器頂部通過。這就保證了試劑經與狹道相連的開口的下部孔「被強迫」排出，從此下部孔流出的液滴與位於其附近(0.5mm)的分析用載體接觸並且通過毛細作用將自身分布在狹道和載體之間。當沒有實現移液器的頂部/上部孔密封時，試劑殘留在上部孔中並且不會落在分析用載體上。
當提供密封但是下部孔沒有位於分析用載體表面附近時，即當遠離分析用載體進行加載時，肯定會出現這種情況。
在這些條件下，當通過移走移液器而破壞了「頂部/上部孔接觸」時，已經流出(但是由於其具有10-15μl的非常小的容積而還沒有落下)並且已經通過毛細作用留在下部孔附近的液滴上升到由上部孔構成的穴中。
在將掩模片設置在分析用載體上之前對掩模片進行的這種加載具有下述優點，即能自動進行例如通過Hydraplus SEBIA自動設備，消除了任何人工移液的需要並且進一步簡化了對掩模片的加載。
加載有被分布在上部孔中的試劑的掩模片用作一種儲存容器，在使用之前該掩模片可被保存在潮溼的室中一段時間，所述時間為幾分鐘到幾小時。
可以採用不同的方法來將加載到掩模片中的試劑沉積在分析用載體上。
在第一實施例中，通過將掩模片和掩模片保持器組件連接到一個導軌上並使其抵靠在陽極位置中，裝載有不同試劑的掩模片和掩模片保持器組件(掩模片保持器構成用於定位掩模片的一種裝置)位於分析用載體上。掩模片組件被覆蓋有一個小室(圖3)，該室覆蓋所用的上部孔且承載在掩模片的邊緣上(一個平面密封抵靠一個平面)。該室設有一個裝置，通過該裝置可以迅速噴入(例如使用注射器)少量的空氣——50到200μl。這種密封室中的壓力增加使各試劑流出到掩模片狹道下方而且然後這些試劑接觸凝膠體。在與分析用載體接觸之後，它們通過毛細作用被同時分布在掩模片的狹道和分析用載體之間。然後分析用載體的表面變溼了。
在另一實施例中，通過將保持器組件連接到導軌上並使其抵靠在陽極位置中，已經被加載的掩模片和掩模片保持器組件位於分析用載體上。
通過使用垂直進入每個上部孔的直徑小於掩模片的下部孔(例如0.5mm)的由具有吸水性材料構成的圓柱杆，並直到該杆與分析用載體相接觸，所述試劑被從起貯存器作用的掩模片的上部孔中落在分析用載體上。
該杆在引入到上部孔中的液體和分析用載體之間建立一個連接。然後，被引入的所有液體藉助毛細作用沿著所述杆下降，並分布在狹道和分析用載體之間。
可通過將一桿垂直並同時引入掩模片的每個上部孔中來實現所有試劑同時下降到分析用載體上，這些具有相同長度(5到10mm)的杆彼此整體地形成，例如通過插入一與掩模片具有相同尺寸和幾何結構的矩形有機玻璃板中，這樣就精確地再現掩模片的孔的分布。當所有的試劑已經被分布在掩模片的狹道和分析用載體之間時，所述具有杆的有機玻璃板被抽出，且所述掩模片掃過所述凝膠體表面。
在本發明的又一個實施例中，提供了第三種方法，這種方法允許所有的試劑同時滴落在凝膠體上，所述方法包括，在將掩模片止擋定位於所述分析用載體上(特別是在陽極和陰極附近)之後，對所述掩模片施加一機械衝擊。所述衝擊可以例如通過將加載的掩模片壓扣配合於掩模片支架中而獲得。
這種衝擊藉助慣性可以將一滴一直由毛細作用保持在掩模片的貯存器中的試劑噴射在分析用載體上，這樣就在位於狹道的下部孔處的掩模片狹道的最低點和分析用載體之間建立了一個連接，從而所有位於貯存器中的試劑藉助毛細作用被分配在掩模片狹道和分析用載體之間，然後可掃移所述凝膠體表面。
在又一個實施例中，在將試劑分布於上部孔中並將掩模片安裝在分析用載體之上之後，當在遠離分析用載體處掩模片被加載時，使掩模片在狹道斜面的最低點處暫時與分析用載體接觸。這種接觸的目的是在分布開始之前允許所有試劑落在分析用載體之上。
在上述一個實施例中，一旦被加載的掩模片處於工作位置中時，即，當每個狹道已經接收了預定量的試劑，藉助導向裝置，所述掩模片沿著電泳遷移的方向平行於分析用載體放置。通過掃移與掩模片的狹道排成一行的分析用載體的表面，這種移位的結果是將液體輸送到掩模片的狹道和分析用載體之間。藉助毛細作用被保持在掩模片和分析用載體之間的液體藉助狹道的斜面而被輸送，所述狹道斜面可以在移位過程中使試劑到達其最低點，從而一定量的試劑就被沉積在分析用載體上，所述試劑滲透並保持在該分析用載體中。隨著掃移的進行，包含在狹道之下的液體的量由於滲透進入分析用載體而被消耗並減少。
本發明還涉及一種用於將試劑沉積並分布於分析用載體之上的方法，其中將試劑加載到掩模片的步驟是自動的。
在本發明的又一個實施例中，移動掩模片以掃移分析用載體的的步驟是自動的。
本發明的方法被有利地實施，以在藉助電泳遷移而被分離之前檢測生物樣本的成分，這種檢測可能會涉及免疫固定，在這種情況下，試劑為特定的抗血清且優選是一種固定劑，以形成一參考電泳輪廓。
本發明的這種方法可以在電泳和免疫固定技術的通常條件下實施。所使用的試劑為普通試劑，但有利的是本發明所使用的試劑的量小於通常使用的試劑的量。
本發明還提供一種藉助免疫固定來檢測一種或多種生物樣本的成分的方法，包括——進行一種或多種生物樣本的電泳，以分離成分；——實施按照本發明的用於將試劑沉積並分布在電泳載體(優選是瓊脂糖凝膠)上的方法；——對藉助電泳分離的生物樣本與分布的一種或多種試劑進行培養，以實現免疫固定。
這種檢測方法的特徵還在於，其還包括一個步驟，即使免疫固定的生物樣本成分顯色，且如果合適，還包括對顯色組分進行定量的步驟。
這些顯色和量化步驟可以使用公知的裝置實施。
優選的是，在本發明中，上述限定的方法可以分別使用具有18，12或6個分析狹道的掩模片，同時分別分析3n，2n或n個生物樣本，其中n為表示沉積物的行數的整數，優選的是n為2，3或4。
然而，理論上，對掩模片上的狹道數沒有限制。
由於掩模片的結構和其使用的特徵的原因，加載在掩模片的每個狹道上的每種試劑的量，即，引入每條狹道的每個開口中並由毛細作用保持在每條狹道下面的試劑量可以有利地被減少，且例如小於15μl/狹道。優選的是，該量為10μl/狹道或更少。
當試劑被沉積在分析用載體上時，它們為液態。這樣，本發明涉及採用液體試劑加載掩模片。本發明還涉及由液體試劑加載的掩模片的應用，然後所述掩模片被冷凍乾燥，從而包含在掩模片的開口中的試劑被冷凍乾燥，直到掩模片被用於要讓試劑為液態的沉積步驟。
另一方面，本發明提供一種試劑盒，包括——至少一個如上所限定的掩模片；——至少一個分析用載體，特別是一種電泳載體。
例如一種試劑盒還可以包括——用於對由電泳分離的樣本的成分進行免疫固定的試劑；——用於對由電泳分離的成分的全體的每種樣本進行固定的固定劑。
該試劑盒還可以包括至少一個梳狀件，用於將試劑沉積到分析用載體上。
如果掩模片不得不在遠離電泳載體的位置被加載，所述試劑盒可以包括例如如上文所述的裝置，用於使試劑從掩模片中的開口落在分析用載體上。
這種試劑盒有利的是適合於使用具有18狹道的掩模片同時在每個電泳載體上分離9或甚至12個樣本。
優選的是，這種試劑盒還可以同時在每種電泳載體上分離18個樣本。
根據本發明的一種試劑盒，還可以包括使用本發明的掩模片的指示，例如以使用說明的形式存在，包括關於被加載到掩模片上的試劑的量的信息和/或移動掩模片的條件，例如掃移速度或建議的掃移次數。
根據本發明的試劑盒的一種特定實施例，如果需要，所述掩模片不與所述的可單獨獲得的分析用載體一起包裝。
本發明的掩模片可以有利地被加載試劑。
此外，本發明涉及一種用於免疫固定的且用於分離3行3樣本布置的至少9個生物樣本的電泳載體，所述載體包括至少18個遷移狹道，所述狹道彼此間隔2mm的距離，且為3mm寬，所述遷移狹道的總長度為至少63mm。
圖9導向部件的頂視圖，允許將掩模片定位在電泳載體上，並使掩模片在載體(凝膠體)上沿預定方向且以給定行程移動；

圖10藉助滑座49被安裝在導軌14上的滑架的頂視圖和底視圖。該滑架具有四個分布在定位有電泳凝膠體的平面上的底座30。所述底座30可以在該平面上滑動。
圖11藉助槽口43和彈簧28接受並保持掩模片的掩模片保持裝置的頂視圖和底視圖。該掩模片保持裝置包括一承載區域46，壓力被施加在該區域上以移動掩模片與凝膠體接觸。
圖12滑架和掩模片保持裝置的組件，所述滑架和掩模片保持裝置由藉助鉚釘48保持的兩個彈簧片47連接。當藉助滑座49被安裝到導軌14上時，該組件允許將掩模片保持與凝膠體平行，且位於凝膠體附近但不與其接觸。
為了使加載入掩模片凹穴中的試劑可以下落，在掩模片保持裝置上施加一個壓力。這使得彈簧片47彎曲，且狹道的最低部分即填充導管34的下部孔與凝膠體相接觸(一支座系統，允許限制彎曲，以便不損傷凝膠體)通過釋放承載區域46的壓力，允許掩模片向上移動，並返回其最初位置，且包含在導管36中的試劑藉助毛細力被分布於狹道的下部和凝膠體之間。
然後藉助手柄26，掩模片向前和向後移動。
圖13所述組件的頂視圖，包括滑架，掩模片保持裝置和掩模片。
圖14到17表示掩模片和安裝在電泳板上的定位杆50上的結束掃移位置處的導向組件。
滑動件16在平行於電泳遷移方向的該板的一邊緣上延伸，並且包括兩個橫向槽18，槽中是由另一個滑動件21承載的嚙合中空銷20，滑動件21與板的所述邊緣成一體，銷中的孔套入從遷移板(未示出)凸出的栓中，並與用於調節滑動件16和掩模片10相對於所述板和分析用載體的橫向位置的螺釘22相連。此滑動件還包括在調節後鎖定此滑動件的螺釘24。
導軌14平行於電泳遷移方向延伸並且在臂16的一端接合在相應的槽中。該端承載一個用於沿一個方向或另一方向在導軌14上平移的手柄或杆26。
在一種變型中，機動裝置可以設置在滑動件16上，用於臂12的自動位移，例如一個電動馬達被連接到臂12上，馬達驅動軸支撐在分布與鏈或帶配合的齒輪或滑輪上。
使用任何合適的裝置例如在28處所示的彈性夾固件，將掩模片10固定在臂12上，而且掩模片10由基本呈矩形的一個平的細長板形成，該板橫向延伸，即垂直於電泳遷移的方向延伸。
通過凸出銷或塊30將此板固定在分析用載體上方的預定距離處，銷或塊30形成在或固定到臂12的下表面上，而且旨在靠在上述板的邊緣上。
掩模片10的下表面包括一系列傾斜的狹道(或斜面)32，它們互相平行並且所示例中以交錯的方式相互偏移而設置成橫向兩排。這些狹道(或斜面)32平行於電泳遷移的方向延伸並且向相同的方向傾斜。它們的最低端包括一個用於將試劑沉積在分析用載體上的孔34。該孔34是在其整個厚度上橫過掩模片10的導管或通道的較低孔，並且該孔經過一個孔36通入掩模片的上表面，孔36的直徑比所述較低孔34的直徑大得多。
在圖4到6所示的本發明的一個實施例中，這些孔34和36具有環形截面的小圓柱狀管道的端部，且經由一截頭圓錐導管38被彼此連接起來。
掩模片保持裝置12和被夾固的掩模片10被連接到導軌14上，而且因此使用螺釘22的橫向調節可以使掩模片的斜面與樣本遷移狹道垂直地對準，這可以通過將一種適合的染料例如溴苯酚藍加入被沉積的樣本中而被觀察到。
使用手柄26或上述機動裝置可以使掩模片人工地掃過分析用載體的頂部。
如圖3中示意性示出，一蓋可以被放置在掩模片10上並固定於其上，用於以基本密封的方式封閉形成在掩模片10中的管道34，36，38。蓋40上的一個管42開在這些管道的上部孔36上方並且允許在掩模片和所述蓋之間噴入少量空氣，以在保護在掩模片的管道中的試劑上施加壓力，並且使它們落入管道中以使它們與分析用載體接觸。
所述試劑可以被沉積在掩模片10的管道中，這些管道可以以基本密封的方式由蓋40封閉，在使用試劑之前，掩模片10/蓋40組件可以被輸送並放置在分析用載體上方。
圖7和8示意性示出了掩模片10的兩種變型——圖7包括18個設置成兩排的橫向管道，這兩排互相平行且以交錯的方向偏置；——圖8包括兩組6個橫向管道，這兩組在掩模片的整個長度上對齊並且各包括5個對齊的管道，1個偏置的管道。
使用本發明的掩模片的例子例1使用一個可移動的具有18個狹道的掩模片同時免疫固定9個樣本(圖4)使用SEBIA’s Hydrasys電泳裝置在一種凝膠體上進行操作，以在0.7×83×101mm的尺寸上進行免疫固定。
為了將樣本沉積在電泳載體上，我們使用塗布器(法國專利FR-A-2671290和歐洲專利EP-A-0 493 996)，包括彼此隔開2mm的18×3mm的齒。每個樣本被沉積在6個連續的齒上，而且因此各塗布器能夠在電泳凝膠上沉積3種不同樣本，而且3個塗布器能被用於獲得9個用於分析的樣本。在分別距離凝膠的陰極邊緣18、38和58mm的位置處的3個平行的行中，使用Hydrasys裝置在凝膠上進行這種沉積。在20℃的控制溫度和20W的恆定功率下以及一定的時間下進行電泳遷移，以便累計31伏特小時。
一旦遷移完成，就建立了具有下述幾何特徵並具有18個狹道的本發明的可移動掩模片狹道寬度2.5mm，狹道長度7mm，狹道間距2.5mm，狹道傾斜角5°。一排三個狹道(用於固定劑的)相對於15個狹道(用於抗血清的)的行偏置5.5mm。
導軌的銷20中的中空部位於兩個承載在Hydrasys裝置上的栓上。
18狹道掩模片被夾固到掩模片保持裝置12中，保持裝置12本身已經被連接到導軌上。掩模片及其掩模片保持裝置抵靠在高的位置處，即靠在凝膠的陽極側上。包含在沉積到凝膠上的樣本中的一種染料(溴苯酚藍)允許分析用載體上的電泳狹道位置被觀察到。使用橫向調節裝置20、22，掩模片的狹道或斜面與樣本的遷移狹道垂直對準。
然後通過經狹道(36)的上部孔導入的用於免疫固定所需的不同試劑，給掩模片加載，每狹道上的試劑量為10微升(μl)並且以通常的順序固定劑，抗IgG，抗IgA，抗IgM，抗K和抗λ。所述固定劑被導入3個偏置陽極側狹道的下面。
一旦被導入狹道和凝膠體之間，這些10微升(μl)的試劑加載量被分布在陽極一側，被顯示出來的每個狹道下面大約5-6mm以外的區域上。
一旦掩模片已經被加載，使用通過沿導軌滑動的手柄(26)使掩模片移動。這種掃移在沒有跳動的近似恆定的速度下被平滑地從膠體的高位置(陽極側)到低位置(陰極側)進行，經過63mm的路徑。這種掃移約進行3秒。
一旦掩模片已經抵達與陰極位置相抵靠位置，就在相同的條件下沿相反的方向進行掃移。這兩次掃移又被重複一遍。起初導入狹道下方的所有試劑已經被沉積在電泳遷移上方的凝膠上。在用於在凝膠體上培養試劑的步驟之前可以抽出所述掩模片，所述培養在20℃下進行5分鐘。
然後我們使用通常的免疫固定方案進行泵送，乾燥，清洗，著色，脫色和乾燥步驟。
例2使用具有18狹道的可移動掩模片同時對12個樣本進行免疫固定(圖4)重複前述例子中的步驟，但是4個具有18齒的塗布器的每個塗布器都被裝載有三個樣品。使用Hydrasys裝置，在4個分別距離凝膠的陰極邊緣18、33、48和63mm位置處的平行的行中在凝膠上進行沉積。在20℃下20W的恆定功率下進行遷移28伏特小時。然後所述方法如前述例中所述。
例3使用具有12狹道的可移動掩模片同時對4個樣本進行免疫固定(圖8)使用具有間隔2mm的15×4mm寬度齒的塗布器將樣本沉積在凝膠體上，所述塗布器的加載量為每個塗布器上兩個樣本(樣本n°1，齒2到7；樣本n°2，齒9到14)。
使用Hydrasys裝置在凝膠體上產生2行彼此平行定位且分別距凝膠體的陰極邊緣23和53mm的沉積物。
在控制溫度20℃下20W的恆定功率下進行遷移直到達到累計42伏特小時。
一旦遷移完成，本發明的具有以下幾何特徵的有12狹道的移動掩模片就被安裝狹道寬度3.5mm，狹道長度7mm，狹道間距2.5mm，狹道傾斜角5°。一排2個狹道(用於加載固定劑)相對於10個狹道(用於抗血清的)的行偏置5.5mm。
導軌的銷20中的中空部位於兩個承載在Hyd所述asys裝置上的栓上。該12狹道掩模片被夾固到掩模片保持裝置12中，保持裝置12本身已經被連接到導軌上。所述組件已經被抵靠在高的位置處。
使用橫向調節裝置，(如例1所述)掩模片的狹道與樣本的電泳遷移狹道對準。
通過對每個狹道導入14μl試劑而對掩模片加載。
如前述例子所述，通過進行4次掩模片的掃移，試劑被分布。
在全部試劑量已被沉積在凝膠體表面上後，掩模片被抽出。
然後我們繼續使用通常的免疫固定方案進行泵送，乾燥，清洗，染色，脫色和乾燥步驟。
例4使用18狹道可移動掩模片實施36IF penta技術(例4)IF penta技術通常用於檢測被分析樣本中單細胞系或少突無性繁殖系免疫球蛋白染色體帶形式的病變蛋白的存在。
這種技術是這樣實現的，即通過使用一種五價的抗血清，即，具有抗IgG，抗IgA，抗IgM，抗Igκ(Kappa)和，抗Igλ特性的抗血清進行免疫固定，而對每個分析全部蛋白輪廓和所有免疫球蛋白輪廓的樣本並排顯色。
在該例中，使用SEBIA’s Hydrasys電泳裝置在一種瓊脂糖凝膠體上進行操作，以在0.7×83×101mm的尺寸上進行免疫固定。使用18×3mm的齒間距為2mm的梳狀部件。每個用於分析的樣本被並排沉積兩次，即，每個塗布器9個樣本。
4個塗布器用於36個樣本。
使用Hydrasys裝置在凝膠體上沉積4行彼此平行的分別距凝膠體的陰極邊緣18，33，48和63mm的沉積物。在控制溫度20℃下20W的恆定功率下進行遷移直到達到累計28伏特小時。然後圖4所示的本發明的18狹道可移動掩模片被安裝。
該掩模片這樣構成，即2行每行9狹道，且彼此偏置5.5mm。9個更靠近陽極的狹道旨在接收固定劑，另外9個狹道旨在接收五價抗血清。每個狹道寬2.5mm，長7mm，狹道間距2.5mm，斜面傾斜度5°。
該掩模片被夾固在掩模片保持部件中，並被置於較高的陽極側位置附近。
導入的試劑量為10μl/狹道。
然後進行例1到3的步驟。
權利要求
1.一種掩模片，用於將試劑沉積並分布於一用於生物樣本的分析用載體上，其包括——至少部分相互平行的一下表面和一上表面，彼此間隔開一構成所述掩模片厚度的距離；——位於所述掩模片下表面水平上的一個或多個限定區域(狹道)，其包括一從所述掩模片的下表面凸出的部件(32)(凸出部件)，每個凸出部件包括一部分——其構成相對於水平面傾斜的斜面；——與一狹道相連的一開口，其從所述掩模片的上表面上的一上部孔(36)穿過所述掩模片的整個厚度通到一下部孔(34)，所述下部孔位於所述狹道中，在所述狹道斜面的最低點附近；所述掩模片是這樣的，其包括的一個或多個狹道可以將載入每個開口中的且藉助毛細作用沉積在所述分析用載體上的試劑保持在所述狹道和所述分析用載體的表面之間，朝著所述表面放置著所述掩模片。
2.如權利要求1所述的掩模片，其適合於將試劑分布於一用於生物樣本的分析用載體上，其包括——至少部分相互平行的一下表面和一上表面，彼此間隔開一構成所述掩模片厚度的距離；——一個或多個狹道，每個狹道包括一從所述掩模片下表面之下凸出的細長形狀的凸出部件(32)，所述凸出部件包括一部分——其構成相對於水平面傾斜的斜面；——一開口，其與一狹道相連，並從所述掩模片的上表面上的一上部孔(36)穿過所述掩模片的整個厚度通到一下部孔(34)，所述下部孔位於所述狹道中，在所述狹道斜面的最低點附近；所述掩模片是這樣的，其包括的一個或多個狹道可以將載入每個開口中的且藉助於毛細作用沉積在所述分析用載體上的試劑保持在所述狹道和所述分析用載體的表面之間，朝著所述表面放置著所述掩模片。
3.如權利要求1的掩模片，其適合於將試劑分布於一用於生物樣本的分析用載體上，其包括——至少部分相互平行的一下表面和一上表面，彼此間隔開一構成所述掩模片厚度的距離；——一個或多個狹道，每個狹道包括一從所述掩模片的下表面之下突起的凸出部件(32)，所述凸出部件由一呈截頭平行六面體形狀的隆起構成，所述凸出部件包括一部分——其構成相對於水平面傾斜的斜面；——一開口，其與一狹道相關聯，並從所述掩模片的上表面上的一上部孔(36)穿過所述掩模片的整個厚度通到一下部孔(34)，所述下部孔位於所述狹道中，在所述狹道斜面的最低點附近；所述掩模片是這樣的，其包括的一個或多個狹道可以將載入每個開口中的且藉助於毛細作用沉積在所述分析用載體上的試劑保持在所述狹道和所述分析用載體的表面之間，朝著所述表面放置著所述掩模片。
4.一種適合於將試劑沉積並分布於一用於生物樣本的分析用載體上的掩模片，其包括——至少部分相互平行的一下表面和一上表面，彼此間隔開一構成所述掩模片厚度的距離；——位於所述掩模片下表面中的一個或多個限定區域(狹道)，並且其包括一從所述掩模片的下表面凸出的部件(32)(凸出部件)，每個凸出部件包括一下表面和一上表面，它們相互平行且平行於所述掩模片的下表面和上表面；——一開口，其與每一狹道相連，並從所述掩模片的上表面上的一上部孔(36)穿過所述掩模片的整個厚度通到一下部孔(34)，所述下部孔位於所述狹道中，在所述狹道斜面的最低點附近，所述狹道斜面通過相對於所述的處於使用位置的分析用載體使所述掩模片傾斜而形成；所述掩模片是這樣的，其包括的一個或多個狹道可以將載入每個開口中的且藉助於毛細作用沉積在所述分析用載體上的試劑保持在所述狹道和所述分析用載體的表面之間，朝著所述表面放置著所述掩模片。
5.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，所述掩模片是剛性的或增強的。
6.如權利要求4所述的掩模片，其特徵在於，所述掩模片是剛性的或增強的。
7.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，所述開口的容積空間構成被加載的試劑的貯存器。
8.如權利要求4所述的掩模片，其特徵在於，所述開口的容積空間構成被加載的試劑的貯存器。
9.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，每個狹道的開口垂直地穿過包括所述凸起部件(32)的厚度在內的所述掩模片厚度，所述開口包括呈截頭圓錐體形狀的一部分(38)，所述部分以一圓柱形下部孔(34)收尾。
10.如權利要求4所述的掩模片，其特徵在於，所述開口的容積空間構成被加載的試劑的貯存器。
11.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，所述掩模片包括若干分布於所述掩模片的整個長度上的相互平行的狹道。
12.如權利要求4所述的掩模片，其特徵在於，所述掩模片包括若干分布於所述掩模片的整個長度上的相互平行的狹道。
13.如權利要求11所述的掩模片，其包括——設置於第一準線上的相互平行的第一系列狹道；——平行於所述第一系列狹道的、相互平行的第二系列狹道，並形成相對於所述第一準線偏置的第二準線。
14.如權利要求12所述的掩模片，其包括——設置於第一準線上的相互平行的第一系列狹道；——平行於所述第一系列狹道的、相互平行的第二系列狹道，並形成相對於所述第一準線偏置的第二準線。
15.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，每個狹道斜面的長度與該狹道的長度一致。
16.如權利要求4所述的掩模片，其特徵在於，每個狹道斜面的長度與該狹道的長度一致。
17.如權利要求1所述的掩模片，當所述掩模片這樣布置時——其距離所述分析用載體最遠的點到所述分析用載體的距離為2mm或更小並且其距離分析用載體最近的點到所述分析用載體的距離等於或在0.1到0.5mm的範圍內，所述掩模片將等於或在4到15μl範圍內的量的試劑沉積在所述掩模片的每個開口中，並藉助毛細作用將所述試劑保持在所述掩模片的狹道和所述分析用載體之間。
18.如權利要求4所述的掩模片，當所述掩模片這樣布置時——其距離所述分析用載體最遠的點到所述分析用載體的距離為2mm或更小並且其距離分析用載體最近的點到所述分析用載體的距離等於或在0.1到0.5mm的範圍內，所述掩模片將等於或在4到15μl範圍內的量的試劑沉積在所述掩模片的每個開口中，並藉助毛細作用將所述試劑保持在所述掩模片的狹道和所述分析用載體之間。
19.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，所述狹道彼此間隔1.5mm或更大的距離。
20.如權利要求4所述的掩模片，其特徵在於，所述狹道彼此間隔1.5mm或更大的距離。
21.如權利要求1或4所述的掩模片，其特徵在於，所述狹道及其間距的尺寸是這樣的，即在試劑沉積或分布在所述分析用載體上期間，通過毛細作用由所述狹道保持在所述掩模片和所述分析用載體之間的試劑不相互作用。
22.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，所述狹道寬度為2.5mm。
23.如權利要求1或權利要求4至19所述的掩模片，其特徵在於，每個狹道的長度在6到7mm的範圍內。
24.如權利要求1或4所述的掩模片，其特徵在於，用於所述固定劑的狹道相對於相鄰的第一狹道被偏置5到7mm的距離。
25.如權利要求1或4所述的掩模片，其特徵在於，每個狹道的斜面相對於水平面的角度在1°到10°的範圍內。
26.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，所述掩模片的每個狹道具有以下尺寸——長度3到15mm；——寬度1到10mm；——斜面的傾斜度相對於水平面1°到10°。
27.如權利要求1或4所述的掩模片，其特徵在於，所述掩模片與定位裝置相連，所述定位裝置旨在將所述掩模片保持在所述分析用載體的表面附近，在所述分析用載體表面附近，所述掩模片將試劑沉積並分布在所述分析用載體上。
28.一種用於將一種或多種試劑沉積並分布在用於生物樣本的分析用載體上的裝置，包括a)如權利要求1所述的掩模片(10)；b)用於對所述掩模片進行定位和導向的裝置(12，14，16)，其允許所述掩模片被定位，從而所述掩模片被保持在所述分析用載體的表面附近，且允許所述掩模片被導引，以便在一平行於所述載體表面的水平面中掃過所述分析用載體的表面，從而允許將試劑沉積並分布在按所述掩模片的狹道排列的所述分析用載體的每個預定區域上。
29.一種用於將一種或多種試劑沉積並分布在用於生物樣本的分析用載體上的裝置，包括a)如權利要求1所述的掩模片(10)；b)用於對所述掩模片進行定位和導向的裝置(12，14，16)，其允許所述掩模片被定位，從而所述掩模片被保持在所述分析用載體的表面附近，且允許所述掩模片被導引，以便在一相對於所述載體的表面傾斜的平面中掃過所述分析用載體的表面，從而允許將試劑沉積並分布在按所述掩模片的狹道排列的所述分析用載體的每個預定區域上。
30.如權利要求28或29所述的裝置，其特徵在於，所述用於對所述掩模片(10)進行定位和導向的裝置可以在所述分析用載體和所述掩模片上的最靠近所述載體的點之間建立一個距離，該距離在0.1mm到0.5mm範圍內。
31.如權利要求28或29所述的裝置，其特徵在於，所述定位和導向裝置允許所述掩模片(10)沿著所述分析用載體自動移位。
32.一種用於將一種或多種試劑沉積並分布在包含生物樣本的分析用載體上的方法，該方法包括以下步驟——將如權利要求1所述的掩模片(10)定位在分析用載體的附近，以將所述一種或多種試劑沉積在所述分析用載體上，並藉助毛細作用將它們保持在所述載體和所述掩模片的一個或多個狹道的斜面之間；——將所述一種或多種試劑加載到所述掩模片(10)上，以將所述一種或多種試劑沉積在所述分析用載體上，並藉助毛細作用將它們保持在所述載體和所述掩模片的一個或多個斜面之間；——按掃過所述分析用載體表面的方式來移動所述掩模片(10)，以將一種或多種試劑分布在所述分析用載體上的所述載體的劃定區域(被稱為培養區域)中，被分布的一種或多種試劑的量足以使它們與存在於所述分析用載體上的生物樣本的成分相互反應。
33.一種用於將一種或多種試劑沉積並分布在包含生物樣本的分析用載體上的方法，該方法包括以下步驟——將所述一種或多種試劑加載到掩模片(10)上，以將所述一種或多種試劑沉積在所述分析用載體上，並藉助毛細作用將它們保持在所述載體和所述掩模片的一個或多個狹道的斜面之間；——將如權利要求1所述的掩模片(10)定位在所述分析用載體的附近，以將所述一種或多種試劑沉積在分析用載體上，並藉助毛細作用將它們保持在所述載體和所述掩模片的一個或多個狹道的斜面之間；——按掃過所述分析用載體表面的方式來移動所述掩模片(10)，以將一種或多種試劑分布在所述分析用載體上的所述載體的劃定區域(被稱為培養區域)中，被分布的一種或多種試劑的量足以使它們與存在於所述分析用載體上的生物樣本的成分相互反應。
34.如權利要求33所述的方法，其特徵在於，在遠離包含生物樣本成分的分析用載體的表面區域處為所述掩模片加載一種或多種試劑。
35.如權利要求34所述的方法，其特徵在於，在將所述掩模片定位於所述分析用載體附近的步驟之前，為所述掩模片加載一種或多種試劑；並且在由氣壓產生的衝擊被施加在所述掩模片上之後，或通過所述試劑和所述分析用載體之間的機械接觸之後，或通過將所述試劑噴射在所述載體上之後，或通過在狹道斜面的最低點處使所述掩模片與所述分析用載體短暫接觸之後，所述試劑被沉積在所述分析用載體上。
36.如權利要求35所述的方法，其特徵在於，為所述掩模片(10)加載一種或多種試劑、和/或掩模片的移位是以自動的方式完成的。
37.如權利要求32或33所述的方法，其特徵在於，所述分析用載體為一種電泳載體，其上的一種或多種生物樣本的成分已通過電泳遷移分離。
38.如權利要求37所述的方法，其特徵在於，所述一種或多種試劑是為了使被電泳分離的生物樣本的成分被免疫固定。
39.一種通過免疫固定來檢測一種或多種生物樣本的成分的方法，其包括以下步驟——在一種或多種生物樣本的一電泳載體上進行電泳，以將所述成分分離出來；——使用如權利要求32或33到44所述的方法之一，將一種或多種試劑沉積並分布於所述電泳載體上；——將由電泳分離的所述生物樣本與所述的一種或多種試劑一起培養，以使它們免疫固定。
40.一種試劑盒，其包括——至少一個如權利要求1所述的掩模片；——至少一個分析用載體。
41.如權利要求40所述的試劑盒，其還包括——試劑，其用於使由電泳分離的樣本的成分免疫固定；——固定劑，其用於固定由電泳分離的成分組的每種樣本。
42.如權利要求1所述的掩模片，其特徵在於，所述試劑以冷凍乾燥的形態被加載入所述掩模片中。
全文摘要
本發明涉及一種用於將一種或多種試劑分布於一種分析用載體上的掩模片，所述分析用載體具體為一種電泳載體，例如電泳凝膠體。被保持在一掩模片保持裝置12中的掩模片(10)(稱為可移動掩模片)被設計成在分析用載體上的預定區域上移動，且包括用於將試劑分布於分析用載體上的橫向孔36。本發明應用於例如對存在於生物樣本中的成分進行檢測和鑑定的領域。特別是，檢測可以通過免疫固定而完成。
文檔編號G01N33/558GK1445542SQ03122610
公開日2003年10月1日 申請日期2003年2月8日 優先權日2002年2月6日
發明者弗蘭克·貝隆 申請人:莎碧亞公司