法呢基蛋白質轉移酶抑制劑作為抗癌藥的製作方法

2023-10-09 19:13:09 1

專利名稱：法呢基蛋白質轉移酶抑制劑作為抗癌藥的製作方法
ras族的致癌基因和原致癌基因編碼了與控制真核細胞增殖有關的某些蛋白質。通過正常的轉錄和翻譯過程，這些基因提供能夠與效應分子相互作用以控制細胞分裂的稱作ras蛋白的蛋白質。
Ras蛋白最初產生於失活狀態的細胞中，而且必需經過各種翻譯後的修飾才激活。部分激活過程為ras蛋白在位於C端附近的半胱氨酸殘基處進行法呢基化。該法泥基化促進ras蛋白與質膜內表面的結合，就激活ras蛋白所引起的致癌基因轉化而言，膜結合是關鍵的。見Schafer等人，Science 245，379(1989)。
通過酶ras法呢基蛋白轉移酶(也稱作FPT酶)催化進行ras蛋白的法呢基化。通過這種酶反應，膽固醇生物合成中間體的法呢基部分，二磷酸法呢酯通過硫醚鍵被連接到位於ras蛋白C端附近的半胱氨酸殘基上。
在人的多種癌，包括結腸和胰腺癌中，都發現了激活的ras蛋白質。通過抑制FPT酶催化的失活ras蛋白法呢基化來幹擾ras蛋白的膜定位將抑制由激活的ras蛋白所引起的細胞的增殖，並因此而產生抗癌作用。
本發明提供具有rasFPT酶抑制作用的化合物，並且此化合物可用作抗癌劑。
本發明提供具有下列通式的化合物式I其中X為CH2，CCl2或CF2，R1和R2各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4而Z為未取代的或由選自C1—C4烷基，C1—C4烷氧基，滷素，CF3，OCF3，OH，CN，NO2和NH2中的1—3個取代基取代的苯基或萘基；或可藥用的陽離子，並且A為選自的基團， 和 其中R3，可為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。本發明也提供具有下列通式的化合物式II其中X為CH2，CCl2或CF2，
Y為CH2或CF2，R1，R2和R3各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4而Z為未取代的或由選自C1—C4烷基，C1—C4烷氧基，滷素，CF3，OCF3，OH，CN，NO2和NH2中的1—3個取代基取代的苯基或萘基；或可藥用的陽離子，並且A為選自 和 的基團，其中R4，可為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。本發明的另一個具體表現是治療遭受腫瘤疾病折磨的患者的或在遭受腫瘤疾病折磨患者中控制腫瘤生長的方法，它包括給予抗腫瘤治療有效量的式I或II化合物。
本文使用的術語「C1—C4烷基」指1—4個碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基。該術語的範圍包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基等。術語「C1—C4烷氧基」指由帶有1—4個碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基的氧基組成的烷氧基。該術語的範圍包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等。術語「具有1—9個雙鍵的可飽和或不飽和的C1—C19烷基」指1—19個碳原子的支鏈或直鏈烴基。該術語具體包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基，癸基，十一烷基，十二烷基，十三烷基，十四烷基，十五烷基，十六烷基，十七烷基，十八烷基，十九烷基，法呢基，香葉基，橙花基，3—甲基2—丁烯基等。術語「滷素」指氯，溴或碘原子。術語「pg」指保護基。術語「可藥用的陽離子」指那些在給予的劑量以獲得需要的作用下基本上無毒且不獨立擁有明顯的藥理活性的陽離子。該術語範圍內包括的鹽為由鹼金屬如鈉和鉀；鹼土金屬如鈣和鎂；第III主族的輕金屬包括鋁；和有機的伯，仲和叔胺，如三乙胺，二苄胺，N，N』—二苄基乙二胺，二異丙基乙胺等形成的鹽。優選鈉鹽。
按反應流程I中所述的方法可製備式I化合物。除另有指示外，所有的取代物定義同前。試劑和初始原料對於本領域普通技術人員來說是容易獲得的。
反應流程I
R5＝R1和R2，條件是R5不為氫或可藥用的陽離子Z＝H或可藥用的陽離子在反應流程I中，步驟a為用結構(1)定義的磷酸鹽處理結構(2)定義的醛以產生結構(3)定義的醇。例如，於近似-78℃下將一當量適當取代的膦酸酯(1)如溶於適當有機溶劑如四氫呋喃中的二氟甲基膦酸二甲酯滴加到攪拌的二異丙基氨化鋰的溶液中。將混合物攪拌2分鐘至2小時。將溶解在適宜有機溶劑如四氫呋喃中的適當取代的醛(2)如法呢醛[按Biller S.A and Forster，C的方法，經Swern反式氧化反式—法呢醇製備的，Tetrahedron1990，46(19)，6645]緩慢加入(1)中，同時保持反應溫度低於-72℃，約2小時後，將反應物傾入適宜的水性酸如0.1N鹽酸中，並用適宜的有機溶劑如乙醚萃取。用適宜的乾燥劑如無水硫酸鎂乾燥有機相，過濾並真空濃縮。用本領域公知的技術純化殘餘物。例如，通過閃式色譜法，用適宜的有機洗脫劑如40％醋酸乙酯/己烷來純化殘餘物以產生1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯。
在反應流程I中，步驟b為將醇(3)氧化成結構(5)所述的酮。例如，在約-60℃和適宜的有機溶劑如二氯甲烷中，將1當量三氟醋酸酐滴加到2當量二甲基亞碸中。完成滴加後，將反應物攪拌約2分鐘。將溶解在適宜的有機溶劑如二氯甲烷中的1當量適當取代的醇(3)如1.1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯滴加到反應物中。完成滴加後，將反應物攪拌大約45分鐘。然後反應冷卻到-78℃，滴加過量三乙胺。反應溫熱到室溫，攪拌約45分鐘。再將反應混合物傾入水中並用適宜的有機溶劑如乙醚萃取。用適宜的乾燥劑如無水硫酸鎂乾燥有機相，過濾並真空濃縮。用本領域公知的技術純化殘餘物。例如，通過閃式色譜法，用適宜的有機洗脫劑如20％醋酸乙酯/己烷來純化殘餘物以產生1，1—二氟—2—氧代、4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯。
在反應流程I中，步驟C為將結構(3)定義的醇水解成結構(4)定義的二元酸或其鹽。例如，在適宜的有機溶劑如二氯甲烷中，將適當取代的醇(3)如1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯與約2當量的可力丁合併，並冷卻到約0℃。將約4當量的適宜的三烷基甲矽烷基滷化物如碘化三甲基甲矽烷滴加到上述溶液中。攪拌約2小時後，用適宜的有機溶劑如乙醚稀釋反應物，並用適宜的水性酸如1N鹽酸中洗。再用適宜的乾燥劑如無水硫酸鈉乾燥有機相，過濾並真空濃縮以產生二元酸粗品。用適宜的鹼如0.1N氫氧化鈉處理，並冷凍乾燥以除去水。然後用本領域公知的技術純化該產品。例如，通過色譜法，用適宜的固定相如CHP20P(二乙烯基苯/苯乙烯共聚物)和適宜的洗脫劑如由水到甲醇的梯度液來產生1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽。
在反應流程I中，步驟C為將結構(5)定義的酮水解為結構(6)定義的二元酸或其鹽。例如，在適宜的有機溶劑如二氯甲烷中，將適當取代的酮(5)如1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯與約2當量的可力丁合併，並冷卻至約0℃。將約3—4當量的適宜的三烷基甲矽烷基滷化物如溴化三甲基矽烷滴加到上述溶液中。讓反應物升至室溫。攪拌約5小時後，用適宜的有機溶劑如甲苯，稀釋反應物。真空除去溶劑，將殘餘物溶解在適宜的有機溶劑如乙醚中，並用適宜的水性酸如1N鹽酸衝洗。用過量的適宜鹼如0.1N氫氧化鈉處理，真空濃縮除去有機溶劑並冷凍乾燥除去水。用本領域公知的技術純化產品。例如，通過色譜法，用適宜的固定相如CHP20P(二乙烯基苯/苯乙烯共聚物)與適宜的洗脫劑如由水到甲醇的梯度液來純化產品以產生1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽。
按反應流程II描述的方法來製備式II化合物。除另有表示外，所有取代物定義同前。試劑和初始原料對本領域普通技術人員而言是容易得到的。
反應流程II R5＝R1，R2和R3，條件是R5不為氫或可藥用陽離子。
Z＝H或可藥用的陽離子Y1＝CH2或CF2。
在反應流程II中，步驟a為用適宜的保護基如叔丁基二苯基矽醚或叔丁基二甲基矽醚，最優選的是叔丁基二苯基矽醚保護醇(3)來產生適當取代的結構(7)所述的受保護醇。
例如，按Hanessian，S.和Lavellee，P，J.can.chem.1975，53，2975所述的總的製備過程，用適宜的溶劑如二甲基甲醯胺溶解醇(3)，並用約1.1當量的氯化叔丁基二苯基矽烷和約2.2當量的咪唑處理。將反應物在室溫下攪拌4—24小時。用乙醚稀釋反應物，用水，半量水稀釋的飽和氯化鈉，飽和氯化鈉洗滌，用適宜的乾燥劑如無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮。用本領域技術人員公知的技術純化殘餘物。例如，通過閃式色譜法，用適宜的洗脫劑如醋酸乙酯/己烷來純化殘餘物來產生結構(7)所述的受保護的醇。
在反應流程II中，步驟b為將受保護的醇(7)進行選擇性地水解來產生結構(8)所述的適當取代的一元酸。
例如按Biller，S.A和Forster，C.Tetrahedron1990，46(19)6645所述的總的製備方法，用適宜的溶劑混合物如包含略過量的氫氧化鉀的1∶1甲醇/水溶解受保護的醇(7)。將反應物在65—75℃加熱1—5小時。蒸去甲醇並加入二氯甲烷。用硫酸氫鉀酸化攪拌下的化合物。分層並用二氯甲烷萃取水層。合併有機萃取液，用50％鹽水洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮來產生一元酸(8)。
在反應流程II中，步驟C為用草醯氯處理一元酸(8)來形成結構(9)所述適當取代的醯基氯。
例如，在氮氣環境中，用含催化量的二甲基甲醯胺的適宜的有機溶劑如苯溶解一元酸(8)。在室溫下，滴加過量的草醯氯。2—4小時後，真空濃縮溶液。將殘餘物兩次溶解在苯中並真空濃縮來產生醯基氯(9)。
在反應流程II中，步驟d為用適宜的陰離子處理醯基氯來產生結構(10)所述適當取代的膦酸酯。
例如，將溶於適宜有機溶劑如四氫呋喃中的約2.2當量適當取代的膦酸二烷基酯如甲基膦酸二甲脂的溶液冷卻至約-78℃並滴加約2.1當量的丁基鋰(1.6m己烷液)來進行處理。攪拌約15—30分鐘後，將溶解在四氫呋喃中的1當量的醯基氯(9)滴加到上述形成的陰離子中。在-78℃下攪拌約1小時後，讓反應物升至0℃並再攪拌1小時。用適宜的有機溶劑如乙醚稀釋反應物，並用適宜的含水酸如10％鹽酸中止反應。分層並用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌有機相。用無水硫酸鎂乾燥混合物，過濾並真空濃縮。用本領域技術人員公知的技術純化殘餘物。例如，通過閃式色譜法，在矽膠上，用適宜的洗脫劑如甲醇/二氯甲烷來純化殘餘物以產生純化的膦酸酯(10)。
在反應流程II，步驟e為在溫和條件下，將膦酸酯去掉保護來產生結構(11)所述的醇。
例如，將膦酸酯(10)的溶液溶解在適宜的有機溶劑如四氫呋喃中，並用過量適宜的氟化物離子源如氟化四—正丁基按在室溫下處理。約1—24小時後，用適宜的有機溶劑如乙醚稀釋反應物。用水，鹽水洗滌反應物，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。按本領域技術人員公知的技術純化殘餘物。例如，通過閃式色譜法，在矽膠上，用適宜的洗脫劑如甲醇/二氯甲烷來純化殘餘物以產生純化的醇(11)。
在反應流程II中，步驟f為按上文反應流程I步驟C中所述方法，可將醇(11)水解來產生結構(12)所述的化合物。
在反應流程II中，步驟g為按上文反應流程I步驟b中所述方法，可將醇(11)氧化來產生結構(13)所述的酮。
在反應流程II中，步驟f為按上文反應流程I步驟C所述方法，可將酮(13)水解來產生R5＝Z的化合物(14)。
下面的實施例顯現了反應流程I和II中所述的典型的合成法。這些實施例僅是說明性的，在無論如何不限定本發明的範圍。在下面實施例中使用的術語「eq」意指當量，「g」意指克，「mg」意指毫克，「mmol」意指毫克分子，「mL」意指毫升，「℃」意指攝氏度，「TLC」意指薄層色譜法，「Rf」意指保留因子而「LOD」意指乾燥失重。
實施例1 製備1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯反應流程I，步驟a；合併二異丙基胺(22.24mL，0.159mol)與四氫呋喃(250mL)並冷卻至-20℃。滴加正丁基鋰(63.3mL，2.5N於己烷中，0.159mol)於該溶液中。攪拌30分鐘並冷卻至-78℃。滴加二氟甲基膦酸二甲基酯(25.8g，0.159mol)的四氫呋喃溶液(20mL)，同時保持溫度低於-75℃。完成滴加後，攪拌2分鐘並緩慢加入反式溶液，即上述步驟製備的反式法呢醛[按Biller，s.A；Forstar，C.Tetrahedron1990，46(19)，6645製備](14g，0.0636mol)的四氫呋喃液(10mL)，同時保持溫度低於-72℃。完成滴加後，在-78℃下再攪拌2小時並將反應物傾入0.1N鹽酸(500mL)中。用乙醚(2×1L)萃取反應物。合併有機相，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過閃式色譜法[40％醋酸乙酯/己烷，Rf(50％醋酸乙酯/己烷)＝0.44]純化殘餘物以產生油狀的標題化合物(9.3g，39％)。
分析計算值C18H31F2O4PC，56.83；H，8.21，實測值C，56.61；H，8.48實施例2 製備1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯反應流程I，步驟b；合併三氟醋酸酐(1.30mL，0.0096mol)與二氯甲烷(20mL)並冷卻至-60℃。滴加二甲基亞碸(1.30mL，0.0183mol)的二氯甲烷(2mL)溶液，同時保持溫度低於-55℃。完成滴加後，攪拌2分鐘，加入實施例1製備的1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯(1.60g，0.0042mol)的二氯甲烷(4mL)溶液，並攪拌45分鐘。將反應物冷卻到-78℃並滴加三乙胺(3.0mL，0.021mol)。讓反應物升至室溫並攪拌45分鐘。將反應物傾入水(100mL)中。用乙醚(400mL)萃取該混合物。用無水硫酸鎂乾燥有機相，過濾真空濃縮。通過閃式色譜法(20％醋酸乙酯/己烷，Rf＝0.18)純化該殘餘物以產生油狀標題化合物(1.1g，69％)。分析計算值C18H29F2O4PC，57.13；H，7.72。實測值C，57.10；H，7.97。
實施例3 製備1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽反應流程I，步驟C；合併實施例1製備的1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基-3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯(0.378g，0.001mol)與可力丁(0.44mL，0.0033mol)和二氯甲烷(5mL)。冷卻至0℃。滴加碘化三甲基矽烷(0.56mL，0.004mol)的二氯甲烷(0.5mL)溶液並攪拌2小時。加入乙醚(200mL)並用1N鹽酸(3×100mL)洗滌。用無水硫酸鈉乾燥有機相，過濾並真空濃縮以產生標題化合物膦酸。用0.1N氫氧化鈉(25mL)處理該殘餘物並冷凍乾燥產生灰白色的粉末。通過色譜法，在CHP20P上(二乙烯基苯/苯乙烯共聚物)，用從水到甲醇形成的梯度洗脫液來進行純化。冷凍乾燥含產物的餾分來產生白色粉狀標題標化合物(0.17g，43％)，mp287—289℃。分析計算值，C16H25F2O4PNa2C，48.48；H，6.36。實測值C，48.20；H，6.32實施例4 製備1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽反應流程I，步驟d；合併實施例2製備的1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯(1.2g，0.0032mol)與可力丁(0.85mL，0.0064mol)和二氯甲烷(5mL)。冷卻至0℃。加入溴化三甲基矽烷(0.92mL，0.007mol)，升至室溫並攪拌5小時。加入甲苯(20mL)並真空濃縮。加入乙醚(200mL)並用1N鹽酸(3×50mL)洗滌。用0.1N氫氧化鈉(64mL)處理有機相，真空濃縮除去有機溶劑並冷凍乾燥除去水。按實施例3的色譜法純化並冷凍乾燥含成分的產物來產生白色粉狀標題化合物(0.32g，25％)，mp247.5—249℃(分解)。分析計算值C16H23F2O4PNa2*0.8H2OC，47.02；H，6.09，LOD＝3.7，實測值C，47.05；H，6.07，LOD＝3.7。
實施例5 製備2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯反應流程I，步驟a；合併二異丙基胺(2.80mL，0.02mol)與四氫呋喃(40mL)並冷卻至-20℃。滴加正丁基鋰(8.0mL，2.5N於己烷中，0.02mol)到該溶液中，攪拌20分鐘並冷卻至-70℃。滴加甲基膦酸二甲基酯(2.48g，0.020mol)的四氫呋喃(20mL)溶液，同時保持溫度低於-70℃。完成滴加後，攪拌1小時並緩慢加入反式溶液，即反式氫化法呢醛[按實施例1製備](2.2g，0.01mol)的四氫呋喃(4mL)溶液，同時保持溫度低於-72℃。完成滴加後，在-70℃再攪拌1小時，並將反應物傾入飽和氯化銨(100mL)中。用乙醚(400mL)萃取反應物。用無水硫酸鎂乾燥有機相，過濾並真空濃縮。通過閃式色譜法(50％醋酸乙酯/己烷，Rf＝0.083)純化來產生油狀標題化合物(1.97g，57％)；MS(EI)M+＝344。分析計算值C18H33O4PC，62.77；H，9.66實測值C，62.75；H，9.74實施例6 製備2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯反應流程I，步驟b；在氮氣環境下合併實施例5製備的2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯(1.03g，0.003mol)與高錳酸鋇(2.30g，0.009mol)和二氯甲烷(18mL)。攪拌6天。濾去固體物並真空濃縮濾液。通過閃式色譜法(75％醋酸乙酯/己烷，Rf＝0.51)純化該殘餘物來產生油狀標題化合物(0.3g，30％)；MS(CI/CH4)M+H＝343分析計算值C18H31O4PC，63.13；H，9.13。實測值C，61.96；H，9.22。
實施例7 製備2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基磷酸二鈉鹽反應流程I，步驟C；合併2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯(0.95g，0.0027mol)與可力丁(0.73mL，0.0055mol)和二氯甲烷(7.5mL)。冷卻至0℃加入溴化三甲基矽烷(1.44mL，0.011mol)並升至室溫。攪拌5小時並加入甲苯(20mL)。真空濃縮並將殘餘物溶於乙醚(200mL)中，用1N鹽酸(3×50mL)洗滌。有機相中加入0.1N氫氧化鈉(54mL)，真空除去有機溶劑並冷凍乾燥除去水。按實施例3的色譜法進行純化來產生白色凍幹的標題化合物(0.35g，35％)，mp＞350℃。分析計算值C16H27O4PNa2*0.6H2OC，51.78；H，7.66，LOD＝2.9。實測值C，51.48；H，7.66，LOD2.9。
實施例8 製備2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽反應流程I，步驟C；合併2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯(0.692g，0.002mol)與可力丁(0.53mL，0.004mol)和二氯甲烷(5mL)。冷卻至0℃。加入溴化三甲基矽烷(1.05mL，0.008mol)並升至室溫。攪拌4小時並真空濃縮。將殘餘物溶於乙醚(100mL)中，並用1N鹽酸(3×50mL)洗滌。有機相中加入0.1N氫氧化鈉(40mL)，真空除去有機溶劑並冷凍乾燥除去水來產生白色粉末。按實施例3所述的色譜法進行純化來產生白色粉狀的標題化合物(0.34g，44％)，mp＞360℃。分析計算值C16H25O4PNa2.1.15H2OC，50.69；H，7.26，LOD5.5實測值C，50.54；H，7.53，LOD5.5實施例9 製備[(1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)甲基膦酸，二甲基酯]次膦酸甲酯反應流程II，步驟a；將實施例1製備的1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲基酯(1.0eq)溶於四氫呋喃中。在室溫攪拌下用氯化叔丁基二苯基矽烷(1.1eq)和咪唑(2.2eq)處理。8小時後用乙醚稀釋反應物，並用水，鹽水洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過閃式色譜法，在矽膠上(醋酸乙酯/己烷)進行純化來產生受保護的醇。
反應流程II，步驟b；將上述形成的受保護的醇(1.0eq)溶解在含氫氧化鉀(1.1eq)的甲醇/水1∶1液中，並將反應物在//65℃下加熱1小時。蒸去甲醇並加入1當量的二氯甲烷。在攪拌下用硫酸氫鉀酸化混合物。分層並用二氯甲烷萃取水層。合併有機萃取物，用50％鹽水洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮來產生一元酸。
反應流程II，步驟C；在氮氣中，將上述形成的一元酸(1.0eq)溶於無水苯中並加入催化量的二甲基甲醯胺。在室溫下，滴加草醯氯(3∶0eq)處理溶液並攪拌4小時。真空濃縮反應物，加入1當量上述苯，真空濃縮並再次重複該過程來產生醯氯。
反應流程II，步驟d；將甲基膦酸二甲酯(2.2eq)溶於無水四氫呋喃中並冷卻至-78℃。溶液中滴加丁基鋰(2.1eq於1.6M己烷溶液中)。完成滴加後，攪拌反應物30分鐘。將上述形成的醯氯(1.0eq)溶於無水四氫呋喃中並滴加到陰離子中。完成滴加後，在-78℃下攪拌反應物1小時，升到0℃再攪拌1小時。用乙醚稀釋反應物並用10％鹽酸中止反應。分層並用水、飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌有機相，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過閃式色譜法，在矽膠上(甲醇/二氯甲烷)純化殘餘物來產生甲基次膦酸二甲基膦酸酯(methyl phosphinate dimethyl phosphonate)。
反應流程II，步驟e；將上述形成的甲基次膦酸二甲基膦酸酯(1.0eq)溶於四氫呋喃中並加入氟化四丁基銨(1M四氫呋喃溶液中含2.0eq)。在室溫下，攪拌反應物20小時並用乙醚稀釋。用水、鹽水洗滌有機相，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。通過閃式色譜法，在矽膠上(甲醇/二氯甲烷)純化殘留物來產生標題化合物。
實施例10 製備[(1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基甲基膦酸二鈉鹽]次膦酸鈉鹽反應流程II，步驟f；合併實施例9製備的甲基次膦酸二甲基膦酸酯(1eq)與可力丁(3.3eq)和二氯甲烷。冷卻至0℃並滴加碘化三甲基矽烷(4eq)的二氯甲烷溶液。將反應物攪拌2小時。加乙醚並用1N鹽酸洗滌。用無水硫酸鈉乾燥有機相，過濾並真空濃縮來產生標題化合物三元酸。用過量的0.1N氫氧化鈉處理殘餘物並冷凍乾燥。通過色譜法，在CHP20P上(二乙烯苯/苯乙烯共聚物)，用水到甲醇的梯度液洗脫來進行純化。冷凍乾燥含產物的餾分來產生標題化合物。
實施例11 製備[(1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，711—十三碳三烯基)甲基膦的二甲基酯]次膦酸甲酯。
反應流程II，步驟g；合併三氟醋酸酐(1.0eq)與二氯甲烷並冷卻到-60℃。滴加二甲基亞碸(2.0eq)的二氯甲烷溶液，同時保持溫度低於-55℃。完成滴加後，攪拌2分鐘。加入實施例9製備的甲基次磷酸二甲基膦酸酯(1eq)的二氯甲烷溶液並攪拌45分鐘。將反應物冷卻至-78℃並滴加三乙胺(3eq)。讓反應物升至室溫並攪拌45分鐘。將反應物傾入水中。用乙醚萃取該混合物。用無水硫酸鎂乾燥有機相，過濾並真空濃縮。通過閃式色譜法(醋酸乙酯/己烷)純化殘留物來產生標題化合物。
實施例12 製備[(1，1—二氟—2—氧代—4，8，1 2—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)甲基膦酸二鈉鹽]次膦酸鈉鹽反應流程II，步驟f；合併實施例11製備的甲基次膦酸二甲基膦酸酯(1.0eq)與可力丁(2.0eq)和二氯甲烷。冷卻到0℃並加入溴化三甲基矽烷(2.1eq)。溫熱至室溫並攪拌5小時。加入甲苯並真空濃縮。加入乙醚並用1N鹽酸洗滌。用過量的氫氧化鈉處理有機相，真空濃縮除去有機溶劑並冷凍乾燥除去水。按實施例10的色譜法進行純化，並冷凍乾燥含產物的流分得標題化合物。
實施例13 製備[(1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯。
反應流程II，步驟d；在-78℃溫度下，將二氟甲基膦酸二甲基酯的無水四氫呋喃液加到二異丙基醯胺鋰(1.05eq)中。加完後，將反應物攪拌30分鐘。用無水四氫呋喃溶解醯氯(1.0eq)[實施例9經步驟C形成的]並滴加到陰離子中。加完後，在-78℃下攪拌反應物1小時，溫熱至0℃並再攪拌1小時。用乙醚稀釋反應物並用10％鹽酸中止反應。分層並用水、飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌有機相，用無水硫酸鎂乾燥，過濾並真空濃縮。經閃式色譜法在矽膠(甲醇/二氯甲烷)上純化殘留物以產生二氟甲基次膦酸二甲基膦酸酯。
反應流程II，步驟e，將以上形成的二氟甲基次膦酸二甲基膦酸酯(1.0eq)溶於四氫呋喃中並加入氟化四丁銨(2.0eq)的1M的四氫呋喃溶液)。室溫下將反應物攪拌20小時並用乙醚稀釋。用水、鹽水洗滌有機相，無水硫酸鎂乾燥、過濾並真空濃縮。經閃式色譜法在矽膠上(甲醇/二氯甲烷)純化殘留物以產生標題化合物。
實施例14 製備[(1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二鈉鹽]次膦酸，鈉鹽反應流程II，步驟f；合併二氟甲基次膦酸二甲基膦酸酯(1eq)(由實施例17製備的)與可力丁(4.0eq)和二氯甲烷。冷卻至0℃並滴加溴化三甲基矽烷溶液(5eq)。將反應物攪拌5小時。室溫下加入乙醚並用1N鹽酸洗滌。用無水硫酸鈉乾燥有機相，過濾並真空濃縮來產生三酸標題化合物。用過量0.1N氫氧化鈉處理並冷凍乾燥。經色譜法，在CHP20P(二乙烯苯/苯乙烯共聚物)用從水到甲醇梯度液洗脫來進行純化。冷凍乾燥含產物的流分來產生標題化合物。
實施例15 製備[(1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯反應流程II，步驟g；合併三氟醋酸酐(1.0eq)和二氯甲烷並冷卻至-60℃。滴加二甲基亞碸(2.0eq)的二氯甲烷溶液，同時保持溫度低於-55℃。加完後，攪拌2分鐘。加入實施例17製備的二氟甲基次膦酸二甲基膦酸酯(1eq)的二氯甲烷液並攪拌45分鐘。將反應物冷卻到-78℃並滴加三乙胺(3eq)。使反應物溫熱到室溫並攪拌45分鐘。將反應物傾入水中。用乙醚提取該混合物。用無水硫酸鎂乾燥有機相，過濾並真空濃縮。用閃式色譜法(乙酸乙酯/己烷)純化殘留物來產生標題化合物。
實施例16 製備[(1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二鈉鹽]次膦酸鈉鹽。
反應流程II，步驟f；合併二氟甲基次膦酸二甲基膦酸酯(1.0eq)(實施例19製備的)與可力丁(2.0eq)和二氯甲烷。冷卻到0℃並加入溴化三甲基矽烷(2.1eq)。溫熱至室溫並攪拌5小時。加入甲苯並真空濃縮。加入乙醚並用1N鹽酸洗滌。用過量的1N氫氧化鈉處理有機相，真空濃縮除去有機溶劑並冷凍乾燥除去水。按實施例10的色譜法進行純化並冷凍乾燥含產物的流分來產生標題化合物。
再一方面，本發明提供一種治療遭受腫瘤疾病患者的方法，它包括給予抗腫瘤治療有效量的式I或II化合物。本文所使用的術語「腫瘤疾病」是指不正常的狀態或疾病，其特徵是快速增殖生長細胞或腫瘤。用式I或II的化合物治療會特別有用的腫瘤疾病包括白血病如，但不局限於，急性成淋巴細胞的、慢性淋巴細胞的、急性myloboastic和慢性mylocytic；癌，如，但不局限於子宮頸、食管、胃、小腸、胰腺、結腸和肺部的那些癌；肉瘤，如，但不局限於Oesteroma骨肉瘤、lepoma、脂肉瘤、血管瘤和血管肉瘤；黑瘤，包括不含黑色素的和含黑色素的；和混合型的腫瘤如，但不局限於癌肉瘤、淋巴組織型、濾泡網狀組織(folicularretic-ulum)、細胞肉瘤和何杰金病。
在本文中，術語「患者」是指熱血動物，如人，它遭受特定腫瘤疾病。
抗腫瘤治療有效量的式I或II化合物是指一次或多次給予患者而有效地控制腫瘤生長或與未進行此治療相比延長了患者生存能力的量。在本文中，腫瘤的「控制生長」是指減慢、幹擾、阻止或停止其生長和轉移且不是必須表明腫瘤全部消除。
在本文中，術語「治療有效量」是指式I或II化合物抗腫瘤治療有效的量。通過本領域技術人員使用已知的技術進行輔助診斷並通過觀察在類似情況下所獲得的結果可容易地確定治療有效量。在治療有效量或劑量的確定中，輔助診斷師要考慮多種因素，包括但不局限於哺乳動物的種類；其體型大小、年齡及總的健康情況；所包含的具體疾病；疾病的程度或複雜性或嚴重性；患者個體的反應；所給予的特定化合物；給藥的方式；所給製劑的生物利用度特點；所選擇的劑量規程；共同使用的藥物；和其它相關情況。
式I或II化合物的治療有效量期望在每天每公斤體重約0.1毫克(mg/kg/天)到約100mg/kg/天的範圍內。優選劑量期望在約0.5到25mg/kg/天的範圍內。
為了對遭受以上所述疾病的患者進行治療，可以任何形式或方式給予式I或II的化合物，所述形式或方式使化合物產生有效量的生物利用度，包括口服和非腸道途徑。例如，可通過口服、皮下、肌內、靜脈、透皮、鼻內、直腸等給予式I或II的化合物。通常口服給藥是優選的。依據所選擇化合物的具體特點、所治療的疾病、疾病的程度，及其它相關情況，製備劑型領域的技術人員可容易地選擇合適的給藥形式和方式。
可單獨或以與可藥用載體或賦形劑組合的藥物組合物的形式給予化合物，其配比和性質取決於所選擇化合物的穩定性和化學特性、所選擇的給藥途徑及常規的藥劑慣例。為了穩定性、便於結晶、增加溶解性等目的，可將本發明的化合物(其本身是有效的)以其與可藥用酸加合成鹽的形式來配製和給藥。
另一方面，本發明提供含有與一種或多種惰性載體混合或結合形式的式I或II的化合物的組合物。這些組合物作為如測定標準、整裝運輸的方便方式或作為藥物組合物都是有用的。式I或II化合物可測定的量是指通過公知的且適於本領域技術人員使用的常規方法和技術可容易測量的量。式I或II的化合物的可測定量通常在組合物重量的約0.001％到75％的範圍內。惰性載體可以是不降解或不與式I或II化合物產生共軛反應的任何材料。合適的惰性載體的例子為水；水性緩衝劑，如常用於高效液相色譜(HPLC)分析的那些；有機溶劑，如乙腈、乙酸乙酯、己烷等；和藥用可接受的載體或賦形劑。
尤其是，本發明提供含有與一種或多種可藥用載體或賦形劑混合或結合形式的治療有效量的式I或II化合物。
以藥學領域公知的方式製備藥物組合物。載體或賦形劑可以是能用作活性組分的輔劑或介質的固體、半固體或液體材料。適當的載體或賦形劑是本技術內公知的。該藥物組合物可適於口服或非腸道使用並可以片劑、膠囊、栓劑、溶液、混懸劑等形式給予患者。
本發明的化合物例如可與惰性稀釋劑或與食用載體一起口服給藥。他們可包含在膠囊中或壓成片劑。為了口服治療給藥，化合物可與賦形劑混合併可使用片劑、錠劑、膠囊、酏劑、混懸液、糖漿、糯米紙囊劑、咀嚼膠劑等的形式。這些製劑應當至少含有4％的本發明化合物(活性組分)但可根據具體的劑型來變化，通常在製劑重量的4％到約70％之間。組合物中本發明化合物量會獲得合適的劑量。本發明優選的組合物和製劑被製備成含有5.0—300毫克本發明化合物的口服劑量單位形式。
片劑、丸劑、膠囊、錠劑等也可含有一種或多種下列輔劑粘合劑如微晶纖維素、西黃耆膠或明膠；賦形劑如澱粉或乳糖，崩解劑如褐藻酸、Primogel，玉米澱粉等；潤滑劑如硬脂酸鎂或Sterotex；glidants如膠體二氧化矽；且可加入甜味劑如蔗糖或糖精或香味劑如薄荷、水楊酸甲酯或橙子香味劑。當劑量單位形式為膠囊時，除含有上述類型的材料外，它還可含有液體載體如聚乙二烯或脂肪油。其它劑量單位形式可含有其它改善劑量單位物理形式的各種材料，如包衣材料。因此，片劑或丸劑可用糖、紫膠或其它腸溶性包衣材料。糖漿除含有本發明化合物外還可含有蔗糖甜味劑和某些防腐劑、染料和色素和香味劑。製備這些組合物中所使用的材料應當是藥用純的且在所使用的量下是無毒的。
為了非腸道治療給藥，本發明的化合物可混合成溶液或懸浮液。這些製劑應當至少含有0.1％的本發明的化合物，但可在製劑重量的0.1％和約50％之間變化。這些組合物中存在的本發明化合物的量將會獲得合適的劑量。將本發明優選的組合物和製劑製備成含有5.0到100毫克本發明化合物的非腸道劑量單位。
溶液或混懸液也可包括一種或多種下列輔劑滅菌稀釋劑如注射用水、鹽水、混合油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑如苯甲醇或羥苯甲酸甲酯；抗氧劑如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑如乙二胺四乙酸；緩衝劑如乙酸鹽、構櫞酸鹽或磷酸鹽和張力調節劑如氯化鈉或葡萄糖。非腸道製劑可包含在安瓿、玻璃或塑料製造的可隨意使用的注射器或多劑量小瓶中。
作為擁有特定用途的任何基團的相關結構化合物，某些基團和構型在其最終使用中是優選的式I或II化合物。
關於取代基X，X為CF2的式I或II化合物通常是優選的。關於取代基R1和R2，R1和R2為Na的式I或II化合物通常是優選的。關於取代基A，A為1—氧代一法尼基的式I或II化合物通常是優選的。
以下列出式I或II的同族化合物，他們是本發明特別優選的具體化合物1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯；1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯；1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽；1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽；2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯；2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯；2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽；2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽；[(1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)甲基膦酸，二甲酯]次膦酸甲酯及相應酸的鈉鹽；[(1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯和相應酸的鈉鹽；[(1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯和相應酸的鈉鹽；[(1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯和相應酸的鈉鹽；[(2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯和相應酸的鈉鹽；[(2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯和相應酸的鈉鹽；[(2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)二氟甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯和相應酸的鈉鹽；[(2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基)甲基膦酸二甲酯]次膦酸甲酯和相應酸的鈉鹽。
權利要求
1.一種下式化合物 其中X為CCl2或CF2，R1和R2各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或具有1—3個選自C1-C4烷基、C1—C4烷氧基、滷素、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥用陽離子，和A為選自下面的基團 和 其中R3為含1—9雙鍵的可飽和或不飽和的C1—C19烷基。
2.一種下式化合物 其中X為CH2，CCl2或CF2，Y為CH2或CF2，R1、R2和R3各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或1—3個選自C1—C4烷基、C1—C4烷氧基、滷素、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥的陽離子，和A為選自下面的基團 和 其中R4為含1—9雙鍵的可飽和或不飽和的C1—C19烷基。
3.權利要求2的化合物，其中X為CF2。
4.權利要求3的化合物，其中R1和R2為可藥用的陽離子。
5.權利要求4的化合物，其中A為基團
6.權利要求4的化合物，其中A為基團
7.權利要求1的化合物，其中X為CF2。
8.權利要求7的化合物，其中R1和R2為可藥用的陽離子。
9.權利要求8的化合物，其中A為基團
10.權利要求9的化合物，其中A的基團
11.權利要求1的化合物，它是1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯。
12.權利要求1的化合物，它是1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二甲酯。
13.權利要求1的化合物，它是1，1—二氟—2—羥基—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽。
14.權利要求1的化合物，它是1，1—二氟—2—氧代—4，8，12—三甲基—3，7，11—十三碳三烯基膦酸二鈉鹽。
15.一種治療癌症病人的方法，其包括給藥病人抗癌治療有效量的權利要求1或2的化合物。
16.一種治療病毒感染病人的方法，其包括給藥病人抗病毒治療有效量的權利要求1或2的化合物。
17.一種控制癌症病人體內腫瘤生長的方法，其包括給藥病人抗癌治療有效量的權利要求1或2的化合物。
18.一種控制病毒感染病人體內感染病毒的方法，其包括給藥病人抗病毒治療有效量的權利要求1或2的化合物。
19.一種藥物組合物，它含有治療有效量的與一種或多種可藥用載體或賦形劑混合或結合形式的下式化合物 其中X為CCl2或CF2，R1和R2各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或1到3個選自C1—C4烷基、C1—C4烷氧基、滷素、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥用陽離子，和A為選自下面的基團 和 其中R3為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。
20.一種藥物組合物，它含有治療有效量的與一種或多種可藥用載體或賦形劑混合或結合形式的下式化合物 其中X是CH2，CCl2或CF2，Y是CH2或CF2，R1、R2和R3各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或1—3個選自C1—C4烷基、C1—C4烷氧、滷素、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥用的陽離子，和A為選自下面的基團 和 其中R4為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。
21.下式化合物製備治療遭受腫瘤疾病患者的藥物的用途 其中X為CCl2或CF2，R1和R2各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或1—3個選自C1—C4烷基、C1—C4烷氧基、滷原子、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥用陽離子，和A為選自下面的基團 和 其中R3為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。
22.下式化合物製備治療遭受腫瘤疾病患者的藥物的用途 其中X為，CH2，CCl2或CF2，Y為CH2或CF2，R1、R2和R3各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或1—3個選自C1—C4烷基、C1—C4烷氧基、滷原子、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥用陽離子，且A為選自下面的基團 和 其中R4為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。
23.下列化合物製備遭受病毒感染患者的藥物的用途 其中X為CCl2或CF2，R1和R2各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或1—3個選自C1—C4烷基、C1—C4烷氧基、滷原子、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥用的陽離子，和A為選自下面的基團 其中R3為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。
24.下列化合物製備治療遭受病毒感染患者的藥物的用途 其中X為CH2，CCl2或CF2，Y為CH2或CF2，R1、R2和R3各自獨立地為H；C1—C4烷基；(CH2)n-Z，其中n為整數0，1，2，3或4且Z為未取代或1—3個選自C1—C4烷基、C1—C4烷氧基、滷原子、CF3、OCF3、OH、CN、NO2和NH2的取代基取代的苯基或萘基；或可藥用的陽離子，和A為選自下面的基團 和 其中R4為含1—9個雙鍵的飽和或不飽和C1—C19烷基。
全文摘要
本發明涉及某些法呢基蛋白質轉移酶的抑制劑，它作為抗腫瘤劑是有用的。
文檔編號C07F9/38GK1118166SQ94191274
公開日1996年3月6日 申請日期1994年1月24日 優先權日1993年2月23日
發明者D·M·斯特莫裡克 申請人:默裡爾多藥物公司