一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基的製作方法
2024-03-27 21:08:05
一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基,由以下組分組成:硝酸銨,硝酸鉀,氯化鈣,硫酸鎂,磷酸二氫鉀,碘化鉀,硼酸,硫酸錳,硫酸鋅,鉬酸鈉,硫酸銅,氯化鈷,乙二胺四乙酸鐵鈉,肌醇,煙酸,鹽酸吡哆醇,鹽酸硫胺素,蔗糖,瓊脂,水。使用本發明的培養基能促使馬鈴薯組培苗的生長速度,從接種之日起到株高長至8釐米所需要的時間僅為20天,大大提高了組培苗剪切、轉接的工作效率。
【專利說明】一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種培養基,具體涉及一種能促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基。【背景技術】
[0002]目前,國內外進行馬鈴薯組培苗快速生長所使用是MS培養基,但是一般情況下在MS培養基上生長的組培苗需30天左右株高才能夠長至8釐米,且主莖較細弱,分枝細長且較多,交織在一起,不利於剪切轉接操作,導致轉接時工作效率低,同時由於組培苗長勢較弱,假植或移栽時緩苗時間較長,成活率相對也較低。由於傳統的MS培養基存在以上缺點,國內外的研究人員也對其配方進行了各種改良,但是效果並不明顯。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在於克服現有技術的不足,提供一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的 培養基。
[0004]為實現上述目的,本發明通過以下技術方案實現:
[0005]一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基,以IL培養基計,由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1567.5 ~1732.5mg,硝酸鉀(KNO3) 1805 ~1995mg,氯化鈣(CaCl2.2Η20) 418 ~462mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 399 ~441mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 162 ~178mg,碘化鉀(KI)0.79 ~0.87mg,硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.1 ~17.7mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.Η20) 72 ~78mg,肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,煙酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,瓊脂 6650 ~7350mg,餘量為水。
[0006]優選的是:以IL培養基計,由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1650mg,硝酸鉀(KNO3) 1900mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)440mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20)420mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170mg,碘化鉀(KI)0.83mg,硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.9mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 75mg,肌醇(C6H12O6) IOOmg,煙酸(C6H5NO2) 0.5mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.5mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg,蔗糖(C12H22O11) 30000mg,瓊脂 7000mg,餘量為水。
[0007]—種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基的製備方法,包含以下步驟:
[0008]a、準確稱取除瓊脂外的培養基其餘組分,加蒸餾水充分溶解後,定容;
[0009]b、準確稱取瓊脂並加入到定容好的溶液中,加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解;
[0010]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養基的pH值調節至5.5-5.7 ;
[0011]d、將配製好的培養基分裝至組織瓶中,於121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘,製得本發明的培養基。
[0012]進一步地:步驟a後不加入瓊脂,製得本發明的不含瓊脂的培養基。
[0013]一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基的使用方法,在無菌操作臺上,每50ml含有瓊脂的培養基中扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段,在環境溫度20-22°C、24小時光照的組培室內培養10天後再加入IOml不含瓊脂的培養基,繼續培養10天。
[0014]與現有技術相比,本發明的培養基,能快繁馬鈴薯組培苗,在24小時光照、室內溫度20-22°C的條件下,組培苗生長迅速,從接種之日起到株高長至8釐米所需要的時間為20天,植株生長健壯,葉色濃綠,莖杆粗壯,分枝少,大大提高了組培苗剪切、轉接的工作效率,同時也大幅提高了其假植、移栽的成活率。
【具體實施方式】
[0015]下面結合實施例對本發明的【具體實施方式】做進一步說明。
[0016]本發明提供一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基,以IL培養基計,由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1567.5~1732.5mg,硝酸鉀(KNO3) 1805~1995mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)418 ~462mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 399 ~441mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 162 ~178mg,碘化鉀(KI)0.79 ~0.87mg,硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg,硫酸錳(MnSO4.4Η20) 16.1 ~17.7mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.Η20) 72 ~78mg,肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,煙酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,瓊脂 6650 ~7350mg,餘量為水。
[0017]其製備方法為:
[0018]a、準確稱取除瓊脂外的培養基其餘組分,加蒸餾水充分溶解後,定容;
[0019]b、準確稱取瓊脂並加入到定容好的溶液中,加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解;
[0020]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養基的pH值調節至
5.5-5.7 ;
[0021]d、將配製好的培養基分裝至組織瓶中,於121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘,製得本發明的培養基。
[0022]進一步地:步驟a後不加入瓊脂,製得本發明的不含瓊脂的培養基。
[0023]實施例1:
[0024]一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基,以IL培養基計,由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1650mg,硝酸鉀(KNO3) 1900mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)440mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20)420mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170mg,碘化鉀(KI)0.83mg,硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.9mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 75mg,肌醇(C6H12O6) IOOmg,煙酸(C6H5NO2) 0.5mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3-HCl)0.5mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg,蔗糖(C12H22O11) 30000mg,瓊脂7000mg,餘量為水。
[0025]上述培養基的製備方法,包含以下步驟:[0026]a、準確稱取除瓊脂外的培養基其餘組分,加蒸餾水充分溶解後,定容;
[0027]b、準確稱取瓊脂並加入到定容好的溶液中,加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解;
[0028]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養基的pH值調節至5.5-5.7 ;
[0029]d、將配製好的培養基分裝至組織瓶中,於121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘,製得本發明的培養基。
[0030]進一步地:步驟a後不加入瓊脂,製得本發明的不含瓊脂的培養基。
[0031]將上述製備方法製得的培養基,用於繁殖馬鈴薯組培苗,其方法為:在無菌操作臺上,每50ml含有瓊脂的培養基中扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段,在環境溫度20_22°C、24小時光照的組培室內培養10天後再加入IOml不含瓊脂的培養基,繼續培養10天。
[0032]使用本實施例中的培養基,對不同的馬鈴薯組培苗進行培養,其典型結果如下:
[0033]1、宣威市馬鈴薯種薯研發中心組培室利用本實施例的培養基和方法快繁馬鈴薯組培苗,2011年3月17日剪切接種,室內溫度設定為22°C,24小時光照,2011年4月6日組培苗株高長至 釐米,生長時間是20天,組培苗生長健壯,葉色濃綠,莖杆粗壯,平均莖粗
0.19釐米,平均每株苗莖節數4.5個。
[0034]2、雲南農業大學薯類作物研究所組培室利用本實施例的培養基和方法快繁馬鈴薯組培苗,2011年3月6日剪切接種,室內溫度設定為20°C,24小時光照,2011年3月27日組培苗株高長至8釐米,生長時間是21天,組培苗生長健壯,葉色濃綠,莖杆粗壯,平均莖粗0.17釐米,平均每株苗莖節數4.7個。
[0035]3、雲南農業大學農學與生物技術學院組培室利用本實施例的培養基和方法快繁馬鈴薯組培苗,2011年4月7日剪切接種,室內溫度設定為21°C,24小時光照,2011年4月27日組培苗株高長至8釐米,生長時間是20天,組培苗生長健壯,葉色濃綠,莖杆粗壯,平均莖粗0.18釐米,平均每株苗莖節數4.6個。
[0036]相同條件下,使用MS培養基保存的馬鈴薯組培苗,2011年4月7日剪切接種,2011年5月7日組培苗株高長至8釐米,生長時間是31天,組培苗生長較弱,葉色淡綠,莖杆細弱彎曲,分枝較多且細弱,平均莖粗0.12釐米,平均每株苗莖節數4.1個。
[0037]本發明所描述的具體實施例只用於對該培養基的具體實現過程的詳細描述,而不是對該培養基的限定。任何對此產品進行的修飾與改良,在專利範圍或範疇內同類或相近物質的替代與使用,均屬於本發明專利範圍,受此專利保護。
【權利要求】
1.一種促進馬鈴薯組培苗快速生長的培養基,其特徵在於:以IL培養基計,由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1567.5~1732.5mg,硝酸鉀(KNO3) 1805~1995mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)418 ~462mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 399 ~441mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 162 ~178mg,碘化鉀(KI)0.79 ~0.87mg,硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg,硫酸錳(MnSO4.4Η20) 16.1 ~17.7mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 72 ~78mg,肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,煙酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,瓊脂 6650 ~7350mg,餘量為水。
2.根據權利要求1所述的培養基,其特徵在於,以IL培養基計,由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 1650mg,硝酸鉀(KNO3) 1900mg,氯化鈣(CaCl2.2H20)440mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20)420mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170mg,碘化鉀(KI)0.83mg,硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 16.9mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6mg,鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25mg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 75mg,肌醇(C6H12O6) IOOmg,煙酸(C6H5NO2) 0.5mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3-HCl)0.5mg,鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg,蔗糖(C12H22O11) 30000mg,瓊脂7000mg,餘量 為水。
【文檔編號】A01H4/00GK103931500SQ201410165582
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月19日 優先權日:2013年4月19日
【發明者】張新永, 包媛媛, 宋雷 申請人:雲南農業大學