一種竹蓀孢子的提取方法
2024-04-01 05:40:05
專利名稱：一種竹蓀孢子的提取方法
技術領域：
本發明屬於食用菌加工領域，具體涉及竹蓀孢子的分離、收集、純化、保存等工藝。
背景技術：
竹蓀為鬼筆科竹蓀屬OVcij^Mora)真菌，是一種名貴的食用菌，自古就列為朝廷 貢品，為國宴和高級宴席上的著名山珍之一。現代醫學研究表明竹蓀具有健脾胃、降血壓、 降血脂、抗腫瘤、抗凝血、抗炎症、抗愛滋病、提高免疫力、保護肝臟等功能，是一種具有良好 保健功能的健康食品。竹蓀子實體由菌體(菌裙和菌柄)、菌蓋和菌託三部分組成。商品竹蓀只是採收、力口 工竹蓀子實體的菌體部分，而佔子實體生物量60%以上的菌蓋和菌託被直接遺棄，即每生 產Ikg商品竹蓀就產生1. 5kg的廢棄物。大量菌蓋和菌託被遺棄在田間不僅浪費資源；而 且容易汙染環境，成為細菌、黴菌、菇蚊、菇蠅等病蟲害滋生的的源頭。目前還未見有提取竹 蓀孢子工藝的報導
發明內容
本發明提供一種從竹蓀菌體採收後的廢棄物中收集、分離、純化獲得竹蓀孢子的 方法，能充分開發竹蓀資源，提高竹蓀產品的附加值，同時解決竹蓀採收加工過程下腳料處 理問題。本發明採用的技術方案如下
收集採收竹蓀菌體後剩下的菌蓋和菌託，低溫保存。將收集的菌蓋和菌託放入水中，通 過震蕩、洗脫等物理方法將孢子從菌蓋和菌託中分離出。將分離出的孢子液通過篩網過濾， 去掉菌蓋、菌託碎片等雜質，收集濾液，濾渣另做用途。濾液通過反覆離心、過濾，可收集到 竹蓀孢子粗體。竹蓀孢子粗體加少量水製成懸浮液，加入酶進行酶解，去除竹蓀孢子液中含 有的膠質；用酸調節PH，去除竹蓀孢子液中的臭味物質後過濾。濾液離心後去掉上清液，再 加水震蕩均勻後離心，如此反覆多次，直到收集的沉澱通過顯微鏡觀察，視野中均為孢子， 且形狀和大小與文獻描述的相同時為止。將收集的沉澱乾燥，即獲得竹蓀孢子。本發明的顯著優點
1、竹蓀孢子是附著在生長成熟期的竹蓀菌蓋中的生殖細胞，具有竹蓀的全部遺傳活性 物質。檢測竹蓀孢子中胺基酸、粗蛋白質含量達23. 04%、34. 72%，高於菌體所含的18.57%、 25. 30%。竹蓀孢子含有豐富的維生素，維生素Bl含量33. 5mg/g,高於菌體的29. Omg/g ；維生素C含量是菌體的一百多倍。因此竹蓀孢子含有極高的營養和保健價值，製備竹蓀孢子 具有廣闊的市場開發前景。2、從竹蓀子實體採收、加工後的廢棄物中收集、提取竹蓀孢子，能充分利用資源， 提高竹蓀產品的附加值；同時解決了竹蓀採收過程廢棄物處理問題，避免滋生細菌、黴菌、 菇蚊、菇蠅等病蟲害造成的環境汙染。3、通過酶解和酸解，去除了竹蓀孢子液中含有的膠質和臭味物質，獲得純淨的竹 蓀孢子。通過冷凍乾燥不損害竹蓀孢子的營養價值，同時使得孢子更易保存。
圖1為竹蓀孢子純品的掃描電鏡圖。
具體實施例方式(1)樣品採集收集採收竹蓀菌體後剩下的竹蓀菌蓋和菌託300_3000g ；
(2 )孢子分離加入水1200-12000ml，清洗5-30min ；均勻翻動上下層，繼續清洗 5-30min ；清洗結束後用100-500目的篩網過濾，濾渣加水1000_3000ml，清洗5_30min，使竹 蓀孢子和菌託、菌蓋充分分離；用200-500目的篩網過濾，合併兩次濾液備用；
(3)孢子粗提濾液用低速大型離心機離心，200-600rpm離心3-20min；取上部液體 1000-2000rpm離心10_30min，取沉澱加入500_2000ml水，震蕩均勻；
(4)孢子純化震蕩液酶解l_2h，所述酶為複合果膠酶；用酸調節pH為3-7，用300-500目 的篩網過濾 』濾液1000-2000rpm離心5_20min ；取沉澱，加入500_2000ml蒸餾水，震蕩均勻， 1500-3000rpm離心5-20min ；收集沉澱，乾燥，裝瓶、密封、低溫保存，即為竹蓀孢子純品。以下為本發明的具體實例，進一步詳細描述本發明，但是本發明不僅限於此。實施例1
在竹蓀菌裙展開至最大時(即成熟自溶期)，收集竹蓀菌蓋和菌託500g，放入超聲波清 洗機(型號KQ-250)，加入自來水2000ml，清洗IOmin ；均勻翻動上下層，繼續清洗lOmin。清 洗結束後用400目的篩網過濾，濾渣放回超聲波清洗機，加入自來水1000ml，清洗lOmin，使 竹蓀孢子和菌蓋、菌託充分分離；用400目的篩網過濾，合併兩次濾液備用。濾液用低速大 型離心機(型號DL-5)離心，500rpm離心5min ；取上部液體，1500rpm離心15min。倒掉上清 液，加入500ml自來水，震蕩均勻；加入0. 1%果膠複合酶酶解lh，去除孢子液中的膠質；用 冰醋酸調節PH到4-5，去除孢子中含有的異味物質。用500目篩網過濾；濾液IOOOrpm離 心lOmin，去掉上清液，收集沉澱；加入IOOOmL蒸餾水，震蕩均勻，1500rpm離心15分鐘；倒 掉上清液，收集沉澱，冷凍乾燥(型號FD-1)，裝瓶、密封、低溫保存。收集得到的竹蓀孢子為 暗綠色粉末狀，通過掃描電子顯微鏡(JSM6380LV，日本JEOL公司)觀察，如圖1所示，孢子 形狀為橢圓形、寬1-1. 5微米，長2. 5-3微米。
權利要求
一種竹蓀孢子的提取方法，其特徵在於收集竹蓀菌蓋上的孢子，通過清洗、過濾、離心，然後進行酶解、酸解、分級離心、乾燥，獲得竹蓀孢子純品。
2.根據權利要求1所述的一種竹蓀孢子的提取方法，其特徵在於所述方法按照以下 步驟進行(1)樣品採集將採收竹蓀菌體後剩下的竹蓀菌蓋和菌託收集備用；(2)孢子分離收集的竹蓀菌蓋和菌託用水清洗、過濾後，得到含孢子的濾液；(3)孢子粗提濾液離心、震蕩，得到孢子粗提液；(4)孢子純化孢子粗提液進行酶解、酸解、過濾，濾液分級離心、冷凍乾燥，獲得竹 蓀孢子純品。
3.根據權利要求2所述的一種竹蓀孢子的提取方法，其特徵在於具體步驟如下 (1)樣品採集收集採收竹蓀菌體後剩下的竹蓀菌蓋和菌託300-3000g ；(2 )孢子分離加入水1200-12000ml，清洗5-30min ；均勻翻動上下層，繼續清洗 5-30min ；清洗結束後用100-500目的篩網過濾，濾渣加水1000_3000ml，清洗5_30min，使竹 蓀孢子和菌託、菌蓋充分分離；用200-500目的篩網過濾，合併兩次濾液備用；(3)孢子粗提濾液用低速大型離心機離心，200-600rpm離心3-20min；取上部液體 1000-2000rpm離心10_30min，取沉澱加入500_2000ml水，震蕩均勻；(4)孢子純化震蕩液酶解l_2h，所述酶為複合果膠酶；用酸調節pH為3-7，用300-500 目的篩網過濾 』濾液1000-2000rpm離心5_20min ；取沉澱，加入500_2000ml蒸餾水，震蕩 均勻，1500-3000rpm離心5-20min ；收集沉澱，乾燥，裝瓶、密封、低溫保存，即為竹蓀孢子純品
全文摘要
本發明提供了一種從竹蓀菌體採收後的廢棄物中收集、分離、純化獲得竹蓀孢子的方法，能充分開發竹蓀資源，提高竹蓀產品的附加值，同時解決竹蓀採收加工過程下腳料處理問題，屬於食用菌加工領域。該方法收集竹蓀菌蓋上的孢子，通過清洗、過濾、離心，然後進行酶解、酸解、分級離心、乾燥，獲得竹蓀孢子純品。本發明從竹蓀子實體採收、加工後的廢棄物中收集、提取竹蓀孢子，能充分利用資源，提高竹蓀產品的附加值，具有廣闊的市場開發前景；同時解決了竹蓀採收過程廢棄物處理問題，避免滋生細菌、黴菌、菇蚊、菇蠅等病蟲害造成的環境汙染。
文檔編號A23L1/28GK101828694SQ201010142348
公開日2010年9月15日 申請日期2010年4月9日 優先權日2010年4月9日
發明者張慧, 林戎斌, 林新堅, 林陳強, 蔡海松, 陳濟琛 申請人:福建省農業科學院土壤肥料研究所