防治蔬菜疫病的菌藥合劑及其製備方法
2024-04-05 02:21:05 1
專利名稱：防治蔬菜疫病的菌藥合劑及其製備方法
技術領域：
本發明屬化學、生物土壤處理劑及其製備方法領域，特別涉及一種對蔬菜疫病具有預防及控制作用的菌藥合劑及其製備方法領域。
背景技術：
疫病是蔬菜生產上的一類重大病害，常見的疫病主要有辣椒疫病、番茄晚疫病和黃瓜疫病等。在我國，辣椒疫病的發生最為嚴重。近年來，由於品種、栽培制度、肥水條件的改變，病害逐年加重，病區由南向北逐年擴展，重病區的枯死率可達到80％以上，產量損失十分顯著。辣椒疫病在辣椒的整個生育期均可發生，尤其在辣椒現蕾和坐果時發生嚴重。在氣候條件適宜的情況下，此病可危害根、莖稈、枝條、果實和葉片，嚴重時可造成死秧、爛果，減產甚至絕產。
生產實踐中，疫病的綜合治理主要是依靠選用抗病品種、合理輪作和使用內吸性殺菌劑。但目前生產上可應用的抗疫病的蔬菜品種有限，同時因為疫病病原菌為土壤習居菌，輪作也難以有效地控制該病。因此較長時期以來化學防治一直使該病最有效的的防治手段之一，生產上主要以藥劑噴霧和灌根來防治辣椒疫病。現有防治疫病的主要藥劑甲霜靈、霜脲氰、乙磷鋁等內吸性殺菌劑，這類殺菌劑屬於特異性位點抑制劑，對病原菌的作用位點單一，只對病原菌的單一代謝環節起作用，一旦此位點發生突變，藥劑即不能與其產生作用，從而導致病菌產生抗藥性，使藥劑防治病害的效果降低。隨著社會經濟發展和人民物質生活水平的迅速提高，「綠色蔬菜」和「無公害蔬菜」需求量也越來越大，作物安全生產和農產品安全倍受重視。因此，單一利用化學農藥防治疫病的策略和實踐受到了挑戰，探索新的防治途徑是目前蔬菜疫病防治必須解決的重要問題。發展生物防治技術來防治植物病害越來越受到各國政府、科技工作者和民眾的關注，據申請人所知，國內外研究生物措施防治疫黴病害已有許多報導。但由於單一的生防因子難以在不同環境條件下取得與使用化學殺菌劑相匹配的防效；而且生防因子對土壤或作物根圍環境條件的波動比較敏感，在田間存在病原菌的生態條件下，生防因子的定殖能力有很大差異。生物防治控制蔬菜疫病的研究目前多在實驗室和溫室條件下進行，尚未大面積用於生產實踐中。
在化學防治受到越來越多的質疑，生物防治體系還不完善的條件下，發展生物-化學協同控制蔬菜疫病的策略逐漸引起各國政府和科研人員的重視。
發明內容
本發明的目的在於提供一種高效、低毒，與環境相容並對蔬菜疫病具有預防及控制作用的生物-化學協同控制的菌藥合劑及其製備方法。
本發明的目的是這樣實現的提供一種防治蔬菜疫病菌藥合劑含有生防菌劑和殺菌劑，所述生防菌劑與殺菌劑按質量計用量比為1∶1。優選的殺菌劑選自阿米西達、百菌清、代森錳鋅、甲霜靈、綠帝、氟嗎啉、烯醯嗎啉、乙磷鋁、銀泰中的一種或多種。進一步優選殺菌劑為烯醯嗎啉，更進一步優選烯醯嗎啉有效成分含量25％-90％的可溼性粉劑，最優選50％安克可溼性粉劑(烯醯嗎啉製劑)。優選的生防菌劑中含有的生防菌株選自枯草芽孢桿菌BS、枯草芽孢桿菌GF1、螢光假單胞菌LX1、螢光假單胞菌BCA1中的一種或多種。進一步優選的生防菌劑中含有的生防菌株為枯草芽孢桿菌BS。
本發明還提供一種製備上述防治蔬菜疫病菌藥合劑的方法，它包括如下步驟a)將對蔬菜疫病病菌具有拮抗作用的生防菌株進行發酵培養，再將發酵液離心獲得的菌體沉澱按1∶1的質量比與微粉碳酸鈣混合製得生防菌劑；優選的生防菌株選自枯草芽孢桿菌BS、枯草芽孢桿菌GF1、螢光假單胞菌LX1、螢光假單胞菌BCA1中的一種或多種。進一步優選的生防菌株為枯草芽孢桿菌BS。
b)將步驟a形成的生防菌劑與殺菌劑按1∶1的質量比復配。
優選的殺菌劑為有效成分含量25％-90％的製劑，進一步優選的殺菌劑為有效成分含量50％的製劑。
優選的殺菌劑選自阿米西達、百菌清、代森錳鋅、甲霜靈、綠帝、氟嗎啉、烯醯嗎啉、乙磷鋁、銀泰中的一種或多種。進一步優選殺菌劑為烯醯嗎啉，更進一步優選烯醯嗎啉有效成分含量25％-90％的可溼性粉劑，最優選50％安克可溼性粉劑(烯醯嗎啉製劑)。
本發明基於生物-化學協同控制原理的菌藥合劑，通過生物因子和化學因子的協同增效作用，可以在設施蔬菜上減少化學農藥施用量50％以上，完全替代傳統的高毒、高殘留農藥，確保蔬菜的農藥殘留量在允許標準以下，符合無公害蔬菜生產要求。從而節約生產成本並改善了蔬菜品質。
圖1為本發明的工藝流程框圖。
具體實施例方式
下面結合附圖所描述的實施方式對本發明作進一步詳細說明。
防治蔬菜疫病菌藥合劑，它含有生防菌劑和50％安克可溼性粉劑；所述生防菌劑與50％安克可溼性粉劑的質量比為1∶1。
如圖所示，防治蔬菜疫病菌藥合劑製備方法，可按如下步驟依次進行a)將對辣椒疫病病菌具有拮抗作用的生防菌株枯草芽孢桿菌BS進行發酵培養，再將發酵液離心獲得的菌體沉澱按1∶1的質量比與微粉碳酸鈣混合製得生防菌劑；
b)將步驟a形成的生防菌劑與有效成分含量為50％的安克可溼性粉劑按1∶1的質量比復配。
本發明立足於已經獲得的幾種拮抗微生物、已經登記的生物防治菌株和國內外生產上防治疫病常用的幾種殺菌劑，以辣椒疫病病菌為靶標菌，通過離體和活體篩選，分別獲得一株對辣椒疫黴具有較強拮抗作用的生防菌株和一種高效、低毒、環境友好的化學農藥，通過離體和活體試驗測定生物農藥和化學農藥毒力係數，明確生物因子與化學藥劑之間專化特異性的增效作用，篩選高效廣譜生物殺菌劑的增效組合，研製成菌藥合劑，並對其施用方式進行了研究。
本發明的具體操作步驟如下(1)拮抗微生物的的篩選在初步篩選的基礎上，選擇枯草芽孢桿菌BS、螢光假單胞菌LX1、枯草芽孢桿菌GF1、螢光假單胞菌BCA1四株生防菌株分別進行了離體抑菌實驗和活體植株篩選，發現枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)BS對辣椒疫病病菌具有較強的拮抗作用，溫室防病實驗中具有較高的防效。具體的數據見表1和表2。因此選擇枯草芽孢桿菌BS作為研製菌藥合劑的生物組分。
(2)殺菌劑的篩選採用生產中常用的9種不同類型的殺菌劑，分別測定了對辣椒疫病病菌不同菌體形態的抑制作用，結果如表3所示，烯醯嗎啉和氟嗎啉兩種殺菌劑對所測定的各種菌體形態都有顯著的抑制作用。在離體篩選的基礎上，又以防治疫病的典型藥劑甲霜靈為對照，進行了烯醯嗎啉和氟嗎啉的溫室防病實驗，發現烯醯嗎啉的防治效果要優於氟嗎啉(見表4)。因此選擇烯醯嗎啉作為構建菌藥合劑的化學組分。
(3)菌藥合劑的研製 將枯草芽孢桿菌BS發酵培養，再將發酵液離心獲得的菌體沉澱按1∶1的質量比與微粉碳酸鈣混合製得生防菌劑，其菌量大於108cfu/g。然後與50％安克可溼性粉劑(烯醯嗎啉製劑)按1∶1的質量比復配獲得本發明防治蔬菜疫病的菌藥合劑。
(4)菌藥合劑質量指標的檢測 烯醯嗎啉和枯草芽孢桿菌BS的含量指標是菌藥合劑的基本質量指標，烯醯嗎啉含量的測定採用高效液相色譜進行(≥25％)，枯草芽孢桿菌的菌數採用稀釋平板法進行測定(活菌落數量≥107cfu/mL)。經熱貯實驗表明，枯草芽孢桿菌對烯醯嗎啉沒有代謝作用，烯醯嗎啉對枯草芽孢桿菌的菌落數形成也沒有幹擾作用。
實施例1採用北京地區主栽辣椒品種京研辣椒3號，模擬自然條件下辣椒疫病的侵染方式，分別採用灌根法和噴霧法接種病菌的方式建立致病體系，研究了不同的施藥方式對菌藥合劑DMBS防治辣椒疫病效果的影響。結果如表5、表6所示，在不同的致病體系下，菌藥合劑的防治效果與藥劑的使用方式有關，灌根法施藥對於防治地下部的病害擴展效果較好，噴霧法施藥對於防治地上部病菌的傳播效果較好。但無論採用哪種接菌方式都可以發現，在供試的殺菌劑單劑、生防菌單劑和菌藥合劑三種處理中，單一的生防製劑防效表現欠穩定，而菌藥合劑則表現出與單一殺菌劑相同的趨勢，隨藥劑濃度的升高，防治效果提高；更重要的是，減少了一半劑量的菌藥合劑的防治效果與同濃度的單一殺菌劑可以取得大致相當的防治效果，在個別濃度下，甚至高於殺菌劑處理。
實施例2採用辣椒疫病的通用感病品種茄門甜椒，模擬自然條件下辣椒疫病的侵染方式，分別採用灌根法和噴霧法接種病菌的方式建立致病體系，研究了不同的施藥方式對菌藥合劑DMBS防治辣椒疫病效果的影響。結果如表7、表8所示，其規律與京研辣椒3號相似。
表1、4株生防菌株對7株辣椒疫病病菌的抑菌作用測定
表2、生防因子防治辣椒疫病溫室試驗
表3、9種殺菌劑對辣椒疫病病菌不同菌體形態的抑制作用
表4、殺菌劑防治辣椒疫病溫室試驗
表5、本發明菌藥合劑對京研辣椒3號灌根法接種辣椒疫病病菌的防治效果
注DMM為烯醯嗎啉，BS為枯草芽孢桿菌，DMBS為菌藥合劑。下同。
表6、本發明菌藥合劑對京研辣椒3號噴霧法接種辣椒疫病病菌的防治效果
表7、本發明菌藥合劑對茄門甜椒灌根法接種辣椒疫病病菌的防治效果
表8、本發明菌藥合劑對茄門甜椒噴霧法接種辣椒疫病病菌的防治效果
權利要求
1.一種防治蔬菜疫病菌藥合劑，它含有生防菌劑和殺菌劑，所述的生防菌劑與殺菌劑按質量計用量比為1∶1。
2.根據權利要求1所述的防治蔬菜疫病菌藥合劑，其特徵在於，所述殺菌劑選自阿米西達、百菌清、代森錳鋅、甲霜靈、綠帝、氟嗎啉、烯醯嗎啉、乙磷鋁、銀泰中的一種或多種。
3.根據權利要求1所述防治蔬菜疫病菌藥合劑，其特徵在於，所述生防菌劑中含有的生防菌株選自枯草芽孢桿菌BS、枯草芽孢桿菌GF1、螢光假單胞菌LX1、螢光假單胞菌BCA1中的一種或多種。
4.一種製備權利要求1所述防治蔬菜疫病菌藥合劑的方法，它包括如下步驟a)將對蔬菜疫病病菌具有拮抗作用的生防菌株進行發酵培養，再將發酵液離心獲得的菌體沉澱按1∶1的質量比與微粉碳酸鈣混合製得生防菌劑；b)將步驟a形成的生防菌劑與殺菌劑按1∶1的質量比復配。
5.根據權利要求4所述的製備防治蔬菜疫病菌藥合劑的方法，其特徵在於，所述生防菌株選自枯草芽孢桿菌BS、枯草芽孢桿菌GF1、螢光假單胞菌LX1、螢光假單胞菌BCA1中的一種或多種。
6.根據權利要求4或5所述的製備防治蔬菜疫病菌藥合劑的方法，其特徵在於，所述殺菌劑選自阿米西達、百菌清、代森錳鋅、甲霜靈、綠帝、氟嗎啉、烯醯嗎啉、乙磷鋁、銀泰中的一種或多種。
7.根據權利要求6所述的製備防治蔬菜疫病菌藥合劑的方法，其特徵在於，所述殺菌劑為烯醯嗎啉。
全文摘要
本發明屬化學、生物土壤處理劑及其製備方法領域，特別涉及一種對蔬菜疫病具有預防及控制作用的菌藥合劑及其製備方法領域，該方法可按如下步驟依次進行a)將對蔬菜疫病病菌具有拮抗作用的生防菌株進行發酵培養，再將發酵液離心獲得的菌體沉澱按1∶1的質量比與微粉碳酸鈣混合製得生防菌劑；b)將步驟a形成的生防菌劑與有效成分含量為50％的殺菌劑按1∶1的質量比復配。本發明可以在設施蔬菜上減少化學農藥施用量50％以上，部分或全部替代傳統的高毒、高殘留農藥，確保蔬菜農藥殘留量在允許標準以下，符合無公害蔬菜生產要求。
文檔編號A01N63/02GK1695457SQ200510011438
公開日2005年11月16日 申請日期2005年3月17日 優先權日2005年3月17日
發明者李健強, 尹敬芳, 劉西莉, 吳學宏, 劉鵬飛, 張文華 申請人:中國農業大學