三七總皂苷脂質體及其製備方法
2023-11-04 06:15:47
專利名稱：三七總皂苷脂質體及其製備方法
技術領域：
本發明屬醫藥技術領域，具體涉及一種三七總皂苷脂質體及其製備方法。
背景技術：
調查顯示心腦血管疾病是影響我國人口壽命的第二大因素，隨著人們生活水平的提高，工作壓力的增大，心腦血管疾病的患病呈年輕化，患病人數呈上升的趨勢。目前，可供選擇的藥物大多為西藥品種，而中藥品種少，且製劑多為傳統劑型或普通劑型。三七是我國傳統的名貴中藥，又名田七，為五加科人參屬的一個種，學名為Panax notoginseng(Buck.)F.H.Chen，盛產於我國雲南、廣西。三七的藥理作用為擴張冠脈、改善心肌缺血、減少心肌耗氧量、擴張血管、抗心率失常等。臨床應用其總皂苷(Saponins of Panax Notoginseng，PNS)治療中風、腦血栓、冠心病、心絞痛、動脈粥樣硬化、視網膜中央靜脈阻塞等。
人參皂苷Rb1、Rg1是三七總皂苷中含量最高的兩個活性單體，各佔總皂苷的30％左右。目前已經上市的三七類產品主要有注射液如血塞通和口服片劑如三七總甙片。注射液採用滴注給藥，患者順應性差，且副作用也日趨增多，如過敏反應等影響了藥物的應用。口服片劑臨床應用療效較低，據有關報導三七總皂苷水溶性極大，在胃腸道黏膜的透過性差，胃的強酸環境對藥物有降解作用，而且其中活性單體極易被胃腸道酶和腸道細菌代謝，因此導致了PNS口服製劑的生物利用度很低，其中人參皂苷Rb1口服絕對生物利用度僅為4.35％，；人參皂苷Rg1的口服生物利用度為18.40％，且在血中消除很快。因此尋找三七總皂苷新劑型和新的給藥途徑顯得尤為必要。
肺部給藥是一種具發展潛力的給藥途徑，臨床已廣泛應用於治療呼吸道疾病，其優點為表面積大，血流豐富，肺泡壁薄，細胞內外生物代謝酶的活性低，且無肝臟首過效應，藥物生物利用度高。
脂質體與肺泡具有良好的生物相容性，製備工藝簡單，藥物包封於脂質體中，能降低藥物毒性，增強藥理作用，而且能夠降低藥物的消除速率，延長藥物作用，增加藥物的體內外穩定性。同時，作為膜材的磷脂，本身無毒，對心腦血管疾病具有積極的預防作用，可降低血清膽固醇、甘油三酯含量，預防動脈硬化並可清掃血管使其柔軟，能顯著減輕動脈粥樣硬化及心肌缺血-再灌注損傷程度，清除動脈硬化引發的心腦血管疾病等多種慢性病變的誘發因素。
發明內容
本發明的目的是提供一種三七總皂苷脂質體。經本發明三七總皂苷脂質體肺部非注射給藥，能減少藥物刺激性和毒性，提高藥物的生物利用度，改善患者用藥的順應性。
本發明由三七總皂苷(DFC-SQZD-01，雲南文山)和磷脂加親脂性添加劑製備成三七總皂苷脂質體。
本發明的磷脂與三七總皂苷的重量比為0.5∶1-100∶1，磷脂與親脂性添加劑的重量比為1∶1-10∶1。
所述脂質體的磷脂，可以是卵磷脂，包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂，雙肉豆蔻磷脂醯膽鹼，雙肉豆蔻磷脂醯甘油，二油醯磷脂醯膽鹼，二棕櫚醯磷脂酸，二棕櫚醯磷脂醯膽鹼，二棕櫚醯磷脂醯甘油和二硬脂醯磷脂醯膽鹼。優選卵磷脂、二棕櫚醯磷脂酸、二棕櫚醯磷脂醯膽鹼和二棕櫚醯磷脂醯甘油。
本發明採用親脂性添加劑選擇性改善脂質體的特性。所述添加劑包括，硬脂胺，磷脂酸，生育酚、膽固醇、膽固醇半琥珀酸酯和羊毛酯提取物；優選膽固醇。
藥物肺部給藥，肺內沉積量是反映藥物能否有效的發揮藥效的重要指標，而進入呼吸道的藥物顆粒的大小及形狀是影響肺內沉積量的重要因素。本發明脂質體粒徑範圍為1-5μm，顆粒易到達呼吸道深部作用部位。
本發明脂質體可通過常規方法包括薄膜法、逆相蒸發法、熔融法、注入法、冷凍乾燥法、表面活性劑法、復乳法、鈣融合法，優選薄膜法、逆相蒸發法和冷凍乾燥法製備。
本發明的三七總皂苷脂質體可製成粉末吸入劑，氣霧劑和噴霧劑等劑型，通過肺部給藥，改善三七總皂苷口服吸收差，生物利用度低的不足，增強三七總皂苷對心腦血管疾病的療效，提高患者用藥的順應性。
本發明根據中華人民共和國藥典2000年版二部，對三七總皂苷脂質體的質量進行檢查。結果表明，本發明的三七總皂苷脂質體粒徑大小符合肺部給藥對製劑粒徑的要求，形態均一，包封率高，滲漏率低，符合藥典對脂質體製劑的各項要求。
圖1是PNS脂質體照片其中a光學顯微鏡照片，經相應介質稀釋20倍後放大300倍，b電鏡照片，放大84000倍。
圖2是PNS脂質體在不同溫度水相介質中的累積釋放曲線，其中，n＝5，x±s。
具體實施例方式通過下列實施例說明本發明的具體實施方式
，但本發明的保護範圍，不局限於此。
實施例1 薄膜法製備三七總皂苷脂質體取大豆卵磷脂(上海太偉藥業有限公司)1.25克，膽固醇(中國醫藥集團上海化學試劑公司)0.3克用60毫升乙醚溶解於250ml梨形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸發出去乙醚，脂質在瓶壁上成一薄膜，加15ml三七總皂苷磷酸鹽緩衝液旋轉水化得到三七總皂苷脂質體。包封率為81％。
實施例2 逆相蒸發法製備三七總皂苷脂質體取大豆卵磷脂2克，膽固醇1克用100ml乙醚溶解於250ml梨形瓶中，再加入20ml三七總皂苷磷酸鹽緩衝液，水浴超聲使成為均一的單相體系，減壓蒸發除去乙醚至凝膠形成，繼續減壓蒸發15分鐘，得到三七總皂苷脂質體。包封率為60％。
實施例3 冷凍乾燥法製備三七總皂苷脂質體取大豆卵磷脂1.25克，膽固醇0.3克用60毫升乙醚溶解於250ml梨形瓶中，在旋轉蒸發儀上減壓蒸發出去乙醚，脂質在瓶壁上成一薄膜，加15ml磷酸鹽緩衝液旋轉水化得到空白脂質體，加適量海藻糖，混勻，在真空中冷凍乾燥，隨即用三七總皂苷磷酸鹽緩衝液振搖進行分散，得到三七總皂苷脂質體。包封率為55％。
實施例4 注入法製備三七總皂苷脂質體取大豆卵磷脂2克，膽固醇2克，用80ml乙醚溶解，三七總皂苷磷酸鹽緩衝液保溫在60℃恆溫振蕩水浴中，，用微量注射器將乙醚脂質溶液緩緩注入緩衝溶液中，並通氮氣去除殘餘乙醚蒸氣，得到三七總皂苷脂質體。包封率為50％。
實施例5 熔融法製備三七總皂苷脂質體取大豆卵磷脂2克，膽固醇1克熔融混勻，將三七總皂苷磷酸鹽緩衝液緩緩加入熔融液中，在組織攪拌機中高速攪拌，至脂質體形成。包封率為48％。
實施例6將三七總皂苷脂質體經冷凍乾燥，裝入粉末吸入裝置，得到三七總皂苷脂質體粉末吸入劑。脂質體粉末裝在定量裝置中，經患者主動吸入。
實施例7將三七總皂苷脂質體與拋射劑一起填入氣霧劑裝置中，得到三七總皂苷脂質體氣霧劑。脂質體混懸液在拋射劑作用下呈氣霧狀噴出。
實施例8將三七總皂苷脂質體裝入噴霧劑裝置中，得到三七總皂苷脂質體噴霧劑。脂質體混懸液在壓力作用下直接噴出呈霧狀。
實施例9 三七總皂苷脂質體質量檢查1.PNS脂質體的粒徑及其形態粒徑測定PNS脂質體適量經磷酸鹽緩衝液稀釋後，用Zeta電位及粒度測定儀測定其粒徑大小。
形態觀察PNS脂質體適量置銅網上，經磷鎢酸負染後，於透射電鏡下觀察脂質體結構。並取適量經稀釋後，置於光學顯微鏡下觀察其形態和分布。
三七總皂苷脂質體為大單室脂質體(LUV)，圓形或橢圓形，外形圓整光滑，形態分布均一。平均粒徑為1546.5nm±321.4nm。
2.包封率測定取三七總皂苷脂質體混懸液適量，置低溫高速離心機中，4℃，20000g×30min離心，取上清液20μl，用磷酸鹽緩衝液稀釋至5ml，搖勻。RP-HPLC法測定游離的Rbl按下式計算包封率。
3.脂質體體外洩漏分別考察PNS脂質體在(25±0.5)℃和(37±0.5)℃恆溫水浴中持續振蕩5天的體外釋放狀況。將脂質體適量置於透析袋內，釋放介質為磷酸鹽緩衝液，振蕩頻率為80r/min，持續振蕩5天，分別於1d，2d，3d，4d，5d取透析液1ml，並同時補充同溫新鮮磷酸鹽緩衝液1ml，RP-HPLC測定透析液中游離的Rb1。透析完成後，剪破透析袋，收集袋內的脂質體並用10％Triton X-100破壞，作為時間無窮大時的藥物洩漏量。計算其累積釋放量，評價PNS脂質體的體外穩定性。
體外釋放實驗結果表明PNS脂質體在25℃和37℃介質中藥物釋放緩慢，37℃5天的體外累積釋放量佔時間無窮大時脂質體釋放量的2.04％，25℃5天的體外累積釋放量佔時間無窮大時脂質體釋放量的0.43％。
權利要求
1.一種三七總皂苷脂質體，其特徵是含三七總皂苷，磷脂和親脂性添加劑。
2.根據權利要求1所述的三七總皂苷脂質體，其特徵是其中磷脂與三七總皂苷的重量比為0.5∶1-100∶1，磷脂與親脂性添加劑的重量比為1∶1-10∶1。
3.根據權利要求1所述的三七總皂苷脂質體，其特徵是所述的脂質體的磷脂是卵磷脂，包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化大豆卵磷脂、氫化蛋黃卵磷脂，雙肉豆蔻磷脂醯膽鹼，雙肉豆蔻磷脂醯甘油，二油醯磷脂醯膽鹼，二棕櫚醯磷脂酸，二棕櫚醯磷脂醯膽鹼，二棕櫚醯磷脂醯甘油和二硬脂醯磷脂醯膽鹼。
4.根據權利要求1所述的三七總皂苷脂質體，其特徵是所述的磷脂是卵磷脂，二棕櫚醯磷脂酸，二棕櫚醯磷脂醯膽鹼和二棕櫚醯磷脂醯甘油。
5.根據權利要求1所述的三七總皂苷脂質體，其特徵是所述的親脂性添加劑包括，硬脂胺，磷脂酸，生育酚、膽固醇、膽固醇半琥珀酸酯和羊毛酯提取物。
6.根據權利要求1所述的三七總皂苷脂質體，其特徵是所述的親脂性添加劑是膽固醇。
7.根據權利要求1所述的三七總皂苷脂質體，其特徵是所述的脂質體粒徑範圍為1-5μm。
8.根據權利要求1-7所述的任一三七總皂苷脂質體，可製成粉末吸入劑，氣霧劑和噴霧劑。
全文摘要
本發明屬醫藥技術領域，具體涉及一種三七總皂苷脂質體及其製備方法。本發明由三七總皂苷和磷脂加親脂性添加劑製備成三七總皂苷脂質體。可通過常規方法製成粉末吸入劑，氣霧劑和噴霧劑等劑型，通過肺部非注射給藥，改善三七總皂苷口服吸收差的不足，減少藥物刺激性和毒性，提高藥物的生物利用度，增強三七總皂苷對心腦血管疾病的療效，改善患者用藥的順應性。質檢結果表明，本發明的三七總皂苷脂質體粒徑形態均一，包封率高，滲漏率低，符合藥典要求。
文檔編號A61K31/7048GK1543974SQ200310108690
公開日2004年11月10日 申請日期2003年11月19日 優先權日2003年11月19日
發明者方曉玲, 沈央, 沙先誼 申請人:復旦大學