用於診斷和治療的新的靶向組合物的製作方法

2023-06-08 06:07:51

專利名稱：：用於診斷和治療的新的靶向組合物的製作方法
技術領域：
：本發明涉及新的靶向組合物及其用途。更具體地，本發明涉及靶向組合物，該組合物能夠被送至身體的組織而用於診斷成像和/或用於服用生物活性劑。
背景技術：
：各種成像技術已被用於診斷疾病。這些成像技術包括X射線成像。在X射線中，所產生的影像能夠反映患者身體中的結構和組織的不同密度。為了提高這種成像技術的實用性，造影劑可被用於提高所感興趣的組織相對於周圍組織的密度。例如，這類造影劑的實例包括鋇的化合物和碘化物，它們可用於胃腸區域的X射線研究，所述胃腸區域包括食管、胃、腸和直腸。造影劑也可用於計算機化X射線斷層照相術(CT)和計算機輔助X射線斷層照相術(CAT)研究，從而改善感興趣組織如胃腸道的影像。磁共振成像(MRI)是另一種成像技術，與X射線不同，MRI不涉及電離輻射。MRI可用於在各種掃描面上產生身體的截面影像，所述掃描面如軸向、冠狀、弧矢或正交。為了進行身體的成像，MRI使用磁場、射頻能量和磁場梯度。組織間的對照或信號強度差異主要反映組織的T1(縱向)和T2(橫向)鬆弛值以及質子密度，所述質子密度一般與游離水的含量相對應。為了利用對照介質改變患者區域內的信號強度，可使用幾個可能的方法。例如，對照介質可設計成能夠改變T1、T2或質子密度。一般地講，MRI需要使用造影劑。如果在進行MRI時不使用造影劑，那麼在成像結果中將感興趣的組織與周圍組織區分開來是非常困難的。在過去，人們將注意力主要集中在用於MRI的順磁造影劑上，順磁造影劑涉及含有不成對電子的材料。不成對電子在主磁場中起著小磁鐵的作用，從而增加了縱向(T1)和橫向(T2)的鬆弛速率。順磁造影劑典型地含有金屬離子，如過渡金屬離子，該離子提供了不成對電子源。然而這些金屬離子也通常具有很高的毒性。為了降低毒性，金屬離子典型地與配位體螯合。金屬氧化物(以氧化鐵最著名)已經被用作MRI造影劑。儘管小顆粒氧化鐵(如具有直徑小於大約20nm的顆粒)可具有所需的順磁鬆弛性能，但其主要作用在於體積磁化率。硝基氧化物(nitroxide)是另一類MRI造影劑，這類氧化物也是順磁的，它們具有相對低的鬆弛性，而且一般較順磁鐵的效果要差。現有的MRI造影劑均受到大量的限制。例如，成像噪聲增加可能於某些造影劑有關，包括含螫合金屬的造影劑。這種噪聲一般會使固有的蠕動性運動及由呼吸或血管動作引起的運動加強。另外，造影劑的強度通常取決於所使用的造影劑的濃度及脈衝序列。造影劑的吸入會使圖像的解釋複雜，特別是在小腸的末梢部分，除非使用足夠高濃度的順磁物質。參見Kommesser等人「磁共振成像」(MagneticResonanceImaging)6124(1988)。其它造影劑對脈衝順序變化的敏感性可能是低的，並且可產生更一致的對比作用。然而，高濃度的顆粒(如鐵酸鹽)可引起特別明顯的磁敏感的人為現象，例如在腸液吸收且可使超磁材料濃縮在結腸中。毒性是另一個常與目前可獲得的造影劑(包括MRI的造影劑)相關的問題。例如，鐵酸鹽在口服後常常引起噁心症狀，以及胃腸脹氣和暫時的血清鐵升高。游離形式的釓離子(被複合成Gd-DTPA)具有高的毒性。胃腸道的各種環境(包括酸性增高(低的pH)的胃和鹼性增高(高的pH)的腸中)可增加複合物脫偶合和分離游離離子的可能性。超聲是另一個研究身體各個部分的有價值的診斷成像技術，包括，例如脈管系統，如組織的微細脈管。超聲比其它診斷技術具有某些優點。例如，包括核醫學和X射線的診斷技術通常包括將病人暴露於離子化的電子射線之下。此射線可引起亞細胞材料損傷，包括脫氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)和蛋白質。超聲不包括這種潛在有傷害作用的射線。另外，超聲比其它診斷技術較為便宜，包括CT和MRI的診斷技術都需要複雜和昂貴的設備。超聲包括將病人暴露於聲波下。通常，聲波因身體組織的吸收而驅散，滲透通過組織或被組織反射。組織對聲波的反射通常是指反向散射或反射性，這形成了開發超聲成像的基礎。在這種情況下，不同的組織對聲波產生不同的反射。這種不同的反射由各種因素產生，包括被觀察的特定組織的構成和密度。超聲包括對不同反射波的檢測，通常使用可檢測具有頻率為1兆赫茲到10兆赫茲(MHZ)的聲波的換能器。檢測的波可被結合形成測定的圖象，並且將測定的聲波轉化成被研究組織的圖象。如同在上文診斷技術中所述的那樣，超聲通常也使用造影劑。例如造影劑包括，如固體顆粒的懸浮劑、乳化的液滴和充氣泡。參見Hilmann等，美國專利4,466,442及公開的國際專利申請WO92/17212和WO92/21382。Widder等(公開的專利申請EP-A-0324938)公開了穩定的泡囊型超聲成像劑，它由加熱變性的生物相容性蛋白質，如白蛋白、血紅蛋白和膠原蛋白產生。由超聲產生的圖象的質量有明顯改進。然而，需要更進一步提高，特別是對灌注有血液的脈管組織成像時。因此，需要改進超聲技術，包括改進造影劑，它能夠對脈管系統和與血管相關的器官產生醫學上有用的圖象。液-氣界面對聲波的反射極為有效。因此，泡囊(包括充氣泡)作為造影劑是有用的。本文使用的「泡囊」是指微泡，它通常是以存在有一種或多種圍繞著內腔的膜或壁為特徵，內腔中填充有氣體或氣體前體。泡囊的例子包括，例如脂質體、膠粒等。如下文更進一步討論的那樣，泡囊作為造影劑的有效性取決於各種因素，包括如泡囊的尺寸和/或彈性。關於泡囊尺寸的作用，進行如下討論。本領域技術人員已經知道，泡囊反射的信號是泡囊半徑(r6)的函數(瑞利散射)。因此，在診斷超聲的頻率範圍內，直徑為4微米(μm)的泡囊的散射能力大約為直徑2微米泡囊的64倍。因此，通常說，泡囊越大，反射的信號越強。然而，泡囊的尺寸受到泡囊必須通過毛細管的直徑的限制。通常，含有直徑大於10微米泡囊的造影劑是危險的，因為微血管可被閉塞。因此，需要造影劑中有超過99％的泡囊的直徑小於10微米。泡囊的平均直徑也是重要的，應當大於1微米，優選大於2微米。泡囊的體積稱重平均直徑應當約為7-10微米。泡囊的彈性也是重要的。這是因為高彈性的泡囊可以變形，如果需要，從而「壓縮」通過毛細管和/或泡囊周圍允許血液流過，這可減少閉塞的可能性。含有泡囊的造影劑的有效性也取決於泡囊的濃度。一般地，泡囊濃度越高，造影劑的反射性越大。另一個與泡囊造影劑有效性相關的重要特性是泡囊的穩定性。如本文所述，特別是充氣泡，「泡囊的穩定性」是指在暴露於高於大氣壓的壓力下之後泡囊保留所包裹的氣體的能力。作為有效的造影劑，泡囊通常需要在暴露於300毫米(mm)汞柱(Hg)壓力下約1分鐘保留大於50％的包裹氣體。特別有效的泡囊是在暴露於300mmHg壓力下1分鐘後保留75％的包裹氣體，包裹90％氣體的泡囊是特別有效的造影劑。除去壓力之後，泡囊恢復其原有尺寸也是非常需要的。這通常稱作「泡囊的彈性」。缺乏所需穩定性的泡囊是不良的造影劑。例如，如果泡囊在體內釋放其包裹的氣體，反射性就會減弱。類似地，具有差的彈性的泡囊的尺寸在體內會減小，也導致反射性減弱。現有技術中公開的泡囊的穩定性通常對於用作造影劑來說是不足的。例如，現有技術公開了泡囊(包括充氣脂質體)，它含有含類脂的壁或膜。參見Ryan等的美國專利4,900,540和4,544,545；Tickner等的美國專利4,276,885；Klaveness等的WO93/13809和Schneider等EP0554213和WO91/15244。Lanza等在WO93/20802中公開了聲學反射寡層脂質體，它是可增加兩層之間水的空間的多層脂質體或是以非濃縮形式套入兩層內的脂質體，並因此包含內部分離的雙層；該文獻也描述了將其用作超聲造影劑以增強超聲成像及檢測給予病人的脂質體中藥物的釋放情況。D′Arrigo在美國專利4,684,479和5,215,680中分別描述了氣/液乳劑和類脂包裹的泡囊。公開在現有技術中的許多泡囊具有不理想的穩定性，因此現有技術的泡囊在體內很可能導致破裂，例如過早地釋放包含在其中的治療劑和/或診斷劑。人們進行了各種研究，試圖改進泡囊的穩定性。這些研究包括，例如，製備膜或壁中含有蛋白質(如白蛋白)或通過交聯明顯增加強度的材料的泡囊。如，參見Klaveness等WO92/17212，其中公開了含有用生物可降解的交聯劑交聯的蛋白質的泡囊。Moseley等在1991年於Napa，CaliforniameetingoftheSocietyforMagneticResonanceinMedicine上進行了介紹，其摘要的題目是「泡囊一種新的MR敏感性造影劑」。Moseley等描述的泡囊含有用人白蛋白殼包裹的空氣。另外，泡囊膜可含有不是蛋白質但用生物相容的交聯劑交聯的化合物。參見Klavenss等的WO92/17436、WO93/17718和WO92/21382。穩定泡囊的現有技術(包括外膜中使用蛋白質或使用膜組分)具有各種缺點。例如，上文所述的交聯通常包括新材料的使用，包括交聯的蛋白質或其它化合物，其代謝結果是未知的。另外，交聯需要另外的化學步驟，包括分離和純化交聯的化合物。而且，使用蛋白質(如白蛋白)泡囊膜和交聯的泡囊膜成分賦予了泡囊壁剛性。這會導致泡囊的彈性降低，從而降低了變形和通過毛細管的能力。因此，現有技術含有蛋白質和/或交聯材料的造影劑極有可能閉塞血管。因此，需要探索新的和/或更好穩定性的造影劑及其製備方法。本發明涉及此項研究以及達到其它重要的目的。發明概要本發明部分涉及用於診斷成像的造影劑。具體地，在一個實施方案中，本發明提供了一種用於診斷成像的造影劑，該造影劑含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明的另一實施方案涉及靶向組合物，該組合物含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明的再一實施方案涉及泡囊組合物，該組合物在含水載體中包含含有與靶向配位體結合的類脂、聚合物或蛋白質和氣體的泡囊，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明的另一實施方案涉及靶向泡囊組合物，該組合物包含含有與靶向配位體結合的氟化氣體的泡囊，其中所述的靶向配位體靶向組織或受體。本發明還有一個實施方案涉及用於治療或診斷的製劑，與生物活性劑結合的該製劑含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明的再一實施方案涉及製備靶向組合物的方法，該方法包括將類脂、蛋白質或聚合物、氣體和靶向配位體結合在一起，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明的另一實施方案涉及製備用於診斷或治療的製劑的方法，該方法包括將生物活性劑和一組合物結合在一起，該組合物包含與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明還有一個實施方案涉及一種靶向組合物，該組合物是通過將類脂、蛋白質或聚合物、氣體和靶向配位體結合在一起製備的，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明的再一實施方案涉及用於製得或治療的靶向製劑，該製劑是通過將生物活性劑和一組合物結合在一起製備的，該組合物包含與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明還有一個實施方案涉及提供患者內部區域成像的方法，該方法包括(I)給患者服用靶向組合物，該組合物包含與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(II)利用超聲掃描患者以獲得可見的區域影像。本發明的另一實施方案涉及提供患者內部區域影像的方法，該方法包括(I)給患者服用泡囊組合物，該組合物在含水載體中包含含有與靶向配位體結合的類脂、聚合物或蛋白質和氣體的泡囊、其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(II)利用超聲掃描患者以獲得可見的區域影像。本發明的再一實施方案涉及診斷患者疾病組織存在的方法，該方法包括(I)給患者服用靶向組合物，該組合物包含與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配立體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(II)利用超聲掃描患者以獲得患者任何疾病組織的可見影像。本發明還有一個實施方案涉及診斷患者疾病組織存在的方法，該方法包括(I)給患者服用泡囊組合物，該組合物在含水載體中包含含有與靶向配位體結合的類脂、聚合物或蛋白質和氣體的泡囊，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(II)利用超聲掃描患者以獲得患者任何疾病組織的可見影像。本發明的另一實施方案涉及體內治療性傳遞生物活性劑的方法，該方法包括給患者服用治療有效量的製劑，與生物活性劑結合的該製劑含有靶向組合物，該組合物含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。本發明的另一實施方案提供了下式化合物其中各X1獨立地為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR4-、-X4-C(＝X5)-、-C(＝X5)-X4-或-C(＝X5)-；各X2和X3獨立地為直接的鍵、-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4、-X4-C(＝X5)-R5-、-C(＝X5)-X4-R5-、-X4-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-C(＝X5)-R5-C(＝X5)-X4-或-R5-C(＝X5)-X4-R5-X4-C(＝X5)-；各X4獨立地為-O-、-NR4-或-S-；各X5獨立地為O或S；M為-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-或-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-R5-；Y為氫或可藥用抗衡離子；Z為親水聚合物；Q為靶向配位體或另外的前體；各R1獨立地為含1至約50碳的烷基；各R2獨立地為含1至約30碳的亞烷基；各R3和R4獨立地為氫或含1至約10碳的烷基；各R5獨立地為直接的鍵或含1至約30碳的亞烷基。本發明還有一個實施方案涉及下式化合物L-P-T其中L為類脂、蛋白質或聚合物；P為親水聚合物；和T為靶向配位體。通過下文詳細的說明，本發明的這些方面及其它方面會變得更加清楚。發明詳述正如上文及整個公開文本中所使用的，除非另有指明，下列術語將被理解為具有下列含義。「類脂」是指通常為兩性和生物相容的合成或天然存在的化合物。類脂典型地含有親水成分和疏水成分。類脂的實例包括脂肪酸、中性脂肪、磷脂、糖脂、表面活性劑、脂肪醇、石蠟、萜烯和類固醇。「類脂組合物」是指典型地在含水介質中含有類脂化合物的組合物。類脂組合物的實例包括懸浮液、乳劑和泡囊組合物。「類脂製劑」是指還含有生物活性劑的類脂組合物。「泡囊」是指通常特徵在於存在能夠形成一個或多個內部空隙的一個或多個壁或膜的球體。例如，泡囊可由類脂(包括這裡描述的各種類脂)、蛋白質材料或聚合物材料(包括中性、合成和半合成的聚合物)形成。優選的泡囊是指那些含有由類脂形成的壁或膜的泡囊。在這些優選的泡囊中，類脂可以是單層或雙層形式，單層或雙層類脂可用於形成單層或雙層泡囊。在一個以上單層或雙層的情況下，單層或雙層通常是同軸的。因此，類脂可用於形成單一疊層泡囊(包含一個單層或雙層)、低聚疊層泡囊(包含大約兩個或大約三個單層或雙層)或多個疊層泡囊(包含大於大約三個單層或雙層)。類似地，由蛋白質或聚合物製得的泡囊可包含一個或多個同軸壁或膜。由蛋白質或聚合物製得的壁或膜基本上可以是固體(均質)，它們或者是多孔或半多孔。這裡描述的泡囊通常是指如脂質體，膠束，水泡，微泡，泡囊，類脂、聚合物和/或蛋白質塗層的水泡、微泡和/或泡囊，泡囊，氣溶膠，籠形結合泡囊等等。根據需要，泡囊內部的空隙可由液體(如包括含水液體)、氣體、氣體前體和/或固體或溶質材料填充，例如包括靶向配位體和/或生物活性劑。「脂質體」通常是指兩性化合物的球形簇束或聚集體，包括類脂化合物，所述化合物典型地為一層或多層同軸層，如雙層。它們在這裡也可指類脂泡囊。由非離子類脂形成的脂質體也可以是指「niosomes」。「膠束」是指由類脂形成的膠體。在有些優選的方案中，膠束包含單層或六方形H2相構型。在其它優選的方案中，膠束可包含雙層構型。「氣溶膠」通常是指以具有許多小的內部空隙為特徵的球體。氣溶膠可由合成材料(如由間苯二酚和甲醛製得的泡沫塑料)形成，也可由天然材料如多糖或蛋白質形成。「籠形物」是指與泡囊有關的固體、半多孔或多孔顆粒。在優選的方案中，籠形物可以形成含由泡囊組成的空洞的籠形結構。如果需要的話，可將穩定劑與籠形物相結合，從而促進泡囊與籠形物的結合。例如，可形成籠形物的適宜材料包括多孔磷灰石如羥基磷灰石鈣，以及聚合物和金屬離子的沉澱物如與鈣鹽沉澱的藻酸。本發明的泡囊優選含有氣體或氣體前體。「充填氣體的泡囊」是指包封氣體的泡囊，而「充填氣體前體的泡囊」是指包封氣體前體的泡囊。泡囊可最小地、部分地或基本上完全地被氣體和/或氣體前體填充。在有些優選的實施方案中，泡囊基本上完全被氣體和/或氣體前體填充。在氣體和/或氣體前體填充的泡囊中所使用的術語「基本上」是指泡囊內部空隙體積中大於大約50％是由氣體組成。優選泡囊內部空隙體積中大於大約60％基本上是由氣體組成，大於大約70％更優選；甚至更優選泡囊內部空隙體積中大於大約80％基本上是由氣體組成，大於大約90％還要更優選；在一個特別優選的實施方案中，泡囊內部空隙體積中大於大約95％是由氣體組成，大約為100％尤其優選。儘管不在本發明的優選實施方案考慮之列，但如果需要的話，泡囊可不含有或基本上不含有氣體或氣體前體。「泡囊組合物」是指典型地在含水介質中包含泡囊的組合物。「包囊製劑」是指還含有生物活性劑的泡囊組合物。例如，用於泡囊製劑的適宜泡囊或泡囊類包括充填氣體的泡囊和充填氣體前體的泡囊。乳劑」是指兩種或多種液體的類脂混合物，而且通常以膠體形式存在。類脂可非均勻地分散在乳劑中。另外，類脂可以如簇束或層(包括單層或雙層)形式存在。「懸浮液」是指飄浮在液體中的細分液體或固體顆粒的混合物，該混合物可在延長的時間內保持穩定。「六方形HII相結構」一般是指液體介質(如含水介質)中的管形聚集體，其中類脂的親水部分通常與管內的液體環境具有內在的關係。類脂的疏水部分一般向外發射，配合物呈現六方管的形狀。在六方相結構中，一般將許多管包裝在一起。「患者」是指動物，包括哺乳動物，特別是入。短語「患者的內部區域」和「感興趣的區域」是指整個患者或患者的特別區域或部位。患者的內部區域及感興趣區域可包括如利用診斷成像造影的區域和/或利用生物活性劑處理的區域。這類區域的實例包括如心臟區域(包括心肌組織)以及其它身體組織(包括脈管系統和循環系統以及腫瘤組織)。這裡使用的短語「脈管系統」是指身體中或器官中或部分身體中的血管。「生物活性劑」是指可用作治療劑和診斷劑的物質，例如在診斷病人是否存在某種疾病的方法中和/或在治療病人疾病的方法中應用的物質。本文所使用的「生物活性劑」也指能夠在體外和/或體內發揮生物作用的物質。生物活性劑可以是中性的或帶正電荷的或帶負電荷的。適宜的生物活性劑的實例包括診斷劑、藥物、合成的有機分子、蛋白質、肽、維生素、載體化合物和遺傳物質，該遺傳物質包括核苷、核苷酸和多核苷酸。「診斷劑」是指可在使病人內臟器官成像和/或診斷病人是否存在某種疾病的方法中使用的任何試劑。例如，診斷劑的實例包括在超聲、核磁共振或計算機化斷層X射線照相法中應用的造影劑，例如，它包括脂本文所描述的類脂和/或泡囊組合物。本文所使用的「聚合物」是指由一個或多個重複單位化合形成的分子。因此，例如，術語「聚合物」可以為二聚物、三聚物和低聚物。聚合物可以為合成的、天然存在的或半合成的。在優選的形式中，術語「聚合物」指包含10個或多個重複單位的分子。「增稠劑」是指各種通常為親水性的物質，當將其與本文所描述的類脂和/或泡囊組合物混合時，該物質可發揮粘度調節劑、乳化劑和/或助溶劑、懸浮劑和張力增加劑的作用。我們希望由於該特性，增稠劑能夠有助於維持組合物的穩定性。「分散劑」是指表面活性劑，當將其加到膠體微粒(例如包括本文所描述的某些類脂和/或泡囊組合物)的懸浮介質中時，該物質可促進微粒的均勻分離。在某些優選實例中，分散劑可包含極好的矽氧烷化合物。「遺傳物質」通常是指核苷酸和多核苷酸，包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。遺傳物質可通過本領域普通技術人員已知的合成化學方法，或通過重組技術，或通過聯合使用兩種方法來製備。NDA和RNA可包含或不包含非天然核苷酸並且可以為單鏈的或雙鏈的。「遺傳物質」也指有意義和反意義DNA和RNA，即，與DNA和/或RNA的特定核苷酸序列互補的核苷酸序列。「藥物」是指可用於治療(包括預防、診斷、減輕或治癒)病人疾病的任何治療劑或預防劑。在治療上有用的肽、多肽和多核苷酸可包括在術語藥物的含義內。「穩定劑」是指生物相容性的並且能夠促進泡囊在類脂組合物中形成的物質。本文所使用的「穩定劑」也指生物相容性的並且能夠改善泡囊穩定性的物質。在某些優選實例中，穩定劑包含聚合物。本文所使用的「聚合物」是指由兩個或多個重複單位化合形成的分子。因此，例如，術語「聚合物」包括二聚物、三聚物和低聚物。在其它某些優選的實例中，穩定劑包含非聚合物質，例如包含單體物質。「穩定劑」也包括某些本發明生物活性劑。穩定劑可以是中性的或帶正電荷的或帶負電荷的。優選的中性穩定劑為極性物質。在涉及類脂的優選實例中，穩定劑可以通過共價鍵和/或非共價鍵與類脂化合物連接。「泡囊穩定性」是指填充氣體的泡囊在大約300mmHg下暴露大約1分鐘後，保留其中所包封氣體的能力。測定泡囊穩定性並用百分數(％)表示，它是最初包封在泡囊中並且在解除壓力後所保留的那部分氣體量。泡囊穩定性也與「泡囊彈性」有關，它是指在解除壓力後泡囊恢復到其原來尺寸的能力。「共價結合」是指分子間結合，它涉及在兩個原子的結合軌道上共用電子。「非共價結合」是指在兩個或多個獨立的分子間發生的分子間相互作用，它不涉及共價鍵。分子間相互作用依賴於各種因素，例如包括所涉及分子的極性(如果有的話)和所涉及分子的電荷(正電荷或負電荷)等等。優選地，非共價鍵結合選自離子相互作用，偶極-偶極相互作用和範德華力及其混合作用。「離子相互作用」或「靜電相互作用」是指在兩個或多個分子間的分子間相互作用，其中，各分子是帶正電荷的或帶負電荷的。因此，例如「離子間相互作用」或「靜電相互作用」是指在第一個帶正電荷的分子和第二個帶負電荷的分子之間的引力。例如，離子或靜電相互作用包括在帶負電荷的穩定劑，例如遺傳物質，以及帶正電荷的類質，例如，陽離子類脂如月桂醯基三甲基溴化銨。「偶極-偶極相互作用」通常是指發生在兩個或多個極性分子間的引力。因此，「偶極-偶極相互作用」是指不帶電荷的，局部帶正電荷的第一個極性分子(通常稱作δ+)和不帶電荷的，局部帶負電荷的第二個極性分子(通常稱作δ-)之間的引力。例如偶極-偶極相互作用的實例為磷脂醯膽鹼帶正電荷的首基，例如，膽鹼首基和帶負電荷的原子，例如雜原子，如，在穩定劑如多糖中存在的氧，氮或硫之間的引力。「偶極-偶極相互作用」也指分子間的氫鍵，其中，氫原子作為帶負電荷原子間的橋對獨立的分子發揮作用並且其中氫原子通過共價鍵佔據第一個分子和通過靜電力佔據第二個分子。「範德華力」是指非極性分子間的引力，它通過量子力學計算。範德華力通常與相鄰分子誘導的瞬間偶極有關並且涉及電子分布的改變。「氫鍵」是指引力或電橋，它可發生在通過共價鍵結合到帶負電荷原子(例如氧，硫，氮等等)上的氫原子和另一帶負電荷的原子之間。氫鍵可以發生在第一個分子的氫原子和第二個分子的帶負電荷原子之間(分子間氫鍵)。氫鍵也可以發生在一個分子所包含的氧原子和帶負電荷的原子之間(分子內氫鍵)。「親水性相互作用」是指可基本上結合，吸收和/或溶解在水中的分子或部分分子。「生物相容」是指通常對生物功能無損害並且不產生任何程度不適宜的毒性，包括過敏反應和疾病狀態的物質。在某些實例中，「與……結合」是指在本發明組合物，包括在類脂組合物和泡囊組合物中合併靶向配位體。「與……結合」也指在本發明組合物，包括在類脂組合物和泡囊組合物中合併生物活性劑。生物活性劑和/或靶向配位體可以與本發明組合物以任何方式結合。例如，在類脂組合物中，生物活性劑和/或靶向配位體可以通過共價鍵和/或非共價鍵與類脂化合物或穩定劑，也可以不與穩定劑結合。在泡囊組合物中，生物活性劑和/或靶向配位體可以包封在泡囊的內部空間。例如，生物活性劑和/或靶向配位體也可以通過在泡囊壁內所包含的類脂之間散布而結合在泡囊壁內。另外，希望將生物活性劑和/或靶向配位體設置在泡囊的表面。在任何情況下，生物活性劑和/或靶向配位體可通過化學方法與泡囊壁，例如包括泡囊的內壁和/或外壁相互作用並且可基本上保留在泡囊壁上。例如，該相互作用可採取共價鍵結合和/或非共價鍵結合的形式。在某些實例中，相互作用可使泡囊穩定。「靶向配位體」是指可以促進本發明組合物與體內組織和/或受體靶向結合的物質。靶向配位體可以是合成的、半合成的或天然存在的。例如，可作為靶向配位體的物質包括蛋白質包括抗體，糖蛋白和外源凝集素，肽，多肽，糖類包括單糖和多糖，維生素，甾體化合物，甾體化合物類似物，激素，輔助因子，生物活性劑和延長物質，包括核苷，核苷酸和多核苷酸。靶向配位體的「前體」是指可轉化為靶向配位體的物質。例如，該轉化可能涉及將前體與靶向配位體結合。靶向前體部分的實例包括馬來醯亞胺基、二硫基如鄰吡啶基二硫基、乙烯碸基、疊氮基和α-吲哚乙醯基。「肽」是指可包含大約20-100個胺基酸基的含氮化合物。「蛋白質」是指可包含大約100個以上胺基酸基含氮化合物。「包衣」或「塗層」是指穩定劑與類脂和/或泡囊的相互作用並且可涉及共價鍵和/或非共價鍵結合。「組織」通常指可完成特定功能的專有細胞。已知，本文所使用的術語「組織」可以指各個細胞或大量細胞或細胞的聚集體，例如，膜或器官。術語「組織」也包括某個異常細胞或大量異常細胞。例如，組織的實例包括心肌組織(也指心臟組織或心肌)，包括心肌細胞和心肌細胞；膜組織，包括內皮和上皮；層狀體；結締組織，包括間質組織；以及腫瘤。「受體」指在細胞內或細胞表面上的分子結構，一般地，其特點為選擇性地與特定物質結合。例如，受體的實例包括供肽激素，神經遞質，抗原，補體碎片和免疫球蛋白結合的細胞表面受體和供甾體激素結合的細胞質受體。本發明範圍內的受體實例為糖蛋白GPIIbIIIa，它是血小板整聯蛋白。「內皮細胞」或「內皮」中細胞和/或組織的聚集體，所述組織可以是正常的和/或生病的並且可以包含單層扁平透明的內皮細胞，該層細胞可以以邊對邊的方式或以重疊的方式連接形成膜。可見，內皮細胞在漿膜的表面，作為心臟內膜、血管和淋巴管的一部分，在腦和脊髓的表面和在眼的前房中。內皮起源於胚胎的中胚層並且包括心臟組織，包括梗塞的心臟組織，心血管系統，外周血管系統，如動脈、靜脈和毛細血管(血管的位置處於心臟的外周)，血凝塊和動脈粥樣硬化斑周圍的區域。「上皮細胞」或「上皮」中細胞和/或組織的聚集體，所述組織可以是正常的和/或生病的並且可以包含一層或多層細胞，所述細胞可以通過支撐在基膜上的游離膠質物質連接在一起。內皮可以分成各種類型、例如包括單層細胞(簡單的內皮)；大於一層的細胞(分層內皮)；和基本上固定在一起，不顯示分層現象的3-4層細胞。不同形式的簡單內皮通常指鱗狀的、鋪壁的、圓柱形的、含腺的、球狀的和/或有纖毛的。內皮起源於胚胎的中胚層或下胚層。內皮包括心臟組織，包括梗塞的心臟組織，心血管系統，外周血管系統，如動脈、靜脈和毛細血管、血凝塊和動脈粥樣硬化般周圍的區域。「心肌」通常指心臟組織，包括心肌細胞，心肌，內皮和上皮細胞。術語「心肌」包括梗塞的心臟組織，心血管系統，外周血管系統，如動脈、靜脈和毛細血管(血管的位置在心臟的外周)，血凝塊，血栓和動脈粥樣硬化斑周圍的區域。「腫瘤細胞」或「腫瘤」指異常細胞和/或組織的聚集體，所述組織可能與疾病狀態有關，其特點是不受控制的細胞增殖。疾病狀態可涉及各種細胞類型，例如包括扁平，上皮和心肌細胞。疾病狀態包括腫瘤，癌症，白血病和再狹窄損傷。「烷基」指直鏈，支鏈或環狀烴基。優選地，烷基為直鏈或支鏈烴基，更優選直鏈烴基。例如，支鏈或直鏈烴基的實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、正戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基。環狀烴基(即環烷基)的實例包括環戊基、環己基和環庚基。「鏈烯基」指至少含一個碳-碳雙鍵的烷基。例如鏈烯基的實例包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、癸烯基和十二碳烯基。「烷氧基」指烷基-O-基，其中烷基如上所述。例如烷氧基的實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和庚氧基。在某種程度上，本發明的目的是提供類脂和/或泡囊組合物。所述組合物的實例包括類脂組合物，它包含類脂、靶向配位體和氣體或氣體的前體，其中所述靶向配位體可以是體內的靶組織、細胞和/或受體並且可以通過連接基連接到類脂上。所述組合物的實例也包括泡囊組合物，它在含水載體中包含有類脂，蛋白質或聚合物組成的泡囊，靶向配位體和氣體或氣體前體，其中，所述靶向配位體可以是體內的靶組織、細胞和/或受體在後面的實例中，靶向配位體可以通過連接基連接到泡囊上，包括構成泡囊的類脂、蛋白質或聚合物。就類脂組合物，並且特別是泡囊形式的類脂組合物而言，在低於所涉及類脂的凝膠-液晶相轉變溫度下製備類脂組合物是有利的。該相轉變溫度是指類脂雙層將由凝膠狀態轉化為液晶狀態的溫度。例如，見Chapnan等，J.Biol.Chem.1974249，2512-2521。通常認為，由凝膠狀態-液晶狀態相轉變溫度高的類脂製備的泡囊在任何特定溫度下的不透性增強。見DerekMarsh，CRCHandbookofLipidBilayers(CRCPress，BocaRaton，FL1990)，139頁，關於飽和的二醯基-sn-甘油基-3-膽鹼磷酸的主鏈解鏈轉變。本領域技術人員將很容易獲得各種類脂的凝膠狀態-液晶狀態相轉變溫度並且例如在LiposomeTechnology，Vol.I，1-18(CRCPress，1984)中描述。下表列出了某些有代表性的類脂及其相轉變溫度。表1飽和的二醯基-sn-甘油基-3-膽鹼磷酸主鏈解鏈轉變溫度例如，見DerekMarsh.CRCHandbookofLipidBilayers.139頁(CRCPress.BocaRaton，FL1990)。通過將至少少量，例如大約為所使用類脂總量1-10摩爾％的負電荷類脂混合到本發明類脂和/或泡囊組合物中，可以提高泡囊的穩定性。例如適宜的負電荷類脂包括磷脂醯絲氨酸、磷脂酸和脂肪酸。不受任何工作理論的約束的條件下，該負電荷類脂可通過抑制泡囊因融合在一起引起破裂的趨勢來提高泡囊的穩定性。因此，負電荷類脂通過在泡囊的外表面建立均勻的負電荷層發揮作用，其中，所述負電荷層將受到在其它類似泡囊上的、類似的負電荷層的排斥。在該方法中，泡囊彼此接近的機會減少，泡囊彼此接近可導致膜或各泡囊皮的破裂和將所接觸的泡囊合併成一個大泡囊。當然，該合併方法的繼續將導致明顯的泡囊降解。特別是就泡囊組合物而言，所使用的類脂物質也優選為柔韌的。這在本發明範圍內就意味著，泡囊可通過改變其形狀而通過直徑小於泡囊直徑的孔。據信，多種類脂適宜於混合到類脂組合物中。特別就泡囊組合物而言，可使用膠束和/或脂質體，以及本領域技術人員已知可適用於泡囊製備的任何物質及其組合物。所使用的類脂可以是天然的、合成的或半合成的類脂。如上所述，例如適宜的類脂通常包括脂肪酸、天然脂肪、磷脂、糖脂、脂族醇和蠟、萜烯和甾體化合物。例如，可用於製備本發明類脂組合物的類脂實例包括脂肪酸、溶血類脂、膽鹼磷酸、如與血小板激活因子(PAF)有關的物質(AvantiPolarLipids，Alabaster.AL)，包括1-烷基-2-乙醯基-sn-甘油基3-膽鹼磷酸和1-烷基-2-羥基-sn-甘油基3-膽鹼磷酸，它們以血凝塊作為靶；含飽和和不飽和類脂的磷脂醯膽鹼，包括二油醯磷脂醯膽鹼、二十四醯磷脂醯膽鹼、二十五醯磷脂醯膽鹼、二十二醯磷脂醯膽鹼、二棕櫚醯膽鹼(DPPC)、二硬脂醯膽鹼(DSPC)和二花生四烯醯基磷脂醯膽鹼(DAPC)、磷脂醯乙醇胺(如二油醯磷脂醯乙醇胺、二棕櫚醯乙醇胺(DPPE)和二硬脂醯乙醇胺(DSPE))、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯甘油(包括二硬脂醯磷脂醯甘油(DSPG))、磷脂醯肌醇、鞘類磷脂(如鞘磷脂)、糖酯(如神經節甙酯GM1和GM2)、葡萄糖酯、硫脂類、糖鞘類磷脂、磷脂酸(如二棕櫚醯磷脂酸(DPPA)和二硬脂醯磷脂酸(DSPA))、棕櫚酸、花生四烯酸、油酸、載有多聚體的類脂(如甲殼質、透明質酸、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇(PEG))，本文中作為「聚乙二醇化類脂」也指優選的載有多聚體的類脂，它包括二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺-聚乙二醇(DPPE-PEG)，是指具有與其連接的PEG聚合物的類脂DPPE，包括，如DPPE-PEG5000，是指連接平均分子量約5000的PEG聚合物的二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺聚合物、載有磺化的單-、雙、寡或多糖的類脂，膽固醇、硫酸膽固醇酯和半琥珀酸膽固醇酯，半琥珀酸生育酚，具有連接脂肪酸的醚和酯的類脂，聚合的類脂(現有技術中各種各樣已知的)，磷酸二乙醯酯，磷酸雙二十六醇酯，硬脂醯胺，心磷胺，具有6-8個碳原子長度的短鏈脂肪酸的磷脂，具有不對稱醯基鏈(如一個為6個碳原子的醯基鏈而另一個為12個碳原子的醯基鏈)的合成磷脂，神經醯胺，包括niosome的非離子脂質體如，聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯化的脫水山梨糖醇脂肪酸酯、羥基硬脂酸甘油聚乙二醇酯、蓖麻醇酸甘油聚乙二醇酯、乙氧化大豆甾醇、乙氧化蓖麻油聚氧乙烯-聚氧丙烯聚合物和硬脂酸聚氧乙烯脂肪酸酯，甾醇脂肪酸酯包括硫酸膽甾醇酯、丁酸膽甾醇酯、異丁酸膽甾醇酯、棕櫚酸膽甾醇酯、硬脂酸膽甾醇酯、乙酸羊毛甾醇酯、棕櫚酸麥角甾醇酯和正丁酸值物甾醇酯，糖酸甾醇酯包括葡糖苷酸膽甾醇酯、葡糖苷酸羊毛甾醇酯、匍糖苷酸7-去氫膽甾醇酯、匍糖苷酸麥角甾醇酯、葡糖酸膽甾醇酯、葡糖酸羊毛甾醇酯和匍糖酸麥角甾醇酯，糖酸和醇的酯包括匍糖苷酸十二酯、匍糖苷酸十八酯、葡糖苷酸十四酯、葡糖酸十二酯、匍糖酸十四酯和葡糖酸十八酯，糖和脂肪酸的酯包括十二酸蔗糖酯、十二酸果糖酯、棕櫚酸蔗糖酯、硬脂酸蔗糖酯、匍糖苷酸、匍糖酸、和多糖醛酸，皂草苷包括菝葜皂苷配基、異菝葜皂苷配基常春配基齊墩果酮酸和洋地黃毒苷配基，二月桂酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、二棕櫚酸甘油酯、甘油和甘油酯包括三棕櫚酸甘油酯二硬脂酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、二肉豆蔻酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯，長鏈醇包括正癸醇、十二醇、十四醇、十六醇和正十八醇，6-(5-膽甾烷-3β-基氧基)-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖甙，二半乳糖二甘油酯，6-(5-膽甾烷-3β-基氧基)己基-6-氨基-6-脫氧-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖甙，6-(5-膽甾烷-3β-基氧基)己基-6-氨基-6-脫氧-1-硫代-α-D-吡喃甘露糖甙，12-(((7′-二乙基氨基香豆素-3-基)羰基)甲基氨基)十八酸，N-〔12-(((7′-二乙基氨基香豆素-3-基)羰基)甲基氨基)十八醯基〕-2-氨基棕櫚酸，(4′-三甲基氨基)丁酸膽甾烷酯，N-琥珀醯基二油醯磷脂醯乙醇胺，1，2-二油醯-sn-甘油，1，2-二棕櫚醯-sn-3-琥珀醯甘油，1，3-二棕櫚醯-2-琥珀醯甘油，1-十六烷基-2-棕櫚醯甘油二氧磷基乙醇胺和棕櫚醯高半胱氨酸和/或它們的組合物。如果需要，可以使用陽離子類脂，例如，N-〔1-(2，3-二油醯氧基)丙基〕-N，N，N-三甲基銨氯化物(DOTMA)、1，2-二油醯氧基-3-(三甲基氨基)丙烷(DOTAP)和1，2-二油醯-3-(4′-三甲基氨基)-丁醯-sn-甘油(DOTB)。如果在類脂組合物中使用陽離子類脂，陽離子類脂與非陽離子類脂的摩爾比約為1∶1000-1∶100。優選地，陽離子類脂與非陽離子類脂的摩爾比約為1∶2-1∶10，約為1∶1-1∶2.5是優選的。甚至更優選陽離子類脂與非陽離子類脂的摩爾比約為1∶1。在同時含有陽離子和非陽離子類脂的類脂組合物的情況下，各種類脂可用作非陽離子類脂。優選地，該非陽離子類脂包括一種或多種DPPC、DPPE和二油醯磷脂醯乙醇胺。作為上文所列陽離子類脂的替代物，在本發明的類脂組合物中也可以使用載有陽離子聚合物的類脂，如聚賴氨酸或聚精氨酸以及烷基磷酸酯、烷基次磷酸酯和烷基亞磷酸酯。在本發明的某些優選的實施方案中，類脂組合物可包括下式的一種或多種陽離子類脂其中，處x，y和z獨立地為0-約100的整數；各X1獨立地為-O-、-S-、NR5-、-C(＝X2)-、-C(＝X2)-N(R5)-、-N(R5)-C(＝X2)-、-C(＝X2)-O-、-O-C(＝X2)-或-X2-(R5X2)P(＝X2)-X2-；各X2獨立地為O或S；各Y1獨立地為磷酸根、N(R6)a-、S(R6)a-、P(R6)a-或-CO2R6，其中a為1-3的整數；各Y2獨立地為-N(R6)b-、-S(R6)b-或-P(R6)b-，其中b為0-2的整數；各Y3獨立地為磷酸根、N(R6)a-、S(R6)a-、P(R6)a-或-CO2R6，其中a為1-3的整數；各R1、R2、R3和R4獨立地為1到大約20個碳的亞烷基；各R5獨立地為氫或1到大約10個碳的烷基；並且各R6獨立地為-[R7-X3]c-R8或-R9-[X4-R10]d-Q，其中各c和d獨立地為0-約100的整數；各Q獨立地為磷酸根、-N(R11)q、-S(R11)q、-P(R11)q或-CO2R6，其中q為1-3的整數；各X3和X4獨立地為-O-、-S-、NR5-、-C(＝X2)-、-C(＝X2)-N(R5)-、-N(R5)-C(＝X2)-、-C(＝X2)-O-、-O-C(＝X2)-或-X2-(R5X2)P(＝X2)-X2-；各R7獨立地為1到大約20個碳的亞烷基；各R8獨立地為氫或1到大約60個碳的烷基；各R9和R10獨立地為1到大約20個碳的亞烷基；並且各R11獨立地為-[R7-X3]c-R8或-R9-[X4-R10]d-W，其中各W獨立地為磷酸根、-N(R12)w、-S(R12)w、-P(R12)w或-CO2R6，其中w為1-3的整數；並且R12為-[R7-X3]c-R8，條件是式(I)化合物至少含一個並且優選至少含兩個季銨鹽。可併入本發明組合物中的另一陽離子類脂化合物為下式化合物其中各Y1獨立地為磷酸根、N(R2)a-、S(R2)a-、P(R2)a-或-CO2R6，其中a為1-3的整數；R1為1到大約60個碳的亞烷基，它包含0到大約30個-O-，-S-、NR3-或-X2-(R3X2)P(＝X2)-X2-雜原子或雜原子基；R2為-R4-[(X1-R5)x-Y2]y-R6，其中各x和y獨立地為0到大約100的整數；各X1獨立地為直接的鍵、-O-、-S-、NR3-、-C(＝X2)-、-C(＝X2)-N(R3)-、-N(R3)-C(＝X2)-、-C(＝X2)-O-、-O-C(＝X2)-或-X2-(R3X2)P(＝X2)-X2-；各X2獨立地為O或S；各Y2獨立地為-S(R2)b-、-N(R2)b-或-P(R2)b-，其中b為0-2的整數；各R3獨立地為氫或1到大約10個碳的烷基；各R4和R5獨立地為直接的鍵或1到大約30個碳的亞烷基，它包含0到大約15個-O-、-S-、NR3-或-X2-(R3X2)P(＝X2)-X2-雜原子或雜原子基；並且各R6獨立地為氫或1到大約60個碳的烷基，它包含0到大約30個-O-、-S-、NR3-或-X2-(R3X2)P(＝X2)-X2-雜原子或雜原子基；條件是式(II)化合物至少含一個並且優選至少含兩個季銨鹽。在另一實例中，本發明類脂組合物可包含下式陽離子類脂化合物其中各x、y和z獨立地為0到大約100的整數；各X1獨立地為-O-、-S-、NR5-、-C(＝X2)-、-C(＝X2)-N(R5)-、-N(R5)-C(＝X2)-、-C(＝X2)-O-、-O-C(＝X2)-或-X2-(R5X2)P(＝X2)-X2-；各X2獨立地為O或S；各Y1獨立地為-O-、-N(R6)a-、-S(R6)a-或-P(R6)a-，其中a為0-2的整數；各Y2獨立地為-N(R6)a-、-S(R6)a-或-P(R6)a-，其中a為0-2的整數；各Y3獨立地為磷酸根、N(R6)b-、S(R6)b-、P(R6)b-或-CO2R6，其中b為1-3的整數；各R1、R2、R3和R4獨立地為1到大約20個碳的亞烷基；各R5獨立地為氫或1到大約10個碳的烷基；並且各R6獨立地為-[R7-X3]c-R8或-R9-[X4-R10]d-Q，其中各c和d獨立地為0到大約100的整數；各Q獨立地為磷酸根、-N(R11)q、-S(R11)q、-P(R11)q或-CO2R11，其中q為1-3的整數；各X3和X4獨立地為-O-、-S-、NR5-、-C(＝X2)-、-C(＝X2)-N(R5)-、-N(R5)-C(＝X2)-、-C(＝X2)-O-、-O-C(＝X2)-或-X2-(R5X2)P(＝X2)-X2-；各R7獨立地為1到大約20個碳的亞烷基；各R8獨立地為氫或1到大約60個碳的烷基；各R9和R10獨立地為1到大約20個碳的亞烷基；並且各R11獨立地為-[R7-X3]c-R8或-R9-[X4-R10]d-W，其中各W獨立地為磷酸根、-N(R12)w、-S(R12)w、-P(R12)w或-CO2R12，其中w為1-3的整數；並且R12為-[R7-X3]c-R8；條件是式(III)化合物至少含一個並且優選至少含兩個季銨鹽。在未決美國申請No.08/391，938中闡述了上述陽離子類脂化合物，將該公開全文引入本文供參考。在某些優選實例中，類脂組合物包含磷脂，特別是DPPC、DPPE、DPPA、DSPC、DSPE、DSPG和DAPC(20個碳)中的一個或多個。另外，飽和的和不飽和的脂肪酸可用於本發明類脂組合物中並且所述脂肪酸可包括直鏈或支鏈形式的、優選含大約12個碳到大約22個碳的分子。也可以使用包含類異戊二烯單位和/或異戊二烯基的烴基。例如，適宜的飽和脂肪酸的實例包括月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸和硬脂酸。例如，可使用的適宜的不飽和脂肪酸包括樟烯酸、抹香鯨酸、肉豆蔻腦酸、棕櫚油酸、巖酸和油酸。例如，可使用的支鏈脂肪酸包括異月桂酸、異肉豆蔻酸、異棕櫚酸和異硬脂酸。除了由類脂製備的類脂組合物和/或泡囊組合物外，本發明實例也包括由蛋白質或其衍生物製備的泡囊。例如，Feinstein在美國專利4,572,203、4,718,433和4,774,958中和Cerny等在美國專利4,957,656中描述了由蛋白質製備的泡囊，它可用於製備本發明靶向泡囊。除了在上述專利中描述的泡囊外，根據本公開，其它蛋白質泡囊是本領域普通技術人員顯而易見的。除了由類脂和/或蛋白質製備的類脂組合物和/或泡囊組合物外，本發明實例也可以包括由聚合物製備的泡囊，所述聚合物可以是天然的、半合成的(改進的天然聚合物)或合成的聚合物。本文所使用的術語聚合物是指飽和兩個或多個重複單體單元，並且優選含10個或多個重複單體單元的化合物。本文所使用的術語半合成的聚合物是指以某種方式通過化學方法改進的天然聚合物。適用於本發明的天然聚合物的實例包括天然存在的聚糖。例如，該聚糖包括阿拉伯聚糖、果聚糖、巖藻聚糖、半乳聚糖、半乳糖醛喃、葡聚糖、甘露聚糖、木聚糖(例如菊粉)、果聚糖、巖藻依聚糖、交叉菜聚糖、galatocarolose、果膠酸、果膠，包括直鏈澱粉、支鏈澱粉、糖原、支鏈澱粉、纖維素。右旋糖酐、糊精、葡萄糖、聚葡萄糖、石臍素、聚乙醯氨基葡糖、瓊脂糖、膠質素、軟骨素、皮膚素、透明質酸、藻酸、黃原膠、澱粉和各種其它天然均聚物或雜聚物，如那些含一個或多個下列醛糖、酮糖、酸或胺的糖赤鮮糖、蘇糖、核糖、阿拉伯糖、木糖、來蘇糖、阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖、塔羅糖、赤鮮酮糖、核酮糖、木酮糖、阿洛酮糖、果糖、山梨糖、塔格糖、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、麥芽糖、纖維素二糖、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬醯胺、穀氨醯胺、天冬氨酸、穀氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、葡糖醛酸葡糖酸、葡糖二酸、半乳糖醛酸、甘露糖醛酸、葡糖胺、半乳糖胺和神經氨糖酸及其天然存在的衍生物。例如，適宜的聚合物包括蛋白質如白蛋白。半合成聚合物的實例包括羧甲基纖維素鈉、羥甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素和甲氧基纖維素。適用於本發明的合成聚合物的實例包括聚乙烯(如聚乙二醇、聚氧乙烯和聚對苯二甲酸乙二醇酯)、聚丙烯(如聚丙二醇)、聚氨基甲酸乙酯(如聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯氯和聚乙烯吡咯烷酮)、聚醯胺，包括尼龍、聚苯乙烯、聚乳酸、氟化烴、氟化碳(如聚四氟乙烯)和聚甲基丙烯酸甲酯及其衍生物。優選的是由單體製備的生物相容性合成聚合物或共聚物，所述單體包括丙烯酸、異丁烯酸、哌嗪、巴豆酸、丙烯醯胺、丙烯酸乙酯、異丁烯酸甲酯、異丁烯酸2-羥基乙酯(HEMA)、乳酸、乙醇酸、ε-己內酯、丙烯醛、氰基丙烯酸酯、雙酚A、表氯醇、羥基烷基丙烯酸酯、矽氧烷、二甲基矽氧烷、環氧乙烷、乙二醇、羥基烷基異丁烯酸酯、N-取代的內烯醯胺、N-取代的異丁烯醯胺、N-乙烯基-2-吡咯烷酮、2，4-戊二醇、乙烯基乙酸酯、丙烯氰、苯乙烯、對-氨基苯乙烯、對-氨基-苯基-苯乙烯、苯乙烯磺酸鈉、2-碸基乙基異丁烯酸鈉、乙烯基吡啶、異丁烯酸氨基乙酯、異丁烯醯氧三甲基氯化銨和聚亞乙烯基，乙基多官能團交聯的單體如N，N′-亞甲基二丙烯醯胺、乙二醇二異丁烯酸酯、2，2′-(對-苯二氧基)二乙基二異丁烯酸酯、二乙烯基苯、三烯丙胺和亞甲基二-(4-苯基異氰酸酯)，包括其混合物。優選的聚合物包括聚丙烯酸、聚乙烯亞胺、聚異丁烯酸、聚矽氧烷、聚二甲基矽氧烷、聚乳酸、聚(ε-己內酯)、環氧樹脂、聚環氧乙烷、聚乙二醇和聚醯胺(尼龍)聚合物。優選的共聚物包括聚亞乙烯-聚丙烯氰、聚亞乙烯-聚丙烯氰-聚異丁烯酸甲酯、聚苯乙烯-聚丙烯氰和聚d-1，丙交酯-乙交酯聚合物。優選的共聚物為聚亞乙烯-聚丙烯氰。根據本公開，其它適宜的生物相容性單體和聚合物是本領域技術人員顯而易見的。如上所述，本發明優選的類脂組合物也包括飽和氣體，如惰性氣體。氣體使類脂組合物的反射性增強，特別是對於將氣體包裹在泡囊中的泡囊組合物來說更是這樣。這可以增加其作為造影劑的功效。優選的氣體為惰性並且是生物相容的氣體，即對生物功能無損害的氣體。優選的氣體選自空氣、稀有氣體如氦、銣、超極化的氙、超極化的氬、超極化的氦、氖、氬和氙、二氧化碳、氮、氟、氧，含硫的氣體如六氟化硫和四氟化硫，氟化氣體如包括部分氟化的氣體或完全氟化的氣體。氟化氣體的實例包括碳氟化合物氣體如全氟化碳氣體及其化合物。順磁氣體如17O2可在類脂組合物中使用。在優選的實例中，氣體包括氟化的氣體。該氟化的氣體包括含一個或多個氟原子的物質。優選的氣體含一個以上的氟原子，全氟化碳(即完全氟化的碳氟化合物)是更優選的。優選地，全氟化碳氣體選自全氟甲烷、全氟乙烷、全氟丙烷、全氟丁烷、全氟戊烷、全氟環丁烷及其混合物。更優選地，全氟化碳氣體為全氟丙烷或全氟丁烷，全氟丙烷是特別優選的。另一優選的氣體是六氟化硫。再另一優選的氣體是七氟丙烷，包括1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷及其異構體、1，1，2，2，3，3，3-七氟丙烷。在本發明組合物中也可以使用不同類型氣體的混合物如全氟化碳氣體和另一類型氣體如空氣的混合物。根據本公開，其它氣體，包括上述舉例說明的氣體是本領域技術人員顯而易見的。在某些優選實例中，將氣體如空氣或全氟化碳氣體與液體全氟化碳如全氟戊烷、全氟己烷、全氟庚烷、全氟辛基溴(PFOB)、全氟萘烷、過氟十二烷靈、全氟辛基碘、全氟三丙基胺和全氟三丁基胺混合。也可以將氣體物質的前體加入類脂組合物中。該前體包括能夠在體內轉化為氣體的物質。優選的該氣體前體是生物相容性的並且在體內產生的氣體也是生物相容性的。適於在本文所描述的組合物中使用的氣體前體是對pH敏感的試劑。這些試劑包括，例如當暴露在中性或酸性pH條件下時，能夠放出氣體的物質。該pH敏感劑的實例包括下列酸的鹽，所述酸選自無機酸、有機酸及其混合物。碳酸(H2CO3)是適宜的無機酸實例，而氨基丙二酸是適宜的有機酸的實例。根據本公開，其它酸包括無機酸和有機酸是本領域技術人員顯而易見的。由鹽衍生的優選地氣體前體選自鹼金屬鹽、銨鹽及其混合物。更優選的所述鹽選自碳酸鹽、碳酸氫鹽、倍半碳酸鹽、氨基丙二酸鹽及其混合物。例如，由鹽衍生的適宜的氣體前體物質的實例包括碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鋰、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸鎂、碳酸鈣、碳酸氫鎂、碳酸銨、碳酸氫銨、倍半碳酸銨、倍半碳酸鈉、氨基丙二酸鈉和氨基丙二酸銨。氨基丙二酸鹽是本領域公知的，例如Thanassi在「生物化學」(Biochemistry)，Vol.19，no.3pp.525-532(1970)中Fitzpatrick等人在「無機化學」(InorganicChemistry)Vol.13，no.3pp.568-574(1974)以及Stelmashok等在KoordinatsionnayaKhimiya，Vol.3，no.4；pp.524-527(1977)中描述了氨基丙二酸鹽的製劑。將這些公開引入本文供參考。除了對改變pH敏感的物質之外，或者替代對改變pH敏感的物質，氣體前體物質也可以包含對改變溫度敏感的物質。對改變溫度敏感的適宜的氣體前體物質的實例為全氟化碳。如技術人員已知的那樣，當首先製備類脂組合物時，特定的全氟化碳可以以液體狀態存在並因此用作氣體前體。或者，當製備類脂組合物時，全氟化碳可以以氣體狀態存在，並因此可直接作為氣體使用。全氟化碳以液體或氣體狀態使用通常依賴於其液體/氣體相轉變溫度或沸點。例如，優選的全氟化碳如全氟戊烷的液體/氣體相轉變溫度(沸點)為29.5℃。這意味著，全氟戊烷在室溫(大約25℃)下通常為液體，但是在人體內轉化為氣體，人體正常的溫度大約為37℃，它高於全氟戊烷的相轉變溫度。因此，在正常情況下，可確定戊烷是氣體前體。作為另一個實例，全氟戊烷具有同系物，即全氟丁烷和全氟己烷。全氟丁烷的液體/氣體相轉變溫度為4℃並且全氟己烷的液體/氣體相轉變溫度為57℃。因此，儘管它更適合作為氣體，全氟丁烷可用作氣體前體；同時，全氟己烷因其具有相對高的沸點，可用作氣體前體。如本領域普通技術人員已知的那樣，物質有效的沸點可能與該物質所承受的壓力有關。該關係可通過理想氣體定律PV＝nRT說明，其中P為壓力，V為體積，n為物質的摩爾數，R為氣體常數，T為溫度。理想氣體定律表明，壓力增加，有效沸點也增加；相反，壓力減少，有效沸點也降低。多種物質可用作本發明組合物的氣體前體。僅僅要求該物質在適宜的溫度下能夠進行相轉變成為氣相即可。例如，適宜的氣體前體包括六氟丙酮、異丙基乙炔、丙二烯、四氟丙二烯、三氟化硼、1，2-丁二烯、2，3-丁二烯、1，3-丁二烯、1，2，3-三氯-2-氟-1，3-丁二烯、2-甲基-1，3-丁二烯、六氟-1，3-丁二烯、丁二炔、1-氟丁烷、2-甲基丁烷、全氟丁烷、1-丁烯、2-丁烯、2-甲基-1-丁烯、3-甲基-1-丁烯、全氟-1-丁烯、全氟-2-丁烯、4-苯基-3-丁烯-2-酮、2-甲基-1-丁烯-3-炔、硝酸丁酯、1-丁炔、2-丁炔、2-氯-1，1，1，4，4，4-六氟丁炔、3-甲基1-丁炔、全氟-2-丁炔、2-溴-丁醛、硫化碳、丁烯腈、環丁烷、甲基環丁烷、八氟環丁烷、全氟環丁烷、3-氯環戊烯、全氟環戊烷、八氟環戊烯、環丙烷、全氟環丙烷、1，2-二甲基-環丙烷、1，1-二甲基環丙烷、1，2-二甲基環丙烷、乙基環丙烷、甲基環丙烷、丁二炔、3-乙基-3甲基二氮丙啶、1，1，1-三氟二乙基偶氮、二甲基胺、六氟二甲基胺、二甲基乙胺、雙(二甲基膦)-胺、全氟己烷、全氟庚烷、全氟辛烷、2，3-二甲基-2-降冰片烷、全氟二甲基胺、氯化二甲基氧、1，3-二氧戊環-2-酮、4-甲基-1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，1-三氟乙烷、1，1，2，2-四氟乙烷、1，1，2-三氯-1，2，2-三氟乙烷、1，1-二氯乙烷、1，1-二氯-1，2，2，2-四氟乙烷、1，2-二氟乙烷、1-氯-1，1，2，2，2-五氟乙烷、2-氯-1，1-二氟乙烷、1，1-二氟-2-氟乙烷、1-氯-1，1，2，2-四氟乙烷、2-氯-1，1-二氟乙烷、氯乙烷、氯五氟乙烷、二氯三氟乙烷、氟乙烷、全氟乙烷、硝基五氟乙烷、亞硝基五氟乙烷、全氟乙基胺，乙基乙烯基醚、1，1-二氯乙烷、1，1-二氯-1，2-二氟乙烷、1，2-二氟乙烷、甲烷、三氟甲磺醯氯、溴二氟亞硝基甲烷、溴氟甲烷、溴氯氟甲烷、溴三氟甲烷、氯二氟硝基甲烷、氯二硝基甲烷、氯氟甲烷、氯三氟甲烷、氯二氟甲烷、二溴二氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯氟甲烷、二氟甲烷、二氟碘甲烷、二矽烷基甲烷、氟甲烷、碘甲烷、碘三氟甲烷、硝基三氟甲烷、亞硝基三氟甲烷、四氟甲烷、三氯氟甲烷、三氟甲烷、2-甲基丁烷、甲醚、甲基異丙基醚、乳酸甲酯、亞硝酸甲酯、甲基硫、甲基乙烯基醚、季戊烷、一氧化二氮、1，2，3-十九烷-三羧酸-2-羥基三甲基酯、1-壬烯-3-炔、1，4-戊二烯、正戊烷、全氟戊烷、4-氨基-4-甲基戊烷-2-酮、1-戊烯、2-戊烯(順式和反式)、3-溴戊-1-烯、全氟戊-1-烯、四氯苯二甲酸、2，3，6-三甲基哌啶、丙烷、1，1，1，2，2，3-六氟丙烷、1，2-環氧丙烷、2，2-二氟丙烷、2-氨基丙烷、2-氯丙烷、七氟-1-硝基丙烷、七氟-1-亞硝基丙烷、全氟丙烷、丙烯、六氟丙烷、1，1，1，2，3，3-六氟-2，3-二氯丙烷、1-氯丙烷、氯丙烷-(反式)、2-氯丙烷、3-氟丙烷、丙炔、3，3，3-三氟丙炔、3-氟苯乙烯、十氟化二硫(S2F10)、2，4-二氨基甲苯、三氟乙腈、三氟甲基過氧化物、三氟甲基硫化物、六氟化鎢、乙烯基乙炔和乙烯醚。全氟化碳被優選用作由本發明方法製備的組合物的氣體和氣體前體。其中所述全氟化碳包括飽和的全氟化碳、不飽和的全氟化碳和環狀全氟化碳。通常優選的飽和全氟化碳具有式CnF2n+2，其中n為約1-約12，優選為約2-約10，更優選為約3-約8，並且甚至更優選為約3-約6。合適的全氟化碳例如包括全氟甲基、全氟乙烷、全氟丙烷、全氟丁烷、全氟環丁烷、全氟戊烷、全氟己烷、全氟庚烷、全氟辛烷和全氟壬烷。優選地，全氟化碳選自全氟丙烷、全氟丁烷、全氟環丁烷、全氟戊烷、全氟己烷和全氟辛烷，全氟丙烷是特別優選的。環狀全氟化碳也是優選的，它具有式CnF2n，其中n為3-約8，優選3-約6，包括如六氟環丙烷、八氟環丁烷和十氟環戊烷。除了全氟化碳之外，使用穩定的未完全氟化的氟化烴可能是合適的。此氟化烴包括七氟丙烷，例如1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷及其異構體、1，1，2，2，3，3，3-七氟丙烷。氣體前體材料也可以是光活化的材料，如重氮化合物和氨基丙二酸。如下文更充分討論的那樣，可以配製某些類脂和/或泡囊組合物，特別是泡囊組合物，使得在靶組織位置或通過聲波在類脂組合物上的作用形成氣體。例如在美國專利5,088,499和5,149,319中描述的氣體前體的例子，其公開的全部內容都引入本文供參考。除了上述那些例子之外，基於本發明，其它氣體前體對於本領域技術人員來說是顯而易見的。優選地，將氣體物質和/或氣體前體混合在類脂和/或泡囊組合物中，不考慮組合物的物理特性。因此，期望可將氣體物質和/或氣體前體例如混合在類脂隨機凝聚的類脂組合物以及泡囊組合物中，包括由類脂配製的泡囊組合物，如膠束和脂質體。可以使用各種方法來將氣體物質和/或氣體前體混合到類脂和/或泡囊組合物中。例如，在基於類脂的泡囊時，可通過振搖或攪拌含有氣體或氣體前體和一種或多種類脂的水性混合物來形成氣體填充的泡囊。這促進形成內部包囊有氣體或氣體前體的穩定的泡囊。另外，可將氣體直接吹入類脂和/或形成泡囊的化合物的含水混合物中。而且，可使用例如，美國專利5,352,435和5,228,446公開的氣體灌注法，其中所公開的全部內容都引入本文供參考。將氣體或氣體前體混合在陽離子類脂組合物中的合適的方法也在美國專利4,865,836中公開，其公開的內容引入本文供參考。基於本發明，其它方法對本領域技術人員來說是顯而易見的。優選地，在加入穩定材料之後或期間和/或形成泡囊期間，可將氣體注入類脂和/或泡囊組合物中。在優選的實施方案中，將氣體物質和/氣體前體材料混合到泡囊組合物中，優選膠束和脂質體。如下文詳細討論的那樣，泡囊有氣體或氣體前體或其混合物的泡囊在其體內提供改進的反射性上是有益的。如下文更詳細討論的那樣，優選由兩種和任意的穩定化合物配製類脂組合物，特別是泡囊組合物，來促進形成穩定的泡囊。另外，類脂和/或泡囊組合物優選地含有高穩定性氣體。短語「高穩定性氣體」是指在水介質中具有局限的溶解性和擴散性的氣體。例如，高穩定性的氣體包括全氟化碳，因為它們通常很少擴散並且在水介質難溶。因此，使用它們可以促進形成高穩定性的泡囊。在某些實施方案中，使用氟化的化合物，全氟化碳化合物是特別合適的，它在類脂和/或泡囊組合物的使用溫度，包括例如在人體的體內溫度下可為液體狀態，有助於或增強類脂和/或泡囊組合物，特別是氣體填充的泡囊的穩定性。合適的氟化化合物包括如氟化的表面活性劑，如以ZONYL為名稱購得的氟化表面活性劑(theDuPontCompany，Wilmington，DE)，以及液體全氟化碳，如全氟辛基溴化物(PFOB)、全氟萘烷、全氟十二氫化萘、全氟辛基碘化物、全氟三丙基胺和全氟-丁基胺。總之，大約含有6或更多個碳原子的全氟化碳在正常的人體溫度下是液體。在這些全氟化碳中，優選室溫下為液體的全氟辛基溴化物和全氟己烷。存在的氣體例如可以是氮氣或全氟丙烷，或者可由氣體前體衍生，也可以是全氟化碳，例如全氟戊烷。在後者的情況下，可由全氟化碳的混合物製備類脂和/或泡囊組合物，所給出的例子是全氟丙烷(氣體)或全氟戊烷(氣體前體)和全氟辛基溴化物(液體)。儘管不打算與任何理論或操作理論相結合，但相信，在泡囊組合物的情況下，液體氟化化合物可位於氣體和泡囊膜或壁表面之間的界面處。因此，可以在穩定化合物(例如使用生物相容的類脂形成的泡囊)的內表面上形成進一步的穩定層，並且該全氟化碳層也可以防止氣體從泡囊膜擴散。本發明的氣體前體在製備和/或貯存穩定下為液體，但至少在使用時或使用期間變為氣體。因此，已經發現液體氟化化合物與通常用於製備本文所述的類脂和/或泡囊組合物的氣體或氣體前體結合時，可以產生單獨由氣體或氣體前體不能產生的附加的穩定性。因此，在本發明的範圍中，使用氣體或氣體前體(如全氟化碳氣體前體，例如全氟戊烷)和在給予患者後保持液態的全氟化碳(即，其液態到氣態的轉化溫度在患者的體溫之上，例如全氟辛基溴化物)。可以使用全氟化的表面活性劑(如ZONYL氟化表面活性劑)來穩定類脂和/或泡囊組合物，並且起例如泡囊的包衣作用。優選的氟化表面活性劑是部分氟化的膽鹼磷酸表面活性劑。在這些優選的氟化表面活性劑中，二元烷基化合物可在末端烷基鏈上氟化並且近端的碳原子可被氫化。這些氟化的膽鹼磷酸表面活性劑可用於製備本發明的靶向類脂和/或泡囊組合物。關於包含泡囊組合物的實施方案，可按照特定的最終打算使用的目的(例如診斷和/或治療使用)來調節泡囊的尺寸。泡囊的尺寸可優選在大約30納米(nm)到100微米(μm)直徑範圍之內，並且所有的組合物和亞組合物的範圍也是如此。更優選地，泡囊直徑大約在100nm到10μm，甚至更優選直徑大約為200納米到7微米。對於特定的用途，例如血管內使用，包括血管系統的磁共振成像，可優選泡囊的直徑不大於約30微米，優選更小的泡囊，例如，泡囊直徑不大於12微米。在某些優選的實例中，泡囊的直徑可以大約為7微米或更小，平均直徑大約為5微米或更小的泡囊是更優選的，並且平均直徑大約為3微米或更小的泡囊是進一步優選的。期望這些小泡囊可以灌注到小血管系統中，如微血管系統，同時提供足夠的空間以便使紅細胞滑過泡囊。如果需要，可以通過各種方法調節泡囊中填充的氣體尺寸，例如，所述方法包括搖動、微乳化、渦流、擠壓、過濾、聲處理、均化、重複的冷凍和融化循環、在通過一定尺寸的孔加壓下擠壓和類似的方法。如上所述，就其製劑來說，本文所使用的組合物也包括製備和使用通過溫度、pH、光和能(如超聲)激活後，從液態或固態轉變為氣體的氣體前體。通過將前體在減壓下貯存可以將氣體前體製成氣體。例如，在減壓下貯存的小瓶可以產生全氟戊烷或全氟己烷氣體的液面上空間，用於在注射前產生預氣體。優選地，可以通過溫度激活氣體前體。下表列出了一系列在較為接近或低於正常體溫(37℃)的溫度下，經歷液態到氣態相轉變的氣體前體及要求形成最大10微米泡囊時乳化滴的尺寸。表2氣體前體的物理特性和形成10微米泡囊時乳化滴的直徑**，來源ChemicalRubberCompanyHandbookofChemistryandPhysics，RobertC.WeastandDavidR.Lide，eds.，CRCPress，Inc.BocaRaton，Florida(1989-1990)。如上所述，全氟化碳優選用作氣體或氣體前體，並用作附加的穩定成分。如上所述，通過使用有限溶解度的前體，使類脂和/或泡囊組合物，特別是由類脂形成的泡囊組合物的利用最佳。術語「有限溶解度」是指氣體憑藉其在周圍水性介質中的溶解度擴散出泡囊的能力。在水性介質中溶解度較大則增加泡囊中氣體的梯度，這樣使得氣體可具有擴散出泡囊的趨向。另一方面，在水性介質中溶解度較小可減少或消除泡囊和界面之間的梯度，使得氣體擴散出泡囊可被阻止。優選地，包裹在泡囊中的氣體的溶解度低於氧的溶解度，也就是說，大約一份氣體溶於32份水。參見MathesonGasDataBook，1966，MathesonCompanyInc.。更優選包裹在泡囊中的氣體在水中的溶解度低於空氣的溶解度；甚至更優選包裹在泡囊中的氣體在水中的溶解度低於氮氣的溶解度。在某些實施方案中，可能由基本上不可滲透的聚合材料製備泡囊是理想的。在這些實施方案中，通常不需要使用高度不溶的氣體。例如，含有基本上不可滲透的聚合材料的穩定組合物可以使用具有較高溶解度的氣體(如空氣或氮氣)來配製。除了上文討論的類脂、蛋白質和/或聚合化合物之外，本文所述的組合物可含有一種或多種穩定材料。此穩定材料的例子如生物相容的聚合物。可使用這些穩定材料來合乎需要地幫助形成泡囊和/或保證基本上包囊氣體或氣體前體。甚至對於較難溶的、不擴散的氣體(如全氟丙烷或六氟化硫)來說，在形成填充有該氣體或氣體前體的泡囊時使用一種或多種穩定材料可獲得改進的泡囊組合物。這些化合物有助於改善泡囊在其尺寸、形狀和/或其它方面的穩定性和完整性。本文所使用的術語「穩定」或「穩定的」意思是指泡囊基本上可阻止在使用期間降解，包括如泡囊結構損壞或包裹的氣體或氣體前體的損失。通常，本發明所使用的泡囊具有理想的貯存期，在正常的室溫下，經常在至少2到3周的期限內至少保持原結構體積的90％。在優選的形式中，泡囊至少在大約1個月的期限內具有理想的穩定性，更優選至少大約2個月，甚至更優選至少大約6個月，更優選大約18個月，最優選長達大約3年。本文所述的泡囊(包括填充氣體或氣體前體的泡囊)甚至在惡劣條件下也是穩定的，如在那些正常環境條件之上和之下的溫度和壓力之下。本文所述的泡囊的穩定性至少部分歸功於製備泡囊的材料，包括例如，上文所述的類脂、聚合物和/或蛋白質，儘管是可有可無的並且是優選的，但經常不需要使用另外的穩定材料。在下文中更詳細地描述這些附加的穩定材料及其特點。構成泡囊的材料優選生物相容的類脂、蛋白質或聚合物材料，並且其中生物相容的類脂是優選的。另外，由於易於配製，包括在給藥之前製備泡囊的可能性，這些泡囊可就地方便地進行製備。可作為製備填充氣體和氣體前體的泡囊的穩定材料的生物相容的聚合物可以是來源於天然、半合成(改良天然的)和合成的。本文所使用的術語聚合物是指包含兩個或多個重複單體單元，並且優選含10個或多個重複單體單元的化合物。本文所使用的術語半合成的聚合物(或改良的天然聚合物)是指以某種方式通過化學方法改進的天然聚合物。適用於本發明的天然聚合物的實例包括天然存在的聚糖。例如，該聚糖包括阿拉伯聚糖、果聚糖、巖藻聚糖、半乳聚糖、半乳糖醛喃、葡聚糖、甘露聚糖、木聚糖(例如菊粉)、果聚糖、巖藻依聚糖、交叉菜聚糖、galatocarolose、果膠酸、果膠，包括直鏈澱粉、支鏈澱粉、糖原、支鏈澱粉、纖維素、右旋糖酐、糊精、匍萄糖、聚葡萄糖、石臍素、聚乙醯氨基葡糖、瓊脂糖、膠質素、軟骨素、皮膚素、透明質酸、藻酸、黃原膠、澱粉和各種其它天然均聚物或雜聚物如那些含一個或多個下列醛糖、酮糖、酸或胺的糖赤鮮糖、蘇糖、核糖、阿拉伯糖、木糖、來蘇糖、阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖、塔羅糖、赤鮮酮糖、核酮糖、木酮糖、阿洛酮糖、果糖、山梨糖、塔格糖、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、蔗糖、海藻糖、麥芽糖、纖維素二糖、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬醯胺、穀氨醯胺、天冬氨酸、穀氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、葡糖醛酸、葡糖酸、葡糖二酸、半乳糖醛酸、甘露糖醛酸、葡糖胺、半乳糖胺和神經氨糖酸及其天然存在的衍生物。因此，例如，適宜的聚合物包括蛋白質如白蛋白。半合成聚合物的實例包括羧甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素和甲氧基纖維素。適用於本發明的合成聚合物的實例包括聚乙烯(如聚乙二醇、聚氧乙烯和聚對苯二甲酸乙二醇酯)、聚丙烯(如聚丙二醇)、聚氨基甲酸乙酯(如聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯氯和聚乙烯吡咯烷酮)、聚醯胺包括尼龍、聚苯乙烯、聚乳酸、氟化烴、氟化碳(如聚四氟乙烯)和聚甲基丙烯酸甲酯及其衍生物。一旦有了本發明公開的內容，並將本
發明內容與本領域已知的技術(例如Unger的美國專利5,205,290所描述和涉及的，其內容全部引入本文供參考)結合，使用聚合物作為穩定化合物製備泡囊的方法對於本領域技術人員來說是顯而易見的。本發明特別優選的實施方案可包括含有三種組分的泡囊(1)天然類脂、非離子的或兩性離子類脂，(2)陰離子類脂和(3)載有穩定材料(例如親水聚合物)的類脂。優選的陰離子類脂的量將大於所存在總類脂量的大約1％摩爾，並且載有親水聚合物的類脂的量將大於所存在總類脂量的1％摩爾。列舉的和優選的陰離子類脂包括磷脂酸。理想的載有親水聚合物的類脂是與聚合物共價連接的類脂，並且聚合物的平均分子量優選約為400到約100,000。合適的親水聚合物優選選自聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮及其共聚物，PEG聚合物是優選的。優選地，PEG聚合物的分子量為約1000到約7500，更優選的分子量為約2000到約5000。PEG或其它聚合物可結合到類脂上，例如通過共價鍵(如醯胺、氨基甲酸酯或胺鍵)連接的DPPE。另外，PEG或其它聚合物以共價鍵可與靶向配位體或其它磷脂相連接，例如包括醯胺、酯、醚、硫酯、硫代醯胺或二硫化物鍵。親水聚合物為PEG時，載有該聚合物的類脂將被稱為「聚乙二醇化類脂」。在優選的形式中，載有親水聚合物的類脂可以是DPPE-PEG，例如包括，DPPE-PEG5000，它指具有與其相連的平均分子量約為5000的聚乙二醇的DPPE(DPPE-PEG5000)。另一合適的聚乙二醇化類脂為二硬脂醯磷脂醯乙醇胺-聚乙二醇5000(DSPE-PEG5000)。在本發明某些優選的實施方胺中，類脂組合物可包括大約77.5摩爾％的DPPC、12.5摩爾％的DPPA和10摩爾％的DPPE-PEG5000。也優選組合物含有約80-約90摩爾％的DPPC、約5-約15摩爾％的DPPA和約5-約15摩爾％的DPPE-PEG5000。特別優選的組合物含有分別以82∶10∶8摩爾％比的DPPC、DPPA和DPPE-PEG5000。DPPE基本上是中性的，因為磷脂醯部分帶有負電荷而膽鹼部分帶有正電荷。因此，根據上文所述的機制，可加入帶有負電荷的DPPA來增加穩定性。DPPE-PEG通過DPPE部分提供與泡囊的類脂膜或外層結合的聚乙二醇化類脂材料，而PEG部分游離到泡囊膜周圍，因此形成體內具有降解此外來材料功能的各種酶和其它內源性試劑的物理屏障。與其它類脂(如DPPC和DPPA)按所給比例結合時，DPPE-PEG可產生更小尺寸的泡囊，它是安全的並且對壓力穩定。理論上，由於聚乙二醇化類脂材料的結構類似於水，它能夠破壞人免疫系統中巨噬細胞的作用，否則它將包圍並除去外來物質。其結果是增加了在此期間穩定的泡囊可作為診斷成像造影劑的功能。除了上文所述的材料之外，可由其它材料製備泡囊組合物，其條件是所製備的泡囊符合本文所述的穩定性和其它標準。這些材料可以是基本和重要的，構成產生或建立穩定的填充氣體和氣體前體的泡囊的主要材料。另一方面，它們可以是輔助性的，作為次要或補充性的試劑起作用，可以提高基本穩定材料或材料的功能，或產生由基本穩定材料所賦予的之外的某些需要的特性。然而，不是總有可能確定所給出的材料是不是基本的或是輔助的材料，因為所述材料的功能是例如通過對所製備穩定泡囊產生的結果來經驗性地確定的。作為這些基本的和輔助的材料如何起作用的實例，已經觀察了振搖時生物相容的類脂和水或鹽水簡單組合經常會獲得混濁的溶液，然後壓熱器處理滅菌。這種混濁的溶液可以起造影劑的作用，但外觀不美並且以末溶解或未分散的類脂顆粒形式可隱含不穩定性。混濁溶液因其未溶解的顆粒物質的直徑大於約7微米特別是大於約10微米也是不理想的。製備步驟(如滅菌過濾)也可對含有未溶解的顆粒物質產生問題。因此，可加入丙二醇來通過促進類脂顆粒的分散或溶解而消除混濁。丙二醇也可起溼潤劑的作用，它可通過增加泡囊膜或外層上的表面張力來改善泡囊的形成和穩定性。丙二醇也可能以附加層起作用，它可以包裹在泡囊膜或外層E，因此產生附加的穩定作用。作為更進一步的基本或輔助穩定材料的例子，有經常使用的表面活性劑參見D′Arrigo的美國專利4,684,479和5,215,680。其它輔助的和基本的穩定材料例如包括花生油、canola油、橄欖油、紅花油、玉米油或其它任何可被列入根據本文所述適於用作穩定化合物的油。公開了各種輔助和基本的穩定材料，例如在美國專利申請號08/444,574，申請日為1995年5月19日中，其全部內容都引入本文供參考。另外，用於製備混合的膠囊系統的化合物可適用於用作基本的或輔助的穩定材料，例如包括溴化月桂基三甲基銨(十二烷基)、溴化十六烷基三甲基銨(十六烷基)、溴化十四烷基三甲基銨(十四烷基)、氯化烷基二甲基苄基銨(其中烷基為C12、C14或C16)、溴化/氯化苄基二甲基十六烷基銨、溴化/氯化苄基二甲基十六烷基銨、溴化/氯化苄基二甲基十四烷基銨、溴化/氯化十六烷基二甲基乙基銨或溴化/氯化十六烷基吡啶鎓。也已經發現本發明中使用的填充有氣體和氣體前體的泡囊可根據尺寸、溶解度和熱穩定性通過從本文所述的各種附加的或輔助的穩定材料中進行選擇來控制。這些材料可影響泡囊特別是由類脂配製的泡囊的這些參數，這不僅通過它們與膜表面的物理性的相互作用來產生，也通過其改進粘度和填充有氣體和氣體前體的泡囊表面的表面張力的能力來產生。因此，本發明中使用的填充有氣體和氣體前體的泡囊可以得到有利的改進和進一步穩定，例如通過加入一種或多種各種各樣的(a)粘度調節劑，例如包括碳水化合物及其磷酸化的或磺化的衍生物；聚醚(優選地分子量範圍為400到100,000)和二和三羥基烷烴及其聚合物(優選其分子量範圍為200到50,000)；(b)乳化劑和/或增溶劑，例如包括，阿拉伯膠、膽固醇、二乙醇胺、單硬脂酸甘油酯、羊毛脂醇、卵磷脂、單和二甘油酯、乙醇胺、油酸、油醇、泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188、泊洛沙姆184和泊洛沙姆181)、硬脂酸50聚氧乙烯、聚羥氧基35蓖麻油、聚羥氧基10油醚、聚羥氧基20鯨蠟醇硬脂醯醚、聚羥氧基40硬脂酸酯、多乙氧基醚20、多乙氧基醚40、多乙氧基醚60、多乙氧基醚80、1，2-丙二醇二乙酸酯、1，2-丙二醇一硬脂酸酯、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸鈉、單月桂酸脫水山梨糖醇酯、單油酸脫水山梨糖醇酯、單棕櫚酸脫水山梨糖醇酯、單硬脂酸脫水山梨糖醇酯、硬脂酸、三乙醇胺和乳化蠟；(c)懸浮和/或粘度增強劑，包括，例如，阿拉伯膠、瓊脂、藻酸、一硬脂酸鋁、皂土、糖糊、卡波姆934P羧甲基纖維素、鈣和鈉和鈉12、角叉菜膠、纖維素、葡聚糖、明膠、胍耳膠、刺槐豆膠、鋁矽酸鎂鹽、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、矽酸鎂鋁、沸石、甲基纖維素、果膠、聚環氧乙烷、聚烯吡酮、藻酸-1，2-丙二醇酯、二氧化矽、藻酸鈉、四黃耆膠、黃原膠、α-d-葡萄糖酸內酯，甘油和甘露糖醇；(d)合成的懸浮劑，如聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇(PVA)、聚丙二醇(PPG)和多乙氧基醚；和(e)張力增加劑，它能夠穩定並增加張力，例如包括山梨糖醇、甘露糖醇、海藻糖、蔗糖、丙二醇和甘油。如上所述，本發明組合物進一步包含靶向配位體。優選地，靶向配位體通過共價鍵或非共價鍵與類脂化合物，蛋白質，聚合物和/或泡囊連接。因此，例如，在類脂組合物狀態下，靶向配位體通過共價鍵或非共價鍵與組合物中至少一個類脂結合。在由類脂以外的其它物質形成的泡囊(如籠形物、氣凝膠和白蛋白泡囊)狀態下，優選地，靶向配位體通過共價鍵或非共價鍵與泡囊壁中的一種或多種物質結合。通常優選地，靶向配位體通過共價鍵與類脂和/或泡囊結合。優選地，在含膽固醇的類脂組合物狀態下，靶向配位體基本上僅通過非共價鍵與膽固醇結合，和/或靶向配位體通過共價鍵與組合物的組分結合，所述組分包括另一種非膽固醇類脂如磷脂。如果需要，靶向配位體也可以與組合物中所存在的其它穩定物質，如生物相容性聚合物結合。優選地，本發明組合物中所混合的靶向配位體是能夠在體內與受體和/或組織靶向結合的物質。如上所述，就靶組織而言，要求靶向配位體能夠與心臟組織，包括心肌細胞以及膜組織，包括內皮和上皮細胞靶向結合。在受體狀態下，要求靶向配位體能夠與GPIIbIIIa受體靶向結合。期望在靶組織和/或受體，包括上述舉例說明的組織和受體中使用的優選的靶向配位體選自蛋白質、肽、多糖、甾體化合物、甾體類似物、生物活性劑和遺傳物質，例如包括抗體、糖蛋白和凝集素，瓊脂、肽是優選的。可優選用作靶向配位體的蛋白質的實例為蛋白質A，它是由大部分金黃色葡萄球菌菌株產生的蛋白質。蛋白質A可購得，例如從SigmaChemicalCo.(St.Louis，MO)購得。然後可使用蛋白質A結合各種IgG抗體。一般來說，作為靶向配位體特別有用的肽包括天然的、天然改良的或合成的肽，混合有其它對血管系統環境的酯酶、醯胺酶或肽酶的降解耐受的物質。穩定肽部分的一種非常有用的方法是結合使用環化技術。作為一個實例，可以使用由羧基末端和胺末端通過醯胺鍵共價連接的尾-尾環化來抑制肽降解並增加環境貯存時間。另外、在誘導穩定性中，側鏈-側鏈環化也是特別有用的。另外，末端-側鏈環化也是一種有用的改進。另外，在肽的關鍵區域，用L-胺基酸代替D-胺基酸可以產生對生物降解的耐受。一經本文描述，合適的靶向配位體及其製備方法對本領域專業人員來說會是顯而易見的。要靶向於內皮細胞，合適的靶向配位體例如包括一種或多種下列物質生長因子(如鹼性成纖維細胞生長因子(bFGF)、酸性成纖維細胞生長因子(aFGF)、轉化生長因子-α(TGF-α)、轉化生長因子-β(TGF-β)、血小板衍生內皮細胞生長因子(PD-ECGF)、血管內皮生長因子(VEGF)和人生長因子(HGF))；血管配基；腫瘤壞死因子(包括腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和腫瘤壞死因子-β(TNF-β))；分子量約為4500的含銅多核苷酸血管營養素以及低分子量非肽血管生成素(如1-丁醯甘油)；前列腺素(例如，包括前列腺素E1(PGE1)和前列腺素E2(PGE2))；煙醯胺；腺苷；潘生丁；多巴酚丁胺；透明質酸降解產物(例如由β鏈水解所導致的降解產物，包括透明生物糖醛酸)；血管生成抑制劑(例如包括，膠原酶抑制劑)；二甲胺四環素；6α-甲-17-羥孕酮；用6-O-硫酸酯和6-O-羧甲基基團化學修飾的殼多糖；血管抑制劑類固醇化合物(例如四氫皮質甾醇)；和肝素(包括肝素片斷，例如具有大約6000分子量的與類固醇化合物混合的片斷，如可的松或氫化可的松)；血管生成抑制劑(包括血管抑制素(AGM-1470-一種血管抑制劑抗生素))；血小板因子4；魚精蛋白；由節細菌的細菌壁衍生的硫酸化的多糖肽聚糖複合物；真菌衍生的血管生成抑制劑(如由煙麴黴衍生的煙麴黴素)；D-青黴素胺；硫代蘋果酸金；凝血栓蛋白；維生素D3類似物(例如包括1-α，25-二羥基維生素D3和合成的類似物22-氧雜-1-α，25-二羥基維生素D3)；α-幹擾素；細胞激活素(如白細胞介素，例如包括白細胞介素-1(IL-1)、白細胞介素-2(IL-2)和白細胞介素-8(IL-8))；粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)；肝素(包括肝素低分子量的片斷或肝素類似物)；簡單硫酸化的多糖(如環糊精，包括α-，β-和γ-環糊精)；硫酸十四烷基酯；鐵傳遞蛋白；鐵蛋白；血小板因子4；魚精蛋白；與銅複合的Gly-His-Lys；銅藍蛋白；(12R)-羥基二十碳三烯酸；okadaikacid；植物凝集素；抗體；CD11a/CD18和VeryLateactivation整聯蛋白-4(VLA-4)。內皮性白細胞粘合分子(ELAM)是在緊張條件下由內皮細胞表達的抗原，然後促進白細胞穿過血管系統的內膜進入周圍組織。也驚奇地發現，這些內皮性白細胞粘合分子用作靶向內皮的受體是有利的。這些內皮細胞粘合分子屬於選擇蛋白族，其中已知的成員如GMP-140，都參與內皮白細胞粘合併包括ELAM-1、LAM-1和顆粒膜蛋白140(GMP-140)，也稱作起血小板激活作用的-依賴於顆粒的-外膜蛋白(PADGEM)，VCAM-1/INCAM-110(VascularAdhesionMolecular/InducibleAdhesionMolecule)和ICAM-1(IntercelluarAdhesionMolecule)。細胞粘合分子的鈣粘著蛋白也可用作靶向配位體，例如包括E-、N-、和P-鈣粘著蛋白、鈣粘著蛋白-4、鈣粘著蛋白-5、鈣粘著蛋白-6、鈣粘著蛋白-7、鈣粘著蛋白-8、鈣粘著蛋白-9、鈣粘著蛋白-10和鈣粘著蛋白-11；並且最優選鈣粘著蛋白C-5。而且，涉及鈣粘著蛋白的抗體(例如單克隆抗體Ec6C10)可用來識別由特異的內皮細胞局部表達的鈣粘著蛋白。可選擇各種各樣不同的靶向配位體與ELAM分子的胞質區結合。關於靶向配位體可包括植物凝集素、各種碳水化合物或糖部分、抗體、抗體片斷、Fab片斷(如Fab′2)和合成的肽(例如包括精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(R-G-D)，它對傷口癒合有作用)。儘管這些材料許多都是由天然物質衍生的，但其中某些可由分子生物重組技術來合成並且其它物質的來源可以是合成的。可通過本領域已知的各種不同組合的化學技術製備肽。由人白細胞衍生的靶向配位體(如CD11a/CD18和白細胞表面糖蛋白(LFA-1))也是已知的，可用來與內皮細胞受體ICAM-1結合。免疫球蛋白總科的細胞激活素可誘導成員，VCAM-1(它是單核白細胞選擇性的)也可用作靶向配位體。由人單核細胞衍生的VLA-4可用作靶向VCAM-1。抗體和其它靶向配位體可用於靶向endoglin，它是一種內皮細胞增殖標記物。Endoglin在各種固體腫瘤的內皮細胞中被上調。可用於靶向與edoglin的靶向配位體是抗體TEC-11。參見R.E.Thorpe和F.J.Burrows，BreastCancerResearchandTreatment，Vol.36，pp.237-51(1995)。在本發明中使用患有動脈粥樣硬化中的內皮細胞激活作用來使組合物靶向於動脈粥樣硬化的區域，例如包括動脈粥樣硬化斑。可用於此目的的靶是作為ATHERO-ELAM通過Rb1/9識別的可誘導單核白細胞內皮粘合分子。可使用單克隆抗體(H4/18和H18/7)來靶向由細胞激活素介質誘導的內皮細胞表面抗原。作為本發明優選的實施方案，填充氣體的泡囊靶向於動脈粥樣硬化斑來在嚴重損傷發生之前(例如在中風或心肌梗塞之前)非傷害性地檢測有病的血管，這樣的話可以進行合適的藥物或外科手術治療。ATHERO-ELAM是優選的目的物和配位體，如抗體、肽或植物凝集素或其組合物可用於靶向該細胞表面的抗原決定部位，它表達在動脈粥樣硬化的內皮細胞上。另外，由低或高密度脂蛋白蛋白質衍生的脂蛋白或脂蛋白片斷可用作靶向配位體。還有，可使用膽固醇靶向內皮細胞並將類脂、泡囊等定位在動脈粥樣硬化斑的區域。在包括使用膽固醇作為靶向配位體的實施方案中，優選的膽固醇是未用其它化學基團、部分、配位體等修飾的(非衍生的)。直接趨向斑中血栓形成材料的靶向配位體可用於區別動脈粥樣硬化斑的活性和非活性區域。當這些斑最終閉合血管或導致血栓時，產生血栓的活性斑更危險。在這一點上，除了低分子量的肝素片斷之外，其它靶向配位體(如涉及血小板激活部分的，例如抗纖維蛋白抗體、組織血纖維蛋白溶酶原激活劑(t-PA)、抗-血栓抗體和纖維蛋白抗體)可用於靶向釋放血凝塊的活性斑。最優選的靶向配位體是靶向激活血小板時除靶向P-選擇蛋白之外的與GPIIbIIIa相關的血漿膜和涉及GPIIbIIIa的抗體或相關抗體的那些。本發明也用於檢測急性心肌梗塞的區域。一般來說，通過在類脂、聚合物或穩定材料上結合抗肌漿球蛋白(特別是心肌漿球蛋白)抗體或抗肌動蛋白抗體，梗塞的心肌可通過本發明的方法來檢測。對於靶向顆粒組織(傷口癒合)來說，許多上述靶向配位體都可使用。傷口癒合三肽(精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸(RGD))也可用作這種靶向配位體。如上文討論的內皮細胞那樣，各種各樣的肽、蛋白質和抗體都可用作靶向於內皮細胞的靶向配位體。優選地，可選擇肽，包括對內皮細胞靶受體具有高親和性的合成的、半合成的或天然產生的肽，合成的肽是更優選的。在這些優選的實施方案中，具有大約5-15個胺基酸殘基的肽是優選的。抗體可作為整個抗體或抗體片斷來使用，例如，Fab或Fab′2，或者是天然的或者是重組的。天然抗體可來源於動物或人，或可以是嵌合的(小鼠/人)。人重組的或嵌合的抗體是優選的而對於整個抗體來說，片斷是優選的。本發明組合物中可用作靶向配位體的單克隆抗體的例子包括CALAM27，它是通過用整個人舌鱗狀細胞癌使BALB/c小鼠免疫並且通過用NS1同源骨髓瘤細胞系交叉提取脾細胞形成雜交瘤而形成的。參見Gioanni，J等的「癌症研究」(CancerResearch)，Vol.47，pp.4417-4424(1987)。CALAM27涉及正常的和有害的內皮細胞的表面抗原決定部位。正常的淋巴結通常不含有表達這些抗原決定部位的細胞。參見「癌症研究」(CancerResearch)，Vol.47，pp.4417-4424(1987)。因此，含有這些抗體的類脂和/或內皮組合物可用於靶向淋巴結中的轉移瘤。單克隆抗體3C2可被用作靶向配位體，它靶向於嚴重的卵巢癌和子宮內膜癌的有害內皮細胞。另一個靶向配位體的例子是Mab4C7(參見「癌症研究」Vol.45，2358-2362，1985)，它可用於靶向黏膜癌、子宮內膜癌和中腎癌。對於靶向頭和頸癌中的鱗狀細胞癌來說，MabE48(「生物學文獻」(BiologicalAbstract)，Vol.099Issue.066Ref.082748)可用作靶向配位體。對於靶向有害的黑素瘤來說，可使用單克隆抗體225.28s(Pathol.Biol.，Vol.38(8)，pp.866-869，1990)。可選擇靶向於抗原的靶向配位體，所述抗原包括與乳腺癌相關的抗原(如表皮生長因子受體(EGFR)、纖維細胞生長因子受體、erbB2/HER-2)和與碳水化合物抗原有關的腫瘤的抗原(Cancer，Vol.74(3)pp.1006-12，1994)。CTA16.88，類似於細胞角蛋白8、18和19，是通過大多數上皮衍生的腫瘤(包括結腸、胰腺、乳腺、卵巢和肺癌)表達的。因此，涉及這些細胞角蛋白(如16.88(IgM)和88BV59(IgG3k)，它識別CTA16.88上的不同的抗原決定部位(Semin.Nucl.Med.，Vol.23(2)，pp.165-79，1993)的抗體可用作靶向配位體。為靶向結腸癌，抗-CEAIgGFab′片斷可用作靶向配位體。化學結合的二特異的抗-細胞表面抗原、抗-半抗原Fab′-Fab抗體也可用作靶向配位體。MG系列的單克隆抗體可被選擇用於靶向例如胃癌(Chin.Med.Sci.J.，Vol.6(1)，pp.56-59，1991)。有各種可選擇靶向於表皮細胞上細胞表面抗原決定部位的靶向配位體。例如，與皮膚和黏膜的良性和惡性表皮增殖相關的蛋白質人乳頭瘤病毒(HPV)兩種HPV致瘤蛋白質(E6和E7)可作為在某些上皮衍生的癌(如頸癌)中可表達的靶。參見Curr.Opin.Immunol.Vol.6(5)，pp.746-54(1994)。肽生長因子(PGF-R)(它包含在癌細胞增殖中的膜受體也可用作腫瘤抗原(AnticancerDrugs，Vol.5(4)，pp.379-93(1994))。而且，表皮生長因子(EGF)和白細胞介素-2可作為合適靶向配位體的靶，所述配位體包括肽，它與這些受體結合。某些與黑素瘤有關的抗原(MAA)(如表皮生長因子(EGFR)和粘合分子(TumorBiol.，Vol.15(4)，pp.188-202，1994)，它通過惡性黑素瘤細胞表達)可作為本文提供的組合物的靶。在癌細胞表面的與腫瘤相關的抗原FAB-72也可以作為靶被選擇。可選擇各種各樣的靶向配位體靶向於心肌細胞。靶向配位體的例子包括抗心肌漿球蛋白抗體，它可含有多克隆抗體，Fab′2片斷，或來源於人、動物(例如，來源於小鼠)，或來源於嵌合體。其它靶向配位體包括潘生丁、洋地黃、硝苯吡啶、阿樸脂蛋白、低密度脂蛋白(LDL)(包括α-LDL、ν-LDL和甲基LDL)、ryanodine、內皮肽、I型補體受體、IgGFc、β-1-類腎上腺素能藥、二氫吡啶、腺苷、鹽皮質激素、煙酸乙醯膽鹼和毒蠅鹼性乙醯膽鹼、人α1A-腎上腺素受體的抗體、生物活性劑(如藥物，包括α1-拮抗劑哌唑嗪)、抗β受體的抗體、與抗β受體結合的藥物、抗-心RyR抗體、內皮肽(它是一種內皮細胞衍生的血管收縮肽，對心組織產生強的增強收縮力的作用，內皮肽-1結合在心肌纖維膜上的泡囊上)、單克隆抗體(它可產生T細胞受體αβ受體，從而用於產生靶向配位體)、補體抑制劑sCR1、產生二氫吡啶受體的藥物、肽或抗體、趨向於抗白細胞介素2受體的單克隆抗體(該受體可被用作靶向配位體來使本發明的組合物到達心肌組織區域，該組織表達該受體並在發炎情況下可被上調)、類似使組合物到達發炎心肌組織區域的環孢子菌素、甲基異丁基異腈、結合心肌細胞和心內皮細胞上特異糖的植物凝集素、腎上腺髓質激素(ADM，是一種內源性降壓和血管鬆弛的肽)、前房尿鈉排洩肽(ANP)、C-型尿鈉排洩肽(CNP，它是一種來源於內皮細胞的22個胺基酸的肽並且結構與前房尿鈉排洩肽相關但在遺傳學上有區別，並降壓作用於血管的和抗有絲分裂發生活性)、vasonatrin肽(VNP，它是前房尿鈉排洩肽(ANP)和C-型尿鈉排洩肽(CNP)的嵌合體並含有27個胺基酸)、凝血酶、內皮衍生的鬆弛因子(EDRF)、中性肽鏈內切酶1(NEP-1)、EDRF競爭抑制劑(例如，包括NG-單甲基-L-精氨酸(L-NMMA))、鉀通道拮抗劑(如卡律蠍毒素和優降糖)、抗心臟抗體(它可用特發的擴張心肌病病人來鑑定但優選不引起心肌的細胞溶解)、抗腺嘌呤核苷易位劑、支鏈酮酸脫氫酶或肌球蛋白的抗體、內皮肽-A-受體的特異性拮抗劑(可被稱作BQ-123)和血管緊張素II受體的抗體。心肌纖膜的兩種主要的抗原是結合鈣的糖蛋白，它與二氫吡啶受體一起純化。抗血清可被提出，包括多克隆或單克隆抗體，抗純化的肌纖膜。這些抗體也可用作靶向配位體。可從肌纖膜的血漿膜中分離結合鈣的糖蛋白的純化部分，然後用於產生抗體。上文所述的可用作靶向配位體的ANP可提供培養人主動脈內皮細胞來獲得。ANP通常位於內皮，但也可位於內皮或心肌組織。ANP可被製備，例如使用重組技術，以及通過使用本領域技術人員公知的肽合成技術合成該肽。使用趨向於ANP的抗體(多克隆的或單克隆抗體)是可能的。類似地，趨向ANP的肽可被用於靶向內皮和/或心肌細胞。α和β形式的前房尿鈉排洩因子可被用作使本組合物到達心肌組織的強的靶向配位體。各種各樣的靶向配位體可被使用來使得本類脂組合物(特別是泡囊組合物)到達GPIIbIIIa受體。到達GPIIbIIIa受體的組合物對於靶向血管血栓的形成和血凝塊是非常有用的，可用於診斷以及治療此血凝塊。包括在其中的這些配位體有、例如，肽，如Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)，Gly-Arg-Gly-Asp-Ser-Pro(GRGDSP)和Gly-Pro-Arg-Pro(GPRP)。含有Arg-Gly-Asp(RGD)序列的五肽也可以使用，例如包括G4120(它是含有Arg-Gly-Asp(RGD)胺基酸序列的環狀肽)。由人凝血因子XIIIA衍生的肽也是有用的，例如包括下列片斷NKLIVRRGQSFYVQIDFSRPYDPRRDLFRVEYVIGRYPQENKGTYIPVPIVSELQSGKWGAKIVMREDRSVRLSIQSSPKCIVGKFRMYVAVWTPYGVLRTSRNPETDTYILFNPWCEDDAVYLDNEKEREEYVLNDIGVIFYGEVNDIKTRSWSYGQF-R′其中R′為-CONH2或-NH2。另外，含有因子XIIIA片斷的肽也是有用的，它包括下列序列NKLIVRRGOSFYVQIDFSRPYDPRRD或DDAVYLDNEKEREEYVLNDIGVIFYGEVNDIKTRSWSYGQF.其它可用作靶向於GPIIbIIIa受體的靶向配位體的肽例如包括含有精氨酸-酪氨酸-天門冬氨酸(Arg-Tyr-Asp，也縮寫為RGD)三肽序列的肽，它的氨基端與羧基端相連並且可結合到活化的血小板上的GPIIbIIIa結合區。此肽的例子包括通式為R1-(X1)n-Arg-Tyr-Asp-(Y)o(X2)m-R2，的肽，其中X1、X2和Y可獨立地為一個或多個胺基酸殘基，儘管在某些情況下Y優選不是絲氨酸或丙氨酸殘基，m、n和o為0或1，在某些情況下的條件是m為1時o為0，並且R1為保護或未保護的末端氨基而R2為保護或未保護的末端羧基。在優選的實施方案中，X1為肽Ala-Arg-Arg-Ser-Ser-Pro-Ser-Tyr-Tyr且X2為肽Gly-Ala-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ala-Met-Asp-Tyr。有用的肽包括Arg-Ser-Pro-Ser-Tyr-Tyr-Arg-Tyr-Asp-Gly-Ala-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ala-Met-Asp-TyrandAla-Arg-Arg-Ser-Pro-Ser-Tyr-Tyr-Arg-Tyr-Asp-Gly-Ala-Gly-Pro-Tyr-Tyr-Ala-Met-Asp-Tyr.將天然胺基酸序列與合成胺基酸結合的合成化合物也可以用作靶向配位體，如纖維蛋白原受體拮抗劑化合物，它包含序列XX-Gly-Asp，其中XX為合成的α-胺基酸，它包含一直鏈側鏈，如其中n+n′為3；AA為單鍵；並且R為苯基或苄基；或-(CH2)n-AA-(CH2)n-NHR，其中n為1-4的整數；n′為2-4的整數；A為氧、硫或單鍵；並且R為H、C1-6烷基、取代的或未取代的芳基、取代的或未取代的芳基甲基或者取代的或未取代的環烷基，假設，在某些情況下，當AA為單鍵並且R為H，n+n′不為3或4。另一個該化合物包含下式纖維蛋白原受體拮抗劑其中XX為合成的α-胺基酸，它包含一直鏈側鏈，該側鏈的結構式為其中n+n′為3；AA為單鍵；並且R為苯基或苄基；或者-(CH2)n-AA-(CH2)n-NHR，其中n為1-4的整數；n′為2-4的整數；A為氧、硫或單鍵；並且R為H、C1-6烷基、取代的或未取代的環烷基，假設，在某些情況下，當AA為單鍵並且R為H，n+n′不為3或4，並且ZZ為1-4個取代或未取代的胺基酸序列。例如，氣體可用作靶向配位體的肽包括「Elegantin」它具有下列序列Gly-Glu-Glu-Cys-Asp-Cys-Gly-Ser-Pro-Glu-Asn-Pro-Cys-Cys-Asp-Ala-Ala-Thr-Cys-Lys-Leu-Arg-Pro-Gly-Ala-Gln-Cys-Ala-Asp-Gly-Leu-Cys-Cys-Asp-Gln-Cys-Arg-Phe-Lys-R-R′-Arg-Thr-Ile-Cys-Arg-Arg-Ala-Arg-Gly-Asp-Asn-Pro-Asp-Asp-Arg-Cys-Thr-Gly-Gln-Ser-Ala-Asp-Cys-Pro-Arg-Asn-Gly-Tyr，其中，各R和R′獨立地為任何胺基酸；「Albolabrin」，它具有下列序列Glu-Ala-Gly-Glu-Asp-Cys-Ays-Cys-Gly-Ser-Pro-Ala-Asn-pro-Cys-Cys-Asp-Ala-Ala-Thr-Cys-Lys-Leu-Leu-Pro-Gly-Ala-Gln-Cys-Gly-Glu-Gly-Leu-Cys-Cys-Asp-Gln-Cys-Ser-Phe-Met-Lys-Lys-Gly-Thr-Ile-Cys-Arg-Arg-Ala-Arg-Gly-Asp-Asp-Leu-Asp-Asp-Tyr-Cys-Asn-Gly-Ile-Ser-Ala-Gly-Cys-Pro-Arg-Asn-Pro-Leu-His-Ala；「Batroxosatin」，它具有下列序列Glu-Ala-Gly-Glu-Glu-Cys-Asp-Cys-Gly-Thr-Pro-Glu-Asn-Pro-Cys-Cys-Asp-Ala-Ala-Thr-Cys-Lys-Leu-Arg-Pro-Gly-Ala-Gln-Cys-Ala-GluGly-Leu-Cys-Cys-Asp-Gln-Cys-Arg-Phe-Lys-Gly-Ala-Gly-Lys-Ile-Cys-Arg-Arg-Ala-Arg-Gly-Asp-Asn-Pro-Asp-Asp-Cys-Thr-Gly-Gln-Ser-Ala-Asp-Cys-Pro-Arg-Phe；和「Flavoridin」，Gly-Gly-Glu-Cys-Asp-Cys-Gly-Ser-Pro-Glu-Asn-Pro-Cys-Cys-Asp-Ala-Ala-Thr-Cys-Lys-Leu-Arg-Pro-Gly-Ala-Gln-Cys-Ala-Asp-Gly-Leu-Cys-Cys-Asp-Gln-Cys-Arg-Phe-Lys-R-R′-Arg-Thr-Ile-Cys-Arg-Ile-Ala-Arg-Gly-Asp-Phe-Pro-Asp-Asp-Arg-Cys-Thr-Gly-Leu-Ser-Ala-Asp-Cys-Pro-Arg-R-Asn-Asp-Leu，其中，各R和R′獨立地為任何胺基酸。其它用於將GPIIbIIIa受體作為靶的配位體包括合成的化合物，如Ac-(D)Phe-Pro-boroArg和環狀擬肽的環(D-2-氨基丁酸-N-甲基-L-精氨酸-甘氨酸-L-天冬氨醯-3-氨基-甲基-苯甲酸)甲磺酸鹽。也可以使用的肽包括下列庫以半胱氨酸基(能夠形成環狀二硫鍵)作為側鏈的六肽和具有Arg-Gly-Asp或Lys-Gly-Asp序列的壞狀、二硫鍵形式的肽以及羧基端衍生的肽，REYVVMWK。某些母體糖蛋白如Tbrombospondin也可以在恢用途中使用。其它可使用的配位體為絲氨酸蛋白酶抑制劑的serpin族，如1型纖維蛋白溶酶原激活劑抑制劑(PAI-1)。一般來講，用作GPIIbIIIa受體靶向配位體的肽優選具有約3-約20個胺基酸，具有約4-約15個胺基酸的肽是更優選的。甚至更優選地，GPIIbIIIa受體的靶向配位體可以包含具有約4-約8個胺基酸的肽，具有約4-約6個或大約5個胺基酸的肽是進一步優選的。如果需要，可以將肽環化，例如通過(1)側鏈-側鏈共價鍵，例如包括，通過將含胺基酸或其類似物，例如包括半胱氨酸或青黴胺的硫醇氧化形成的二硫鍵；(2)末端-側鏈共價鍵，例如包括，通過使用胺基酸序列的氨基端和側鏈的羧酸根基，如非關鍵性的穀氨酸或天冬氨酸基形成的共價鍵。或者，末端-側鏈共價鍵可以包括胺基酸序列的羧酸根端和側鏈氨基、脒、胍或其它基團形成的共價鍵，其中，所述其它基團的側鏈包含親核的氮原子，例如該側鏈基包括賴氨酸、精氨酸、高精氨酸、高賴氨酸等；(3)末端-末端共價鍵，該共價鍵為高精醯胺鍵等。該方法是本領域技術人員已知的。另外，也可以使用「假環化」，其中通過非共價鍵的相互作用，如靜電的相互作用產生環化，所述非共價鍵相互作用包括將二級結構摺疊形成一環狀部分。期望金屬離子有助於誘導「假環」形成。該假環的形成可能類似於「鋅指」。如本領域技術人員已知的那樣，鋅指由於在鋅離子(Zn2+)和半胱氨酸、青黴胺和/或高半胱氨酸之間的靜電相互作用，形成一襻(手指)狀區域。在存在高半胱氨酸的情況下，RGD將存在於手指尖。當然，已知在本發明中，任何種穩定環化都是適宜的，只要能夠識別和連接肽配位體，如RGD保持適宜的構型和/或受體圖象以便連接到凝塊中適宜的受體上，同時具有適宜的米氏常數(Km)或結合常數。本文所使用的術語「構型」是指肽、類肽或假肽骨架的三維結構，術語「受體圖象」是指是指肽、類肽或假肽側鏈的三維結構。其它適宜的靶向配位體包括下列化合物Ac-Cys-Arg-Gly-Asp-Met-Pbe-Gly-Cys-CONH2；Ac-Cys-Arg-Gly-Asp-Met-Leu-Arg-Cys-CONH2；Ac-Cys-Arg-Gly-Asp-Phe-Leu-Asn-Cys-CONH2；Ac-Cys-Asn-Thr-Leu-Lys-Gly-Asp-Cys-CONH2；Ac-Cys-Asn-Trp-Lys-Arg-Gly-Asp-Cys-CONH2；以及Ac-Cys-N-甲基-Arg-Gly-Asp-Pen-CONH2，其中「Pen」指青黴胺(β-β-二甲基半胱氨酸)。可用作靶向配位體的其它化合物包括由下式表示的肽或其衍生物A-B-Arg-Gly-Asp-C-D其中A為脯氨酸、巰基脯氨酸、羥基脯氨酸、脫氫脯氨酸、2-氧-4-噻唑烷羧酸、N-烷基甘氨酸或具有下式結構的胺基酸衍生物色氨酸，或具有下式結構的色氨酸衍生物焦穀氨酸或2-氮雜環丁烷二酮-4-羧酸；B為絲氨酸、甘氨酸、纈氨酸、丙氨酸、蘇氨酸或β-丙氨酸；C為具有疏水性官能團的胺基酸基；並且D為羥基或氨基；其中R1為氫、-(CH2)pCH3或-CO-(CH2)pCH3，R2為氫或烷基；R3為氫或烷氧基；R4為氫或烷基；R5為氫，氨基或醯基氨基；m為2-5的整數；n為0-2的整數；p為0-5的整數；以及q為0-3的整數。可適用於本發明組合物的另一靶向配位體為具有下式結構的肽，肽衍生物，或其鹽A-B-Arg-Gly-Asp-C-D其中A為乳清酸或乳清氫酸；B為胺基酸；C為具有疏水性官能團的胺基酸；以及D為羥基或氨基。在上述化合物中，在「C」的定義中具有疏水性官能團的胺基酸的實例為色氨酸或苯丙氨酸。例如，Sato等在美國專利5,498,601中和在下列公開的歐洲專利申請EP0368486A2、EP0382451A2和EP0422938B1中公開了能夠在本發明組合物中用作靶向配位體的各種肽，特別是GPIIbIIIa，將該公開全文引入本文供參考。除了上述舉例說明的那些外，根據本公開，其它可在本發明組合物中使用的靶向配位體是本領域技術人員顯而易見的。例如其它適宜的靶向配位體包括共軛肽如糖共軛肽和外源凝集素，它們是與糖連接的肽。組合物中可以包含一個靶向配位體，以及兩個或多個不同的靶向配位體。本發明也通過具有下式結構的化合物其中各X1獨立地為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR4-、-X4-C(＝X5)-、-C(＝X5)-X4-或-C(＝X5)-；各X2和X3獨立地為直接的鍵、-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4-、-X4-C(＝X5)-R5-、-C(＝X5)-X4-R5-、-X4-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-C(＝X5)-R5-C(＝X5)-X4-或-R5-C(＝X5)-X4-R5-X4-C(＝X5)-；各X4獨立地為-O-、-NR4-或-S-；各X5獨立地為O或S；M為-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-(YX5)P-(＝X5)-X4-或-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-R5-；Y為氫或可藥用抗衡離子；Z為親水性聚合物；Q為靶向配位體或其前體；各R1獨立地為1到約50個碳的烷基；各R2獨立地為1到約30個碳的亞烷基；各R3和R4獨立地為氫或1到約10個碳的烷基；並且各R5獨立地為直接的鍵或1到約30個碳的亞烷基。在上式中，當任何符號在某特定結構式或取代基中出現一次以上時其在各實施例中的含義是彼此獨立地。在上式中，當兩個或多個相鄰的符號定義為「直接的鍵」用來提供多個相鄰的直接的鍵時，該多個並且相鄰的直接的鍵合併為一個直接的鍵。在上式中，各X1獨立地為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR4-、-X4-C(＝X5)-、-C(＝X5)-X4-或-C(＝X5)-；在優選的實例中，各X1獨立地為-X4-C(＝X5)-、-C(＝X5)-X4-或-C(＝X5)-。更優選地，各X1獨立地為-X4-C(＝X5)-或-C(＝X5)-X4-。進一步優選的，各X1獨立地為-C(＝X5)-X4-，例如，-C(＝O)-O-。在上式中，各X2和X3獨立地為直接的鍵，-R5-X4-C(＝X5)-，-R5-C(＝X5)-X4-、-X4-C(＝X5)-R5-、-C(＝X5)-X4-R5-、-X4-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-C(＝X5)-R5-C(＝X5)-X4-，或-R5-C(＝X5)-X4-R5-X4-C(＝X5)-。在優選的實例中，各X2和X3獨立地為直接的鍵、-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4-、-X4-C(＝X5)-R5-、-C(＝X5)-X4-R5-、-X4-R5-C(＝X5)-X4-或-R5-X4-C(＝X5)-R5-C(＝X5)-X4-。更優選地，X2為-CH2CH2-C(＝O)-NH-或-CH2CH2NH-C(＝O)-CH2CH2-C(＝O)-NH-並且X3為直接的鍵、-C(＝O)-NH-、-NH-C(＝O)-、-NH-C(＝O)-CH2、-NHCH2-C(＝O)-NH-或-NH-C(＝O)-CH2CH2。在上式中，各X4獨立地為-O-、-NR4-或-S-。優選地，各X4獨立地為-O-、-NR4-。在上式中，M為-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-或-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-R5-。在某優選實例中，M為-R5-X4-C(＝X5)-或-R5-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-，更優選地，M為-CH2O-C(＝O)-或-CH2O-(HO)P(＝O)-O-。在某些其它優選的實例中，M為-R5-X4-C(＝X5)-或-R5-C(＝X5)-X4-。在其它進一步優選的實例中，M為-R5-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-或-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-R5-。其中，至少X4或X5中的一個為S。在上式中，Z為親水性共聚物。優選地，Z選自聚烯化氧、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯醯胺、聚甲基丙烯醯胺、聚噻吩嗪、聚(羥基烷基羧酸)和聚噁唑烷。更優選地，Z含有聚氧化亞烴。甚至更優選地，Z是選自聚乙二醇和聚丙二醇的聚氧化亞烴，聚乙二醇是更優選的。在某些其它優選的實施方案中，Z是親水聚合物而不是包括聚乙二醇和聚丙二醇的聚氧化亞烴。Z的分子量可以變化，例如，取決於化合物的最終特定用途。優選地，Z為具有約100-約10,000分子量範圍的聚合物，並且該範圍的所有聚合物都可以進行組合和亞組合。更優選地，Z為具有約1000-約5,000分子量的聚合物。也優選顯示範圍約大於1到約3的多分散性的聚合物並包括所有在該範圍的組合和亞組合。更優選地，Z是具有約大於1到約2的多分散性的聚合物，約大於1到約1.5的多分散性聚合物甚至是更優選的，約大於1到約1.2的多分散性聚合物是最優選的。在上式中，Q是靶向配位體或其前體。在Q為靶向配位體的實施方案中，Q優選靶向於選自心肌細胞、內皮細胞、表皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。另外，在Q為靶向配位體的實施方案中，Q優選選自蛋白質、肽、糖、甾體化合物、甾體類似物、生物活性劑和遺傳物質。在後者實施方案中，Q優選選自蛋白質、肽和糖。在Q含有肽的實施方案中，Q優選肽-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val或環狀肽，如DMP728(如參見Mousa等，ThrombosisResearch，Vol.76(2)，pp.109-119，1994)，其公開的全部內容都引入本文供參考)。在Q為含有蛋白質的實施方案中，Q優選蛋白質A。在Q為含有糖的實施方案中，Q優選糖，甘露糖和葡萄糖是更選的。在Q為靶向配位體前體的實施方案中，Q優選含有部分未飽和的或芳香的5-7元的含有1或2個N、O或S原子的單環，更優選含有馬來醯亞胺部分或吡啶基部分。在上式中，R1獨立地為1-約50個碳原子範圍內的烷基和在此範圍中的所有組合和亞組合，或者約2到約50個碳原子的亞烷基和在此範圍中的所有組合和亞組合。優選地，R1獨立地為約1-約40個碳原子的烷基。更優選R1獨立地為約5-約30個碳原子的烷基。甚至更優選的R1獨立地為約10-約20個碳原子的烷基，約15個碳原子的烷基是最優選的。在某些優選的實施方案中，R1為1到約20個碳原子的短鏈烷基。在其它優選的實施方案中，R1是約20-約50，或者約30-約50個碳原子的長鏈烷基。在上式中，R2獨立地為1-約30個碳原子範圍的亞烷基和在此範圍中的所有組合和亞組合。優選地，R2獨立地為1-約20個碳原子的亞烷基。更優選R2獨立地為1-約10個碳原子的亞烷基，最好R2獨立地為1-約5個碳原子的亞烷基，亞甲基是特別優選的。在上式中，R3和R4獨立地為氫或1到約10個碳原子範圍的烷基和在此範圍中的所有組合和亞組合。優選地，R3和R4各為氫或1-約5個碳原子的烷基。更優選地，R3和R4都為氫。在上式中，R5獨立地為直接的鍵或1到約30個碳原子範圍的亞烷基和在此範圍中的所有組合和亞組合。優選地，R5獨立地為直接的鍵或1-約20個碳原子的亞烷基。更優選地，R5獨立地為直接的鍵或1-10個碳原子的亞烷基。甚至更優選地，R5獨立地為直接的鍵或1-約5個碳原子的亞烷基。最優選地，R5均為直接的鍵或-(CH2)x-，x為1或2。本文也提供下式化合物L-P-T其中L為類脂、蛋白質或聚合物；P為親水聚合物；和T為靶向配位體。在優選的實施方案中，L為選自下列物質的類脂卵磷脂、磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯肌醇、心磷脂、膽固醇、膽固醇胺、溶血磷脂、赤型-鞘氨醇、鞘磷脂、神經醯胺、腦苷脂類、飽和的磷脂、不飽和的磷脂和磷蝦磷脂。更優選地，L是選自下列物質的類脂卵磷脂、磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲氨酸和磷脂醯肌醇。在其它優選的實施方案中，L為選自下列物質的類脂1，2-二醯基-sn-甘油基-3-膽鹼磷酸、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-二氧磷基乙醇胺、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔二氧磷基-rac-(1-甘油)〕、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔磷酸絲氨酸〕、溶血磷脂醯膽鹼、溶血磷脂醯甘油、1，2-二醯基-sn-甘油、1，2-二醯基-亞乙基-甘油基、N-(正己醯胺)-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、N-十二烷醯基胺-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、N-琥珀醯-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、N-戊二醯基-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺和N-十二烷醯基-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺。更優選地，L為選自下列物質的類脂1，2-二醯基-sn-甘油基-3-膽鹼磷酸、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-二氧磷基乙醇胺、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔二氧磷基-rac-(1-甘油)〕、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔磷酸絲氨酸〕、溶血磷脂醯膽鹼、溶血磷脂醯甘油和1，2-二醯基-sn-甘油。在其它優選的實施方案中，L為蛋白質，它包含白蛋白。在進一步優選的實施方案中，L為聚合物，它包含合成的聚合物或由單體製備的聚合物，所述單體選自丙烯酸、異丁烯酸、哌嗪、巴豆酸、丙烯醯胺、丙烯酸乙酯、異丁烯酸甲酯、異丁烯酸2-羥基乙酯、乳酸、羥基乙酸、ε-己內酯、丙烯醛、腈基丙烯酸酯、雙酚A、表氯醇、羥基烷基丙烯酸酯、矽氧烷、二甲基矽氧烷、環氧乙烷、環氧丙烷、乙二醇、羥基烷基異丁烯酸酯、N-取代的丙烯醯胺、N-取代的異丁烯醯胺、N-乙烯基-2-吡咯烷酮、2，4-戊二烯-1-醇、乙烯基乙酸酯、丙烯腈、苯乙烯、對-氨基-苯乙烯、對-氨基苄基苯乙烯、苯乙烯磺酸鈉、2-次硫基乙基異丁烯酸鈉、乙烯基吡啶、異丁烯酸氨基乙酯和2-異丁烯醯氧基三腈基氯化銨。也優選下列化合物，物質L為聚合物，它包含合成的聚合物或共聚物，所述聚合物或共聚物選自聚丙烯酸、聚乙烯亞胺、聚異丁烯酸、聚異丁烯酸甲酯、聚矽氧烷、聚二甲基矽氧烷、聚乳酸、聚(ε-己內酯)、環氧樹脂、聚(環氧乙烷)、聚(環氧丙烷)、聚(乙二醇)、聚醯胺、聚亞乙烯-聚丙烯腈、聚亞乙烯-聚丙烯腈-聚異丁烯酸甲酯和聚苯乙烯-聚丙烯腈。這些聚合物中優選的是聚亞乙烯-聚丙烯腈共聚物。在上述化合物中，P為親水聚合物，優選P為選自下面的親水聚合物聚烯化氧、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯醯胺、聚甲基丙烯醯胺、聚磷氮雜烯、聚羥烷基羧酸和聚噁唑烷。更優選P為聚烯化氧，尤其優選聚乙二醇和聚丙二醇且最優選聚乙二醇。在上述結構式中，T為靶向配位體。優選T為靶向選自下述細胞或受體的靶向配位體心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體。同樣在優選的實施方案中，T為選自蛋白質、肽類、糖類、類固醇、類固醇類似物、生物活性物質和遺傳物質的靶向配位體，其中較優選蛋白質、肽類和糖類。還優選靶向動脈粥樣硬化區，尤其是動脈粥樣硬化斑的靶向配位體。在包括糖基的靶向配位體情況下，合適的糖部分包括，例如，單糖、二糖和多糖。典型的單糖可含有六個碳原子，且這些糖類包括阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、古羅糖、艾杜糖、半乳糖、塔羅糖、果糖、阿洛酮糖、verbose和塔格糖。五碳糖包括核糖、阿拉伯糖、木糖、來蘇糖、核酮糖和木酮糖。四碳糖包括赤蘚糖、蘇阿糖和赤蘚酮糖。二糖類包括蔗糖、乳糖、麥芽糖、異麥芽糖和纖維素二糖。載有糖類的靶向配位體可通過多步有機合成途徑合成，參見下文更詳盡的說明。例如，載有靶向性葡萄糖部分的類脂可通過四苄基-α-吡喃葡糖基溴與ω-三氟乙醯氨基聚乙二醇反應，得到四苄基-ω-吡喃葡糖基-ω′-三氟乙醯氨基聚乙二醇。然後可以將此產物在碳酸鈉或碳酸鉀溶液中水解，爾後氫化，得到ω-吡喃葡糖基-ω′-氨基聚乙二醇。氨基吡喃葡糖基終止的聚乙二醇隨後可與N-DPGS-琥珀醯亞胺反應形成載有類脂的糖DPGS-NH-PEG-葡萄糖。也優選靶向梗塞心肌的靶向配位體。在一些實施方案中，靶向配位體靶向癌細胞。本發明化合物的上述優選實施方案對各種情況都優選，這些包括合成的容易性、診斷效力、增強的生物相容性和/或改進的靶向性效力。靶向配位體可通過各種方式結合到本發明組合物中。一般說來，通過與組合物中所包含的一種或多種物質共價或非共價結合，可以將靶向配位體結合到本發明組合物中，這些物質例如包括類脂、蛋白質、聚合物和/輔助穩定物質。優選靶向配位體通過共價鍵與本發明組合物中所包含的一種或多種上述物質結合。如上所述，本發明的優選組合物包括類脂、蛋白質或聚合物化合物。在這些組合物中，靶向配位體優選與類脂、蛋白質或靶向配位體與類脂、蛋白質、聚合物和/或賦形劑結合的典型共價鍵包括醯胺(-CONH-)；硫代醯胺(-CSNH-)；醚(ROR′，其中R和R′可以相同或不同，且不為氫)；酯(-COO-)；硫酯(-COS-)；-O-；-S-；-Sn-，其中n大於1，優選約2至約8，更優選約2；氨基甲酸酯；-NH-；-NR-，其中R為烷基，例如，含1至約4個碳原子的烷基；尿烷和取代亞胺酸酯；以及兩種或多種上述這些共價鍵的組合。介於靶向配位體和例如類脂之間的共價鍵可通過利用可用作間隔基的分子完成，以增加配位體的構象和地形的撓性。這類間隔基的實例包括琥珀酸、1，6己二酸、1，8辛二酸等，以及改性胺基酸如6氨基己酸、4氨基丁酸等。另外，在包括肽部分的靶向配位體情況下，側鏈-側鏈交聯可以用側鏈-端基交聯和/或端基-端基交聯補充。同樣，小分子間隔基如辛二亞胺酸二甲酯可用於實現類似目的。還可以採用包括在席夫鹼型反應中使用的反應物。席夫鹼鍵(可能為可逆鍵)通過利用還原性氨基化步驟可以形成較牢固的共價連鍵。此步驟涉及化學還原劑，如氫化鋁鋰還原劑或其溫和類似物，包括二異丁基氫化鋁鋰(DIBAL)，硼氫化鈉(NaBH4)或氰基硼氫化鈉(NaBH3CN)。靶向配位體與本發明組合物中的物質(包括類脂、蛋白質和/或聚合物)間的共價鍵可採用基於本發明公開內容對本領域普通技術人員而言為顯而易見的有機合成技術完成。例如，利用公知的偶合劑或活化劑，可以將靶向配位體連接到包括類脂的物質上。正如專業人員所知道的那樣，活化劑一般為親電性的。使用這種親電性物質有助於共價鍵的形成。可使用的典型活化劑包括，例如，羰基二咪唑(CDI)、二環己基碳化二亞胺(DCC)、二異丙基碳化二亞胺(DIC)、甲基磺醯氯、切除試劑和二苯基磷醯氯。共價鍵可包括交聯和/或聚合。交聯優選是指聚合物的兩條鏈通過由元素，基團或化合物組成的橋連接情況，這種橋通過共價化學鍵連接鏈中的某些碳原子。例如，交聯可以發生在由半胱氨酸殘基的二硫鍵連接的聚肽中。交聯可按下所述完成(1)加入化學物質(交聯劑)並加熱混合物，或(2)高能輻射聚合物。例如R.L.Lunbland在「蛋白質修飾技術」(TechniquesinProteinModification)，CRC出版社，Inc.，AnnArbor，MI，pp.249-68(1995)中描述了各種不同長度和/或官能度的交聯劑，或「系鏈」，此文獻所公開的內容在此全部併入本文作為參考。典型的交聯劑包括，例如，3，3′-二硫代雙(琥珀醯併入本文作為參考。典型的交聯劑包括，例如，3、3′-二硫代雙(琥珀醯亞胺基丙酸酯)、辛二亞胺酸二甲酯及其變型(基於烴長度)，以及雙-N-馬來醯亞胺基-1，8-辛烷。根據優選的實施方案，靶向配位體可通過連接基連接到類脂、蛋白質或聚合物上。各種連接基是已知的，並且對本領域專業人員而言，一旦了解掌握了本
發明內容，這些是顯而易見的。優選連接基包括親水聚合物。合適的親水連接基聚合物包括，例如，聚烯化氧，如聚乙二醇(PEG)和聚丙二醇(PPG)，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯基甲基醚，聚丙烯醯胺，如聚甲基丙烯醯胺，聚二甲基丙烯醯胺和聚羥丙基丙烯醯胺，聚丙烯酸羥乙酯，聚甲基丙烯酸羥丙酯，聚甲基噁唑啉，聚乙基噁唑啉，聚羥乙基噁唑啉，聚羥丙基惡唑啉，聚乙烯醇，聚磷氮雜烯，聚羥烷基羧酸，聚噁唑烷和聚天冬醯胺。親水聚合物優選選自PEG、PPG、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮及它們的共聚物、其中較優選PEG和PPG聚合物，更優選PEG聚合物。因此，在涉及類脂組合物的實施方案中，其中類脂組合物包括載有如包括DPPE-PEG的聚合物的類脂，靶向配位體可與類脂連接的聚合物直接連接，以提供DPPE-PEG-TL共軛物，此處，TL為靶向配位體。因此，使用DPPE-PEG實例，如DPPE-PEG5000時，上述共軛物可以表示為DPPE-PEG5000-TL。用作連接基的親水聚合物優選為雙官能聚合物，例如，雙官能PEG，如二氨基-PEG。在這種情況下，PEG基團的一端與類脂化合物連接，並且其游離末端通過醯胺鍵與靶向配位體鍵合。還可使用其中一端被端羧基取代，而另一端被端氨基取代的親水聚合物，例如PEG。優選後一類雙官能親水聚合物，因為它們具有各種類似胺基酸的性質。當採用具有兩個單一端官能團的連接基時，可使用標準肽方法學連接靶向配位體與類脂。雙官能親水聚合物，特別是雙官能PEGs，可採用標準有機合成方法學合成。此外，許多這些物質可以從市場上購得。例如，α-氨基ω-羧基PEG可從ShearwaterPolymers(Huntsville，AL)購得。使用PEG物質作為連接基的優點在於PEG的尺寸可以變化，從而使得乙二醇單體亞基數量可少至約5，或多至約500或更多。因此，如果需要，「系鏈」或鍵長可以變化。依據所用的特定靶向配位體，這可能是非常重要的。例如，包括大分子蛋白質的靶向配位體可能需要短系鏈，以便模擬膜結合蛋白。短系鏈還容許泡囊保持對細胞的緊密鄰近。這樣有利於與還包括生物活性劑的泡囊結合使用，這是因為可被傳送到細胞中的生物活性劑的濃度可大大增高。其它可以提供短系鏈的適宜的連接基為甘油醛。甘油醛可以通過席夫鹼反應與DPPE結合。其後的Amadori重排可以提供牢固的短連接基。席夫鹼的β羰基然後可以與靶向性蛋白或肽的賴氨酸或精氨酸反應，形成定向類脂。更準確地講，本發明組合物中所用的化合物、包括類脂、蛋白質和/或聚合物，可以含有各種官能團，如羥基、硫基和氨基，利用合適的偶合條件，這些官能團可以與親水聚合物連接基的羧酸或羧酸衍生物反應，對本領域技術人員而言，一旦掌握了本發明的公開內容，這些偶合條件是顯而易見的。羧基(或其衍生物)與官能團如羥基、硫基或氨基反應形成酯，硫酯或醯胺基之後，任何被護的官能團可以利用本領域技術人員熟知的方法脫保護。這裡所用的術語「保護基」是指可用於阻止官能團反應並且根據需要可以被除去以得到未保護官能團的任何基團。可使用任何各種不同的保護基，不過這些基團將根據受保護的基團是氨基、羥基還是羧基而變化。倘如官能團為羥基，適宜的保護基包括，例如，一些醚、酯和碳酸酯。這類保護基見例如Greene，TW和Wuts，PGM「有機合成中的保護基(ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis)」，JohnWiley，NewYork，2ndEdition(1991)中所述。此文獻的公開內容在此全部併入本文作為參考。例如，典型的氨基保護基包括叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(Cbz)、鄰-硝基苄氧基羰基和三氟乙醯基(TFA)。包含在泡囊中的聚合物的主鏈上可能存在的氨基通過利用偶合劑(如戊二醛)形成席夫鹼而與親水連接聚合物上的氨基偶聯。這種偶聯作用的實例見Allcock等人在「大分子」(Macromolecules)，Vol.19(6)，pp.1502-1508(1986)中所述，此文獻內容在此全部併入本文作為參考。例如，如果泡囊由聚賴氨酸製成，游離氨基可以曝露在泡囊的表面，並且這些游離氨基可如上所述活化。隨後可使用活化氨基偶聯官能化親水聚合物，如α-氨基-ω-羥基-PEG，其中ω-羥基已用碳酸酯保護。在反應完成之後，裂解碳酸酯，從而能活化端羥基與合適的靶向配位體反應。。在某些實施方案中，泡囊的表面可通過置換含氯磷氮雜烯殘基如聚二氯磷氮雜烯中的氯原子活化。隨後與靶向配位體加成並用水或含水甲醇終止剩餘的氯化物基團，產生偶聯產物。此外，可以合成聚(二苯氧基磷氮雜烯)(Allcock等人「大分子」(Macromolecules)，Vol.(1986)19(6)，pp.1502-1508)並固定在DPPE上，隨後加入硝酸和乙酸酐混合物硝化苯氧基基團。然後按下述活化產生的硝基例如，(1)用溶在0.1M磷酸緩衝液(pH11)中的溴化氰處理，接著加入含有游離氨基的靶向配位體產生偶聯的脲衍生物，(2)利用亞硝酸鈉/HCl，形成重氮鹽，接著加入靶向配位體形成偶聯配位體，和/或(3)利用二醛如上述戊二醛，形成席夫鹼。在DPPE連接到親水聚合物和靶向配位體上之後，可以用本文所述方法配製泡囊。聚合物上的醛基可通過形成席夫鹼與如上所述的胺偶聯。這種偶聯方法的實例見Allcock和Austin在「大分子」(Macromolecules)，Vol.14，p.1616(1981)中所述，此文獻內容在此全部併入本文作為參考。上述方法中，聚合物或類脂如磷脂醯甘油或磷脂醯乙醇胺的末端優選被活化，並與親水聚合物連接基偶合，類脂的末端用適宜方法封閉。作為此策略的實例，是在羥基苯並三唑存在下，在N-甲基吡咯烷酮中用1，1′-羰基二咪唑活化具有t-Boc保護的端氨基和游離羧基端基的α-氨基ω-羧基-PEG-4000。在加入磷脂醯乙醇胺之後，使用三氟乙酸(TFA)除去t-Boc基團，給出遊離胺。然後將胺與可包括有如類脂、蛋白質、生物鹼或其它物質的靶向配位體通過類似的活化配位體來反應，得到類脂-連接基-靶向配位體共軛物。可使用除上面所舉例說明之外的其它策略製備類脂-連接基-靶向配位體共軛物。一般說來，這些方法可使用合成有機化學領域人員普遍公知的合成策略。正如本領域普通技術人員所知道的那樣，免疫球蛋白一般包含有被證明為「鉸鏈」區的柔性區。例如參見「ConciseEncyclopediaofBiochemistry」，第二版，WalterdeGruyterCo.，pp.282-283(1988)。利用鉸鏈區中完整的硫醇部位，可將Fab′片斷連接到類脂、聚合物、蛋白質和/或泡囊上。該區為偶合Fab′片斷的優選區域，而這種Fab′片斷為遠離抗原識別部位的潛在結合部位。一般說來，使用鉸鏈基團的硫醇可能比較困難，除非它們能容易製得。更具體講，正如Shahinian和Salbias(「生物化學和生物物理學報」(BiochimicaetBiophysicaActa)，Vol1239(1995)157-167)所概述的那樣，重要的是還原硫醇以便它們能有效地偶合到馬來醯亞胺衍生物連接基。通常使用的還原劑的實例為乙二硫醇、巰基乙醇、巰基乙胺，且更常用二硫蘇糖醇(通常稱作Cleland試劑)。但是，應當注意的是，當使用某些還原劑如二硫蘇糖醇時，應小心操作，因為可能會發生過還原。對於蛋白質，甄別使用還原劑可能是必需的，因為過還原和其後的變形或構型變化，可能會影響蛋白質的活性或結合能力。例如，參見Shahinian，S.和Salvias，J.R.(1995)「生物化學和生物物理學報」(Biochim.Biophys.Acta)1239，157-167。F(ab′)2抗體片斷可通過在37℃下用胃蛋白酶(60μg/ml)/0.1M乙酸鈉(pH4.2)溫育抗體4小時製得。加入2MTris(pH8.8)終止消化，Tris的最終濃度為80mM。然後通過離心(10,000xg，30min，4℃)得到F(ab′)2片斷。隨後將上清液在150mMNaCl、20mM磷酸鹽(pH7.0)環境下於4℃透析。爾後將它們裝入A蛋白-SepharoseCL-4B柱中進行層析，除去任何未消化的IgG。F(ab′)2片斷然後可在使用之前通過用氮氣脫氣衝洗溶液製備。可以得到5mg/ml濃度的F(ab′)2片斷，它們可以在30mM半胱氨酸中於氬氣氛下被還原。另一方面，也可使用半胱胺。可使用100mMTris、pH7.6作為緩衝液，在37℃下溫育15分鐘。然後用等體積量合適的試驗緩衝液將溶液稀釋2倍，並將它們旋轉通過0.4ml生物膠P-6DG自旋柱。所得F(ab′)2片斷在與馬來醯亞胺連接基偶合時效力更高。還應注意，使用相同方法，也可以將含有半胱氨酸殘基的其它大分子物偶合到馬來醯亞胺間隔基上。同樣，也可以使用肽，條件是它們含有半胱氨酸殘基。如果肽不是新近製備的，肽結構中的半胱氨酸殘基可能會被氧化，這樣可能需要用上述方法再生硫醇基。另外的連接基包括可用於偶合到雙官能間隔基上的類脂的其它衍生物。例如，磷脂醯乙醇胺(PE)可以偶合到雙官能物上。其中可使用例如4-(對-馬來醯胺基苯基)丁酸N-琥珀醯亞胺酯(SMPB)和3-(2-吡啶基二硫醇)丙酸N-琥珀醯亞胺酯(SPDP)、反-4-(N-馬來醯亞氨基甲基)環己烷-1-羧酸酯N-琥珀醯亞胺酯(SMCC)和3-馬來醯亞氨基苯甲酸N-琥珀醯亞胺酯(SMB)來產生雙官能化類脂MPB-PE和PDP-PE。親水間隔基如聚乙二醇乙胺(它們含有活性基團，如胺或羥基)的游離端可用於結合輔因子或其它靶向配位體。例如，聚乙二醇乙胺可與N-琥珀醯亞氨基生物素或對-硝基苯基生物素反應，在間隔基上引入有用的偶合基。例如，生物素可偶合到間隔基上並且此間隔基很容易非共價結合蛋白質。例如，MPB-PEG-DPPE可按下述合成。在PEG末端具有游離氨基的DPPE-PEG如前所述形成。然後在氯仿中利用1當量三乙胺使SMPB和DPPE-PEG以1∶5摩爾比反應合成SMPBPEG-DPPE。3小時後，在氬氣氣氛下蒸發反應混合物至幹。利用製備薄層色譜除去過量未反應的SMPB和主要副產物(TLC，矽膠，用50％丙酮/氯仿展開)。利用20-30％甲醇/氯仿(V∶V)從矽膠上提取上部分類脂帶，結果分離到純淨完整的MPB-Peg-DPPE。然後可將鏈親和素偶合到蛋白質上，以便蛋白質本身隨後又被偶合到MPB-PEG-DPPE上。迅速將SPDP用鏈親和素在室溫下溫育30分鐘並使用色譜除去未反應的SPDP。向反應混合物中加入二硫蘇糖醇，10分鐘後，2-硫代吡啶酮的濃度為343nM。用DTT(25mM)還原反應混合物的剩餘物10分鐘。凝膠排阻衝洗分離硫醇鹽產物。所產生的鏈親和素標記蛋白然後可用於結合與類脂部分固定的生物素化間隔基。在本發明的優選實施方案中，靶向化合物，即靶向類脂、蛋白和聚合物被摻入到用於形成靶向泡囊的組合物中，這些靶向泡囊包括例如靶向微膠粒、靶向脂質體、靶向白蛋白塗布泡囊和/或靶向聚合物塗布泡囊。連接到製備泡囊的化合物上的靶向配位體朝外定向離開泡囊表面。這樣提供了可用於靶向受體和組織的靶向泡囊。在某些實施方案中，靶向配位體可通過非共價締合方式摻入到本發明組合物中。正如本領域技術人員所公知的那樣，非共價締合通常指各種因素的作用，包括，例如，所涉及分子的極性、所涉及分子的電荷(正電荷或負電荷)(如果有的話)、通過分子網絡的氫鍵的程度等。非共價鍵優選選自離子相互作用、偶極-偶極相互作用、氫鍵、親水相互作用、範得瓦耳斯力以及它們的任何組合。非共價相互作用可被用於將靶向配位體鍵合到類脂上。或直接鍵合到泡囊的表面上。例如，胺基酸序列Gly-Gly-His可通過連接基如PEG鍵合到泡囊的表面，然後加入銅，鐵或釩離子。蛋白質，如含有組氨酸殘基的抗體，隨後可通過含有銅離子的離子橋被鍵合到泡囊上，如美國專利5,466,467中所述，此文獻的公開內容在此全部併入本文用作參考。氫鍵的實例包括可被摻合到類脂組合物中的心磷脂類脂。在本發明涉及泡囊組合物的優選方案中，例如，pH和/或體內溫度的變化可以引起靶向配位體的位置變化，如從泡囊內的位置變化到泡囊外壁的外部位置。這可以促進靶向配位體與定向部位的結合，定向部位包括受體如GPIIbIIIa受體和組織，包括心肌，內皮和上皮細胞，這是由於靶向配位體具有更大的暴露於這類定向部位的可能性。此外，高能超聲波可被用於促進泡囊的破裂。這樣可以將靶向配位體暴露在需要的結合部位。如上所述，本發明的類脂和/或泡囊組合物最好在含水環境中配製。這種環境可誘導類脂(基於其疏水/親水性質)形成泡囊，它們是在這種環境中產生的最穩定的構型。可用於產生這種含水環境的稀釋劑包括，例如，水，包括去離子水或含有一種或多種溶解溶質如鹽的水，優選這些不幹擾泡囊的形成和/或穩定性或它們作為診斷劑如超聲波造影劑、MRI造影劑或「CT」造影劑用途的溶質；以及普通鹽水和生理鹽水。本發明的類脂和/或泡囊組合物還可包括其它造影劑，包括常規造影劑，它們起著增強其作為診斷成像用造影劑效力的作用。因此，本發明提供了泡囊組合物，其中包括柔性泡囊，例如，由類脂配製形成的泡囊或非柔性泡囊，例如由聚甲基丙烯酸甲酯製備的泡囊。預期本發明組合物特別適用於超聲波儀，包括診斷和治療超聲波儀。本發明組合物在超聲波儀中的應用遍及本發明說明書。如上所述，本發明組合物還用於計算機化X射線斷層攝影術(CT)成像。CT具有各種缺點，並且與上述診斷技術相比，常常是低效的。然而，如果有足夠高濃度的本發明造影劑，尤其是氣體填充的泡囊組合物，被傳送到感興趣的區域，如血塊，通過降低血塊的總密度，血塊可以在CT影像上被檢測到。通常，需要向感興趣的CT檢測區，包括前述血塊，傳送約1/10濃度或更高濃度(按體積計)的1％氣體填充泡囊。適合本發明組合物使用的典型的順磁性造影劑包括，例如，穩定自由基，如穩定硝基氧化物，以及包括過渡元素，鑭系和錒系元素的化合物；如果需要，它們可以為鹽形式或可以共價鍵或非共價鍵方式與配位劑，包括其親脂衍生物結合，或與大分子蛋白質結合。優選的過渡元素，鑭系和錒系元素包括，例如，Gd(III)、Mn(II)、Cu(II)、Cr(III)、Fe(II)、Fe(III)、Co(II)、Er(II)、Ni(II)、Eu(III)和Dy(III)。更優選的元素可以為Gd(III)、Mn(II)、Cu(II)、Fe(II)、Fe(III)、Eu(III)和Dy(III)，尤其是Mn(II)和Gd(III)。如果需要，上述元素可以為鹽形式，包括無機鹽，如錳鹽，如氯化錳、碳酸錳、乙酸錳；以及有機鹽，如葡糖酸錳和羥基磷灰石錳。其它代表性鹽包括鐵鹽，如硫化鐵和三價鐵鹽如氯化鐵(III)。如果需要，這些元素還可通過共價或非共價締合與配位劑包括其親脂衍生物或蛋白質大分子結合。優選的配位劑包括，如二亞乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、1，4，7，10-四氮雜環十二烷-N，N′，N′，N-四乙酸(DOTA)、1，4，7，10-四氮雜環十二烷-N，N′，N″-三乙酸(DOTA)、3，6，9-三氮雜-12-氧雜-3，6，9-三羧基亞甲基-10-羧基-13-苯基-三癸酸(B-19036)、羥基苄基亞乙基二胺二乙酸(HBED)、N，N′-雙(吡啶氧基-5-磷酸鹽)亞乙基二胺、N，N′-二乙酸鹽(DPDP)、1，4，7-三氮雜環壬烷-N，N′，N″-三乙酸(NOTA)、1，4，8，11-四氮雜環十四烷-N，N′，N″，N-四乙酸(TETA)、kryptands(大環配合物)和去鐵胺。較優選的配位劑為EDTA、DTPA、DOTA、DO3A和kryptands，最優選DTPA。優選的親脂配合物包括配位劑EDTA、DOTA的烷基化衍生物，例如，N，N′-雙(羧基癸醯胺基甲基-N-2，3-二羥基丙基)-亞乙基二胺-N，N′-二乙酸鹽(EDTA-DDP)；N，N′-雙(羧基十八烷醯氨基-甲基)-N-2，3-二羥基丙基)亞乙基二胺-N，N′-二乙酸鹽(EDTA-ODP)；N，N′-雙(羧基-月桂醯氨基甲基-N-2，3-二羥基丙基)亞乙基二胺-N，N′-二乙酸鹽(EDTA-LDP)等等，包括美國專利5,312,617中所描述的那些，此文獻的內容在此全部併入本文用作參考。優選的蛋白質大分子包括，如β-球蛋白，在更優選白蛋白、聚精氨酸、聚賴氨酸和聚組氨酸。因此，合適的配合物包括Mn(II)-DTPA、Mn(II)-EDTA、Mn(II)-DOTA、Mn(II)DO3A、Mn(II)-kryptands、Gd(II)-DTPA、Gd(III)-DO3A、Gd(III)-krytands、Cr(III)-EDTA、Cu(II)-EDTA或鐵-去鐵胺，尤其是Mn(II)-EDTA或Gd(III)-DTPA。硝基氧化物為順磁性造影劑，由於硝基氧化物分子中存在未成對電子，它們能增加MRI的T1和T2鬆弛速率。正如本領域普通技術人員所知道的那樣，用作MRI造影劑的特定化合物的順磁效應可能(至少部分)與順磁性分子中的未成對電子的數量有關，特別是與未成對電子數量的平方有關。例如，釓具有七個未成對電子，而硝基氧化物分子含有一個未成對電子。因此，與硝基氧化物相比，釓常常是更強的MRI造影劑。然而，效應相關時間(評估造影劑效力的另一重要參數)使得硝基氧化物具有增強的弛豫能力。當通過連接順磁性造影劑到大分子上來減慢轉動速率時，轉動將變得更慢，從而能更有效地轉移能量加速水質子的弛豫。然而，在釓中，電子自旋弛豫非常迅速，限制了緩慢旋轉相關時間能增加弛豫性的程度。但是，對於硝基氧化物，電子自旋相關時間比較適宜，弛豫性的極大增加可通過減慢這些分子的旋轉相關時間而達到。本發明的氣體填充泡囊特別適於達到減慢旋轉相關時間和弛豫性總改進的目的。儘管不擬囿於任何特定的操作理論，但可以預料，由於硝基氧化物可以被設計能通過製備其烷基衍生物來塗布泡囊的四周，所得到的相關時間能被優化。此外，所產生的本發明造影劑可視為磁性球，一種能使弛豫性達到最大限度的幾何構型。如果需要，硝基氧化物可被烷基化或用其它方式衍生化，如硝基氧化物2，2，5，5-四甲基-1-吡咯烷氧基自由基和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基自由基(TMPO)。適合本發明組合物中使用的典型的超順磁性造影劑包括受到磁疇的金屬氧化物和硫化物，亞鐵-或鐵磁性化合物，如純鐵、磁性氧化鐵如磁鐵礦、γ-Fe2O3、Fe3O4、錳鐵、鈷鐵和鎳鐵。順磁性氣體也可以用於本發明組合物中，如氧17氣體(17O2)。此外，還可以使用超極化氙、氡或氦氣。然後可使用MR全身成像術迅速掃描身體來確定血栓形成；並且如果需要的話，可施加超聲波幫助血栓溶解。造影劑(如上面所述的順磁性和超順磁性造影劑)可用作類脂和/或泡囊組合物的組分。對於泡囊組合物，上述造影劑可被包裹在其內腔內，以含有泡囊的溶液形式施用，它們可與任何其它穩定物摻合，或塗布在泡囊的表面或膜上。如果需要，順磁和超順磁劑可以其烷基化衍生物或其它衍生物的形式摻合在組合物中，尤其是摻合到泡囊的類脂壁內被傳遞。特別是硝基氧化物2，2，5，5-四甲基-1-吡咯烷氧基自由基和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基自由基，可以與長鏈脂肪酸在甲基未佔居的環位置上通過各種連鍵，包括如乙醯氧基連鍵形成加合物。這種加合物非常適合摻入到本發明的類脂和/或泡囊組合物內。任一種或多種順磁劑和/或超順磁劑的混合物可用於本發明組合物中。如果需要，順磁性劑和超順磁性劑還可獨立地共同施用。本發明的類脂和/或泡囊組合物，尤其是泡囊組合物，不僅用作上述超順磁劑的有效載體，而且還可改進造影劑的磁化效應。超順磁性造影劑包括金屬氧化物，特別是氧化鐵，但也包括氧化錳，如含有不同量的經受磁疇的錳、鈷和鎳的氧化鐵。這些物質為毫微或微顆粒，並具有很高的體積敏感性和橫向弛豫速率。較大顆粒，如直徑約100nm的顆粒，具有大大高於R1弛豫性的R2弛豫性。較小顆粒，例如直徑約10至約15nm的顆粒，則具有稍低的R2弛豫性，但仍大大高於R1和R2的平衡值。對於更小的顆粒，例如直徑約3至約5nm的單晶氧化鐵顆粒，則具有較低的R2弛豫性，但可能具有最大的R1和R2平衡值。也可配製鐵蛋白來包裹具有非常高弛豫速率的超順磁性鐵的核。業已發現，類脂和/或泡囊組合物，尤其是泡囊組合物，包括氣體填充的泡囊，可以增加這些常規氧化鐵基MRI造影劑的效力和安全性。氧化鐵可簡單地摻入到類脂和/或泡囊組合物內。優選地，在類脂配製的泡囊情況下，氧化鐵可通過吸附在泡囊的表面摻入到泡囊的壁上，或者按美國專利5,088,499所述的方法包裹在泡囊的內部，此文獻的公開內容在此全部併入本文用作參考。不要擬囿於任何特殊操作理論，據信本發明的泡囊可通過多種機理增高超順磁性造影劑的效力。首先，認為泡囊起著增高氧化鐵顆粒的表觀磁濃度作用。同樣還認為泡囊可增加MRI造影劑(包括順磁和超順磁劑)的表觀旋轉相關時間，從而增大弛豫速率。此外，泡囊似乎能根據下述方式增加造影劑的表觀磁疇。本發明的一些泡囊，尤其是由類脂製成的泡囊，可被看作是根據懸浮介質具有不同磁化率的柔性球磁疇，懸浮介質如造影劑的懸浮液或血或其它體液，例如，在肌內注射或注射到體內其它部位的情況下就如此。對於純粒鐵或氧化鐵顆粒，應當注意，由這些物質提供的對比度依賴於顆粒尺寸。這種現象十分普遍並常常稱作水分子的「長期」弛豫。用更科學的術語講，這種弛豫機理依賴於分子配合物的有效尺寸，其中配合物中存在有順磁原子，或順磁分子或多分子。一種科學解釋可用下述Solomon-Bloembergen方程闡述，該方程將順磁作用定義為自旋1/2核的T1和T2弛豫時間與受順磁離子微擾的磁旋比g的函數1/T1M＝(2/15)S(S+1)γ2g2β2/r6[3τc/(1+ω12τc2)+7τc/(1+ωs2τc2)]+(2/3)S(S+1)A2/h2[τc/(1+ωs2τc2)]和1/T2M＝(1/15)S(S+1)γ2g2β2/r6[4τc+3τc/(1+ω12τc2)+13τc/(1+ws2τc2)]+(1/3)S(S+1)A2/h2[τc/(1+ωs2τc2)]其中S為電子自旋量子數；g為電子g因子；β為波爾磁子；ωI和ω5(657wI)為核自旋和電子自旋的拉莫爾角進動頻率；r為離子-核距離；A為超精細偶合常數；τc和τe分別為偶極和與標量相互作用的相關時間；和h為Planck常數。參見如Solomon，I.，「物理評論」(Phys.Rev.)Vol.99，p.559(1955)和Bloembergen，N.，「化學物理雜誌」(J.chem.Phys.)Vol.27，pp.572，595(1957)。少量大顆粒可能具有比大量比較小的顆粒更大的作用，這主要歸因於其具有較大相關時間。如果製得的氧化鐵顆粒非常大，則可能導致增加的毒性，並栓塞肺或可能激活補體串聯繫統。此外，據信顆粒的總尺寸並不象顆粒直徑那樣對其邊或外表面十分重要。磁疇或敏感效應隨顆粒表面增大呈指數下降。一般說來，對於偶極(通過空間)弛豫機理，這種指數下降顯示了r6與順磁性偶極-偶極相互作用之間的相互關係。從字面上講，距離順磁表面4埃的水分子比距離相同順磁表面2埃的水分子受到的影響小64倍。得到最大對比效果的理想情況使氧化鐵顆粒中空、具有撓性並儘可能大。迄今還不可能實現這種情況，據信這些優點至今也未被認識到。通過用造影劑塗布泡囊的內或外表面，即使個體造影劑如氧化鐵毫微顆粒或順磁離子具有相對較小的結構，造影劑的效力也能大大提高。在這種情況下，造影劑可起非常有效的較大泡囊的作用，其中有效磁疇由泡囊的直徑決定並且在泡囊的表面上最大。這些造影劑提高了撓性，即可塑性。雖然剛性泡囊可能在肺部或其它器官中積聚並引起毒性反應，但這些撓性泡囊能非常容易地滑過毛細管。與上述撓性泡囊相反，在某些情況下，最好用基本上不透性聚合材料製備泡囊，這些材料包括，例如，聚甲基丙烯酸甲酯。這樣往往導致形成這種泡囊，它們基本上為不透性的且為相對非彈性和脆性的。在涉及診斷成像例如超聲波成像的實施方案中，包含這種脆性泡囊的造影劑常常不能提供撓性泡囊所能提供的所需反射性。但是，通過增加超聲波的輸出功率，脆性泡囊可被破裂，從而產生能被超聲波傳感器檢測到的聲波發射。核醫學成像(NMI)也可與本發明的診斷和治療方法結合使用。例如，NMI可用於檢測放射性氣體，如Xe133，除上述氣體外它們可另外摻入到，或代替上述氣體摻入到本發明的組合物中。這种放射性氣體可包裹在泡囊內用於檢測血栓形成。優選地，雙官能螯合劑衍生物可摻入到泡囊的壁中，這樣產生的泡囊可用於NMI和超聲波。在這種情況下，高能、高質量核醫學成像同位素如鎝99m或銦111可被摻入到泡囊的壁中。然後可使用全身γ射線掃描照相機來迅速確定體內吸收的泡囊所在的區域。如果需要，也可以使用超聲波來確定血管中血塊的存在，這是因為與核醫學成像相比，超聲波往往能提供改進的分辨能力。NMI還可用於篩選患者整體以檢測血管血栓形成的面積，而超聲波則可施加到這些局部區域來促進泡囊的破裂並治療血塊。對於光學成像，則可將光活性氣體如氬氣或氖氣摻入到本發明組合物中。此外，還可使用光活性材料，如螢光材料包括卟啉衍生物。彈性攝影術是一種成像技術，較之使用頻率大於1MHz的超聲波，這種成像方法往往使用較低頻率聲波，例如約60KHz。在彈性攝影術情況下，一般施加聲能到組織上，然後測定組織的彈性。在本發明優選的涉及高彈性泡囊的實施方案中，這種泡囊在血塊上的聚焦增加了組織和/或血塊周圍空間的局部彈性。然後可用彈性攝影術測定這種增加的彈性。如果需要，彈性攝影術可與其它成像技術如MRI和超聲波結合使用。除上述診斷成像技術和血塊血栓溶解外，本發明組合物可用於各種診斷治療方式中。例如，生物活性劑如藥物可被摻入到本發明組合物內。有用的藥物包括，例如，硫酸肝素、組織纖溶酶原激活物、鏈激酶和水蛭素。對於治療應用，還可使用包括如二氫麥角胺的互補劑，它們可以與硫酸肝素一同使用以降低靜脈鬱滯。此外，苄丙酮香豆素可用作抗凝血治療的輔劑。遺傳物質也可被摻入到本發明組合物內。在泡囊組合物情況下，遺傳物質可摻入到泡囊的壁中，或摻入到泡囊的中央氣體填充的空腔中。當泡囊壁使用陽離子類脂時，這種情況可很方便地完成。也可使用基因如血管內皮細胞生長因子，或定向鹼性成纖維細胞生長因子的反義基因片斷。本發明可用於治療潛在的動脈粥樣硬化或用於降低細微內膜增生趨勢。本發明的類脂和/或泡囊組合物可使用各種適宜的方法製備。這些分別見下面涉及類脂組合物和氣體，包括氣體填充的泡囊的實施方案和涉及類脂組合物和氣體前體，包括氣體前體填充的泡囊的實施方案中所述，不過既包括氣體又包括氣體前體的組合物也構成了本發明的一部分。通過與組合物中所用的一種或多種物質(組合物由它們製成)鍵合，靶向普通可連接到氣體或氣體前體填充的泡囊上，這些物質包括如上所述的類脂、蛋白質、聚合物和/或輔助穩定物質。可以使用各種方法製備本發明的組合物，包括泡囊組合物，如泡囊和/或脂質體。這些方法包括如振蕩、乾燥、氣體滴注、噴霧乾燥等等。製備泡囊組合物的合適方法見美國專利5,469,854中所述，此文獻的內容在此全部併入本文用作參考。如上所述，泡囊優選由保持凝膠態的類脂製備。關於泡囊組合物的製備，下面將給予討論。泡囊可使用對本領域技術人員顯而易見的任何常規製備泡囊的方法製備。這些方法一般包括在有機溶劑中懸浮類脂化合物，蒸除溶劑，在含水介質中再懸浮，超聲波處理和濃縮。上述方法以及其它方法見下述文獻中描述例如，Canfield等人MethodsinEnzymology，Vol.189，pp.418-422(1990)；EI-Gorab等人，Biochem.Biophys.Acta，Vol.306，pp.58-66(1973)；ColloidalSurfactant，Shinoda，K.，Nakagana，Tamamushi和Isejura，AcademicPress，NY(1963)(尤其是「TheFormationofMicelles」，Shinoda，Chapterl，pp.1-88)；CatalysisinMicellarandMacromolecularSystems，Fendler和Fendler，AcademicPress，NY(1975)。上述各篇文獻的內容在此全部併入本文用作參考。如上所述，泡囊組合物可包括脂質體。對於任何特定脂質體，類脂化合物可以是單層或雙層形式。並且這種單層或雙層類脂可用於形成一個或多個單層或雙層。在多於一個單層或雙層情況下，單層或雙層一般是向心的。因此，類脂可用於形成單層脂質體(由一個單層或雙層組成)，寡層脂質體(由兩個或多個多層或雙層組成)或多層脂質體(由多於三個多層或雙層組成)。可以使用各種方法製備脂質體組合物，因此，脂質體可使用對本領域技術人員公知的任何一種常規脂質體製備技術製備。這些技術包括，如溶劑滲析、弗氏壓碎法、擠壓(含有或不含冰凍-熔化過程)、反相蒸發、簡單冰凍-熔化、超聲波處理、螯合滲析、均化、溶劑滴注、微乳化、自然形成、溶劑蒸發、溶劑滲析、弗氏細胞壓碎技術、受控洗滌劑滲析等，各種這些技術都涉及製備不同形式的泡囊。例如，參見Madden等人ChemistryandPhysicsofLipids，199053，37-46，此文獻內容在此全部併入本文用作參考。例如，合適的冷凍-熔化技術見1989年11月8日遞交的國際專利申請PCT/US89/05040中描述的方法，此文獻內容在此全部併入本文用作參考。關於脂質體的製備，優選包括冷凍-熔化技術。脂質體的製備可在溶液如鹽水溶液，磷酸緩衝液或無菌水中進行。脂質體也可以通過各種包括振蕩或渦旋的方法製備。這可通過利用機械搖動裝置完成，如Wig-L-BugTM(CrescentDental，Lyons，IL)，Mixomat，DegussaAG銷售(Fuankfurt，Germany)，Capmix，EspeFabrikPharmazeutischerPraeparateGMBHCo.銷售，Seefeld，OberayGermany，SilamatPlus，Vivadent，Lechtenstein銷售，Vibios，QuayleDental銷售(Sussex，England)。也可以使用常規微乳化裝置，如MicrofluidizerTM(Microfluidics，Woburn，MA)。也可以使用噴霧乾燥法來製備氣體填充的泡囊。利用此方法，可將類脂在含水環境中預混合，然後噴霧乾燥，得到氣體填充泡囊。這種泡囊可在所希望的氣氛下貯藏。下述文獻中已討論了眾多適合用於製備泡囊組合物的脂質體製備技術美國專利4,728,578；英國專利申請GB2193095A；美國專利4,728,575；美國專利4,737,323；國際專利申請PCT/US85/01161；Mayer等人，BiochimicaetBiophysicaActa.Vol.858，pp.161-168(1986)；Hope等人，BiochimicaetBiophysicaActa，Vol.812，pp.55-65(1985)；美國專利4,533,254；Mayhew等人，MethodsinEnzymology，Vol.149，pp.64-77(1987)；Mayhew等人，BiochimicaetBiophysicaActa，Vol.755，pp.169-74(1984)；Cheng等人，InvestigativeRadiology，Vol.22.，pp.47-55(1987)；國際專利申請PCT/US89/05040；美國專利4,162,282；美國專利4,310,505；美國專利4,921,706；以及LiposomeTechnology，Gregoriadis，G.，ed.，Vol.I，pp.29-31.51-67和79-108(CRCPressInc.，BocaRaton，FL1984)，上述各篇文獻的內容在此全部併入本文用作參考。包含氣體的類脂組合物，可以通過在氣體存在下，攪動含有(如果需要的話)穩定劑的水溶液來製備。這裡所用術語「攪動」是指搖動水溶液使氣體從局部周圍環境中導入水溶液中的任何運動。這種攪動優選在低於類脂從膠體相轉移成液晶的溫度下進行。攪拌溶液時所涉及到的搖動優選具有足以使包括泡囊組合物，特別是包括充氣泡囊的泡囊組合物的類脂組合物形成的力度。搖動可以通過旋轉，如渦旋，左右或上下運動進行。不同類型的運動可以結合所用。搖動也可以通過搖動容有類脂水溶液的容器，或通過攪動容器內的水溶液而不搖動容器本身來進行。搖動可以手工或通過機械方式發生。可用的機械搖動器包括搖動臺，如VWRScientific(Cerritos，CA)搖動臺，以及任一前面所述的搖動裝置，其中優選Capmix(EspeFabrikPharmazeutischerPraeparateGMBHCo.，Seefeld，OberayGermany)。現已發現，一些搖動或渦動種類可用於製備其尺寸落在優選尺寸範圍內的泡囊。優選搖動，並優選用EspeCapmix機械振蕩器進行的搖動。根據此優選方法，優選利用往復運動產生類脂組合物。特別是泡囊組合物。更優選弧形往復運動，預期往復運動的速度和其弧形尺寸對泡囊的形成特別重要。優選往復或完全循環擺動次數為約1000至約20,000/分。較優選往復或擺動次數為2500至約8000，更優選往復或擺動次數為約3300至約5000。當然，擺動次數取決於被攪動的內容物的量。一般說來，量越大擺動的次數就越少。產生振蕩的另一方式包括在高速或高壓下逸出氣體的作用。同樣不難理解，對於較大體積量的水溶液，優選總力度將相應增加。劇烈搖動被定義為每分鐘至少振蕩運動60轉。較優選約60至約300轉/分的渦旋。更優選約300-1800轉/分的渦旋。除上述的簡單搖動方法之外，也能使用較複雜的方法。這類複雜方法包括如液晶振蕩氣體注入法和真空乾燥氣體注入法，如1993年6月11日登記的與此有關的美國申請，申請號為08/076,250中所述的方法。此文獻的內容在此全部併入本文作為參考。儘管可使用任何不同的各種技術，但本發明中所用的泡囊組合物優選用振蕩技術製備。振蕩技術優選包括用機械振蕩裝置，如EspeCapmix(Seefeld，OberayGerman)，使用如1993年11月30日登記的與此有關的美國申請，申請號為160,232中所述的技術攪拌。此文獻的內容在此全部併入本文作為參考。如果需要，氣體填充的泡囊的尺寸可通過各種方法調節，如包括微乳化、渦旋、擠壓、過濾、聲化、均化、重複冷凍和解凍循環、加壓擠過固定尺寸的孔以及類似方法。按照這裡所述方法製得的氣體填充泡囊的尺寸可以從低於1μm至大於約100μm。此外，在下文洋細描述的擠壓和滅菌步驟之後，攪動或搖動產生泡囊組合物中，其中溶液殘餘物中基本上沒有或殘留有極少量無水類脂相(Bangham，A.D.，Standish，M.M.Watkins，J.C.，J.Mol.Biol.Vol.13，pp.238-252(1965))。如果需要的話，本發明泡囊可以以所形成的形式直接使用，而不作進一步修飾其尺寸的任何打算。對於血管內使用，泡囊優選具有小於約30μm的直徑，更優選小於約12μm。對於定向血管內使用，例如，包括結合到某些組織上，所述組織如癌組織，泡囊的直徑可以大大減小，如低於約100nm。對於小腸或胃腸使用，泡囊的直徑可以大大增大，如大至毫米級。優選地，泡囊被篩分具有約2μm至約100μm直徑尺寸。氣體填充的泡囊可以通過擠出過濾的簡單方法精壓加工，濾器的孔徑尺寸控制所產生的氣體填充泡囊的尺寸分布。通過使用兩個或更多個串聯或迭加的濾器，例如，10μm濾器後接一8μm濾器，選擇氣體填充的泡囊具有集中在7-9μm的非常窄的尺寸分布。過濾後，這些氣體填充的泡囊可以保持超過24小時的穩定性。在使用之前，當將組合物從無菌管瓶中移去時，篩分或過濾步驟可以利用過濾裝置完成，或者更優選的是，在使用期間將過濾裝置摻入到注射器中。篩分泡囊的方法包括使用包含針筒、至少一個濾器和針頭的注射器，並通過下述抽提步驟進行包括將泡囊通過固定在注射器的針筒和針頭之間的濾器，從針筒中擠出，隨後在泡囊施用給患者之前進行篩分。抽提步驟還可以包括將泡囊抽入注射器中，濾器將以相同方式將進入到注射器內的泡囊篩分。另一種方法是用早已通過一些其它方法篩分過的泡囊填充到注射器中，在這種情況下，濾器所起的作用只是確保泡囊具有所需要的尺寸範圍，或具有所希望的最大尺寸，繼之通過注射器擠出而施用。在一些優選實施方案中，泡囊組合物可以被加熱滅菌，或過濾滅菌並在搖動之前通過濾器擠出。一般說來，包含氣體的泡囊組合物可被加熱滅菌，而包括氣體前體的泡囊組合物可被過濾滅菌。一旦氣體填充泡囊形成，它們便可以如上所述過濾篩分。在氣體或氣體前體填充的泡囊形成之前進行這些步驟能提供隨時可以施用於患者的無菌氣體填充的泡囊。例如，用已過濾類脂組合物填充混合容器如管瓶或注射器，然後通過如高壓釜滅菌方式滅菌混合容器內的組合物。將氣體注入組合物中，通過搖動無菌容器形成氣體填充的泡囊。優選無菌容器裝配有定位濾器，以便氣體填充泡囊在接觸患者之前先通過濾器。擠壓類脂化合物溶液通過濾器的步驟，通過粉碎任何乾燥物質和曝露更大表面進行水合，能夠減少未水合物質的量。優選濾器具有約0.1至約5μm孔徑，較優選約0.1至約4μm孔徑，更優選約0.1至約2μm孔徑，且進一步較優選約1μm孔徑。未水合化合物一般是不需要的，且表現為非均一尺寸的無定形塊。滅菌步驟提供了易施用於患者進行診斷成像如包括超聲波或CT用的組合物。在某些優選的實施方案中，滅菌可通過加熱完成，優選通過在至少100℃下高壓滅菌溶液完成，較優選在約100℃至約130℃下高壓滅菌，更優選在約110℃至約130℃下高壓滅菌，進一步優選在約120℃至約130℃下高壓滅菌，且更優選在約130℃下滅菌。優選加熱至少1分鐘，較優選加熱約1至約30分鐘，更優選約10至約20分鐘，進一步優選約15分鐘。如果需要的話，可以顛倒使用如上所述的擠壓和加熱步驟，或僅使用這兩步中的一步。可用的其它滅菌方式包括如曝露在γ射線中。除前述實施方案外，泡囊中所包含的氣體前體可通過活化形成，例如通過置於高溫下，改變pH或光照，進行從液體，包括泡囊中包封的液體至氣體的相轉變等方式，從而膨脹產生這裡所述的氣體填充的泡囊。這種技術的詳細描述見我們1993年11月30日遞交的與此有關的專利申請，申請號分別為08/160,232和08/159,687，它們各自的公開內容在此全部併入本文用作參考。活化氣體前體的優選方法是將其曝露在高溫下。活化或轉變溫度等術語是指氣體前體的沸點，並且是氣體前體發生液-氣相轉變的溫度。有用的氣體前體為沸點落在約-100℃至約70℃範圍內的物質。活化溫度對每種氣體前體是特定的。在本發明中，優選氣體前體的活化溫度為約37℃，或約為人體體溫。因此，在優選情形下，液相氣體前體在約37℃或低於此溫度下活化成氣體。本發明方法中使用的氣體前體可用為液相或為氣相。氣體前體填充的泡囊的製備方法可以在低於氣體前體的沸點下進行，以使液體摻入到泡囊內。此外，所述方法可以在氣體前體的沸點下進行，以使氣體摻入到泡囊內。對於具有低沸點溫度的氣體前體，可以使用冷卻到低溫的微流化裝置乳化液體前體。為使用液態形式前體，也可以用溶劑/液體介質降低沸點。進一步地，所述方法也可以在方法過程中溫度逐漸增高的溫度下進行，從而此方法始於液體形式氣體前體並以氣體形式終止。在使用之前，貯藏期間或製備期間，如此選擇氣體前體，以便它們進入患者或動物體內後能在靶組織或液體中就地形成氣體。產生溫度活化的氣體前體填充的泡囊的方法可以在低於氣體前體沸點的溫度下進行。在此實施方案中，氣體前體被包封在泡囊內，以便在製造期間不發生相轉變。而氣體前體填充的泡囊在氣體前體為液相情況下製造。相轉變活化可以在溫度被容許超過前體的沸點情況下的任何時候進行。而且，在知道了液相氣體的體的液滴中液體的量，可以測定達到氣態的泡囊的尺寸。另一方面，可以使用氣體前體產生使用前預形成的穩定的氣體填充泡囊。在此方案中，在低於氣體前體各自的液-氣相轉變溫度下，將氣體前體加到容有類脂組合物的容器內。隨著溫度升高，氣體前體與液體溶液之間形成乳液，氣體前體進行液態至氣態的轉變。這種加熱和氣體形成的結果是氣體置換了上述液體混合物上方空間的空氣，從而形成包封有氣體前體氣體、環境氣體(如空氣)或共同包裹氣態氣體前體和環境氣體的的氣體填充的泡囊。這種相轉變可用於造影劑的最佳混合和形成。例如，氣體前體全氟丁烷可包封在類脂泡囊內，並隨著溫度增高超出全氟丁烷的沸點(4℃)，全氟丁烷前體就被包裹在泡囊內。因此，選擇氣體前體在體內形成氣體填充的泡囊，或者將氣體前體設計成在生產過程中，貯藏期間，或在使用前的某些時候能就地產生前體填充的泡囊。在靜脈注射之前，可以使用水浴，超聲波儀或相對於密閉管塞向後抽拉注射器的活塞的液動活化方式活化溫度敏感的氣體前體來激活定向氣體填充泡囊。作為本發明的進一步實施方案，通過預形成液態形式的氣體前體成水乳液，一旦完成向氣態的轉變，可使用理想氣體定律測定泡囊的最大尺寸。為從氣體前體製備氣體填充的泡囊，假設氣相被瞬間形成，並且由於擴散到液體(事實上一般為水性)中，新形成的泡囊內的氣體基本上不被消耗。因此，根據乳液中已知液體的體積，就能夠預測氣體填充泡囊體積尺寸的上限。在本發明的實施方案中，配製含有確定尺寸液滴的類脂化合物和氣體前體的混合物，以便當達到特定溫度如氣體前體的沸點時，液滴將膨脹成確定尺寸的氣體填充泡囊。確定尺寸代表實際尺寸的上限，因為諸如氣體擴散到溶液內，氣體逸到大氣中的損失以及增加壓力的影響等因素是理想氣體定律所不能解釋的。可用於計算從液態到氣態轉變時氣泡體積增加的理想氣體定律如下PV＝nRT其中P為以大氣壓為單位的壓力(atm)；V為以升為單位的體積(L)；n為氣體摩爾數；T為開氏溫度(K)；和R為理想氣體常數(22.4L-atm/K-mole)根據液體混合物液體的體積、密度和溫度等資料，可以計算液體氣體前體的量(摩爾)和體積；當它們轉化成氣體時，將膨脹到已知體積的泡囊內。計算體積將反映氣體填充的泡囊的尺寸的上限，假定瞬間膨脹成氣體填充的泡囊並且在膨脹時間期間忽略氣體的擴散。這樣，對於其中氣體前體微滴為球形的混合物中的液體氣體前體的穩定化，氣體前體的微滴的體積可用下述方程計算體積(球形泡囊)＝4/3πr3其中r為球體半徑。這樣，一且體積被預定，並知道液體在需要溫度下的密度，可以計算微滴中液體氣體前體的量。更詳細講，可以使用下述方程V氣體＝4/3π(r氣體)3用理想氣體定律，PV＝nRT代入得到V氣體＝nRT/P氣體或者，(A)n＝4/3[πr氣體3]P/RT量n＝4/3[πr氣體3P/RT]·MWn轉換回液體體積(B)V液＝[4/3[πr氣體3]P/RT]·MWn/D1/3其中D為前體密度。計算液滴直徑，(C)直徑/2＝[3/4π[4/3[πr氣體3]P/RT]MWn/D]1/3簡化為直徑＝2[[r氣體3]P/RT][Mwn/D]]1/3.作為製備本發明方法中使用的所需尺寸的泡囊的另外方法，利用液滴的體積，特別是半徑資料，人們可用適當尺寸的濾器篩分氣體前體微滴成適當直徑的泡囊。代表性的氣體前體可被用於形成確定尺寸如10μm直徑的泡囊。在此實例中，泡囊在人體血流中形成，因此，典型的溫度應是37℃或為310K。在1大氣壓下使用(A)中的方程計算，需要7.54×10-17摩爾量氣體前體填充10μm直徑的泡囊。使用上述計算量氣體前體和1-氟丁烷分子量為76.11，沸點32.5℃，20℃時的密度為0.7789g/mL)，對於10μm泡囊，進一步計算預計需要5.74×10-15g這種前體。進一步推斷，並利用密度資料，方程(B)進一步預計需要8.47×10-16mL液體前體來形成具有最後，利用方程(C)，形成例如含有半徑為0.0272μm或相應直徑為0.0544μm微滴的乳液的混合物，以製備具有10μm上限泡囊的氣體前體填充的泡囊。這種特定尺寸的乳液很容易通過使用適當尺寸的濾器得到。此外，正如由需要形成確定尺寸的氣體前體微滴的濾器的尺寸所看到的那樣，濾器的尺寸也應能夠除去任何可能的細菌汙染物，並因此也能被用作無菌過濾。該製備前體填充泡囊的實施方案適用於所有由溫度激活的氣體前體。事實上，降低溶劑體系的凝固點容許使用能在低於0℃下進行液-氣相變的氣體前體。選擇溶劑體系以提供懸浮氣體前體的介質。例如，混溶在緩衝鹽水中的20％丙二醇顯示出明顯低於純水凝固點的凝固點降低。通過增加丙二醇的量或加入象氯化鈉等物質，凝固點甚至能進一步降低。合適溶劑體系的選擇可通過已知的物理方法確定。當物質(固體或液體，這裡稱作溶質)溶於溶劑如水基緩衝液中時，凝固點通過依靠溶液組成的量來降低。因此，正如Wall所定義的，可以由下述方程表達溶劑的凝固點降低Inxa＝In(1-xb)≈ΔH液/R(1/To-1/T)其中xa為溶劑的摩爾分數；xb為溶質的摩爾分數；ΔH為溶劑的熔化熱；和To為溶劑的正常凝固點。溶劑的正常凝固點可通過求解方程得到。如果xb小於xa，則上述方程可變為xb＝ΔH液/R[T-To/ToT]≈ΔH熔ΔT/RTo2上述方程假定溫度變化ΔT小於T2。此方程可通過表示成溶質的重量摩爾濃度m(每千克溶劑中溶質的摩爾數)進一步簡化。這樣，方程可變為Xb＝m/[m+1000/ma]≈mMa/1000其中Ma為溶劑的分子量。從而，取代分數xbΔT＝[MaRTo2/1000ΔH熔]m或ΔT＝Kfm，具中Kf＝MaRTo2/1000ΔH液Kf為摩爾凝固點，並且對於水在1大氣壓下等於1.86度/單位摩爾濃度。上述方程可用於精確測量氣體前體填充的泡囊的溶質的摩爾凝固點。因此，上述方程適用於估算凝固點降低並測定將溶劑的凝固溫度降低到適當值所必需的液體或固體溶質的濃度。製備溫度激活的氣體前體填充的泡囊的方法包括(a)渦旋和/或振蕩氣體前體和附加物質(如果需要的話，這些物質例如包括穩定物質、增稠劑和/或分散劑)的含水混合物。此方法的任選步驟包括在渦旋或振蕩之前高壓滅菌；加熱氣體前體的含水混合物；渦旋含有混合物/懸浮液的容器；振蕩或容許氣體前體填充的泡囊自發形成並冷卻氣體前體填充的泡囊懸浮液；並擠壓氣體前體的水懸浮液通過約0.22μm的濾器。另一方面，過濾可在體內給用泡囊期間進行，這樣可使用約0.22μm濾器。(b)微乳化，其中氣體前體的含水混合物是在施用於患者之前通過攪動和加熱乳化，以形成泡囊。(c)在攪動或不攪動條件下加熱混合物中的氣體前體，其中低密度氣體前體填充的泡囊通過膨脹和置換容器中的其它泡囊而漂浮到溶液的頂部，並放空容器釋放空氣；和(d)在上述任一方法中使用密封容器盛納氣體前體的水懸浮液並保持懸浮液低於氣體前體的相變溫度，繼之高壓蒸煮至高於相變溫度，任選地振蕩，或容許氣體前體泡囊自發形成，其中密封容器中的膨脹氣體前體增加容器的壓力，並冷卻氣體填充的泡囊懸浮液，隨後還可以進行振蕩。在振蕩氣體注入法進行之前，可使用冷凍乾燥除水和除有機物質。乾燥注入法可以用於除去泡囊中的水。通過在溫熱後預包封乾燥泡囊(即在於燥前)中的氣體前體，氣體前體可膨脹填充泡囊。氣體前體也可在進行抽真空後用於填充乾燥泡囊。由於乾燥泡囊被保持在低於其凝膠態至液晶抽真空後用於填充乾燥泡囊。由於乾燥泡囊被保持在低於其凝膠態至液晶溫度的溫度下，乾燥空腔可用氣態氣體前體緩慢填充。例如，在高於4℃(全氟丁烷的沸點)的溫度下可使用全氟丁烷填充乾燥泡囊。製備溫度激活的氣體前體填充的泡囊的優選方法包括在低於氣體前體的液-氣相變溫度下，在氣體前體存在下，振蕩含有類脂化合物的水溶液。此方法優選在低於類脂的凝膠態-液晶態相變溫度下進行。然後加熱混合物至高於氣體前體的液態-氣態相變的溫度，使前體揮發和膨脹。然後終止加熱，隨後使混合物的溫度降低至低於氣體前體的液態-氣態相變溫度。混合物的振蕩可以在加熱步驟期間，或在使混合物冷卻之後來進行。製備氣體前體填充的泡囊的其它方法包括振蕩類脂和氣體前體的水溶液，並分離所得的氣體前體填充的泡囊。通常，現有技術中的充水脂質體常常是在高於用於製備它們的類脂的相變溫度下形成，由於它們的的柔韌性較高，因而可以液晶態用於生物體系。例如，參見Szoka和Papahadjopoulos，Proc.Natl.Acad.Sci.1978，75，4194-4198。相反，根據本文描述的一些優選實施方案所製備的泡囊為氣體前體填充的，具有較大韌性，由於氣體形成後氣體前體比水溶液更具有壓縮性和順從性。本發明所研究的方法提供了在溫度活化的氣體前體存在下振蕩包括類脂的水溶液的方法。優選的是振蕩具有能在短時間內，如約30分鐘，優選在約20分鐘內，更優選在約10分鐘短時間內形成泡沫的充足力量。振蕩可包括微乳化、微流化、旋轉(如渦旋)、左右或上下運動。在加有液態氣體前體的情況下，除上述振蕩法外，還可以使用聲化方法。此外，可以組合不同類型的運動。同樣，振蕩也可以通過搖動盛納有類脂水溶液的容器，或搖動容器內的水溶液而不振蕩容器本身的方式進行。進一步地，振蕩可以為手動或機械振蕩兩種方式。可使用的機械搖動器包括例如前面所述的機械搖動器，其中優選EspeCapmix(Seefeld，OberayGermany)。產生振蕩的另一種方式包括在高速或高壓下釋放氣體前體。按照本文所述方法，氣體如空氣也可以由局部環境氣氛提供。局部環境氣氛可包括密封容器內的大氣，以及外部環境大氣壓。另一方面，例如，氣體可注射到或用其它方法加到含有類脂水溶液的容器內或加到類脂水溶液內以提供非空氣的氣體。比空氣輕的氣體通常加到密封容器內，而比空氣重的氣體可以加到密封或未密封的容器內。因此，本發明包括氣體前體與空氣和/或其它氣體的共包封物。因此，氣體前體填充的泡囊可以以與本發明所述的氣體填充的泡囊基本相同的方式使用，一旦通過應用到宿主組織上進行活化，可以利用諸如溫度或pH等因素使氣體發生。優選氣體前體在接近宿主的正常體溫的溫度下發生從液相到氣相的相轉變，由此可通過宿主的體內溫度活化以發生向氣相的轉變。另一方面，靜脈注射前的活化可通過例如熱、機械或光學方式發生。當例如宿主組織是具有約37℃正常體溫人體組織且氣體前體從液相到氣相發生相變的溫度接近37℃情況下，這種活化即能發生。如上所述，如果這些方法在注入步驟之前或先於溫度介導的組合物內的溫度敏感氣體前體的轉化，本發明的類脂和/或泡囊組合物可通過高壓滅菌或無菌過濾滅菌。另一方面，組合物組成中可包括一種或多種抗菌劑和/或防腐劑如苯甲酸鈉、季銨鹽、疊氮化鈉、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、山梨酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基茴香醛、丁基化羥基甲苯、氯丁醇、脫氫乙酸、乙二胺、單硫代甘油、苯甲酸鉀、焦亞硫酸鉀、山梨酸鉀、亞硫酸氫鈉、二氧化硫和有機汞鹽。當穩定泡囊用於進入環境中如血管內或腹膜內成像時，這類滅菌是必需的，當然，這類滅菌也可由其它常規方式如輻射實現。根據本發明的公開內容，合適的滅菌方法對本領域技術人員而言是顯而易見的。包括由蛋白質配製而成的泡囊(也稱作蛋白質包裹泡囊)如白蛋白泡囊的泡囊組合物可由各種方法製備，對於本領域技術人員而言，一旦掌握了本發明的公開內容，這些方法將是顯而易見的。適宜的方法包括例如Feinstein在美國專利4,572,203、4,718,433和4,774,958以及Cerny等人在美國專利4,957,656中所述的方法，其中這些專利的內容在此全部併入本文用作參考。上述專利中所述的蛋白質基泡囊的製備方法是用聲化處理蛋白質溶液的方法。在優選的方法中，起始原料可以是熱變性、水溶性的生物相容蛋白質的水溶液。包裹蛋白質優選為熱敏性，以便在聲化處理期間通過加熱能夠部分不溶解。合適的熱敏蛋白質包括例如白蛋白、血紅蛋白、膠原等。優選蛋白質為人蛋白，更優選人血清白蛋白(HSA)。HSA可以以5％的滅菌水溶液從市場上購得，它們適於製備蛋白質基泡囊。當然，本領域普通技術人員明白，其它濃度白蛋白以及其它熱變性蛋白質也可用於製備泡囊。一般說來，HSA的濃度是可以變化的，並可以在約0.1至約25wt％範圍以及其中的所有組合和小組合範圍內變化。對於蛋白質基泡囊的某些製備方法，優選使用稀水溶液形式蛋白質。對於白蛋白而言，優選使用含有約0.5至約7.5wt％白蛋白的水溶液，其中優選濃度小於約5wt％的水溶液，例如約0.5至約3wt％濃度。蛋白質基泡囊可以用市場上可購得的儀器製備。例如，對於如Cerny等人在美國專利4,957,656中所公開的進料製備操作，可以使用購自WalkerStainlessEquipmenCo，(NewLisbon，WI)的不鏽鋼罐和購自Millipore(Bedford，MA)的工業濾器。聲化處理操作可以連續使用熱交換器和通過聲化處理容器的流量器。此類型的熱交換器可從ITTStandard(Buffalo.NY)購得。熱交換器保持聲化處理過程中的操作溫度，溫度控制在約65℃至約80℃範圍內，這取決於介質的組成。聲化裝置的振蕩頻率可以在較寬範圍內變化，例如，從約5至約40千赫(kHz)，大部分市購超聲波破碎器在約10或20kHz下操作。適宜的聲化裝置包括例如配備有平端超聲波破碎器發聲器的SonicsMaterialsVibra-Cell，購自SonicsMaterials，Inc.(Danbury，CT)。適用於超聲波破碎器發聲期望的功率可以在由製造商定標的1至10規格的動力設置間變化，如使用SonicsMaterialsVibra-CellVL1500型。可以使用中間功率設置，例如5至9。優選振動頻率和施加的功率應足以在欲被活化的液體只能夠產生氣蝕。進料流速可以在約50mL/分鐘至約1000mL/分鐘範圍以及其中的所有組合和小組合範圍內變化。在聲化處理容器中的殘留時間可以從約1秒至約4分鐘，並且氣態流體的加入速率可以從約10立方釐米(cc)/分鐘至約100cc/分鐘，或進料流速的5％至25％以及其中的所有組合和小組合範圍內變化。優選聲化處理以能使溶液起泡，尤其是廣泛起泡的方式進行。一般說來，廣泛起泡和霧化對得到具有高濃度和穩定性的造影劑是比較重要的。為加速起泡，可以提高輸入到超聲波破碎器發聲器的功率，且方法可在中等壓力如約1至約5psi壓力下操作。起泡很容易由溶液的混濁外觀和所產生的泡沫來檢測。製備蛋白質基泡囊的合適方法還可以包括以物理或化學方式改變水溶液中的蛋白質或蛋白質衍生物以變性或固定所述物質。例如，蛋白質基泡囊可以由5％HSA水溶液通過在聲化處理形成造影劑之後或形成造影劑期間加熱而製備。化學蝕變作用可包括化學變性或通過將蛋白質與雙官能醛如戊二醛結合而發生的固定。例如，可以將泡囊在pH4.5下與0.25克50％戊二醛水溶液/蛋白質(克)反應6小時。然後從蛋白質中洗去未反應的戊二醛。在任一上面所述的蛋白質基泡囊的製備方法中，靶向配位體可以在泡囊形成之前、之間或之後與蛋白質結合，對於本領域技術人員而言，一旦掌握了本發明的公開內容，這些將是顯而易見的。包括由聚合物配製的泡囊的泡囊組合物可以用各種不同的方法製備，對於本領域技術人員而言，一旦掌握了本發明的公開內容，這些方法將是顯而易見的。典型的方法包括例如界面聚合、相分離和凝聚、多孔板離心製備和溶劑蒸發。可使用的或改型的由聚合物製備泡囊的本發明方法的合適方法包括下述文獻中所述的方法Garner等人，美國專利4,179,546、Garner，美國專利3,945,956、Cohrs等人，美國專利4,108,806、日本專利公開62286534、GB1,044,680、Kenaga等人，美國專利3,293,114、Morehouse等人，美國專利3,401,475、Walters，美國專利3,479,811、Walters等人，美國專利3,488,714、Morehouse等人，美國專利3,615,972、Baker等人，美國專利4,549,892、Sands等人，美國專利4,540,629、Sands等人，美國專利4,421,562、Sands，美國專利4,420,442、Mathiowitz等人，美國專利4,898,734、Lencki等人，美國專利4,822,534、Herbig等人，美國專利3,732,172、Himmel等人，3,594,326、Sommerbille等人，美國專利3,015,128、Deasy，MicroencapsulationandRelatedDrugProcesses，Vol.20，Chs.9和10，pp.195-240(MarcelDekker，Inc.，N.Y.，1984)，Chang等人，CanadianJ.ofPhysiologyandPharmacology，Vol.44，pp.115-129(1966)，以及Chang，Science，Vol.146，pp.524-525(1964)，上述各篇文獻的公開內容在此全部併入本文用作參考。根據優選的合成方案，泡囊可用熱膨脹法製備，如Garner等人，美國專利4,179,546、Garner，美國專利3,945,956、Cohrs等人，美國專利4,108,806、GB1,044,680和日本專利公開62286534中所描述的方法。一般地說，熱膨脹法可通過製備可膨脹聚合物或共聚物泡囊進行，這種泡囊在其空隙(空腔)中包含揮發性液體(氣體前體)。然後加熱泡囊、增塑泡囊並轉化揮發性液體成氣體，使泡囊膨脹至其原始體積的數倍。當移去熱源，熱塑性聚合物仍保持至少一定程度的其膨脹形狀。由此方法產生的泡囊往往具有特別低的密度，因此是優選的。前述方法是本領域中熟知的方法，並可稱作製備低密度泡囊的熱膨脹法。熱膨脹法中有用的聚合物對本領域技術人員而言是顯而易見的，包括熱塑性聚合物或共聚物，這包括許多上述單體的聚合物或共聚物。所述聚合物和共聚物優選包括下述共聚物聚亞乙烯-聚丙烯腈、聚亞乙烯-聚丙烯腈-聚甲基丙烯酸甲酯和聚苯乙烯-聚丙烯腈。最優選的共聚物為聚亞乙烯基-聚丙烯腈。熱膨脹法中有用的揮發性液體對本領域技術人員而言是顯而易見的，包括脂族烴，如乙烷、乙烯、丙烷、丙烯、丁烷、異丁烷、新戊烷、乙炔、己烷、庚烷；氯氟烴，如CCl3F、CCl2F2、ClF3、CClF2-CCl2F2、一氯七氟環丁烷和1，2-二氯六氟環丁烷；四烷基矽烷，如四甲基矽矽烷、三甲基乙基矽烷、三甲基異丙基矽烷和三甲基正丙基矽烷；以及全氟烴，包括前面所述的全氟烴。一般來說，重要的是揮發性液體不能溶解所用的聚合物或共聚物。同樣還優選揮發性液體的沸點低於所涉及到的聚合物或共聚物的軟化點。對本領域技術人員而言，各種揮發性液體的沸點和各種聚合物的軟化點是很容易確定的，聚合物或共聚物與揮發性液體的合適組合對專業技術人員而言是十分顯然的。作為引導，並且正如本領域技術人員所認識到那樣，通常隨著揮發性液體的碳鏈長度的增加，液體的沸點也隨之增加。同樣，在最後正式加熱和膨脹之前，在過氧化氫存在下，緩緩預加熱處於水中的泡囊可以預軟化泡囊，從而使得膨脹更易發生。例如，為了用合成聚合物製備泡囊，利用一種或多種前面所述的改進或未改進的文獻方法，將亞乙烯和丙烯腈可以在異丁烷液體介質中共聚合，從而使異丁烷包封在泡囊內部。當這種泡囊隨後從約80℃加熱至約120℃時，異丁烷氣體膨脹，隨後再膨脹泡囊。移去熱源後，膨脹的聚亞乙烯和丙烯腈共聚物泡囊仍基本上保持固定在它們膨脹的位置。所形成的低密度泡囊無論是幹態還是懸浮在水介質中都非常穩定。這裡所用的異丁烷僅僅是作為說明性的液體，應當理解，異丁烷可以被能夠在用於合成這些泡囊和當加熱時能形成極低密度泡囊的溫度下進行液/氣轉變的其它液體替代。類似地，可使用除亞乙烯和丙烯腈之外的單體製備泡囊。在一些優選實施方案中，可用於本發明方法中的由合成聚合物配製成的泡囊可從Expancel，NobelIndustries(Sundsvall，Sweden)購得，包括EXPANCEL551DETM泡囊。EXPANCEL551DETM泡囊由亞乙烯和丙烯腈的共聚物組成，其中包裹有異丁烷液體。這種泡囊以於態組合物形式出售，其尺寸為大約50微米。EXPANCEL551DETM泡囊的比重僅為0.02-0.05，這介於水密度的1/50和1/20之間。在任一上面所述的聚合物基泡囊的製備方法中，靶向配位體可以在泡囊形成之前，期間或之後與聚合物結合，對於本領域技術人員而言，一旦掌握了本發明的公開內容，這些將是顯而易見的。如同製備類脂和/或泡囊組合物的情況一樣，可以使用多種方法製備類脂製劑。例如，類脂和/或泡囊製劑可以由類脂化合物、生物活性劑和氣體或氣體前體混合物製備。在這種情況下，類脂組合物如上所述製備，其中組合物還包括生物活性劑。這樣，例如，泡囊能夠在生物活性劑存在下製備。對於其中包括氣體的類脂組合物，其製備可包括，例如，直接將氣體鼓入類脂化合物和一種或多種附加物質的混合物中。另一方面，類脂組合物可以用類脂化合物和氣體或氣體前體預形成。在後一種情況下，隨後在使用之前將生物活性劑加到類脂組合物內。例如，製備脂質體和氣體的含水混合物，向其中加入生物活性劑並攪動，形成脂質體製劑。脂質體製劑容易分離，這是因為氣體和/或生物活性劑填充的脂質體泡囊一般漂浮在水溶液的上部。可以從剩餘的水溶液中回收過量的生物活性劑。正如本領域技術人員將認識到的那樣，任何類脂和/或泡囊組合物和/或類脂和/或泡囊製劑可以凍幹貯藏，並可以通過劇烈攪拌用含水介質(如無菌水、磷酸緩衝液或鹽水溶液)重構。為了預防類脂和/或泡囊因凍幹引起的凝集或融合，其中包含能防止這類融合或凝集的添加劑是有用的。可用的添加劑包括山梨糖醇、甘露糖醇、氯化鈉、海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇(PEG)如PEG400。這些及其它添加劑在文獻中已有描述，如美國藥典，美國專利XXII，NFXVII，TheUnitedStatesPharmacopeialConbertionInc.，12601TwinbrookParkway，Rockbille，MD20852，由此這些公開內容在此全部併入本文用作參考。凍幹製品常常具有更長貯臧期限的優點。如上所述，本發明組合物，包括氣體和/或氣體前體填充的泡囊，可用作診斷成像包括例如超聲波成像(US)的造影劑、計算機化X射線斷層攝影術(CT)成像(包括CT血管造影術(CTA))成像的造影劑、磁共振(MR)成像造影劑、磁共振血管造影術(MRA)、核醫學及光學成像和彈性記錄法用的造影劑。本發明提供了對一個或多個病灶成像的方法。本發明還提供了診斷患者體內存在或不存在的疾病組織的方法。本發明方法包括對患者施用類脂和/或泡囊組合物形式的造影劑。利用診斷成像包括超聲波成像掃描患者，以得到患者內部區域的可視成像。所述方法特別適用於提供心臟區，胃腸道區或淋巴系統的成像，但還可以更廣泛地用於患者其它內部區域包括如脈管系統的成像。這裡所用的術語「胃腸道區域」或「胃腸道」包括由食管，胃，小及大腸和直腸限定的患者區域。本發明方法還能用於傳送生物活性劑到患者的內部區域。正如本領域技術人員所認識到的那樣，本發明的類脂和/或泡囊組合物的施用可以以各種方式完成，即腸胃外給用、口服施用或腹膜內施用。腸胃外施用是優選的並包括經下述途徑的施用靜脈內；肌內；間隙間；動脈內；皮下；眼內；滑膜內；經上皮的，包括經皮給用；經肺吸入；經眼；舌下和經頰；局部給用，包括眼；皮膚；眼內；直腸；和經吹入鼻內吸入給藥。胃腸外給藥途徑中優選靜脈內給藥。給用的有用劑量和給藥的特定方式將依據年齡、體重和特定的哺乳動物以及掃描的區域和所用的特殊造影劑等因素而變化。典型地，最初劑量較低並隨所要達到的需要對比的增加而加大。可使用類脂組合物的各種混合物來改變所需的性能，包括粘度、滲透性和可口性。在實施本發明的成像方法時，造影劑可以單獨使用，或與診斷劑、治療劑或其它物質結合使用。這類其它物質包括賦形劑如香味劑或著色劑。使用的CT成像技術是常規的，並描述在如下所述的文獻中ComputedBodyTomography，Lee，J.K.T.，Sagel，S.S.，和Stanley，R.J.編輯，RavensPress，NewYork，N.Y.，尤其是Aronberg，D.J.撰寫的標題為「PhysicalPrinciplesandInstrumentation」，Ter-Pogossian.M.M.，和「Techniques」的前兩章，此文獻的公開內容在此全部併入本文用作參考。在診斷應用如超聲波和CT情況下，為成像靶組織，需向患者的最低限度區域施加能量，如超聲波能。爾後得到患者內部區域的可視影像，從而可以確定疾病組織的存在或不存在。關於超聲波、超聲波成像技術，包括二次諧波成像和柵控成像是本領域中公知的，並可見下述文獻中所述Uhlendorf，「PhysicsofUltrasoundContrastImagingScatteringintheLinearRange」，IEEETransactionsonUltrasonics，Ferroelectrics，andFrequencyControl，Vol.14(1)，pp.70-79(1994)和Sutherland等人「ColorDopplerMyocardialImagingANewTechniquefortheAssessmentofMyocardialFunction」，JournaloftheAmericanSocietyofEchocardiography，Vol.7(5)，pp.441-458(1994)，上述文獻的公開內容在此全部併入本文用作參考。超聲波可用於診斷和治療目的。在診斷超聲波儀情況下，超聲波波長或一組超聲波脈衝由傳感器施加。超聲波一般為非連續性脈衝，不過如果需要也可以連續脈衝。因此，診斷超聲波一般涉及施加回波脈衝，隨後，在收聽周期期間，超聲波傳感器接受反射信號。可以使用諧波、超諧波或次諧波。優選使用二次諧波波型，其中接受到2x頻率，這裡x為人射頻率。利用本發明的定向造影劑(它們可定向到需要部位，如血塊)，二次諧波的作用是降低背景物質的信號和增強來自傳感器的信號。其它諧波信號，如奇諧波信號，例如3x或5x，可利用此方法同樣接受。次諧波信號例如x/2和x/3也可被接受和加工以形成影像。除脈衝方法外，可使用連續波超聲波儀，例如，PowerDoppler。當使用剛性泡囊，如由聚甲基丙烯酸甲酯製成的泡囊時，這種方法特別有用。在這種情況下，可以使用相對高能量的PowerDoppler共振泡囊，從而促進它們的破裂。這樣可以產生聲發射，其發射頻率可以在次諧波或超諧波範圍內，或者，在某些情況下，與使用的超聲波的頻率相同。可以認識到，在此方法中將釋放出聲圖象光譜並且如此使用的傳感器可接受聲發射，以檢測例如血塊的存在。此外，可以使用泡囊破裂的方法將動能轉移到如血塊的表面，以促進血塊溶解。因此，血栓的治療可以在結合診斷和治療超聲波期間完成。也可以使用都卜勒型光譜儀。總的說來，診斷超聲波儀的能量水平不足以促進泡囊的破裂和加速生物活性劑的釋放和細胞吸收。如上所述，診斷超聲波儀可包括施用一種或多種波脈衝。脈衝間的間歇允許接受並分析反射聲信號。診斷超聲波儀中所用脈衝的有限數量限制了傳遞到所研究組織上的有效能量。高能超聲波，例如由治療超聲波儀產生超聲波，常常能造成泡囊物質破裂。一般來說，治療超聲波裝置使用約10至約100％脈衝保持時間與間歇時間之比，這取決於用超聲波所處理的組織的面積。對於其特徵為大量肌塊，例如背部和股部以及高血管化組織如心臟組織的體面積，可能需要較大的脈衝保持時間與間歇時間之比，例如，高至約100％。在治療性超聲波儀中，使用連續波長超聲波來傳遞較高能級。對於泡囊的破裂，儘管聲能也可被脈衝，但優選連續波長的超聲波。如果使用了脈衝聲能，聲波通常以每次約8至約20或更高脈衝的回波列長度脈衝。優選回波列長度每次為約20脈衝。此外，所用聲波的頻率可以從約0.025變化至約100兆赫茲(MHz)。一般來說，治療超聲波儀用的頻率優選在約0.75和約3MHz之間，其中較優選約1至約2MHz。而且，能級可以在約0.5瓦(W)/平方釐米(cm2)至約5.0W/cm2之間變化，其中優選能級為約0.5至約2.5W/cm2。高溫治療用的治療超聲波儀的能級一般從約5W/cm2至約50W/cm2。對於極小泡囊，例如，直徑小於約0.5μm的泡囊，優選使用較高頻率的聲波。這是因為較小泡囊能夠更有效地吸收較高頻率聲波的聲波能級。當使用極高頻率例如大於約10Mhz時，聲能一般僅能穿透到液體和組織的有限深度。但是，較深組織一般需要聚焦超聲波能，以便能較優選地定向到焦點區內。另一方面，超聲波能可通過探針，肌內超聲波導管或內腔導管施加。這種探針或導管可在食管中使用以診斷和/或治療食管癌。除上述治療使用外，本發明組合物可在食管癌方面使用，或用於冠動脈中以治療動脈粥樣硬化，以及用於如美國專利5,149,319所述的治療用途，此文獻的內容在此全部並人本文用作參考。可以使用應用雙頻率超聲波的治療性超聲波儀。第一頻率可以為x，而第二頻率可以為2x。在優選的情形中，如此設計超聲波儀，以使第一和第二頻率的焦點區會聚成單一聚焦區。然後將儀器的焦點區指向靶組織內的靶向組合物，例如靶向泡囊組合物。這種超聲波儀可同時施加x和2x頻率超聲波能來提供二次諧波治療。在超聲波涉及泡囊情況下，可以預料，與涉及單一頻率的超聲波治療相比，這種二次諧波治療可提供改進的泡囊破裂能力。同樣，可以預料，優選的頻率範圍落在泡囊的基諧波頻率範圍之內。這種儀器也可使用較低能量。在上述二次皆波治療方面使用的超聲波儀在下述文獻中有描述Kawabata.K.等人，UltrasonicsSonochemistry，Vol.3，pp.1-5(1996)，該文獻內容在此全部併入本文用作參考。形成希望的穩定泡囊水平所需的類脂的濃度將隨所用類脂的種類而變化，並容易通過常規實驗方法測定。例如，在優選的實施方案中，用於形成本發明方法中的穩定泡囊的1，2-二棕櫚醯磷脂醯膽鹼(DPPC)的濃度為約0.1mg/ml至約30mg/ml鹽水溶液，更優選約0.5mg/ml至約20mg/ml鹽水溶液，且最優選約1mg/ml至約10mg/ml鹽水溶液。優選實施方案中所用的二硬脂醯磷脂醯膽鹼(DSPC)的濃度為約0.1mg/ml至約30mg/ml鹽水溶液，更優選約0.5mg/ml至約20mg/ml鹽水溶液，且最優選約1mg/ml至約10mg/ml鹽水溶液。給患者施用的組合物的量可以變化。典型地，對於70Kg重患者，IV劑量可以小於約10mL，其中優選較低劑量。除上述方法外，製備靶向造影劑的另一方案包括混合一種生物相容的類脂和氣體前體；攪拌至前體填充的泡囊形成為止；向所述前體填充泡囊中加入靶向配位體，使靶向配位體與所述前體填充泡囊之間通過共價鍵或非共價鍵方式鍵合；並攪拌至包括有前體填充泡囊和靶向配位體的造影劑形成為止。在加入靶向配位體之前，直至形成氣體填充的泡囊，不進行攪拌，氣體前體在使用之前仍可保持為氣體前體。也就是說，可使用氣體前體來製備造影劑，其中氣體前體可以在體內通過如溫度活化。另一方面，製備定向內皮細胞的造影劑的方法可包括混合至少一種生物相容類脂和靶向配位體，使靶向配位體通過共價鍵或非共價鍵方式與所述類脂鍵合，加入氣體前體並攪拌至包括有氣體填充的泡囊和靶向配位體的造影劑形成為止。此外，也可加入氣體前體，並在使用之前仍保持氣體前體狀態。也就是說，可使用氣體前體來製備含有氣體前體填充的泡囊和靶向配位體的造影劑，它們可供體內使用。另一方面，可使用氣體前體來產生穩定的含有靶向配位體的前體填充泡囊，它們在使用前預形成。在此實施方案中，在低於相應氣體前體的液-氣相變溫度的溫度下，將氣體前體和靶向配位體加到容納有懸浮和/或穩定介質的容器內。然後將溫度升高至超出相變溫度，在氣體前體和液體溶液之間形成乳液，氣體前體進行從液態至氣態的轉變。通過加熱和形成氣體，氣體置換液態懸浮液上部的空氣，結果形成氣體填充的泡囊，它們包封有氣體前體的氣體、環境氣體如空氣，或共同包封氣態氣體前體和環境氣體。這種相轉變可用於最佳混合和穩定造影劑。例如，氣體前體全氟丁烷可包封在生物相容類脂或其它穩定化合物中，當溫度升高大於4℃(全氟丁烷的沸點)時，可產生包封全氟丁烷氣體的穩定化合物。作為附加實例，氣體前體全氟丁烷可以懸浮在含有乳化劑和穩定劑如甘油或丙二醇的含水懸浮液中，並用商用渦旋機渦旋。在足以低至氣體前體為液體的溫度下開始渦旋並當樣品溫度升高至大於液-氣態相變溫度時繼續渦旋。經過這樣處理，前體在微乳化過程中轉化成氣態。在有合適穩定劑存在下，能產生具有驚人穩定性的前體填充泡囊和靶向配位體。因此，選擇氣體前體在體內形成氣體填充的泡囊，或者將氣體前體設計成在生產過程中、貯藏期間或在使用前的某些時候能就地產生前體填充的泡囊。對於本領域技術人員而言，一旦掌握了本發明的公開內容，它們將能理解，用作起始物質的類脂、蛋白質、聚合物和其它穩定化合物或泡囊最終產物，可以在進行本發明所期望的方法之前和其後處理。例如，穩定化合物如生物相容類脂可被水合，然後凍幹，進行冷凍和融化循環，或簡單水合。在優選的方案中，在形成氣體前體填充的泡囊之前，類脂被水合，然後凍幹，或先水合，然後進行冷凍和融化循環，隨後再凍幹。根據本發明所期望的方法，諸如但不限於空氣的氣體的存在，也可由局部環境氣氛提供。局部環境氣氛可以是密封容器內的氣氛，或在非密封容器內，可以是外部環境氣氛。另一方面，例如，氣體可被注射到或以其它方式加到含有類脂水溶液的容器內或類脂水溶液本身中以提供非空氣的氣體。不比空氣重的氣體可被加到密封容器內，而重於空氣的氣體可加到密封或非密封容器內。因此，本發明包括空氣和/或其它氣體與氣體前體一道的共包封物。正如上面涉及穩定化合物的章節中早已描述的那樣，本發明所期望的優選方法在低於所用類脂的凝膠態-液晶態相轉變溫度的溫度下進行。術語「凝膠態-液晶態的相變溫度」意指類脂雙層從凝膠態轉化到液晶態的溫度。例如，參見Chapman等人，J.Biol.Chem.1974，249，2512-2521。因此，上述穩定泡囊可以與本發明中所用的其它穩定泡囊相同的方式使用，一旦通過施用到患者組織上被活化，其中的諸如溫度或pH等因素可被用於產生前體。優選的是此方案中氣體前體在接近所述宿主的正常體溫下進行從液態至氣態的相轉變，並由此由所述宿主組織的溫度活化，以進行向氣相的轉變。更優選地，此方法中宿主組織為具有約37℃正常溫度的人組織，並且其中的氣體前體在接近37℃下進行液-氣態相變。所有上述涉及轉變本發明中所用的穩定的氣體填充的泡囊的實施方案，如果這些步驟是在氣體注入步驟之前或先於溫度介導的懸浮液中溫度敏感的氣體前體的轉化進行，則它們可被高壓滅菌或滅菌過濾。另一方面，造影劑形成過程中可包括一種或多種抗菌劑和/或防腐劑，如苯甲酸鈉、所有的季銨鹽、疊氮化鈉、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、山梨酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基茴香醛、丁基化羥基甲苯、氯丁醇、脫氫乙酸、乙二胺、單硫代甘油、苯甲酸鉀、焦亞硫酸鉀、山梨酸鉀、亞硫酸氫鈉、二氧化硫和有機汞鹽。這類滅菌也可用其它常規手段實現，如輻射方式，當穩定泡囊用於進入環境中如血管內或腹膜內成像時，滅菌是必需的。合適的滅菌方法對於受本發明關於穩定的氣體填充的泡囊及其用途的描述指導的本領域技術人員而言是顯而易見的。造影劑一般以水懸浮液形式貯藏，但在乾燥泡囊或乾燥類脂情況下，造影劑可以以用前再構的乾燥粉末形式使用。本發明的新型組合物，尤其是泡囊組合物，可在診斷成像方面用作造影劑，而且適用於使用診斷成像的所有區域。不過，穩定泡囊特別適用於灌注成像。診斷成像是指用肉眼觀測患者體內區域。診斷成像包括，例如，超聲波(US)、磁共振成像(MRI)、核磁共振(NMR)、計算機化X射線斷層攝影術(CT)、電子自旋共振(ESR)，當造影劑包括放射性物質時的核醫學，以及光學成像，特別是利用螢光造影劑的光學成像。診斷成像還包括藉助本發明方法促進泡囊破裂。例如，超聲波可用於肉眼檢測泡囊並確定泡囊在確定組織中的位置。此外，一旦泡囊到達預定靶包括組織和/或受體目標上，可使用超聲波來促進泡囊的破裂，從而釋放出生物活性劑和/或診斷劑。本發明提供了普通患者成像的方法，和/或特別是診斷患者病組織存在的方法。本發明的成像方法可通過對患者施用本發明造影劑而進行，然後使用如超聲波儀、計算機化X射線斷層攝影術和/或磁共振成像技術掃描患者，得到肉眼可視的患者內部區域和/或內部區域內的任何組織的影像。術語「患者區域」是指患者整體或患者的特別部位或部分。造影劑特別用於提供組織如心肌、內皮和/或上皮組織，以及胃腸和心血管區的影像，也可以用於更廣泛的方面，如用於成像脈管系統，或以對對本領域技術人員十分顯然的其它方法使用。這裡所用的術語「心血管區」是指由心臟和直接連接和離開心臟的脈管系統所限定的患者區域。這裡所用的術語「脈管系統」是指體內或體內器官或部分中的血管(動脈、靜脈等)。患者可以是任何種類哺乳動物，但最優選人。本發明還提供了診斷疾病組織存在的方法。疾病組織包括，例如，由支持疾病組織的脈管系統產生的內皮組織。結果，定位和成像患者區域內皮組織(在正常情況下與內皮組織不相干)提供了疾病組織在區域內的指症。在進行本發明的磁共振成像方法時，造影劑可以單獨使用，或與其它診斷，治療或其它藥劑結合使用。這些其它藥劑包括賦形劑如調味劑或著色劑。可使用的磁共振成像技術是常規技術並參見如D.M.Kean和M.A.Smith，MagneticResonanceImagingPrinciplesandAppications，(William和Wilkins，Baltimore1986)中的描述。期待的MRI技術包括但不限於核磁共振(NMR)和電子自旋共振(ESR)。優選的成像方式為NMR成像。本發明進一步用下述實施例加以說明。實施例1至8、13至15、20至22、27、28、42、43至45和47及48為實際實施例，而實施例9至12、16至19、23至26、29至41和49至59為預示實施例。實施例46不僅為實際實施例(部分)而且還是預示實施例(部分)。這些實施例僅為說明性的，而不限制本發明的範圍。實施例實施例1本實施例涉及具有下式結構的N，N′-雙(十六烷基氨基羰基亞甲基)-(β-N，N，N-三甲基銨基乙基氨基羰基亞甲基)-N，N′-二甲基-N，N′-乙二胺四碘化物(EDTA-HA-TMA四碘化物)的製備。A.製備N，N′-雙-(十六烷基氨基羰基亞甲基)-乙二胺-N，N′-二乙酸(EDTA-HA)將乙二胺四乙酸二酐(2.56g，0.01mol)的無水甲醇(30ml)溶液和十六烷基胺(4.82g，0.02mol)的無水甲醇(60mL)溶液混合併於50℃攪拌6小時。過濾分離所產生的白色固體並於室溫下真空乾燥，得到3.43g(64％)EDTA-HA。IR3320cm-1(OH)，1670cm-1(C＝O)(羰基)。B.製備N，N′-雙-(十六烷基氨基羰基亞甲基)-N，N′，β-N，N-二甲基氨基-乙基氨基羰基亞甲基)乙二胺(EDTA-HA-DMA)向含有步驟A的EDTA-HA(3.69g，0.005mol)，N，N-二甲基乙二胺(0.88g，0.01mol)和CHCl3(100mL)的冷(5℃)溶液內滴加入DCC(2.227g，0.01mol)的氯仿(20ml)溶液。所得乳狀液於室溫下攪拌約24小時，隨後過濾。用0.5％乙酸(100mL)洗滌濾液以分解過量的DCC。觀察到白色乳狀乳液分離成兩層。乾燥(Na2SO4)下層有機層並真空濃縮，得到3.81gEDTA-HA-DMA，為半固體。IR3280cm-1，2900cm-1，1640cm-1，1530cm-1。C.製備EDTA-HA-TMA四碘化物混合步驟B所得的EDTA-HA-DMA(4.22g，4.77mmol)、碘甲烷(3.41g，24mmol)和乙醇(30mL)並回流2小時。濃縮反應混合物並凍幹殘留物過夜，得到4.98g標題產物(EDTA-HA-TMA四碘化物)，為黃色固體。IR3260cm-1，1650cm-1。實施例2本實施例涉及具有下式結構的N，N′-雙(十六烷氧基羰基亞甲基)-N-(β-N，N，N-三甲基銨基乙基氨基羰基亞甲基)-N-甲基-N′-(羧基亞甲基)乙二胺二碘化物(EDTA-HAL-DMA二碘化物)的製備。A.製備N，N′-雙-(十六烷氧基羰基亞甲基)-乙二胺-N，N′-二乙酸(EDTA-HAL)混合十六烷醇(4.84g，0.02mol)、無水二甲基甲醯胺(20mL)、無水三乙胺(3.3g)和乙二胺四乙酸二酐(2.56g，0.01mol)，於50℃攪拌2小時。將反應混合物傾入冷水中(200mL)並用HCl酸化所得含水混合物。過濾分離所產生的白色沉澱並水洗濾餅。用乙醇重結晶白色固體，得到7gEDTA-HAL。m.p.103℃。B.製備N，N′-雙-(十六烷氧基羰基亞甲基)-N-(β-N-二甲基氨基-乙基氨基羰基)-N′-乙酸(EDTA-HAL-DMA)向含有步驟A的EDTA-HAL(3.70g，0.005mol)、N，N-二甲基乙二胺(1.598g，0.0175mol)和CHCl3(100mL)的冷(5℃)溶液內滴加入DCC(3.60g，0.0175mol)的氯仿(20ml)溶液。有沉澱形成，並室溫攪拌反應混合物約24小時，隨後過濾反應混合物，並用0.5％乙酸(100mL)洗滌濾液以分解過量的DCC。形成白色乳狀溶液並分離成兩層。乾燥底層有機層並真空濃縮，得到3.85gEDTA-HAL-DMA、為粘性固體。C.製備EDTA-HAL-DMA二碘化物混合步驟B所得的EDTA-HAL-DMA(2.36g.0.0027mol)、碘甲烷(3.81g)和乙醇(50mL)，並回流2小時。真空濃縮溶液並將所得到的殘留物凍幹過夜，得到2.96g標題產物(EDTA-HAL-DMA二碘化物)，為淡黃色固體。實施例3本實施例涉及具有下述結構的N，N′-雙(十六烷氧基羰基亞甲基)-N-(β-N，N，N-三甲基銨基乙基氨基羰基亞甲基)-N-甲基-N′-(羧基亞甲基)乙二胺二碘化物(EDTA-HA-DMA二碘化物)的製備。A.製備N，N′雙(十六烷基氨基羰基亞甲基)-乙二胺-N，N′-二乙酸(EDTA-HA)將十六烷基胺(4.82g，0.02mol)的無水甲醇(60mL)溶液加到乙二胺四乙酸二酐(2.56g，0.01mol)的無水甲醇(30mL)懸浮液內。混合物於50℃攪拌6小時。過濾分離所形成的白色固體沉澱，並於室溫下真空乾燥，得到3.43g(64％)EDTA-HA。m.p.156-158℃。IR3320cm-1(OH)；1670cm-1(-C(C＝O)-)。B.製備N，N′-雙(十六烷基氨基羰基亞甲基)-N，N′-雙(β-N，N-二甲基氨基羰基亞甲基)乙二胺(EDTA-HA-DMA)向含有步驟A所得的EDTA-HA(3.69g，0.005mol)、N，N-二甲基乙二胺(0.88g，0.01mol)和CHCl3(100mL)的冷(5℃)溶液內滴加入1.3-二環己基碳化二亞胺(DCC)(2.227g，0.011mol)的CHCl3(20mL)溶液。觀測到有沉澱形成，室溫下攪拌反應混合物約24小時。過濾反應混合物並用0.5％乙酸(100mL)洗滌濾液，以分解過量DCC。形成的白色乳狀溶液分離成兩層。乾燥(硫酸鈉)底部有機層並真空濃縮，得到3.81gEDTA-HA-DMA，為半固體。IR3280cm-1；2900cm-1；1640cm-1；1530cm-1。C.製備EDTA-HA-DMA二碘化物將含步驟B得到的EDTA-HA-DMA(4.2g，4.77mmol)、碘甲烷(3.41g，24mmol)和乙醇(30mL)的溶液回流2小時。真空濃縮乙醇溶液並凍幹所得殘留物過夜，得到3.98g標題化合物(EDTA-LA-DMA二碘化物)，為黃色固體。IR3260cm-1；1650cm-1。實施例4本實施例涉及具有下述結構的DPGS-PEG-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val的製備。A製備N-(1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-琥珀醯基)-琥珀醯亞胺(N-DPGS-琥珀醯亞胺)向含DCC(20.6mg)和乙腈(10mL)的冷(0-5℃)溶液內滴加入含1，2-二棕櫚醯-sn-甘油基-3-琥珀酸酯(AvantiPolarLipids，Alabaster，AL)(66.8mg)，N-羥基琥珀醯亞胺(11.5mg)，二甲氨基吡啶(DMAP)(2mg)和乙腈(40mL)的溶液。攪拌反應混合物5小時並濾除所形成的固體。真空濃縮濾液，得到78mgN-DPGS-琥珀醯亞胺，為白色產物。B.製備3-ω-羧基聚乙二醇亞氨基琥珀酸1，2-二棕櫚醯-sn-甘油酯(DPGS-ω-羧基-PEG)向ω-氨基-ω′-羧基-聚乙二醇(ShearwaterPolymers，Huntsville，AL)(0.3g)和三乙胺(40mg)在CHCl3(20mL)的溶液內滴加入步驟A所得的N-DPGS-琥珀醯亞胺(78mg)的氯仿(10mL)溶液。10℃下攪拌所形成的溶液約5小時並放置過夜。將反應混合物傾入冰水內並用10％HCl中和至pH小於3。分離有機層，水洗並乾燥(硫酸鈉)，過濾並真空濃縮，得到0.34gDPGS-ω-羧基-PEG，為白色固體。C.製備3-琥珀醯氧基羰基-聚乙二醇亞氨基琥珀酸-1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油酯(DPGS-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺)向DCC(12mg)的乙腈(10mL)冷(0-5℃)溶液內加入步驟B所得的DPGS-ω-羧基-PEG(200mg)，N-羥基琥珀醯亞胺(6mg)he二甲氨基吡啶(2mg)的溶液。攪拌所形成的反應混合物5小時。從反應混合物中過濾除去所形成的白色固體，並真空濃縮濾液。得到DPGS-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺(200mg)，為白色固體。D.製備DPGS-PEG-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val共軛物向肽Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val(5mg)在pH8.5的緩衝液(20mL)中的溶液內滴加入步驟C的DPGS-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺(40mg)的乙腈(0.1mL)溶液。室溫攪拌所形成的反應混合物約48小時。真空濃縮反應混合物並通過具有約1,000分子量分級顆粒的膜滲析天然鹽，並在凍幹箱中乾燥。得到標題化合物(DPGS-PEG-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val)(24mg)，為白色固體。實施例5本實施例涉及具有下述結構的DPPE-PEG-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val的製備。其中「肽」為-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-valA.製備ω，ω′-二亞甲基羧基-聚乙二醇酐向氯磺醯基異氰酸酯(14.2mg)的CHCl3(5mL)冷(0-5℃)溶液內加入ω，ω′-二亞甲基羧基聚乙二醇(0.34g)和三乙胺(20mg)的CHCl3(20mL)溶液。攪拌反應混合物過夜並傾入到冰水中。分離有機層並乾燥(Na2SO4)。過濾並真空濃縮有機層，得到標題酐化合物(0.2g)，為白色固體。B.製備1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-羰基亞甲基-ω′-羧基-聚乙二醇(DPPE-ω-羧基-PEG)。向步驟A得到的酐化合物(0.3g)的二氯甲烷(10mL)令(0-10℃)溶液內加入DPPE(0.07g)和三乙胺(0.05g)的二氯甲烷(15mL)溶液。攪拌所得混合物過夜，傾入冰水中，用10％HCl中和至pH＜3。分離有機層並乾燥(硫酸鈉)，過濾並真空濃縮有機層，得到0.45gDPPE-ω-羧基-PEG，為灰白色固體。C.製備1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-羰基亞甲基-聚乙二醇-琥珀醯亞胺(DPPE-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺)向DCC(3mg)的乙腈(2mL)冷(0-5℃)溶液內加入步驟B所得的DPPE-ω-羧基-PEG(60mg)，N-羥基琥珀醯亞胺(1.8mg)和二甲氨基吡啶(0.2mg)在6mL乙腈中的溶液。在0-5℃下，攪拌所形成的混合物3小時，然後於室溫下攪拌過夜。濾除所形成的固體並真空濃縮濾液，得到60mgDPPE-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺。D.製備DPPE-PEG-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val共軛物向Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val(5mg)在pH8.5的緩衝液中的溶液內滴加入DPPE-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺(40mg)的乙腈(10mL)溶液。室溫攪拌所形成的混合物約48小時。真空除去乙腈，然後通過1000分子量分級顆粒的膜滲析天然鹽。凍幹得到35mg標題化合物(DPPE-PEG-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val)，為白色固體。實施例6向鹽水、丙二醇和甘油(8∶1∶1)的溶液內加入DPPC、DPPE-PEG5000和DPPA(摩爾比為82∶8∶10)。將所得混合物加熱至約45℃，過濾(0.22μm)。將過濾後的混合物放入到管瓶內並使之冷卻至室溫。將管瓶放入真空中排空任何氣體，隨後用PFP加壓管瓶。爾後密封管瓶，置于振蕩器上，於室溫下振蕩，得到PFP填充泡囊的溶液，泡囊的平均直徑約2.5μm。實施例7本實施例涉及本發明範圍內的靶向泡囊的製備。利用上面實施例5中所述方法，將GpIIbIIIa結合肽(IntegratedBiomoleculeCorporation.Tucson，AZ)與DPPE-PEG3400通過共價方式結合。隨後將此肽共軛物與DPPC(82mol％)、DPPE-PEG5000(8mol％)和DPPA(8mol％)的乾燥類脂混合物混合。水合此混合物並用LabconcoLyph-Lock12凍幹機(KansasCity.MO)凍幹。將凍乾物料再懸浮在的生理鹽水∶丙二醇∶甘油＝8∶1∶1混合液中，濃度為1mg/ml。取小份此混合物放入2mLWheaton管瓶(Millville，NJ)內，封口並用全氟丁烷氣體(Flura，Newport.TN)替換上部空間的氣體。攪拌管瓶，得到靶向GpIIbIIIa受體的泡囊組合物。實施例8本實施例包括利用實施例6和7製備的泡囊組合物進行肽結合實驗的描述。將未肝素化人血放入Vacutainer管(BectonDickinson，Rutherford，NJ)內並使之結塊。用BeckmanTJ-6型離心儀(PaloAlto，CA)離心收集血塊。然後將血塊放在陽電載片(FisherScientific，Pittsburgh，PA)上。用血塊血塗布九塊載片。還使用六塊未塗布載片作為對照研究。然後通過如下所述將實施例6及7的泡囊組合物(200μL)施加到前述載片上進行結合研究(A)僅施加血塊(對照)；(B)施加實施例6的泡囊組合物，但不施加血塊；(C)施加實施例6的泡囊組合物和血塊；(D)施加實施例7的泡囊組合物，但不施加血塊；(E)施加實施例3的泡囊組合物和血塊。溫育載片20分鐘，然後用磷酸緩衝鹽水洗去未結合的物料。隨後使用NikonDiaphot(Tokyo，Japan)顯微鏡觀測載片。結果見下表中所示。表3結合研究結合(A)無(B)無(C)無(D)無(E)結合正如從上表中能看到的那樣，僅當使用含有GPIIbIIIa靶向肽的實施例7的泡囊組合物時，觀測到結合。實施例9本實施例涉及基於人血清白蛋白的載有定向GPIIbIIIa受體的靶向配位體的泡囊的製備。在容器內放入5％人血清白蛋白懸浮液。在連續真空下脫氣此懸浮液，並按公開的國際專利申請WO95/29705所述在其上部空間中導入全氟丙烷，所述文獻在此全部併入本文用作參考。通過用生理鹽水重複洗滌，所形成的氣體填充的白蛋白泡囊將與任何游離的白蛋白分離開。將氣體填充泡囊再懸浮在生理鹽水∶丙二醇∶甘油(6∶2∶2.v∶v∶v)混合物內並緩和混合懸浮液。向此懸浮液內加入1％戊二醛和1wt.％肽Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val，產生載有GPIIbIIIa結合肽的交聯全氟丙烷泡囊。實施例10本實施例涉及被結合有定向GPIIbIIIa受體的可聚丙烯醯基/苯乙烯基類脂類似物穩定的泡囊的製備。用甲基丙烯醯氯酯化12-羥基十二烷酸並轉化該酯成酐，從而得到12-(甲基丙烯醯氧基)十二烷酸酐。用12-(甲基丙烯醯氧基)十二烷酸酐醯化衍生自卵磷脂的L-α-甘油磷醯膽鹼，得到雙[12-(甲基丙烯醯基)氧基十二烷醯基]-L-α-甘油磷醯膽鹼(1)。用由粗製響尾蛇毒液(Crotalusadamanteus)得到的磷脂酶酶促水解化合物(1)，接著用棕櫚醯酐醯化，得到1-[2-(甲基丙烯醯氧基)十二烷醯基]-2-棕櫚醯基-L-α-甘油磷醯膽鹼(2)。採用類似方法轉化二棕櫚醯基-L-α-甘油磷醯膽鹼成1-棕櫚醯基-2-[12-(甲基醯氧基)十二烷醯基]-L-α-甘油磷醯膽鹼(3)。向DPPE-PEG5000(1.8mg/mL)和10wt％用GPIIbIIIa結合肽(Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val)標記的DPPE-PEG-5000(採用上面實施例5的方法製得)的生理鹽水溶液內加入上面所製得的化合物(3)。取少量此溶液放入無菌3mL管瓶內。將管瓶的液面上空間抽真空並注入氮氣和全氟乙烷氣體(20∶80，v/v)混合物到管瓶的液面上空間內，加至環境壓力。室溫下，將管瓶放在ESPECapmix(Seefeld，OberayGerman)振蕩約1分鐘。照射(254nm)泡囊組合物，得到載有GPIIbIIIa結合肽的聚合氣體填充泡囊。泡囊的平均直徑為約3μm。實施例11本實施例涉及定向GpIIbIIIa受體的合成聚雙(羧酸根合苯氧基)吩噻嗪(PCCP)氣體填充的泡囊的製備。採用上面實施例5中所述方法製備PCPP-PEG2000-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val。然後如美國專利5,487,390所述製備PCPP泡囊，此文獻內容在此併入本文用作參考。將PCPP泡囊(100mg)加到1mL碳酸鈉溶液(30mg/mL)內並於室溫攪拌過夜溶解。溶液用磷酸緩衝鹽水溶液(pH7.4)稀釋，得到25％(w/v)最終聚合物濃度及pH7.4的溶液。如果需要，用1NHCl調節pH。在膠體磨中混合含0.2％吐溫20的PCPP溶液(2.5％w/v)和全氟丙烷氣體，產生充氣的PCCP溶液，此溶液能穩定數小時。此溶液中所用的PCPP的10mol％為PCPP-PEG2000-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val。充氣溶液以150μL/分鐘速率從注射泵中擠壓到處在全氟丙烷氣體氣氛中的空氣霧化裝置中並噴霧到含有250mL7.5％CaCl2溶液(其中含0.5％吐溫20)的盤中。通過與CaCl2溶液接觸，PCPP被兩價鈣離子交聯，產生具有比較均勻分布的靶向GPIIbIIIa並填充有全氟丙烷的球形凝膠泡囊。通過利用倒置顯微鏡觀察泡囊，可以證實所包封的全氟丙烷的存在。實施例12本實施例涉及由氟化類脂配製的靶向GPIIbIIIa受體的泡囊的製備。α-氨基ω-羧基-PEG3400(ShearwaterPolymer，Huntsville，AL)的氨基按下所述給予保護溶解1當量α-氨基ω-羧基-PEG3400到水二噁烷(1∶1，v/v)溶液內，向此攪拌溶液內加入1摩爾當量t-BOc-酐(Bachem，Gardena，CA)和三乙胺(AldrichChemical，Milwaukee，WI)。攪拌所形成的溶液過夜並真空濃縮除去揮發物二噁烷。向濃縮物料中加入10體積當量(相對於水)乙酸乙酯並用冰浴冷卻所形成的混合物。混合物的pH用2N硫酸水溶液調節至pH2，利用分液漏鬥分離下層水層。乙酸乙酯層用飽和鹽水洗滌，硫酸鎂乾燥，過濾，並真空濃縮，得到漿狀物。結合t-BOC-α-氨基ω-羧基-PEG3400、一摩爾當量二異丙基碳化二亞胺(DIC)(SigmaChemicalCO.，St.Louis，MO)和無水DMF。攪拌此溶液並加入各一當量的二異丙基乙胺(DIEA)(SigmaChemicalCo，St.Louis.MO)、羥基苯並三唑(HOBT)和1，2-二(15，16，17，18-九氟代)硬脂基磷脂醯乙醇胺(氟化-DSPE)。攪拌所形成的溶液2小時並真空濃縮。將氟化-DSPE-t-BOC-α-氨基ω-羧基-PEG3400懸浮在三氟乙酸和二氯甲烷(4∶6)的溶液內，接著再攪拌20分鐘。然後用DIEA中和溶液並真空濃縮。產物再懸浮在二氯甲烷內，加鹽酸至pH約2。分離水層並用1.0％NaOH再調節至pH10。向含水混合物中加入乙酸乙酯，並分離出乙酸乙酯層，用飽和鹽水洗滌，乾燥(疏酸鎂)，過濾並真空濃縮，得到氟化-DSPEα-氨基ω-羧基-PEG3400，為黃色油。將上面所得的黃色油與1當量N-溴代琥珀醯亞胺(NBS)(SigmaChemical，St.Louis，MO)和DMF混合。攪拌所形成的混合物3小時並真空濃縮過夜。濃縮物料再懸浮在pH7的磷酸緩衝鹽水溶液內，並向懸浮液內加入靶向GPIIbIIIa受體的肽Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS)。攪拌過夜後，使用Amicon濾器濃縮器(Amicon，Beverly，MA)濃縮反應混合物至約300ml體積。通過尺寸排阻層析純化濃縮液，得到氟化-DSPE-α-氨基ω-羧基-PEG3400-Arg-Gly-Asp-Ser。將此產物加到DPPC和DPPA的混合物中，以得到DPPC∶氟化DSPE∶DPPA的比例為40∶54∶6。將該類脂混合物加到包括生理鹽水∶甘油∶丙二醇(8∶1∶1，v∶v∶v)的稀釋劑中，得到1mg/mL稀釋劑類脂最終濃度。取少量此溶液放入到2mL管瓶(WheatonIndustries，Chicago，IL)內並用全氟丙烷填充液面上空間。用ESPECapmix(ESPE，Seefeld，Germany)以4300rpm攪拌管瓶1分鐘，產生靶向GPIIbIIIa受體的氟化泡囊。實施例13本實施例涉及具有下述結構的N-(1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-琥珀醯)-PEG-A蛋白共軛物的製備。A.製備N-DPGS-琥珀醯亞胺。向容在100mL圓底燒瓶內的1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-琥珀酸酯(66.8mg)、N-羥基-琥珀醯亞胺(11.5mg)、DMAP(2mg)和乙腈(40mL)冷(0-5℃)溶液中滴加入DCC(20.6mg)的乙腈(10mL)溶液。攪拌所得混合物5小時。濾除反應期間產生的固體物料(二環己基脲)並真空濃縮濾液，得到78mgN-DPGS-琥珀醯亞胺，為白色產物。B.製備3-ω-羧基-聚乙二醇-亞氨基-琥珀酸1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油酯(DPGS-ω-羧基-PEG)。向容在100mL圓底燒瓶內的步驟A所得的N-DPGS-琥珀醯亞胺(78mg)和CHCl3(10mL)(Mallinckrodt，St.Louis，Mo.)的冷(0-5℃溶液中滴加入ω-氨基-ω′-羧基-聚乙二醇(0.3g)和三乙胺(40mg)的CHCl3(20mL)溶液。10℃下攪拌所得混合物5小時。攪拌過夜後，將反應混合物傾入到冰水中並用10％HCl中和至pH約3或更低。利用分液漏鬥分出下面有機層並水洗三次。收集有機層並乾燥(硫酸鈉)。過濾並真空濃縮，得到0.34gDPGS-ω-羧基-PEG，為白色固體。C.製備3-琥珀醯亞胺醯氧基-羰基-聚乙二醇-亞氨基琥珀酸1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油酯(DPGS-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺)。向置於250mL圓底燒瓶內的步驟B的DPGS-ω-羧基-PEG(200mg)、N-羥基琥珀醯亞胺(6mg)、DMAP(2mg)和乙腈(40mL)的冷(0-5℃)溶液中滴加入DCC(12mg)的乙腈(10mL)溶液。攪拌所得混合物5小時並濾除所形成的白色固體(二環己基脲)。真空濃縮濾液，得到200mgDPGS-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺，為白色固體。D.製備DPGS-PEG-A蛋白共軛物向攪拌的蛋白A(SigmaChemicalCo.，St.Louis，MO)(20mg)在pH8.5的含水緩衝液(20mL)中的冷(5-10℃)溶液內滴加入步驟C所得的DPGS-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺(4mg)和乙腈(10mL)的溶液。將所得混合物的溫度升至室溫並攪拌約48小時。真空濃縮混合物並利用具有約3500分子量分級顆粒膜的滲析儀滲析去殘留鹽，逆水平衡。冷凍並凍幹所得滲析溶液，得到12mg標題物料(DPGS-PEG-A蛋白共軛物)，為白色固體。實施例14本實施例涉及具有下述結構的DPPE-PEG-A蛋白共軛物的製備，A.製備ω，ω′-二亞甲基羧基-聚乙二醇酸酐向置在100mL圓底燒瓶內的ω，ω′-二亞甲基羧基聚乙二醇(0.34g)和CHCl3(20mL)的冷(0-5℃)溶液內加入DCC(0.02g)的CHCl3(5mL)溶液。攪拌此溶液過夜並濾除所產生的白色固體沉澱(二環己基脲)。真空濃縮濾液，得到0.3g酐，為白色固體。B.製備1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-羰基-亞甲基-ω′-羧基-聚乙二醇(DPPE-ω-羧基-PEG)向置在100mL圓底燒瓶內的步驟A所得酸酐(0.3g)的二氯甲烷(10mL)冷(0-10℃)溶液內加入DPPE(0.07g)和三乙胺(0.05g)的二氯甲烷(15mL)溶液。攪拌過夜後，將反應混合物傾入冰水中並用10％HCl酸化至pH約3或更低。隨後利用250mL分液漏鬥分出下面有機層並乾燥(硫酸鈉)。過濾並真空濃縮二氯甲烷溶液，得到0.45gDPPE-ω-羧基-PEG，為灰白色固體。C.製備1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-羰基乙腈-聚乙二醇-琥珀醯亞胺(DPPE-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺)向DCC(3mg)的乙腈(2mL)冷(0-5℃)溶液內加入DPPE-ω-羧基-PEG(60mg)(由步驟B製得)、N-羥基琥珀醯亞胺(1.8mg)和DMAP(0.2mg)的乙腈(6mL)溶液。在0-5℃攪拌3小時後，將反應混合物的溫度升至室溫。攪拌過夜後，濾除所形成的白色固體沉澱，並真空濃縮濾液，得到60mgDPPE-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺。D.製備DPPE-PEG-A蛋白共軛物向A蛋白(20mg)在15mlpH8.5的含水緩衝液(15mL)中的冷(5-10℃)溶液內滴加步驟C所得的DPPE-ω-羧基-PEG-琥珀醯亞胺(4mg)的乙腈(8mL)溶液。將反應混合物的溫度升至室溫並續攪拌48小時。真空濃縮混合物，利用具有約3500分子量分級顆粒滲析膜滲析殘餘鹽到水中。凍幹含水滲析液樣，得到15mg標題產物(DPPE-PEG-A蛋白共軛物)，為白色固體。實施例15本實施例涉及定向上皮細胞的靶向泡囊組合物的製備和使用。A.製備泡囊組合物將實施例13所得的DPGS-PEG-蛋白A共軛物(1wt％)與DPPC(82mol％)、DPPA(10mol％)和DPPE(8mol％)的乾燥類脂混合物混合。水合此乾燥類脂混合物並利用Labconco(KansasCity，MO)Lyph-Lock12型凍幹機凍幹。將凍幹混合物再懸浮在生理鹽水∶丙二醇∶甘油(8∶1∶1)中，其中類脂濃度為1mg/mL。將混合物等分到2mLWheaton管瓶(Millville，NJ)內。封口覆蓋管瓶並用全氟丁烷氣體(Flura，Newport，TN)置換管瓶的液面上空間空氣。然後用EspeCapmix(Seefeld，Germany)搖動管瓶一分鐘，得到氣體填充泡囊。向管瓶液樣中加入兔抗角蛋白抗體(Calbiochem，SanDiego，CA)(100μL)，並顛倒混合抗體和氣體填充泡囊。室溫溫育管瓶約1小時。分別在用PBS洗滌之前和之後對泡囊組合物進行雙辛可寧酸蛋白沉測定(Pierce，Rockford，IL)。該測定表明，抗角蛋白抗體通過A蛋白與泡囊結合，並且在洗滌過程中仍保持結合。B.泡囊組合物的靶向實驗將HeLa細胞(表達角蛋白的上皮子宮頸癌細胞系)平板接種到平側組織培養管(Nunc，Roskilde，Denmark)的EMEM培養基(Cellgro，Washington，DC)內。將細胞生長過夜，並向各管內加入等分泡囊組合物。所用泡囊組合物為(i)實施例6所得的泡囊；(ii)步驟A中所制的且不含兔抗角蛋白抗體的泡囊；和(iii)步驟A所制的且包含兔抗角蛋白抗體的泡囊。僅(iii)中的包含抗體的泡囊與HeLa細胞結合。實施例16利用二硬脂醯基磷脂醯乙醇胺(DSPE)，(AvantiPlarLipids，Alabaster，AL)和α-氨基ω-羧基-PEG3400(ShearwaterPolymer，Huntsville，AL)製備聚乙二醇化類脂。通過在水∶二噁烷(1∶1，v∶v)中結合α-氨基ω-醯氨基PEG和各1摩爾當量的t-Boc-酐(Bachem，Gardena，CA)和三乙胺(AldrichChemical，Milwaukee，WI)保護氨基。攪拌所得溶液過夜並真空除去二噁烷。向水殘留物中加入相對於水1倍體積量乙酸乙酯(Mallincrodt，St.Louis，MO)，並在冰浴中冷卻此混合物。用含水硫酸(2N)調節pH至pH2，利用分液漏鬥分離水層。乙酸乙酯層用鹽水洗滌，乾燥(硫酸鎂)，並真空濃縮，顛倒此漿狀物。混合黃色油、DSPE-t-Boc-α-氨基ω-醯氨基-PEG3400、一摩爾當量二異丙基碳化二亞胺(DIC)(SigmaChemicalCo.，St.Louis，MO)和無水二甲基甲醯胺(DMF)。攪拌溶液並再各加入一摩爾當量二異丙基碳化二亞胺(DIEA)(SigmaChemicalCo.，St.Louis，MO)和羥基苯並三唑(HOBT)。攪拌溶液2小時並真空濃縮。將濃縮殘留物DSPE-t-BOC-α-氨基，ω-醯氨基-PEG3400與三氟乙酸和二氯甲烷(4∶6，v∶v)混合，並再攪拌所得混合物20分鐘。溶液用DIEA中和並真空濃縮。鹼將此殘留物再懸浮於二氯甲烷中，加入稀鹽酸至達到pH2為止。分離水層，並用1.0％NaOH調節pH至10。向此水混合物中加入乙酸乙酯，並分離乙酸乙酯層，飽和鹽水洗滌，並乾燥(硫酸鎂)。真空濃縮乙酸乙酯溶液，得到黃色油。向黃色油、DSPE-α-氨基ω-醯氨基-PEG3400在DMF中的溶液內加入一當量N-溴琥珀醯亞胺(NBS)(SigmaChemical，St.Louis，MO)。攪拌3小時後，真空濃縮反應混合物過夜。向所得濃殘留物在pH約7的磷酸緩衝鹽水(PBS)的懸浮液中加入抗癌胚抗原(抗-CEA)，即小鼠/人嵌合起點的單克隆抗體。攪拌過夜後，用Amicon過濾濃縮器(Amicon，Bevely，MA)濃縮溶液至約300mL體積。濃溶液通過尺寸排阻層析純化，得到最終產物。實施例17重複實施例6製備泡囊製劑，只是在泡囊形成之前，向類脂組合物中加入約1納摩爾重組人生長激素。實施例18重複實施例17，只是用陽離子類脂二棕櫚醯基磷脂醯膽鹼(Avanti)代替DPPA，以及用中性類脂DPPE代替DPPC。此實施例提供了可與生物活性劑，特別是遺傳物質，如血管內皮生長因子(VEGF)結合的陽離子泡囊。摻入靶向配位體如抗心肌抗體類脂共軛物，提供了能定向梗塞和/或局部缺血組織的靶向泡囊。施加具有可變脈衝持續時間的高能量超聲波脈衝，例如1MHz連續波200mW，促進泡囊破裂。結果，VEGF基本上能直接傳送到梗塞和/局部缺血組織。實施例19本實施例涉及能靶向胰腺神經內分泌腫瘤的泡囊組合物的製備。重複實施例16，只是用抑生長素肽代替抗-CEA。再向泡囊組合物中摻入治療用抗腫瘤劑鏈左星。靜脈注射所得泡囊組合物到被診斷患有神經內分泌腫瘤的患者體內。泡囊優先在鄰近腫瘤的胰腺區域被吸收，由此產生增強的傳送抗腫瘤劑到腫瘤部位的能力。實施例20重複實施例15，只是除HeLa細胞外，靶向泡囊還被加入到包括小鼠正常肝細胞的內皮細胞系中。只有含有抗體的泡囊才與肝細胞結合。實施例21本實施例涉及靶向心肌細胞的製備和使用。A.製備靶向泡囊重複實施例15，只是用兔抗人骨骼肌球蛋白抗體(BiomakorTM，KiryatWeizmann，Rehovot，Israel)(100μL)代替兔抗角蛋白抗體。B.靶向心肌細胞將大鼠心臟成肌細胞(美國典型培養物保藏中心，Rockbille，MD)平板接種到平側組織培養管(Nunc，Roskilde，Denmark)的EMEM培養基(Cellgro，Washington，DC)內。將細胞生長過夜，並向各管內加入等份泡囊組合物。所用泡囊組合物為(i)實施例6的泡囊；(ii)步驟A中所制的且不含兔抗肌球蛋白抗體的泡囊；和(iii)步驟A所制的且包含兔抗肌球蛋白抗體的泡囊。只有(iii)中的包含抗體的泡囊與心肌細胞結合。實施例22本實施例涉及靶向心肌細胞的製備和應用。A.製備靶向泡囊重複實施例15，只是用兔抗肌球蛋白(骨骼)抗體(AccurateChemical，Westbury，NY)(100μL)代替兔抗角蛋白抗體。B.靶向心肌細胞採用表達心肌球蛋白的大鼠心肌細胞系H9C2。(與骨骼肌肌球蛋白和心肌肌球蛋白基本類似)。對照組細胞係為INT407，即人腸道細胞系。將這些細胞平板接種到平側組織培養管(Nunc，Roskilde，Denmark)的EMEM培養基(Cellgro，Washington，DC)內。將細胞生長過夜，並向各管內加入等份泡囊組合物。所用泡囊組合物為(i)實施例6的泡囊；(ii)步驟A中所制的且不含兔抗肌球蛋白抗體的泡囊；和(iii)步驟A所制的且包含兔抗肌球蛋白抗體的泡囊。所用的三種試驗細胞種類為(a)INT407；(b)H9C2；和(c)經過下述處理的H9C2暴露在10％葡萄糖中10分鐘以休克細胞並開通微孔，以容許抗肌球蛋白結合到胞質肌球蛋白上。在任一細胞種類(a)、(b)或(c)中均未觀察到它們與泡囊組合物的結合。泡囊組合物(iii)也未與細胞種類(a)結合。觀察到泡囊組合物(iii)與細胞種類(b)的某些結合，相反則觀察到泡囊組合物(iii)與細胞種類(c)的顯著結合。實施例23冠脈擴張藥潘生丁(例如，參見TheMerckIndex，10thEd.，p.489(1983))是包括在本發明範圍中的生物活性劑。潘生丁還包括在本發明範圍內的靶向配位體中，因為它能與心臟組織內的一種或多種受體結合，並且還能連接到磷脂上，提供膜相容衍生物。具體地，利用二環己基碳化二亞胺和作為縮合劑的催化劑，使N-琥珀醯-DPPE與N-雙嘧氨哌醇琥珀酸酯-DPPE結合。此種結合有潘生丁衍生物的類脂可用於類脂組合物中，用於製備靶向心臟組織的泡囊，實施例24將氣囊導管經過股動脈經皮導入到實驗動物的左彎曲冠狀動脈內。充氣氣囊3小時，防止血液流向前外側心肌層並引起心肌梗塞。藉助5MHz換能器進行超聲波心動描記術並展示持續壁運動異常，以及左室前外側壁的心肌變細。放氣氣囊並靜脈注射劑量30μL/Kg的填充有十二氟戊烷氣體的抗心肌球蛋白標記的泡囊(類似實施例22步驟A中所述製備)。注射後，進行30分鐘超聲波心動描記術。影像表明，在前外側壁中由增強的發生回波面積，這對應於梗塞的面積。梗塞外周(再灌注區域)最亮，中心強度較低(持續無血流區域)。比較發現，中心室穴相對暗，此時大多數泡囊被清楚。實施例25將胸疼患者送入到醫院的急救室中，進行超聲波研究，研究表明在左室的前壁存在壁運動異常。對患者施用劑量5μL/Kg抗心肌球蛋白標記的填充有全氟丁烷氣體的泡囊(類似實施例22步驟A所述製備)。給用10分鐘後，重複超聲波成像，顯示出在左室動脈壁中有增強的回波發生區域。這將進一步確定心肌梗塞的診斷，並用組織纖溶酶原激活物治療患者。實施例26對患者進行應力超聲波心動描記術檢查，診斷是否存在冠狀動脈疾病。在最大運動期間，對患者施用55μL/Kg如上面實施例23所述的潘生丁標記的全氟丙烷填充泡囊。通過利用(a)雙官能團；(b)小跨越分子；(c)還原性氨化或未還原性氨化的席夫鹼；或(d)馬來醯亞胺基連接基，結合潘生丁和泡囊。泡囊結合到心肌的灌注區域。隨著背景泡囊變清楚(需要約5分鐘)，標記泡囊將繼續存在心肌內。延遲影像表明，冠狀動脈疾病(CAD)影響的局部缺血心肌作為明亮環繞的低強度區域，即正常冠狀心肌。心室內的任何顯著背景泡囊的缺少消除了屏蔽問題，並有助於進行CAD診斷。實施例27本實施例說明使用本發明的泡囊組合物和方法對蛋白質的靶向表達。取三隻Sprague-Dawley鼠(這裡分別稱作(A)、(B)和(C))，用氯胺酮乙醯丙嗪麻醉。將含有帶有SV40啟動子的β-半乳糖苷酶基因和增強子基因的質粒pSVβ-gal與實施例2中製得的陽離子類脂化合物結合。室溫培養質粒和陽離子類脂化合物的混合物15分鐘。將cGMP和所得的培養物質加到分別以82∶10∶8摩爾％共混的DPPC、中的溶液內。用WIG-L-BUGTM以3200rpm振蕩所形成的混合物1分鐘，製得泡囊。將所得泡囊組合物分別注射到大鼠(A)、(B)和(C)體內。注射劑量如下。大鼠劑量pSVβgal(μg)劑量陽離子類脂(μg)(A)530(B)530(C)25150在注射泡囊組合物期間，將大鼠(B)和(C)暴露在超聲波儀(1.0Mhz，Rich-Mar25型，Rich-MarCorporation.Inola，OK)的超聲波能量中。注射期間超聲波定向到左後頹的內部並持續一分鐘後峰。大鼠(A)不接受超聲波治療。48小時後，用CO2窒息處死大鼠。從各大鼠上除去左右腿肌肉和皮膚。還除去心臟，肝臟和腎臟。切除組織在2％福馬林固定72小時。固定後，將組織浸入到含有X-gal、亞鐵氰化鉀和鐵氰化鉀的溶液內，測定所存在的β-半乳糖苷酶的活性。染色組織，檢查並照相。表達廣泛分散在大鼠(A)的腿組織，特別是內皮細胞，肌肉和皮膚中。檢查大鼠(B)的切除組織表示出在類似細胞種類中的表達，但僅在超聲波施加的部位。大鼠(C)顯示出在靶腿中的點表達並且分散表達到未靶向的腿中。實施例28本實施例涉及各種類脂組合物的製備。以相應的82∶10∶8摩爾比例共混DPPC、DPPA和DPPE-PEG5000，此類脂混合物在此稱作組合物(A)。取部分組合物(A)與實施例2中製得的陽離子類脂化合物以10∶1(w/w)比例混合在去離子蒸餾水中。這後一種混合物在此稱作組合物(B)。將組合物(A)和(B)導入到1ml血清管瓶內。用SargentWelch真空泵(Skokie，IL)抽真空並用全氟丙烷氣體(FluraChemicalCorp.Newport，TN)替換液面上空間氣體。用CrescentDentalWIG-L-BUGTM311B(Lyons，IL)機械搖動器攪動管瓶。振蕩後，向部分管瓶中加入肝素(ElkinSinnsInc.，CherryHill，NJ)，類脂與肝素的摩爾比大約為5∶1。肝素和組合物(A)的混合物在此稱作組合物(C)。肝素和組合物(B)的混合物在此被稱作組合物(D)。隨後向組合物(A)、(B)、(C)和(D)中分別加入重組人隨後向組合物(A)、(B)、(C)和(D)中分別加入重組人鹼性成纖維細胞生長因子(BFGF)(Sigma，St.Louis，MO)，所得混合物在此分別稱作組合物(E)、(F)、(G)和(H)。以5∶1摩爾比(BFGF肝素)將BFGF加到含有肝素的組合物(組合物(C)和(D))中。採用Accusizer770(ParticleSizingSystems，SantaBarbara，CA)，分級組合物(A)至(H)各至少三組樣品。分級表明，組合物(A)至(G)中的泡囊的尺寸沒有區別。但是，含有陽離子類脂、肝素和BFGF的組合物(H)的泡囊具有較小的平均尺寸。然後利用天然聚丙烯醯胺凝膠(蛋白質凝膠PAGE混合物，BoehringerMannheim，Indianapolis，IN)分析組合物(E)至(H)，鑑定肝素和BFGF的結合特性。凝膠在HoeferSE400板凝膠裝置(HoeferScientificSanFranciso，CA)中熔化。利用電泳電源(MBP300，IBI，Rochester，NY)，凝膠以恆電流熔化。爾後採用快速考馬斯藍(EastmanKodak，Rochester，NY)染色方法染色凝膠並目視分析。凝膠電泳確認，在組合物(H)中，陽離子類脂的存在增強了肝素以及BFGF的結合。預期陰離子性肝素與陽離子類脂結合，且陽離子性BFGF與肝素結合。不含肝素和陽離子類脂的組合物中的BFGF在電泳過程中遷移。實施例29重複實施例16，只是用血管內皮生長因子(VEGF)替代抗-CEA抗原。實施例30以82∶10∶8摩爾％將DPPC、DPPA和DPPE-PEG5000混合到生理鹽水∶丙二醇∶甘油(8∶1∶1，w/w/w)中。溶液中類脂總濃度為1mg/mL。向此混合物中加入重組人生長因子，濃度10wt％(基於類脂的總重量)。取小份(1.5mL)此混合物放入到3mL玻璃管瓶內並將管瓶內液面上空間氣體用全氟丙烷氣體交換。密封管瓶並搖動，產生結合有人生長激素的氣體填充泡囊，可用於靶向內皮細胞。泡囊的平均直徑為約3μm。實施例31以92∶8摩爾比，將二硬脂醯磷脂醯甘油(DSPG)和DPPE-PEG5000混合到無菌水中。類脂濃度約1mg/mL。利用醯胺結合法，用10摩爾％(重量)鹼性成纖維細胞生長因子(bFGF)衍生脫乙醯殼多糖，連接脫乙醯殼多糖的氨基到bFGF的羧基部分上。將衍生脫乙醯殼多糖加到類脂懸浮液中，其加入量應能提供基本等濃度脫乙醯殼多糖中的陽離子基團和DSPG中的陰離子基團。取小份此溶液(1.5mL)放入到3mL管瓶內並用全氟丁烷替代液面上空間的氣體。密封管瓶並用ESPECapmix(Seefeld，Germany)振蕩，得到用於靶向內皮細胞的氣體填充泡囊。實施例32用DSPE和α，ω-雙羧甲基)PEG2000(ShearwaterPolymer，Huntsville，AL)製備聚乙二醇化類脂，從而得到MeO2C-PEG-DSPE。用柱色譜(矽膠)純化該類脂，得到游離酸(HO2C-PEG-DSPE)，然後將VEGF連接到游離羧基上。以82∶10∶6∶2摩爾比將DPPC，DSPA，DSPE-PEG和DSPEPEG-VEGF混合至生理鹽水∶甘油∶丙二醇(8∶1∶1，w/w/w)中，類脂總濃度達到1.5mg/ml。取小份此混合物(1.5mL)放入到3mL無菌管瓶內，並在30℃下將管瓶中液面上空間的氣體用全氟戊烷氣體替換，密封管瓶。利用ESPECapmisx(Seefeld，Germany)，在30℃以3,200rpm振蕩管瓶約90秒，產生全氟戊烷氣體填充的靶向泡囊。實施例33以65∶27∶8摩爾比將，DSPC、膽固醇和DPPA混合到生理鹽水∶丙二醇∶甘油(8∶1∶1，w/w/w)中，總類脂濃度為5mg/mL。取小份此混合物(1.5mL)放入到無菌管瓶內，並在將管瓶中液面上空間的氣體用全氟丁烷氣體替換，密封管瓶並用ESPECapmisx(Seefeld，Germany)振蕩管瓶約5分鐘，得到本發明的泡囊組合物。對已給用高膽固醇食物的Watanabi兔靜脈給用0.10mL/Kg劑量泡囊組合物。給藥後，進行超聲波成像約25分鐘，成像表明泡囊聚焦在粥樣硬化斑侵襲的內皮細胞區域。這說明本發明的泡囊組合物可用於檢測內皮細胞的粥樣硬化區。實施例34重複實施例33，其中除所用類脂外，還包括提供醯胺鍵與DPPE-PEG-羧酸化物共價連接的膽甾醇胺。這樣類脂混合物包括DPPC、DPPE-PEG5000、DPPE-PEG-膽甾醇胺和DPPA，它們以82∶7∶1∶10摩爾％混合。實施例35重複實施例33，只是類脂濃度增高至約5mg/mL，且懸浮介質包括生理鹽水、海藻糖(10mg/mL)和pluronicF-68(10mg/mL)的溶液。此類脂懸浮液用Microfluidizer(Microfluidics，Newton，MA)以16,000psi微乳化，共10個來回。凍幹所形成的泡囊組合物，並通過緩慢注入全氟丁烷氣體，在72小時內使凍幹室的上部空間逐漸恢復至環境壓力。所形成的氣體填充的凍幹泡囊在使用之前以乾粉形式貯藏。實施例36重複實施例35，只是類脂濃度將增大至約25mg/mL，且懸浮介質包括生理鹽水、山梨糖醇(20mg/mL)和pluronicF-68(20mg/mL)的溶液。將類脂懸浮液冷卻至-4℃，並向此混合物中加入全氟戊烷，使全氟戊烷的濃度達到8μL/mL溶液。將此混合物以16,000psi通過保持在4℃的微硫化器，共20個來回。從而得到全氟戊烷填充的泡囊組合物。靜脈注射該組合物到患者體內，在體內形成可用於靶向內皮細胞的氣體填充泡囊。氣體填充泡囊也可在靜脈注射之前按下所述製得溫熱泡囊組合物至高於約30℃，利用如ESPEcapmix(Seefeld，Germany)或其它搖動器或攪拌裝置攪動製得，或者通過抽動填充由全氟戊烷填充的泡囊組合物的注射器的活塞，降低壓力並轉化全氟戊烷液體成全氟戊烷氣體來製備。實施例37用異丁烯醯氯酯化12-羥基十二烷酸並轉化酯成酸酐，得到12-(異丁烯醯氧基)十二烷酸酐。用12-(異丁烯醯氧基)十二烷酸酐醯化衍生自卵磷脂的L-α-甘油膽鹼磷酸，產生雙[12-(異丁烯醯)氧基十二烷醯基]-L-α-磷脂醯膽鹼(1)。利用由粗製響尾蛇毒液(Crotalusadamanteus)得到的磷脂酶酶促水解化合物(1)，接著用棕櫚醯酐醯化，得到1-[2-(異丁烯醯氧基)十二烷醯基]-2-棕櫚醯基-L-α-甘油磷醯膽鹼(2)。將上述產物(2)與生理鹽水混合，其中類脂的濃度為3mg/mL。向此混合物中加入DSPE-PEG-VEGF，其濃度為0.30mg/mL。取少量此溶液(1.5mL)放入無菌3mL管瓶內。將管瓶的液面上空間抽真空並全氟丙烷氣體置換，密封管瓶並用光不透性箔紙纏繞。將管瓶放在ESPECapmix(Seefeld，Germany)振蕩約3分鐘，得到氣體ESPECapmix(Seefeld，Germany)振蕩約3分鐘，得到氣體填充泡囊。除去箔紙並用光(254nm)照射泡囊組合物，得到靶向內皮細胞的聚合氣體填充泡囊、該泡囊載有VEGF。實施例38重複實施例37，只是將類脂(2)與DSPE-PEG(參見實施例8)結合。在用ESPECapmix(Seefeld.Germany)搖動之前，將VEGF與此混合物混合，而不是共價連接到DSPE-PEG上。光聚合之後，將VEGF直接嵌入塗布泡囊的聚合類脂膜中。實施例39本實施例概括性涉及白蛋白泡囊的製備，該泡囊被內部交聯並包括通過連接聚氧(C1-4)亞烷基鏈修飾的表面，如公開的國際專利WO95/00126所述，此文獻內容在此全部併入本文用作參考。亞烷基鏈修飾物的末端包含活性基團，而不是WO95/00126中的亞烷基鏈的末端為醚基。活性基團包括結合內皮細胞的靶向配位體的基團。實施例39A以500mL/分鐘速率將5％人牛血清白蛋白(5mL)的水溶液導入到超聲波反應器內。使用SonifierB-30(Branson，FRG)超聲波處理混合物約15分鐘，能量負荷為100瓦/cm2。通過冷凍反應容器保持溫度為22℃。如果需要的話，此混合物中可包含生物活性劑如藥物。通過加到白蛋白溶液(戊二醛飽和的二氯甲烷(0.2mL)溶液)內引發交聯。攪拌所得溶液約1小時。依次用甲醇，丙酮和正己烷洗滌後，得到交聯的白蛋白泡囊，為棕色粉末，並真空乾燥約24小時。利用Nicomps雷射光顆粒散射系統在大約200nm處確定所得泡囊的顆粒尺寸。實施例39B通過用4葉片高速攪拌機替代高強度乳化法並使用高濃度白蛋白，例如約10至約25％濃度，可以製得具有大於實施例39A中所制泡囊直徑的白蛋白泡囊。如上面實施例39A所述進行交聯。實施例39C本實施例涉及氣體填充的泡囊的製備。按下所述製備白蛋白泡囊在無菌管瓶內放入5mL5％白蛋白並在液面上空間中充入全氟丁烷氣體。用ESPECapmix(Seefeld，Germany)以3,300rpm搖動管瓶約5分鐘，並按上面實施例39A所述進行交聯。實施例39D本實施例涉及氣體填充的白蛋白泡囊的製備。通過超聲波處理含5％人血清白蛋白溶液的管瓶和液面上空間的全氟丙烷氣體，製備白蛋白泡囊。該超聲處理包括在中等功率設置下(HeatSystemsProbe，Farmingdale，NY)將超聲波發生器角尖端最低程度浸入到液體內界面內約5分鐘。如上實施例39A所述交聯白蛋白泡囊。實施例39E本實施例涉及偶合雜雙官能化PEG到上面製得的白蛋白泡囊上。將α-氨基ω-羧基-PEG5000(ShearwaterPolymers)的ω羧基用合適的酯官能物例如苄基酯保護。通過用1，1-羰基二咪唑活化蛋白質上的合適胺基酸部分如天冬氨酸或穀氨酸部分，使PEG的氨基共價鍵合到白蛋白泡囊上，使白蛋白與PEG的重量比為10∶1。PEG通過醯胺鍵共價鍵合到白蛋白上之後，除去苄基酯基團，通過用1，1-羰基二咪唑活化PEG的羧酸化物，使aFGF與游離羧基連接。這樣提供了經PEG連接基鍵合到白蛋白泡囊上的內皮靶向配位體。另一方面，偶合也可通過用羰基二咪唑活化aFGF的適宜胺基酸如天冬氨酸或穀氨酸，接著加入羧基保護的α-氨基ω-羧基-PEG而完成。被護羧基將被脫保護，而未保護的羧基被羰基二咪唑活化。混合活化的aFGF-PEG並與白蛋白泡囊反應。通過在真空下小心脫水泡囊將氣體注入到泡囊內，並逐漸用氣體如全氟丁烷恢復至環境壓力。在脫水和氣體注入步驟之前可加入一種或多種表面活性劑如pouronicF-68。實施例40本實施例涉及氣體填充的籠形物的製備。用適宜的酯官能物如苄基酯保護α-羥基，ω-羧基-PEG2000的ω羧基。在0-5℃，將被護化合物與一當量POCl3在Et3N和CHCl3中反應，轉化羥基成氯化磷酯。爾後將此化合物與過量碳酸氫鈉反應產生相應的磷酸鈉鹽(PEG-PO4Na2)用pH3.0的HCl酸化該鹽，得到相應的酸(PEG-PO4H2)。採用約100分子量分級顆粒的膜向純淨水逆向滲析此產物。滲析後，將上述磷酸產物(2g)與焦磷酸二氫二鈉(Na2H2P2O7)(8g)在水(100mL)中化合。將此溶液導入到Buchi噴霧乾燥裝置中並噴霧乾燥。真空下於120℃烘乾所得顆粒，得到空心PEG塗層的焦磷酸鹽泡囊。將這些泡囊再懸浮在水介質中，除去苄基保護基。用1，1-羰基二咪唑活化PEG的脫保護羧基，並偶合所得化合物到靶向內皮細胞的ELAM的單克隆抗體上。向含靶向泡囊的水介質中加入DDPC和pluronicF-68，使其濃度分別達到1mg/mL和5mg/mL。加熱含泡囊的水介質至約45℃，手動緩慢攪動並在保持此溫度下利用旋轉蒸發器真空乾燥。將所得乾燥物質加到適宜的容器內並凍幹。在約48小時內向容器的液面上空間內逐漸注入全氟丁烷氣體，直至達到環境壓力。所得氣體填充的焦磷酸鹽籠形物在使用之前以凍乾粉末形式貯藏。實施例41在100mL蒸餾水中溶解3.68gCaCl2H2O，製備0.25MCa+2溶液。用0.1M氫氧化鈉調節溶液的pH至11。通過在10mL蒸餾水中溶解0.75g此鹽製備0.74M磷酸二氫鉀(KH2PO4)溶液。向該溶液內加入1.75g雙官能化PEG、α-苯基羧基酯、ω-磷醯基-PEG5000。pH再用0.1MNaOH調節至pH11。在劇烈攪拌下向CaCL2溶液內滴加磷酸二氫鉀/PEG磷酸鹽溶液。所得沉澱經單顆粒光學篩分和光學顯微鏡分級。顆粒直徑在約1至2μm範圍內。過濾顆粒並再懸浮到生理鹽水中，從羧基上除去苯基。將羧基用1，1-羰基二咪唑活化並與對ELAM具有特異性的單克隆抗體反應。單克隆抗體可根據Kohler和Milstein在「自然」(Nature)1975，256495中羧酸的方法用常規技術製備，其中此文獻內容在此全部併入本文用作參考。將顆粒懸浮在pluronicF-68(20mg/mL)中，將此懸浮液導入到合適容器中並凍幹。容器液面上的空間逐漸用全氟丙烷氣體平衡至環境壓力，得到羥磷灰石氣體籠形物。實施例42對大鼠進行體內試驗，該試驗說明實施例3的陽離子類脂化合物胞內傳遞遺傳物質的高效力。此試驗還說明超聲波能量用於靶向到體內具有含遺傳物質的泡囊組合物的特定組織的效力。通過混合質粒pSVβ-gal(Promega，Madison，WI)(含有β-半乳糖苷酶基因y和實施例3中製得的陽離子類脂化合物化合它們。尾靜脈注射所形成的混合物到三組SpragueDawley鼠(鼠組(A)，(B)和(C))的各組中。(A)組大鼠不進行超聲波處理。在向(B)組和(C)組大鼠的各組注射過程中，對其後腿內部施加超聲波能量。48小時後，對鼠施行安樂死並去除組織。將組織在2％福馬林中固定72小時，切成薄片並放入到X-gal溶液內。在37℃溫育16小時後，檢查組織。(A)組大鼠的組織顯示為藍包，這為普通轉染的表示。(B)組及(C)組大鼠的組織僅在施加超聲波能量的部位顯示為藍色。這表明基因表達的定位可利用本發明的化合物及方法實現。實施例43將新鮮人血施加到紗布條(TillotsonHealthCareBedford，NH)上並使之結塊。在Tygon管中鑄成1％瓊脂糖(BoehringerMannheimBiochemical，Indianapolis，Indiana)支座板。將載有血塊的紗布條插入到Tygon管內。在管內還插入線內混合元件(Cole-Parmer，Chicago，IL)以產生湍流。採用MasterFlex蠕動泵(Cole-Parmer)泵入磷酸緩衝鹽水(BoehringerMannheimBiochemcial)浸沒整個紗布條。採用帶有7.5MHz的外周血管換能器(Phoenix，AZ)的AcousticImaging5200超聲波儀進行超聲波成像。換能器固定在環架上並從支座板的下面進行成像。待未結合的血塊從紗布條上洗去之後，向大約2mL/分鐘流速的PBS流中注射各1mL的靶向GPIIbIIIa的靶向泡囊組合物和實施例的泡囊組合物(非靶向)。使泡囊在此速度下結合2分鐘，然後將流速往上調到6mL/分鐘，回收未結合泡囊。在以6mL/分鐘速率洗滌後，靶向泡囊結合在紗布條上，而非靶向泡囊則被洗去。超聲波影像顯示出結合有靶向GPIIbIIIa泡囊的血塊具有增強的回波發生。採用Macintosh660AV計算機(AppleComputing，Cupertino，CA)進行脫機電視顯像測密分析。選擇血塊的全部面積並測定電視顯像測密術單位。利用Image1.55(NationalInstitutesofHealth，Washington，DC)捕獲影像並分析。這種分析包括捕積併疊加造影前基線影像和造影后影像，並從造影后影像中扣除造影前影像。這種捕積、疊加和扣除還可以在洗去未結合泡囊之前和之後進行。這種電視顯像測密分析不僅可使用連續式超聲波還可以使用間歇式超聲波來進行。該分析所得數據見下表中所示，其中高數值表示改善的造影效果。表4靶向泡囊的電視顯像測密分析-超聲波背散射定量觀察上表，顯示出，與非靶向泡囊相比，靶向泡囊的背散射增強。進行T-試驗，該試驗說明在p＜0.01的連續影像和間歇影像成像中，與非靶向泡囊相比，靶向泡囊的電視光密度信號明顯增強。實施例44本實施例涉及具有下式結構的DPGS-NH-PEG-NH-馬米醯亞胺的製備。A.製備二棕櫚醯甘由琥珀酸酯-聚乙二醇-胺(DPGS-NH-PEG-NH2)。向100mL圓底燒瓶內加入DPGS(98mg，0.147mmol，leq.)的CH2Cl2溶液。向另一圓底燒瓶(100mL)內加入H2N-PEG-NH2(PEG-二胺)(50mg，0.147mmol，leq.)的CH2Cl2溶液。向PEG-二胺溶液內立刻加入DCC(31mg，0.15mmol，1.02eq)的CHCl3(5mL)溶液。在約0-約5℃下，將形成的DCC和PEG-二胺混合物滴加到DPGS溶液內。將所形成的反應混合物加熱至室溫。攪拌24小時後，向反應混合物中加入去離子蒸餾水(50mL)，並濾除所形成的沉澱(二環己基脲)。利用250mL分離漏鬥分離下層有機層並將其乾燥(1硫酸鈉)。過濾乾燥過的有機溶液並向濾液中加入80mL乙腈。濾除殘餘的白色沉澱並真空濃縮濾液，得到0.44gDPGS-NH-PEG-NH2，為固體產物。IR1700cm-1。TLCRf0.65。B.製備DPGS-PEG-NH-馬來醯亞胺在100mL圓底燒瓶內加入步驟A所得的DPGS-NH-PEG-NH2(0.44g，0.13mmol，leq.)的CH2Cl2(10mL)溶液。向此溶液內加入三乙胺(13mg，0.13mmol，leq.)的CH2Cl2溶液。爾後向此混合物中滴加入34.6mgN-馬來醯基-β-氨基丙酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(34.6mg)的CH2Cl2(10mL)溶液。室溫攪拌過夜後，向反應混合物中加入去離子蒸餾水(30mL)並再攪拌3小時。利用分液漏鬥分離下層有機層並乾燥(硫酸鈉)。過濾有機層並真空濃縮濾液，得到360mg標題化合物，為蠟狀白色固體。IR1740cm-1，1670cm-1，1100cm-1。TLCRf0.75。實施例45本實施例涉及具有下述結構的1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-羰基亞乙基羰基-亞胺基-聚乙二醇乙基氨基羰基亞乙基馬來醯亞胺的製備。A.製備1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-羰基亞乙基羰基亞胺基聚乙二醇乙胺(DPPE-NH-PEG-NH2)。向DPPE琥珀酸酯(79mg)和ω，ω′-二氨基聚乙二醇(340mg)的二氯甲烷(20mL)冷(0-5℃)溶液內加入DCC(22mg)，的二氯甲烷(10mL)溶液。在0-5℃下攪拌反應混合物4小時，然後於室溫下攪拌過夜。加水(10mL)，並再攪拌反應混合物一小時。分出下層有機層並利用旋轉蒸發器真空濃度。將殘留物溶於乙腈中並濾除沉澱。真空濃縮有機溶液，得到390mgDPPE-NH-PEG-NH2，為白色固體。B.製備DPPE-NH-PEG-NH-馬來醯亞胺向步驟A所得的DPPE-NH-PEG-NH2(210mg)和三乙胺(20mg)的二氯甲烷(20mL)冷(0-5℃)溶液內加入馬來醯亞胺基丙酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(26mg)的二氯甲烷(10mL)溶液。在0-5℃下攪拌所形成的混合物1小時，爾後室溫攪拌過夜。加入10mL水並在攪拌下用稀鹽酸酸化所得混合物至pH3。分離有機層，水洗(10mL)並乾燥(硫酸鈉)。利用旋轉蒸發器真空濃縮至幹，得到210mg標題化合物(DPPE-NH-PEG-NH-馬來醯亞胺)，為白色固體。實施例46將Fab′或F(ab′)2片斷經類脂-PEG-馬來醯亞胺類脂與氣體填充的泡囊結合。Fab′或F(ab′)2片斷通過利用購自Pierce(RockfordIL)的Fab′和/或F(ab′)2試劑盒，由抗骨骼肌球蛋白(SigmaChemical，St.Louis，MO)製得。Fab′片斷通過用木瓜蛋白酶消化抗體製備。這樣從抗體的Fc區切割下兩個Fab′片斷。然後將Fc片斷結合到A蛋白柱上並收集Fab′片斷。爾後將Fab′片斷凍幹(LabconcoLyph-Lock12，KansasCity.MO)並作好用於結合到類脂-PEG-馬來醯亞胺類脂上的準備。以與Fab′的製備類似的方式製備F(ab′)2片斷。不過用胃蛋白酶代替木瓜蛋白酶。胃蛋白酶在Fc區切割下更多個Fab′片斷，並且每兩個Fab′片斷仍保持連接。然後凍幹F(ab′)2片斷，將各種片斷再懸浮在偶聯緩衝液(150mMNaCl，10mMMOPS，0.1mMEDTA，50μmDTPA，pH6.5)中(所有上述物質均購自SigmaChemical，St.Louis，MO)，其中片斷的濃度為1mg/mL。然後加入類脂-PEG-馬來醯亞胺(0.2-10mM)，將混合物在4℃培養16小時。用聚丙烯醯胺電泳凝膠分析所得產物，確定Fab′和/或F(ab′)2片斷是否已結合到類脂上。這可以通過觀測分子量的變化來確定。然後採用1wt％Fab′和/或F(ab′)2片斷結合類脂製備靶向泡囊。實施例47本實施例涉及具有下式結構的DPGS-NH-PEG-NH-PDP的製備。採用實施例44步驟A的方法製備二棕櫚醯基甘油基琥珀酸酯-聚乙二醇-胺(DPGS-NH-PEG-NH2)。將DPGS-NH-PEG-NH2(440mg，0.13mmol)和三乙胺(13mg，0.13mmol)溶於10mL二氯甲烷內。向此溶液內加入3-(2-吡啶基聯硫基)丙酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(PDP)(31mg)的二氯甲烷(10mL)溶液。室溫攪拌過夜後，向反應混合物中加入去離子水(30mL)並繼續攪拌3小時。利用分液漏鬥分離出下層有機層並乾燥(硫酸鈉)。過濾有機層並真空濃縮濾液，得到360mg標題化合物(DPGS-NH-PEG-NH-PDP)，為蠟狀白色固體。實施例48本實施例涉及具有下式結構的DPPE-NH-PEG-NH-PDP的合成。採用實施例45步驟A所述的方法製備1，2-二棕櫚醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺-N-羰基亞乙基羰基亞氨基聚乙二醇乙胺(DPPE-NH-PEG-NH2)。將210mg此物質與20mg-乙胺在20mL二氯甲烷中化合。將此溶液加到3-(2-吡啶基聯硫基)丙酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(PDP)(31mg)的二氯甲烷(10mL)溶液中。在0-5℃下攪拌此混合物1小時，然後於室溫攪拌過夜。加入10mL蒸餾水並在攪拌下用稀鹽酸酸化所得混合物酯pH3。分離有機層，水(10mL)洗並乾燥(硫酸鈉)。過濾有機層並利用旋轉蒸發器真空濃縮至幹，得到210mg標題化合物(DPPE-NH-PEG-NH-PDP)，為白色固體。實施例49本實施例涉及具有下式結構的本發明類脂-親水聚合物-蛋白質共軛物的製備。其中「A」代表A蛋白通過DPPE-NH-PEG-NH-PDP中-S-S-二疏鍵的硫原子與蛋白質的巰基反應，鍵連實施例48的化合物與A蛋白。所得化合物用於形成載有蛋白質的泡囊，如載有蛋白質的脂質體。實施例50本實施例涉及具有下式結構的本發明類脂-親水聚合物-蛋白質共軛物的製備。偶連實施例47的化合物(DPGS-NH-PEG-NH-PDP)和馬來醯亞胺標記的A蛋白，得到上述化合物。實施例51本實施例涉及具有下式結構的DPGS-NH-PEG-葡萄糖的製備。A.NH2-PEG-葡萄糖的製備按照C.A.A.vanBroeckel和J.H.vanBoom在「四面體」，41，4545(1985)中所述的方法，製備2，3，4，6-四-O-苄基-α-D-吡喃葡萄糖基溴(0.6g)。使用活化分子篩乾燥上述化合物在DMF中與ω-三氟乙醯基氨基聚乙二醇(3.5g)(該化合物由ω-氨基聚乙二醇和三氟乙酸酐製備)以及二異丙基乙胺(DIEA)(1.2mL)的混合物。氮氣氣氛下攪拌所形成的溶液4天。溶液用氯仿(150mL)稀釋並用10％碳酸氫鈉(50mL)及水洗滌。真空濃縮有機層，並在室溫下用碳酸鈉甲醇-水溶液處理所得殘留物2天。真空除去溶劑，殘留物用氯仿(100mL)提取兩次。合併氯仿提取液並真空濃縮，將殘留物溶於甲醇中，在10％鈀-碳(0.45g)存在下於4大氣壓壓力下室溫氫化。濾除催化劑並真空濃縮濾液，得到NH2-PEG-葡萄糖(3g)，為白色固體。產物用矽膠柱色譜純化，並用氯仿-甲醇-水為無梯度洗脫劑洗脫。B.製備DPGS-NH-PEG-葡萄糖混合步驟A所得的NH2-PEG-葡萄糖(1g)、三乙胺(0.5g)和乙腈及水(50∶50)的溶液，並加到實施例13A得到的DPGS-琥珀醯亞胺(0.15g)的乙腈(10mL)冷(0-5℃)溶液中。室溫攪拌所形成的混合物兩天並蒸除乙腈。所得殘留物用水稀釋至50mL，通過500MWCO膜滲析，並東幹，得到標題化合物(DPGS-NH-PEG-葡萄糖)，為白色固體。實施例52本實施例涉及具有下式結構的DPGS-NH-PEG-N-甘露糖的製備。A製備α-溴-乙醯氨基-D-甘露糖混合D-甘露糖胺鹽酸鹽(2.1g)、三乙胺(3g)和DMF(50mL)，並在攪拌下將它們加到α-溴乙醯溴(2g)的二氯甲烷冷(0-5℃溶液中。室溫攪拌所得混合物8小時然後傾入到冰水(50mL)中。攪拌此含水混合物1小時，隨後真空濃縮至幹。用水和乙醇混合物重結晶所得殘留物，得到α-溴乙醯氨基-D-甘露糖(2.1g)，為白色固體。B.製備DPGS-NH-PEG-NH-甘露糖將步驟A所得的α-溴乙醯氨基-D-甘露糖(0.3g)、實施例44A製得的DPGS-NH-PEG-NH2(4g)、碳酸鈉(0.2g)和K1(20mg)在1∶1的水和乙醇混合液中化合。加熱所形成的混合物至40℃反應8小時。用旋轉蒸發器蒸除乙醇，含水殘留物則通過500MWCO膜滲析並凍幹，得到4g標題化合物(DPGS-NH-PEG-NH-甘露糖)，為白色固體。下述各實施例涉及靶向泡囊的製備。實施例53將白蛋白泡囊(或白蛋白塗層氣泡)懸浮在pH大於8的緩衝液中。在0-5℃下，向此懸浮液內加入3-(2-吡啶基)聯硫基丙酸N-羥基-琥珀醯亞胺酯(SPDP)的乙腈溶液。所得混合物在室溫下培養2天並利用500MWCO膜滲析，得到載有吡啶基聯硫基丙醯基的白蛋白泡囊。然後將馬來醯亞胺基苯基丁酸酯共軛抗體(MPB-AB)用表面修飾的白蛋白泡囊培養，得到與白蛋白泡囊連接的抗體。實施例54將聚穀氨酸泡囊(或聚穀氨酸塗層氣泡)懸浮到水中。在0-5℃下，向此懸浮液內加入乙基-N，N-二甲基氨基丙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)的水溶液。緩和攪拌所得混合物4小時，然後加入肽溶液(溶在pH8-9.5的緩衝液中)。室溫溫育此混合物2天，並通過500MWCO膜滲析，得到肽共軛的聚穀氨酸泡囊。實施例55重複實施例53，只是用由氰基甲基丙烯酸甲酯(2-氰基-2-丙烯酸甲酯)和ω-氨基-四甘醇甲基丙烯酸酯的共聚物配製的泡囊替代白蛋白泡囊。實施列56本實施例涉及類脂-聚合物-肽共軛物以及由其製得的靶向泡囊的製備。在圓底燒瓶內加入1當量帶有叔丁氧基羰基(t-Boc)保護基的α-氨基ω-羧基PEG-4000。加入溶在N-甲基吡咯烷酮中的羰基二咪唑(CDI)(leq.)和羥基苯並三唑(leq.)活化上述化合物。向此溶液內加入氨基末端脫保護的肽Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val。攪拌所形成的溶液，通過亞甲藍或茚三酮分析定期檢測游離氨基。當不存在進步證據說明存在游離氨基末端後，加入三氟乙酸的二氯甲烷溶液脫保護所有混合物。然後利用標準方法分離來自PEG的游離胺。在另一燒瓶內加入DPPE(leq)的DMF溶液和羰基二咪唑(leq)。在分子篩(4埃)存在下繼續攪拌一小時。然後向此混合物中加入PEG-肽配位體混合物，接著繼續攪拌。然後真空乾燥混合物並加到DEAE瓊脂糖凝膠尺寸排阻層析柱內，由此分離DPPE-PEG-肽共軛物。隨後採用標準方法由DPPE-PEG-肽製備氣體填充泡囊。實施例57本實施例涉及具有下式結構的DPGS-PEG-環肽的製備。利用標準肽合成法製備環狀[D-2-氨基丁醯基-N-2-甲基-L-精氨醯-甘氨醯-L-天冬氨醯-3-(氨基甲基苯甲酸)]。在0-5℃下，向66mg該環肽在20mL水中的溶液內加入乙基-N，N-二甲基氨基丙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)的水(10mL)溶液。在0-5℃下攪拌所得混合物4小時，接著室溫攪拌8小時。0-5℃下，向此溶液內加入實施例44A的DPGS-NH-PEG-NH2(400mg)的乙腈(10mL)溶液。室溫攪拌過夜後，真空濃縮反應混合物，並將含水殘留物通過1000MWCO膜滲析。凍幹得到上述化合物(410mg)，為白色固體。實施例58本實施例涉及由環肽靶向的泡囊的製備。0-5℃下，向環狀[D-2-氨基丁醯基-N-2-甲基-L-精氨醯-甘氨醯-L-天冬氨醯-3-(氨基甲基苯甲酸)](66mg)的水(20mL)溶液中加入乙基-N，N-二甲基氨基丙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)的水(10mL)溶液。在0-5℃下攪拌所得混合物4小時，接著室溫攪拌8小時。然後在0-5℃下，將反應混合物加到白蛋白泡囊的懸浮液內。室溫溫育所得混合物兩天，過濾並採用具有1000MWCO的膜滲析，得到由卟啉靶向配位體靶向的白蛋白泡囊。實施例59重複實施例58，只是用由氰基甲基丙烯酸甲酯(2-氰基-2-丙烯酸甲酯)和ω-氨基-四甘醇甲基丙烯酸酯的共聚物配製的泡囊替代白蛋白泡囊。本文件中所引用或描述的各件專利、專利申請和其它文獻所公開的內容在此全部併入本文用作參考。除本文所描述的之外，對本領域技術人員而言，根據前面所述的方法對本發明進行的各種改進都是顯而易見的。這些改進也將落在本申請所附的權利要求書的範圍之中。權利要求1.用於診斷成像的造影劑，該造影劑含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。2.根據權利要求1的造影劑，其中所述的造影劑含有類脂。3.根據權利要求2的造影劑，其中所述的類脂含有磷脂。4.根據權利要求3的造影劑，其中所述的磷脂選自磷脂醯氯、磷脂醯乙醇胺和磷脂酸。5.根據權利要求4的造影劑，其中所述的磷脂醯氯選自二油醯磷脂醯氯、二肉豆蔻醯磷脂醯氯、二棕櫚醯磷脂醯氯和二硬脂醯磷脂醯氯。6.根據權利要求5的造影劑，其中所述的磷脂醯氯含有二棕櫚醯磷脂醯氯。7.根據權利要求6的造影劑，其中所述的磷脂醯乙醇胺選自二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺、二油醯磷脂醯乙醇胺、N-琥珀醯二油醯磷脂醯乙醇胺和1-十六烷基-2-棕櫚醯磷脂醯乙醇胺。8.根據權利要求7的造影劑，其中所述的磷脂醯乙醇胺含有二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺。9.根據權利要求4的造影劑，其中所述的磷脂酸含有二棕櫚醯磷脂酸。10.根據權利要求2的造影劑，其中所述的類脂進一步含有聚合物。11.根據權利要求10的造影劑，其中所述的聚合物含有親水聚合物。12.根據權利要求11的造影劑，其中所述的聚合物含有聚乙二醇。13.根據權利要求1的造影利，其中所述的造影劑含有蛋白質。14.根據權利要求13的造影劑，其中所述的蛋白質含有白蛋白。15.根據權利要求1的造影劑，其中所述的造影劑含有聚合物。16.根據權利要求15的造影劑，其中所述的聚合物包含合成聚合物或由單體製得的共聚物，所述單體選自丙烯酸、異丁烯酸、哌嗪、丁烯酸、丙烯醯胺、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸2-羥基乙酯、乳酸、乙醇酸、ε-己內酯、丙烯醛、氰基丙烯酸酯、雙酚A、表氯醇、羥基烷基丙烯酸酯、矽氧烷、二甲基矽氧烷、環氧乙烷、環氧丙烷、乙二醇、羥基烷基異丁烯酸酯、N-取代的丙烯醯胺、N-取代的異丁烯醯胺、N-乙烯基-2-吡咯烷酮、2，4-戊二-1-醇、乙烯基乙酸酯、丙烯氰、苯乙烯、對-氨基苯乙烯、對-氨基-苄基-苯乙烯、苯乙烯磺酸鈉、2-硫氧基乙基異丁烯酸鈉、乙烯基吡啶、異丁烯酸氨基乙酯和2-異丁烯醯氧基三甲基-氯化銨。17.根據權利要求15的造影劑，其中所述的聚合物包含選自下列的合成聚合物或共聚物聚丙烯酸、聚乙烯亞胺、聚異丁烯酸、聚甲基丙烯酸酯、聚矽氧烷、聚二甲基矽氧烷、聚乳酸、聚(ε-己內酯)、環氧樹脂、聚環氧乙烷、聚環氧丙烷、聚乙二醇、聚醯胺、聚亞乙烯-聚丙烯氰、聚亞乙烯-聚丙烯氰-聚異丁烯酸甲酯和聚苯乙烯-聚丙烯氰。18.根據權利要求17的造影劑，其中所述的聚合物包含聚亞乙烯-聚丙烯腈共聚物。19.根據權利要求1的造影劑，其中所述的氣體包含氟化氣體。20.根據權利要求19的造影劑，其中所述的氟化氣體選自全氟化碳、六氟化硫和七氟丙烷。21.根據權利要求20的造影劑，其中所述的氟化氣體包含全氟化碳。22.根據權利要求21的造影劑，其中所述的全氟化碳選自全氟甲烷、全氟乙烷、全氟丙烷和全氟環丁烷。23.根據權利要求1的造影劑，其中所述的氣體至少有部分是由氣體前體衍生的。24.根據權利要求23的造影劑，其中所述的氣體前體的沸點大於大約37℃。25.根據權利要求23的造影劑，其中所述的氣體前體包含氟化物。26.根據權利要求25的造影劑，其中所述的氟化物包含全氟化碳。27.根據權利要求25的造影劑，其中所述的全氟化碳選自全氟戊烷和全氟己烷。28.根據權利要求1的造影劑，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽、糖、類固醇、類固醇類似物、生物活性劑和遺傳物質。29.根據權利要求27的造影劑，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽和糖。30.根據權利要求29的造影劑，其中所述的靶向配位體選自蛋白質和肽。31.根據權利要求1的造影劑，其中所述的造影劑包含泡囊。32.根據權利要求31的造影劑，其中所述的泡囊選自膠束和脂質體。33.一種靶向組合物，該組合物包含與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。34.根據權利要求33的靶向組合物，該組合物靶向動脈硬化區域。35.根據權利要求34的靶向組合物，其中所述的動脈硬化包括動脈硬化斑。36.根據權利要求33的靶向組合物，該組合物靶向梗塞的心肌。37.根據權利要求33的靶向組合物，該組合物靶向癌細胞。38.根據權利要求33的靶向組合物，該組合物包含靶向類脂組合物。39.根據權利要求38的靶向類脂組合物，其中所述的類脂包含磷脂。40.根據權利要求39的靶向類脂組合物，其中所述的磷脂選自磷脂醯氯、磷脂醯乙醇胺和磷脂酸。41.根據權利要求40的靶向類脂組合物，其中所述的磷脂醯氯選自二油醯磷脂醯氯、二肉豆蔻醯磷脂醯氯、二棕櫚醯磷脂醯氯和二硬脂醯磷脂醯氯。42.根據權利要求41的靶向類脂組合物，其中所述的磷脂醯氯包含二棕櫚醯磷脂醯氯。43.根據權利要求40的靶向類脂組合物，其中所述的磷脂醯乙醇胺選自二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺、二油醯磷脂醯乙醇胺、N-琥珀醯二油醯磷脂醯乙醇胺和1-十六烷基-2-棕櫚醯磷脂醯乙醇胺。44.根據權利要求43的靶向類脂組合物，其中所述的磷脂醯乙醇胺含有二棕櫚醯磷脂醯乙醇胺。45.根據權利要求40的靶向類脂組合物，其中所述的磷脂酸含有二棕櫚醯磷脂酸。46.根據權利要求38的靶向類脂組合物，其中所述的類脂進一步含有聚合物。47.根據權利要求46的靶向類脂組合物，其中所述的聚合物含有親水聚合物。48.根據權利要求47的靶向類脂組合物，其中所述的聚合物含有聚乙二醇。49.根據權利要求33的靶向組合物，該組合物含有靶向蛋白質組合物。50.根據權利要求49的靶向蛋白質組合物，其中所述的蛋白質含有白蛋白。51.根據權利要求33的靶向組合物，該組合物含有靶向聚合物。52.根據權利要求51的靶向聚合物組合物，其中所述的聚合物包含合成聚合物或由單體製得的共聚物，所述單體選自丙烯酸、異丁烯酸、哌嗪、丁烯酸、丙烯醯胺、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸2-羥基乙酯、乳酸、乙醇酸、ε-己內酯、丙烯醛、氰基丙烯酸酯、雙酚A、表氯醇、羥基烷基丙烯酸酯、矽氧烷、二甲基矽氧烷、環氧乙烷、環氧丙烷、乙二醇、羥基烷基異丁烯酸酯、N-取代的丙烯醯胺、N-取代的異丁烯醯胺、N-乙烯基-2-吡咯烷酮、2，4-戊二-1-醇、乙烯基乙酸酯、丙烯氰、苯乙烯、對-氨基苯乙烯、對-氨基-苄基-苯乙烯、苯乙烯磺酸鈉、2-硫氧基乙基異丁烯酸鈉、乙烯基吡啶、異丁烯酸氨基乙酯和2-異丁烯醯氧基三甲基-氯化銨。53.根據權利要求51的靶向聚合物組合物，其中所述的聚合物包含選自下列的合成聚合物或共聚物聚丙烯酸、聚乙烯亞胺、聚異丁烯酸、聚甲基丙烯酸酯、聚矽氧烷、聚二甲基矽氧烷、聚乳酸、聚(ε-己內酯)、環氧樹脂、聚環氧乙烷、聚環氧丙烷、聚乙二醇、聚醯胺、聚亞乙烯-聚丙烯氰、聚亞乙烯-聚丙烯氰-聚異丁烯酸甲酯和聚苯乙烯-聚丙烯氰。54.根據權利要求53的靶向聚合物組合物，其中所述的聚合物包含聚亞乙烯-聚丙烯腈共聚物。55.根據權利要求33的靶向組合物，其中所述的氣體包含氟化氣體。56.根據權利要求55的靶向組合物，其中所述的氟化氣體選自全氟化碳、六氟化硫和七氟丙烷。57.根據權利要求56的靶向組合物，其中所述的氟化氣體包含全氟化碳。58.根據權利要求57的靶向組合物，其中所述的全氟化碳選自全氟甲烷、全氟乙烷、全氟丙烷和全氟環丁烷。59.根據權利要求33的靶向組合物，其中所述靶向配位體選自蛋白質、肽、糖、類固醇、類固醇類似物、生物活性劑和遺傳物質。60.根據權利要求59的靶向組合物，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽和糖。61.根據權利要求60的靶向組合物，其中所述的靶向配位體選自蛋白質和肽。62.根據權利要求33的靶向組合物，其中所述的靶向配位體與類脂、蛋白質或聚合物共價或非共價相連。63.根據權利要求62的靶向組合物，其中所述的靶向配位體與類脂、蛋白質或聚合物共價相連。64.根據權利要求63的靶向組合物，其中所述的共價連接包括選自醯胺；硫代醯胺；醚；酯；硫代酯；-O-；-S-；-Sn-，其中n大於1；氨基甲酸酯；-NH-；-NR，其中R為含1至約4個碳原子的烷基；氨基甲酸乙酯和取代亞胺酸酯鍵的共價鍵。65.根據權利要求63的靶向組合物，其中所述的共價連接進一步包含交聯。66.根據權利要求63的靶向組合物，其中所述的靶向配位體通過連接基團與所述類脂、蛋白質或聚合物共價連接。67.根據權利要求66的靶向組合物，其中所述的連接基團包含親水聚合物。68.根據權利要求67的靶向組合物，其中所述的親水聚合物選自聚烯化氧、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯醯胺、聚甲基丙烯醯胺、多磷雜環戊二烯、聚(羥基烷基羧酸)和聚噁唑烷。69.根據權利要求68的靶向組合物，其中所述的親水聚合物包含聚烯化氧。70.根據權利要求69的靶向組合物，其中所述的聚烯化氧選自聚乙二醇和聚丙二醇。71.根據權利要求70的靶向組合物，其中所述的聚烯化氧包含聚乙二醇。72.根據權利要求33的靶向組合物，該組合物含有泡囊。73.根據權利要求72的靶向組合物，其中所述的泡囊包含類脂泡囊。74.根據權利要求73的靶向組合物，其中所述的類脂泡囊選自膠束和脂質體。75.一種泡囊組合物，該組合物在含水載體中包含含有與靶向配位體結合的類脂、聚合物或蛋白質和氣體的泡囊，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。76.根據權利要求75的泡囊組合物，其中所述的泡囊包含類脂泡囊。77.根據權利要求76的泡囊組合物，其中所述的類脂泡囊選自膠束和脂質體。78.根據權利要求76的泡囊組合物，其中所述的類脂進一步包含聚合物。79.根據權利要求78的泡囊組合物，其中所述的聚合物含有親水聚合物。80.根據權利要求79的泡囊組合物，其中所述的聚合物含有聚乙二醇。81.根據權利要求75的泡囊組合物，其中所述的泡囊含有蛋白質泡囊。82.根據權利要求75的泡囊組合物，其中所述的泡囊含有聚合物泡囊。83.根據權利要求75的泡囊組合物，所述泡囊組合物進一步含有氣體前體。84.根據權利要求83的泡囊組合物，其中所述的氣體前體的沸點大於大約37℃。85.根據權利要求83的泡囊組合物，其中所述的氣體前體包含氟化物。86.根據權利要求85的泡囊組合物，其中所述的氟化物包含全氟化碳。87.根據權利要求86的泡囊組合物，其中所述的全氟化碳選自全氟戊烷和全氟己烷。88.根據權利要求75的泡囊組合物，其中所述的泡囊組合物進一步含有生物活性劑。89.一種靶向泡囊組合物，該組合物包含與靶向配位體結合的氟化氣體，其中所述的靶向配位體靶向組織或受體。90.根據權利要求89的靶向泡囊組合物，其中所述的組織選自心肌組織、膜組織、層組織、間質組織和腫瘤。91.根據權利要求90的靶向泡囊組合物，其中所述的膜組織選自內皮和上皮。92.根據權利要求89的靶向泡囊組合物，其中所述的受體包含糖蛋白GPIIbIIIa受體。93.根據權利要求89的靶向泡囊組合物，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽、糖、類固醇、類固醇類似物、生物活性劑和遺傳物質。94.根據權利要求93的靶向泡囊組合物，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽和糖。95.根據權利要求89的靶向泡囊組合物，其中所述的氟化氣體選自全氟化碳、六氟化硫和七氟丙烷。96.根據權利要求95的靶向泡囊組合物，其中所述的氟化氣體包含全氟化碳。97.根據權利要求96的靶向泡囊組合物，其中所述的全氟化碳選自全氟甲烷、全氟乙烷、全氟丙烷和全氟環丁烷。98.根據權利要求89的靶向泡囊組合物，其中所述的氣體至少有部分是由氣體前體衍生的。99.根據權利要求98的靶向泡囊組合物，其中所述的氣體前體的沸點大於約37℃。100.根據權利要求98的靶向泡囊組合物，其中所述的氣體前體包含氟化物。101.根據權利要求100的靶向泡囊組合物，其中所述的氟化物包含全氟化碳。102.根據權利要求101的靶向泡囊組合物，其中所述的全氟化碳選自全氟戊烷和全氟己烷。103.一種用於治療或診斷的製劑，該製劑包含與靶向配位體結合的生物活性劑、類脂、蛋白質或聚合物及氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。104.根據權利要求103的製劑，其中所述的製劑包含泡囊。105.根據權利要求104的製劑，其中所述的泡囊包含類脂泡囊。106.根據權利要求105的製劑，其中所述的泡囊選自膠束和脂質體。107.根據權利要求103的製劑，其中所述的氣體至少有部分是由氣體前體衍生的。108.一種製備靶向組合物的方法，該方法包括將類脂、蛋白質或聚合物、氣體和靶向配位體結合在一起，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。109.根據權利要求108的方法，其中所述的類脂、蛋白質或聚合物與所述的靶向配位體以共價或非共價方式結合在一起。110.根據權利要求109的方法，其中所述的類脂、蛋白質或聚合物與所述的靶向配位體以共價方式結合在一起。111.根據權利要求108的方法，其中所述的所述類脂、蛋白質或聚合物與所述的靶向配位體以共價鍵方式結合在一起，所述共價鍵選自醯胺；硫代醯胺；醚；酯；硫代酯；-O-；-S-；-Sn-，其中n大於1；氨基甲酸酯；-NH-；-NR，其中R為含1至約4個碳原子的烷基；氨基甲酸乙酯和取代亞胺酸酯鍵。112.根據權利要求108的方法，其中所述的類脂、蛋白質或聚合物與所述的靶向配位體以共價交聯方式結合在一起。113.根據權利要求108的方法，其中所述的配位體與所述的類脂、蛋白質或聚合物通過連接基團以共價方式結合。114.根據權利要求113的方法，其中所述的連接基團包含親水聚合物。115.根據權利要求114的方法，其中所述的親水聚合物包含聚乙二醇。116.一種製備用於治療或診斷的製劑的方法，該方法包括將生物活性劑與含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物及氣體的組合物結合，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。117.根據權利要求116的方法，其中所述的製劑包含泡囊。118.根據權利要求117的方法，其中所述的泡囊包含類脂泡囊。119.根據權利要求118的方法，其中所述的泡囊選自膠束和脂質體。120.一種靶向組合物，該靶向組合物通過將類脂、蛋白質或聚合物、氣體和靶向配位體結合在一起製得，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。121.根據權利要求120的靶向組合物，該靶向組合物包含泡囊。122.根據權利要求121的靶向組合物，其中所述的泡囊包含類脂泡囊。123.根據權利要求122的靶向組合物，其中所述的泡囊選自膠束和脂質體。124.根據權利要求120的靶向組合物，該組合物靶向動脈硬化區域。125.根據權利要求124的靶向組合物，其中所述的動脈硬化包括動脈硬化斑。126.根據權利要求120的靶向組合物，該組合物靶向梗塞的心肌。127.一種用於治療或診斷的靶向製劑，該靶向製劑通過將生物活性劑與含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物及氣體結合在一起製得，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。128.根據權利要求127的靶向製劑，該靶向製劑包含泡囊。129.根據權利要求128的靶向製劑，其中所述的泡囊包含類脂泡囊。130.根據權利要求129的靶向製劑，其中所述的泡囊選自膠束和脂質體。131.一種提供患者內部區域影像的方法，該方法包括(i)給患者服用靶向組合物，該組合物包含與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(ii)利用超聲掃描患者，得到可見的區域影像。132.一種提供患者內部區域影像的方法，該方法包括(i)給患者服用泡囊組合物，該組合物在含水載體中包含含有與靶向配位體結合的類脂聚合物或蛋白質和氣體的泡囊，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(ii)利用超聲掃描患者，得到可見的區域影像。133.一種診斷患者疾病組織存在的方法，該方法包括(i)給患者服用靶向組合物，該組合物在含水載體中包含與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(ii)利用超聲掃描患者、得到患者任何疾病組織的可見影像。134.一種診斷患者疾病組織存在的方法，該方法包括(i)給患者服用泡囊組合物，該組合物在含水載體中包含含有與靶向配位體結合的類脂、聚合物或蛋白質和氣體的泡囊，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體，以及(ii)利用超聲掃描患者，得到患者任何疾病組織的可見影像。135.一種體內治療性傳遞生物活性劑的方法，該方法包括給患者服用治療有效量的製劑，與生物活性劑結合的該製劑含有靶向組合物，該組合物含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物和氣體，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。136.具有下式的化合物，其中各X1獨立地為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR4-、-X4-C(＝X5)-、-C(＝X5)-X4-或-C(＝X5)-；各X2和X3獨立地為直接的鍵、-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4、-X4-C(＝X5)-R5-、-C(＝X5)-X4-R5-、-X4-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-C(＝X5)-R5-C(＝X5)-X4-或-R5-C(＝X5)-X4-R5-X4-C(＝X5)-；各X4獨立地為-O-、-NR4-或-S-；各X5獨立地為O或S；M為-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4-、-R5-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-或-X4-(YX5)P(＝X5)-X4-R5-；Y為氫或可藥用抗衡離子；Z為親水聚合物；Q為靶向配位體或其前體；各R1獨立地為含1至約50碳的烷基；各R2獨立地為含1至約30碳的亞烷基；各R3和R4獨立地為氫或含1至約10碳的烷基；以及各R5獨立地為直接的鍵或含1至約30碳的亞烷基。137.根據權利要求136的化合物，其中各X1獨立地為-X4-C(＝X5)-、-C(＝X5)-X4-或-C(＝X5)-；各X2和X3獨立地為直接的鍵、-R5-X4-C(＝X5)-、-R5-C(＝X5)-X4-、-X4-C(＝X5)-R5-、-C(＝X5)-X4-R5-、-X4-R5-C(＝X5)-X4-或-R5-X4-C(＝X5)-R5-C(＝X5)-X4-；各X4獨立地為-O-和-NR4-；X5為O；以及M為-R5-X4-C(＝X5)-或-R5-X4-(YX5)P-(＝X5)-X4-。138.根據權利要求137的化合物，其中各X1獨立地為-X4-C(＝X5)-或-C(＝X5)-X4-。139.根據權利要求138的化合物，其中各X1獨立地為-C(＝X5)-X4-。140.根據權利要求139的化合物，其中各R1獨立地為大於1至約40個碳原子的烷基；各R2獨立地為1至約20個碳原子的亞烷基；各R3和R4為氫或1至約5個碳原子的烷基；以及各R5獨立地為直接的鍵或1至約20個碳原子的亞烷基。141.根據權利要求140的化合物，其中各R1獨立地為約5至約30個碳原子的烷基；各R2獨立地為1至約10個碳原子的亞烷基；各R3和R4為氫；以及各R5獨立地為直接的鍵或1至約10個碳原子的亞烷基。142.根據權利要求141的化合物，其中各R1獨立地為約10至約20個碳原子的烷基；各R2獨立地為1至約5個碳原子的亞烷基以及各R5獨立地為直接的鍵或1至約5個碳原子的亞烷基。143.根據權利要求142的化合物，其中各R1獨立地為約15個碳原子的烷基；各R2為-CH2-；以及各R5為直接的鍵或-(CH2)x-，其中x為1或2。144.根據權利要求143的化合物，其中Z選自聚烯化氧、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯醯胺、聚甲基丙烯醯胺、聚噻吩嗪、聚(羥基烷基羧酸)和聚噁唑烷。145.根據權利要求144的化合物，其中Z包括聚烯化氧。146.根據權利要求145的化合物，其中所述聚烯化氧選自聚乙二醇和聚丙二醇。147.根據權利要求146的化合物，其中所述聚烯化氧選自聚乙二醇。148.根據權利要求146的化合物，其中X1為-C(＝O)-O-。149.根據權利要求148的化合物，其中X2為-CH2CH2-C(＝O)-NH-或-CH2CH2NH-C(＝O)-CH2CH2-C(＝O)-NH-。150.根據權利要求149的化合物，其中Q包含靶向配位體。151.根據權利要求150的化合物，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。152.根據權利要求150的化合物，其中所述的靶向配位體選的自蛋白質、肽、糖、類固醇、類固醇類似物、生物活性劑和遺傳物質。153.根據權利要求152的化合物，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽和糖。154.根據權利要求153的化合物，其中X2為-CH2CH2-C(＝O)-NH。155.根據權利要求153的化合物，其中M為-CH2O-C(＝O)-。156.根據權利要求155的化合物，其中X3為-C(＝O)-NH-。157.根據權利要求156的化合物，其中Q包含肽。158.根據權利要求157的化合物，其中Q包含-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val。159.根據權利要求156的化合物，其中Q包含蛋白質。160.根據權利要求159的化合物，其中Q包含蛋白質A。161.根據權利要求155的化合物，其中X3為-NH-C(＝O)-CH2或-NH-C(＝O)-CH2CH2-。162.根據權利要求161的化合物，其中Q包含蛋白質。163.根據權利要求162的化合物，其中Q包含蛋白質A。164.根據權利要求161的化合物，其中Q包含環肽。165.根據權利要求155的化合物，其中X3為直接的鍵或-NHCH2-C(＝O)-NH-。166.根據權利要求165的化合物，其中Q包含糖。167.根據權利要求166的化合物，其中Q包含單糖。168.根據權利要求167的化合物，其中X3為直接的鍵。169.根據權利要求168的化合物，其中Q包含葡萄糖。170.根據權利要求167的化合物，其中X3為-NHCH2-C(＝O)-NH-。171.根據權利要求170的化合物，其中Q包含甘露糖。172.根據權利要求153的化合物，其中M為-CH2O-(HO)P(＝O)-O-。173.根據權利要求172的化合物，其中X3為-C(＝O)-NH-。174.根據權利要求173的化合物，其中Q包含肽。175.根據權利要求174的化合物，其中Q包含-Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val。176.根據權利要求173的化合物，其中Q包含蛋白質。177.根據權利要求176的化合物，其中Q包含蛋白質A。178.根據權利要求153的化合物，其中X2為-CH2CH2NH-C(＝O)-CH2CH2-C(＝O)-NH-。179.根據權利要求178的化合物，其中M為-CH2O-(HO)P(＝O)-O-。180.根據權利要求179的化合物，其中X3為-NH-C(＝O)-CH2CH2-。181.根據權利要求180的化合物，其中Q包含蛋白質。182.根據權利要求181的化合物，其中Q包含蛋白質A。183.根據權利要求148的化合物，其中Q包含與靶向配位體結合的氣體前體。184.根據權利要求183的化合物，其中Q包含含有1或2個N、O或S原子的部分不飽和或芳族5至7元單環。185.根據權利要求184的化合物，其中Q為選自順丁烯二醯亞胺部分和吡啶基部分。186.根據權利要求185的化合物，其中X3為-NH-C(＝O)-。187.根據權利要求186的化合物，其中X2為-CH2CH2-C(＝O)-NH-。188.根據權利要求187的化合物，其中M為-CH2O-C(＝O)-。189.根據權利要求187的化合物，其中M包含順丁烯二醯亞胺部分。190.根據權利要求186的化合物，其中M為-CH2O-(HO)P(＝O)-O-。191.根據權利要求190的化合物，其中X2為-CH2CH2NH-C(＝O)-CH2CH2-C(＝O)-NH-。192.根據權利要求191的化合物，其中Q包含順丁烯二醯亞胺部分。。193.根據權利要求185的化合物，其中X3為-NH-C(＝O)-CH2CH2-。194.根據權利要求193的化合物，其中M為-CH2O-C(＝O)-。195.根據權利要求194的化合物，其中X2為-CH2CH2-C(＝O)-NH-。196.根據權利要求195的化合物，其中Q包含吡啶基部分。197.根據權利要求193的化合物，其中M為-CH2O-(HO)P(＝O)-O-。198.根據權利要求197的化合物，其中X2為-CH2CH2NH-C(＝O)-CH2CH2-C(＝O)-NH-。199.根據權利要求198的化合物，其中Q包含吡啶基部分。200.具有下式的化合物L-P-T其中L為類脂、蛋白質或聚合物；P為親水聚合物；和T為靶向配位體。201.根據權利要求200的化合物，其中L為類脂。202.根據權利要求201的化合物，其中所述的類脂選自卵磷脂、磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲氨酸、磷脂醯肌醇、心磷脂、膽固醇、膽固醇胺、溶血磷脂、赤型-鞘氨醇、鞘磷脂、神經醯胺、腦苷脂類、飽和的磷脂、不飽和的磷脂和磷蝦磷脂。203.根據權利要求202的化合物，其中所述的類脂選自卵磷脂、磷脂醯膽鹼、磷脂醯絲氨酸和磷脂醯肌醇。204.根據權利要求201的化合物，其中所述的類脂選自1，2-二醯基-sn-甘油基-3-膽鹼磷酸、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-二氧磷基乙醇胺、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔二氧磷基-rac-(1-甘油)〕、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔磷酸絲氨酸〕、溶血磷脂醯膽鹼、溶血磷脂醯甘油、1，2-二醯基-sn-甘油、1，2-二醯基-亞乙基-甘油基、N-(正己醯胺)-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、N-十二烷醯基胺-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、N-琥珀醯-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺、N-戊二醯基-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺和N-十二烷醯基-1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺。205.根據權利要求204的化合物，其中所述的類脂選自1，2-二醯基-sn-甘油基-3-膽鹼磷酸、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔二氧磷基-rac-(1-甘油)〕、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-磷酸酯、1，2-二醯基-sn-甘油基-3-〔磷酸絲氨酸〕、溶血磷脂醯膽鹼、溶血磷脂醯甘油和1，2-二醯基-sn-甘油。206.根據權利要求200的化合物，其中L為蛋白質。207.根據權利要求206的化合物，其中所述的蛋白質為白蛋白。208.根據權利要求207的化合物，其中L為聚合物。209.根據權利要求208的化合物，其中所述的聚合物包含合成聚合物或由單體製得的共聚物，所述單體選自丙烯酸、異丁烯酸、哌嗪、丁烯酸、丙烯醯胺、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸2-羥基乙酯、乳酸、乙醇酸、ε-己內酯、丙烯醛、氰基丙烯酸酯、雙酚A、表氯醇、羥基烷基丙烯酸酯、矽氧烷、二甲基矽氧烷、環氧乙烷、環氧丙烷、乙二醇、羥基烷基異丁烯酸酯、N-取代的丙烯醯胺、N-取代的異丁烯醯胺、N-乙烯基-2-吡咯烷酮、2，4-戊二-1-醇、乙烯基乙酸酯、丙烯氰、苯乙烯、對-氨基苯乙烯、對-氨基-苄基-苯乙烯、苯乙烯磺酸鈉、2-硫氧基乙基異丁烯酸鈉、乙烯基吡啶、異丁烯酸氨基乙酯和2-異丁烯醯氧基三甲基-氯化銨。210.根據權利要求208的化合物，其中所述的聚合物包含選自下列的合成聚合物或共聚物聚丙烯酸、聚乙烯亞胺、聚異丁烯酸、聚甲基丙烯酸酯、聚矽氧烷、聚二甲基矽氧烷、聚乳酸、聚(ε-己內酯)、環氧樹脂、聚環氧乙烷、聚環氧丙烷、聚乙二醇、聚醯胺、聚亞乙烯-聚丙烯氰、聚亞乙烯-聚丙烯氰-聚異丁烯酸甲酯和聚苯乙烯-聚丙烯氰。211.根據權利要求210的化合物，其中所述的聚合物包含聚亞乙烯-聚丙烯腈共聚物。212.根據權利要求200的化合物，其中所述的親水聚合物選自聚烯化氧、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯醯胺、聚甲基丙烯醯胺、多磷雜環戊二烯、聚(羥基烷基羧酸)和聚噁唑烷。213.根據權利要求212的化合物，其中所述的親水聚合物包含聚烯化氧。214.根據權利要求213的化合物，其中所述的聚烯化氧選自聚乙二醇和聚丙二醇。215.根據權利要求214的化合物，其中所述的聚烯化氧包含聚乙二醇。216.根據權利要求200的化合物，其中所述的靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的細胞或受體。217.根據權利要求200的化合物，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽、糖、類固醇、類固醇類似物、生物活性劑和遺傳物質。218.根據權利要求217的化合物，其中所述的靶向配位體選自蛋白質、肽和糖。219.根據權利要求217的化合物，其中所述的靶向配位體靶向動脈硬化區域。220.根據權利要求219的化合物，其中所述的動脈硬化包括動脈硬化斑。221.根據權利要求217的化合物，其中所述的靶向配位體靶向梗塞的心肌。222.根據權利要求217的化合物，其中所述的靶向配位體靶向癌細胞。全文摘要本發明涉及新的用於診斷和治療的靶向組合物。該組合物含有與靶向配位體結合的類脂、蛋白質或聚合物及氣體。所述靶向配位體靶向選自心肌細胞、內皮細胞、上皮細胞、腫瘤細胞和糖蛋白GPIIbIIIa受體的組織、細胞或受體。造影介質可與診斷成像如超聲波以及治療應用如治療性超聲波結合使用。文檔編號A61K49/22GK1187137SQ96194499公開日1998年7月8日申請日期1996年6月6日優先權日1995年6月7日發明者埃文·C·翁格爾,沈德康,吳觀麗申請人:ImaRx藥物公司