一種甲基苯丙胺的膠體金標記免疫檢測墊、試紙的製作方法

2023-10-18 06:47:04 2

專利名稱：一種甲基苯丙胺的膠體金標記免疫檢測墊、試紙的製作方法
技術領域：
本實用新型涉及一種體外快速免疫檢測工具，具體涉及一種甲基苯 丙胺的多梯度膠體金標記墊、試紙。
背景技術：
甲基苯丙胺(又名去氧麻黃鹼或安非他命)呈白色結晶體或粉末狀， 俗稱冰毒。甲基苯丙胺為中樞興奮劑，能抑制丁氨基氧化酶的活性，使 腎上腺素和腎上腺素能神經的化學傳導物質一去甲基腎上腺素的破壞減 慢，大腦皮質以及皮質下中樞產生興奮，具有欣快、警覺及抑制食慾的 作用。濫用者會處於強烈興奮狀態，表現為不吃不睡、活動過度、情感 衝動、偏執狂、妄想、幻覺和暴力傾向。為了捕捉和感受一種短暫即逝 的強烈快感或興奮，避免快感過後的失落、抑鬱、疲勞感，常常導致強 迫性用藥行為。因而極易成癮。甲基苯丙胺是目前國際、國內蔓延最廣， 流行最快的毒品之一。
甲基苯丙胺可以使用多種方法進行檢測，如氣相色譜(GC)氣相色譜 /質譜(GC/MS)，高效液相色譜(HPLC)等。但是費用較高，所需的時間 較長。因此目前在進行毒品篩査過程中更多使用的是免疫膠體金檢測方 法。
3免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標誌物應用於抗原抗體的一種 新型的免疫標記技術。膠體金在弱鹼環境下帶負電荷，膠體金標記，實 質上是蛋白質等帶正電荷基團的高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被 過程。由於這種結合是靜電結合，所以不影響蛋白質等被吸附物質的生 物特性。膠體金除了與蛋白質結合以外，還可以與許多其它生物大分子
結合，如SPA、 PHA、 ConA等。根據膠體金的一些物理性狀，如高電子密 度、顆粒大小、形狀及顏色反應，加上結合物的免疫和生物學特性，因 而使膠體金廣泛地應用於免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。 1971年Faulk和Taytor將膠體金引入免疫化學，此後免疫膠體金技術作 為一種新的免疫學方法，在生物醫學各領域得到了日益廣泛的應用。
目前毒品檢測中使用的免疫膠體金檢測方法原理為將氯金酸用還原 法製成一定直徑的金溶膠顆粒，標記抗體。以硝酸纖維素膜為載體，利 用了微孔膜的毛細管作用，滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移。 在移動的過程中，會發生相應的抗原抗體反應，並通過免疫金的顏色而 顯示出來。樣本中的被檢測成分在流動的過程中與膠體金標記的特異性 單克隆抗體結合，抑制了抗體與硝酸纖維素(NC)膜檢測線上被檢測成分 -BSA偶聯物的結合，使檢測線不顯顏色，結果為陽性；反之，檢測線顯 色，結果為陰性。
在膠體金免疫檢測法中，可使用的膠體金通常是紅色型或紫紅色型。
下面以目前普遍使用的甲基苯丙胺膠體金標記免疫檢測方法為例進 行說明。(1) 免疫原的製備採用活化脂法，將牛血清白蛋白(BSA)與甲 基苯丙胺結合，製成甲基苯丙胺的免疫原。
(2) 抗甲基苯丙胺的特異抗體的製備將製備的甲基苯丙胺合成免 疫原免疫小鼠，提取小鼠腹水，分離純化以得到抗甲基苯丙胺單克隆抗 體。
(3) 膠體金的製備採用還原法製備膠體金，常用的還原劑有檸檬 酸鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷、硼氫化鈉等。
(4) 膠體金標記抗甲基苯丙胺的特異抗體的製備將特異抗體加入 到膠體金溶液中混合，獲得膠體金標記的抗體。
(5) 抗膠體金標記抗體的二抗的製備採用常規的製備方法製備二抗。
(6) 硝酸纖維素膜和玻璃纖維素膜的處理 硝酸纖維膜的包被硝酸纖維膜作為檢測過程中的抗原抗體反應的
載體，要依次包被甲基苯丙胺-BSA結合物(測試線即T線)和抗膠體金
標記抗體的二抗(質控線即c線)。
玻璃纖維膜處理將檢測閾值為1000ng/mL的凍幹的膠體金標記的 抗甲基苯丙胺的特異抗體固定於玻璃纖維膜，製成膠體金墊。
(7) 免疫層析試紙條的製備在塑料底板7上分別將吸液用玻璃纖維6、固著凍幹膠體金標記的
抗甲基苯丙胺的特異抗體的玻璃纖維膜金標墊5、包被甲基苯丙胺-BSA 結合物和抗膠體金標記抗體的二抗的硝酸纖維素膜2和吸水墊1依次粘 貼，如圖1所示，其中硝酸纖維素膜2兩端分別與吸水墊和抗甲基苯丙 胺單抗金標墊5互相交疊連接，在抗甲基苯丙胺單抗金標墊5上壓有玻 璃纖維6。
(8)樣品測試和結果判斷方法
快速檢測過程描述將試紙條插入待測樣品中，停留5秒後取出平 放，或用滴管在樣品墊上滴加4 6滴樣品，3 5分鐘後觀察結果。如 果受測標本中不含有甲基苯丙胺，膠體金標記的特異性抗體釋放並向膜 區流動，與膜區抗原和二抗結合形成兩條紅線(一條反應線T， 一條質 控線C)，表明檢測結果為陰性，如果受測標本中存在甲基苯丙胺，而且 濃度高於檢測水平時，就會與膠體金標記的抗體競爭結合，從而阻止膠 體金標記的抗體與膜區抗原結合，使其對應的反應線不顯色，僅出現一 條紅色的質控線，表明檢測結果為陽性。質控線(C)是檢驗方法本身 有效與否，顯色有效，不顯色無效。
免疫膠體金層析技術具有特異性強，靈敏度高，簡便易行，價格低 廉等許多優點，已經成為世界通用的對吸毒人員進行初步篩査的首選方 法。當篩査為陽性結果，再進行GC-MS檢査確認，大大降低了工作強度 和經濟費用。作為篩查，我國對每一種毒品都規定了各自的檢測閾值 (cutoff)，高於該閾值即為檢測陽性。各種毒品的檢測閾值在各國略有不同，即使在一個國家，也會根據該閾值的實際檢測的信度和效度不斷 調整閾值。美國1988年首次公布對阿片、大麻、古柯鹼等數種毒品檢測
閾值後，到2004年已經進行了 4次修訂。對每個國家來講，各種毒品的 檢測閾值都是單一的，以國家行政命令的形式公布的，其區分度具有一 定的法律意義。我國目前使用的檢測閾值是參照美國1988年公布的檢測 閾值制定的，其中，甲基苯丙胺檢測閾值為1000ng/mL。但是在對藥物 濫用人員執法過程中，存在各種複雜情況，單一的定性檢測閾值，難以 適應不同的環境，難以區分不同的吸毒人群。如在吸毒時大量飲水，會 造成尿液稀釋，使尿中毒品濃度低於檢測閾值，造成假陰性；無法區分 偶爾吸毒和吸毒成癮者，對於上述兩種情況我國法律所規定的處理方法 是不同的。對於無法進行GC-MS檢測確認的現場執法人員面對這些複雜 情況，單一定性的檢測閾值提供的信息是不夠的。

實用新型內容
本實用新型的目的在於提供一種甲基苯丙胺的多梯度膠體金標記免 疫檢測工具，克服上述信息量不足的缺點，採用保留原檢測閾值(cutoff ) 1000 ng/mL不變，用增加檢測閾值的方法，擴大檢測範圍，以滿足現場 執法區分不同吸毒人員的需要。對尿中含甲基苯丙胺的濃度進行多個濃 度範圍的半定量標定。
本實用新型甲基苯丙胺膠體金標記免疫檢測墊和相配合的試紙，包 括免疫原、抗甲基苯丙胺特異抗體、膠體金、膠體金標記抗甲基苯丙胺 特異抗體、抗膠體金標記抗體的二抗、硝酸纖維素膜和玻璃纖維素膜、免疫層析試紙條，
所述檢測墊是多梯度檢測墊，其上至少有兩個硝酸纖維素膜，不同 的硝酸纖維素膜上分別有不同濃度的膠體金標記抗甲基苯丙胺特異抗體 固定於其上，形成具有不同檢測閾值的膠體金標記墊；
所述免疫層析試紙條是使用上述膠體金墊，在同一底板上製成的多 梯度檢測試紙條；其中，每個試紙條是將吸液用玻璃纖維、上述膠體金 墊之一、包被甲基苯丙胺-BSA結合物和抗膠體金標記抗體的二抗的硝酸 纖維素膜和吸水墊依次粘貼於其上。
所述甲基苯丙胺的多梯度膠體金標記免疫檢測墊及相配合的試紙， 其特徵在於所述多梯度檢測試紙條所包含的檢測閾值為下述三組中的任 何一組
(1) 由如下兩個檢測閾值構成250 500ng/mL和1000ng/mL;
(2) 由如下兩個檢測閾值構成1000ng/mL和10000 100000ng/mL;
(3) 由如下三個檢測閾值構成250 500ng/mL、 1000ng/mL和 10000 100000ng/mL。
使用所述的免疫檢測墊和相配合的試紙的檢測方法，樣品測試和結
果判斷方法按照如下操作步驟進行
將上述多梯度檢測試劑條置於乾淨平坦的檯面上，用塑料吸管垂直
8滴加140 160ul無空氣泡的受試者尿樣於加樣孔內； 測試結果在5-8分鐘以內讀取，8分鐘後判定無效； 結果判斷相應試紙條上的檢測線不顯色，檢測結果為陽性，檢測線顯色，檢測結果為陰性，質控線顯色表明檢測結果有效，不顯色表明 結果無效。所述免疫層析試紙條的製備是使用上述膠體金墊，在同一底板上制 成多梯度檢測試紙條，其中，每個試紙條是將吸液用玻璃纖維、上述膠體金墊之一、包被甲基苯丙胺-BSA結合物和抗膠體金標記抗體的二抗的 硝酸纖維素膜和吸水墊依次粘貼；所述樣品測試和結果判斷方法的操作步驟如下(1) 將上述多梯度檢測試劑條置於乾淨平坦的檯面上，用塑料吸管垂直滴加140-160nl無空氣泡的尿樣於加樣孔內；(2) 測試結果在5-8分鐘以內讀取，8分鐘後判定無效；(3) 結果判斷相應試紙條上的檢測線不顯色，檢測結果為陽性，檢測線顯色，檢測結果為陰性，質控線顯色表明檢測結果有效，不 顯色表明結果無效。所述檢測閾值為下述三組中的任何一組 (1)包括如下兩個檢測閾值250 500ng/mL和1000ng/mL;/mL;(3) 包括如下三個檢測閾值250 500ng/mL 、 1000ng/mL和 10000 100000ng/mU所述檢測閾值250 500ng/mL用於篩選檢測前3h內一次或多次 飲水800mL以上的被試者是否服用甲基苯丙胺類毒品。所述檢測閾值1000 ng/mL用於篩選檢測前3h內飲水量不超過 S00mL的被試者是否服用甲基苯丙胺類毒品。所述檢測閾值10000 100000ng/mL用於篩選被試者是否連續服用 甲基苯丙類毒品並成癮。所述樣品為尿液。所述檢測方法在被試者服用甲基苯丙胺類毒品後48小時內均可使用。本實用新型的優越性在於將只有一個檢測閾值的定性檢測方法，改進為多個梯度的半定量檢測，擴大檢測範圍，增加了信息量，為區分 不同性質，不同劑量吸毒人員的判定提供客觀依據。


圖1為通用甲基苯丙胺檢測試紙條的結構圖；l-吸水墊；2-硝酸纖維素膜；3-質控線；4_測試線；5-抗甲基苯丙胺單抗金標墊；6-玻璃纖維；7-底板圖2為本實用新型甲基苯丙胺檢測試紙條的俯視圖； 圖3為本實用新型甲基苯丙胺檢測試紙測試結果圖。
具體實施方式
下面結合實施例對本實用新型的製備及使用本實用新型的檢測方法 進行詳細說明。實施例1l免疫原的製備採用活化脂法，將牛血清白蛋白(BSA)與甲基苯 丙胺結合，製成甲基苯丙胺的免疫原，甲基苯丙胺-BSA結合物。2抗甲基苯丙胺的特異抗體的製備將製備的甲基苯丙胺合成免疫 原免疫小鼠，提取小鼠腹水，分離純化以得到抗甲基苯丙胺單克隆抗體， 其製備方法參照宋朝錦、郭偉正、劉一兵等寫的甲基苯丙胺和嗎啡單克 隆抗體的製備及初步應用(中國原子能科學研究院年報，2001年00期 397-403頁)。3膠體金的製備採用檸檬酸三鈉還原法製備金溶膠，其中，加入1 %檸檬酸三鈉水溶液0.7ml，製得金溶膠的粒徑為71.5nm，顏色為紫 紅色。4膠體金標記抗甲基苯丙胺的特異抗體的製備將步驟2中製備的特異抗體加入到步驟3製得的膠體金溶液中混合，從而獲得膠體金標記 的抗體，具體操作方法參照江靜、劉一兵、周稜等寫的甲基苯丙胺免疫層析測試條的研製(同位素，2004年17 (2) : 79-83)和曾立波、陳連 康、胡小龍等寫的氯胺酮、甲基苯丙胺和嗎啡金標單抗試劑盒的研製(中 國法醫學雜誌2008年23 (4): 241-243)。5抗膠體金標記抗體的二抗的製備具體操作方法參照江靜、劉一兵、周稜等寫的甲基苯丙胺免疫層析測試條的研製(同位素，2004年17 (2) : 79-83)和曾立波、陳連康、胡小龍等寫的氯胺酮、甲基苯丙胺 和嗎啡金標單抗試劑盒的研製(中國法醫學雜誌2008年23 (4): 241-243)。6硝酸纖維素膜和玻璃纖維素膜的處理硝酸纖維膜的包被剪取長6cm，寬為0.4cm硝酸纖維膜，在膜上 依次包被濃度為10mg/ml的甲基苯丙胺-BSA結合物(測試線即T線)， 位置參照圖1中的4，和濃度為10mg/ml的抗膠體金標記抗體的二抗(質 控線即C線)，位置參照圖1中的3;製作三張同樣的硝酸纖維膜。玻璃纖維膜處理剪取三張長6cm，寬為0. 4cm玻璃纖維膜，分別 將檢測閾值為250ng/mL 、 1000ng/mL和10000ng/mL的凍幹的膠體金標 記的抗甲基苯丙胺的特異抗體固定於不同的玻璃纖維膜，製成三個膠體 金墊。7免疫層析試紙條的製備12在塑料底板7上分別將吸液用玻璃纖維6、固著凍幹膠體金標記的抗甲基苯丙胺的特異抗體的玻璃纖維膜金標墊5、包被甲基苯丙胺-BSA 結合物和抗膠體金標記抗體的二抗的硝酸纖維素膜2和吸水墊1依次粘 貼，三個檢測閾值的試紙條粘帖在同一塑料底板7上，結果如圖2所示， 從上到下檢測閾值依次為250ng/mL 、 1000ng/mL和10000ng/mL。8檢測(4) 將試劑條置於乾淨平坦的檯面上，用塑料吸管垂直滴加5 滴無空氣泡的尿樣(約150ul)於加樣孔內。(5) 測試結果在5分鐘時讀取，8分鐘後判定無效。(6) 結果判斷如圖3所示，a:陽性，250 ng/ml《尿液中甲基苯丙胺濃度《1000 ng/ml，此陽 性結果表明檢測前3h內一次或多次飲水800mL以上的被試者服用過甲基 苯丙胺類毒品；b:陽性，1000ng/ml《尿液中甲基苯丙胺濃度《10000ng/ml，此陽 性結果表明檢測前3h內飲水量不超過800mL的被試者服用過甲基苯丙胺 類毒品；c:陽性，尿液中甲基苯丙胺濃度^10000ng/ml，此陽性結果表明被 試者連續服用過甲基苯丙類毒品並成癮；d:陰性；e i:檢測結果無效。 實施例2單次口服甲基苯丙胺 10mg ， 其血漿 Cmax 為 17. 4ng/mL;Tmax5. 2h;T1/29. 3h。尿Cmax為2969. 7ng/mL;Tmax15. 16h;陽 性結果(檢測值為1000ng/mL)出現的最早時間5. Oh。單次口服甲基苯丙 胺20mg，其血漿Cmax為32. 4ng/mL; Tmax7. 5h; T1/211. lh。尿Cmax為 4038.4ng/mL;Tmaxl4.32h;陽性結果出現的最早時間3. 3h。甲基苯丙胺 腎臟清除率175 +/- 102 mL/min，根據上述甲基苯丙胺藥代動力學特徵 設計如下實驗，以確定檢測閾值250 ng/ml和10000ng/ml的必要性和可 信度。1檢測低線閾值的確定1.1檢測值500ng/mL或250ng/mL對正常人定量服用甲基苯丙胺後 尿中甲基苯苯胺濃度的檢測時間窗和檢測陽性率的影響8例健康受試者，均為男性，平均年齡為26歲，經一次口服甲基苯 丙胺10mg後，使用GC-MS連續檢測尿液中甲基苯丙胺的濃度，結果 發現如以500ng/mL為檢測閾值時，檢出甲基苯丙胺的時間範圍是7-20h， 如果以250 ng/mL為檢測閾值，其最初檢出甲基苯丙胺的時間範圍是4-13 h。以250 ng/mL為檢測閾值比以500ng/mL為檢測閾值，總檢出時間增 加達34 h，總檢出陽性率增加480/0。1. 2不同檢測值對甲基苯丙胺毒品可疑使用者檢出率的影響
使用已經取得體外試劑檢測批號的杭州艾康生產的甲基苯丙胺檢測 試紙條對娛樂場所中300名可疑甲基苯丙胺使用者進行尿液檢測，結果
顯示206名為陽性，對尿檢(lOOOng/mL為檢測值)陰性人員的尿液使 用GC-MS復檢，結果發現檢測值在100ng/mL以上陽性率為82.2%， 250ng/mL以上陽性率為76. 4%，500ng/mL以上陽性率為14. 1%， lOOOng/mL 以上陽性率為0%。在調查中發現所有陰性人員均有在2-3h中大量飲水 (飲料)歷史，飲水量在800ml—1000ml之間。
1. 3增加250ng/mL檢測值對假陽性的檢測結果的影響
對甲基苯丙胺檢測而言，假陽性主要來自治療目的使用甲基苯丙胺， 和其他藥物中含有的單胺、腐胺類成分的交叉反應。我國允許使用中樞 興奮劑治療兒童注意缺陷多動障礙、成年注意缺陷多動障礙和發作性睡 病。治療劑量一般為20-25mg/d，劑量範圍是5-30mg/d。在這一用藥劑 量範圍中尿液甲基苯丙胺濃度己經處於^1000ng/mL的水平(參看2. 1)， 所以250ng/mL檢測值對治療用藥人群的假陽性檢出率的影響不大。值得 注意的是一些含有單胺、腐胺類藥物由於交叉反應造成的假陽性結果。 可以在使用說明中標示250ng/mL檢測值僅限於在尿液被稀釋的情況下， 即吸毒後2-3h內飲水量在800ml以上，才對判定吸毒與否有意義。
2檢測高線閾值的確定
2.1娛樂性(偶爾)使用甲基苯丙胺人員尿中甲基苯丙胺濃度低於10000ng/mL
對使用杭州艾康生產的甲基苯丙胺檢測試紙條檢測的105例甲基苯 丙胺尿檢陽性人員進行血液中甲基苯丙胺濃度檢測(GC-MS方法)發現 血液中甲基苯丙胺濃度在0. 1-11. 1 microM，中位數為1. 3 microM (0. 19 mg/l)均數為2microM (0. 3 mg/1)。根據藥代動力學推算，維持甲基苯 丙胺血藥濃度為1.3 microM (0.19 mg/1)，人每天的藥物負荷劑量應為 52mg。
4例健康受試者，均為男性，平均年齡28.3歲，以每次口服給甲基 苯丙胺13mg，每天4次，每次給藥間隔為4h，連續4天。結果顯示受試 者的血藥濃度維持在1-4microM之間。尿中甲基苯丙胺濃度大於 1000ng/mL，低於10000ng/mL。
2. 2甲基苯丙胺成癮人員尿中甲基苯丙胺濃度高於10000ng/mL
物質成癮的診斷必須滿足DSM-IV診斷標準，臨床發現符合甲基苯 丙胺依賴診斷標準的患者都有長期且大量使用甲基苯丙胺的病史。對診 斷甲基苯丙胺成癮972名自願戒毒人員的調査發現，他們使用甲基苯丙 胺劑量範圍在0.7-2. lg/d，中位數為0.82 g/d，均數為l.l g/d。根據 藥代動力學的研究，以成癮人員每日用量的中位數0. 82g為甲基苯丙胺 藥物負荷劑量，成癮人員甲基苯丙胺血藥濃度應在 16-64microM(2. 4-9. 6mg/L)， 尿中甲基苯丙胺濃度在 26400ng/mL—1930000ng/mL，均數為317000 ng/mL，因而將上線定於10000ng/mL以上，便於區分少量娛樂性使用和成癮性大量使用甲基苯 丙胺的人員。
以上研究結果表明，以250ng/mL、 10000ng/mL，與原有1000ng/mL 的檢測閾值共同組成一個檢測單位，實現對甲基苯丙胺(鹽酸甲基安非 他明)3個濃度範圍的半定量檢測。在該檢測範圍內，能夠較好的達到 區分不同性質使用甲基苯丙胺的人員。
3檢測時間範圍的確定
8個志願者分為2組口服甲基苯丙胺，連續給藥組4人每天給甲基 苯丙胺10mg， 4天，非連續給藥4人組隔天給甲基苯丙胺10mg， 4次。 用GC-MS連續檢測末次給藥後尿液中甲基苯丙胺的濃度，直到尿液中甲 基苯丙胺濃度低於250ng/ml為止。發現連續使用甲基苯丙胺的4人中從 末次給藥到尿中甲基苯丙胺濃度低於250ng/ml的時間範圍是44h到73h， 平均為58.2士14.2h;非連續使用甲基苯丙胺的4人中從末次給藥到尿 中甲基苯丙胺濃度低於250ng/ml的時間範圍是59h到71h，平均為65. 8 士5.9h。從以上結果可以發現連續使用或間斷使用甲基苯丙胺對最長可 檢測時間影響不大；以250ng/ml為最低檢測值，可以發現在48h以內使 用過10mg以上甲基苯丙胺的人。
權利要求1、一種甲基苯丙胺膠體金標記和試紙，包括免疫原、抗甲基苯丙胺特異抗體、膠體金、膠體金標記抗甲基苯丙胺特異抗體、抗膠體金標記抗體的二抗、硝酸纖維素膜和玻璃纖維素膜、免疫層析試紙條，其特徵在於所述檢測墊是多梯度檢測墊，其上至少有兩個硝酸纖維素膜，不同的硝酸纖維素膜上分別有不同濃度的膠體金標記抗甲基苯丙胺特異抗體固定於其上，形成具有不同檢測閾值的膠體金墊；所述免疫層析試紙條是使用上述膠體金墊，在同一底板上製成的多梯度檢測試紙條，其中，每個試紙條是將吸液用玻璃纖維、上述膠體金墊之一、包被甲基苯丙胺-BSA結合物和抗膠體金標記抗體的二抗的硝酸纖維素膜和吸水墊依次粘貼於其上。
2、 根據權利要求1所述的膠體金標記墊和試紙，其特徵在於所述多梯度檢 測試紙條所包含的檢測閾值為下述三組中的任何一組(1) 由如下兩個檢測閾值構成250 500ng/mL和1000ng/mL;(2) 由如下兩個檢測閾值構成1000ng/mL和10000 100000ng/mL;(3) 由如下三個檢測閾值構成250 500ng/mL、 1000ng/mL和10000 100000ng/mL。
專利摘要本實用新型公開了一種甲基苯丙胺的多梯度膠體金標記免疫檢測墊及試紙，屬於體外檢測試劑領域。本實用新型是對目前普遍使用的單一閥值甲基苯丙胺的膠體金標記免疫檢測工具的進一步改進，在保留原有單一檢測閾值的基礎上增加1～2個新的檢測閾值構成一個多梯度檢測。使用本實用新型的檢測方法可以區分不同可疑涉毒人員是否吸毒或成癮，為執法人員提供一個客觀指標，具有簡單、準確的特點。
文檔編號G01N33/558GK201413327SQ200920146329
公開日2010年2月24日 申請日期2009年3月17日 優先權日2009年3月17日
發明者高俊鈺 申請人:高俊鈺