牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法

2023-12-12 13:47:52 1

專利名稱：牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法
技術領域：
發明涉及一種牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法。
背景技術：
牛乳中蛋白質主要有兩大類，即酪蛋白和乳清蛋白。牛乳蛋白質中乳清蛋白約佔總蛋白的20%，酪蛋白約佔總蛋白的80%。人乳中酪蛋白約佔總蛋白的40%，乳清蛋白約佔總蛋白的60% .乳清蛋白分子量較酪蛋白分子量小，更易消化吸收，並且乳清蛋白中含有多種活性物質，因此乳清蛋白被譽為蛋白之王。我國嬰兒配方乳粉有強制性國家標準，規定其乳清蛋白含量不得低於總蛋白質的60% .由於乳清蛋白易變性，在乳品加工過程中有較多的乳清蛋白已經變性，而許多測定方法只能檢測未變性的乳清蛋白，不能檢測已變性的乳清蛋白，因此總乳清蛋白的測定一直是個難題。到目前為止，國內外仍然沒有測定變性和未變性乳清蛋白總量的好方法。

發明內容
發明的目的是提供一種能夠準確測定牛乳嬰幼兒配方粉中變性和非變性乳清蛋白總含量時科學的數據校正處理方法。
上述的目的通過以下的技術方案實現一種牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，第一步乳清蛋白標準系列樣品和被測樣品水解後胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸各自總量的測定與計算並減去各自游離胺基酸的測定值；第二步胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸的含量值的自身校正；第三步用 胱氨酸值校正天冬氨酸、丙氨酸、纈氨酸值；第四步校正後的胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸含量相加；第五步校正後胺基酸比值計算；第六步胺基酸比值與乳清蛋白標準系列樣品含量的數據關係分析；第七步被測樣品乳清蛋白百分含量計算。
所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，所述的第一步水解後胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸各自的總量的計算減去各自游離胺基酸的量；經過酸水解後測定的胺基酸總量X1減去不水解時該樣品胺基酸測定值x2，各種胺基酸中游離胺基酸的含量都要相應扣除；樣品中各胺基酸佔總蛋白的含量按下列公式計算
權利要求
1.一種牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，其特徵是第一步乳清蛋白標準系列樣品和被測樣品水解，進行胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸各自總量的測定與計算，減去各自游離胺基酸的測定值；第二步胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸的含量值的自身校正；第三步用胱氨酸值校正天冬氨酸、丙氨酸、纈氨酸值；第四步校正後的胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸含量相加；第五步校正後胺基酸比值計算；第六步胺基酸比值與乳清蛋白標準系列樣品含量的數據關係分析；第七步被測樣品乳清蛋白百分含量計算。
2.根據權利要求1所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法， 其特徵是第一步乳清蛋白標準系列樣品和被測樣品水解，進行胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸各自總量的測定與計算，減去各自游離胺基酸的測定值經過酸水解後測定的胺基酸總量X1減去不水解時該樣品胺基酸測定值X2,胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸中游離胺基酸的含量都要相應扣除；樣品中各胺基酸佔總蛋白的含量按下列公式計算
3.根據權利要求1或2所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，其特徵是所述的第二步胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸的含量值的自身校正；
4.根據權利要求1或2所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，其特徵是所述的第六步胺基酸比值與乳清蛋白標準系列樣品含量的數據關係分析； 以乳清蛋白標準系列各個乳清蛋白含量數據為橫坐標Xi，以對應的各個校正後胺基酸比值為縱坐標Yi，對所得數據進行回歸分析，得到胺基酸比值與乳清蛋白含量關係的回歸線性方程 Yi = KXi + b ;所述的第七步被測樣品乳清蛋白百分含量計算；將被測樣品校正後的胺基酸比值代入乳清蛋白的線性回歸方程Yi = KXi + b中，計算出乳清蛋白的百分含量。
5.根據權利要求3所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，其特徵是所述的第六步胺基酸比值與乳清蛋白標準系列樣品含量的數據關係分析；以乳清蛋白標準系列各個乳清蛋白含量數據為橫坐標Xi，以對應的各個校正後胺基酸比值為縱坐標Yi，對所得數據進行回歸分析，得到胺基酸比值與乳清蛋白含量關係的回歸線性方程 Yi = KXi + b ；所述的第七步被測樣品乳清蛋白百分含量計算；將被測樣品校正後的胺基酸比值代入乳清蛋白的線性回歸方程Yi = KXi + b中，計算出乳清蛋白的百分含量。
6.根據權利要求1或2或4所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，其特徵是所述的校正處理方法所用的待測樣品及標準樣品的製作方法，對待測樣品、標準樣品進行氧化、鹽酸水解，首先稱取混合均勻的含蛋白質7. O mg-50mg的樣品和乳清蛋白與酪蛋白混合的標準品於水解管中，在冰水浴中冷卻30 min後加入2-4 mL 已經冷卻的過甲酸溶液，蓋好瓶塞後置於O °C ±1 °C冰箱中，冰浴16 h；向水解管中加入O. 3-0. 6 mL氫溴酸，振搖後冰浴30 min，在60 V ±2 °C氮吹儀上濃縮至近幹或在60 °C ±2 °C下減壓蒸懼至近幹；向水解管內加入6 mol/L鹽酸,8-30 mL,充入氮氣Imin後， 擰緊螺紋蓋，將水解管放在110°C ± I°C的恆溫乾燥箱內水解24 h後取出冷卻至室溫；將水解液用超純水轉移並定容至25或50 mL容量瓶中，混勻，濾紙過濾；吸取濾液I mL於指型瓶中，在60 °C±2 °C氮吹儀上濃縮至幹或在低於50 °C下減壓蒸餾，殘留物用I mL超純水溶解，即製成試樣溶液。
7.根據權利要求6所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法， 其特徵是所述的試樣溶液中游離胺基酸試樣的製備；準確稱取混合均勻的試樣約2. 5 g 於100 mL錐形瓶中，加入約25 mL，45 °C-50 °C溫水溶解；降至室溫後用鹽酸溶液調節試樣溶液的PH值至1. 7±0. 1，放置約I min ;再用氫氧化鈉溶液調節試樣溶液的pH值至 4. 5±0. 1，超聲振蕩10 min，用水轉移並定容至100 mL容量瓶中混勻；濾紙過濾後經O. 22 μ m濾膜過濾，濾液即為試樣溶液；乳清蛋白計算時要扣除游離胺基酸。
8.根據權利要求3所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法， 其特徵是所述的校正處理方法所用的待測樣品及標準樣品的製作方法，對待測樣品、標準樣品進行氧化、鹽酸水解，首先稱取混合均勻的含蛋白質7. O mg-50mg的樣品和乳清蛋白與酪蛋白混合的標準品於水解管中，在冰水浴中冷卻30 min後加入2-4 mL已經冷卻的過甲酸溶液，蓋好瓶塞後置於O °C±1 °C冰箱中，冰浴16 h；向水解管中加入O. 3-0. 6 mL氫溴酸，振搖後冰浴30 min，在60 °C ±2 °C氮吹儀上濃縮至近幹或在60 °C ±2 °〇下減壓蒸餾至近幹；向水解管內加入6 mol/L鹽酸，8-30 mL，充入氮氣Imin後，擰緊螺紋蓋，將水解管放在110°C ± I°C的恆溫乾燥箱內水解24 h後取出冷卻至室溫；將水解液用超純水轉移並定容至25或50 mL容量瓶中，混勻，濾紙過濾；吸取濾液I mL於指型瓶中，在60 °C ±2 °C氮吹儀上濃縮至幹或在低於50 °C下減壓蒸餾，殘留物用I mL超純水溶解，即製成試樣溶液。
9.根據權利要求5所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法， 其特徵是所述的校正處理方法所用的待測樣品及標準樣品的製作方法，對待測樣品、標準樣品進行氧化、鹽酸水解，首先稱取混合均勻的含蛋白質7. O mg-50mg的樣品和乳清蛋白與酪蛋白混合的標準品於水解管中，在冰水浴中冷卻30 min後加入2-4 mL已經冷卻的過甲酸溶液，蓋好瓶塞後置於O °C±1 °C冰箱中，冰浴16 h；向水解管中加入O. 3-0. 6 mL氫溴酸，振搖後冰浴30 min，在60 °C ±2 °C氮吹儀上濃縮至近幹或在60 °C ±2 °〇下減壓蒸餾至近幹；向水解管內加入6 mol/L鹽酸，8-30 mL，充入氮氣Imin後，擰緊螺紋蓋，將水解管放在110°C ± I°C的恆溫乾燥箱內水解24 h後取出冷卻至室溫；將水解液用超純水轉移並定容至25或50 mL容量瓶中，混勻，濾紙過濾；吸取濾液I mL於指型瓶中，在60 °C ±2 °C氮吹儀上濃縮至幹或在低於50 °C下減壓蒸餾，殘留物用I mL超純水溶解，即製成試樣溶液。
10.根據權利要求6或7或8或9所述的牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法，其特徵是將所述的試樣溶液進行衍生，分別取試樣溶液、乳清蛋白標準水解溶液、胺基酸混合標準工作液各10 μ L,各加入70 μ L試樣溶液緩衝液，振蕩混勻；邊振蕩邊加入20 UL衍生劑，振蕩後於55 V ±2 °C培養箱中放置10 min，即得胺基酸標準工作衍生液、乳清蛋白標準系列衍生液、被測樣品衍生液。
全文摘要
牛乳嬰幼兒配方粉總乳清蛋白測定時數據的校正處理方法。牛乳中蛋白質主要有兩大類，即酪蛋白和乳清蛋白。本發明，第一步乳清蛋白標準系列樣品和被測樣品水解後胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸各自總量的測定與計算並減去各自游離胺基酸的測定值；第二步胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸及纈氨酸的含量值的自身校正；第三步用胱氨酸值校正天冬氨酸、丙氨酸、纈氨酸值；第四步校正後的胱氨酸、天冬氨酸、丙氨酸含量相加；第五步校正後胺基酸比值計算；第六步胺基酸比值與乳清蛋白標準系列樣品含量的數據關係分析；第七步被測樣品乳清蛋白百分含量計算。本發明用於牛乳基嬰幼兒配方乳品中變性和非變性乳清蛋白總量的測定時，數據的科學校正處理方法。
文檔編號G01N33/04GK102998427SQ201210515468
公開日2013年3月27日 申請日期2013年1月20日 優先權日2013年1月20日
發明者鄂來明, 張秋梅, 王薇, 趙秋蓮, 張麗宏, 單藝, 姜一銘, 劉德鑫, 黃曉林, 傅徐陽, 梁傑 申請人:黑龍江省乳品工業技術開發中心