一種治療慢性洩瀉的藥物的製作方法

2023-12-05 12:49:21

專利名稱：一種治療慢性洩瀉的藥物的製作方法
技術領域：
本發明涉及消化系統藥物的技術領域，具體地說是以中藥材提取物為原料製成的一種治療慢性洩瀉的藥物。
背景技術：
慢性洩瀉是臨床上常見的一種病症，其病變主要是在肝、脾、腎與胃、大小腸，常與感受外邪、飲食所傷、情致失調及臟腑虛弱等因素有關。用中醫治療慢性洩瀉的藥物已有文獻報導，目前有以下幾種1.陝西中醫學院學報2004年3月第27卷第2期57-60頁潰瘍性結腸炎的中醫藥治療概況該文獻報導是用香軍四逆散加減(柴胡、白芍、枳殼、木香、大黃炭、炙甘草)或是用味軍理中湯加減(黨參、炮姜、白朮、五味子、制大黃、炙甘草)肝脾不和，氣滯溼鬱型和脾虛溼鬱、寒熱錯雜型進行施治。
2.河北中醫2001年11月第23卷第11期878-880頁潰瘍性結腸炎的中醫藥研究進展該文獻報導是用赤石脂、黃連、厚樸、神曲、川椒、烏梅、川芎、乾薑、牡蠣治療潰瘍性結腸炎。
中醫治療潰瘍性結腸炎的的方法多樣，但是還需在開展中藥現代藥理、生物活性研究基礎上，篩選和組方，開發新的療法好、便於患者服用的新劑型。

發明內容
本發明的目的在於提供一種治療慢性洩瀉的藥物。慢性洩瀉是臨床上常見的一種病症，其病變主要是在肝、脾、腎與胃、大小腸，常與感受外邪、飲食所傷、情致失調及臟腑虛弱等因素有關。其主要病機為肝、脾、腎功能失調，脾失健運，水溼不化，下走大腸，急性洩瀉，失治誤治，病情遷延不愈，以致更傷中焦(脾胃)，累及下焦(肝腎)，脾腎陽虛而生寒，下元失溫而不固，故大便清稀或完谷不化，甚則滑脫不禁，溼濁蘊滯，氣血壅阻不暢則腹痛，腸鳴，溼濁宿滯久積不除，鬱久化熱，則可見寒熱錯雜，虛實兼見之證，針對本病特點，治當酸澀固腸為首務，輔以關門截流而止瀉，溫裡助陽以散寒，清熱燥溼以堅腸，行氣活血兼理氣。
本發明的解決方案是提供一種治療慢性洩瀉的藥物，其特徵在於是由下述重量配比的原料製成赤石脂(煅)450-550份 黃連225-275份黃柏225-275份 訶子(去核)225-275份肉豆蔻(煨)225-275份 厚樸(炙)225-275份建曲225-275份 吳茱萸(制)180-220份肉桂180-220份 乾薑225-275份花椒180-220份 川芎180-220份牡蠣(煅)180-220份 五倍子225-275份烏梅(去核)225-275份。
所述的治療慢性洩瀉的藥物，其特徵在於是由下述優選重量配比的原料製成赤石脂(煅)500份 黃連250份黃柏250份訶子(去核)250份 肉豆蔻(煨)250份 厚樸(炙)250份建曲250份吳茱萸(制)200份 肉桂200份乾薑250份花椒200份川芎200份牡蠣(煅)200份五倍子250份 烏梅(去核)250份。
所述的治療慢性洩瀉的藥物，其特徵在於是由下述優選重量配比的原料製成膠囊赤石脂(煅)500份、黃連250份、黃柏250份、訶子(去核)250份、肉豆蔻(煨)250份、厚樸(炙)250份、建曲250份、吳茱萸(制)200份、肉桂200份、乾薑250份、花椒200份、川芎200份、牡蠣(煅)200份、五倍子250份、烏梅(去核)250份。
將以上十五味生藥按處方量之比配伍，經挑選去雜物，水洗去泥沙後，烘乾，粉碎成細粉，混勻，加適量水，制顆粒，乾燥，整粒，分裝入膠囊，即得。
一種治療慢性洩瀉的藥物的質量標準，其特徵在於本品每粒含厚樸酚C18H18Ox與和厚樸酚的總量應不少於0.49mg。
一種治療慢性洩瀉的藥物的檢驗方法，其特徵在於其厚樸以厚樸酚(C18H18O2)與和厚樸酚(C18H18O2)的含量測定方法是含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(75∶25)為流動相；檢測波長294nm。理論板數按厚樸酚峰計算應不低於3000。
對照品溶液的製備 精密稱取厚樸酚12mg與和厚樸酚5mg，置100ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含厚樸酚0.06mg，和厚樸酚0.025mg)。
供試品溶液的製備 取裝量差異項下的內容物，混勻，精密稱取2.0g，置100ml具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞緊，稱定重量，超聲提取1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
用固腸膠囊進行了藥效學試驗，觀察固腸膠囊對大鼠實驗性慢性結腸炎的治療作用、固腸膠囊對腸運動及吸收功能的影響、固腸膠囊對小鼠醋酸扭體試驗的影響材料和方法、固腸膠囊對免疫功能的影響、固腸膠囊抗炎作用的研究，以證實固腸膠囊的臨床散寒清熱、調和氣血、澀腸止瀉。用於寒熱錯雜、虛實互見的腸易激症候群。症見大便清稀或夾有少許白粘凍，或完谷不化，甚則滑脫不禁，腹痛腸鳴，畏寒肢冷，腰膝酸軟的作用。
試驗結果表明1.結腸損傷計數在實驗組與對照組間有明顯差異，固腸膠囊各組與柳氮磺胺嘧啶組較生理鹽水對照組少，有明顯的統計學差異(p＜0.01-0.001)，且固腸膠囊中劑量組及固腸膠囊大劑量組損傷計數明顯少於柳氮磺胺嘧啶組(p＜0.01-0.05)，說明固腸膠囊對大鼠實驗性慢性結腸炎有明顯的促癒合作用，且優於柳氮磺胺嘧啶。
2.病理觀察結果顯示各實驗組較生理鹽水對照組腸黏膜完整率及腸黏膜輕度損傷率高；固腸膠囊中劑量組及固腸膠囊大劑量組腸黏膜完整率及腸黏膜輕度損傷率較柳氮磺胺嘧啶組高，固腸膠囊小劑量組略低於柳氮磺胺嘧啶組，其病理觀察與結腸黏膜損傷計數相一致。
可以認為固腸膠囊對大鼠實驗性慢性結腸炎有較好的促癒合作用。
3、固腸膠囊對離體兔腸管因乙醯膽鹼的致痙狀態有緩解作用，說明其解痙鎮痛機理在於通過神經介質使平滑肌解痙，作用與阿託品相仿。
固腸膠囊對離體兔腸管因氯化鋇的致痙狀態也有緩解作用，說明其解痙機理在於通過影響平滑肌本身的收縮機理使其松馳達到臨床止痛作用。
因此固腸膠囊的解痙作用的機理是對抗神經介質和直接作用於平滑肌。
4、固腸膠囊能促進腸道對水及氯離子的吸收。
5、固腸膠囊對小鼠醋酸扭休反應，有與阿託品相似的抑制作用，表示固腸膠囊有止痛作用。
6、通過血清凝集素測定可以反映致敏動物血清中血凝素的水平，後者系循環抗體之一，可以反映動物體液免疫水平。
固腸膠囊有抑制動物血清凝集素的產生的作用，並且有量效關係。大劑量組、中劑量組與空白對照組相比較，抗體積數明顯下降，並有統計學意義(p＜0.02)，小劑量組與空白對照組相比較，抗體積數也有下降，但未能顯示統計學差異(p＞0.05)。
柳氮磺胺嘧啶是治療潰瘍性結腸炎的經典藥物，但在本實驗中未能顯示出有抑制動物血清凝集素產生的作用，可能其作用機制與體液免疫反應的調節無關。
7、固腸膠囊對大鼠棉球肉芽腫抗炎試驗，證實固腸膠囊有與阿斯匹林相似的抑制大鼠棉球植入的肉芽腫形成的作用，對棉球溼重、乾重和肉芽腫淨重都有不同程度的抑制，說明固腸膠囊有一定的抗炎作用。
8、固腸膠囊對小鼠二甲苯致炎有顯著的消炎作用，與阿斯匹林相似。
9、固腸膠囊對甲醛致大鼠足趾腫脹試驗的證實1)、大鼠足趾在甲醛致炎後，在3小時達到腫脹高峰，以後逐漸降到致炎前正常水平。
2)、中藥固腸膠囊有阿斯匹林相似的抑制甲醛引起的大鼠足趾腫脹的作用，有量效變化，大劑量(2.0g/kg)作用較中劑量(1.0g/kg)作用更明顯。
通過固腸膠囊治療慢性洩瀉II期臨床，對固腸膠囊治療慢性洩瀉(寒熱錯雜，虛實互見證)的療效及安全性進行考察，與固本益腸片比較其優劣。試驗方法試驗分兩部分，第一部分採用隨機、雙盲雙模擬對照試驗，第二部分採用非對照試驗。試驗結果雙盲雙模擬對照試驗共選擇病例206例，剔除3例，共觀察合格病例203例，其中試驗組102例，顯效以上60例，顯效率58.82％，對照組101例，顯效以上46例，顯效率45.54％，兩組比較有顯著性差異(P＜0.05)；非對照試驗選擇病例208例，剔除4例，共觀察合格病例204例，顯效以上122例，顯效率59.80％，試驗組合併顯效率59.48％。試驗中未發現固腸膠囊、固本益腸片對主要臟器的損害及其它副作用。採用雙盲雙模擬對照試驗與非對照試驗兩種方法，考察固腸膠囊治療慢性洩瀉的療效與安全性。
採用固腸膠囊選擇寒熱錯雜，虛實互見的慢性洩瀉進行臨床試驗，因為試驗組與對照組在例數上不等，所以採用雙盲雙模擬對照試驗和非對照試驗兩種方式進行，在雙盲雙模擬對照試驗中，試驗組顯效率58.82％，對照組顯效率45.54％，組間比較有顯著性差異(P＜0.05)。非對照試驗組顯效率為59.80％，對照試驗組與非對照試驗組療效齊同，無顯著性差異(P＞0.05)，試驗組合併顯效率為59.48％，與對照組比較具有顯著性差異(P＜0.01)。治後慢性洩瀉各症狀為大便次數、大便性狀等症狀均有明顯改善，藥物療效不受年齡、病程、病情的影響，對心肝腎等主要臟器無損害，未發現其它副作用。
臨床觀察證明了固腸膠囊具有澀腸止瀉、散寒清熱、調和氣血的功能，治療慢性洩瀉、寒熱錯雜、虛實互見證有效，藥物療效不受年齡、病程、病情的影響，臨床試用對心肝腎無損害，並未發現其它不良反應。
為了嚴格控制藥品的質量，確保療效，制定了固腸膠囊生產用質量標準如下固腸膠囊Guchang Jiaonang處方赤石脂(煅) 黃連 黃柏 訶子(去核) 肉豆蔻(煨) 厚樸(炙) 建曲 吳茱萸(制) 肉桂 乾薑 花椒 川芎 牡蠣(煅) 五倍子 烏梅(去核)製法以上十五味生藥粉碎成細粉，混勻，加適量水，制顆粒，乾燥，整粒，分裝入膠囊，製成1000粒，即得。
性狀本品為膠囊劑，內容物為棕黃色至棕褐色顆粒與粉末；味辛、苦。鑑別(1)取本品少量，置顯微鏡下觀察韌皮纖維鮮黃色，成束或散在，有的與石細胞相連接，呈紡錘或梭形，末端斜尖、鈍圓或狹細，長136～185μm，直徑27～37μm，壁厚、木化、孔溝明顯，纖維束周圍薄壁細胞中含草酸鈣方晶，形成晶纖維，方晶至為密集，含晶細胞的壁不均勻木化增厚。
(2)取本品內容物2g，加乙酸乙酯10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取川芎對照藥材0.2g，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液4μl、對照藥材溶液2μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯(9∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點。
(3)取本品內容物2g，加三氯甲烷10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取吳茱萸對照藥材0.2g，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液4μl、對照藥材溶液2μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點。
(4)取本品內容物2g，加無水乙醇10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取桂皮醛對照品，加無水乙醇製成每1ml含1μl的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液4μl、對照品溶液1μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(85∶15)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯肼乙醇試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點。
(5)取本品內容物2g，加乙酸乙酯10ml，超聲提取20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取花椒對照藥材0.2g，同法製成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液4μl、對照藥材溶液2μl，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(17∶3)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點。
檢查重金屬 取本品1.0g，依法檢查(中國藥典2005年版一部附錄IXE第二法)，含重金屬不得過百萬分之二十五。
其他 應符合膠囊劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。
含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。
色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(75∶25)為流動相；檢測波長294nm。理論板數按厚樸酚峰計算應不低於3000。
對照品溶液的製備 精密稱取厚樸酚12mg與和厚樸酚5mg，置100ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含厚樸酚0.06mg，和厚樸酚0.025mg)。
供試品溶液的製備取裝量差異項下的內容物，混勻，精密稱取2.0g，置100ml具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞緊，稱定重量，超聲提取1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品每粒含厚樸酚(C18H18O2)與和厚樸酚(C18H18O2)的總量應不少於0.49mg。
功能與主治散寒清熱、調和氣血、澀腸止瀉。用於寒熱錯雜、虛實互見的腸易激症候群。症見大便清稀或夾有少許白粘凍，或完谷不化，甚則滑脫不禁，腹痛腸鳴，畏寒肢冷，腰膝酸軟。
用法與用量口服。一次4粒，一日3次。4周為一療程。
注意事項1.孕婦慎用。2.服藥期間忌食生冷、辛辣、油膩之物。
規格每粒裝0.375g。
貯藏置陰涼乾燥處。
有效期24個月。
固腸膠囊質量標準說明1.顯微鑑別(1)黃連的鑑別取黃連藥材粉末少量，置於載玻片上，加2滴水合氯醛溶液研磨均勻，蓋上蓋玻片，在酒精燈上透化後，置40×10倍顯微鏡下觀察顯示韌皮纖維鮮黃色，成束或散在，有的與石細胞相連接。呈紡綞或梭形，末端斜尖、鈍圓或狹細，長136～185um，直徑27～37um，壁厚、木化、孔溝明顯。
取固腸膠囊內容物少量，同上操作，顯示黃連的顯微特徵，說明樣品中含有黃連。
(2)黃柏的鑑別取黃柏藥材粉末少量，置於載玻片上，加2滴水合氯醛溶液研磨均勻，蓋上蓋玻片，在酒精燈上透化後，置40×10倍顯微鏡下觀察顯示纖維束周圍薄壁細胞中含草酸鈣方晶，形成晶纖維，方晶至為密集，含晶細胞的壁不均勻木化增厚。
取固腸膠囊內容物少量，同上操作，顯示黃柏的顯微特徵，說明樣品中含有黃柏。
2.薄層鑑別(1)川芎定性鑑別供試品溶液的製備取本品內容物4g，加乙酸乙酯20ml，超聲波提取20分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。
對照藥材溶液的製備稱取川芎對照藥材0.2g，按供試品溶液製備方法製成對照藥材溶液。
川芎陰性對照溶液的製備除川芎外，按處方配製諸藥，粉碎，稱取4g，照供試品溶液的製備方法操作，作為川芎陰性對照溶液。
照薄層色譜法(《中國藥典》95年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4ul、2ul、4ul，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以苯--乙酸乙脂(9∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相同的位置上顯相同顏色的螢光斑點，而川芎陰性對照色譜中則無此斑點。說明該方法專屬、可靠。
(2)吳茱萸定性鑑別供試品溶液的製備取本品內容物4g，加氯仿20ml，超聲波提取20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。
對照藥材溶液的製備稱取吳茱萸對照藥材0.2g，按供試品溶液製備方法製成對照藥材溶液。
吳茱萸陰性對照溶液的製備除吳茱萸外，按處方配製諸藥，粉碎，稱取4g，照供試品溶液的製備方法操作，作為吳茱萸陰性對照溶液。
照薄層色譜法(《中國藥典》95年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4ul、2ul、4ul，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以正丁醇--冰醋酸--水(7∶1∶2)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相同的位置上顯相同顏色的螢光斑點，而吳茱萸陰性對照色譜中則無此斑點。說明該方法專屬、可靠。
(3)肉桂定性鑑別供試品溶液的製備取本品內容物4g，加無水乙醇20ml，超聲波提取20分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加無水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。
對照品溶液的製備精取桂皮醛對照品1ul，用1ml甲醇溶解製成對照品溶液。
肉桂陰性對照溶液的製備除肉桂外，按處方配製諸藥，粉碎，稱取4g，照供試品溶液的製備方法操作，作為肉桂陰性對照溶液。
照薄層色譜法(《中國藥典》95年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4ul、1ul、4ul，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)--乙酸乙脂(17∶3)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以二硝基苯肼乙醇液。供試品色譜中，在與對照品色譜相同的位置上顯相同顏色的斑點，而肉桂陰性對照色譜中則無此斑點。說明該方法專屬、可靠。
(4)花椒定性鑑別供試品溶液的製備取本品內容物4g，加乙酸乙酯20ml，超聲波提取20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。
對照藥材溶液的製備稱取花椒對照藥材0.2g，按供試品溶液製備方法製成對照藥材溶液。
花椒陰性對照溶液的製備除花椒外，按處方配製諸藥，粉碎，稱取4g，照供試品溶液的製備方法操作，作為花椒陰性對照溶液。
照薄層色譜法(《中國藥典》95年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4ul、2ul、4ul，分別點於同一高效矽膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)--乙酸乙脂(17∶3)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相同的位置上顯相同顏色的螢光斑點，而花椒陰性對照色譜中則無此斑點。說明該方法專屬、可靠。
檢查內容包括水份、裝量差異、崩解時限、衛生學檢查(衛生部)、鑑別等主要依據《中國藥典》95年版一部附錄IL.膠囊劑項下規定。衛生部藥品檢查標準及本文質量標準中規定的鑑別內容、方法。
取裝量差異項下的內容物，混勻，精密稱取2.0g，置100ml具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞緊，稱定重量，超聲提取1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液。另取厚樸酚與和厚樸酚對照品，加甲醇製成每1ml含厚樸酚0.06mg，和厚樸酚0.025mg濃度的混合溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法(中國藥典95年版一部附錄IA)試驗，採用ODS色譜柱，波長294nm，流動相為75％甲醇溶液，流量0.4ml/min，對照品與供試品的進樣量均為10ul，測量相應的吸收面積，計算，即得。
本品每粒含厚樸酚(C18H18O2)與和厚樸酚(C18H18O2)的總量應不少於0.49mg。
固腸膠囊厚樸酚與和厚樸酚含量測定方法學研究固腸膠囊由赤石脂、黃連、黃柏、厚樸等十五味中藥組成，具有澀腸止瀉、散寒清熱、調和氣血之功效。為了加強產品質量控制手段，選用處方中臣藥厚樸所含厚樸酚與和厚樸酚的總量為定量指標，採用HPLC法測定其含量，作為判斷和控制產品質量優劣的依據。
實驗部分一、儀器及藥品1.儀器條件儀器島津LC-6A高效液相色譜儀色譜柱ODS-5 id4.6×75mm(理論塔板數＞3000)檢測器SPD-6AV 0.08AUFS流動相75％甲醇波長294nm進樣量均為10ul柱溫室溫流速0.4ml/min2.試劑與藥品厚樸酚與和厚樸酚對照品均購自中國藥品生物製品檢定所，供含量測定用，批號0729-9605，0730-9204純度檢查精密稱取厚樸酚與和厚樸酚對照品適量，分別加甲醇製成每1ml含厚樸酚0.68mg，和厚樸酚0.27mg濃度的對照品溶液。精密吸取厚樸酚與和厚樸酚對照品溶液各15ml，照高效液相色譜法(中國藥典95年版一部附錄IA)試驗，其純度分別為99.9％和99.0％(見圖1，圖2)。
固腸膠囊樣品由天津達仁堂制廠提供甲醇為色譜純，其它試劑均為分析純。
二、實驗方法考察1.提取條件的考察1.1提取溶媒的選定本實驗對甲醇、乙醇、50％乙醇三種不同的提取溶媒進行考察，結果甲醇的提取率最高，故選擇甲醇為最佳提取溶媒。

1.2提取方法的選擇本實驗採用以甲醇為提取溶媒，以回流、振蕩、超聲波三種方法提取相同時間進行考察，結果以超聲波提取率最高，且操作簡便、省時，峰形及分離度好，故選擇甲醇超聲波提取為最佳提取方法。

1.3提取時間的選定以甲醇為提取溶媒，超聲15，30，60，90min，結果以超聲60min厚樸酚與和厚樸酚總含量最高。

2.測定條件的選擇2.1波長的選擇應用紫外分光光度計(UV-2100)測定厚樸酚與和厚樸酚的紫外吸收光譜圖，確定在294nm處有最大吸收，故選擇294nm為檢測波長(見圖3)。
2.2流動相的選擇參考文獻報導的幾組流動相系統均不適合本樣品，經反覆摸索實驗，以甲醇-水(75∶25)為最佳，和厚樸酚與厚樸酚的保留時間分別為7min和10min左右，樣品中厚樸酚與和厚樸酚的分離效果最好。
3.空白幹擾實驗按樣品處方稱取除厚樸的中藥材適量，按供試品溶液的製備方法製成空白對照溶液，用於樣品相同色譜條件測定，同時測定樣品，結果表明空白對照溶液色譜圖中在厚樸酚與和厚樸酚吸收峰位置上無幹擾(見圖4)。
4.線性關性考察精密稱取厚樸酚與和厚樸酚對照品適量，用甲醇溶解製成每1ml含厚樸酚0.12mg，和厚樸酚0.05mg的混合對照品溶液。在上述色譜條件下，精密吸取對照品溶液1、3、5、7、9、11ul，依次進樣分析。測得吸收面積如下和厚樸酚進樣量(ug)0.05 0.15 0.25 0.35 0.45 0.55吸收面積 11073373636293587319112830137394厚樸酚進樣量(ug)0.12 0.36 0.60 0.84 1.08 1.32吸收面積 2119272036121657 168570 216698264835經統計學計算得和厚樸酚回歸方程為Y＝-814.4+252111.4X(r＝0.9999)，和厚樸酚在0.05～0.55ug之間成線性關係。厚樸酚回歸方程為Y＝-1473.7+202275X(r＝0.9999)，厚樸酚在0.12～1.32ug之間成線性關係。以含量為橫坐標，峰面積積分為縱坐標，繪製標準曲線(見圖5)根據厚樸酚與和厚樸酚標準曲線色譜圖所得回歸方程標準曲線，採用外標一點法進行定量。
5.精密度試驗對同一厚樸酚與和厚樸酚混合對照品溶液連續進樣5次，每次5u1，測定吸收面積分別為和厚樸酚7601276472764947595276052變異係數RSD(％)＝0.35厚樸酚 146425 147270 147506 146060 146343變異係數RSD(％)＝0.436.重複性試驗取同一批樣品，精密稱取6份，按擬定的含量測定方法進行提取、分析、測定，結果為

7.回收率試驗取厚樸酚含量1.52mg/g，和厚樸酚含量0.50mg/g的固腸膠囊樣品，傾出內容物混勻，精密稱取6份，每份1g，分別加入厚樸酚與和厚樸酚混合對照品溶液(厚樸酚0.153mg/ml，和厚樸酚0.050mg/ml)10ml，依法提取、測定，結果如下厚樸酚回收率測定結果(n＝6)

和厚樸酚回收率測定結果(n＝6)

8.穩定性試驗將製備好的供試品溶液進行分析，以後每2小時進樣一次，重複4次，吸收面積積分值如下

結果表明，供試品溶液的吸收面積在8小時內基本無變化，說明樣品穩定。
9.固腸膠囊中厚樸酚與和厚樸酚總含量的測定供試品溶液的製備取本品10粒，傾出內容物，混勻，精密稱取2.0g，置100ml具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞緊，稱定重量，超聲波提取1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45um濾膜過濾，即得。
對照品溶液的製備稱取厚樸酚與和厚樸酚對照品，加甲醇製成每1ml含厚樸酚0.06mg，和厚樸酚0.025mg濃度的混合溶液，即得。依照擬定方法，共測定了10批固腸膠囊的含量，結果如下

本品含厚樸以厚樸酚與和厚樸酚的總量計算不得低於1.3mg/g。「質量標準正文中規定本品每粒含厚樸酚(C18H18O2)與和厚樸酚(C18H18O2)的總量應不少於0.49mg。」經過對精密度、重現性的試驗考察，確定了採用HPLC法測定含量，重現性好，能快速準確的檢測藥品的質量。
發明效果選用處方中臣藥厚樸所含厚樸酚與和厚樸酚的總量為定量指標，採用HPLC法測定其含量，並在色譜條件與系統適用性試驗及供試品溶液的製備方面作出合理的選擇，作為判斷和控制產品質量優劣的依據，加強了產品質量控制手段。


圖1是厚樸酚標準曲線圖。
圖2是和厚樸酚標準曲線圖。
圖3是厚樸酚、和厚樸酚紫外吸收光譜圖。
圖4是厚樸酚與和厚樸酚標準品、固腸膠囊樣品及厚樸陰性色譜圖。
圖5是厚樸酚與和厚樸酚標準曲線色譜圖。
具體實施例方式
實施例1優選重量配比的原料製備膠囊劑的方法用赤石脂(煅)500g、黃連250g、黃柏250g、訶子(去核)250g、肉豆蔻(煨)250g、厚樸(炙)250g、建曲250g、吳茱萸(制)200g、肉桂200g、乾薑250g、花椒200g、川芎200g、牡蠣(煅)200g、五倍子250g、烏梅(去核)250g製法將以上十五味生藥按處方量之比配伍，經挑選去雜物，水洗去泥沙後，烘乾。混勻，加適量水，制顆粒，乾燥，整粒，分裝入膠囊，製成10000粒，即得。每粒膠囊含生藥0.375g，應出成品10000粒，0.375g/粒。
本發明藥物功能與主治散寒清熱、調和氣血、澀腸止瀉。用於寒熱錯雜、虛實互見的腸易激症候群。症見大便清稀或夾有少許白粘凍，或完谷不化，甚則滑脫不禁，腹痛腸鳴，畏寒肢冷，腰膝酸軟。用法與用量口服，一次4粒，一日3次。
權利要求
1.一種治療慢性洩瀉的藥物，其特徵在於是由下述重量配比的原料製成赤石脂(煅)450-550份 黃連225-275份黃柏225-275份訶子(去核)225-275份肉豆蔻(煨)225-275份 厚樸(炙)225-275份建曲225-275份吳茱萸(制)180-220份肉桂180-220份乾薑225-275份花椒180-220份川芎180-220份牡蠣(煅)180-220份五倍子225-275份烏梅(去核)225-275份。
2.根據權利要求1所述的治療慢性洩瀉的藥物，其特徵在於是由下述優選重量配比的原料製成赤石脂(煅)500份 黃連250份 黃柏250份訶子(去核)250份 肉豆蔻(煨)250份厚樸(炙)250份建曲250份吳茱萸(制)200份肉桂200份乾薑250份花椒200份 川芎200份牡蠣(煅)200份五倍子250份烏梅(去核)250份。
3.根據權利要求1所述的治療慢性洩瀉的藥物，其特徵在於是由下述優選重量配比的原料製成膠囊赤石脂(煅)500份、黃連250份、黃柏250份、訶子(去核)250份、肉豆蔻(煨)250份、厚樸(炙)250份、建曲250份、吳茱萸(制)200份、肉桂200份、乾薑250份、花椒200份、川芎200份、牡蠣(煅)200份、五倍子250份、烏梅(去核)250份，將以上十五味生藥按處方量之比配伍，經挑選去雜物，水洗去泥沙後，烘乾，粉碎成細粉，混勻，加適量水，制顆粒，乾燥，整粒，分裝入膠囊，即得。
4.一種治療慢性洩瀉的藥物的質量標準，其特徵在於本品每粒含厚樸酚C18H18O2與和厚樸酚的總量應不少於0.49mg。
5.一種治療慢性洩瀉的藥物的檢驗方法，其特徵在於其厚樸以厚樸酚(C18H18O2)與和厚樸酚(C18H18O2)的含量測定方法是含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；甲醇-水(75∶25)為流動相；檢測波長294nm。理論板數按厚樸酚峰計算應不低於3000；對照品溶液的製備精密稱取厚樸酚12mg與和厚樸酚5mg，置100ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含厚樸酚0.06mg，和厚樸酚0.025mg)；供試品溶液的製備取裝量差異項下的內容物，混勻，精密稱取2.0g，置100ml具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，塞緊，稱定重量，超聲提取1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
全文摘要
本發明涉及消化系統藥物的技術領域，具體地說是以中藥材提取物為原料製成的一種治療慢性洩瀉的藥物。是由赤石脂、黃連、黃柏、訶子、肉豆蔻、厚樸、建曲、吳茱萸、肉桂、乾薑、花椒、川芎、牡蠣、五倍子、烏梅為原料製成膠囊，並在膠囊質量標準中設置厚樸定量指標及其含量測定方法。固腸膠囊具有澀腸止瀉、散寒清熱、調和氣血的功能，臨床治療慢性洩瀉、寒熱錯雜、虛實互見證有效，藥物療效不受年齡、病程、病情的影響，臨床試用對心肝腎無損害，並未發現其它不良反應。
文檔編號G01N30/02GK1911427SQ200510014980
公開日2007年2月14日 申請日期2005年9月5日 優先權日2005年9月5日
發明者徐曉陽 申請人:天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂製藥廠