具有改進穩定性的聚合物膠束組合物的製作方法

2023-12-05 18:01:31 2

專利名稱：具有改進穩定性的聚合物膠束組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及聚合物膠束組合物。更具體地說，本發明涉及包括由親水性嵌段和疏水性嵌段組成的兩親性嵌段共聚物和具有至少一個末端羧基的聚乳酸衍生物的聚合物膠束組合物。
背景技術：
最近，使用可生物降解的聚合物的納米顆粒和聚合物膠束體系已經被報導是非常有用的技術，它們能夠改變靜脈內施用的藥物的活體內分布，因此減少了藥物的副作用並改進它們的功效。這些系統提供一些優點，如藥物的特定細胞標靶以及釋放的控制。它們還具有與體液的良好相容性並改進弱水溶性的藥物的溶解度和生物利用率。
由物理方式將藥物截留在由親水性組分和疏水性組分組成的嵌段共聚物中來製備嵌段共聚物膠束的方法已公開在EP 0 583,955A2，和JP 206,815/94中。所使用的嵌段共聚物是A-B型二嵌段共聚物，它包括作為親水性A組分的聚氧化乙烯和作為疏水性B組分的具有疏水性官能團的聚胺基酸或它的衍生物。包括以上嵌段共聚物的聚合物膠束能夠以物理方式將藥物，例如阿黴素(adriamycin)，抗炎吲哚酸(indomethacin)等引入到聚合物膠束的內芯中，然後用作藥物釋放載體。然而，這些聚合物膠束是由在活體內不易降解的嵌段共聚物組成。另外，該嵌段共聚物具有低的生物相容性，它在活體內施用時能夠引起所不希望有的副作用。
更多的工作已經投入到具有改進的穩定性和功效，並截留弱水溶性的藥物的可生物降解的和生物相容的核殼型藥物載體的開發中。化學方式束縛的聚合物膠束的製備方法，其中聚合物是包括作為殼的親水性聚氧化乙烯和作為核的在水溶液中交聯的疏水性可生物降解的聚合物的核殼型聚合物，公開在EP0,552,802A2中。然而，這一聚合物膠束難以製備，因為交聯劑必須被引入到A-B型二嵌段或A-B-A型三嵌段共聚物的疏水性組分中，這樣核形成用的聚合物具有穩定結構。同時，使用從來沒有用於人體中的交聯劑會引起安全方面的關注。
另一方面，為了將疏水性藥物增溶化，已經報導了由包括聚亞烷基二醇衍生物的親水性聚合物和疏水性可生物降解的聚合物如脂肪酸聚酯或聚胺基酸的二-或三嵌段共聚物組成的聚合物膠束。US專利No.5,449,513公開二嵌段共聚物，它包括作為親水性聚合物的聚乙二醇，和作為疏水性聚合物的聚胺基酸衍生物例如聚苄基天冬氨酸，等。這一二嵌段共聚物能夠使疏水性抗癌劑，例如亞德利亞黴素，或消炎藥，例如抗炎吲哚酸增溶化。然而，該聚胺基酸衍生物不能在活體內水解，因此由於免疫反應而引起副作用。
US專利No.5,429,826公開了包括親水性聚亞烷基二醇和疏水性聚乳酸的二-或多嵌段共聚物。具體地說，上述專利描述了通過將二-或多嵌段共聚物在水溶液中膠束化來使聚合物膠束穩定化的方法，其中丙烯酸衍生物鍵接到二-或多嵌段共聚物的端基上，和然後交聯該聚合物而形成該膠束。以上方法能夠實現該聚合物膠束的穩定化，但是交聯聚合物無法降解，和因此，不能在活體內應用。上述聚合物膠束能夠在具有中性pH的水溶液中將大量的弱水溶性的藥物實施增溶化，但缺點是它們在短時間內釋放藥物。
鑑於上述情況，屬於生物相容性和可生物降解性的用於疏水性藥物分配的改進型聚合物膠束組合物的開發將被認識到和聯想到。因此，本發明提供了這一改進的聚合物膠束組合物，它是生物相容性和可生物降解性的和它能夠有效地分配疏水性藥物，但它的穩定性沒有下降。

發明內容
本發明涉及包括兩親性嵌段共聚物和含有至少一個羧端基的聚乳酸衍生物的聚合物膠束組合物。本發明還涉及聚合物組合物，其中聚乳酸衍生物的羧端基用二-或三-價的金屬離子束縛。本發明的組合物能夠在體液或水溶液中形成穩定的聚合物膠束或納米顆粒。從本發明的組合物形成的膠束或納米顆粒具有親水性外殼和疏水性內芯，其中大量的疏水性藥物以物理方式捕獲。本發明的含藥物的膠束和納米顆粒在施用之後在血流中具有較長的停留時間，並能夠利用來製造各種藥物配製料。本發明的附加特點和優點可以從下面的詳細說明，再結合附圖，而變得清楚，它們一起舉例說明本發明的特徵。
附圖的簡述

圖1是由單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)在含水環境中所形成的聚合物膠束的示意圖。
圖2是由羧酸鈉衍生化的D，L-聚乳酸在含水環境中所形成的聚合物膠束的示意圖。
圖3是由單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)和羧酸鈉衍生化的D，L-聚乳酸的混合物在含水環境中所形成的聚合物膠束的示意圖。
圖4是圖3的Ca2+-束縛型聚合物膠束的示意圖。
圖5是含有被捕獲在膠束的疏水性芯之內的疏水性藥物的Ca2+-束縛聚合物膠束的示意圖。
圖6是顯示了在給藥之後的各個時間間隔中含有藥物的Ca2+-束縛型聚合物膠束的血漿藥物濃度的曲線圖。
圖7說明了Ca2+-束縛型聚合物膠束，Cremophor EL和Tween 80製劑各自的血漿濃度曲線。
圖8a顯示了使用人類前列腺癌細胞系PPC-1的含有藥物的Ca2+-束縛型聚合物膠束在小鼠體內中的抗癌效果。
圖8b顯示了使用人類結腸癌細胞系HT-29的含有藥物的Ca2+-束縛型聚合物膠束在小鼠體內中的抗癌效果。
實施本發明的最佳模式在本發明的聚合物組合物和它的使用和製造方法被公開和描述之前，應該理解本發明不局限於具體的構型、工序和這裡所公開的材料，因為這些構型、工序和材料多少發生改變。也應該理解的是，這裡所使用的術語僅僅用於描述具體實施方案的目的而沒有限制意義，因為本發明的範圍僅僅受到所附權利要求和其等同物的限制。
必須指出，在本說明書和權利要求中所使用的單數形式也包括複數指示物，除非上下文另外清楚地規定。因此，例如，對於含有「端基」的聚合物的引用包括對於兩個或更多此類基團的引用，和對於「疏水性藥物」的引用包括兩種或更多種此類藥物的引用。
在描述和作為權利來要求本發明時，下列術語將根據下面所給出的定義來使用。
這裡使用的術語「生物活性劑」或「藥物」或任何其它類似術語是指適合由現有技術領域中先前已知的方法和/或由本發明中所教導的方法所施用並誘導所預期的生物或藥理學效果的任何化學或生物材料或化合物。此類效果包括但不限於(1)對生物體有預防作用並防止所不希望有的生物效應如防止感染，(2)減輕由疾病所引起的症狀，例如，減輕由疾病引起的疼痛或發炎，和/或(3)減輕，減少，或完全消除生物體的疾病。該效果可以是局部的，如保證局部麻醉效果，或是系統性的。
這裡使用的術語「可生物降解的」或「生物降解」被定義為利用增溶化水解作用或利用生物學上形成的實體(它可以是酶或其它生物體產品)將材料轉化成不太複雜的中間體或最終產物。
這裡使用的術語「生物相容的」是指利用增溶化水解作用或利用生物學上形成的實體(它可以是酶或其它生物體產品和它對人體沒有不利影響)所形成的材料或中間體或最終產物。
「聚(丙交酯)」或「PLA」是指從乳酸的縮合或通過丙交酯的開環聚合所衍生的聚合物。術語「丙交酯(lactide)」和「乳酸(內)酯(lactate)」可以互換使用。
這裡使用的「有效量」指在合理的風險/效益比率下足以提供所預期的局部或系統效果和性能的生物活性劑的量，不管經歷任何醫學處理。
這裡使用的「給藥」和類似術語是指將組合物分配到所要治療的個體中，使得組合物能夠系統地循環。優選，本發明的組合物經由皮下，肌內，透皮，口服，透黏膜，靜脈內或腹腔途徑給藥。可供使用的可注射劑能夠以普通形式製備，作為液體溶液或懸浮液，或呈現固體形式，它適合在注射之前在液體中製備為溶液或懸浮液，或作為乳液。供施用的合適的賦形劑包括，例如，水，鹽水，葡萄糖，甘油，乙醇等；和如果需要，少量的輔助物質如溼潤或乳化劑，緩衝劑等。對於口服，它能夠配製成各種形式，如溶液，片劑，膠囊劑等。
現在參考舉例的實施方案，特定的語言在這裡用於描述它。仍然應該理解，本發明的範圍的限制不是有意的。這裡所描述的本發明特徵的改變和進一步改進，和這裡所描述的本發明的原理的附加應用，這些是相關技術領域中的技術人員所能想到的並具有本公開物的所有權，將是考慮在本發明範圍內。
本發明的一個方面是能夠截留大量疏水性藥物和在含水環境中形成穩定的聚合物膠束或納米顆粒的聚合物組合物。具體地說，本發明提供聚合物組合物，它包括由親水性嵌段和疏水性嵌段組成的兩親性嵌段共聚物，和具有羧端基的聚乳酸衍生物，其中該組合物在含水環境中形成穩定的聚合物膠束。
本發明的另一個方面提供聚合物組合物，它包括由親水性嵌段和疏水性嵌段組成的兩親性嵌段共聚物，和結合了二-或三-價的金屬離子的具有羧端基的聚乳酸衍生物。
本發明還提供藥物組合物，它包括由以上聚合物組合物和截留在其中的疏水性藥物所形成的聚合物膠束或納米顆粒。本發明此外提供製備上述藥物組合物的方法。
本發明的兩親性嵌段共聚物優選是包括親水性A嵌段和疏水性B嵌段的A-B型二嵌段共聚物。兩親性嵌段共聚物，當放入水相中時，形成核殼型聚合物膠束，其中疏水性B嵌段形成了該核和親水性A嵌段形成了該殼。優選，親水性A嵌段是選自聚亞烷基二醇，聚乙烯醇，聚乙烯基吡咯烷酮，聚丙烯醯胺和它的衍生物中的成員。更優選，親水性A嵌段是選自單甲氧基聚乙二醇，單乙醯氧基聚乙二醇，聚乙二醇，聚乙二醇共丙二醇和聚乙烯基吡咯烷酮中的成員。優選，親水性A嵌段具有500到50,000道爾頓的數均分子量。更優選，親水性A嵌段具有1,000到20,000道爾頓的數均分子量。
本發明的兩親性嵌段共聚物的疏水性B嵌段是選自聚酯，聚酸酐，聚胺基酸，聚原酸酯和聚膦嗪中的高度生物相容的和可生物降解的聚合物。更優選，疏水性B嵌段是選自聚丙交酯，聚乙交酯，聚己酸內酯，聚二噁烷-2-酮，聚乳酸共乙交酯，聚乳酸共二噁烷-2-酮，聚乳酸共己內酯，和聚乙醇酸共己內酯中的一種。疏水性B嵌段的羧端基能夠被脂肪酸如丁酸，丙酸，乙酸，硬脂酸和棕櫚酸取代。優選，兩親性嵌段共聚物的疏水性B嵌段具有500到50,000道爾頓的數均分子量。更優選，兩親性嵌段共聚物的疏水性B嵌段具有1,000到20,000道爾頓的數均分子量。
本發明的兩親性嵌段共聚物的親水性A嵌段與疏水性B嵌段的比率優選是在2∶8到8∶2範圍內，和更優選在4∶6到7∶3範圍內。如果親水性A嵌段的含量太低，則聚合物不會在水溶液中形成聚合物膠束，而如果該含量太高，則所形成的聚合物膠束是不穩定的。
本發明的聚乳酸衍生物的一端以共價鍵方式鍵接於至少一種羧酸或羧酸鹽上。本發明的聚乳酸衍生物的另一端能以共價鍵方式鍵接於選自羥基，乙醯氧基，苯甲醯氧基，癸醯氧基和棕櫚醯氧基中的官能團上。該羧酸或羧酸鹽在pH4或更高的水溶液中用作親水性基團並使聚乳酸衍生物在其中形成聚合物膠束。當本發明的聚乳酸衍生物溶於水溶液中時，在聚乳酸衍生物中存在的親水性和疏水性組分應該平衡，以形成聚合物膠束。因此，本發明的聚乳酸衍生物的數均分子量優選是在500到2,500道爾頓的範圍內。聚乳酸衍生物的分子量能夠在製備過程中通過控制反應溫度、時間等來調節。
聚乳酸衍生物優選由下面通式表示RO-CHZ-[A]n-[B]m-COOM (I)其中A是-COO-CHZ-；B是-COO-CHY-，-COO-CH2CH2CH2CH2CH2-或-COO-CH2CH2OCH2；R是氫原子，乙醯基，苯甲醯基，癸醯基，棕櫚醯基，甲基或乙基；Z和Y各是氫原子，甲基，或苯基；M是H，Na，K，或Li；n是1到30的整數，和m是0到20的整數。
本發明的聚乳酸衍生物的一端以共價鍵方式鍵接於羧基或它的鹼金屬鹽上，優選，它的鹼金屬鹽上。在形成聚乳酸衍生物的鹼金屬鹽中的金屬離子是單價的，例如鈉，鉀或鋰。金屬離子鹽形式的聚乳酸衍生物在室溫下是固體，並且是非常穩定的，因為它的相對中性pH。
更優選地，聚乳酸衍生物是由下面通式表示RO-CHZ-[COO-CHX]p-[COO-CHY′]q-COO-CHZ-COOM (II)其中X是甲基；Y』是氫原子或苯基；p是0到25的整數；q是0到25的整數，前提條件是，p+q是5到25的整數；R，Z和M與在通式(I)中定義相同。
另外，下列通式(III)和(IV)的聚乳酸衍生物也適合於本發明RO-PLA-COO-W-M′ (III)其中W-M′是 或 該PLA是選自D，L-聚乳酸，D-聚乳酸，聚扁桃酸，D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物，D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物，D，L-乳酸和己內酯的共聚物，以及D，L-乳酸和1，4-二噁烷-2-酮的共聚物中的一種；R和M與在通式(I)定義相同。
S-O-PLA-COO-Q(IV)其中S是 L』是-NR1-或-O-；R1是氫原子或C1-C10烷基；Q是CH3，CH2CH3，CH2CH2CH3，CH2CH2CH2CH3或CH2C6H5；a是0到4的整數；b是1到10的整數；R和M與通式(I)中定義相同；和PLA與通式(III)中定義相同。
本發明的聚合物組合物可以含有5-95wt％的兩親性嵌段共聚物和5-95wt％的聚乳酸衍生物，基於兩親性嵌段共聚物和聚乳酸衍生物的總重量。優選，本發明的聚合物組合物含有20-80wt％的兩親性嵌段共聚物和20-80wt％的聚乳酸衍生物。更優選，本發明的聚合物組合物含有50-80wt％的兩親性嵌段共聚物和20-50wt％的聚乳酸衍生物。
本發明的聚乳酸衍生物單獨能夠在pH4或更高的水溶液中形成膠束，然而，聚合物組合物能夠在水溶液中形成膠束，與溶液的pH無關。因為可生物降解的聚合物通常在10或更高的pH下水解，本發明的聚合物組合物可以在1到10範圍內的pH，優選在4到8範圍內的pH下使用。從本發明的聚合物組合物製備的膠束或納米顆粒的粒度可以調節在1到400nm範圍內，和優選在5到200nm範圍內，這取決於聚合物的分子量以及聚乳酸衍生物與兩親性嵌段共聚物的比率。
如在圖1到圖3中所示，聚乳酸衍生物或兩親性嵌段共聚物單獨以及它們的混合物可以在水溶液中形成膠束。1表示弱水溶性的藥物；10表示單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)；11表示單甲氧基聚乙二醇(mPEG)；12表示聚丙交酯(PLA)；20表示D，L-聚(乳酸)的鈉鹽；21表示D，L-聚乳酸和22表示羧酸鈉。然而，本發明的聚合物組合物顯著地改進該藥物負載效率和在水溶液中形成的膠束的穩定性，與從聚乳酸衍生物或兩親性嵌段共聚物單獨形成的膠束相比。
根據下列實施例，由聚乳酸衍生物單獨組成的聚合物膠束可以含有至多25wt％的紫杉酚，但是紫杉酚是在37℃下1小時內釋放在水溶液中。另外，由兩親性嵌段共聚物單獨組成的聚合物膠束可以含有5wt％或5wt％以下的紫杉酚，而且紫杉酚是在37℃下6小時內釋放在水溶液中。相反，由包括兩親性嵌段共聚物和聚乳酸衍生物的本發明的組合物組成的聚合物膠束可能含有至多25wt％的紫杉酚，但是紫杉酚在37℃下24小時內沒有釋放在水溶液中。
藥物在聚合物膠束中的負載效率與構成在水溶液中所形成的膠束的疏水性芯的疏水性嵌段的份額成比例。聚合物膠束在水溶液中的穩定性取決於它們在水溶液中的動態平衡，即在聚合物膠束的狀態和溶於水中的單種聚合物之間的平衡常數。聚乳酸衍生物是非常疏水性的，因為親水性組分，即羧酸端基，佔聚合物的10％或10％以下。因此，由聚乳酸衍生物單獨形成的聚合物膠束可以含有大量的疏水性藥物，但是所形成的膠束是非常不穩定的，歸因於在聚合物膠束的末端存在的羧基陰離子基團之間的靜電斥力。另一方面，從單甲氧基聚乙二醇(Mn5,000道爾頓)和聚丙交酯(Mn4,000道爾頓)的兩親性嵌段共聚物形成的膠束難以含有大量的疏水性藥物，因為疏水性嵌段僅僅佔聚合物的大約40％。然而，該膠束是非常穩定的，因為兩親性嵌段共聚物的親水端基是非離子的聚乙二醇，它沒有顯示靜電斥力，與聚乳酸衍生物相反。因此，通過將兩親性嵌段共聚物和聚乳酸衍生物相結合，本發明提供了聚合物膠束組合物，後者使大量的弱水溶性的藥物增溶化並保持穩定性24小時或更多。
在本發明的一個實施方案中，聚乳酸衍生物的羧端基被二-或三-價的金屬離子結合或束縛。金屬離子束縛的聚合物組合物能夠通過向兩親性嵌段共聚物和聚乳酸衍生物的聚合物組合物中添加二-或三-價的金屬離子來製備。通過改變為了結合或束縛聚乳酸衍生物的羧端基所添加的二-或三-價的金屬離子的量可以形成聚合物膠束或納米顆粒。
該二-或三-價的金屬離子優選是選自Ca2+，Mg2+，Ba2+，Cr3+，Fe3+，Mn2+，Ni2+，Cu2+，Zn2+，和Al3+。該二-或三-價的金屬離子能夠以硫酸鹽，氯化物，碳酸鹽，磷酸鹽或羥基化物的形式，和優選以CaCl2，MgCl2，ZnCl2，AlCl3，FeCl3，CaCO3，MgCO3，Ca3(PO4)2，Mg3(PO4)2，AlPO4，MgSO4，Ca(OH)2，Mg(OH)2，Al(OH)3，或Zn(OH)2的形式被添加到兩親性嵌段共聚物和聚乳酸衍生物的聚合物組合物中。
如在圖4和5中所示，當在聚乳酸衍生物的羧端基上的單價金屬離子被二-或三-價的金屬離子取代而形成金屬離子鍵時，所形成的膠束或納米顆粒具有改進的穩定性。
聚合物膠束或納米顆粒能夠通過改變所添加的金屬離子的當量來製備。具體地說，如果二價金屬離子以相對於羧端基的0.5當量或更低當量添加，則與聚乳酸衍生物的羧端基形成鍵的金屬離子是不夠的的，和因此，形成了聚合物膠束。如果二價金屬離子以0.5當量或更高添加，則與聚乳酸衍生物的羧端基形成鍵的金屬離子足以牢固地束縛該膠束，因此形成了納米顆粒。
另外，藥物從聚合物膠束或納米顆粒中的釋放速度可通過改變所添加的金屬離子的當量值來調節。如果該金屬離子是以相對於聚乳酸衍生物的羧基而言的1當量或1當量以下存在，則供結合於聚乳酸衍生物的羧端基上的數量會減少，因此，該藥物釋放速度會提高。如果該金屬離子是1當量或1當量以上存在，則供結合於聚乳酸衍生物的羧端基上的數量會增加，因此，該藥物釋放速度會下降。因此，為了提高在血液中的藥物釋放速度，該金屬離子以較小的當量數使用，而為了降低藥物釋放速度，該金屬離子以較大的當量數使用。
本發明的金屬離子束縛的聚合物組合物可以含有5-95wt％的兩親性嵌段共聚物，5-95wt％的聚乳酸衍生物和0.01-10當量的二-或三-價的金屬離子，相對於聚乳酸衍生物的羧端基的當量。優選地，它們含有20-80wt％的兩親性嵌段共聚物，20-80wt％的聚乳酸衍生物和0.1-5當量的該二-或三-價的金屬離子，和優選地，20-60wt％的兩親性嵌段共聚物，40-80wt％的聚乳酸衍生物和0.2-2當量的該二-或三-價的金屬離子。
本發明還涉及藥物組合物，它含有從本發明的聚合物組合物形成的聚合物膠束或納米顆粒和截留在其中的弱水溶性的藥物。本發明的藥物組合物保證疏水性藥物的提高的血漿濃度並能夠用於各種藥物配製料中。
如圖3到5中所示，弱水溶性的藥物與兩親性嵌段共聚物和聚乳酸衍生物的聚合物組合物混合而形成在其中含有藥物的聚合物膠束。為了改進它的穩定性，二-或三-價的金屬離子可以與聚乳酸衍生物的羧端基形成金屬離子鍵，因此形成含有藥物的聚合物膠束和納米顆粒。
該術語「弱水溶性的藥物」或「疏水性藥物」，是指具有50mg/ml或更低的水溶性的任何藥物或生物活性劑。這些包括抗癌劑，抗生素，消炎藥，麻醉藥，激素，抗高血壓藥，治療糖尿病的試劑，抗高血脂劑，抗病毒藥，治療帕金森氏病的試劑，抗痴呆劑，止吐藥，免疫抑制劑，抗潰瘍劑，通便劑，和抗瘧劑。疏水性藥物的例子包括抗癌劑如紫杉酚，喜樹鹼，鬼臼亞乙苷，亞德利亞黴素，dausorubicin，idarubicin，胞嘧啶阿拉伯糖苷等；免疫抑制劑如環孢菌素A(cyclosporine A)等。甾族激素如睪丸激素，雌二醇，雌激素，黃體酮，triameinolon乙酸鹽，地塞米松等和消炎藥如tenoxicam，pyroxicam，抗炎吲哚酸，COX-II抑制劑等，它們具有非常快的從血液中的排洩速率，也是可用於本發明中的合適的疏水性藥物的例子。
弱水溶性的藥物的含量優選是在0.1-30wt％範圍內，基於包括兩親性嵌段共聚物，聚乳酸衍生物，和疏水性藥物的藥物組合物的總重量。含有藥物的聚合物膠束或納米顆粒的尺寸可以調節在5到400nm範圍內，和優選在10到200nm範圍內，這取決於聚合物的分子量以及兩親性嵌段共聚物與聚乳酸衍生物的比率。
對於弱水溶性的藥物的口服或腸胃外給藥，該藥物截留在聚合物膠束或納米顆粒中，因此增溶化。特別地，該金屬離子-束縛聚合物膠束或納米顆粒長時間保留在血流中並在靶疾患處積累。該藥物從膠束的疏水性芯中釋放出來而顯示藥理學的效果，同時該膠束髮生降解。
對於胃腸外給藥，該藥物可以經由靜脈內，肌內注射，腹膜內，透鼻，直腸內，眼內，或肺內來給藥。對於口服給藥，藥物與本發明的聚合物膠束混合，然後以片，膠囊，或水溶液的形式給藥。
根據本發明的金屬離子束縛的聚合物膠束或納米顆粒具有優良的穩定性，因此，能夠提高藥物的血漿濃度。如在下面實驗和圖6中所示，其中紫杉酚截留在金屬離子束縛的聚合物膠束內的組合物1在血流中具有更長的藥物停留時間，因此更長時間維持有效血漿藥物濃度，與其中紫杉酚截留在由僅僅嵌段共聚物組成的聚合物組合物中的組合物3，和其中紫杉酚截留在嵌段共聚物和聚乳酸的混合聚合物膠束中的組合物2相比而言。
如在下列實驗和圖7和8中所示，組合物4，其中紫杉酚截留在金屬離子束縛的聚合物組合物中，具有在血流中的更長時間的藥物停留時間，因此更長時間維持有效血漿藥物濃度，與市售的紫杉酚配製料，Taxol(組合物5)相比而言，並且對於癌症生長具有高抑制率，因此顯示出高抗癌活性。
此外，本發明包括製備上述藥物組合物的方法。具體地說，如圖3和5中所示，兩親性嵌段共聚物，聚乳酸衍生物，和弱水溶性的藥物溶於有機溶劑中，然後，有機溶劑從中蒸發。其後，所獲得的混合物被添加到水溶液，以製備含有弱水溶性的藥物的混合聚合物膠束。金屬離子束縛的聚合物膠束或納米顆粒可通過向混合聚合物膠束中添加二-或三-價的金屬離子，因此束縛聚乳酸衍生物的羧端基來製備。
聚乳酸衍生物，兩親性嵌段共聚物，和弱水溶性的藥物按照某種比率能夠溶於選自丙酮，乙醇，甲醇，乙酸乙酯，乙腈，二氯甲烷，氯仿，乙酸和二噁烷中的一種溶劑或多種混合溶劑中。有機溶劑能夠從中除去而製備弱水溶性的藥物和聚合物的均勻混合物。弱水溶性的藥物和本發明的聚合物組合物的均勻混合物能夠在0-80℃下添加到pH4-8的水溶液中，獲得含有弱水溶性的藥物的混合聚合物膠束水溶液。上述含有藥物的聚合物膠束水溶液然後被凍幹以製備固體形式的聚合物膠束組合物。
含有0.001-2M的二-或三-價金屬離子的水溶液被添加到含有弱水溶性的藥物的混合聚合物膠束水溶液中。混合物在室溫下緩慢地攪拌0.1-1小時，然後凍幹以製備固體形式的金屬離子束縛的聚合物膠束或納米顆粒組合物。
下列實施例將使本領域中的那些技術人員更清楚地理解如何實施本發明。需要理解的是，儘管本發明已經結合後面跟著的本發明的優選的特定實施方案進行了描述，但本意是說明本發明而不是限制本發明的範圍。本發明的其它方面對於本發明所屬技術領域中的那些技術人員是顯而易見的。
實施例製備例1-11聚乳酸衍生物的合成由2-羥基羧酸衍生物在催化劑不存在下，在升高的溫度下(100-200℃)和在減壓下(100到0.1mmHg)達6到24小時的聚合反應來製備聚合物，隨後提純。
製備例1D，L-聚乳酸(PLA-COOH)的合成1將一百克的D，L-乳酸引入到250ml三頸圓底燒瓶中。該燒瓶裝有攪拌器，然後在80℃的油浴中加熱。該反應利用由真空吸氣器降至25mmHg的壓力進行1小時，以除去多餘水分。該反應然後在150℃的溫度下在25mmHg的減壓下進行6小時。所獲得的產物被添加到1升的蒸餾水中以沉澱該聚合物。沉澱的聚合物然後添加到蒸餾水中以除去可溶於pH4或pH4以下的水溶液中的低分子量聚合物。沉澱的聚合物然後被添加到1升的蒸餾水中，水溶液的pH通過向其中滴加碳酸氫鈉被調節至6到8，以溶解聚合物。水不溶性的聚合物被分離和通過離心作用或過濾除去。將1N鹽酸溶液滴加到其中，聚合物在水溶液中沉澱。沉澱的聚合物用蒸餾水洗滌兩次，分離和減壓乾燥，獲得高度粘性的液體(78g的D，L-聚乳酸，產率78％)。聚合物的數均分子量是540道爾頓，由1H-NMR譜測定。
製備例2-4D，L-聚乳酸(PLA-COOH)的合成2
根據與製備例1中相同的程序獲得D，L-聚乳酸，只是反應溫度、壓力和時間的控制如在表1中所列。從以上製備例1-4合成的D，L-聚乳酸的數均分子量和產率示於下表1中。
表

*產率＝(所獲得的聚合物/所使用的單體)×100製備例5D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的合成1(PLGA-COOH)將五十五克的D，L-乳酸(0.6mol)和45克乙醇酸(0.6mol)一起引入到250ml三頸圓底燒瓶中。進行與製備例1中同樣的程序，只是在150℃的溫度下和在10mmHg的減壓下進行反應12小時。
製備例6D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的合成2(PLGA-COOH)將七十三克的D，L-乳酸(0.8mol)和27克乙醇酸(0.35mol)一起引入到250ml三頸圓底燒瓶中。進行與製備例1中同樣的程序，只是在160℃的溫度下和在10mmHg的減壓下進行反應12小時。
製備例7D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的合成3(PLGA-COOH)將九十一克的D，L-乳酸(1.0mol)和9克乙醇酸(0.12mol)一起引入到250ml三頸圓底燒瓶中。進行與製備例1中同樣的程序，只是在160℃的溫度下和在10mmHg的減壓下進行反應12小時。
製備例8D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的合成4(PLGA-COOH)將七十三克的D，L-乳酸(0.8mol)和27克乙醇酸(0.35mol)引入到250ml三頸圓底燒瓶中。進行與製備例1中同樣的程序，只是在180℃的溫度下和在5mmHg的減壓下進行反應24小時。
在上述製備例5到8中合成的共聚物示於表2中。
表2

製備例9D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物的合成(PLMA-COOH)將七十五克的D，L-乳酸(0.83mol)和25克D，L-扁桃酸(0.16mol)一起引入到250ml三頸圓底燒瓶中。進行與製備例1中同樣的程序，只是在180℃的溫度下和在10-20mmHg的減壓下進行反應5小時。獲得54g(產率54％)的D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物。D，L-乳酸與扁桃酸的摩爾比率是85/15。聚合物的數均分子量是1,096道爾頓，由1H-NMR譜測定。
製備例10乙醯氧基D，L-聚乳酸衍生物(AcO-PLA-COOH)的合成50g的從製備例2製得的D，L-聚乳酸(Mn1,140道爾頓)，和20ml的氯乙酸一起被引入到250ml圓底燒瓶中。該燒瓶配備冰箱，反應混合物在氮氣流下回流4小時。過多的氯乙酸通過蒸餾被除去，然後，反應產物被添加到冰和水的混合物中。全部混合物慢慢攪拌以沉澱聚合物。沉澱的聚合物被分離，用蒸餾水洗滌兩次，然後，溶於無水丙酮中。在其中添加無水硫酸鎂以除去多餘水分。所獲得的產物經過濾被除去硫酸鎂。丙酮通過使用真空蒸發器被除去，據此獲得液體乙醯氧基D，L-聚乳酸(46g，產率92％)。利用1H-NMR，該乙醯氧基團被鑑別為在2.02ppm處的單個峰。
製備例11棕櫚醯氧基D，L-聚乳酸衍生物(PalmO-PLA-COOH)的合成將二十克的從製備例2製得的D，L-聚乳酸(Mn1,140道爾頓)引入到250ml圓底燒瓶中。反應物在真空下在120℃的油浴中完全脫水。該油浴被冷卻到50℃和向其中添加50ml丙酮，以完全溶解聚合物。添加5ml的氯棕櫚酸，和該反應在50℃的溫度下在氮氣氛圍中進行10小時。該反應產物用過量的己烷洗滌以除去任何殘留的反應物。該產品然後溶於丙酮中和溶液被添加到冰和水的混合物中。全部混合物慢慢攪拌，導致低聚物的沉澱。低聚物被分離，用蒸餾水洗滌兩次，然後，溶於無水丙酮中。將無水硫酸鎂加入到溶液中以除去多餘水分。所獲得的產物經過濾被除去硫酸鎂。丙酮用真空蒸發器除去，據此獲得棕櫚醯氧基D，L-聚乳酸衍生物(19.1g，產率96％)。利用1H-NMR，該棕櫚醯基團被鑑別為在0.88，1.3和2.38ppm處的峰。
製備例12到22聚乳酸衍生物的羧酸鹽的合成從製備例1到11合成的聚乳酸衍生物與碳酸氫鈉，碳酸鈉，碳酸氫鉀，或碳酸鉀在丙酮溶劑中的鹼性水溶液反應，製備它們的羧酸鹽。
製備例12聚乳酸的鈉鹽(PLA-COONa)的合成1將從製備例1製得的D，L-聚乳酸(Mn540道爾頓)溶於丙酮中。溶液被引入圓底燒瓶中和該燒瓶裝有攪拌器。溶液在室溫下慢慢地攪拌，緩慢地在其中添加碳酸氫鈉溶液(1N)，直到達到7的pH為止。在其中添加無水硫酸鎂以從中除去多餘水分。所獲得的混合物被過濾和該丙酮用溶劑蒸發器來蒸發掉。獲得白色固體。將固體溶於無水丙酮中和溶液經過過濾以除去不溶性的部分。丙酮被蒸發，留下白色固體形式的D，L-聚乳酸的鈉鹽(產率96％)。如圖2中所示，由1H-NMR在4.88ppm處觀察到與羧酸基團靠近的氫峰，該聚合物在溶於水中時具有6.5到7.5的pH。
製備例13聚乳酸的鈉鹽(PLA-COONa)的合成2根據與以上製備例12同樣的程序合成聚乳酸(產率95％)的鈉鹽，只是使用從製備例2合成的D，L-聚乳酸(Mn1,140道爾頓)和碳酸鈉的水溶液。
製備例14乙醯氧基-D，L-聚乳酸(AcO-PLA-COONa)的鈉鹽的合成根據與製備例12同樣的程序合成乙醯氧基-D，L-聚乳酸(產率95％)的鈉鹽，只是使用從製備例10合成的乙醯氧基-D，L-聚乳酸(Mn1,140道爾頓)和碳酸鈉的水溶液。
製備例15棕櫚醯氧基D，L-聚乳酸(PalmO-PLA-COONa)的鈉鹽的合成1將從製備例11合成的棕櫚醯氧基D，L-聚乳酸(Mn1,140道爾頓)完全溶於丙酮的水溶液(28.6v/v％)中。溶液被引入圓底燒瓶中和該燒瓶裝有攪拌器。溶液在室溫下慢慢地攪拌，然後，向其中添加碳酸氫鈉的水溶液(1N)以進行中和。溶液在室溫下慢慢地攪拌，緩慢地在其中添加碳酸氫鈉溶液(1N)，直到達到7的pH為止。在其中添加無水硫酸鎂以除去多餘水分。所獲得的溶液被過濾和該丙酮溶液用溶劑蒸發器來蒸發掉。獲得白色固體。將固體溶於丙酮中和溶液經過過濾以除去在丙酮中的不溶性物。丙酮被蒸發，獲得白色固體形式的棕櫚醯氧基D，L-聚乳酸的鈉鹽(產率96％)。
製備例16聚乳酸的鉀鹽(PLA-COOK)的合成2根據與製備例12中同樣的程序合成聚乳酸的鉀鹽(產率98％)，只是使用從在製備例3合成的D，L-乳酸(Mn1,550道爾頓)和碳酸氫鉀的水溶液。
製備例17聚乳酸的鈉鹽(PLA-COONa)的合成3根據與製備例12中同樣的程序合成聚乳酸的鈉鹽(產率95％)，只是使用從在製備例4合成的D，L-乳酸(Mn2,100道爾頓)。
製備例18D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鈉鹽(PLGA-COONa)的合成1根據與製備例12同樣的程序合成D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鈉鹽(產率98％)，只是使用從製備例5合成的D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物(Mn920道爾頓)和碳酸鈉的水溶液。
製備例19D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鈉鹽(PLGA-COONa)的合成2根據與製備例12同樣的程序合成D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鈉鹽(產率93％)，只是使用從製備例6合成的D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物(Mn1,040道爾頓)。
製備例20D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鉀鹽(PLGA-COOK)的合成根據與製備例12同樣的程序合成D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鉀鹽(產率92％)，只是使用從製備例7合成的D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物(Mn1,180道爾頓)和碳酸鉀的水溶液。
製備例21D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鈉鹽(PLGA-COONa)的合成3根據與製備例12同樣的程序合成D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物的鈉鹽(產率98％)，只是使用從製備例8合成的D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物(Mn1,650道爾頓)。
製備例22D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物的鈉鹽(PLMA-COONa)的合成根據與製備例12同樣的程序合成白色固體形式的D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物的鈉鹽(產率96％)，只是使用從製備例9合成的D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物(Mn1,096道爾頓)。
從以上製備例12到22合成的聚乳酸衍生物的羧酸鹽示於表3中。
表3

製備例23到29由親水性A嵌段和疏水性B嵌段組成的AB型嵌段共聚物的合成製備例23單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)嵌段共聚物(AB型)的聚合將五克的單甲氧基聚乙二醇(Mn2,000道爾頓)引入到100ml兩頸圓底燒瓶中，在減壓(1mmHg)下加熱至130℃來脫水3到4小時。該反應燒瓶用乾燥氮氣填充，然後使用注射器將反應催化劑，辛酸亞錫(Sn(Oct)2)，與0.1wt％(10.13mg，25mmol)的D，L-丙交酯一起注入。反應混合物攪拌30分鐘，該壓力在130℃下降至1mmHg保持1小時以除去溶解該催化劑的溶劑(甲苯)。將提純的丙交酯(10.13g)加入其中，和混合物加熱至130℃保持18小時。將所形成的聚合物溶於二氯甲烷中，和向其中添加二乙醚以沉澱聚合物。所獲得的聚合物在真空箱中乾燥48小時。所獲得的mPEG-PLA具有2,000-1,765道爾頓的數均分子量，並且由1H-NMR證實是AB型。
製備例24單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)嵌段共聚物(AB型)的聚合將五克的單甲氧基聚乙二醇(Mn2,000道爾頓)引入到100ml兩頸圓底燒瓶中，在減壓(1mmHg)下加熱至130℃來脫水3到4小時。該反應燒瓶用乾燥氮氣填充，然後使用注射器將反應催化劑，辛酸亞錫(Sn(Oct)2)，與0.1wt％(13.75mg，34mmol)的D，L-丙交酯一起注入。反應混合物攪拌30分鐘，該壓力在130℃下降至1mmHg保持1小時以除去溶解該催化劑的溶劑(甲苯)。將提純的丙交酯(13.75g)加入其中，和混合物加熱至130℃保持18小時。將所形成的聚合物溶於二氯甲烷中，和向其中添加二乙醚以沉澱聚合物。所獲得的聚合物在真空箱中乾燥48小時。所獲得的mPEG-PLA具有2,000-5,000道爾頓的數均分子量，並且由1H-NMR證實是AB型。
製備例25單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)嵌段共聚物(AB型)的聚合將五克的單甲氧基聚乙二醇(Mn2,000道爾頓)引入到100ml兩頸圓底燒瓶中，在減壓(1mmHg)下加熱至130℃來脫水3到4小時。該反應燒瓶用乾燥氮氣填充，然後使用注射器將反應催化劑，辛酸亞錫(Sn(Oct)2)，與0.1wt％(22.0mg，55mmol)的D，L-丙交酯一起注入。反應混合物攪拌30分鐘，該壓力在130℃下降至1mmHg保持1小時以除去溶解該催化劑的溶劑(甲苯)。將提純的丙交酯(22g)加入其中，和混合物加熱至130℃保持18小時。將所形成的聚合物溶於二氯甲烷中，和向其中添加二乙醚以沉澱聚合物。所獲得的聚合物在真空箱中乾燥48小時。所獲得的mPEG-PLA具有2,000-8,000道爾頓的數均分子量，並且由1H-NMR證實是AB型。
製備例26單甲氧基聚乙二醇-聚(乳酸共乙交酯)(mPEG-PLGA)嵌段共聚物(AB型)的聚合為了合成mPEG-PLGA嵌段共聚物，根據與製備例23相同的程序，讓單甲氧基聚乙二醇(Mn5,000道爾頓)與丙交酯和乙交酯在催化劑辛酸亞錫存在下在120℃下反應12小時。所獲得的mPEG-PLGA具有5,000-4,000道爾頓的數均分子量，並且由1H-NMR證實是AB型。
製備例27單甲氧基聚乙二醇-聚(乳酸共對-二噁烷-2-酮)(mPEG-PLDO)嵌段共聚物(AB型)的聚合為了合成mPEG-PLDO嵌段共聚物，根據與製備例23相同的程序，讓單甲氧基聚乙二醇(Mn12,000道爾頓)與丙交酯和對-二噁烷-2-酮在催化劑辛酸亞錫存在下在110℃下反應12小時。所獲得的mPEG-PLDO具有12,000-10,000道爾頓的數均分子量，並且由1H-NMR證實是AB型。
製備例28單甲氧基聚乙二醇-聚己酸內酯(mPEG-PCL)嵌段共聚物(AB型)的聚合為了合成mPEG-PCL段共聚物，根據與製備例23相同的程序，讓單甲氧基聚乙二醇(Mn12,000道爾頓)與己內酯在催化劑辛酸亞錫存在下在130℃下反應12小時。所獲得的mPEG-PCL具有12,000-5,000道爾頓的數均分子量，並且由1H-NMR證實是AB型。
製備例29單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯-棕櫚酸酯(mPEG-PLA-棕櫚酸酯)嵌段共聚物(AB型)的聚合所合成的單甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯(mPEG-PLA)(Mn2,000-1,750，20g)被引入到燒瓶中並在120℃的油浴中在真空下完全地脫水。反應物被冷卻到50℃和向其中添加50ml丙酮，以完全溶解聚合物。將2ml的棕櫚醯氯加入其中(摩爾比率棕櫚醯氯/mPEG-PLA＝1.2/1)，和該反應於50℃在氮氣流下進行10小時。反應混合物用過量的己烷洗滌，以除去殘留反應物。所獲得的聚合物溶於二氯甲烷中，用二乙醚沉澱，然後過濾。所獲得的聚合物在真空箱中乾燥48小時。所獲得的mPEG-PLA-棕櫚酸酯具有2,000-1,800道爾頓的Mn。另外，由1H-NMR證實，棕櫚醯基鍵接於mPEG-PLA的-OH端基上。
從以上製備例23到29合成的嵌段共聚物示於下表4中。
表4

實施例1到7含有弱水溶性的藥物的混合聚合物膠束的製備實施例1D，L-PLA-COONa和mPEG-PLGA嵌段共聚物的含有紫杉酚的混合聚合物膠束組合物的製備將從以上製備例合成的D，L-PLA-COONa(Mn1,140道爾頓)(130mg)，兩親性嵌段共聚物mPEG-PLGA(Mn5,000-4,000道爾頓)(100mg)，和40mg紫杉酚溶於1ml的丙酮中以製備透明溶液。丙酮從中除去以製備含有紫杉酚的混合聚合物組合物。將蒸餾水(2ml)加入到含有紫杉酚的聚合物組合物中，和混合物在40℃下攪拌20分鐘以製備含有紫杉酚的混合聚合物膠束水溶液。溶液穿過具有200nm的孔隙大小的過濾器以除去不溶解的紫杉酚。紫杉酚的含量和溶解度是由HPLC測定和粒度是由Dynamic Light Scattering(DLS)方法測量。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLGA＝56/44紫杉酚的含量14.8wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度40mg/ml粒度24nm實施例2D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有紫杉酚的混合聚合物膠束組合物的製備將從以上製備例合成的D，L-PLA-COONa(Mn1,140道爾頓)(180mg)，100mg的兩親性嵌段共聚物mPEG-PLA(Mn2,000-1,765道爾頓)，和20mg紫杉酚溶於1ml的丙酮中以製備透明溶液。丙酮從中除去以製備含有紫杉酚的混合聚合物組合物。將蒸餾水(2ml)加入到含有紫杉酚的聚合物組合物中，和混合物在40℃下攪拌30分鐘以製備含有紫杉酚的混合聚合物膠束水溶液。溶液穿過具有200nm的孔隙大小的過濾器以除去不溶解的紫杉酚。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA＝64/36紫杉酚的含量6.7wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10mg/ml粒度16nm實施例3D，L-PLGA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有環孢菌素A的混合聚合物膠束組合物的製備根據與實施例2中同樣的程序製備含有環孢菌素A的混合聚合物膠束水溶液，只是使用從以上製備例合成的150mg的D，L-PLGA-COONa(Mn1,650道爾頓)，50mg的兩親性嵌段共聚物mPEG-PLA(Mn2,000-1,765道爾頓)，和20mg的環孢菌素A，並通過具有具有200nm的孔隙大小的過濾器以除去不溶解的環孢菌素A。
D，L-PLGA-COONa/mPEG-PLA＝75/25環孢菌素A的含量9.1wt％
粒度20nm實施例4D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有環孢菌素A的混合聚合物膠束組合物的製備根據與實施例2中同樣的程序製備含有環孢菌素A的混合聚合物膠束水溶液，只是使用從以上製備例合成的100mg的D，L-PLA-COONa(Mn540道爾頓)，100mg的兩親性嵌段共聚物mPEG-PLA(Mn2,000-1,765道爾頓)，和25mg的環孢菌素A。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA＝50/50環孢菌素A的含量11.1wt％粒度22nm實施例5D，L-PLGA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有環孢菌素A的混合聚合物膠束組合物的製備根據與實施例2中同樣的程序製備含有環孢菌素A的混合聚合物膠束水溶液，只是使用從以上製備例合成的100mg的D，L-PLGA-COONa(Mn1,040道爾頓)，100mg的兩親性嵌段共聚物mPEG-PLA(Mn2,000-1,765道爾頓)，和25mg的環孢菌素A。
D，L-PLGA-COONa/mPEG-PLA＝50/50環孢菌素A的含量11.1wt％粒度24nm實施例6D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有紫杉酚的混合聚合物膠束組合物的製備根據與實施例2中同樣的程序製備含有紫杉酚的混合聚合物膠束水溶液，只是使用從以上製備例合成的D，L-PLA-COONa(Mn1,140道爾頓)(100mg)，90mg的兩親性嵌段共聚物mPEG-PLA(Mn2,000-5,000道爾頓)，和10mg的紫杉酚。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA-54/46紫杉酚的含量5.0wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10mg/ml粒度56nm
實施例7D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有紫杉酚的混合聚合物膠束組合物的製備根據與實施例2中同樣的程序製備含有紫杉酚的混合聚合物膠束水溶液，只是使用從以上製備例合成的D，L-PLA-COONa(Mn1,140道爾頓)(150mg)，90mg的兩親性嵌段共聚物mPEG-PLA(Mn2,000-8,000道爾頓)，和10mg的紫杉酚。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA＝63/37紫杉酚的含量4.0wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10mg/ml粒度56nm對比實施例1D，L-PLA-COONa的含有紫杉酚的聚合物膠束的製備將從以上製備例合成的D，L-PLA-COONa(Mn1,140道爾頓)(80mg)和20mg的紫杉酚溶於1ml的丙酮中。該丙酮通過使用真空蒸發器被除去，在其中添加蒸餾水以製備含有紫杉酚的D，L-PLA-COONa聚合物膠束。所獲得的混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器以除去不溶解的紫杉酚。紫杉酚的含量和溶解度，以及粒度是如下紫杉酚的含量20wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度20mg/ml粒度18nm對比實施例2含有紫杉酚的mPEG-PLGA聚合物膠束的製備將從以上製備例合成的mPEG-PLGA(Mn5,000-4,000道爾頓)(80mg)和20mg的紫杉酚溶於1ml的丙酮中。該丙酮通過使用真空蒸發器被除去，在其中添加蒸餾水以製備含有紫杉酚的mPEG-PLGA聚合物膠束。
紫杉酚的含量5wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度5mg/ml粒度28nm實驗實施例1穩定性試驗從實施例1獲得的含有紫杉酚的混合聚合物膠束組合物的水溶液的藥物負載效率和在37℃的穩定性與從對比實施例1獲得的D，L-PLA-COONa聚合物膠束組合物和從對比實施例2獲得的mPEG-PLGA聚合物膠束組合物的此類性質進行對比。通過製備含有過量藥物的聚合物膠束，讓它們穿過具有200nm的孔隙大小的過濾器，由HPLC測量在濾液中的藥物濃度，和將測量的濃度換算成以聚合物膠束組合物的總重量為基礎計的藥物的重量％，來計算聚合物膠束的藥物負載效率。結果示於表5中。
表5

圖1到3是上述實施例1和對比實施例1和2的聚合物膠束的示意圖。
如表5中所示，紫杉酚的負載效率是在混合聚合物膠束中的14.8wt％和在D，L-PLA-COONa聚合物膠束中的20wt％，而它在mPEG-PLGA聚合物膠束中僅僅是5wt％。因此，已經證實，該mPEG-PLA聚合物膠束具有相當於其它聚合物膠束的負載效率的僅僅大約1/3的負載效率，而本發明的混合聚合物膠束具有與D，L-PLA-COONa類似的負載效率。
該聚合物膠束被稀釋在具有pH7的磷酸鹽緩衝鹽水溶液中以調節紫杉酚的濃度到1mg/ml。然後，在37℃下保持的同時以一定時間間隔測量紫杉酚的濃度。結果示於表6中。
表6混合和單種聚合物膠束在37℃下的穩定性

如表6中所示，紫杉酚在24小時內沒有從實施例1的混合聚合物膠束組合物中釋放。相反，紫杉酚在1小時之後從對比實施例1的D，L-PLA-COONa中和在6小時之後從對比實施例2的mPEG-PLGA聚合物膠束組合物中猛烈地釋放。在24小時之後僅僅大約40％的藥物保留在對比實施例2的mPEG-PLGA聚合物膠束組合物中。以上結果證明，本發明的混合聚合物膠束組合物具有與對比實施例2的mPEG-PLGA聚合物膠束組合物相當的穩定性。
實驗實施例2聚合物的組成比率對於含有弱水溶性的藥物的混合聚合物膠束的穩定性的影響的評價根據在實施例1中的程序製備含有9.1wt％的紫杉酚的組合物，以組合物的總重量為基礎。D，L-PLA-COONa(Mn1,140道爾頓)與mPEG-PLA(Mn2,000-1,765道爾頓)的組成比率是如下變化0/100，10/90，20/80，40/60，50/50，60/40，80/20，90/10，和100/0。組合物然後稀釋在pH7的磷酸鹽緩衝溶液中以調節紫杉酚的濃度到1mg/ml。在25℃下保持的同時以一定時間間隔測量紫杉酚的濃度，以對比膠束穩定性。結果示於表7中。
表7取決於聚乳酸衍生物和兩親性嵌段共聚物的組成比例的、在25℃下的穩定性的對比

如表7中所示，本發明的混合聚合物膠束具有恆定的紫杉酚濃度，甚至在24小時之後，而包括聚乳酸衍生物或兩親性嵌段共聚物的單種聚合物膠束在12小時之後具有降低的紫杉酚濃度。因此，已經證實，該混合聚合物膠束具有比單種聚合物膠束更好的穩定性。
實施例8到13含有二-或三-價金屬離子束縛的弱水溶性的藥物的膠束或納米顆粒的製備實施例8D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的Ca2+束縛的含有紫杉酚的膠束的製備步驟1D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有紫杉酚的聚合物膠束的製備將130mg(114mmol)的製備例13的D，L-PLA-COONa(Mn1,140道爾頓)，30mg的紫杉酚，和100mg的製備例23的mPEG-PLA(Mn2,000-1,765道爾頓)完全溶於2ml的丙酮中而獲得透明溶液。丙酮從中除去以製備含有紫杉酚的聚合物組合物。將蒸餾水(2.5ml)加入其中，和混合物在40℃下攪拌30分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。
步驟2用二價金屬離子的束縛將0.29ml(58mmol)的無水氯化鈣的0.2M水溶液加入到在步驟1中製備的聚合物膠束水溶液中，混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器，然後冷凍乾燥。紫杉酚的含量和溶解度是由HPLC測定和粒度是根據Dynamic Light Scattering(DLS)方法測量。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA(重量比)56.5/43.5紫杉酚的含量11.5wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10.7mg/ml粒度18nm實施例9D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的Mg2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的製備將0.29ml(58mmol)的無水氯化鎂的0.2M水溶液加入到在以上實施例8的步驟1中製備的聚合物膠束水溶液中，混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器，然後冷凍乾燥。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA(重量比)56.5/43.5紫杉酚的含量11.5wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10.7mg/ml粒度18nm實施例10D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的Zn2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的製備將0.29ml(58mmol)的無水氯化鋅的0.2M水溶液加入到在以上實施例8的步驟1中製備的聚合物膠束水溶液中，混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器，然後冷凍乾燥。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA(重量比)56.5/43.5紫杉酚的含量11.5wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10.7mg/ml粒度18nm
實施例11D，L-PLMA-COONa和mPEG-PLA-棕櫚酸酯嵌段共聚物的Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的製備根據與實施例8相同的程序製備Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束組合物，只是使用130mg(119mmol)的製備例22的D，L-PLMA-COONa(Mn1,096)，30mg的紫杉酚，100mg的製備例29的mPEG-PLA-棕櫚酸酯(Mn2,000-1,800道爾頓)，和乙醇代替丙酮。
D，L-PLMA-COONa/mPEG-PLA-棕櫚酸酯(重量比)56.5/43.5紫杉酚的含量11.5wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10.7mg/ml粒度18nm實施例12D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的製備根據與實施例8相同的程序製備Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束組合物，只是使用100mg(88mmol)的製備例13的D，L-PLA-COONa(Mn1,140)，10mg的紫杉酚，90mg的製備例24的mPEG-PLA(Mn2,000-5,000道爾頓)，和乙醇代替丙酮。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA(重量比)54/46紫杉酚的含量5.0wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10.0mg/ml粒度58nm實施例13D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的製備根據與實施例8相同的程序製備Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束組合物，只是使用150mg(132mmol)的製備例13的D，L-PLA-COONa(Mn1,140)，10mg的紫杉酚，90mg的製備例25的mPEG-PLA(Mn2,000-8,000道爾頓)，和乙醇代替丙酮。
D，L-PLA-COONa/mPEG-PLA(重量比)63/37紫杉酚的含量4.0wt％在水溶液中紫杉酚的溶解度10.0mg/ml
粒度50nm實驗實施例3與所使用的金屬離子的當量相關的聚合物膠束或納米顆粒組合物的穩定性的評價為了評價與所使用的金屬離子的當量相關的聚合物膠束或納米顆粒組合物的穩定性，如下製備聚合物膠束組合物。
步驟1D，L-PLA-COONa和mPEG-PLA嵌段共聚物的含有紫杉酚的混合聚合物膠束的製備將170mg(149mmol)的D，L-PLA-COONa(Mn1,140)，30mg的紫杉酚和50mg的兩親性嵌段共聚物mPEG-PLA(Mn2,000-1,765道爾頓)溶於2ml的丙酮中而獲得透明溶液。丙酮從中除去以製備含有紫杉酚的聚合物膠束組合物。將蒸餾水(3ml)加入到聚合物膠束組合物中，和混合物在40℃下攪拌30分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。
步驟2用二價金屬離子的束縛將在步驟1中製備的含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液分成3份，每份1ml。向每份中添加0.0625，0.125，和0.25ml(12.5，25，和50mmol)的0.2M無水氯化鈣水溶液。混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器。然後，將pH7.4的PBS(對苯甲醯硫酸鹽)緩衝液添加進去，以調節紫杉酚的濃度到1mg/ml。在37℃下保持的同時由HPLC測量紫杉酚的濃度。結果示於表8中。
表8

(eq.當量)
如表8中所示，該藥物濃度與初始濃度相比減少了80％，並且當沒有添加Ca2+時在24小時之後藥物濃度是0.2mg/ml。該藥物濃度與初始濃度相比減少了大約30％，並且當添加0.25當量的Ca2+時在24小時之後藥物濃度是0.7mg/ml，它高於當不添加Ca2+時的濃度。此外，當添加0.5當量或更高的Ca2+時，藥物濃度在24小時之後沒有變化。如上所述，該Ca2+-處理的組合物比未處理的組合物更穩定，並且當添加0.5當量或更高的Ca2+時，穩定性顯著地提高。
實驗實施例4與所使用的D，L-聚乳酸鈉鹽(D，L-PLA-COONa)的M.W.有關的聚合物膠束的穩定性試驗。
為了試驗與所使用的D，L-聚乳酸鈉鹽(D，L-PLA-COONa)的M.W.有關的納米顆粒組合物的穩定性，如下製備聚合物膠束組合物。
紫杉酚，mPEG-PLA(Mn2,000-1,776)，和D，L-PLA-COONa(Mn646，1,145，1,500或2,300)是以1∶3∶3的當量比摻混，然後將混合物溶於5ml的無水乙醇中以製備透明溶液。使用真空蒸發器從中除去乙醇而製備含有紫杉酚的聚合物組合物。將蒸餾水(12ml)加入其中，和混合物在60℃下攪拌10分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。向以上聚合物膠束溶液中添加與D，L-PLA-COONa同樣當量的CaCl2水溶液(濃度100mg/ml)，和混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物穿過具有200nm的孔隙大小的過濾器，然後向其中添加pH7.4的PBS緩衝液，將混合物稀釋到具有1mg/ml的紫杉酚。讓混合物在37℃下靜置，由HPLC測量隨著時間的推移，紫杉酚的濃度。結果示於表9中。
表9

如表9中所示，隨著D，L-PLA-COONa的M.W.提高到646，1,145，1,500，和2,300，在14天之後藥物濃度分別增加到0.15，0.23，0.36和0.62mg/ml。隨著D，L-PLA-COONa的M.W.的提高，藥物沉澱減少，這說明聚合物膠束組合物是相對更穩定的。
實驗實施例5與所使用的D，L-聚乳酸鈉鹽(D，L-PLA-COONa)的當量有關的聚合物膠束的穩定性試驗。
為了試驗與所使用的D，L-聚乳酸鈉鹽(D，L-PLA-COONa)的當量有關的納米顆粒組合物的穩定性，如下製備聚合物膠束組合物。
紫杉酚，mPEG-PLA(Mn2,000-1,776)，和D，L-PLA-COONa(Mn646，1,145)是以1∶2∶x的當量比摻混，其中x是2，4，6，8，10或12，然後將混合物溶於5ml的無水乙醇中以製備透明溶液。使用真空蒸發器從中除去乙醇而製備含有紫杉酚的聚合物組合物。將蒸餾水(12ml)加入其中，和混合物在60℃下攪拌10分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。向以上聚合物膠束溶液中添加與D，L-PLA-COONa同樣當量的CaCl2水溶液(濃度100mg/ml)，和混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物穿過具有200nm的孔隙大小的過濾器，然後向其中添加pH7.4的PBS緩衝液，將混合物稀釋到具有1mg/ml的紫杉酚。讓混合物在37℃下靜置，由HPLC測量在不同的時間間隔中紫杉酚的濃度。結果示於表10中。
表10

如表10中所示，隨著D，L-PLA-COONa的當量的提高，聚合物膠束的穩定性會提高，並且在6/2或更高的當量比下顯著地提高。特別地，在8/2的當量比下，在14天之後藥物濃度是0.80mg/ml的最高值。
實驗實施例6Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的血液保留試驗為了試驗Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的血流停留時間，如下製備聚合物膠束組合物。
步驟1混合聚合物膠束的製備含有紫杉酚，嵌段共聚物，聚乳酸，和金屬離子的聚合物膠束(組合物1)。
紫杉酚，mPEG-PLA(Mn2,000-1,776)，和D，L-PLA-COONa(Mn1,145)是以1∶5∶20的當量比摻混，然後將混合物溶於5ml的無水乙醇中以製備透明溶液。使用真空蒸發器從中除去乙醇而製備含有紫杉酚的聚合物組合物。將蒸餾水(4ml)加入其中，和混合物在60℃下攪拌10分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。向以上聚合物膠束溶液中添加與D，L-PLA-COONa同樣當量的CaCl2水溶液(濃度100mg/ml)，和混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器。
含有紫杉酚，嵌段共聚物，和聚乳酸的聚合物膠束(組合物2)。
紫杉酚，mPEG-PLA(Mn2,000-1,776)，和D，L-PLA-COONa(Mn1,145)是以1∶5∶20的當量比摻混，然後將混合物溶於5ml的無水乙醇中以製備透明溶液。使用真空蒸發器從中除去乙醇而製備含有紫杉酚的聚合物組合物。將蒸餾水(4ml)加入其中，和混合物在60℃下攪拌10分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器。
含有紫杉酚和嵌段共聚物的聚合物膠束(組合物3)。
紫杉酚和mPEG-PLA(Mn2,000-1,776)是以1∶5的當量比摻混，然後將混合物溶於5ml的無水乙醇中以製備透明溶液。使用真空蒸發器從中除去乙醇而製備含有紫杉酚的聚合物組合物。將蒸餾水(5ml)加入其中，和混合物在60℃下攪拌10分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器。
表11

為了進行動物試驗，230-250g的雄性Sprague-Dawley鼠是股靜脈和股動脈中插入導管。組合物1，2和3經過15秒以10mg/kg的劑量注入股靜脈中。在注入之後，0.3ml的全部血液在1，15，30，45分鐘，和1，1.5，2，3，4，5，6，8小時之後從股動脈中抽出，然後離心處理以獲得清澈的上層血漿。
此外，為了分析藥物的血漿濃度，將0.1ml的血漿注入到覆蓋的玻璃管中和將0.1ml的含有內標準物質的乙腈溶液添加在其中。將10ml的乙酸乙酯添加到以上溶液中，混合物劇烈地攪拌30秒，然後，在2,500rpm下離心處理10分鐘。全部的乙酸乙酯層被取出和轉移到試管中，然後，有機溶劑於40℃在氮氣流下完全地被蒸發掉。在其中添加的是0.1ml的40％(v/v)乙腈溶液，和混合物劇烈地攪拌30秒，然後，進行HPLC。HPLC的條件是如下這些注入體積0.075ml
流速1.0ml/分鐘波長227nm移動相在5分鐘中24％乙腈水溶液，在16分鐘中已提高到58％，在2分鐘中提高到70％，在4分鐘中下降到34％，和維持5分鐘柱4.6×50nm(C18，Vydac，USA)。
藥物的血漿濃度的分析結果示於下表12和圖6中。
表12

如表12和圖6中所示，含有D，L-PLA-COONa的組合物2，具有比僅僅含有mPEG-PLA嵌段共聚物的組合物3更長的血流停留時間，和含有Ca2+的組合物1具有比組合物2更長的停留時間。因此，以上結果說明，根據本發明的含有藥物的聚合物膠束具有較長的藥物的血流停留時間，和特別地，金屬離子束縛的聚合物膠束具有更長的藥物的血流停留時間。
實驗實施例7Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的血流停留時間為了將Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的血流停留時間與含有其它載體的配製料的停留時間進行對比，如下製備組合物。
含有紫杉酚，嵌段共聚物，聚乳酸，和金屬離子的聚合物膠束(組合物4)。
紫杉酚，mPEG-PLA(Mn2,000-1,776)和D，L-PLMA-COONa(Mn1,198)是以49.5∶49.5∶1的重量比摻混，然後將混合物溶於5ml的無水乙醇中以製備透明溶液。使用真空蒸發器從中除去乙醇而製備含有紫杉酚的聚合物組合物。將蒸餾水(4ml)加入其中，和混合物在60℃下攪拌10分鐘以製備含有紫杉酚的聚合物膠束水溶液。向以上聚合物膠束溶液中添加與D，L-PLMA-COONa同樣當量的CaCl2水溶液(濃度100mg/ml)，和混合物在室溫下攪拌20分鐘。混合物通過具有200nm的孔隙大小的過濾器。
含有紫杉酚，Cremophor EL，和無水乙醇的組合物(組合物5)。
將紫杉酚(30mg)溶於5ml的由Cremophor EL和無水乙醇組成的混合溶液(50∶50v/v)中而獲得透明溶液。溶液通過具有200nm的孔隙大小的過濾器。
含有紫杉酚，polysorbate 80(Tween 80)，和無水乙醇的組合物(組合物6)。
將紫杉酚(30mg)溶於5ml的由polysorbate 80和無水乙醇組成的混合溶液(50∶50v/v)中而獲得透明溶液。溶液通過具有200nm的孔隙大小的過濾器。
以上組合物和藥物含量概括在表13中。
表13

為了進行動物試驗，230-250g重量的雄性Sprague-Dawley鼠是在股靜脈和股動脈中插入導管。組合物4，5和6經過15秒以5mg/kg的劑量注入股靜脈中。在注入之後，0.3ml的全部血液在1，15，30分鐘，和1，1.5，2，3，4，6小時之後從股動脈中抽出，然後離心處理以獲得清澈的上層血漿。
此外，該血漿藥物濃度根據與實驗實施例6中同樣的方法來分析，血漿藥物濃度的結果示於表14和圖7中。
表14

如表14和圖7中所示，Ca2+束縛的聚合物膠束(組合物4)具有比含有其它表面活性劑的注射劑(組合物5和6)更長的血流停留時間。因為本發明的Ca2+束縛的聚合物膠束(組合物4)具有比市售的配製料Taxol(組合物5)更長的血流停留時間，本發明通過使用可生物降解的和生物相容的聚合物而能夠增加在血流中的藥物停留時間，與Taxol相比而言。
實驗實施例8Ca2+束縛的含有紫杉酚的聚合物膠束的抗癌活性將0.1ml的含有7×106人癌細胞(PPC1，HT29)的細胞懸浮液經皮下注入到健康的雌性裸(nu/nu)無胸腺(athymic)小鼠(20g，8周齡期，n＝6)的側邊。在腫瘤達到一定尺寸之後，它們被異種移植三次而形成3-4mm的異種移植段。利用12規格套管針將異種移植片經皮下注入到健康的雌性裸(nu/nu)無胸腺(athymic)小鼠(20g，8周齡期，n＝5)的側邊。當腫瘤的體積達到100-300mm3時，該藥物被施用，和這一時間點被記錄為0天。在0天，將小鼠布置成5隻的各組，並且在0，1和2天，金屬離子束縛的聚合物膠束(組合物4)和該Cremophor EL配製料(組合物5)是以20mg/kg的紫杉酚的劑量經由尾靜脈注入，和腫瘤的體積是在不同的時間間隔測量。腫瘤的體積通過公式(W2×L)/2來計算，其中W是短軸，和L是長軸。
如圖8a和8b中所示，與對照組相比，金屬離子束縛的聚合物膠束處理過的組和Cremophor EL配製料處理過的組都顯示了對腫瘤生長的相當大的抑制作用，和特別地，該金屬離子束縛的聚合物膠束處理過的組顯示出比Cremophor EL配製料處理過的組更高的抑制比率。
可以理解，以上描述的實施方案僅僅是本發明的原理的應用的舉例說明。在不脫離本發明的精神和範圍的前提下許多的改進和供選擇的實施方案能夠派生出來，並且所附權利要求希望覆蓋此類改進和排列。因此，儘管本發明已經在附圖中顯示並且在以上關於目前視為本發明的最實際和優選的實施方案的那些內容進行了具體和詳細的充分描述，對於本領域中的技術人員而言明顯的是，在不脫離在權利要求中給出的本發明的原理和概念的情況下能夠作很多改進。
權利要求
1.能夠在水溶液中形成穩定膠束的聚合物組合物，該組合物包括親水性嵌段和疏水性嵌段的兩親性嵌段共聚物，和聚乳酸衍生物，其中聚乳酸的一端以共價鍵方式鍵接於至少一個羧基上。
2.能夠在水溶液中形成穩定膠束的聚合物組合物，該組合物包括親水性嵌段和疏水性嵌段的兩親性嵌段共聚物，和由下式表示的聚乳酸衍生物RO-CHZ-[A]n-[B]m-COOM(I)其中A是-COO-CHZ-；B是-COO-CHY-，-COO-CH2CH2CH2CH2CH2-或-COO-CH2CH2OCH2；R是氫原子，乙醯基，苯甲醯基，癸醯基，棕櫚醯基，甲基或乙基；Z和Y各是氫原子，甲基，或苯基；M是H，Na，K，或Li；n是1到30的整數，和m是0到20的整數。
3.能夠在水溶液中形成穩定膠束的聚合物組合物，該組合物包括親水性嵌段和疏水性嵌段的兩親性嵌段共聚物，和由下式表示的聚乳酸衍生物RO-CHZ-[COO-CHX]p-[COO-CHY′]q-COO-CHZ-COOM(II)其中X是甲基；Y』是氫原子或苯基；p是0到25的整數；q是0到25的整數，前提條件是p+q是5到25的整數；R是氫原子，乙醯基，苯甲醯基，癸醯基，棕櫚醯基，甲基或乙基；Z是氫原子，甲基，或苯基；和M是H，Na，K，或Li。
4.能夠在水溶液中形成穩定膠束的聚合物組合物，該組合物包括親水性嵌段和疏水性嵌段的兩親性嵌段共聚物，和由下式表示的聚乳酸衍生物RO-PLA-COO-W-M′ (III)其中W-M′是 或 該PLA是選自D，L-聚乳酸，D-聚乳酸，聚扁桃酸，D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物，D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物，D，L-乳酸和己內酯的共聚物，以及D，L-乳酸和1，4-二噁烷-2-酮的共聚物中的一種；R是氫原子，乙醯基，苯甲醯基，癸醯基，棕櫚醯基，甲基或乙基；和M是H，Na，K或Li。
5.能夠在水溶液中形成穩定膠束的聚合物組合物，該組合物包括親水性嵌段和疏水性嵌段的兩親性嵌段共聚物，和由下式表示的聚乳酸衍生物S-O-PLA-COO-Q (IV)其中S是 L』是-NR1-或-O-；R1是氫原子或C1-C10烷基；Q是CH3，CH2CH3，CH2CH2CH3，CH2CH2CH2CH3，或CH2C6H5；a是0到4的整數；b是1到10的整數；R是氫原子，乙醯基，苯甲醯基，癸醯基，棕櫚醯基，甲基或乙基；M是H，Na，K，或Li和PLA是選自D，L-聚乳酸，D-聚乳酸，聚扁桃酸，D，L-乳酸和乙醇酸的共聚物，D，L-乳酸和扁桃酸的共聚物，D，L-乳酸和己內酯的共聚物，以及D，L-乳酸和1，4-二噁烷-2-酮的共聚物中的一種。
6.權利要求1的聚合物組合物，其中親水性嵌段是選自聚亞烷基二醇，聚乙烯基吡咯烷酮，聚乙烯醇和聚丙烯醯胺中的一種，和疏水性嵌段是選自聚丙交酯，聚乙交酯，聚二噁烷-2-酮，聚己酸內酯，聚乳酸共乙交酯，聚乳酸共己內酯，聚乳酸共二噁烷-2-酮，和它們的其中羧端基被脂肪酸基團取代的那些衍生物中的一種。
7.權利要求6的聚合物組合物，其中親水性和疏水性嵌段分別具有在500到50,000道爾頓範圍內的數均分子量。
8.權利要求1的聚合物組合物，其中在兩親性嵌段共聚物中親水性嵌段與疏水性嵌段的比率是2∶8到8∶2。
9.權利要求1的聚合物組合物，它包括5-95wt％的兩親性嵌段共聚物和5-95wt％的聚乳酸衍生物，基於組合物的總重量。
10.權利要求1的聚合物組合物，其中聚乳酸衍生物具有500到2,500道爾頓的數均分子量。
11.權利要求1的聚合物組合物，其中聚乳酸衍生物是通過沒有催化劑存在下的縮合反應獲得的鈉或鉀鹽形式，隨後用碳酸鈉，碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，或碳酸鉀中和。
12.能夠在水溶液中形成穩定膠束的藥物組合物，它包括70-99.9wt％的權利要求1-11中的一項的聚合物組合物和0.1-30wt％的弱水溶性的藥物，其中該藥物以物理方式被捕獲在膠束的疏水性芯之內。
13.權利要求1到11中一項的聚合物組合物，進一步包括0.01到0.5當量的二-或三-價的金屬離子，相對於1當量的聚乳酸衍生物的羧端基。
14.權利要求13的聚合物組合物，其中二-或三-價的金屬離子是選自Ca2+，Mg2+，Ba2+，Cr3+，Fe3+，Mn2+，Ni2+，Cu2+，Zn2+和Al3+中的一種。
15.藥物組合物，它包括70-99.9wt％的權利要求13的聚合物膠束組合物和0.1-30wt％的弱水溶性的藥物。
16.納米顆粒形成用的聚合物組合物，它包括權利要求1-11中的一項的聚合物組合物，和0.5到10當量的二-或三-價的金屬離子，相對於1當量的聚乳酸衍生物的羧端基。
17.權利要求16的聚合物組合物，其中二-或三-價的金屬離子是選自Ca2+，Mg2+，Ba2+，Cr3+，Fe3+，Mn2+，Ni2+，Cu2+，Zn2+和Al3+中的一種。
18.藥物組合物，它包括70-99.9wt％的權利要求16的聚合物組合物和0.1-30wt％的弱水溶性的藥物。
19.製備含有弱水溶性的藥物的聚合物組合物的方法，包括以下步驟將兩親性嵌段共聚物，聚乳酸衍生物，和弱水溶性的藥物溶於有機溶劑中，蒸發有機溶劑，和添加水溶液而形成含有弱水溶性的藥物的聚合物膠束。
20.權利要求19的方法，進一步包括將二-或三-價的金屬離子添加到含有弱水溶性的藥物的聚合物膠束中以束縛聚乳酸衍生物的羧端基的一個步驟。
21.權利要求19的方法，其中有機溶劑是選自丙酮，乙醇，甲醇，乙酸乙酯，乙腈，二氯甲烷，氯仿，乙酸和二噁烷中的一種溶劑或多種。
全文摘要
能夠在水溶液中形成穩定膠束的聚合物組合物，該組合物包括親水性嵌段和疏水性嵌段的兩親性嵌段共聚物，和聚乳酸衍生物，其中聚乳酸的一端以共價鍵方式鍵接於至少一個羧基上。聚乳酸衍生物的羧基可以被二－或三－價的金屬離子束縛，可通過向聚合物組合物中添加二－或三－價的金屬離子而獲得。
文檔編號C08L53/00GK1571816SQ02820573
公開日2005年1月26日 申請日期2002年10月17日 優先權日2001年10月18日
發明者徐敏孝, 李思元, 金希祚, 金廷景, 玄明韓, 劉正一 申請人:株式會社三養社