牛蒡根水提物的提取及應用的製作方法

2024-01-20 17:52:15 2

專利名稱：：牛蒡根水提物的提取及應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種牛蒡根水提物的提取及應用，屬於生物
技術領域：
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背景技術：
：男性勃起功能障礙(Erectiledysfimction，簡稱ED)是指陰莖不能勃起、勃起不堅或堅而不持久以致不能性交者；國際陽痿學會對此作出的定義為性交時陰莖不能有效地勃起導致性交不滿足。ED是男性最常見的一種性功能障礙，據不完全統計，在男性人群中，ED發生率就達15呢。牛蒡根是菊科兩年生大型草本植物牛蒡的根。牛蒡根呈紡錘形，肉質而直立。皮部黑褐色，有皺紋，易折斷，斷面黃白色，味微苦而性粘。經常食用牛蒂根能促進血液循環、清除腸胃垃圾、防止人體過早衰老、潤澤肌膚、防止中風和高血壓、清腸排毒、降低膽固醇和血糖，並適合糖尿病患者長期食用對類風溼、抗真菌有一定療效，對癌症和尿毒症也有很好的預防和抑制作用，因此被譽為大自然的最佳清血劑。在日本牛蒡成為尋常百姓家強身健體、防病治病的保健菜，它可以與人參相媲美，因此被稱作東洋參。但對其藥用價值等方面的報導很少，尤其是在治療勃起功能障礙(ED)等方面的研究未見報導。
發明內容本發明的目的是提供一種牛蒡根水提物的提取及應用。本發明通過大量的化學和藥理研究測定，牛蒡根含有多糖、多酚物質及內酯類成分，可作為藥物製劑或功能性食品的原料。一種牛蒡根水提物的提取方法，提取方法如下-1)取新鮮的牛蒡根，除去殘根、雜質，洗淨，切片後，加6倍牛蒡根重量的水煮沸後，文火煎煮30分鐘，多次攪拌，過濾得一次藥液；或乾燥的牛蒡根，除去殘根、雜質，洗淨，切片後，加8倍牛蒡根重量的水煮沸後文火煎煮30分鐘，多次攪拌，過濾得一次藥液；2)步驟l)所得藥渣加3倍重量的水，煮沸後文火煎煮30分鐘，過濾得二次藥液；3)合併兩次濾液，用電爐將濾液濃縮至濃度為2g/ml的水煎藥液；4)將步驟3)所得的水煎藥液過濾，濾除固含物，經濃縮、冷凍乾燥後得到取率為4-7%牛蒡根提取物乾粉；5)所得乾粉提取物通過苯酚硫酸法測定，牛蒡根提取物的乾粉含多糖為95—98%。一種牛蒡根水提物在防治和輔助治療男性勃起功能障礙藥物和食品中的應用，以牛蒡根水提物作為藥物或功能性食品原料，按照常規製備方法分別製成膠囊劑、片劑、顆粒劑、固體功能性食品；配比是取l重量份牛蒡根水提物，與1-3重量份微晶纖維素、0.3-0.5重量份可壓性澱粉、0.02-0.06重量份聚乙二醇-4000或聚乙二醇-6000混合；或按1重量份牛蒡根水提物與13重量份賦形劑混合。所述的賦形劑為澱粉或糊精或乳糖或羥丙甲基纖維素或它們的混合物。經動物實驗研究證明，牛蒡根水提物具有防治或輔助治療男性勃起功能障礙(ED)作用。包括增強陽虛小鼠機體功能，提高應激能力，補腎壯陽作用；促進去勢小鼠的性功能；增強正常大鼠的勃起功能，升高NO、NOS和cGMP的含量及促進性激素分泌；能夠明顯縮短去勢大鼠電刺激勃起潛伏期，增加去勢大鼠血清中NO的含量，增加去勢大鼠前列腺和精囊腺等臟器的重量；明顯擴張A-ED大鼠陰莖組織的血管，升高大鼠陰莖組織的NO和cGMP含量。具體實施例方式以下舉例實施更具體說明本發明，實施例所示成分、比率、操作條件和順序可在不脫離本發明精神的限定內適當變更。實施例l:一種牛蒡根水提物的提取方法，提取方法如下1)取新鮮的牛蒡根3500g，除去殘根、雜質，洗淨，切片後，加6倍牛蒡根重量的水煮沸後文火煎煮30分鐘，多次攪拌，過濾得一次藥液；2)步驟l)所得藥渣加3倍重量的水，煮沸後文火煎煮30分鐘，過濾得二次藥液；3)合併兩次濾液，用電爐將濾液濃縮至1650ml，得濃度為2g/ml的水煎藥液；4)將步驟3)所得水煎藥液過濾，濾除固含物，經濃縮、冷凍乾燥後得到取率為4-7%牛蒡根提取物乾粉；5)所得乾粉通過苯酚硫酸法測定，牛蒡根提取物的乾粉含多糖為95%。實施例2:一種牛蒡根水提物的提取方法，提取方法如下-1)取乾燥的牛蒡根3500g，除去殘根、雜質，洗淨，切片後，加8倍牛蒡根重量的水煮沸後文火煎煮30分鐘，多次攪拌，過濾得一次藥液；2)步驟l)所得藥渣加3倍重量的水，煮沸後文火煎煮30分鐘，過濾得二次藥液；3)合併兩次濾液，用電爐將濾液濃縮至1650ml，得濃度為2g/ml的水煎藥液；4)將步驟3)所得水煎藥液過濾，濾除固含物，經濃縮、冷凍乾燥後得到取率為4-7%牛蒡根提取物乾粉；5)所得乾粉通過苯酚硫酸法測定，牛蒡根提取物的乾粉含多糖為98%。實施例3:用牛蒡根水提物製備膠囊劑取1重量份牛蒡根水提物與1.5份微晶纖維素、0.3重量份可壓性澱粉、0.02重量份PEG6000混合均勻，填充即得。實施例4:用牛蒡根水提物製備片劑取1重量份牛蒡根水提物與2.5份微晶纖維素、0.35重量份可壓性澱粉混合均勻，按常規方法，壓片即得。實施例5:用牛蒡根水提物製備顆粒劑取1重量份牛蒡根水提物與2.85重量份微晶纖維素、40.35重量份可壓性澱粉、0.02重量份PEG4000，溼法制粒，乾燥即得。實施例6:用牛蒡根水提物製備固體功能性食品取1重量份牛蒡根水提物與2.65重量份微晶纖維素及0.01重量份乳糖混合均勻後制粒，可填充膠囊或壓製成片。實施例7:牛蒡水提物對陽虛小鼠的影響將雄性小鼠(體重20土2g)隨機分成6組，每組ll只正常對照組(等容量蒸餾)、陽虛模型組(等容量蒸餾水)、陽性對照組(甲睪酮0.0013g/kg)及牛蒡水提物2、1、0.5g/kg三個劑量組。灌胃給藥7天後開始造模，除正常對照組外每組小鼠後腿外側肌肉注射氫化可的松0.25mg/d，連續注射9天，同時灌胃給藥。之後繼續灌胃給藥7天後小鼠稱重，測量小鼠肛溫、低溫負重遊泳時間、自主活動次數及相關免疫、性器官臟器係數。實驗結果表明，牛蒡水提物各劑量組能顯著性增加陽虛小鼠的體溫、低溫負重遊泳時間和自主活動次數，與模型組比較有顯著性差異。同時牛蒡水提物2、lg/k可明顯增加免疫器官脾臟和胸腺的重量，也可增加性腺器官包皮腺、前列腺、精囊腺、腎臟等的體重。結果見表l、2。表1牛蒡水提物對陽虛小鼠的影響(x±sn=li:>組別劑量體重體溫遊泳時間活動次數(g/kg)(g)rc)(s)欣/2min)空白對照組一23.66±4.1537.03±0.36*270.60±43.71*58.80±9.78**陽虛模型組一23.33±1.5534.68±2.26127.75±58.2337.20+19.34甲睪酮組0細325.99±2.69*37.17±0.82*233.00±33.58*55.90±12.81**21.90±3.4336.88±1.51*227.67±61.73**48.50±21.01*牛蒡根水125.08±4.0136.47±0.81*212.67±59.17*51.88±20.82*0.520.74±2.3936.95士1.4W241.83±61.73*52.13±16.84**注與模型組比較，*p<0.05，**p<0.01.表2牛蒡水提物對陽虛小鼠臟器係數的影響(x土sn-ll)組另u劑量腎上腺包皮腺胸腺前列腺腎臟脾臟(g/kg)+精囊腺空白對照組—0.027±0.012*0.163±0.054*0.197±0.07*0.356±0.090*1.339±0.13*o.409土o.or模型組—0.018±0.0050.126士O.030.134±0.0290.258±0.0641.2±0.0980.304±0.054甲睪酮組0.00130.024±0.004*0.167±0.04*0.176±0.042*0.463±0.153"1.43±0.U廣0.488±0.214'20.021±0.0040.235±0.027"0.171±0.036*0.336土0.07'1.294±0.072*0.524±0.199*牛蒡根水提物10.02±0.0040.187±0.037*0,218±0.036*0.365±0.092'1.313±0.1760.451±0.168*0.50.024±0.05*0.117±0.0310.138±0.080.304±0.1531.282±0.1190.484±0.188*注與模型組比較，*p<0.05，**p<0.01.實施例10:牛蒡根水提物對去勢小鼠性功能的測定昆明種雄性小鼠60隻，同期飼養1822g雌性小鼠60隻。雄性小鼠隨機分成6組，每組10隻正常對照組(等容量蒸餾)、陽虛模型組(等容量蒸餾水)、陽性對照組(甲睪酮0.0013g/kg)及牛蒡水提物2、1、0.5g/k三個劑量組。給藥7d後，除正常對照組外其他組雙側摘除睪丸，繼續給藥14天，最後一次給藥後60min，將雄性小鼠單只置於籠中，每籠中加入雌性小鼠1隻，記錄自雌性小鼠投於籠中雄鼠第1次捕捉雌鼠的時間即捕捉潛伏期，以及30min內雄性小鼠爬背的次數。實驗結果表明去勢小鼠給予牛蒡水提物0.5、1、2g/kg可使延長的捕捉潛伏期顯著縮短，去勢小鼠30min內爬背次數為1.9土1.0，較正常對照組明顯減少，去勢小鼠給予牛蒡水提物0.5、1、2g/kg可使小鼠爬背次數顯著增加，結果見表3。表3牛蒡水提物對去勢小鼠性功能的影響組別捕捉潛伏期(s)爬背次數(次)tableseeoriginaldocumentpage6注與模型組比較，*p〈0.05，**p〈0.01.實施例ll:牛蒡根水提物對正常大鼠勃起功能的影響將雄性SD大鼠(200土10g)40隻，隨機分成四組正常組(等體積蒸餾水)，牛蒡水提物l、0.5、0.25g/kg三個劑量組。連續灌胃給藥10d，測量勃起潛伏期(剌激條件為電壓8V，頻率7Hz，波寬l.lms)、阿樸嗎啡誘導的勃起次數、血清和陰莖組織中NO、NOS含量、陰莖組織和睪丸cGMP含量(放免法)等。實驗結果表明牛蒡水提物各劑量組均可極顯著性縮電剌激勃起潛伏期、增加阿樸嗎啡誘導的勃起次數與正常對照組比較有顯著性差異。同時牛蒡水提物各劑量組均能升高血清中睪酮、NO、NOS含量，其中1、0.5g/kg劑量組還能顯著升高陰莖組織NO、NOS、cGMP和睪丸組織中cGMP含量，實驗結果見表4一8。表4牛蒡水提物對正常大鼠勃起潛伏期血清睪酮的影響(x土sn=10)tableseeoriginaldocumentpage6注與正常對照組比較，*p<0.05,**p<0,01.表5APO對正常大鼠的影響(x士s，n=10)組別劑量(g/Kg)勃起次數(次)正常對照組一2.86±0.69牛蒡水提物14.29±1.25A0.55.00士1.41"0.25.50±1.87注與正常對照組比較，*p<0.05,**p〈0.01.表6牛蒡水提物對正常大鼠對血清NO和NOS含量的影響(xis，n=10)tableseeoriginaldocumentpage7注與正常對照組比較，*P〈0.05，**p〈0.01。表7牛蒡水提物對陰莖組織NO、NOS的影響(xisn=10)tableseeoriginaldocumentpage7注與正常對照組比較，*p<0.05,**p<0.01.表8牛蒡水提物對正常大鼠對陰莖組織和睪丸cGMP的影響(x士sn=10)tableseeoriginaldocumentpage7注與正常對照組比較，*p<0.05,**p〈0.01.實施例12:牛蒡水提物對去勢大鼠的影響將雄性大鼠(140±20g)隨機分為7組假手術組(等容量蒸餾水)、模型組(等容量蒸餾水)、陽性對照組(甲睪酮0.9mg/kg)、牛蒡水提物l、0.5、0.25g/kg組。灌胃給藥後7天後，戊巴比妥鈉麻醉後摘除大鼠雙側睪丸建立去勢模型。造模後繼續給藥14天後，測量大鼠電刺激勃起潛伏期，檢血清中NO含量，解剖相關臟器。實驗結果表明，牛蒡根水提物能顯著縮短去勢大鼠勃起潛伏期，極顯著升高血清中N0含量，與模型組比較有顯著性差異(P〈0.0D。實驗結果見表9。寧牛蒡根水提物對去勢大鼠勃起潛伏期和血清中NO的影響(x士sn^2)tableseeoriginaldocumentpage70.25319.36±38.40A13.4±3.4*—:63.1^13.45**注與模型組比較，*p<0.05，**p<0.01.實施例13:牛蒡根水提物對血管型ED大鼠的影響將雄性大鼠(140±20g)隨機分為8組，每組10隻假手術組(等容量蒸餾水組)、模型組(等容量蒸餾水)、陽性對照組(甲睪酮和西地那非組)、牛蒡水提物l、0.5、0.25g/kg組。灌胃給藥7天後大鼠經戊巴比妥鈉麻醉後腹腔麻醉後，做下腹正中切口，切開皮膚、皮下組織、腹膜，進入腹腔，於髂總動脈分叉處向下找到髂總動脈，向下可見膀胱上動脈起自髂總動脈，其深面找到左髂內動脈，游離血管周圍組織、筋膜，用6-0絲線於髂內動脈起始端結紮左髂內動脈，同法結紮右側髂內動脈。假手術組打開腹腔後，即關腹不做髂內動脈結紮。手術後繼續給藥14天後，測定各組大鼠電刺激勃起潛伏期及陰莖組織中N0、cGMP含量。實驗結果表明，牛蒡根水提物各劑量組均能縮短大鼠電刺激勃起潛伏期，並顯著升高陰莖組織中N0、cGMP含量，與模型組大鼠比較有顯著性差異(P〈0.01)。實驗結果見表10、11。表10牛蒡根水提物對A-ED模型大鼠勃起潛伏期的影響組另lj劑量(g/Kg)勃起潛伏期(s)假手術組一20.8±4.6"模型組—46.2±9.5甲睪酮組0.000926.3土4.9"西地那非組0扁22.6土4.(T125.1±3.3**牛蒡根水提物0.526.肚5.9"0.2530.1±8.5"注與模型組比較，*p〈0.05，**p〈0.01.考11牛蒡水提物對A-ED模型大鼠陰莖組織NO和cGMP的影響(x士sn=10)組另lj劑量(g/KgNO(Wnol/gprotcGMP(pmol/rag)假手術組—0.21±0.07*0.75±0.23**模型組0.12±0.070.39±0.16甲睪酮組.00090.20±0.08*0.46±0.24西地那非組0.0090.23±0.07**0.69±0.2廣11.34±0.62**0.79±0,30林牛蒡根水提物0.50.80±0.16**0.63±0.27**0.250.43±0.15**0.60±0.26**注與模型組比較，*p〈0.05，**p〈0.01.實施例14:牛蒡根治療男性勃起功能障礙臨床觀察臨床資料75例ED患者，均來自皖南醫學院附設戈磯山醫院門診，2006年3月至2007年12月，採用隨機分組，其中45例給予牛蒡根水提物製劑治療(治療組)，另30例給予六味地黃丸治8療(對照組)。其中治療組年齡2261歲，平均(36.56土11.39)歲，病程3個月7年，平均(2.24士1.63)年；對照組年齡2459歲，平均(37.81土10.09)歲，病程4個月6年，平均(1.86土1.02)年。2組患者年齡、病程、勃起功能積分和病情輕重程度等方面比較均無顯著性差異。診斷標準和納入標準參照國際ED診斷原則，即男子在性刺激下，不能持續地達到或維持足夠硬度的陰莖勃起以完成滿意性交，且病程在3個月以上，國際勃起功能評分問巻《21分，診斷為ED。排除病例標準確診的中度以上器質性勃起功能障礙患者；嚴重臟器疾病或精神病；配偶不能充分配合者。治療和觀察方法治療組服用牛蒡根水提物10g/日，3次/日；對照組服用六味地黃丸(8粒/次，3次/曰；兩組均治療8周。治療前、治療4周、治療8周分別觀察勃起功能、國際問巻(IIEF-5)積分改變，包括陰莖勃起信心、成功插入次數、勃起硬度、維持勃起能力和性交滿意度5個問題。臨床療效比較治療組臨床控制5，顯效9例，有效15例，總有效率為72.5%;對照組臨床控制2例，顯效2例，有效7例，總有效率為36.7%。治療組療效優於對照組。勃起功能評分改變情況治療組在治療4周、8周，勃起功能評分與治療前比較顯著增加(PO.01);治療後治療組與對照組勃起功能評分有顯著性差異(P0.05)。見表12tableseeoriginaldocumentpage9注與本組治療前比較，厶P〈0.01;與對照組治療後比較，*P<0.0權利要求1、一種牛蒡根水提物的提取方法，其特徵在於，提取方法如下1)取新鮮的牛蒡根，除去殘根、雜質，洗淨，切片後，加6倍牛蒡根重量的水煮沸後，文火煎煮30分鐘，多次攪拌，過濾得一次藥液；或乾燥的牛蒡根，除去殘根、雜質，洗淨，切片後，加8倍牛蒡根重量的水煮沸後文火煎煮30分鐘，多次攪拌，過濾得一次藥液；2)步驟1)所得藥渣加3倍重量的水，煮沸後文火煎煮30分鐘，過濾得二次藥液；3)合併兩次濾液，用電爐將濾液濃縮至濃度為2g/ml的水煎藥液；4)將步驟3)所得的水煎藥液過濾，濾除固含物，經濃縮、冷凍乾燥後得到取率為4-7％牛蒡根提取物乾粉；5)所得乾粉提取物通過苯酚硫酸法測定，牛蒡根提取物的乾粉含多糖為95—98％。2、一種牛蒡根水提物在防治和輔助治療男性勃起功能障礙的藥物和食品中的應用，其特徵在於，以牛蒡根水提物作為藥物或功能性食品的原料，按照常規製備方法分別製成膠囊劑、片劑、顆粒劑、固體功能性食品；配比是取l重量份牛蒡根水提物，與13重量份微晶纖維素、0.3-0.5重量份可壓性澱粉、0.02-0.06重量份聚乙二醇-4000或聚乙二醇-6000混合；或按1重量份牛蒡根水提物與1-3重量份賦形劑混合。3、如權利要求2所述的牛蒡根水提物在防治和輔助治療男性勃起功能障礙的藥物和食品中的應用，其特徵在於，所述的賦形劑為澱粉或糊精或乳糖或羥丙甲基纖維素或它們的混合物。全文摘要一種牛蒡根水提物的提取及應用，提取方法為取牛蒡根除質，洗淨切片，加6-8倍牛蒡根重量的水煎煮，過濾得一次藥液；藥渣加3倍水，煎煮過濾得二次藥液；合併兩次濾液濃縮至濃度為2g/ml的水煎藥液，濾除固含物，經濃縮、冷凍乾燥後得牛蒡根提取物乾粉；所得牛蒡根提取物的乾粉含多糖為95-98％。牛蒡根水提物作為藥物原料和功能性食品原料，按照常規製備方法分別製成膠囊劑、片劑、散劑、顆粒劑、口服液體製劑或複方製劑。本發明所得牛蒡根水提物可用於預防和治療男性勃起功能障礙。文檔編號A23L1/30GK101433568SQ20081023848公開日2009年5月20日申請日期2008年12月19日優先權日2008年12月19日發明者何聖紅,喻麗珍,佳姚,張鵬英,李麗華,敏郭,陳世雄,陳靠山申請人:陳靠山