防治土傳病害複合菌劑及其製備方法與流程
2024-04-10 23:45:05
本發明涉及生物製品技術領域，尤其涉及一種防治土傳病害複合菌劑及其製備方法。
背景技術：
我國農業生產中，由於化學肥料的長期使用，致使農田生態環境、土壤理化性質、土壤結構和土壤微生物區系受到不同程度的破壞，以及植物土傳病害的病原物的複合侵染，在一定程度上嚴重影響了農產品的生產。
隨著微生物技術在農業中的應用，利用有益微生物殺滅或壓低病原生物數量以控制植物病害發生、發展，許多功能菌也廣泛應用於農藥和肥料領域，為實現環保、無汙染和高效農業生產提供了有效的方法和解決途徑。
目前市面上同類技術產品雖能在秸稈資源的利用和對土壤有機質的提升方面有一定促進作用，但仍存在著以下問題：菌種存活能力差，多種微生物一起培養產生拮抗，容易造成部分菌種死亡，從而影響生防效果；菌種之間會產生抗衡，適應性差，應用效果不穩定；製備方法不完善、不成熟，工業化程度低。
技術實現要素：
本發明所要解決的技術問題是提供一種既能促進土壤改良、又有良好生防效果的防治土傳病害複合菌劑。
為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：防治土傳病害複合菌劑，包括如下重量份的組份：螢光假單孢菌液體菌種25～35份；枯草芽孢桿菌液體菌種25～35份；巨大芽孢桿菌液體菌種25～35份；蘇雲金桿菌液體菌種25～35份；哈次木黴液體菌種3～7份；大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；瓊脂1～3份；磷酸氫二鉀8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份。
作為優選，所述防治土傳病害複合菌劑包括如下重量份的組份：螢光假單孢菌液體菌種30份；枯草芽孢桿菌液體菌種30份；巨大芽孢桿菌液體菌種30份；蘇雲金桿菌液體菌種30份；哈次木黴液體菌種5份；大豆蛋白粉10份；牛肉膏2份；瓊脂2份；磷酸氫二鉀10份；尿素10份；糖蜜20份。
由於採用了上述技術方案，本防治土傳病害複合菌劑具有以下有益效果：
(1)將每種微生物的功能組合為強勢的菌體，菌種功能各異，完美搭配相符；其中包含固氮、絮凝能力較強的螢光假單胞及解磷菌的芽孢桿菌，分解有機質、纖維、蛋白、秸稈及農殘所用的哈次木黴；枯草芽孢桿菌、蘇雲金桿菌對鱗翅目、雙翅目及膜翅目有較強的殺傷力，巨大芽孢桿菌解磷、解藥，是典型的好氣菌，這個群體具有強有力的防治能力；本產品具有強大的存活能力，能快速繁殖，具有固氮、溶磷、防止肥分流失的效果。
(2)菌種通過單獨培養成熟穩定後按一定比例組合，避免了多種微生物一起培養產生拮抗造成部分菌種死亡的現象，按照真細菌的比例搭配避免了菌之間的抗衡，本產品是一種多功能複合型的生防菌群，對當前的土壤改良、農業的環保、廢棄秸稈垃圾有著很好的解決方式，既能促進土壤改良，又有很好的生防效果，利於改善土壤結構、防止肥分流失、保護生態環境。
本發明還提供了上述防治土傳病害複合菌劑的製備方法，包括如下步驟：
步驟一、培養基的製備
(1)培養基a的製備
取胺基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白腖、尿素、牛肉膏和水製成重量含量為胺基酸1.5～2.5％、磷酸二氫鉀1.5～2.5％、葡萄糖0.5～1.5％、蛋白腖0.1～0.9％、尿素0.1～0.9％、牛肉膏0.5～1.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基a；
(2)培養基b的製備
取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水製成重量含量為硝酸鉀0.3～0.8％、氯化鈉0.1～0.3％，糖蜜3～8％，葡萄糖1～3％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基b；
步驟二、液體菌種的培養
取螢光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基a進行培養，得到螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇雲金桿菌液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
取哈次木黴先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基b進行培養，得到哈次木黴液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
步驟三、液體菌種的熟化
將步驟二中培養後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種和哈次木黴液體菌種分別投入90～100公斤培養基中，在種子罐內25～35℃培養5～8天，熟化後備用；
步驟四、液體菌種的複合與強化
取步驟三中熟化後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種、哈次木黴液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按比例混合成複合體，即製得該防治土傳病害複合菌劑。
作為優選，步驟四中各組份的重量份配比如下：螢光假單孢菌液體菌種25～35份；枯草芽孢桿菌液體菌種25～35份；巨大芽孢桿菌液體菌種25～35份；蘇雲金桿菌液體菌種25～35份；哈次木黴液體菌種3～7份；大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；瓊脂1～3份；磷酸氫二鉀8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份。
由於採用了上述技術方案，本製備方法具有以下有益效果：利用各自微生物的特性在培養過程中實行菌種的單獨培養，菌種成熟穩定後加以複合使其進入穩定狀態，防止混合後導致有些菌種衰微，避免了多種微生物一起培養產生拮抗造成部分菌種死亡的現象。本製備方法簡單易於實現，這種方式複合而成菌種功能各異，完美搭配相符，具有固氮、溶磷、解鉀、分解有機質、抑制蟲害和促進有機質轉換、加速有機質分解養分等功能，既能促進土壤改良，又有很好的生防效果。
具體實施方式
下面結合實施例，進一步闡述本發明。
實施例1
本實施例中，防治土傳病害複合菌劑包括如下重量份的組份：螢光假單孢菌液體菌種25份；枯草芽孢桿菌液體菌種25份；巨大芽孢桿菌液體菌種25份；蘇雲金桿菌液體菌種25份；哈次木黴液體菌種3份；大豆蛋白粉8份；牛肉膏1份；瓊脂1份；磷酸氫二鉀8份；尿素8份；糖蜜15份。
其製備方法包括如下步驟：
步驟一、培養基的製備
(1)培養基a的製備
取胺基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白腖、尿素、牛肉膏和水製成重量含量為胺基酸1.5％、磷酸二氫鉀1.5％、葡萄糖0.5％、蛋白腖0.2％、尿素0.3％、牛肉膏0.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基a；
(2)培養基b的製備
取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水製成重量含量為硝酸鉀0.3％、氯化鈉0.1％，糖蜜4％，葡萄糖1％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基b；
步驟二、液體菌種的培養
取螢光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基a進行培養，得到螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇雲金桿菌液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
取哈次木黴先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基b進行培養，得到哈次木黴液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
步驟三、液體菌種的熟化
將步驟二中培養後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種和哈次木黴液體菌種分別投入90～100公斤培養基中，在種子罐內25～35℃培養5～8天，熟化後備用；
步驟四、液體菌種的複合與強化
取步驟三中熟化後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種、哈次木黴液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成複合體，即製得該防治土傳病害複合菌劑。
實施例2
本實施例中，防治土傳病害複合菌劑包括如下重量份的組份：螢光假單孢菌液體菌種30份；枯草芽孢桿菌液體菌種30份；巨大芽孢桿菌液體菌種30份；蘇雲金桿菌液體菌種30份；哈次木黴液體菌種5份；大豆蛋白粉10份；牛肉膏2份；瓊脂2份；磷酸氫二鉀10份；尿素10份；糖蜜20份。
其製備方法包括如下步驟：
步驟一、培養基的製備
(1)培養基a的製備
取胺基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白腖、尿素、牛肉膏和水製成重量含量為胺基酸2％、磷酸二氫鉀2％、葡萄糖1％、蛋白腖0.5％、尿素0.5％、牛肉膏1％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基a；
(2)培養基b的製備
取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水製成重量含量為硝酸鉀0.5％、氯化鈉0.2％，糖蜜5％，葡萄糖2％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基b；
步驟二、液體菌種的培養
取螢光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基a進行培養，得到螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇雲金桿菌液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
取哈次木黴先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基b進行培養，得到哈次木黴液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
步驟三、液體菌種的熟化
將步驟二中培養後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種和哈次木黴液體菌種分別投入90～100公斤培養基中，在種子罐內25～35℃培養5～8天，熟化後備用；
步驟四、液體菌種的複合與強化
取步驟三中熟化後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種、哈次木黴液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成複合體，即製得該防治土傳病害複合菌劑。
實施例3
本實施例中，防治土傳病害複合菌劑包括如下重量份的組份：螢光假單孢菌液體菌種35份；枯草芽孢桿菌液體菌種35份；巨大芽孢桿菌液體菌種35份；蘇雲金桿菌液體菌種35份；哈次木黴液體菌種7份；大豆蛋白粉12份；牛肉膏3份；瓊脂3份；磷酸氫二鉀12份；尿素12份；糖蜜25份。
其製備方法包括如下步驟：
步驟一、培養基的製備
(1)培養基a的製備
取胺基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白腖、尿素、牛肉膏和水製成重量含量為胺基酸2.5％、磷酸二氫鉀2.5％、葡萄糖1.5％、蛋白腖0.8％、尿素0.8％、牛肉膏1.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基a；
(2)培養基b的製備
取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水製成重量含量為硝酸鉀0.8％、氯化鈉0.3％，糖蜜8％，葡萄糖3％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養基b；
步驟二、液體菌種的培養
取螢光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇雲金桿菌先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基a進行培養，得到螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇雲金桿菌液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
取哈次木黴先在無菌室純化復壯，然後分別用500克培養基b進行培養，得到哈次木黴液體菌種；培養條件為25～30℃搖床培養24～72小時；
步驟三、液體菌種的熟化
將步驟二中培養後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種和哈次木黴液體菌種分別投入90～100公斤培養基中，在種子罐內25～35℃培養5～8天，熟化後備用；
步驟四、液體菌種的複合與強化
取步驟三中熟化後的螢光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇雲金桿菌液體菌種、哈次木黴液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成複合體，即製得該防治土傳病害複合菌劑。
以上所述僅為本發明示意性的具體實施方式，並非用以限定本發明的範圍。任何本領域的技術人員，在不脫離本發明的構思和原則的前提下所作出的等同變化與修改，均應屬於本發明保護的範圍。