免疫學組合物的製作方法

2023-12-05 09:09:06 1

專利名稱：免疫學組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及免疫學組合物(immunological composition)，其包含磺基脂-環糊精(sulpholipo-cyclodextrin，SL-CD)，並包含皂素(saponin)或 Quil A，還任選含有至少一種抗原。本發明還涉及製備免疫學組合物的方法，所述組合物含SL-⑶，皂素或Quil A， 以及抗原。本發明還提供了應用致免疫學組合物激發抗牛暫時熱病毒(bovine ephemeral fever virus, BEFV)、抗牛皰疹病毒 1 (IBR)、或抗藍舌病毒(bluetongue virus, BTV)的免疫應答的方法。本發明提供了含本發明免疫學組合物的試劑盒。
背景技術：
皂素佐劑是已在商業上應用於動物疫苗的一類已知佐劑。皂素是多種植物中發現的一類次級代謝產物。它們是一些兩親性糖苷，因在水溶液中振蕩時產生肥皂樣泡沫這一現象而被歸為一類。在結構上，皂素由一或多個親水糖苷組分與一個親脂性三萜(triterpene)衍生物組合而成。商購的皂素大都是從南美樹種Quillaja Saponaria Molina和Mohave Yucca植物(也稱Yucca schidigera)的樹皮中分離出來的。皂素可從多種來源獲得，所述來源包括Berghausen Corporation (Cincinnati，0H)。皂素的精鍊形式通常稱為Quil A，可從多種來源商購，包括Berghausen Corporation, Sergeant Chemical Company(Clifton, NJ), Superfos a/s (Vedbaek, Denmark), 以及 Brenntag Biosector (Frederikssund, Denmark)。Quil-A 的理化特性可參見 Superfos 的題為 Purified Saponin Adjuvant Quil-A的商業出版物。Quil-A在化學方面的特徵在於，碳水化合物組分經糖苷鍵與三萜皂皮酸(triterpenoid quillaic acid)連接。多個已授權的美國專利討論了作為佐劑的Quil A。例如，美國專利6，416，764和 6，291, 228涉及一些疫苗，它們將Quil A用作佐劑，並包含牛病毒性腹瀉病毒的非致病株。 美國專利4，432，969涉及一種吸入性過敏原組合物，其包含吸入性過敏原，並包含皂素或 Quil A佐劑。美國專利4，900, 549描述了製備含Quil A的致免疫複合物的方法。美國專利6，165，995涉及製備SL-⑶衍生物。美國專利6，610，310涉及聚離子聚合物如SL-⑶作為佐劑。牛暫時熱(Bovine Ephemeral i^eve^BEF)是一種引起虛弱的病毒性疾病，既感染奶牛，也感染肉牛，在北美尤其如此。BEF也見於商業化養牛的大多數亞洲國家。已知BEF是 「三日病(three day sickness) 」，能實質上影響牛奶產量或引起肉牛和奶牛死亡(Walker， P. J.，2005，Curr. Top. Microbiol. Immunol. 292 :57-80)。BEF的致病因子是牛暫時熱病毒(BEFV)。此病毒是歸為短暫熱病毒屬 (Ephemerovirus)的彈狀病毒(rhabdovirus)。BEFV的病毒粒子是子彈狀或錐狀，包含負鏈單鏈RNA基因組。BEFV基因組編碼核蛋白，聚合酶相關蛋白，基質蛋白，大的RNA-依賴性 RNA聚合酶，以及兩種糖蛋白。改良BEF活疫苗在澳大利亞已上市多年，每年都在BEF季之前進行強化接種。此疫苗要求有獸醫醫囑，是凍幹形式，需要在施用前用含佐劑的稀釋劑重建。未受過感染的 (NaiVe)動物需要接種兩劑疫苗且隨後每年補種。PCT出版物W0/1994004685涉及含上述BEFV表面糖蛋白的BEFV疫苗製劑。Vanselow et al. (1995，Vet. Microbiol. 46 :117-130)描述了對各種 BEF 疫苗的測試。Hsieh et al. (2006, J. Vet. Med. Sci. 68 :543-548)涉及的 BEFV 疫苗用到了 Tn88U8和Tn73毒株。這些疫苗通過添加二乙烯亞胺和氫氧化鋁或水油水佐劑滅活病毒而製得。含BEFV結構性糖蛋白的重組病毒可參見Wal lace，D. B. and Viljoen G.J. (2005, Vaccine 23 :3061-3067)，其中的糖蛋白已克隆至疙瘩皮膚病(lumpy skin disease)病毒 (SA-Neethling 型)載體中。Chuang et al. (2007, J. Virol. Meth. 145 :84-87)涉及用 RNA 幹擾且抑制 BEFV 表面糖蛋白基因的表達。牛皰疹病毒-1也已知是感染性牛鼻氣管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus)。其縮寫為BHV或IBR。牛皰疹病毒_1是皰疹病毒科 (Herpesviridae)的病毒，在牛群中引起疾病，包括鼻氣管炎，陰道炎，龜頭包皮炎 (balanoposthitis),流產，結膜炎(conjunctivitis),和腸炎。BHV-I也引起船運熱 (shipping fever) 0它通過性接觸，人工授精，以及氣溶膠播散來傳播。象其它皰疹病毒一樣，BHV-I引起終身的潛伏感染並排出病毒。已有疫苗能減輕疾病的嚴重性和發生率。由 BHV-I引起的呼吸道疾病通常被稱為感染性牛鼻氣管炎。藍舌病毒(BTV)是環狀病毒屬(Orbivirus)的原型病毒(prototype virus)，該屬歸為雙鏈RNA病毒科呼腸孤病毒科(Reoviridae)。BTV在諸如綿羊、山羊、牛和鹿等牲畜中引起嚴重疾病。文獻中報導了 M種血清型，它們引起的問題從不明顯的感染到急性烈性感染(fulminating infection)都有。慢性、持續性排出病毒的牛也已被發現。已有疫苗用於治療牲畜的藍舌病。發明概述本文提供了免疫學組合物，其包含磺基脂-環糊精(SL-CD)和皂素，以及任選地， 含至少一種抗原。在本發明一些實施方案中，皂素是Quil A。在本發明一些實施方案中，所述至少一種抗原選自細菌、病毒、肽、多肽、核酸、或它們的組合。在本發明一些實施方案中， 所述至少一種抗原是獸醫抗原(veterinary antigen)。在本發明一些實施方案中，獸醫抗原是牛抗原。在本發明一些實施方案中，所述抗原是病毒抗原。在本發明一些實施方案中， 病毒抗原是牛皰疹病毒1 (IBR)、藍舌病毒(BTV)、或牛暫時熱病毒(BEFV)。病毒抗原可以是減毒活的、重組的、殺死的(killed)、或滅活的(inactivated)。在一些實施方案中，本發明提供了致免疫組合物，其中所述抗原是減毒活病毒。在本發明一些實施方案中，所述病毒是牛暫時熱病毒(BEFV)。在本發明多種實施方案中，所述病毒是來自冷凍的儲存物(frozen stock)，幹的儲存物(dried stock)，凍幹的儲存物(freeze-dried stock)，或新鮮的儲存物(fresh stock)。在多種實施方案中，皂素在本發明免疫學組合物中終濃度約0. 5mg/mL。 在多種實施方案中，Quil A在本發明免疫學組合物中終濃度約0. lmg/mL至約0. 2mg/mL0 在一些實施方案中，本發明免疫學組合物中Quil A的終濃度為約0. 158mg/mL。在多種實施方案中，本發明免疫學組合物中SL-⑶的終濃度為約0. 2mL/mL。在一些實施方案中，含皂素和SL-⑶或含QuilA和SL-⑶的本發明免疫學組合物包含至少一種另外的佐劑。在本發明多種實施方案中，所述另外的佐劑選自氫氧化鋁、SP-油，或卡波普(carbopol)。在本發明一些實施方案中，所述抗原是多肽，其在一些實施方案中是病毒亞單位。在本發明一些實施方案中，病毒亞單位選自BEFV、IBR、或BTV。在一實施方案中，本發明提供在動物中激發抗獸醫抗原的免疫應答的方法，包括對該動物施用致免疫組合物，所述組合物含皂素、SL-CD、和至少一種獸醫抗原。在一實施方案中，所述免疫應答在施用單劑致免疫組合物之後被激發。在一實施方案中，本發明提供在動物中激發抗IBR的免疫應答的方法，包括對該動物施用致免疫組合物，所述組合物含皂素、SL-CD、和至少一種作為抗原的IBR。在一實施方案中，本發明提供在動物中激發抗BTV 的免疫應答的方法，其包括對該動物施用致免疫組合物，所述組合物含皂素、SL-CD、和至少一種作為抗原的BTV。在一實施方案中，本發明提供在動物中激發抗BEFV的免疫應答的方法，包括對該動物施用致免疫組合物，所述組合物含QuilA、SL-⑶、和抗原。在一實施方案中，所述免疫應答在施用單劑致免疫組合物之後被激發。在一實施方案中，本發明提供在動物中激發抗 IBR的免疫應答的方法，包括對該動物施用致免疫組合物，所述組合物含皂素、SL-CD、和抗原。在一實施方案中，本發明提供在動物中激發抗BTV的免疫應答的方法，其包括對該動物施用致免疫組合物，所述組合物含皂素、SL-⑶、和抗原。在本發明一些實施方案中，施用本發明致免疫組合物之後激發的免疫應答是保護性免疫應答。在一實施方案中，本發明提供致免疫組合物，其通過在添加SL-⑶之前將Quil A 與病毒組合而製得。所述病毒可以是減毒活的、重組的、殺死的、或滅活的。在本發明一些實施方案中，Quil A和病毒在室溫混合。在本發明一些實施方案中，Quil A的病毒混合至少15分鐘。在本發明一些實施方案中，Quil A和病毒混合至少120分鐘。在一實施方案中，本發明提供了含本發明致免疫組合物以激發動物的免疫應答的試齊U盒。在多種實施方案中，本發明提供了在牛中誘導出抵抗由BEFV引起的病毒感染或牛暫時熱的免疫應答的方法。所述誘導抗BEFV的免疫應答的方法包括對牛施用含BEFV、 SL-CD、以及QuilA的組合物。在一實施方案中，本發明提供了致免疫組合物或疫苗，其包含免疫學有效量的 BEFV、SL-CD、以及 QuilA。在多種實施方案中，本發明提供了在牛中誘導出抵抗由IBR引起的皰疹病毒感染或牛鼻氣管炎的免疫應答的方法。所述誘導抗IBR的免疫應答的方法包括對牛施用含IBR、 SL-⑶、和皂素的組合物。在多種實施方案中，本發明提供了提供了在牛中誘導出抵抗由BTV引起的病毒感染或牛藍舌病的免疫應答的方法。所述誘導抗BTV的免疫應答的方法包括對牛施用含BTV、 SL-⑶、和皂素的組合物。在一實施方案中，本發明提供了致免疫組合物或疫苗，其包含免疫學有效量的 IBR、SL-CD、和皂素。在一實施方案中，本發明提供了致免疫組合物或疫苗，其包含免疫學有效量的 BTV、SL-CD、和皂素。發明詳述本文是基於，至少部分地基於，發現含SL-⑶、和皂素或Quil A的免疫學組合物能增強至少一種抗原的致免疫性。在本發明多種實施方案中，所述至少一種抗原可以選自細菌、病毒、肽、多肽、核酸、或它們的組合。在本發明一些實施方案中，所述至少一種抗原是獸醫抗原。在本發明多種實施方案中，獸醫抗原可以是牛抗原。在本發明一個實施方案中，獸醫抗原可以是病毒抗原。在本發明一些實施方案中， 病毒抗原包括但不限於BEFV，IBR,或BTV株。BEFV是已知在澳大利亞、非洲、中東和亞洲引起牛暫時熱的彈狀病毒。BEFV的多個株是已知的，如BB2271-919和其親本株(919)，TN73， Tn88128,BEFV2001的1_11株，或BEFV2004的1_3株。根據使用本發明致免疫組合物的國家的不同，對病毒株的選擇也不同。牛皰疹病毒-1也稱BHV或IBR，是在牛中引起疾病的皰疹病毒科病毒，所述疾病包括鼻氣管炎，陰道炎，龜頭包皮炎，流產，結膜炎，和腸炎。IBR 也引起船運熱。它通過性接觸，人工授精，以及氣溶膠播散來傳播。象其它皰疹病毒一樣， IBR引起終身的潛伏感染並排出病毒。由IBR引起的呼吸道疾病通常被稱為感染性牛鼻氣管炎。藍舌病毒(BTV)是環狀病毒屬的原型病毒(prototype virus)，該屬歸為雙鏈RNA 病毒科呼腸孤病毒科。BTV在諸如綿羊、山羊、牛和鹿等牲畜中引起嚴重疾病。文獻中報導了 M種血清型，它們引起的問題從不明顯的感染到急性烈性感染都有。慢性、持續性排出病毒的牛也已被發現。藍舌病可見於澳大利亞、北美、非洲、中東、亞洲、以及歐洲。在本發明多種實施方案中，致免疫組合物中的病毒可以是減毒活的、重組的、殺死的、或滅活的。製備減毒活病毒的方法是文獻中已知的。例如，病毒可以通過在外源宿主如組織培養物、胚卵、或活體動物中傳代而減毒。可以選出減毒的BEFV，以便在非牛的細胞中優先生長，並在選擇過程中，變得越來越不能夠在牛的細胞中生長。因為這些減毒的病毒株在牛宿主中複製能力很弱，當它們被給予牛以後，誘導免疫力而非引起疾病。當一種病毒對其天然宿主的毒力降低而對新宿主的毒力增加時，認為該病毒被減毒。一些減毒病毒株可天然產生。遺傳工程可以用於按照指定的方向使病毒減毒。製備殺死的或滅活的病毒以用於致免疫組合物、疫苗和方法中的方法是本領域已知的。在化學滅活過程中，合適的病毒樣品或含該病毒的血清樣品用足量的滅活劑在足夠高(或低，取決於該滅活劑)的溫度或 PH處理足夠長的時間以滅活該病毒。例如，病毒可以用諸如福馬林、二乙烯亞胺(binary ethyleneimine, BEI)，或或疏水溶劑、酸等滅活劑處理。病毒也可以通過用紫外線或X-線輻射、或通過加熱等方式來滅活。熱滅活是在足以滅活該病毒的溫度加熱足夠長的時間。輻射滅活是用一定波長的光或其它能量處理足夠長的時間以滅活該病毒。在本發明一些實施方案中，致免疫組合物包含減毒活病毒。
7在本發明一些實施方案中，致免疫組合物包含從冷凍的儲存物、幹的儲存物、或新鮮儲存物獲得的抗原。當所述抗原從幹的儲存物獲得時，可從凍幹的儲存物獲得。在一些實施方案中，本發明的致免疫組合物包含從冷凍的儲存物獲得的抗原。皂素是廣泛分布於植物和海洋動物王國的類固醇或三萜糖苷。皂素引起注意的特點是，在水中形成振蕩後能起泡的膠體溶液，以及能沉澱膽固醇。當皂素靠近細胞膜時， 它們在膜上產生孔狀結構，引起膜破裂。皂素被用作動物疫苗的佐劑。各種皂素的佐劑活性和溶血活性已被深入研究(Lacaille-Dubois and Wagner, 1996, A review of the biological and pharmacological activities of saponins"Phytomedicine vol 2 pp 363-386)。皂素是多種植物中發現的一類次級代謝產物。它們是一些兩親性糖苷，因在水溶液中振蕩時產生肥皂樣泡沫這一現象而被歸為一類。在結構上，皂素由一或多個親水糖苷組分與一個親脂性三萜衍生物組合而成。商購的皂素大都是Quillaja Saponaria Molina 和Yucca schidigera中提取的。「Quil Α」是指皂素的精鍊形式。皂素在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約0. 4mg/mL至約0. 6mg/mL。皂素在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約0. 5mg/mL。Quil A在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約0. lmg/mL至約0. ang/mL。Quil A在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約0. 12mg/mL至約0. 18mg/mL。Quil A在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約 0. Hmg/mL至約0. 16mg/mL。Quil A在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約0. 158mg/ mL。在一實施方案中，Quil A在本發明致免疫組合物中的終濃度是約0. 158mg/mL。在水包角鯊烷(squalane in-water)乳液(SL-CD/角鯊烷)中的磺基脂-環糊精被用於製備不同疫苗。SL-⑶/角鯊烯(squalene)可以按Hilgers等所述來制 I (Sulfolipo-cyclodextrin in squalane in—water as a novel and safe vaccine adjuvant. Vaccine 17(1999), pp. 219-228 ；Fort Dodge Animal Health Holland, ffeesp, The Netherlands)。SL-⑶在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約0. 09mL/mL至約0. 3mL/mL。 SL-⑶在本發明致免疫組合物中的終濃度可以是約0. lmL/mL，約0. 15mL/mL，約0. 17mL/mL, 約0. 2mL/mL，或約0. 25mL/mL。本發明致免疫組合物還可包含除了 Quil A和SL-⑶以外的佐劑。所述另外的佐劑可以選擇本領域已知的任一種佐劑，見後文詳述。在一些實施方案中，本發明提供了激發免疫應答的方法，包括對動物施用含皂素和SL-⑶的免疫學組合物。在一些實施方案中，所述方法包括對動物施用含皂素、SL-⑶和至少一種抗原的免疫學組合物。在一些實施方案中，所述至少一種抗原是獸醫抗原。在本發明一些實施方案中，獸醫抗原是牛抗原。在本發明一些實施方案中，獸醫抗原是病毒抗原。 在一些實施方案中，病毒抗原是BEHV，IBR或BTV。在一些實施方案中，病毒是減毒活的，重組的，殺死的，或滅活的。在一些實施方案中，病毒是殺死的。在一些實施方案中，抗原從冷凍的儲存物，幹的儲存物，或新鮮的儲存物獲得。當抗原從幹的儲存物獲得時，它可以從凍幹的儲存物獲得。在一些實施方案中，抗原從冷凍的儲存物獲得。在一些實施方案中，本發明提供了激發免疫應答的方法，包括對動物施用含QuilA 和SL-⑶的免疫學組合物。在一些實施方案中，所述方法包括對動物施用含Quil A、SL-⑶ 和至少一種抗原的免疫學組合物。在一些實施方案中，用在所述方法中的至少一種抗原是獸醫抗原。在一些實施方案中，用在所述方法中的獸醫抗原是牛抗原。在一些實施方案中，所述抗原是病毒抗原。在一些實施方案中，病毒抗原是IBR，BEHV或IBR。在一些實施方案中，病毒抗原是減毒活的，重組的，殺死的，或滅活的。在一些實施方案中，病毒是減毒活的。 在一些實施方案中，抗原從冷凍的儲存物，幹的儲存物，或新鮮的儲存物獲得。當抗原從幹的儲存物獲得時，它可以從凍幹的儲存物獲得。在一些實施方案中，抗原從冷凍的儲存物獲得。本發明的致免疫組合物可以在施用多劑之後激發免疫應答。在一些實施方案中， 本發明的致免疫組合物可以在施用兩劑之後激發免疫應答。在一些實施方案中，本發明的致免疫組合物可以在施用單劑之後激發免疫應答。由本發明的致免疫組合物激發的免疫應答可以是保護性免疫應答。施用了起始劑量的本發明致免疫組合物之後，可以在約4周後施用加強劑量，以增強該致免疫應答。還可以進一步施用加強劑量。在一實施方案中，本發明提供了在動物中激發免疫應答的試劑盒。在一些實施方案中，試劑盒包含致免疫組合物，組合物包含皂素和SL-CD和任選地至少一種抗原。在一些實施方案中，試劑盒中的皂素是Quil A。在一些實施方案中，試劑盒中的至少一種抗原是獸醫抗原。在一些實施方案中，試劑盒中的獸醫抗原是牛抗原。在一些實施方案中，試劑盒中的獸醫抗原是病毒抗原。在一些實施方案中，試劑盒中的病毒抗原是BEFV，IBR，或BTV。 在一些實施方案中，試劑盒中的抗原可以是減毒活的，重組的，殺死的或滅活的。在一些實施方案中，試劑盒中的抗原可以是減毒獲得。在一些實施方案中，試劑盒中的抗原可以是殺死的。在一些實施方案中，試劑盒中的抗原可以從冷凍的儲存物，幹的儲存物，或新鮮的儲存物獲得。在一些實施方案中，試劑盒中的抗原從冷凍的儲存物獲得。本發明提供了含SL-CD以及皂素和/或Quil A的試劑盒，免疫學組合物，和疫苗，其可包含至少一種另外的佐劑。可以使用的佐劑很多，例如，氫氧化鋁，阿夫立定 (avridine), 二甲基雙十八燒基溴化銨(dimethyldioctadecyl ammonium bromide,也稱 DDAB或D0DAB)，聚磷腈(polyphosphazene)，基於礦物油的水包油乳液如SPT乳液(見例如 Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach, 1995,編輯 Michael F. Powel and Mark J. Newman, Plennum Press, New York and London, pages 147-204),基於可代謝油的油包水乳液，如美國專利6，368,601所述，以及美國專利5，422，109所述的那些。合適的佐劑的另一些例子包括角鯊烷和角鯊烯(或動物來源的其它油)；嵌段共聚物如pluronic (L121)皂素；去汙劑如Tween -80，礦物油如DRAKE0L ,或Marcol ; 植物油如花生油；棒狀桿菌衍生的佐劑如短小棒狀桿菌(corynebacterium parvum)；丙酸桿菌衍生的佐劑；牛分枝桿菌(Bacillus Calmette and Guerinn，或BCG)；白細胞介素如白介素2和白介素-12 ；單核因子如白介素1 ；腫瘤壞死因子；幹擾素如伽瑪幹擾素； 脂質體；iscom佐劑；分枝桿菌細胞壁提取物；合成的糖肽如胞壁醯二肽或其它衍生物； 阿夫立定；脂質A ；硫酸葡聚糖；DEAE-葡聚糖或帶有磷酸鋁的DEAE-葡聚糖；羧聚乙烯 (carboxypolymethylene)，如卡波普 ，·；丙烯酸共聚物乳劑如Neocryl A640(見美國專利5，047，238)；豆苗病毒或動物痘病毒蛋白；亞病毒粒子佐劑如環狀病毒；霍亂毒素； dimethyidiocledecylammonium bromide ；或它們的組合物。其它佐劑可以選自表面活性劑(如十六烷基胺(hexadecylamine)，十八烷基胺，溶血卵磷脂(lysolecithin)，二甲基雙十八烷基溴化銨，N, N-雙十八烷基-n' -N- 二(2-羥乙基丙烷二胺)，甲氧基十六烷基甘油，和pluronic多元醇)；聚陰離子(如吡喃(pyran)，硫酸葡聚糖，聚IC，聚丙烯酸，卡波普)，肽(如，胞壁醯二肽，二甲基甘氨酸，他福新(tuftsin))，油性乳劑，明礬，以及它們的混合物。也可以選擇多種佐劑的多種組合。在一實施方案中，本發明提供了在添加另外的抗原如SL-CD之前將與抗原組合而製得的致免疫組合物。本領域技術人員應理解，將病毒與Quil A組合將降低病毒的有效滴度(Walker，P. J. ,2005,Curr. Top. Microbiol. Immunol. 292 :57-80)。在向所述致免疫組合物中添加至少一種另外的組分之前，將Quil A與抗原組合的步驟可以持續任意長的時間。 本領域技術人員很容易理解，本發明致免疫組合物可以通過，在向所述致免疫組合物中添加至少一種另外的組分之前，在不同長度的時間內，將Quil A與抗原組合而製得的。例如， Quil A和抗原可以混合至少5-至少200分鐘。在一些實施方案中，Quil A和抗原可以混合任意長的時間，包括從至少10分鐘至至少190分鐘。在一些實施方案中，Quil A和抗原混合至少15分鐘。本領域技術人員應理解，本發明的致免疫組合物可以通過將Quil A和所述抗原在眾多溫度的任一種溫度中組合。Quil A與所述抗原可以在低於或高於室溫的溫度進行混合，只要所得組合物具有致免疫性就可以。Quil A和所述抗原可以在室溫混合。 在一些實施方案中，通過在SL-CD添加之前將Quil A與抗原混合而製得的致免疫組合物中的抗原是病毒。在一些實施方案中，所述病毒是BEFV。在一些實施方案中，所述病毒可以是減毒活病毒，重組病毒，殺死的病毒或滅活的病毒。在一些實施方案中，所述抗原是減毒活的。在一些實施方案中，所述抗原可以從冷凍的儲存物，幹的儲存物，或新鮮的儲存物獲得。 在一些實施方案中，所述抗原從冷凍的儲存物獲得。在一實施方案中，本發明提供了激發免疫應答的致免疫組合物，其包含皂素和 SL-⑶。在本發明一些實施方案中，激發免疫應答的致免疫組合物包含皂素和SL-⑶；以及至少一種抗原。在本發明一些實施方案中，激發免疫應答的致免疫組合物中的皂素是Quil A。在本發明一些實施方案中，激發免疫應答的致免疫組合物中的至少一種抗原可以選自細菌、病毒、肽、多肽、核酸、或它們的組合。在一些實施方案中，在本發明致免疫組合物中，所述至少一種抗原是獸醫抗原。在一些實施方案中，在本發明致免疫組合物中，所述獸醫抗原是牛抗原。在一些實施方案中，在本發明致免疫組合物中，所述抗原是病毒抗原。在本發明一些實施方案中，病毒抗原至少是BEFV，BTV，或IBR株。在一些實施方案中，皂素或Quil A在添加SL-⑶之前添加給病毒抗原。在一些實施方案中，所述抗原可以是減毒活的，重組的，殺死的或滅活的。在一些實施方案中，所述抗原是減毒活的。在一些實施方案中，所述抗原是殺死的。在一些實施方案中，所述抗原可以從冷凍的儲存物，幹的儲存物，或新鮮的儲存物獲得。在一些實施方案中，所述抗原從冷凍的儲存物獲得。本發明的免疫學組合物可以用本領域常規方法從病毒培養物製得。例如，病毒可以在組織培養細胞如非洲綠猴腎上皮細胞(Vero cells)，人二倍體成纖維細胞， MDBK(Madin-Darby牛腎)，或其它牛細胞中繁殖。病毒的生長可以用標準技術來監控 (觀察致細胞病變效應、免疫螢光或其它基於抗體的分析)，當病毒滴度達到足夠高水平 (如106TCID5(l/mL)時進行收穫。病毒儲存物可以用常規方法進一步濃縮或凍幹，再添加至疫苗配製劑中。也可以採用其它製備病毒儲存物的方法，參見諸如Thomas等(1986， Agri-Practice, 7 (5) :26-30)所述。本發明的免疫學組合物可以單獨施用，或作為多價免疫學組合物的一種成分來施用，即與其它免疫學組合物組合後施用。致免疫配製劑中的病毒可以是活的或殺死的；活的或殺死的病毒都可以是凍幹的，且任選按照本領域已知的那樣進行重建。致免疫組合物可以提供在試劑盒中，該試劑盒還可以包含合適的標籤以及對動物主體(如牲畜，有蹄類動物(ungulate)，伴侶動物(companion animal))或鳥(如家禽)施用致免疫組合物的說明。含SL-⑶以及，皂素或Quil A ；以及至少一種病毒抗原的致免疫組合物還可以包含可藥用和獸用的載體。這樣的載體是本領域技術人員熟悉的，包括被緩慢代謝的大分子如蛋白，多糖，聚乳酸，聚乙醇酸，多聚胺基酸，胺基酸共聚物，和完整的病毒粒子。可藥用且可獸用的鹽也可以用在所述疫苗中，例如，礦物鹽如鹽酸鹽(hydrochloride)，氫溴酸鹽(hydrobromide)，磷酸鹽，或硫酸鹽，以及有機酸的鹽如乙酸鹽，丙酸鹽，丙二酸鹽 (malonate)，或苯甲酸鹽(benzoate) 0疫苗也可以含有脂質，如水，鹽水，甘油，和乙醇，以及諸如增溼劑、乳化劑，或PH緩衝劑等物質。脂質體也可以用作殺滅的病毒的載體(見例如，美國專利5，422，120，PCT出版物WO 95/13796，PCT出版物WO 91/14445，或歐洲專利 524，968B1)。本發明的致免疫組合物可以通過肌肉內或皮下途徑施用，或通過鼻內、腹腔、皮內、支氣管內、或口服途徑施用。本發明的致免疫組合物可以通過噴霧、眼接種、或劃痕 (scarification)來施用。另一種將本發明致免疫組合物遞送至哺乳動物(如牲畜，有蹄類動物，伴侶動物)的便利方法是通過口服(如放在飼料或飲用水或誘餌中)給藥。特別方便的是將所述致免疫組合物作為敷料(top-dress)或混合餵食。通常，大的動物(如牲畜 /有蹄類動物如牛)被給予約106TCID5(1/mL，可以是每劑致免疫組合物106』5至107，TCID500單劑給藥時，所述致免疫組合物應含有對應於約IO4至約107TCID5(1/mL，，優選 106TCID5Q/mL的BEFV量。可以按照每隻動物約l_5mL致免疫組合物的量，優選2mL，經肌肉、 皮下或腹腔途徑施用。所述致免疫組合物應包含對應於約6. 81ogs/mL的IBR量。可以按照每隻動物約 l-5mL含IBR的致免疫組合物的量，優選2mL，經肌肉、皮下或腹腔途徑施用。所述致免疫組合物應包含對應於約106_ 7TCID50BTV血清型1和/或約107_ 3TCID50 的BTV血清型8的BTV量。可以按照每隻動物約l_5mL含BTV的致免疫組合物的量，優選 2mL,經肌肉、皮下或腹腔途徑施用。致免疫組合物的製備可參見文獻，例如，「Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach",上文所述，和「Vaccines」 (2008,第 5 版，Plotkin, S. A. et al.， editors, Saunders Elsevier)。本發明提供了特別有用於預防和治療動物的BEF，IBR，或BTV感染的免疫學組合物。因此，本發明另一方面涉及預防和治療動物的BEF，IBR，或BTV感染的方法，特徵在於，對需要所述預防或治療的動物施用本發明的致免疫組合物本發明的致免疫組合物可以通過肌肉或皮下注射方式來施用，或通過鼻內、氣管內、口服、皮膚(cutane)、經皮 (percutane)或皮內(intracutane)途徑施用。優選地，對於BEFV，IBR，或BTV疫苗而言， 進行皮下或肌肉接種，最優選肌肉接種。BEFV，IBR，或BTV的活疫苗優選從6月齡開始施用。本發明還提供了對動物尤其是牛進行免疫，以便同時抵抗一或多種傳染物的方法，其包括口服、鼻內、皮下、皮內、腹腔、肌肉、或氣溶膠形式施用疫苗(或將它們組合施用)，所述疫苗含有免疫學有效量的由本發明提供的組合物。定義本文所用術語具有本領域技術人員認識到的和已知的含義，但，為了方便起見，也為了完整，下面給出一些具體術語和它們的含義。除非上下文有清楚的說明，本說明書和所附權利要求中用到的單數形式「一個」 ("a", "an")和「該」 (「the」)包括複數含義。因此，例如，「該方法」包括一或多種方法，和/或步驟，它們屬於本文所述類型和/或是本領域技術人員閱讀了本文後很明顯能認識到的。術語「約」或「接近」是指統計學意義上的範圍值。這樣的範圍可以是在一個數量級之內，通常在指定數值或範圍的50 %以內，更通常在20 %以內，還更通常在10 %以內，甚至更通常在5%以內。術語「約」或「接近」所涵蓋的能允許的變化取決於研究的具體體系， 是本領域技術人員可以很容易地認識到的。BEFV的「感染單位(infectious unit) 」是指，感染或殺死50%的組織培養細胞所需的病毒量。這可以表示為50%組織培養感染劑量或TCID5Q。當病毒對天然宿主的毒力下降時，該病毒被認為是減毒的。當病毒不能在易感於該病毒的細胞中繁殖時，該病毒被認為是滅活的。術語「抗原」是指有時能刺激免疫應答的分子。抗原是任何能被後天免疫系統識別的物質。抗原通常是蛋白或多糖。抗原可以是細菌、病毒、或其它微生物的一部分，如外殼 (coat)、莢膜(capsule)、細胞壁、鞭毛(flagella)、纖毛(fimbrae)、或毒素。抗原也可以是脂質或核酸。所述組合物中用到的抗原可以從新鮮培養物、冷凍的儲存物、凍幹的儲存物、 或其它任何公眾可活動的儲存物獲得。當抗原是病毒時，它可以是活-滅活的或減毒的。「佐劑」是指一或多種能增強組合物(通常是疫苗組合物)的抗原性的物質。佐劑可以作為緩慢釋放抗原的組織儲庫(tissue depot)的形式起作用，也可以作為非特異性增強免疫應答的淋巴系統激活劑起作用(Hood，et al.，Immunology, Second Ed.，Menlo Park, CA :Benjamin/Cummings, 1984. p. 384)。通常，單獨用抗原進行初步接種，不使用佐劑， 不能激發出體液或細胞的免疫應答。而且，根據情況的不同，單獨用抗原進行初步攻擊，不使用佐劑，不能激發出足夠的體液或細胞免疫應答。已有多種細胞因子或淋巴因子被發現具有免疫調節活性，因此能用作佐劑，它們包括，白細胞介素1-α，1-β，2，4，5，6，7，8，10， 12 (見例如，美國專利5，723，127)，13，14，15，16，17和18 (及它的突變形式)；幹擾素_ α， β和Y ；粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)(見例如，美國專利5，078，996)；巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)；粒細胞集落刺激因子(G-CSF)；以及腫瘤壞死因子α和β。 其它可用於本文所述致免疫組合物的佐劑包括趨化因子，包括但不限於，單核細胞趨化蛋白-1 (MCP-I)，巨噬細胞炎性蛋白(MIP)如MIP-I α和MIP-I β，也稱CCL-3和CCL-4 ；以及活化後調節的、正常T細胞表達並分泌的分子(RANTES)；粘附分子，諸如選擇蛋白，例如L-選擇蛋白、P-選擇蛋白和E-選擇蛋白；黏蛋白-樣分子，例如，CD34(也稱涎福林 (sialophorin)，白細胞唾液素(Ieukosialin)，或 SPN)，GlyCAM-I 和 MadCAM-I ；整聯蛋白家族的成員諸如淋巴細胞功能相關分子LFA-1，2，和3，VLA-I, Mac-I和ρ150· 95 ；免疫球蛋白超家族的成員諸如血小板內皮細胞粘附分子(PECAM)，細胞間粘附分子，例如ICAM-1， ICAM-2, ICAM-3, ICAMUP ICAM-5，CD2 和 LFA-3 ；協同刺激分子諸如 CD40 和 CD40L ；生長因子，包括血管生長因子，神經生長因子，成纖維細胞生長因子，表皮生長因子，Β7. 2，PDGF,BL-I，以及血管內皮細胞生長因子；受體分子，包括i^as，TNF受體，Fit, Apo-I，p55，WSL-I， DR3, TRAMP, Apo-3, AIR, LARD, NGRF, DR4, DR5, KILLER, TRAIL-R2, TRICK2,禾口 DR6 ；以及 Caspase(ICE)。用於增強免疫應答的合適的佐劑還包括，但不限於，MPL (3-0_脫醯化單磷醯脂質A，Corixa, Hamilton, MT)，見美國專利4，912，094。適合用作佐劑的還有合成的脂質A類似物或氨基烷基磷酸葡糖胺化合物(AGP)，或它們的衍生物或類似物，都可從Corixa (Hmilton，MT)獲得，都可參見美國專利6，113，918。一種這樣的AGP是2- [ (R) -3-十四醯基氧基十四醯基氨基]乙基2-脫氧-4-0-瞵醯基 (phosphono) -3-0- [ (R) _3_十四醯基氧基十四醯基]-2- [ (R) -3-十四醯基氧基十四醯基-氨基]-b-D-葡糖吡喃糖苷，也稱5 (以前稱RC529)。該5 佐劑被配製成含水形式 (AF)或為穩定的乳液(SE)。其它佐劑還包括，胞壁醯肽，諸如N-乙醯-胞壁醯-L-蘇氨醯-D-異穀氨醯胺 (thr-MDP)，N-乙醯-正胞壁醯(normuramyl)-L-丙氨酸-2-( 1，-2，二棕櫚醯-sn_ 甘油-3-羥基磷醯基氧基)-乙胺(MTP-PE)；水包油乳劑，諸如MF59 (PCT出版物W090/14837) (含5%角鯊烯，0. 5%Tween 80，和0. 5% Span 85(任選含不同量的MTP-PE)，用高壓納米均質機(microfluidizer)如 IlOY 型高壓納米均質機(Microfluidics, Newton, ΜΑ) 配製成亞微米粒子(submicron particle))，和 SAF(含 10%角鯊烯，0. 4% Tween 80,5% pluronic-嵌段共聚物L121，和thr_MDP，經高壓納米均質機處理成亞微米乳液或渦旋形成大顆粒乳液)；不完全福氏佐劑(IFA)；鋁鹽(alum)，諸如氫氧化鋁，磷酸鋁，硫酸鋁；愛菲金(Amphigen)；阿夫立定；L121/角鯊烯；D-交酯(Iactide)-聚交酯/糖苷；pluronic 多元醇；殺死的博德特氏菌(Bordetella)；皂素，諸如Stimulon QS-21 (Antigenics， Framingham, ΜΑ.),見美國專利 5，057，540，ISCOMATRIX(CSL Limited, Parkville, Australia)，見美國專利5，254，339，以及免疫刺激複合物(ISCOMS)；結核分枝桿菌 (Mycobacterium tuberculosis)；細菌脂多糖；合成的多核苷酸諸如含CpG基序的寡核苷酸(例如美國專利 6，207，646) ；IC-31 (Intercell AG, Vienna, Austria)，見歐洲專利 1，四6，713和1，326，634;百日咳毒素(PT)或其突變體，霍亂毒素或其突變體(例如，PCT 出版物W000/18434，W002/098368和W002/098369)；或大腸桿菌不耐熱毒素(LT)，特別是 LT-K63, LT-R72, PT-K9/G129 ；見例如，PCT 出版物 W 93/13302 和 W092/19265。本發明組合物中可以添加的佐劑可包括SL-⑶，氫氧化鋁，SP-oil，或卡波普，或可代謝的油，諸如一或多種不飽和萜烴(terpene hydrocarbon)，例如角鯊烯或角鯊烷，以及聚氧乙烯-聚丙烯嵌段共聚物如Pluronic 。術語「哺乳動物」包括單孔類動物(monotreme)(例如鴨嘴獸(platypus))，有袋類動物(marsupial)(例如袋鼠)，以及有胎盤哺乳動物(placental)，其包括牲畜(為提供肉、奶、或纖維而飼養的動物，如狗，綿羊，牛，和馬)和伴侶動物(例如狗，貓)。「有蹄類動物」包括，但不限於，牛，水牛(water buffalo)，野牛(bison)，綿羊，豬，鹿，大象，犛牛。這些中的每一種都包括成年形式和發育形式(例如小牛，小豬，小羊等)。本發明的致免疫組合物可以對成年的或發育中的哺乳動物(優選牲畜)施用。「免疫學有效量」是激發免疫應答的抗原量。牛暫時熱病毒(BEFV)的免疫學有效量是激發抗牛暫時熱病毒的免疫應答的BEFV量。牛皰疹病毒I(IBR)的免疫學有效量是激發抗IBR的免疫應答的IBR量。藍舌病毒(BTV)的免疫學有效量是激發抗BTV的免疫應答的BTV量。「免疫學有效量」取決於受體動物的物種，品種(breed)，年齡，大小和健康狀況。 「免疫學有效量」受該動物在先暴露於該抗原的一或多個株、而所述一或多個株是毒力株還是無毒力的病毒株的影響。本文中，牛暫時熱病毒(BEFV)的「免疫學有效量」，當與至少一種合適的佐劑組合應用時，是足以增強該牛暫時熱病毒的免疫原性、並因此提供抵抗毒力牛暫時熱病毒株攻擊的保護性免疫力的BEFV量。在一實施方案中，BEFV的免疫學有效量是約 106_ 2°TCID5(1/mL 組合物。本文中，牛皰疹病毒I(IBR)的「免疫學有效量」，當與至少一種合適的佐劑組合應用時，是足以增強該牛皰疹病毒的免疫原性、並因此提供抵抗毒力牛皰疹病毒株攻擊的保護性免疫力的量。在一實施方案中，IBR的免疫學有效量是約6. 81ogs/mL組合物。本文中，藍舌病毒(BTV)的「免疫學有效量」，當與至少一種合適的佐劑組合應用時，是足以增強該藍舌病毒的免疫原性、並因此提供抵抗毒力藍舌病毒株攻擊的保護性免疫力的量。在一實施方案中，BTV的免疫學有效量是約106_ 7TCID5tlBTV血清型1和/或約 IO7-3TCID50BTV 血清型 8/mL 組合物。在本發明一些實施方案中，所述病毒抗原可以是以下病毒的至少一個株感染性牛皰疹病毒1 (也稱牛鼻氣管炎病毒或IBR)，副流感病毒，牛呼吸道合胞病毒，牛病毒性腹瀉病毒，手足口病病毒，藍舌病毒，牛暫時熱病毒，犬細小病毒，犬溫熱病毒，犬腺病毒，犬副流感病毒，犬冠狀病毒，狂犬病病毒，貓瘟病毒(panleukopania virus)，貓嵌杯樣病毒 (calicivirus)，貓病毒性鼻氣管炎病毒，貓傳染性腹膜炎病毒，貓白血病病毒，貓免疫缺陷病毒，西尼羅病毒，馬腦脊髓炎病毒，馬流感病毒，馬皰疹(鼻肺炎)病毒，馬動脈炎病毒，豬細小病毒，豬圓環病毒(cirocovirus)，豬生殖呼吸症候群病毒，豬輪狀病毒，豬流感病毒， 假狂犬病病毒，傳染性法氏囊病病毒，Marek病病毒，新城疫病毒，傳染性支氣管炎病毒，傳染性喉氣管炎病毒，禽腦脊髓炎病毒，禽呼腸孤病毒，禽流感病毒。本文中，術語「病毒亞單位」是指病毒體的一個部分。例如，牛暫時熱病毒(BEFV) 亞單位可以是BEFV病毒體的至少一部分，BEFV基因組的至少一部分，BEFV編碼蛋白的至少一部分，如BEFV核蛋白，BEFV聚合酶相關蛋白，BEFV基質蛋白，BEFV RNA-依賴性RNA聚合酶，或BEFV糖蛋白。本文中，術語「致免疫」是指，所述組合物能激發體液和/或細胞免疫應答。致免疫株也是具有抗原性的。致免疫組合物是給予動物後激發體液和/或細胞免疫應答的組合物。術語「致免疫組合物」涉及含有抗原例如微生物的任何藥物組合物，該組合物可用於在動物中激發免疫應答。所述免疫應答可包括T細胞應答，B細胞應答，或兩者。所述組合物可以通過在細胞表面呈遞與MHC分子相關的抗原而使該哺乳動物致敏。此外，可產生抗原特異性T-淋巴細胞或抗體，以允許將來保護被免疫的宿主。「致免疫組合物」可包含活的，減毒的，或殺死的/滅活的抗原。所述抗原可以是完整微生物或從它衍生出的能誘導免疫應答的致免疫部分。致免疫組合物可保護動物而避免與該微生物感染有關的一或多種症狀，或可保護該動物不發生因該微生物感染所致的死亡。術語「腸胃外給藥」在本文中是指，不通過胃腸道，通過其它途徑給藥，特別是通過靜脈、皮下、肌肉或髓內(intramedullar)注射將物質引入生物，但也可以指另外的非-口服和非-鼻途徑給藥諸如腹腔注射或表面局部應用(topical application)。術語「疫苗」或「疫苗組合物」在本文中可互換使用，是指藥物組合物，其含有至少一種在動物中誘導免疫應答的致免疫組合物。疫苗或疫苗組合物可保護該動物而避免歸因於感染的疾病或可能的死亡，而且可以包括或不包括一或多種另外的增強該活性成分之免疫學活性的成分。疫苗或疫苗組合物還可包含藥物組合物常見的其它成分。其它成分可包括，例如，一或多種佐劑或免疫調節劑。疫苗的致免疫活性成分可包含完整的活生物，為它們的原始形式，或為改良活疫苗中的減毒生物形式，或殺死的或滅活的疫苗中的通過適當方法失活的生物，或含有所述病毒的一或多種致免疫組分的亞單位疫苗，或經本領域技術人員已知的方法製得的基因工程化、突變的、或克隆化的疫苗。疫苗或疫苗組合物可包含一種或同時包含不止一種上述元件。相應地，在本申請中，可以採用本領域技術範疇內的常規分子生物學，微生物學和免疫學技術。這樣的技術在文獻中有詳細解釋。見例如，Sambrook, Fritsch& Maniatis， Molecular Cloning :A Laboratory Manual, Second Edition(1989)Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York。
實施例實施例1製備牛晳時熱病毒/QUIL A混合物(mix)牛暫時熱(BEF)活病毒抗原從冷凍的儲存物獲得。室溫解凍後，在添加疫苗中的其它成分之前，將病毒與Quil A混合。Quil A粉末由Brenntag製備，從APS(Nuplex hdusties，Australia的分支機構) 以產品編號04307503獲得。QuilA儲液通過在水中稀釋至10mg/mL而製得。簡言之，149.96mL 活 BEF 抗原儲存物(1. 38xl07TCID50/mL)用 36. 34mL9. 643g/mL NaCl稀釋，在lmg/mL添加20. 70mL 10mg/mL Quil Α。將該混合物室溫攪拌2. 5小時。實施例2製備BEFV疫苗為製備BEFV疫苗，依次添加以下成分，每兩次添加之間將混合物攪拌5分鐘。384. 3mL 8. 5g/mL NaCl94. 87g BEFV/QUILA混合物，按實施例1製備120. OOmL 10mg/mL SL-CD* 儲存物至 20% (ν/ν)1. 36g 硫柳汞 9. 9% (w/v)*SL-CD 按 Hilgers 等所述來製備(Sulpholipo-cyclodextrin in squalene-in-water as a novel and safe vaccine adjuvant. Vaccine 17(1999), pp219-228)。添加了所有成分後，將疫苗攪拌30分鐘，將pH調至7. 18。再將疫苗攪拌30分鐘，用其充滿標記好的枕式包裝(pillow packs)中。實施例3BEFV疫苗的動物試驗疫苗安全性測試在R)rt Dodge Australia, Penrith site進行。疫苗安全性按照EP2002 0062指南在牛中測試。10隻豚鼠和兩頭牛接種如上述製得的疫苗，以確定對BEF抗原級分的血清型反應。這10隻豚鼠體重為250-40(^，每隻都皮下接種2.0!^疫苗。六周後給豚鼠採血。兩頭不到1歲的牛皮下接種4mL疫苗。接種的14天後給牛採血。所得血清按照Biosecurity Sciences Laboratory, Department of Primary Industries and Fisheries Animal Research Institute, Queensland(Australia)的試驗方案進行病毒中和(VN)測試。所用的病毒中和測試方法遵循「澳大利亞標準診斷程序(Australia standard diagnostic procedures)，，。兩批疫苗的試驗結果見下表1 ^ 1用單劑BEF疫苗的安全件結果
測試說明結果20 % SL-CD無菌狀態未檢測到細菌或真菌通過水相pH6.5-7.57.25BEF血清滴度N/A豚鼠=32 牛=陰性牛的安全性無明顯的局部或全身接種後無明顯的接種部位反應，反應但14天後在接種點出現腫塊根據用BEF滅活疫苗在牛和兔中進行的試驗，有證據表明，實驗室的動物血清學與牛的抗BEFV保護作用存在相關性。故，表1所示豚鼠結果證實，本發明的致免疫組合物能給牛提供抗BEFV的保護作用。如上述製得的單劑BEF疫苗製劑產生了穩定的乳劑。在牛安全性測試中，該疫苗經過了安全性測試，最初未產生接種部位的反應。儘管未發現全身反應或行為反應，但在觀察期結束時，這種疫苗在注射部位產生一些局部反應。下表2描述了牛接種單劑4mL上述疫苗製劑後出現的症狀。^t 2全身反應和局部反應
接種後天數054.6 (20%SLCD)1號牛2號牛全身反應1NilNil
權利要求
1.免疫學組合物，包含磺基脂-環糊精(SL-CD)和皂素。
2.權利要求1的免疫學組合物，還包含至少一種抗原。
3.權利要求2的免疫學組合物，其中所述至少一種抗原選自細菌、病毒、肽、多肽、核酸、或它們的組合。
4.權利要求3的免疫學組合物，其中所述至少一種抗原是獸醫抗原。
5.權利要求4的免疫學組合物，其中所述至少一種抗原是牛抗原。
6.權利要求3的免疫學組合物，其中所述至少一種抗原是病毒抗原。
7.權利要求6的免疫學組合物，其中所述病毒抗原是牛暫時熱病毒(BEFV)，牛皰疹病毒1 (IBR)，或藍舌病毒(BTV)。
8.權利要求1-7任一項的免疫學組合物，其中SL-⑶的終濃度為約0.ang/mL。
9.權利要求1-8任一項的免疫學組合物，其中皂素的終濃度為約0.5mg/mL。
10.權利要求1-8任一項的免疫學組合物，其中的皂素是QuilA0
11.權利要求10的免疫學組合物，其中QuilA的終濃度為約0.lmg/mL至約0. 2mg/mL0
12.權利要求10或11的免疫學組合物，其中QuilA的終濃度為約0. 158mg/mL。
13.在有需要的動物中激發免疫應答的方法，包括對該動物施用權利要求1-12任一項的免疫學組合物。
14.免疫學組合物，是在添加至少一種另外的佐劑之前將QuilA與至少一種病毒抗原組合而製得的。
15.權利要求14的免疫學組合物，還包含至少一種另外的佐劑。
16.權利要求15的免疫學組合物，其中所述至少一種另外的佐劑選自SL-CD，氫氧化鋁，SP-oi 1，或卡波普。
17.權利要求16的免疫學組合物，其中所述至少一種另外的佐劑是SL-⑶。
18.權利要求17的免疫學組合物，其中所述SL-⑶的終濃度為約0.2mL/mL。
19.權利要求14-18任一項的免疫學組合物，其中所述QuilA的終濃度為約0. lmg/mL 至約 0. 2mg/mL。
20.權利要求14-19任一項的免疫學組合物，其中所述QuilA的終濃度為約0. 158mg/mL。
21.權利要求14-20任一項的免疫學組合物，其中所述病毒抗原是牛抗原。
22.權利要求14-21任一項的免疫學組合物，其中所述病毒抗原選自BEFV，IBR，和BTV。
23.在動物中激發抗BEFV的免疫應答的方法，包括對該動物施用權利要求22的組合物。
24.權利要求23的方法，其中所述免疫應答在施用單劑量的所述組合物之後被激發。
25.權利要求23或M的方法，其中所述免疫應答是保護性免疫應答。
26.激發動物免疫應答的試劑盒，包含SL-⑶和皂素。
27.權利要求沈的試劑盒，其中的皂素是QuilA。
28.權利要求沈或27的試劑盒，還包含至少一種抗原。
29.權利要求觀的試劑盒，其中所述至少一種抗原選自細菌，病毒，肽，多肽，核酸，或它們的組合。
30.權利要求四的試劑盒，其中所述至少一種抗原是病毒抗原。
31.權利要求30的試劑盒，其中所述病毒抗原選自BEFV，IBR，和BTV。
全文摘要
本發明涉及免疫學組合物，其包含磺基脂-環糊精(SL-CD)以及，皂素或Quil A，並任選至少一種抗原。本發明涉及含至少一種抗原的方法和免疫學組合物，所述抗原可以是獸用抗原。本發明的方法和免疫學組合物中的獸醫抗原可以是牛抗原。本發明涉及含牛暫時熱病毒(BEFV)，牛皰疹病毒1(IBR)或藍舌病毒(BTV)的方法和免疫學組合物。本發明包含在動物中激發抗BEFV，IBR，或BTV的免疫應答的方法，其包括對所述動物施用本發明的組合物。在本發明中，所述免疫應答尤其是保護性免疫應答。本發明包含免疫學組合物的方法，包括給病毒添加QuilA。
文檔編號A61K39/39GK102186502SQ200980141319
公開日2011年9月14日 申請日期2009年8月19日 優先權日2008年8月19日
發明者菲利普.R.萊爾巴克, 威廉.J.切希爾, 辛志先 申請人:惠氏有限責任公司