一種多西他賽凍幹脂質體及其製備方法
2023-12-05 12:56:16 1
一種多西他賽凍幹脂質體及其製備方法
【專利摘要】本發明屬於醫藥【技術領域】，公開了一種多西他賽凍幹脂質體及其製備方法。將多西他賽採用環糊精包合提高其溶解度，然後採用薄膜分散法及凍融法製備多西他賽凍幹脂質體，其組成為0.5％-2.0％環糊精包合多西他賽，2％-65％天然磷脂，0.1％-20.0％膽固醇及其衍生物，15-80％凍幹保護劑，緩衝鹽適量。本發明採用反覆凍融製備的脂質體粒徑較小、包封率高，同時環糊精包合提高了多西他賽的水溶性和脂質體的穩定性，由於製備的是凍幹脂質體方便儲存和運輸。
【專利說明】一種多西他賽凍幹脂質體及其製備方法
[0001]一、【技術領域】:
本發明屬於藥物製劑領域，涉及計一種難容性抗癌藥多西他賽凍幹脂質體及其製備方法。
[0002]二、【背景技術】:
多西他賽(docetaxel、多西紫杉醇,商品名為Taxotere、泰索帝)是新一代抗腫瘤藥物，它與紫杉醇(paclitaxel,商品名為Taxol)同屬紫杉燒類,結構式如圖1所示,均為FDA批准的紫杉燒類抗癌藥物。多西他賽可由歐洲眾果紫杉(Taxusbaccata,European yew)針葉中提取的無活性化合物，再經半合成得到。多西他賽由法國羅納普朗克樂安公司開發，用作乳腺癌、非小細胞肺癌的化療藥物，化學結構式見圖1，其作用機制為促進微管的形成，阻止微管蛋白的分解，從而阻斷細胞有絲分裂，促使細胞凋亡。多西他賽及其合併用藥方案在臨床上被越來越多地應用於乳腺癌、非小細胞肺癌、胰腺癌、軟組織肉瘤、頭頸癌、胃癌、卵巢癌以及前列腺癌等多種腫瘤的治療。[0003]多西他賽作為抗癌藥物的常用藥，其單獨用藥口服生物利用度僅為8%，將其製成注射製劑是提高其生物利用度的手段之一。由於多西他賽難溶於水，目前多西他賽注射液主要是以吐溫-80和乙醇等配製而成，商品名為泰索帝(Taxotere@)。儘管吐溫80毒性相對較小，但是在I期臨床試驗中仍然出現了嚴重的超敏反應，因為吐溫-80易產生溶血及過敏等不良反應，因此在使用多西他賽注射液前，必須使用抗過敏藥物來幫助緩解由於多西他賽的使用而產生的嚴重過敏等毒性和不良反應，常常給病人帶來痛苦，直接影響了該藥的使用。另外，作為細胞毒性抗腫瘤藥物，多西他賽的全身毒性，特別是易造成中性粒細胞減少症等免疫系統毒性，給患者的身心造成了極大的損害，大大限制了它的臨床應用。因此，開發新的多西他賽注射劑型具有重要的意義，國內外都在致力於研究低毒的，療效好的多西他賽新劑型，增加藥物的溶解度，同時避免吐溫80的使用。
[0004]納米給藥系統(nanoparticledrug delivery system, NDDS)是當前國內外研究的熱點，在實現靶向性給藥、緩釋給藥、提高難溶性藥物與多肽藥物的生物利用度、降低藥物不良反應等方面表現出良好的應用前景。目前研究較多的多西他賽納米製劑主要有脂質體(liposome)、微乳(microemulsion)、固體脂質納米粒(solid lipid nanoparticles,SLN)、納米脂質載體(nanostructured lipid carrier, NLC)、聚合物納米粒(polymericnanoparticles)、膠束系統(micellar system)等。
[0005]脂質體(liposome)最初是1965年由英國學者Bangham和Standish將磷脂分散在水中進行電鏡觀察時發現的。脂質體脂質體是由磷脂和膽固醇組成，具有類似生物膜的雙分子層結構。脂質體屬於靶向給藥系統的一種新劑型，它可以將毒副作用大、在血液中穩定性差、降解快、不溶於水的藥物粉末或溶液包埋在直徑為納米級的脂質體微粒中，這種微粒可以透過人體病灶部位血管內皮細胞間隙到達病灶部位,並改變被包封藥物的體內分布，使其在病灶部堆積釋放，使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，從而提高藥物的治療指數，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性，以達到定向給藥的目的。目前新型靶向脂質體包括前體脂質體、長循環脂質體、免疫脂質體等。多西他賽用脂質體包裹後，可克服普通注射劑中吐溫80所產生的不良反應，聚乙二醇(PEG)修飾後延長藥物在體內的滯留時間，提高藥效，還可增加藥物的穩定性。
[0006]目前，製備脂質體的方法較多，常用的有薄膜法、反相蒸發法、超聲波分散、溶劑注入法和復乳法等，這些方法一般稱為被動載藥法，在製備含藥脂質體時，首先將藥物溶於水相或有機相中，然後按適宜的方法製備含藥脂質體，該法適於脂溶性強的藥物，所得脂質體具有較高包封率。而PH梯度法，硫酸銨梯度法一般被稱為主動載藥法。以下簡單介紹幾種被動載藥的方法:
1、薄膜分散法:最初由Bangham等報導，是最原始但又是迄今為止最基本和應用最廣泛的脂質體的製備方法。將磷脂和膽固醇等類脂及脂溶性藥物溶於有機溶劑，然後將此溶液置於一大的圓底燒瓶中，再旋轉減壓蒸乾，磷脂在燒瓶內壁上會形成一層很薄的膜，然後加入一定量的緩衝溶液，充分振蕩燒瓶使脂質膜水化脫落，即可得到脂質體。這種方法對水溶性藥物可獲得較高的包封率，但是脂質體粒徑在0.2~5μπι之間，可通過超聲波儀處理或者通過擠壓使脂質體通過固定粒徑的聚碳酸酯膜，在一定程度上降低脂質體的粒徑。
[0007]2、超聲分散法:將磷脂、膽固醇和待包封藥物一起溶解於有機溶劑中，混合均勻後旋轉蒸發去除有機溶劑，將剩下的溶液再經超聲波處理，分離即得脂質體。超聲波法可分為兩種「水浴超聲波法和探針超聲波法」，本法是製備小脂質體的常用方法，但是超聲波易引起藥物的降解問題。
[0008]3、冷凍乾燥法:脂質體混懸液在貯存期間易發生聚集、融合及藥物滲漏，且磷脂易氧化、水解，難以滿足藥物製劑穩定 性的要求。1978年Vanleberghe等首次報導採用冷凍乾燥法提高脂質體的貯存穩定性。目前，該法已成為較有前途的改善脂質體製劑長期穩定性的方法之一。脂質體冷凍乾燥包括預凍、初步乾燥及二次乾燥3個過程。凍幹脂質體可直接作為固體劑型，如噴霧劑使用，也可用水或其它溶劑化重建成脂質體混懸液使用，但預凍、乾燥和復水等過程均不利於脂質體結構和功能的穩定。如在凍幹前加入適宜的凍幹保護劑，採用適當的工藝，則可大大減輕甚至消除凍幹過程對脂質體的破壞，復水後脂質體的形態、粒徑及包封率等均無顯著變化。單糖、二糖、寡聚糖、多糖、多元醇及其他水溶性高分子物質都可以用做脂質體凍幹保護劑，其中二糖是研究最多也是最有效的，常用的有海藻糖、麥芽糖、蔗糖及乳糖。本法適於熱敏型藥物前體脂質體的製備，但成本較高。陳建明等以大豆磷脂為膜材，以甘露醇為凍幹保護劑，採用凍幹法製備了維生素A前體脂質體，復水化後平均粒徑為0.615 Iym ,包封率98.5%。林中方等採用凍幹法製備了鬼臼毒素體脂質體，復水化後平均粒徑為1.451 μ m，包封率72.3%，但是這種方法仍然存在著不足之處，例如脂質體復水化後粒徑分布不夠均勻。
[0009]4、凍融法:首先製備包封有藥物的脂質體，然後冷凍。在快速冷凍過程中，由於冰晶的形成，使形成的脂質體膜破裂，冰晶的片層與破碎的膜同時存在，此狀態不穩定，在緩慢融化過程中，暴露出的脂膜互相融合重新形成脂質體。通過研究發現，凍融法製備的脂質體的包封率最高，但是粒徑最大。反覆凍融可以提高脂質體的包封率，王健松製備了阿奇黴素脂質體，實驗發現，經3次重複凍融後，阿奇黴素脂質體的包封率從61.4%增加到78%，但是當凍融次數增加到4次，包封率變化很小。該製備方法適於較大量的生產，尤其對不穩定的藥物最適合。
[0010]5、復乳法:第I步將磷脂溶於有機溶劑，加入待包封藥物的溶液，乳化得到W /0初乳，第2步將初乳加入到10倍體積的水中混合，乳化得到W /0 /W乳液，然後在一定溫度下去除有機溶劑即可得到脂質體。Kim用乳化法製得脂質體的包封率比較高，但是粒徑較大。Tomoko等通過研究發現，第2步乳化過程和有機溶劑的去除過程的溫度對脂質體的粒徑有比較大的影響，較低的溫度有利於減小脂質體的粒徑，通過控制溫度可以製得粒徑為400 nm,包封率達到90%的脂質體。
[0011]6、注入法:將類脂質和脂溶性藥物溶於有機溶劑中(油相)，然後把油相均速注射到水相(含水溶性藥物)中，攪拌揮盡有機溶劑，再乳勻或超聲得到脂質體。根據溶劑的不同可分為乙醇注入法和乙醚注入法。乙醇注入法避免了使用有機溶劑，丁麗燕用乙醇法製備了司帕沙星脂質體，通過研究發現慢速注入可製得具有較高包封率的脂質體，其包封率為47%。乙醚注入法製備的脂質體大多為單室脂質體，粒徑絕大多數在2μπι以下，操作過程中溫度比較低(40°C)，因此，該方法適用於在乙醚中有較好溶解度和對熱不穩定藥物，同時通過調節乙醚中不同磷脂的濃度，可以得到不同粒徑且粒徑分布均勻的脂質體混懸液。
[0012]7、反相蒸發法:最初由Szoka提出，一般的製法是將磷脂等膜材溶於有機溶劑中，短時超聲振蕩，直至形成穩定的W /0乳液，然後減壓蒸發除掉有機溶劑，達到膠態後，滴加緩衝液，旋轉蒸發使器壁上的凝膠脫落，然後在減壓下繼續蒸發，製得水性混懸液，除去未包入的藥物，即得大單層脂質體脂質體。此法可包裹較大的水容積，一般適用於包封水溶性藥物、大分子生物活性物質等。
[0013]8、超臨界法:傳統的脂質體製備方法，必須要使用氯仿，乙醚、甲醇等有機溶劑，這對環境和人體都是有害的。超臨界二氧化碳是一種無毒、惰性且對環境無害的反應介質。嚴賓等用超臨界法製備了頭孢唑林鈉脂質體，將一定量的卵磷脂溶解於乙醇中配得卵磷酯乙醇溶液，與頭孢唑啉鈉溶液一起放入加入高壓釜中，將高壓釜放入恆溫水浴中，通入C02。在其超臨界態下孵化 30min，製備脂質體。採用超臨界CO2法製備的包封率高、粒徑小，穩定性增強。
[0014]三、
【發明內容】
:
本發明的目的是製備出一種粒徑較小、包封率高、穩定性高的多西他賽脂質體的凍幹製劑，同時便於運輸和貯藏。
[0015]本發明的目的可以通過以下技術方案實現。
[0016]本發明的多西他賽脂質體的凍幹製劑，每100g多西他賽脂質體凍幹製劑中含有如下成分:
環糊精包合多西他賽0.5 - 2.0g
天然磷脂2.0-65.0g
維生素 E2.0-20.0g
膽固醇及其衍生物0.1-20.0g
凍幹保護劑15.0-80.0g
緩衝液0.01-1.0Og
本發明的多西他賽脂質體無菌凍幹製劑照如下方法製得:稱取上述量的環糊精包合的多西他賽、天然卵磷脂、維生素E、膽固醇及其衍生物溶於適量的有機溶劑中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發，除去有機溶劑，脂質均勻地分布在圓底燒瓶內表面，用少量緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混懸液，通過加壓過0.22 μ m濾膜整粒除熱原，分裝至安瓿中冰箱冷凍後室溫融化，重複3次後，冷凍乾燥即得。
[0017]多西他賽凍幹脂質體製備包括如下詳細步驟:
(1)稱取環糊精包合的多西他賽、天然卵磷脂、維生素E、膽固醇及其衍生物溶於茄形瓶中，加入適量的有機溶劑中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發(溫度調至40°C )，除去有機溶劑，脂質溶液就結成一層非常均勻的薄膜，狀均勻地分布在茄形瓶內表面；
(2)把茄形瓶由蒸發儀中取下後置於乾燥箱中，乾燥箱為真空，過夜除盡溶劑。
[0018](3)採用注射用水配製含有凍幹保護劑的緩衝鹽溶液，調節pH5.5-7.5之間，用少量緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混懸液；
(4)將白色的混懸液依次通過加壓過0.8μ-- >0.45 μ m和0.22 μ m濾膜除熱原，分裝至安瓿中；
(5)將安瓿置於冰箱冷凍後室溫融化，重複3次；
(6)冷凍乾燥即得多西他賽凍幹脂質體。
[0019]本發明中多西他賽凍幹脂質體中多西他賽採用的是其環糊精包合物，製備方法是稱取適量的多西他賽和環糊精及其衍生物溶於適量溶劑中，恆溫攪拌，減壓蒸發溶劑，適當處理後，乾燥即得。所述的適當處理方法包括減壓蒸發至無溶劑，粉碎乾燥；減壓蒸發至溶劑剩餘適量，至冰箱過夜析晶，過濾乾燥；減壓蒸發至溶劑剩餘適量，至室溫緩慢析晶，過濾乾燥。其中，環糊精包合的多西他賽中環糊精與多西他賽的比例為10:1-1:1，優選6:1-4:1 ;環糊精選自α -環糊精、β -環糊精、甲基化-β -環糊精、羥丙甲基-β -環糊精、一氯三嗪-β -環糊精、2、6_ 二甲基-β -環糊精中一種或幾種。
[0020]所述的多西他賽凍幹脂質體，其特徵在於天然磷脂選自蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、中一種或幾種。膽固醇及其衍生物選自膽固醇、氫化膽固醇、D-直鏈葡萄糖膽固醇中一種或幾種。緩衝液選自磷酸鹽、醋酸鹽、丁二酸鹽、檸檬酸鹽、組氨酸和甘氨酸鹽中的一種。凍幹保護劑選自麥芽糖、甘露醇、半乳糖、乳糖、葡糖糖、蔗糖、海藻糖中的一種或幾種。
[0021]本發明中的多西他賽凍幹脂質體，採用的方法是薄膜分散法和凍融法的結合，其中反覆凍融的方法是將安瓿置於_80°C冰箱冷凍後室溫融化，重複3次。
[0022]最終產品是凍幹製劑，便於儲存和運輸，其冷凍乾燥的方法是_45°C的預凍溫度，再進行4h保溫；第1次乾燥 溫度為_30°C，進行30h的保溫；第二次的乾燥溫度為25°C，再進行IOh保溫，即可獲取注射用多西他賽脂質體，置於4°C環境保存備用。
[0023]四、【專利附圖】
【附圖說明】
圖1、多西他賽的結構式；
五、【具體實施方式】:
實施例1
多西他賽0.5g
β -環糊精2.0g蛋黃卵磷脂15.0g
維生素E2.5g
膽固醇2.0g
甘露醇30.0g
甘氨酸鹽緩衝液0.3g
(I)製備糊精包合的多西他賽:稱取1.0g多西他賽和4.0g β-環糊精溶於適量氯仿:乙醇(2:1)混合溶劑中，恆溫攪拌5-6h，減壓蒸發，粉碎乾燥即得。
[0024](2)稱取處方量環糊精包合的多西他賽、蛋黃卵磷脂、維生素E、膽固醇於茄形瓶中，加入適量的叔丁醇中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發(溫度調至40°C )，除去有機溶劑，脂質溶液就結成一層非常均勻的薄膜，狀均勻地分布在茄形瓶內表面；
(3)把茄形瓶由蒸發儀中取下後置於乾燥箱中，乾燥箱為真空，過夜除盡溶劑。
[0025](4)採用注射用水配製含有甘露醇的凍幹保護劑的甘氨酸鹽緩衝鹽溶液，調節PH5.5-7.5之間，用少量甘氨酸鹽緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混懸液；
(5)將白色的混懸液依次通過加壓過0.8μπι >0.45 μ m和0.22 μ m濾膜除熱原，分
裝至安瓿中； (6)將安瓿置於-80°C冰箱冷凍後室溫融化，重複3次；
(7)將安瓿置於_45°C的預凍溫度，再進行4h保溫；第1次乾燥溫度為_30°C，進行30h的保溫；第二次的乾燥溫度為25°C，再進行IOh保溫，即可獲取注射用多西他賽脂質體，置於4°C環境保存備用。
[0026]實施例2
多西他賽0.5g
β -環糊精2.0g
大豆卵磷脂15.0g
維生素E2.5g
氫化膽固醇2.0g
甘露醇30.0g
磷酸鹽緩衝液0.3g
(I)製備糊精包合的多西他賽:稱取1.0g多西他賽和4.0g β-環糊精溶於適量氯仿:乙醇(2:1)混合溶劑中，恆溫攪拌5-6h，減壓蒸發，至溶劑剩餘適量，至冰箱過夜析晶，過濾乾燥即得。
[0027](2)稱取處方量環糊精包合的多西他賽、大豆卵磷脂、維生素E、氫化膽固醇於茄形瓶中，加入適量的乙醇中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發(溫度調至40°C )，除去有機溶劑，脂質溶液就結成一層非常均勻的薄膜，狀均勻地分布在茄形瓶內表面；
(3)把茄形瓶由蒸發儀中取下後置於乾燥箱中，乾燥箱為真空，過夜除盡溶劑。
[0028](4)採用注射用水配製含有甘露醇的凍幹保護劑的磷酸鹽緩衝鹽溶液，調節PH5.5-7.5之間，用少量磷酸鹽緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混懸液；
(5)將白色的混懸液依次通過加壓過0.8μπι >0.45 μ m和0.22 μ m濾膜除熱原，分裝至安瓿中；
(6)將安瓿置於-80°C冰箱冷凍後室溫融化，重複3次；
(7)將安瓿置於_45°C的預凍溫度，再進行4h保溫；第1次乾燥溫度為_30°C，進行30h的保溫；第二次的乾燥溫度為25°C，再進行IOh保溫，即可獲取注射用多西他賽脂質體，置於4°C環境保存備用。[0029]實施例3
多西他賽0.5g
羥丙甲基-β-環糊精2.5g
蛋黃卵磷脂15.0g
維生素E2.5g
膽固醇2.0g
麥芽糖12.0g
甘露醇18.0g
醋酸鹽緩衝液0.3g
(I)製備糊精包合的多西他賽:稱取1.0g多西他賽和5.0g羥丙甲基-β -環糊精溶於適量氯仿:乙醇(2:1)混合溶劑中，恆溫攪拌5-6h，減壓蒸發，至溶劑剩餘適量，至室溫緩慢析晶，析晶完全後過濾乾燥即得。
[0030](2)稱取處方量環糊精包合的多西他賽、蛋黃卵磷脂、維生素E、膽固醇於茄形瓶中，加入適量的叔丁醇中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發(溫度調至40°C )，除去有機溶劑，脂質溶液就結成一層非常均勻的薄膜，狀均勻地分布在茄形瓶內表面；
(3)把茄形瓶由蒸發儀中取下後置於乾燥箱中，乾燥箱為真空，過夜除盡溶劑。
[0031](4)採用注射用水配製含有麥芽糖和甘露醇的凍幹保護劑的醋酸鹽緩衝鹽溶液，調節pH5.5-7.5之間，用少量醋酸鹽緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混懸液；
(5)將白色的混懸液依次通過加壓過0.8μπι >0.45 μ m和0.22 μ m濾膜除熱原，分
裝至安瓿中；
(6)將安瓿置於-80°C冰箱冷凍後室溫融化，重複3次；
(7)將安瓿置於_45°C的預凍溫度，再進行4h保溫；第1次乾燥溫度為_30°C，進行30h的保溫；第二次的乾燥溫度為25°C，再進行IOh保溫，即可獲取注射用多西他賽脂質體，置於4°C環境保存備用。
[0032]實施例4
多西他賽0.5g
羥丙甲基-β-環糊精3.0 g
蛋黃卵磷脂15.0g
維生素E2.5g
膽固醇2.0g
葡萄糖12.0g
甘露醇18.0g
檸檬酸鹽緩衝液0.3g(I)製備糊精包合的多西他賽:稱取1.0g多西他賽和6.0g羥丙甲基-β -環糊精溶於適量氯仿:乙醇(2:1)混合溶劑中，恆溫攪拌5-6h，減壓蒸發，至溶劑剩餘適量，至冰箱過夜析晶，過濾乾燥即得。
[0033](2)稱取處方量環糊精包合的多西他賽、蛋黃卵磷脂、維生素E、膽固醇於茄形瓶中，加入適量的乙醇中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發(溫度調至40°C )，除去有機溶劑，脂質溶液就結成一層非常均勻的薄膜，狀均勻地分布在茄形瓶內表面；
(3)把茄形瓶由蒸發儀中取下後置於乾燥箱中，乾燥箱為真空，過夜除盡溶劑。
[0034](4)採用注射用水配製含有葡萄糖和甘露醇的凍幹保護劑的檸檬酸鹽緩衝鹽溶液，調節PH5.5-7.5之間，用少量檸檬酸鹽緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混懸液；
(5)將白色的混懸液依次通過加壓過0.8μπι >0.45 μ m和0.22 μ m濾膜除熱原，分裝至安瓿中；
(6)將安瓿置於-80°C冰箱冷凍後室溫融化，重複3次；
(7)將安瓿置於_45°C的預凍溫度，再進行4h保溫；第1次乾燥溫度為_30°C，進行30h的保溫；第二次的乾燥溫度為25°C，再進行IOh保溫，即可獲取注射用多西他賽脂質體，置於4°C環境保存備用。
[0035]實施粒5
【權利要求】
1.一種多西他賽脂質體的凍幹製劑，其特徵在於每1000g多西他賽脂質體凍幹製劑中含有如下成分: 環糊精包合多西他賽0.5 - 2.0g 天然磷脂2.0-65.0g 維生素 E2.0-20.0g 膽固醇及其衍生物0.1-20.0g 凍幹保護劑15.0-80.0g 緩衝液0.01-1.0Og 此多西他賽脂質體無菌凍幹製劑照如下方法製得: 稱取上述量的環糊精包合的多西他賽、天然卵磷脂、維生素E、膽固醇及其衍生物溶於適量的有機溶劑中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發，除去有機溶劑，脂質均勻地分布在圓底燒瓶內表面，用少量磷酸鹽緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混 懸液，通過加壓過0.22 μ m濾膜除熱原，分裝至安瓿中冰箱冷凍後室溫融化，重複3次後，冷凍乾燥即得。
2.如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體製備，其特徵在於製備方法包括如下步驟: (1)稱取環糊精包合的多西他賽、天然卵磷脂、維生素E、膽固醇及其衍生物溶於茄形瓶中，加入適量的有機溶劑中充分溶解，將混合物於旋轉蒸發儀上減壓蒸發(溫度調至40°C )，除去有機溶劑，脂質溶液就結成一層非常均勻的薄膜，狀均勻地分布在茄形瓶內表面； (2)把茄形瓶由蒸發儀中取下後置於乾燥箱中，乾燥箱為真空，過夜除盡溶劑； (3)採用注射用水配製含有凍幹保護劑的緩衝鹽溶液，調節pH5.5-7.5之間，用少量緩衝液振搖，使脂質膜充分水合溶脹，得均勻無白色顆粒的白色混懸液； (4)將白色的混懸液依次通過加壓過0.8μ-- >0.45 μ m和0.22 μ m濾膜除熱原，分裝至安瓿中； (5)將安瓿置於冰箱冷凍後室溫融化，重複3次； (6)冷凍乾燥即得多西他賽凍幹脂質體。
3.如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體，其特徵在於環糊精包合的多西他賽製備方法是稱取適量的多西他賽和環糊精及其衍生物溶於適量溶劑中，恆溫攪拌，減壓蒸發溶劑，適當處理後，乾燥即得。
4.如權利要求3所述的環糊精包合的多西他賽，其特徵在適當處理方法包括減壓蒸發至無溶劑，粉碎乾燥；減壓蒸發至溶劑剩餘適量，至冰箱過夜析晶，過濾乾燥；減壓蒸發至溶劑剩餘適量，至室溫緩慢析晶，過濾乾燥；如權利要求3所述的環糊精包合的多西他賽，其特徵在於環糊精與多西他賽的比例為10:1-1:1，優選6:1-4:1。
5.如權利要求3所述的環糊精包合的多西他賽，其特徵在於環糊精選自α-環糊精、β -環糊精、甲基化-環糊精、羥丙甲基-環糊精、一氯三嗪-環糊精、2、6_ 二甲基-β -環糊精中一種或幾種。
6.如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體，其特徵在於天然磷脂選自蛋黃卵磷月旨、大豆卵磷脂中一種或幾種。
7.如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體，其特徵在於膽固醇及其衍生物選自膽固醇、氫化膽固醇、D-直鏈葡萄糖膽固醇中一種或幾種。
8.如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體，其特徵在於緩衝液選自磷酸鹽、醋酸鹽、丁二酸鹽、檸檬酸鹽、組氨酸和甘氨酸鹽中的一種。
9.如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體，其特徵在於凍幹保護劑選自麥芽糖、甘露醇、半乳糖、乳糖、葡糖糖、蔗糖、海藻糖中的一種或幾種。
10.如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體，其特徵在於反覆凍融的方法是將安瓿置於-80°C冰箱冷凍後室溫融化，重複3次；如權利要求1所述的一種多西他賽凍幹脂質體，其特徵在冷凍乾燥的方法是_45°C的預凍溫度，再進行4h保溫；第1次乾燥溫度為_30°C，進行30h的保溫；第二次的乾燥溫度為25°C，再進行IOh保溫，即可獲取注射用多西他賽脂質體，置 於4°C環境保存備用。
【文檔編號】A61K31/337GK103830181SQ201210489755
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2012年11月27日 優先權日:2012年11月27日
【發明者】楊鵬輝, 靳靜, 張霞 申請人:南京億華藥業有限公司