一種人工誘導石斑魚性逆轉的藥物及製備方法和用途的製作方法
2023-11-02 07:16:47 3
專利名稱：一種人工誘導石斑魚性逆轉的藥物及製備方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及水產養殖中的魚變性藥物及其製備和用途。
石斑魚隸屬鮨科(Serranidae)、石斑魚亞科(Epinephelinae)、石斑魚屬(Epinephelus)，全世界400多種，我國大陸沿海已記錄45種(祝茜，1998)，其個體發育中普遍存在「先雌後雄」的性轉變過程，雄親魚均高齡化(一般6齡以上)；大型種類(如巨石斑魚)雖到4齡雌性就已成熟，並可排卵；但到10齡以上，體重30多千克時才轉變成功能性雄魚。長達6年以上的性逆轉進程，不僅消耗大量魚用餌料，而且雌雄間體的存在，延誤了人工繁殖的時間；等生長發育到雄性精巢可釋精時，種群數量已十分稀少且極難捕獲。
石斑魚的人工繁殖屬於世界性海水養殖難題之一，而石斑魚性控技術又是人工育苗的關鍵。石斑魚養殖經濟效益巨大，世界沿海國家和地區都花大量資金對性控技術進行攻關研究，希望人工育苗產業化；但性控成功，進而發展到人工育苗的，未見科研報導和相關專利。新加坡學者Chao和Lim，泰國學者Tookwinas，日本學者本原稔，菲律賓學者Duray，我國臺灣學者葉信利，大陸學者方永強、洪萬樹等分別對巨石斑魚(Epinephelus tauvina)、點帶石斑魚(E.malabaricus)、桔點石斑魚(E.suillus)、青石斑魚(E.awoara)、赤點石斑魚(E.akaara)等做過性轉控制和人工繁殖方面的實驗研究。他們的方法多數集中於甲基睪丸酮單一藥餌投餵法，少數採用甲基睪丸酮單一藥液注射法，這兩種方法雖簡單，但費工費時，實驗用魚實際攝入劑量無法控制，性轉效果差，性轉雄魚精子活力不強；而且停用藥餌投餵或藥物注射5-7個月後，性轉雄魚又恢復到雌魚狀態卵巢發育良好，精巢退化，部分性別復原的雌魚還能自然產卵；即使有暫時性轉成功，以此性轉雄魚作為父本，雌雄也很難配對，即使偶爾配對人工受精，孵出的仔魚也很難成活，更談不上人工育苗產業化。因此，他們的研究工作大部分夭折，少部分仍在繼續研究，但未見突破性進展。90年代後期，臺灣民間通過改善親魚培育體系，利用網箱養殖天然雌、雄親魚自然產卵受精，並將受精卵或孵出魚苗銷往廣東沿海地區，但受精卵孵化成苗率不足1％；因受雄親魚數量限制，魚苗數量極為有限，而且價格昂貴。這種途徑不能從根本上解決石斑魚人工育苗產業化及大規模養殖對種苗的需求。
本發明的目的是提供一種用於埋植於石斑魚體內以誘導其性逆轉的藥物及製備方法，達到能縮短性轉時間，性轉穩定可靠的效果，以適應石斑魚人工育苗產業化及大規模養殖對種苗的需求。
本發明所提供的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物配方組分是經過多年的篩選而確定的，該藥物的配方組分如下甲基睪丸酮(17αMethyltestosterone，17αMT) 11-30％；睪酮(Testosterone) 25-59％；丙酸睪酮(Testosterone Propionate) 5-20％；甲狀腺素(Thyronine) 3-19％。
本發明的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物是作為埋植法的外源性藥物，一般做成藥條的形式，可以在所述配方組分中加5％-10％海藻多糖或15-25％α-澱粉製成適合於埋植在魚體內的藥條形狀，所述的藥條以圓柱狀為最佳。
本發明藥物採用以下的工藝步驟製備(1)將甲基睪丸酮(17αMethyltestosterone，17αMT)、睪酮(Testosterone)、丙酸睪酮(Testosterone Propionate)及甲狀腺素(Thyronine)四種激素按以下配方組分比例均勻混合甲基睪丸酮(17αMethyltestosterone，17αMT) 11-30％，睪酮(Testosterone) 25-60％，丙酸睪酮(Testosterone Propionate) 5-20％，甲狀腺素(Thyronine)3-19％；(2)在上述混合物中加5％-10％海藻多糖或15-25％α-澱粉充分混合均勻，用無菌海水硬骨魚生理鹽水調製成粘團狀，然後將其擠壓成藥條；(3)將成形後的藥條放於滅菌乾燥培養皿中，在無菌條件下乾燥。
可將所製得的藥物直接應用或保存於已抽真空的棕色廣口瓶中，為將來備用。
本發明所製備的的藥物專用於作為埋植於雌性石斑魚體內以誘導石斑魚性逆轉的外源性藥物。埋植前先測量每尾魚的體長和體重，並鑑定年齡，用採卵管抽取活體性產物在顯微鏡下觀察確定性細胞和性腺的發育狀況，根據年齡、體重及性腺發育狀況選定埋植的劑量為15～19mg/kg體重的外源混合激素藥條。埋植的部位經過嚴格篩選後認為在頭後背部兩側肌體埋植效果最佳，其範圍在頭部鰓蓋上緣後8～15cm，偏離背中線兩側3.5～5cm處；植入藥條時，用親魚夾把已適度麻醉的親魚固定好，將適量藥條埋植入魚體背部肌肉，傷口基部用適量含消炎藥粘合物塗蓋，完成後將已植入藥條的親魚放入大水槽中，使用雙層沙濾海水，待甦醒後緩慢移入強化培育池。經過以上操作植入本發明藥條的親魚不僅100％存活，面且性轉效果也十分理想。
採用本發明的外源混合激素藥條肌體埋植法，經試驗，對雌性石斑魚性轉時間縮短為80天以內，而且更為穩定可靠，至今未發現性別復原問題。以此性轉雄魚與天然雌魚配對受精，已孵出仔魚21萬餘尾，育成3cm商品魚苗3萬尾。實驗證明埋植法無論是性轉效果的穩定性，還是操作過程的高科技含量都比常規藥餌投餵法和注射法都更為先進一步。
實施例一當使用甲基睪丸酮(17α Methyltestosterone，17αMT)23％、睪酮(Testosterone)56％、丙酸睪酮(Testosterone Propionate)16％及甲狀腺素(Thyronine)5％四種激素混合，加8％海藻多糖充分混合均勻，用無菌海水硬骨魚生理鹽水調製成粘團狀，用力擠壓製成圓柱狀藥條，實驗用親魚用0.5％氨基甲酸乙酯麻醉，埋植的藥條位於頭部鰓蓋上緣後14cm，偏離背中線兩側4cm處透皮穿刺入背部肌肉；傷口基部用適量混有1％麝香草酚和0.01％呋喃西林的粘合物蛋清甘油消炎後，使用雙層沙濾海水浸浴實驗用親魚，待甦醒後緩慢移入強化培育池。經過以上操作植入混合激素藥條的親魚不僅100％存活，而且當年80天內實現由雌變雄的性逆轉過程，至今未發現性別復原。
實施例二當使用甲基睪丸酮(17α Methyltestosterone，17αMT)28％、睪酮(Testosterone)40％、丙酸睪酮(Testosterone Propionate)17％及甲狀腺素(Thyronine)15％四種激素混合，加18％α-澱粉充分混合均勻，用無菌海水硬骨魚生理鹽水調製成粘團狀，用力擠壓製成圓柱狀藥條，實驗用親魚用MS222麻醉，埋植的藥條位於頭部鰓蓋上緣後12cm，偏離背中線兩側4cm處透皮穿刺入背部肌肉；傷口基部用適量混有1％麝香草酚和0.01％呋喃西林的粘合物蛋清甘油消炎後，使用雙層沙濾海水浸浴實驗用親魚，待甦醒後緩慢移入強化培育池。經過以上操作植入混合激素藥條的親魚不僅100％存活，而且當年76天內實現由雌變雄的性逆轉過程，至今未發現性別復原。
實施例三當使用甲基睪丸酮(17α Methyltestosterone，17αMT)27％、睪酮(Testosterone)49％、丙酸睪酮(Testosterone Propionate)11％及甲狀腺素(Thyronine)13％四種激素混合，加6％海藻多糖充分混合均勻，用無菌海水硬骨魚生理鹽水調製成粘團狀，用力擠壓製成圓柱狀藥條，實驗用親魚用0.5％氨基甲酸乙酯麻醉，埋植的藥條位於頭部鰓蓋上緣後10cm，偏離背中線兩側3.8cm處透皮穿刺入背部肌肉；傷口基部用適量混有1％麝香草酚和0.01％呋喃西林的粘合物蛋清甘油消炎後，使用雙層沙濾海水浸浴實驗用親魚，待甦醒後緩慢移入強化培育池。經過以上操作植入混合激素藥條的親魚不僅100％存活，而且當年78天內實現由雌變雄的性逆轉過程，至今未發現性別復原。
實施例四當使用甲基睪丸酮(17α Methyltestosterone，17αMT)17％、睪酮(Testosterone)59％、丙酸睪酮(Testosterone Propionate)11％及甲狀腺素(Thyronine)13％四種激素混合製成圓柱狀藥條，實驗用親魚用0.5％氨基甲酸乙酯麻醉，埋植的藥條位於頭部鰓蓋上緣後10cm，偏離背中線兩側4cm處透皮穿刺入背部肌肉；傷口基部用適量混有1％麝香草酚和0.01％呋喃西林的粘合物蛋清甘油消炎後，使用雙層沙濾海水浸浴實驗用親魚，待甦醒後緩慢移入強化培育池。經過以上操作植入混合激素藥條的親魚不僅100％存活，而且當年80天內實現由雌變雄的性逆轉過程，至今未發現性別復原。
權利要求
1.一種人工誘導石斑魚性逆轉的藥物，其特徵在於其配方組分如下甲基睪丸酮(17αMethyltestosterone，17αMT)11-30％；睪酮(Testosterone)25-59％；丙酸睪酮(Testosterone Propionate) 5-20％；甲狀腺素(Thyronine) 3-19％。
2.根據權利要求1所述的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物，其特徵在於在所述配方組分中加5％-10％海藻多糖或15-25％α-澱粉製成藥條。
3.根據權利要求2所述的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物，其特徵在於所述的藥條為圓柱狀。
4.一種權利要求1所述的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物的製備方法，其特徵在於(1)將甲基睪丸酮(17αMethyltestosterone，17αMT)、睪酮(Testosterone)、丙酸睪酮(Testosterone Propionate)及甲狀腺素(Thyronine)四種激素按以下配方組分比例均勻混合甲基睪丸酮(17αMethyltestosterone，17αMT) 11-30％，睪酮(Testosterone) 25-60％，丙酸睪酮(Testosterone Propionate) 5-20％，甲狀腺素(Thyronine) 3-19％；(2)在上述混合物中加5％-10％海藻多糖或15-25％α-澱粉充分混合均勻，用無菌海水硬骨魚生理鹽水調製成粘團狀，然後將其擠壓成藥條；(3)將成形後的藥條放於滅菌乾燥培養皿中，在無菌條件下乾燥。
5.一種權利要求1所述的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物的用途，其特徵在於用作埋植於雌性石斑魚體內以誘導石斑魚性逆轉的外源性藥物。
6.根據權利要求5所述的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物的用途，其特徵在於每kg魚體重的植入劑量為15～19mg。
7.根據權利要求5所述的人工誘導石斑魚性逆轉的藥物的用途，其特徵在於所述藥物埋植於魚頭後背部兩側肌體部位，其範圍在頭部鰓蓋上緣後8～15cm，偏離背中線兩側3.5～5cm處。
全文摘要
本發明提供一種人工誘導石斑魚性逆轉的藥物及製備方法和用途,該藥物為由甲基睪丸酮、睪酮、丙酸睪酮、甲狀腺素組成的混合激素,加上海藻多糖或α－澱粉製成適合於埋植在魚體內的藥條形狀。本發明所製備的藥物專用於作為埋植於雌性石斑魚體內以誘導石斑魚性逆轉的外源性藥物。採用本發明的外源混合激素藥條肌體埋植法,經試驗,對雌性石斑魚性轉時間縮短為80天以內,效果穩定可靠,至今未發現性別復原問題。
文檔編號A61K38/22GK1377703SQ0110768
公開日2002年11月6日 申請日期2001年3月29日 優先權日2001年3月29日
發明者鄒記興 申請人:中國科學院南海海洋研究所