具有增加的產量的植物及其生產方法

2024-01-21 20:49:15 2

專利名稱：：具有增加的產量的植物及其生產方法具有增加的產量的植物及其生產方法
技術領域：
：本發明一般涉及分子生物學領域並涉及用於與相應的野生型植物相比增加植物產量的方法。更特別地，本發明涉及用於增加植物產量的方法，其包括將編碼細胞周期蛋白D3(CYCD3)的核酸引入植物，所述核酸在能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。本發明還涉及包含分離的核酸的植物，所述核酸編碼CYCD3多肽，在能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下，所述植物具有與相應野生型糹直物相比增加的產量。本發明還提供在本發明的方法中有用的構建體。不斷增長的世界人口和逐漸減少的農業耕地促使研究朝提高農業效率的方向發展。用於作物和園藝改進的傳統方式利用選擇性育種技術來鑑定具有目標性狀的植物。然而，此類選擇性育種技術具有缺點，即這些技術一般是勞動密集型的並獲得常常含有異質性遺傳成分的植物，其不能夠總是獲得從母本植物傳遞而來的目標性狀。分子生物學的進步已允許人類修飾動物和植物的種質。植物的基因工程需要分離和操作遺傳物質(一般以DNA或RNA的形式)並隨後將遺傳物質引入植物。此類技術能夠生產具有多種改良的經濟、農藝或園藝性狀的作物或植物。一個特別的經濟上重要的性狀是產量。產量通常定義為作物經濟價值的可測定的生產，並可用數量和/或質量來定義。產量直接依賴於幾個因素，例如，器官的數目和大小、植物結構(例如分枝的數目)、種子生產等。根發育、營養吸收和壓力耐受力也可為決定產量的重要因素。優化上述因素之一可因此促使作物產量的增加。一個特別的經濟上重要的性狀是種子產量。植物種子是人和動物營養的重要來源。作物例如玉米、稻、小麥、油菜和大豆佔了總的人類熱量才聶入的一半以上，無論通過種子本身的直接消費還是通過由加工的種子生產的肉製品的消費。它們還是糖、油和多種用於工業過程的代謝物的來源。種子含有胚一一萌發後新枝條和根的來源，和胚乳一一胚生長、萌發期間和幼苗的早期生長過程中的營養物來源。種子的發育涉及許多基因，並需要從根、葉和莖中將代謝物轉移至生長的種子中。胚乳特別吸收糖類聚合物、油和蛋白質的代謝前體，並將其合成儲藏大分子以填充穀粒。增加植物產量的能力，無論通過改變種子相關的性狀，例如種子數量、種子生物量、種子發育、種子填充或任何其他種子相關的性狀，還是通過增加植物器官的數量和大小，或通過影響植物結構(例如，分枝的數目)、才艮發育、營養4聶入或壓力耐受力，在農業中將有許多應用，甚至許多非農業用途，例如在物質例如藥物、抗體或疫苗的生物4支術生產中。可增加植物產量的方法之一是通過改變植物的固有生長機制。植物的固有生長機制在於高度有序的事件，其共同稱為"細胞周期"。通過細胞周期的行進是所有多細胞生物的生長和發育的基礎，並對於細胞增殖是至關重要的。酵母、哺乳動物和植物中的細胞周期的主要成分是高度保守的。細胞周期一般分為下列順序的時期G0-G1-S-G2-M。DNA複製或合成通常發生在S期("S"是指DNA合成)且染色體的有絲分裂分離發生在M期("M"是指有絲分裂)，伴有介於其間的間期，Gl(細胞在DNA複製之前生長的過程)和G2(在DNA複製之後細胞準備分裂的階段)。細胞分裂在胞質分裂-M期的最後步驟後得以完成。將那些已退出細胞周期並變為靜止的細胞稱為處於GO期。在此時期中的細胞經刺激可重返細胞周期處於Gl期。Gl、G2和G0中的"G"代表"間隙"。細胞周期過程的完成使得每個處於細胞分裂過程的子細胞獲得親代基因組的完整拷貝。細胞分裂由兩個主要的細胞周期事件來控制，即DNA合成的啟動和有絲分裂的啟動。向每個這些關鍵事件的每次轉換過渡均受到檢驗點的控制，所述檢驗點由特定的蛋白質複合體代表(涉及DNA複製和分離)。哺乳動物和植物細胞中Gl/S邊界上DNA合成所需基因的表達受到轉錄因子的E2F家族的調節(LaThangue，1994;Muller等人，2001;DeVeylder等人，2002)。進入細胞周期受到E2F/Rb複合體的調節/引發，其整合信號並使得細胞周期基因的轉錄激活。細胞周期不同時期之間轉換並和從而在細胞周期中行進，是受不同的異二聚體絲氨i^/蘇氨酸蛋白激酶——通常稱為細胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)的形成和激活來驅動的。這些激酶活性的必要條件是其與特定的細胞周期蛋白的物理結合，激活的時間選擇主要依賴於細胞周期蛋白的表達。細胞周期蛋白結合引起所結合的CDK的N-末端片段的構象改變並促使複合體的定位和底物特異性。單體CDKs在與細胞周期蛋白相結合時激活並從而具有激酶活性。細胞周期蛋白水平在細胞周期中波動並因此代表決定CDK活化的時間選擇的主要因素。在細胞周期過程中，這些含有細胞周期蛋白和CDK的複合體的周期性激活介導細胞周期轉換(檢驗點)的時序調節。細胞周期蛋白可分為有絲分裂的細胞周期蛋白(在高等真核生物中命名為A-和B-型細胞周期蛋白，在芽殖酵母中命名為CLBs)和Gl特異的細胞周期蛋白(在哺乳動物中命名為D-型細胞周期蛋白，且在芽殖酵母中命名為CLNs)。H-型細胞周期蛋白調節CAKs(CDK激活的激酶)的活性。植物中已知的所有四種類型的細胞周期蛋白大部分是根據其與其人類對應物的類比而得以鑑定的。在擬南芥中，已描述了10種A-型、9種B-型、10種D-型和1種H-型細胞周期蛋白(Vandepoele等人，2002)。將擬南芥中的10種D-型細胞周期蛋白分為7個亞類，Dl至D7,其反映出它們彼此之間缺乏高的序列相似性，這與A-型和B-型細胞周期蛋白相反。只有D3和D4亞類具有多於一個成員，分別為3個和2個。以前已有建議，將D3型細胞周期蛋白的冗餘作為當敲除單個D3-型細胞周期蛋白時不能觀察到突變體表型的一種解釋(Swaminathan等人，2000)。兩種D3型細胞周期蛋白經最近的部分複製而連接，這表明這些是功能上冗餘的。一種類似的假說可以支持D4-型細胞周期蛋白，因為三個中的兩個定位於複製塊上。與A-和B-型細胞周期蛋白相比，D-型細胞周期蛋白中所顯示的更大區別可能反映了D-型細胞周期蛋白在將發育信號和環境信號整合進細胞周期中的潛在作用。例如，D3-型細胞周期蛋白已顯示出對植物激素例如細胞分裂素和油菜素類固醇的反應，而CYCD2和CYCD4在Gl期中較早地激活，並對糖可用性起反應(對於綜述，見Stals和Inz6,2001)。據報導菸草中CYCD2;1基因的過表達在未有形態改變的情況下增加了細胞分裂並提高了總體的植物生長速度(Cockcroft等人，2000)。據報導，擬南芥中CYCD3;1基因在CaMV35S啟動子控制下的過表達使植物具有變大的子葉、顯著減小的最終植物大小和扭曲的發育。在細胞水平，細胞從G1推進，引起分生組織區域和那些細胞分裂通常缺失或受限的區域中的異位細胞分裂。細胞數目的增加伴隨著細胞大小的減小(Dewitte等人，2003)。本發明的目標是克服與植物中CYCD3表達的現有技術相關的一些問題。目前已發現，將編碼CYCD3多肽的核酸引入植物中，處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子的控制下，使植物相對於野生型植物具有增加的產量，尤其是相對於那些在不能優先驅動胚乳中表達的啟動子控制下的轉基因植物具有增加的產量。因此，根據本發明的一個實施方案，提供了一種用於增加植物產量的方法，包括將編碼CYCD3多肽的核酸引入植物中，使其處於能夠優先地在種子胚乳中表達該核酸的啟動子的控制下。有利地，根據本發明的方法的操作導致植物與對應的野生型植物相比具有增加的產量，特別是種子產量。將此處所述的術語"增加的產量，，用於表示下列任何一種或多種增加，每種均相對於野生型植物(i)一個或多個植物部分的增加的生物量(重量)，其可包括地上(可收穫的)部分和/或(可收穫的)地下部分，特別是增加的根生物量；(ii)增加的總的種子產量，其包括種子生物量的增加(種子重量)，重量的增加；(iii)每個圓錐花絮的花("小花，，)數目的增加；(iv)(飽滿)種子數目的增加；(v)增加的種子大小，其也可影響種子的組成；(vi)種子體積的增加，其也可影響種子的組成(包括油、蛋白質和糖類總含量和組成)；(vii)增加的個體種子面積和/或種子周長；(viii)增加的個體種子長度和/或寬度；(ix)提高的收穫指數，其表達為可收穫部分產量例如種子佔全部生物量的比率；和(x)提高的千粒重(TKW)，其可從所計數的飽滿數量和它們的總重量外推出來。提高的TKW可產生自增加的種子大小和/或種子重量。提高的TKW可產生自胚大小(重量)和/或胚乳大小(重量)的增加。種子大小、種子體積、種子面積和種子長度的增加可由於種子特定部分的增加，例如由於胚和/或胚乳和/或糊粉和/或盾片和/或子葉或種子其它部分大小的增加。以玉米為例，產量的增加可表現為下列的一種或多種每公項或畝的植物數量的增加、每植物穗的數量的增加、行數的增加、每行米粒數、米粒重量、千粒重、穗長/直徑的增加、種子飽滿率(其為滿種數量除以種子總數並乘以IOO)的增加，等等。以稻為例，產量的增加可表現為下列的一種或多種每公項或畝的植物數量、每植物圓錐花序的數量、每個圓錐花序的小穗數量、每個圓錐花序的花的數量、種子飽滿率的增加、TKW的增加，等等。產量的增加也可導致改良的結構、或可以由於改良的結構而發生。根據優選的特徵，本發明方法的實施導致具有提高的種子產量的植物。特別是，此增加的種子產量包括每圓錐花序花的數目的增加、增加的總的種子產量、增加的TKW和增加的收穫指數、每個均相對於相應的野生型植物。因此，根據本發明，提供了一種用於增加植物中種子產量的方法，該方法包括將編碼CYCD3多肽的核酸引入植物，所述核酸處於能夠優先在種子的胚乳中表達該核酸的啟動子的控制下。既然根據本發明的轉基因植物具有增加的產量，很可能是這些植物表現出增加的生長速率(在至少部分它們的生命周期中)，其相對於相應的野生型植物在其生命周期的相應階段而言。增加的生長速率對於植物的一個或多個部分(包括種子)可為特異的，或可基本為整個植物特異的。具有增加的生長速率的植物甚至可表現出早期開花。生長速率的增加可發生在植物生長周期的一個或多個階段，或基本上在整個植物生命周期過程中。植物生命周期的早期階段中增加的生長速率可反映出增強的活力。生長速率的增加可改變植物的收穫周期，允許植物比其他可能的方式更晚播種和/或更早收穫。如果生長速率充分提高，其可允許同一植物物種的再次播種(例如在一個常規的生長周期中，在播種和收穫稻植物之後播種和收穫另外的稻植物)。類似地，如果生長速率得以足夠提高，其可允許進一步播種不同植物物種的種子(例如播種和收穫稻植物後，例如播種和任選收穫大豆、馬鈴薯或任何其他合適的植物稻)。從同一根莖收穫額外的次數在一些作物的情況下也是可能的。改變植物的收穫周期可引起每畝的年生物量產品的增力口(由於任何特定植物可生長和收穫的次數(如一年中)增加)。生長速率的增加也可允許轉基因植物比野生型對應物在更廣的地域範圍內培養，因為種植作物的區域限制常常由種植(早季)時或收穫(晚季)時的不利環境條件來決定。如果收穫周期縮短，此類不利條件可避免。生長周期可通過來自生長曲線的多種參數來確定，此類參數可為T-Mid(植物達到其最大尺寸的50%所需的時間)和T-卯(植物達到其最大尺寸的卯％所需的時間)，等等。本發明方法的實施使植物具有提高的生長速率。因此，根據本發明，此處提供了用於相對於相應的野生型植物的生長速率而言，提高植物生長速率的方法，該方法包括將編碼CYCD3多肽的核酸引入植物中，所述核酸處於能優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子的控制下。無論當植物處於無脅迫狀態還是當植物暴露於多種脅迫之下，與對照植物相比，產量和/或生長速率的增加均會發生。植物通常會通過生長地更加緩慢來對暴露於脅迫進行響應。在嚴重脅迫的情況下，植物可能甚至完全停止生長。在另一方面，此處將輕微脅迫定義為，當植物暴露其中時，不會導致植物完全停止生長、失去重新生長的能力的脅迫。由於農業實踐(灌溉、施肥、殺蟲劑處理)的進步，在種植的作物中常常不會遭遇嚴重脅迫。因而，由輕微脅迫引起的受損的生長對於農業常常是不受歡迎的特徵。輕微脅迫是植物可能暴露的通常脅迫。這些脅迫可為植物所暴露的日常的生物的和/或非生物的(環境的)脅迫。通常的非生物或環境脅迫包括由非典型的熱或冷/嚴寒的溫度引起的溫度脅迫、鹽脅迫、水脅迫(乾旱或過度的7K)。化學品也可導致非生物的脅迫。生物脅迫通常是那些由病原體例如細菌、病毒、真菌和昆蟲引起的脅迫。有利地，本發明方法的實施允許任何植物中產量得到增加。此處所用的術語"植物"包含完整植物、植物的祖先和後代以及植物部分，包括種子、枝條、莖、葉、根(包括塊莖)、花、及組織和器官，其中上述的每種均包含目的基因/核酸。術語"植物"還包含植物細胞、懸浮培養物、愈傷組織、胚、分生組織區域、配子體、花粉和小孢子，再次其中上述中的每種均含目的基因/核酸。在本發明方法中尤其有用的植物包括所有屬於綠色植物(Viridiplantae)總科的植物，尤其是包括選自下列清單的飼料或祠料莢果、觀賞植物、食物作物、樹木或灌木的單子葉和雙子葉植物，其中包括金合歡屬物種(Acaciaspp.)、槭樹屬物種(Acerspp.)、浙爾猴湘匕屬物種(Actinidiaspp.)、七葉樹屬物種(Aesculusspp.)、紐西蘭貝殼杉(Agathisaustralis)、Albiziaamara、三色桫移(Alsophilatricolor)、須芒草屬物種(Andropogonspp.)、落花生屬物種(Arachisspp)、檳榔(Arecacatechu)、Asteliafragrans、黃芪(Astragaluscicer)、Baikiaeaplurijuga、樺木屬物種(Betulaspp.)、芸莒屬物種(Brassicaspp.)、木攬(Bruguieragymnorrhiza)、Burkeaafricana、紫鉚(Buteafrondosa)、Cadabafarinosa、朱纓花屬物種(Calliandraspp)、茶(Camelliasinensis)、美人蕉(Cannaindica)、辣椒屬物種(Capsicumspp,)、決明屬物種(Cassiaspp.)、距瓣豆(Centroemapubescens)、木瓜屬物種(Chaenomelesspp.)、肉才圭(Cinnamomumcassia)、小果咖啡(Coffeaarabica)、Colophospermummopane、變異小冠花(Coronilliavaria)、枸子(Cotoneasterserotina)、山植屬物種(Crataegusspp.)、香瓜屬物種(Cucumisspp.)、柏木屬物種(Cupressusspp.)、Cyatheadealbata、木梨(Cydoniaoblonga)、圓球杉卩杉(Cryptomeriajaponica)、香茅屬物種(Cymbopogonspp.)、Cyntheadealbata、木梨(Cydoniaoblonga)、Dalbergiamonetaria、大葉骨碎補(Davalliadivaricata)、山馬蟲皇屬物種(Desmodiumspp.)、迪卡蘭(Dicksoniasquarosa)、Diheteropogonamplectens、Diocleaspp、錄扁豆屬物種(Dolichosspp.)、Dorycniumrectum、錐穗稗(Echinochloapyramidalis)、Ehrartiaspp.、糝子(Eleusinecoracana)、Eragrestisspp.、刺4同屬物種(Erythrinaspp.)、桉屬物種(Eucalyptusspp.)、Eucleaschimperi、金茅(Eulaliavillosa)、蕎麥屬物種(Fagopyrumspp.)、費約羅(Feijoasellowiana)、草雷屬物種(Fragariaspp.)、千斤拔屬物種(Flemingiaspp)、Freycinetiabanksii、Geraniumthunbergii、銀杏(Ginkgobiloba)、Glycinejavanica、Gliricidiaspp、陸地衝帛(Gossypiumhirsutum)、4艮摔屬物種(Grevilleaspp.)、Guibourtiacoleosperma、巖黃芪屬物種(Hedysarumspp.)、牛鞭草(Hemarthiaaltissima)、扭黃茅(Heteropogoncontortus)、大麥(Hordeumvulgare)、Hyparrheniarufa、小連翅(Hypericumerectum)、Hypertheliadissoluta、白花庭藍(Indigoincarnata)、秀尾屬物種(Irisspp.)、Leptarrhenapyrolifolia、胡枝子屬物種(Lespedizaspp.)、萵苣屬物種(Lettucaspp.)、Leucaenaleucocephala、Loudetiasimplex、Lotonusbainesii、百糾艮屬物種(Lotusspp.)、硬皮豆(Macrotylomaaxillare)、蘋果屬物種(Malusspp.)、Manihotesculenta、紫苜覆(Medicagosativa)、水杉(Metasequoiaglyptostroboides)、大蕉(Musasapientum)、菸草屬物種(Nicotianumspp.)、驢食草屬物種(Onobrychisspp.)、Ornithopusspp.、稻屬物種(Oryzaspp.)、非洲雙翼豆(Peltophorumafricamim)、狼尾草屬物種(Pennisetumspp.)、鱘梨(Perseagratissima)、碧冬痴屬物種(Petuniaspp.)、菜豆屬物種(Phaseolusspp.)、檳榔竹(Phoenixcanariensis)、Phormiumcookianum、石楠屬物種(Photiniaspp.)、白雲杉(Piceaglauca)、松屬物種(Pinusspp.)、豌豆(Pisumsativum)、紐西蘭羅漢松(Podocarpustotara)、Pogonarthriafleckii、Pogonarthriasquarrosa、楊屬物種(Populusspp.)、牧豆樹(Prosopiscineraria)、花旗松(Pseudotsugamenziesii)、Pterolobiumstellatum、西洋梨(Pymscommunis)、櫟屬物種(Quercusspp.)、Rhaphiolepsisumbellata、美味棒花棕(Rhopalostylissapida)、Rhusnatalensis、歐洲醋粟(Ribesgrossularia)、茶薦子屬物種(Ribesspp.)、洋槐(Robiniapseudoacacia)、薔薇屬物種(Rosaspp.)、懸鉤子屬物種(Rubusspp.)、杉p屬物種(Salixspp.)、Schyzachyriumsanguineum、金松(Sciadopitysverticillata)、j匕美紅斥-(Sequoiasempervirens)、巨才i(Sequoiadendrongiganteum)、兩色蜀黍(Sorghumbicolor)、菠菜屬物種(Spinaciaspp.)、Sporobolusfimbriatus、Stiburusalopecuroides、Stylosanthoshumilis、葫蘆茶屬物種(Tadehagispp)、落羽杉(Taxodiumdistichum)、阿拉伯黃背草(Themedatriandra)、車軸草屬物種(Trifoliumspp.)、小麥屬物種(TriticumSPP')、異葉鐵杉(Tsugaheterophylla)、越桔屬物種(Vaccini腿spp.)、野豌豆屬物種(Viciaspp.)、葡萄(Vitisvinifera)、錐穂沃森花(Watsoniapyramidata)、馬蹄蓮(Zantedeschiaaethiopica)、玉蜀黍(Zeamays)、莧屬植物(amaranth)、洋薊(artichoke)、天門冬屬(asparagus)、椰菜(broccoli)、孢子甘藍(Brusselssprouts)、甘藍、芸苔(canola)、胡蘿蔔、花椰菜、芽菜、羽衣甘藍(collardgreens)、亞麻、無頭甘藍(kale)、兵豆屬(lentil)、油菜籽油菜(oilseedrape)、秋葵(okra)、洋蔥、馬鈴薯、稻、大豆、草莓、甜菜、甘蔗、向日葵、番茄、南瓜(squash)、茶和藻類，等等。根據本發明優選的實施方案，植物為作物植物。作物植物的實例包括大豆、向日葵、芸苔、苜蓿、油菜籽、棉花、番茄、馬鈴薯或菸草等等。進一步優選地，植物為單子葉植物。單子葉植物的一個此類的例子是甘蔗。更優選地該植物為穀物。此類穀物的例子包括稻、玉米、小麥、大麥、粟、黑麥、高梁和燕麥。可利用不同的方法鑑定CYCD3多肽。例如，查詢蛋白質序列可與翻譯的擬南芥核亂亭列資料庫進行BLASTed(例如，利用BLAST默認參數進行空位開放罰分和空位擴展罰分)。BLAST結果中的第一個命中者即為擬南芥CYCD3多肽。用於鑑定CYCD3多肽的另一種方法是通過用已知的CYCD3蛋白質序列比對查詢序列，利用例如VectorNTI套包(InforMax，Bethesda，MD)中的AlignX程序。然後可利用空位開放罰分10和空位擴展罰分0.01進行多重比對。為了更好地定位一些保守區域，對比對進行較小的手工編輯也是必要的。如果查詢序列是CYCD3多肽，其將與已知的CYCD3多肽序列比對。如此處所述的"CYCD3多肽"是指任何多肽序列，當用於構建細胞周期蛋白或細胞周期蛋白D系統樹(例如如圖1中所述的一種)時，其落入細胞周期蛋白D3-型組中，該組包括CYCD3多肽(且不是其他D-型細胞周期蛋白，例如細胞周期蛋白D1、D2、D4、D5、D6和D7)。本發明方法的實施需要4吏用編碼CYCD3多肽的核酸。此處所涉及的編碼CYCD3多肽的核酸是如上所述的編碼CYCD3多肽的核酸。本領域技術人員可容易地利用製作此類系統樹的已知技術和軟體，例如GCG、EBI或CLUSTAL軟體包，利用默認參數來確定任何所研究的多肽序列是否落入前述的定義中。一旦建立此系統樹，D3-型細胞周期蛋白組中的序列聚類將被認為落入"CYCD3多肽"的定義中。編碼此類序列的核酸在實施本發明的方法中將是有用的。D3-型細胞周期蛋白通常具有結合和激活植物CDKs和Rb的能力。除了細胞周期蛋白盒和大約前40個胺基酸內的LxCxE基序(其為大多數D-型細胞周期蛋白特徵性的)外，D3-型細胞周期蛋白可包含一種或多種且優選地所有通過圖2和6中所示的盒所鑑定的保守區域。如圖2和6所示，盒內的一個錯配是允許的。編碼落入前述CYCD3多肽定義的CYCD3多肽的核酸的例子在下文表1中給出。表1中所示的CYCD3編碼核酸在實施本發明的方法中是有用的，即通過引入和表達在能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制之下的這些核酸中的任意一種，獲得具有與對應的野生型植物相比增加產量的植物。表l的CYCD3-編碼核酸的變體在本發明的方法中也是有用的。SEQIDNO:1，SEQIDNO:48或任一種的變體在本發明的方法中是優選使用的。如此處所述的編碼CYCD3多肽的核酸的變體通常編碼完整蛋白質的基本部分，其可包含除細胞周期蛋白盒和大約前40個M酸內的LxCxE基序(其為大多數D-型細胞周期蛋白特徵性的)外，還包含一種或多種且優選地所有通過圖2和6中所示的盒所鑑定的保守區域(如圖2和6所示，盒內的一個錯配是允許的)。表l中顯示了如上文所述的CYCD3多肽的例子(由具有NCBI檢索號的多核苷,列編碼)。SEQIDNO:2、SEQIDNO:49或二者之一的基本部分代表了用於實施本發明的優選的CYCD3多肽序列。CYCD3多肽可為核酸編碼的完整蛋白質，或可為所編碼蛋白質的部分。優選地，此處所提供的核酸編碼組成完整蛋白質的基本部分的CYCD3多肽，所述完整蛋白質除包含細胞周期蛋白盒和大約前40個胺基酸內的LxCxE基序(其為大多數D-型細胞周期蛋白特徵性的)夕卜，還包含一種或多種且優選地所有圖2和6中所示的盒所鑑定的保守區域(如圖2和6所示，盒內的一個錯配是允許的)。此部分可以分離的形式使用或可與其他編碼(或非編碼)序列融合使用以便，例如，產生組合幾種活性的蛋白質。當與其他編碼序列融合時，通過翻譯產生的所獲得的多肽可比預計的CYCD3片段更大。表l:編碼CYCD3多肽的核酸的例子tableseeoriginaldocumentpage15tableseeoriginaldocumentpage16tableseeoriginaldocumentpage17tableseeoriginaldocumentpage18*不含有終止密碼子，其產生了更長的轉錄物，與相應的非修飾序列(SEQIDNO:2)相比，所得的額外部分被認為並不影響整體功能。此處所提供的CYCD3-編碼核酸的變體在本發明的方法中也是有用的。此類變體可來自任何天然或人工的來源。核^/基因或其變體可分離自微生物來源，例如酵母或真菌，或來自植物、藻類或動物(包括人)來源。此核酸可通過故意的人工操作從其組成和/或基因環境中的天然形式修飾而來。核酸優選地來自植物來源，無論來自相同的植物物種(例如與其所要引入的植物相同)或來自不同的植物物種。核酸可分離自雙子葉物種，優選地來自十字花科(Brassicaceae)，更優選地來自擬南芥。更優選地，SEQIDNO:1或SEDIDNO:48代表了分離自擬南芥的CYCD3-編碼核酸，且SEQIDNO:2或SEDIDNO:49代表了CYCD3多肽序列。CYCD3-編碼核^/或基因的變體的例子是能夠在降低的嚴格條件，優選地在嚴格條件下能夠與CYCD3-編碼核^/基因雜交，所述核^/基因編碼這樣的多肽，當用於建立細胞周期蛋白或細胞周期蛋白D系統樹時，落入包括如SEQIDNO:2或SEQIDNO:49中的CYCD3的細胞周期蛋白D3-型組。優選地，CYCD3-編碼核酸/基因的變體是能夠與編碼CYCD3多肽的核酸雜交的核酸，該多肽除包含細胞周期蛋白盒和大約前40個胺基酸內的LxCxE基序夕卜，還包含一種或多種且優選地所有圖2和6中所示的盒所鑑定的保守區域(如圖2和6所示，盒內的一個錯配是允許的)。優選的是能夠與SEQIDNO:1或SEDIDNO:48所代表的核酸雜交的核酸。另外在本發明的方法中有用的是能夠與表1中所示的任一CYCD3-編碼核酸相雜交的任何核酸。本文定義的術語"雜交"指其中基本同源互補的核酸序列彼此退火的過程。雜交過程能夠完全在溶液中發生，即互補的核酸都在溶液中。雜交過程也可以在如下情況下進行，即互補核酸之一固定於基質上，如磁珠、瓊脂糖珠或任何其它樹脂上。此外，雜交過程也可以如此進行，即其中互補核酸之一固定在固相支持物如硝酸纖維素或尼龍膜上，或者如用照相平板印刷固定在例如矽質玻璃支持物上(後者稱為核酸陣列或微陣列，或稱為核酸晶片)。為了使雜交發生，通常使核酸分子熱變性或化學變性，以使雙鏈解鏈成兩條單鏈，和/或除去單鏈核酸中的髮夾結構或其它二級結構。雜交的嚴格性受諸如溫度、鹽濃度、離子強度和雜交緩衝液組成等條件的影響。在核酸雜交實驗如Southern和Northern雜交的情況中，"嚴格雜交條件"和"嚴格雜交洗滌條件"依賴於序列，並且在不同的環境參數下不同。熟練的4支術人員知曉可以在雜交和洗滌過程中改變的多種參數，從而保持或者改變嚴格條件。Tm是在確定的離子強度和pH值下，50%的耙序列與完全匹配的探針雜交的溫度。Tm取決於溶液條件和探針的鹼基組成及長度。例如，較長的序列在較高溫度下特異性雜交。在低於Tm值16。C到32。C獲得最大雜交率。在雜交溶液中存在一價陽離子會減少兩核酸鏈之間的靜電排斥作用，從而促進雜合體形成；當鈉濃度高達0.4M時，這一作用明顯。每個百分點的甲醯胺可使DNA-DNA和DNA-RNA雙鏈體的解鏈溫度降低0.6到0.7^，加入50。/。甲醯胺能夠使雜交在30到45。C完成，儘管這將降低雜交率。鹼基對錯配降低雜交率和雙鏈體的熱穩定性。平均而言，對於大的探針，每個百分點鹼基錯配使L值下降約1'C。Tm值可以用依賴於雜合體類型的下列方程式計算1、DNA-DNA雜合體(Mdnkoth和Wahl，Anal.Biochem.，138:267-284，1984):Tm=81.5°C+16.6xlog[Na+]a+0.41x%[G/Cb-500x[LT1-0.61x%甲醯胺2、DNA-RNA或RNA-RNA雜合體Tm=79.8+18.5(log10[Na+]a)+0.58(%G/Cb)+11.8(%G/Cb)2國820/Lc3、寡DNA或寡RNAd雜合體<20個核苷酸Tm=2(ln)20曙35個核苷酸Tm=22+1.46(ln)a或對於其它一價陽離子，但是僅在0.01-0.4M範圍內精確。b僅對於在30%到75%範圍內的y。GC精確。c1^雙鏈體的鹼基對長度。d寡，寡核苷酸；ln，引物的有效長度-2x(G/C數)+(A/T數)。注釋對於每1%甲醯胺，TJ1降低約0.6到0.7。C,而6M尿素的存在可使Tm值降低約30'C。雜交特異性通常是雜交後洗滌的函數。為了除去非特異雜交產生的背景，用稀釋的鹽溶液洗滌樣品。這類洗滌的關鍵因素包括最終洗滌溶液的離子強度和溫度鹽濃度越低、洗滌溫度越高，洗滌的嚴格性就越高。洗滌條件通常在等於或低於雜交嚴格性條件下進行。一般地，如上設置適用於核酸雜交測定或基因擴增檢測操作的嚴格條件。也可以選擇更高或更低的嚴格性條件。通常，對於在確定的離子強度和pH值下的特定序列，選擇比熱解鏈溫度(TJ低50'C的低嚴格條件。中等嚴格條件溫度比TJ氐20'C，而高嚴格條件溫度比Tm低10X:。例如，嚴格條件是至少像如條件A-L—樣嚴格；降低的嚴格條件是至少像如條件M-R—樣嚴格。可以通過許多已知技術中的任一來控制非特異性結合，所述技術諸如，例如用含蛋白質的溶液封閉膜，在雜交緩衝液中添加異源RNA、DNA和SDS，以及用RNA酶處理。在下表2中列出雜交和洗滌條件的實例，表2:雜交和洗滌條件的實例tableseeoriginaldocumentpage21tableseeoriginaldocumentpage22*"雜合體長度"是雜交核酸的預期長度。當已知序列的核酸雜交時，可以通過比對序列及鑑別本文所述的保守區域來確定雜合體長度。t在雜交和洗滌緩衝液中，可以用SSPE(1xSSPE是0.15MNaCl，10mMNaH2P04和1.25mMEDTA，pH7.4)代替SSC(1xSSC是0.15MNaCl和15mM檸檬酸鈉)；雜交完成後洗滌15分鐘。雜交和洗滌可以另外地包括5xDenhardt's試劑、0.5-1.0%SDS、100照/ml變性片段化的鮭精DNA、0.5%焦磷酸鈉和高達50%的甲醯胺。*Tb-Tr:對於預期長度小於50個鹼基對的雜合體，雜交溫度應該比雜合體的解鏈溫度TVf氐5-10'C;根據上述方程式確定Tm。*本發明還包括以PNA或修飾的核酸代替任一或多個DNA或RNA雜交配偶體。為了定義嚴格性水平，可以參考Sambrook等(2001)的《分子克隆實驗室手冊》，第三版，冷泉港實驗室出版，冷泉港，紐約，或者CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWiley&Sons,N.Y.(1989)。編碼CYCD3多肽的"同源物"的核酸也可用於本發明中。"同源物"包括肽、寡肽、多肽、蛋白質和酶，其相對於所討論的未修飾蛋白質具有胺基酸替代、缺失和/或插入，並且具有與其衍生自的未修飾形式蛋白質相似的生物活性和功能活性。為了產生這樣的同源物，蛋白質的胺基酸由具有相似性質(如相似的疏水性、親水性、抗原性、形成或打破ot螺旋結構或P片層結構的傾向)的其它胺基酸所替換。保守替代表是本領域內眾所周知的(例如見Creighton(1984)Proteins.W.H.FreemanandCompany和下表3)。術語"同源物"還包含兩種特殊形式的同源，其包括直系同源序列和旁系同源序列，其中包含用於描述基因的祖先關係的進化概念。術語"旁系同源"涉及在一個物種的基因組內部導致旁系同源基因的基因-副本。術語"直系同源"涉及由於物種形成導致的不同生物中的同源基因。上文中表1中給出了CYCD3多肽同源物的例子。例如，可以通過所謂的交互(reciprocal)blast搜索容易地找到例如在單子葉植物種中的直系同源物。這可以通過使用查詢序列(例如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:48或SEQIDNO:49)針對任何序列資料庫，如可在http:Vwww.ncbi.nlm.nih.gov找到的公共可獲得的NCBI資料庫，進行一次blast而實現。當從核苷,列開始時，可使用BLASTN或tBLASTX，而當從蛋白質開始時，可使用BLASTP或TBLASTN(利用標準默認值)。Blast結果可以任選地過濾。接著使用過濾的結果或者未過濾的結果中的全長序列針對查詢序列源自的相同生物體的序列進行反向blast(二次blast)。然後比較第一次和第二次blast的結果。如果二次blast中得分靠前的命中事件來自查詢序列源自的相同物種，則找到了旁系同源物；如果二次blast中得分靠前的命中事件不是來自查詢序列源自的相同物種，則找到了直系同源物。得分靠前的命中事件是E值低的命中事件。E值越低，得分越具有顯著性(或者換句話說，偶然發現此命中事件的機率越低)。E值的計算是本領域眾所周知的。在大家族的情況下可以使用ClustalW,繼之以鄰近連接樹來輔助相關基因的聚類可視化，以鑑定直系同源物和旁系同源物。有用的。根據本發明，提供了用於增加植物產量的方法，其包括將編碼SEQIDNO:2或SEQIDNO:49所代表的CYCD3多肽的直系同源物或旁系同源物的核酸引入植物，該核酸處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。同源物可以是蛋白質"替代變體，，的形式，即在氨基^列中至少有一個殘基被除去，並在這一位置插入不同的殘基。胺基酸替代通常是單個殘基的替代，但是視施加於多肽的功能性限制而定也可能是成簇替代；插入通常在1到10個胺基酸殘基的數量級。優選地，胺基酸替代包括保守的胺基酸替代。本領域可以容易地獲得保守替代表。下表3給出了保守胺基酸替代的實例。表3:保守胺基酸替代的實例tableseeoriginaldocumentpage24tableseeoriginaldocumentpage25lieLeu;Val同源物也可以是蛋白質的"插入變體，，的形式，即在蛋白質的預定位置引入一個或多個胺基酸殘基。插入可以包括氨基端和/或羧基端的融合，以及單個或多個胺基酸的內部序列插入。一般，多肽序列內部的插入將小於氨基或氛基端的融合，數量級在約1到10個殘基。氨基或羧基端融合蛋白質或肽的實例包括在酵母雙雜交系統中應用的轉錄激活因子的結合結構域或激活結構域、噬菌體外殼蛋白質、(組氨酸)6標籤、穀胱甘肽S-轉移酶標籤、蛋白質A、麥芽糖結合蛋白、二氫葉酸還原酶、Tag'100表位、c-myc表位、FLAG⑧表位、lacZ、CMP(4丐調蛋白結合肽)、HA表位、蛋白質C表位和VSV表位。蛋白質"缺失變體"形式的同源物特徵在於從蛋白質中除去一個或多個胺基酸。可通過本領域眾所周知的肽合成技術，如固相肽合成法等，或通過重組DNA操作容易地得到蛋白質的多肽變體。用於操縱DNA序列以產生蛋白質的替代、插入或缺失變體的方法是本領域眾所周知的。例如，本領域技術人員熟知在DNA預定位置產生替代突變的技術，其包括M13誘變、T7-Gen體外誘變(USB，Cleveland,OH)、QuickChange位點定向誘變(Stratagene，SanDiego,CA)、PCR介導的位點定向資變或其它位點定向請變方法。CYCD3多肽可為衍生物。蛋白質的"衍生物"包含肽、寡肽、多肽，其包含與多肽的天然存在形式的M酸序列相比而言，天然發生改變(糖基化、醯基化、泛素化、異戊烯化、磷酸化、豆蔻醯化、硫酸化等)或非天然改變的胺基酸殘基。衍生物還可包含與其所來源的胺基酸序列相比，一個或多個胺基酸替代或添加，例如報告分子或其他配體，其共價或非共價地結合到M酸序列上，例如結合以幫助其檢測的報告分子，和相對於天然存在蛋白質的胺基酸序列而言的非天然存在的胺基酸殘基。CYCD3多肽可由CYCD3編碼核^/基因的可變剪接變體編碼。如此處所用的術語"可變剪接變體"包含核酸序列的變體，其中已將所選擇的內含子和/或外顯子切除、維持、替換或增加，或者已將其中的內含子縮短或加長。此類變體將是保持蛋白質的生物學活性的變體，其可通過選擇性地保留蛋白質的功能片段來獲得。此類剪接變體可在自然中找到或可人造。用於製備此類剪接變體的方法是本領域中公知的。根據本發明，提供了用於增加植物產量的方法，包括將編碼CYCD3多肽的核酸剪接變體引入植物，所述變體處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制之下。優選的剪接變體是編碼多肽的核酸剪接變體，其當用於建立細胞周期蛋白和細胞周期蛋白D系統樹時，落入D3-型組，該組包括SEQIDNO:2或SEQIDNO:49所代表的CYCD3。此類剪接變體可為上面表1所述的任何一種核酸的剪接變體。SEQIDNO:1或SEQIDNO:48的剪接變體用於本發明的方法是特別優選的。CYCD3多肽還可由CYCD3編碼核^/基因的等位基因變體來編碼。等位基因變體天然存在，本發明方法還包括這些天然等位基因的用途。等INDELs的大小通常小於100bp。SNPs和INDELs形成了大多數生物天然發生的多態性林系中序列變體中最大的部分。根據本發明，提供了用於增加植物產量的方法，包括將編碼CYCD3多肽的核酸的等位基因變體引入植物，使其處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。優選的等位基因變體是編碼多肽的核酸的等位基因變體，其當用於建立細胞周期蛋白和細胞周期蛋白D系統樹時落入D3-型組，該組包括如SEQIDNO:2或SEQIDNO:49中的CYCD3。此類等位基因變體可為上面表1所述的任何一種核酸的等位基因變體。SEQIDNO:1或SEQIDNO:48的等位變體用於本發明的方法是特別優選的。位點定向誘變和定向進化是能夠產生新CYCD3變體的技術的例子。幾種方法可用來實現位點定向誘變，最普遍的是基於PCR的方法(分子生物學的通用方案。WileyEds.http:〃www.4ulr.com/products/currentprotocols/index.html)。定向進化，也稱為基因改組，也可用於產生CYCD3編碼核酸的變體。其組成為重複進行DNA改組，隨後是合適的篩選和/或選擇從而產生CYCD3編碼核酸或其編碼CYCD3多肽部分或其具有修飾的生物學活性部分的部分(Castle等人，(2004)Science304(5674):1151-4;美國專利5,811,238和6,395,547)。因此，引入植物的核酸可為一種通過位點定向誘變或定向進化的技術或其它用於產生此類變體序列的已知方法所獲得的核酸。所要引入植物的核酸可為全長核酸或可為如上文所定義的變體序列。根據本發明的優選方面，設想CYCD3-編碼核酸的增加的表達。增加基因或基因產物表達的方法在本領域有充分的記錄，其包括，例如由適當的啟動子驅動的過表達、轉錄增強子或翻譯增強子的使用。可以將用作啟動子或增強子元件的分離的核酸引入非異源形式多核苷酸的適當位置(一般是上遊)，從而上調CYCD3編碼核酸或其變體的表達。例如，可以通過突變、缺失和/或替代，體內地改變內源啟動子(見Kmiec，美國專利號5,565,350;Zarling等，PCT/US93/03868)，或者將分離的啟動子在本發明基因的適當方向和距離引入植物細胞中，從而控制基因的表達。降低基因或基因產物表達的方法在本領域有充分的記錄。如果期望多肽表達，通常優選在多肽編碼區域的3，末端納入多聚腺苷酸化區域。多聚腺苷酸化區域可以源自天然基因、多種其它植物基因或T-DNA。例如，待加入的3，末端序列可以源自胭脂鹼合酶或章魚鹼合酶基因、或備選地源自其他植物基因、或次優選地源自任何其它真核基因。也可以在5，非翻譯區或部分編碼序列的編碼序列中加入內含子序列，來增加在胞質中累積的成熟信使的數量。已顯示，在植物和動物表達構建體的轉錄單位中納入的可剪接內含子均可以在mRNA和蛋白質水平增加高達1000倍的基因表達，Buchman和Berg，Mol.Cellbiol.8:4395-4405(1988);Callis等，GenesDev.1:1183-1200(1987)。通常這類內含子^U文置在轉錄單位5，末端附近時，其增強基因表達的作用達到最大。玉米內含子Adhl-S內含子l、2和6，Bronze-l內含子的使用是本領域公知的。通常見TheMaizeHandbook,第116章，Freeling和Walbot編輯，Springer,N.Y.(1994)。本發明還提供遺傳構建體和載體，以促進用於本發明方法中的核苷酸序列的引入和/或表達。因此，提供了基因構建體，其包含(i)編碼CYCD3多肽的核酸；(ii)一種或多種控制序列，其能夠優選地驅動(i)的核酸序列在種子胚乳中表達；和任選地(iii)轉錄終止序列。編碼CYCD3多肽的核酸可為任何如上文所述的編碼CYCD3多肽的核酸。特別優選的是如表1所述的核酸，特別是SEQIDNO:1或SEQIDNO:48所代表的核酸。另外優選的是表l中所述核酸的核酸變體，此類變體如上所述。可以使用本領域技術人員熟知的重組DNA技術構建用於本發明方法的構建體。可以將基因構建體插入可商購的、適合於轉化進入植物並適於在轉化的細胞中表達目的基因的載體中。本發明因此提供了如上文所述的基因構建體在本發明方法中的用途。用包含目的序列(即，編碼CYCD3多肽的核酸)的載體轉化植物。將目的序列有效連接於一個或多個控制序列(至少連接至能夠優先驅動核酸在種子胚乳中表達的啟動子)。術語"調控元件"、"控制序列"和"啟動子"在本文中都可交換的使用，從廣義上是指能夠影響與i^目連的序列表達的調控核酸序列。上述術語包括源自典型真核生物基因組基因的轉錄調控序列(包括具有或沒有CCAAT盒序列的TATA盒，其對於精確的轉錄起始是必需的)，以及另外的調控元件(即上遊激活序列、增強子和沉默子)，其通過應答發育刺激和/或外部刺激或以組織特異的方式改變基因表達。該術語還包括了經典原核生物基因的轉錄調控序列，在此情況下可以包括-35盒序列和/或-10盒轉錄調控序列。術語"調控元件"也包含合成的融合分子或衍生物，其賦予、激活或增強細胞、組織或器官中核酸分子的表達。本文所用的術語"有效連接"指在啟動子序列和目的基因之間的功能性連接，以使啟動子序列能起始目的基因的轉錄。能夠優先在種子胚乳中表達核酸的啟動子是胚乳特異性啟動子。胚乳特異性啟動子指的是任何能夠優先驅動目的基因在胚乳中表達的啟動子。此處對優先增加種子胚乳中的表達的引用是指在胚乳中增加的表達基本上排除了植物中其它地方的表達，除了由於遺漏啟動子導致的任何殘留表達之外。例如，醇溶谷蛋白啟動子顯示胚乳中的強表達，帶有分生組織中的遺漏，更特異地芽分生組織和/或分生組織中的辨別中心。優選地，胚乳特異性啟動子是種子貯藏蛋白質啟動子，更優選地分離自谷醇溶蛋白基因的啟動子，例如SEQIDNO:3所代表的稻穀醇溶蛋白RP6(Wen等人，(1993)PlantPhysiol101(3):1115-6)啟動子或相似長度的啟動子和/或與稻穀醇溶蛋白啟動子具有相似表達才莫式的啟動子。相似長度和/或相似表達模式可通過例如將啟動子連接至報告基因並檢測植物組織中的報告基因功能來進行分析。一種眾所周知的報告基因是P-葡糖醛酸糖苷酶並用比色GUS染料顯示植物組織中的p-葡糖醛酸糖苷酶活性。應當清楚本發明的應用並不局限於由SEQIDNO:1或SEQIDNO:48所代表的核酸，本發明的應用也不局限於編碼CYCD3多肽的核酸在受谷醇溶蛋白啟動子驅動時的表達。可用於實施本發明方法的其它胚乳特異性啟動子的例子顯示於下面的表4中。表4:用於本發明的胚乳特異性啟動子的例tableseeoriginaldocumentpage29tableseeoriginaldocumentpage30tableseeoriginaldocumentpage31任選的，還可以在引入植物的構建體中使用一個或多個終止子序列。術語"終止子"包括控制序列，其為位於轉錄單位末端的DNA序列，傳遞信號引發初級轉錄本的3，加工和多聚腺苷酸化以及轉錄的終止。另外的調控元件可以包括轉錄和翻譯的增強子。本領域技術人員將知道適合用於進行本發明的終止子和增強子的序列。這類序列為本領域技術人員所公知或者可以容易地獲得。本發明的遺傳構建體還包括在特定細胞類型中維持和/或複製所需的複製起點序列。一個實例是需要將遺傳構建體作為附加型遺傳元件(如質粒或粘粒分子)在細菌細胞中維持的情況。優選的複製起點包括但不限於fl-ori和colEl。遺傳構建體可以任選地包括可選擇的標記基因。如本文所用，術語"可選擇的標記基因"包括賦予細胞表型的任意基因，該基因在細胞中表達，有利於鑑定和/或選擇經本發明的核酸構建體轉染或轉化的細胞。適當的標記可以選自賦予抗生素或除草劑抗性的標記，其引入新的代謝性狀或允許可視選擇。可選擇標記基因的實例包括賦予抗生素抗性的基因(例如磷酸化新黴素和卡那黴素的nptn,或磷酸化潮黴素的hpt)、賦予除草劑抗性的基因(例如提供Basta抗性的bar;或提供草甘膦抗性的aroA或gox)、或者提供代謝性狀的基因(例如允許植物使用甘露糖作為唯一碳源的manA)。可視標記基因導致形成顏色(例如P-葡糖趁酸糖苦酶，GUS)、發光(例如焚光素酶)或螢光(綠色螢光蛋白GFP及其衍生物)。本發明還包含根據本發明的方法可獲得的植物(及其部分)。本發明因此提供了根據本發明的方法可獲得的植物，該植物已經引入和在其中表達了CYCD3-編碼核酸，其處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。本發明還提供了用於生產具有增加的產量的轉基因植物的方法，包括在植物中引入和表達CYCD3編碼核酸，其處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。更特別地，本發明提供了用於生產具有增加產量的轉基因植物的方法，該方法包括(i)在植物或植物細胞中引入和表達編碼CYCD3多肽的核酸，該核酸處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。(ii)在促進植物生長和發育的條件下培養植物細胞。產量的增加如上文定義。可以將核酸直接《j入植物細胞或植物本身(包括引入組織、器官或植物的任何其它部分)。才艮據本發明的優選方面，通過轉化優選將核酸引入植物。本文所指術語"轉化"包括將外源多核苷酸轉移進宿主細胞，不考慮轉移所用的方法。通過器官發生或者胚胎發生的能夠隨即克隆增殖的植物組織都可以使用本發明的遺傳構建體轉化並從其再生整個植物。具體的組織選擇將因可提供和最適於轉化的具體物種的克隆增殖系統而改變。示例性的靶組織包括葉盤、花粉、胚、子葉、胚軸、雌配子、愈傷組織、既有的分生組織(例如頂端分生組織、腋芽和根分生組織)，以及i秀導的分生組織(例如子葉分生^L織和胚軸分生組織)。可以將多核苷酸瞬時地或穩定地引入宿主細胞，並且可以，例如作為質粒保持非整合的狀態。備選地，其可以整合進入宿主基因組。得到的轉化植物細胞可以接著用於以本領域技術人員熟知的方式再生為轉化的植物。植物物種的轉化目前是一種相當常規的技術。有利地，可以使用幾種轉化方法的任一向適當的祖先細胞引入目的基因。轉化方法包括用脂質體、電穿孔、增強游離DNA攝取的化學物質、直接向植物注射DNA、粒子槍轟擊、用病毒或花粉轉化和顯微投影(micr叩rojection)。方法可以選自用於原生質體的鉤/聚乙二醇方法(Krens，F.A.等，(1882)Nature296，72-74;NegrutiuI.等，(1987)PlantMol.Biol.8:363-373);原生質體的電穿孔法(ShillitoR.D.等，1985Bio/Technol3，1099-1102);植物材料的顯微注射(CrosswayA.等，(1986)Mol.GenGenet202:179-185);DNA或RNA包被的粒子轟擊(KleinT.M.等，(I987)Nature327:70);(非整合的)病毒感染，等等。優選使用任何轉稻轉化的熟知方法，通過農桿菌介導的轉化，產生表達CYCD3編碼核酸/基因的轉基因稻類植物，例如在任何以下任一文獻中描述的方法乂/^開的歐洲專利申請EP1198985Al，Aldemita和Hodges(Planta，199:612-617，1996);Chan等(PlantMol.Biol.22(3)491-506，1993)，Hid等(PlantJ.6(2):271-282，1994)，其公開的內容如同其陳述的全部內容那樣併入本文作為參考。至於穀物轉化，優選的方法如Ishida等(Nat.Biotechnol.14(6):745-50，1996)或Frame等(PlantPhysiol.129(1):13-22，2002)中所述，其/>開的內容如同其陳述的全部內容那樣併入本文作為參考。通常在轉化以後，選出存在一個或多個標記的植物細胞或細胞群，所述標記由與目的基因共轉移的植物可表達基因編碼，繼之將轉化的材料再生成整個植物。DNA轉移和再生之後，可評估推定轉化的植物，例如用Southern分析評價目的基因的存在、拷貝數和/或基因組構造。備選的或額外的，可用Northern和/或Western分析監測新引入基因的表達水平，兩種技術都是本領域內普通技術人員所熟知的。產生的轉化植物可以通過多種方式繁殖，如用克隆繁殖或經典的育種技術。例如，第一代(或T1)轉化的植物可自交得到純合的第二代(或T2)轉化體，T2植物進一步通過經典育種技術繁殖。產生的轉化生物體可以有多種形式。例如，它們可以是轉化細胞和非轉化細胞的嵌合體；克隆的轉化體(例如經過轉化包含表達盒的所有細胞)；轉化和非轉化組織的嫁接體(例如在植物中，轉化的根莖嫁接到非轉化的接穗上)。本發明顯然延及由本文所述方法產生的任何植物細胞或植物，以及所有的植物部分和其無性繁殖體。本發明還涵蓋由任意上述方法產生的初級轉化或轉染的細胞、組織、器官或整個植物的後代，所述後代的唯一要求是與本發明方法產生的親本呈現同樣的基因型和/或表型特性。本發明也包括含有分離的CYCD3編碼核酸的宿主細胞。本發明優選的宿主細胞是植物細胞。本發明也延及植物可收穫的部分，例如，但不限於種子、葉、果實、花、莖培養物、根莖、塊莖和球莖。本發明還涉及由這樣的植物的可收穫部分直接衍生的產品，如幹丸或乾粉、油類、脂肪和脂肪酸、澱粉或蛋白質。本發明還包含CYCD3編碼核酸的用途和CYCD3多肽的用途。一種此類用途涉及增加的產量、特別是種子產量。種子產量如上文中所定義並優選地包括下列中的一種或多種每圓錐花序增加的花的數量、增加的總的種子產量、增加的TK，W和增加的收穫指數，每項均相對於相應的野生型植物而言。CYCD3編碼核酸或其變體、或CYCD3多肽可在育種程序中發現用途，該程序中通常遺傳連接至CYCD3編碼基因或其變體的DNA標記得以鑑定。CYCD3-編碼核^/基因或其變體、或CYCD3多肽可用於定義分子標記。然後可將此DNA或蛋白質標記用於育種程序中來篩選具有增高產量的植物。CYCD3編碼基因或其變體可，例如，為由SEQIDNO:1或SEQIDNO:48所代表的核酸。CYCD3編碼核^/基因的等位基因變體也可以用於標記輔助的育種程序。這類育種程序有時需要使用，例如EMS誘變，通過植物誘變處理引入等位基因變體；備選的，此程序可以以收集無意產生的所謂"天然"起源的等位基因變體開始。然後通過例如PCR鑑定等位基因變體。隨後是選擇步驟，用以選擇所討論序列的較好等位基因變體，所述等位基因變體賦予植物增加的產量。一般通過監測含有所討論序列的不同等位基因變體的植物的生長性能來進行選擇，例如SEQIDNO:1或SEQIDNO:48的不同等位基因變體。生長性能的監測可在溫室或田間進行。進一步任選的步驟包括將其中鑑定了較好的等位基因變體的植物與另一植物雜交。這可用於例如組合感興趣的表型特徵。CYCD3-編碼核酸或其變體還可以作為探針，用於對為那些基因連鎖性狀的一部分並作為其標誌物的基因進行遺傳和物理的作圖。這樣的信息可以在植物育種中使用，以得到具有所期望表型的品系。CYCD3-編碼核酸或其變體的這類應用僅需要長至少15個核苷酸的核酸序列。CYCD3-編碼核酸或其變體可以用作限制性片段長度多態性(RFLP)標記。可用CYCD3-編碼核酸或其變體探測限制酶切消化的植物基因組DNA的Southern印跡(SambrookJ，FritschEF和ManiatisT(1989)《分子克隆實驗室手冊》)。隨後使用電腦程式如MapMaker(Lander等(1987)Genomics1:174-181)對產生的帶型進行遺傳分析，以構建遺傳圖譜。此夕卜，可以使用核酸在含有一組個體的限制性內切酶處理的基因組DNA中探測Southern印跡，所述一組個體為代表明確的遺傳雜交的親本和子代的一組個體。記錄DNA多態性的分離並用於計算在先前用此群體獲得的遺傳圖鐠中CYCD3-編碼核酸或其變體的位置(Botstein等(1980)Am.J.Hum-Genet.32:314-331)。在遺傳作圖中使用的植物基因衍生探針的產生和用途描述於Bematzky和Tanksley(1986)PlantMol.Biol.Reporter4:37-41中。眾多出版物中描述過用上述方法或其變通形式對特定cDNA克隆進行遺傳作圖。例如，可以使用F2雜交群體、回交群體、隨機交配群體、近親同基因系(NIL)和其它個體組作圖。這類方法是本領域技術人員眾所周知的。核酸探針也可以用於物理作圖(即在物理圖鐠上安置序列；見Hohdsel等In:Non-mammalianGenomicAnalysis:APracticalGuide,Academicpress1996,第319-346頁，及其中引用的參考文獻)。在另一個實施方案中，核酸探針可用於直接螢光原位雜交(FISH)作圖(Trask(1991)TrendsGenet.7:149-154)。儘管目前FISH作圖的方法傾向用於大的克隆(幾個kb到幾百個kb;見Laan等(1995)GenomeRes.5:13-20),但是靈敏性的提高允許在FISH作圖中應用較短的探針。用於遺傳和物理作圖的多種基於核酸擴增的方法可以使用所述核酸進行。實例包括等位基因特異性擴增(Kazazian(1989)J.Lab.Clin.Med11:95-96)、PCR擴增片段的多態性(CAPS;Sheffield等(1993)Genomics16:325-332)、等位基因特異性連接(Landegren等(1988)Science241:1077-1080)、核普酸延伸反應(Sokolov(19卯)NucleicAcidRes.18:3671)、方文射雜交作圖(Walter等(1997)Nat.Genet.7:22-28)和Happy作圖(Dear和Cook(1989)NucleicAcidRes.17:6795-6807)。為實施這些方法，使用核酸序列設計和產生用於擴增反應或引物延伸反應的引物對。這類引物的設計是本領域技術人員眾所周知的。使用基於PCR的遺傳作圖的方法，可能需要鑑定跨越相應於本發明核酸序列區域作圖的親本之間DNA序列的差異。然而，這對作圖方法通常不是必要的。本發明的方法中通過向植物中引入編碼CYCD3多肽的核酸，使其處於能優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下，獲得了產量增加。然而，此類產量增加也可通過其它眾所周知的技術例如T-DNA激活、TILLING和同源重組來獲得。T-DNA激活標記(Hayashi等人Science(1992)1350-1353)涉及將通常含有啟動子(也可為翻譯增強子或內含子)的T-DNA插入到目的基因的基因組區域或基因編碼區域的10kb上遊或下遊，其以這樣的構型存在，使得啟動子指導靶基因的表達。一般，乾基因通過其天然啟動子的表達調節被破壞，而基因落入新引入的啟動子的控制下。啟動子通常包含在T-DNA中。此T-DNA隨機插入到植物基因組中，例如，通過農桿菌感染並導致所插入的T-DNA附近的基因過表達。由於所引入啟動子附n因的過表達，所獲得的轉基因植物顯示出顯性表型。引入的啟動子可為能夠優先驅動在種子胚乳中表達的任何啟動子。TILLING(TargetedInducedLocalLesionsInGenomes)4支術也可用於重現進行本發明方法的效果。TILLING是誘變技術，用於產生和/或鑑定，並最終分離具有<多飾的表達和/或活性的CYCD3-編碼核酸。TILLING還允許選擇帶有此類突變變體的植物。這些突變變體可在強度上或位置上或在時間選擇中(例如如果突變影響啟動子)顯示出修飾的表達。TILLNG結合了高密度誘變和高通量篩選方法。在TILLING中通常跟隨的步驟有(a)EMS誘變(RedeiGP和KonczC(1992)InMethodsinArabidopsisResearch,KonczC，ChuaNH，SchellJ，eds.Singapore,WorldScientificPublishingCo,pp.16-82;Feldmann等人，(1994)InMeyerowitzEM,SomervilleCR，eds，Arabidopsis.ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY，pp137-172;LightnerJandCasparT(1998)InJMartinez-Zapater，JSalinas,eds，MethodsonMolecularBiology,Vol.82.HumanaPress,Totowa，NJ，pp91-104);(b)DNA製備和個體的合併；(c)目的區域的PCR擴增；(d)變性和退火以允許異源雙鏈體的形成；(e)DHPLC，其中庫中異源雙鏈體的存在被檢測為色鐠圖中的額外峰；(f)突變個體的鑑定；和(g)突變PCR產物的測序。用於TILLING的方法是本領域中所公知的(McCallum等人，(2000)NatBiotechnol18:455-457;由Stemple(2004)NatRevGenet5(2):145-50綜述)。攜帶此類突變變體的植物優先在胚乳中增加CYCD3編碼基因的表達。T-DNA激活和TILLING是能夠產生遺傳4務飾(優選在編碼CYCD3多肽的基因的基因座中)的技術的例子，其產生了編碼CYCD3多肽的核酸在植物胚乳中的優先增加的表達。此處將基因的基因座定義為基因組區域，其包括目的基因和編碼區域的10kb上遊或下遊。同源重組允許在基因組的限定選擇的位置上引入所選核酸。同源重組是生物科學中用於低等生物例如酵母或莒蘚劍葉蘚(Physcomitrella)的常規使用的標準技術。植物中進行同源重組的方法已有所描述，不僅對於模式植物(Offringa等人(19卯)EMBOJ9(10):3077-84)，而且對於作物植物，例如稻(Terada等人(2002)NatBiotech20(10):1030-4;Iida和Terada(2004)CurrOpinBiotech15(2):132-8)進行了描述。將核酸(其可為如上文所述的CYCD3-編碼核酸或其變體)靶向CYCD3基因的基因座。待乾向的入。靶向的核酸優選地為控制植物中編碼CYCD3多肽的核酸的天然表達的區域。將胚乳特異性啟動子引入此區域，在此之外，或部分或基本全部替代它。如前所述，才艮據本發明的所有方法均獲得具有增加產量的植物。這些有用的性狀也可與其它經濟上有利的性狀相組合，例如進一步產量提高的性狀、對多種脅迫的耐受、修飾多種結構特徵和/或生物化學和/或生理學特徵的性狀。附圖描述現在將參考下列圖對本發明進行描述，其中圖1是利用ClustalW和默認值所進行的多重多肽比對，然後是平均距離樹計算。顯示了CYCD3多肽聚類。圖2是已知才直物CYCD蛋白質序列的比對。利用VectorNTI套包(InforMax，Bethesda，MD)中的AlignX程序對這些序列進行了比對。多重比對利用空位開放罰分10和空位擴展罰分0.01來進行。為了更好地定位一些保守區域，還對比對進行了較小的手工編輯。顯示的行指出CYCD3多肽從其它D-型細胞周期蛋白的分離。對多個CYCD3多肽特異性的基序加框。圖3是利用MatGAT(MatrixGlobalAlignmentTool)產生的相似性/同一性矩陣，其在給定的數據組中在不需數據預比對的情況下計算了每對多肽序列之間的相似性和同一性。該程序利用Myers和Miller總體比對算法(空位開放罰分為12，空位擴展罰分為2)進行了一系列逐對比對。然後其利用例如Blosum60作為得分矩陣計算相似性和同一性，然後將結果》文入距離矩陣中。序列相似性顯示於分界線的下半部分，而序列同一性顯示於分界線的上半部分。SEQIDNO:2的序列在矩陣中顯示為5號。與SEQIDNO:2的序列具有至少30%序列同一性的多肽序列包含CYCD3多肽。圖4是用於在稻中表達處於谷醇溶蛋白啟動子的控制下的擬南芥CYCD3;3基因的雙元載體。圖5詳細描述了用於實施才艮據本發明的方法的序列的例子。圖6是僅植物CYCD3蛋白質序列的比對。利用VectorNTI套包(InforMax，Bethesda,MD)中的AlignX程序對所述序列進行了比對。多重比對利用空位開》文罰分10和空位擴展罰分0.01來進行。為了更好地定位一些保守區域，還對比對進行了小的手工編輯。除了細胞周期蛋白盒(在共有序列下標記為"X"(Interproref:IPR006670))和大約前40個胺基酸內的LxCxE基序外，還鑑定了多個CYCD3多肽特異的基序。實施例現參考以下實施例描述本發明，所述實施例僅意在舉例說明。DNA操作除非另外說明，重組DNA技術根據描述於(Sambrook(2001)《分子克隆實驗室手冊》，第三版，冷泉港實驗室出版，冷泉港，紐約)或者Ausubel等(1994)，CurrentProtocolsinMolecularBiology,CurrentProtocols笫一巻和第二巻的標準方法執行。植物分子操作的標準材料和方法由R.D.D.Croy描述於PlantMolecularBiologyLabfase(1993),由BIOSScientificPublicationsLtd(UK)和BlackwellScientificPublications(UK)出版。實施例l:基因克隆使用擬南芥幼苗cDNA文庫(Invitrogen,Paisley,UK)作為模板通過PCR擴增擬南齊CycD3;3基因。從幼苗提取的RNA經反轉錄後，將cDNA克隆進入pCMVSport6.0。該庫平均插入片段大小為1.5kb,並且原始克隆數為1.59xl07cfu。在6xl011cfu/ml的第一次擴增之後，確定原始滴度為9.6xl5cfu/ml。提取質粒之後，將200ng模板用於50plPCR混合物中。PCR擴增所用的引物包括Gateway重組的AttB位點，為引物prm0360(正義，起始密碼子為粗體，AttBl位置為斜體5，GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTTCACAATGGCTTTAGAAGAGGAGGA3，)和prm0361(反義，互補的，終止密碼子為粗體，AttB2位置為斜體5，GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTTAGCGAGGACTACTACTAAGCA3，)。在標準條件下使用HifiTaqDNA聚合酶進行PCR。同樣用標準方法擴增和純化1086bp的PCR片段。接著進行Gateway操作的第一步，BP反應，在此期間將PCR片段與pDONR201質粒體內重組以產生Gateway術語所稱的"進入(entry)克隆"，p0443。作為Gateway⑧技術一部分的質粒pDONR201購自Invitrogen。對於SEQIDNO:48/49的修飾序列，反義引物為5，GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTTAGCGAGGACTACTATAAGCA3，。實施例2:載體構建隨後將進入克隆p0443用於與p0830的LR反應中，p0830為用於稻轉化的終點載體。此載體含有在T-DNA邊界內作為功能元件的植物選擇標記、植物篩選標記、和用於與已克隆入進入克隆的目的序列進行LR體內重組的Gateway盒。將用於胚乳特異性表達的谷醇溶蛋白啟動子(PROOO卯；SEQIDNO:3)定位於此Gateway盒的上遊。在LR重組步驟後，將所獲得的表達載體(見圖4)轉化入農桿菌菌抹LBA4404並隨後轉入稻植物。將如圖4中所示的，所獲得的表達載體轉化入農桿菌並隨後轉化入稻植物中。讓轉化的稻植物生長並隨後對其檢查如實施例3中所述參數。實施例3:評估和結果大約產生了15到20個獨立的TO稻類轉化體。初級轉化體由組織培養室轉移到溫室生長並收穫T1種子。6個事件得以保留，其中T1代發生轉基因存在/缺乏的3:l分離。通過監測可視標記的表達，在每一事件中選出大約10個含轉基因(雜合子和純合子)的Tl幼苗，和大約IO個缺少轉基因(無效合子)的Tl幼苗。將轉基因植物和相應的無效合子並排栽培在隨機的位置。從播種期直到成熟期，將植物穿過數字成像室幾次。每次從至少6個不同的角度對每抹植物採集點數字圖像(2048xl536象素，1600萬色彩)。對5個Tl事件在T2代進一步評估，接著是與Tl相同但是每個事件使用更多個體的評估步驟。統計分析t檢驗和F檢驗使用雙因子ANOVA(方差分析)作為植物表型特性整體評估的統計模型。在由本發明基因轉化的所有事件的所有植物中，對所有測量參數進行F檢驗。進行F檢驗來檢查所有轉化事件中基因的效應，並驗證基因的整體效應，亦稱為整體基因效應。真實的整體基因效應顯著性的閾值設定為F檢驗的5%概率水平。顯著性F檢驗值證明基因效應，其意味著不僅僅^因的存在或位置引起表型的差異。為檢測基因在事件內的效果，即品系特異性效果，在每個事件內利用來自轉基因植物和相應的無效植物的數據集進行t檢驗。"無效植物"或"無效分離子"或"無效合子"是以與轉基因植物同樣的方式處理的植物，但是轉基因已分離。也可將無效植物描述為純合的陰性轉化植物。將t檢驗的顯著性閾值設置為10%概率水平。一些事件的結果可超出或低於此閾值。這是基於這樣的假設，即基因僅可在基因組的某些位置有效，且這種位置依賴性效果的發生是普遍的。這種基因效果在此也叫作"基因的品系效果"。通過將t值與t分布相比較或備選地通過將F值與F分布相比較來獲得p值。於是p值給出了無效假設(即無轉基因效果)為正確的概率。3.1種子相關參數的測定收穫成熟的原代圓錐花序(primarypanicle),裝袋、標記條形碼、然後在37。C的烘箱中乾燥三天。然後將圓錐花序脫粒並收集和計數所有種子。利用空氣鼓風裝置將飽滿的殼從空殼中分離出來。棄去空殼並再次計數剩餘的部分。在分析天平上稱量飽滿的殼。此方法獲得了一組如下所述的種子相關參數。3.1.1每個圓錐花序的花的總數如本發明中所述的每個圓錐花序花的總數是種子總數和成熟原代圓錐花序數目的比值。在T2中兩個顯著性轉基因事件與其相應的無效合子之間的百分比差異顯示於表5中。還顯示了T2評估中的顯著性事件的P值。顯著性P值表明轉基因的存在涉及每個圓錐花序花的總數的增高。表5:每個圓錐花序花的總數tableseeoriginaldocumentpage423.1.2總的種子產量通過稱重所有收穫自植物的飽滿殼來測定總的種子產量。T2中三個顯著性轉基因事件與其相應的無效合子之間的百分比差異顯示於表6中。T2評估中的顯著性事件的P值也有所顯示。顯著性P值表明轉基因的存在涉及總的種子產量的提高。表6:總的種子產量tableseeoriginaldocumentpage423.1.3TKW本發明中的TKW是由計數的飽滿種子的數目和其總重量推斷而來的。T2中三個顯著性轉基因事件與其相應的無效合子之間的百分比差異顯示於表7中。還顯示了T2評估中的顯著性事件的P值。顯著性P值表明轉基因的存在涉及TKW的提高。表7:TKWcomplextableseeoriginaldocumentpage433.1.4植物的收穫指數本發明的收穫指數定義為總的種子產量與地上面積(mm2)的比值，乘以因子106。T2中三個顯著性轉基因事件與其相應的無效合子之間的百分比差異顯示於表8中。還顯示了T2評估中的顯著性事件的P值。顯著性P值表明轉基因的存在涉及收穫指數的提高。表8:收穫指數complextableseeoriginaldocumentpage43實施例4:比較數據pOleosin::細胞周期蛋白D3;3產生含有上述構建體的植物並利用如上所述的同樣方法評估pOleosin::細胞周期蛋白D3;3。Tl評估的結果顯示於下表9至11中。轉基因植物及其相應的無效合子的百分比差異顯示於每個表中。還顯示了F檢驗的p值。表9:地上面積tableseeoriginaldocumentpage44權利要求1.用於與相應的野生型植物相比增加植物產量的方法，其包括增加編碼細胞周期蛋白D3(CYCD3)多肽的核酸在植物中的表達，並任選地選擇具有增加的產量的植物，其中所述核酸處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。2.根據權利要求l的方法，其中所述在種子胚乳中的增加的表達是通過優選在編碼CYCD3多肽的基因的基因座中引入遺傳修飾來實現的。3.根據權利要求2的方法，其中所述遺傳修飾是通過下列之一來實現的T-DNA激活、TILLING、位點定向i秀變或定向進化。4.用於與相應的野生型植物相比增加;fet物產量的方法，其包括在植物中引入並表達編碼CYCD3多肽的核酸，所述核酸處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。5.根據權利要求4的方法，其中所述核酸編碼CYCD3多肽的一部分或能夠與CYCD3編碼核酸雜交。6.才艮據權利要求4的方法，其中所述核酸編碼SEQIDNO:2的CYCD3蛋白質的直系同源物或旁系同源物。7.才艮據權利要求4或6中任意一項的方法，其中所述CYCD3編碼核酸是植物來源的，優選地來自雙子葉植物，進一步優選地來自十字花科，更優選地該核酸來自擬南芥。8.根據權利要求4至7中任意一項的方法，其中所述CYCD3編碼核酸有效連接到胚乳特異性啟動子。9.根據權利要求8的方法，其中所述的胚乳特異性啟動子是谷醇溶蛋白啟動子。10.根據權利要求1至9中任意一項的方法，其中所述增加的產量是增加的種子產量。11.根據權利要求1至10中任意一項的方法，其中所述增加的產量選自每個圓錐花序增加的花的數量、增加的總的種子產量、增加的TKW和增加的收穫指數。12.通過根據權利要求1至11中任意一項的方法可以獲得的植物。13.構建體，其包含(i)編碼CYCD3多肽的核酸；(ii)一種或多種控制序列，其能夠優先驅動(i)的核酸序列在種子的胚乳中表達；和任選地(iii)轉錄終止序列。14.根據權利要求13的構建體，其中所述控制序列是胚乳特異性啟動子。15.根據權利要求14的構建體，其中所述胚乳特異性啟動子是谷醇溶蛋白啟動子。16.才艮據權利要求15的構建體，其中所述的谷醇溶蛋白啟動子如SEQID戮3表示。17.用根據4又利要求13至16中任意一項的構建體轉化的植物。18.用於產生具有增加的產量的轉基因植物的方法，該方法包括(i)將編碼CYCD3多肽的核酸引入植物或植物細胞中並在植物或植物細胞中表達，所述核酸處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下；和(ii)在促進植物生長和發育的條件下培養所述植物細胞。19.具有增加的產量的轉基因植物，其由編碼CYCD3多肽的核酸引入所述植物並在所述植物中表達獲得，所迷核酸處於能夠優先在種子的胚乳中表達該核酸的啟動子控制之下。20.根據權利要求12、17或19的轉基因植物，其中所述植物是單子葉植物，例如甘蔗，或者其中所述植物為穀類，例如稻、玉米、小麥、大麥、粟、黑麥、燕麥或高梁。21.才艮據4又利要求12、17、19或20中任意一項的植物的可收穫部分。22.根據權利要求21中任意一項的植物的可收穫部分，其中所述可收穫部分為種子。23.直接來自根據權利要求22的植物和/或來自根據權利要求21或22的植物的可收穫部分的產品。24.根據權利要求13的構建體在與相應的野生型植物相比增加產量、特別是種子產量上的用途。25.根據權利要求24的用途，其中所述種子產量選自每個圓錐花序增加的花的數量、增加的總的種子產量、增加的TKW和增加的收穫指數。全文摘要本發明涉及用於與相應的野生型植物相比增加植物產量的方法。更優選地，本發明涉及用於增加植物產量的方法，其包括將編碼細胞周期蛋白D3(CYCD3)多肽的核酸引入植物，所述核酸處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下。本發明還涉及包含分離的編碼CYCD3多肽的核酸的植物，所述核酸處於能夠優先在種子胚乳中表達該核酸的啟動子控制下，所述植物具有與相應的野生型植物相比增加的產量。本發明還提供了可用於本發明方法的構建體。文檔編號C12N15/82GK101180398SQ200680018121公開日2008年5月14日申請日期2006年3月24日優先權日2005年3月25日發明者V·弗蘭卡德,V·米隆諾弗申請人:克羅普迪塞恩股份有限公司